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Formule sanguine automatisée au cabinet médical

Dr M. Stalder & Dr P.-Y. Lovey, Unité d’Hématologie, CONSILIA Sion

Les différents types d’analyseurs de Ainsi, chaque analyseur de formule san- CAUSE DE COMPTAGE AUTOMATISÉ
formule sanguine déterminent de 8 à 23 guine fournit des résultats chiffrés des DES LEUCOCYTES ERRONÉ
variables relatives aux globules rouges, différents paramètres et des histogram-
1. Compte faussement élevé des leu-
aux globules blancs et aux plaquettes. mes pour chaque population cellulaire :
cocytes
Hormis la mesure du taux d’hémoglo- érythrocytes, thrombocytes et leucocy-
tes (Figure 1). - Erythroblastes. Si le pourcentage
bine, toutes les variables dépendent du
d'érythroblastes est significatif, il
comptage et de la mesure de la taille VALIDATION DES RÉSULTATS faut corriger le nombre de leucocy-
des cellules, qui peuvent se réaliser soit
Les résultats de la formule sanguine tes, en tenant compte du nombre
selon le principe d’impédance, soit selon
obtenus par comptage automatisé sont d'érythroblastes pour 100 leucocytes
le principe de cytométrie. Les automa-
validés si les conditions suivantes sont évalués sur le frottis sanguin. Le
tes ont au moins 2 canaux (des canaux
remplies : l'appareil fonctionne correc- nombre de leucocytes corrigés est
supplémentaires permettent de diffé-
tement, la calibration a été faite et alors égal au nombre de leucocytes
rencier les sous-populations leucocytai-
contrôlée, les contrôles de qualité inter- comptés en 106/L x 100 sur le nom-
res). Dans l’un, un diluant est ajouté et
nes sont dans les intervalles cibles, les bre d'érythroblastes pour 100 leuco-
les globules rouges sont comptés et leur
contrôles de qualité externes sont cytes + 100.
volume mesuré. Dans l’autre, un diluant
conformes, la plausibilité des résultats - Plaquettes géantes en grand nombre
et un réactif de lyse des globules rouges
est adéquate. De plus, l'analyse des - Agrégats plaquettaires
sont ajoutés, permettant le comptage
histogrammes et la prise en compte des - Cryoglobulinémie
des globules blancs et des plaquettes et
messages d'erreurs donnés par l'instru- - Parasites ou malaria
la mesure du taux d’hémoglobine par
photométrie. ment, permettent de définir s'il y a lieu 2. Compte faussement abaissé des
de mettre en doute les résultats et de leucocytes
PRINCIPE D’IMPÉDANCE les contrôler, notamment par l'examen - Lyse cellulaire si le sang prélevé
Le passage de cellules en suspension du frottis sanguin. date de plus de trois jours
dans un liquide conducteur à travers un
RÉSULTATS FACTICES CAUSE DE COMPTAGE AUTOMATISÉ
orifice modifie la résistance électrique
entre 2 électrodes. Cette modification Certains résultats factices sont en rela- DES ÉRYTHROCYTES ERRONÉ
est enregistrée sous forme d’impulsions. tion avec des problèmes pré-analytiques 1. Compte faussement élevé des éry-
Le nombre d’impulsions enregistrées : erreur d'identification du tube, mau- throcytes
correspond au nombre de cellules pas- vais remplissage du tube, spécimen en
partie coagulé, spécimen mal mélangé. − Extrême leucocytose
sant. La hauteur des impulsions est
Ils peuvent également être liés à des − Plaquettes géantes en grand nombre
proportionnelle au volume de la cellule
dysfonctionnements de l'appareil : obs- − Plasma lipémique
détectée. L’analyse volumétrique des
truction de l'aspiration, calibration ina- − Cryoglobulinémie
globules blancs permet de différencier 3
sous-populations leucocytaires. L’héma- déquate, etc.. 2. Compte faussement abaissé des éry-
tocrite et les index érythrocytaires MCH throcytes
L'utilisateur doit être particulièrement
et MCHC sont calculés. attentif à la possibilité de résultats facti- - Agglutinines froides
ces liés à des caractéristiques propres à - Microcytose extrême ou schizocytes
PRINCIPE DE CYTOMÉTRIE nombreux
l'échantillon de sang analysé.
Un gainage fluidique force les cellules CAUSE DE MESURE DU TAUX D'HÉ-
leucocytaires à se présenter une à une CAUSES DE COMPTAGE AUTOMATI- MOGLOBINE FICTIVEMENT TROP
devant une cellule de mesure qui pos- SÉ DES THROMBOCYTES ERRONÉ ELEVE
sède des électrodes, pour l’enregistre- 1. Compte faussement abaissé des
ment de variations d’impédance et de Conséquence le plus souvent d'une aug-
thrombocytes mentation de turbidité par :
fréquences d’ondes électromagnétiques
et qui s’intègre dans un banc optique - Coagulation partielle du spécimen
- Agrégation plaquettaire induite par - Leucocytose marquée (dépend des
dont la source lumineuse est un canon appareils et de l'efficacité de la solu-
laser assurant une illumination cons- EDTA
- Satellitisme des plaquettes tion lyse)
tante des cellules. Cela permet des me- - Plasma lipémique
sures de volume, de diffraction du rayon - Plaquettes géantes
- Paraprotéinémie élevée
laser (granularité) et de conductivité 2. Compte faussement augmenté des - Cryoglobulinémie
d’un courant haute fréquence (compo- thrombocytes
A contrôler lors de leucocytose > 100
sition chimique du noyau et du cyto- - Erythrocytes microcytaires ou schizo- G/L
plasme). Le traitement des trois mesu- cytes (cf. figure 2)
res physiques permet la différenciation - Fragments de leucocytes A suspecter si MCV particulièrement ↑
des sous-populations leucocytaires. - Cryoglobuline ou MCHC ↑

Paramètres érythrocytaires Paramètres plaquettaires Histogramme des leucocytes

Figure 1: histogrammes

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Figure 2 a

Paramètres de l'automate : Hémo- Analyse des histogramme de l'au- Résultats définitifs par comptage
globine 82 g/L (117 - 157), hémato- tomate : l'histogramme des érythrocy- manuel des érythrocytes, des
crite 0.284 L/L (0.35 - 0.47), érythro- tes ne débute pas à la ligne de base, thrombocytes et hématocrite cen-
cytes 5.72 T/L (3.80 - 5.20), MCV histogramme très perturbé des throm- trifugé
49.6 fL (80 - 100), MCH 14.3 pg (26 - bocytes avec image d'une deuxième
34), MCHC 289 g/L (310 - 360). population entre 10 et 20 fL, suggé-
Thrombocytes 707 G/L (150 - 350). rant, étant donné la microcytose sévère Hémoglobine 82 g/L, hématocrite 0.31
Leucocytes 6.4 G/L (4 - 10). des érythrocytes, une contamination du L/L, érythrocytes 6.28 T/L, MCV 49
comptage des plaquettes par les micro- fL, MCH 13 pg, MCHC 265 g/L.
cytes. Thrombocytes 412 G/L. Leucocytes
6.4 G/L.

Figure 2: comptage erroné des erythrocytes et des thrombocytes: microcytose sévère

CAUSE D'UN RÉSULTAT DE MCV CONCLUSION


ERRONÉ Les automates d'hématologie
1. MCV faussement élevé permettent d'obtenir les valeurs des
- Sang resté à température ambiante paramètres de la formule sanguine
> 8 h ou > 24 h, selon instrument d'une manière rapide et fiable, dans la
- Agglutinines froides me s ure o ù le s con di t ion s pr é-
- Leucocytose extrême analytiques et les règles de bonne
pratique du laboratoire sont observées.
2. MCV faussement bas
A ce propos, l'exécution régulière et la
- Érythrocytes hypochromes documentation des contrôles de qualité
- Augmentation température ambiante internes, ainsi que la participation aux
L'analyse de la plausibilité des résultats contrôles de qualité externes, jouent un
rendus par l'automate, l'examen attentif rôle fondamental. Il est également
des histogrammes et la prise en compte nécessaire que l'utilisateur connaisse les
des messages d'erreurs ou alarmes causes potentielles de résultats erronés.
signalés par l'automate, permettent de
définir si les résultats doivent être mis
en doute et contrôlés et, en particulier,
si un examen du frottis sanguin
s'impose.

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