Diabète – Montpellier 2013
que ce récepteur n’est pas indispensable. En revanche le TICE est augmenté de
62 % (p < 0,01) chez des souris PCSK9-/- présentant une augmentation de 300 % du
LDLr intestinal comparé aux souris contrôles et une excrétion fécale de stérols
neutres augmentée de 26 % (p < 0,05). Inversement, l’injection intraveineuse de
protéines recombinantes PCSK9 entraîne une dégradation rapide du LDLR intesti-
nal et réduit le TICE de 35 % chez des souris PCSK9-/- (p < 0,05), mais est sans
effet chez des souris LDLr-/-. Enfin, des souris C57Bl/6J nourries pendant 10 jours
avec une statine (lovastatine, 0,2 %) présentent un TICE accrue de 71 % (p < 0,05)
par rapport aux souris sous régime contrôle.
Conclusion : Cette étude démontre que les LDL et HDL sont sources de cholestérol
pour le TICE et que la lovastatine et l’absence de PCSK9 stimulent le TICE.
O27 Impact des lipides alimentaires sur la production d’acides
gras polyinsaturés conjugués dans l’intestin :
une nouvelle preuve de symbiose métabolique
entre le microbiote intestinal et l’hôte
C. Druart, A. M. Neyrinck, P. D. Cani, N. M. Delzenne
Metabolism and Nutrition Research Group, Louvain Drug Research Institute, Université
catholique de Louvain, Bruxelles, Belgique.
Introduction : Les bactéries du microbiote intestinal sont susceptibles de métaboliser
les acides gras polyinsaturés (AGPI) en isomères conjugués, notamment en CLA
(conjugated linoleic acid). Des propriétés anti-obésité et insulino-sensibilisantes sont
associées à l’administration orale de certains CLA mais on ignore l’impact d’une
production « endogène » de ces métabolites bactériens sur l’hôte. L’objectif de notre
étude in vivo chez la souris est de déterminer la distribution intestinale et systé-
mique des CLA produits de manière « endogène » à partir des lipides alimentaires.
Matériels et méthodes : 12 souris C57BL/6J ont été injectées avec du Tyloxapol,
un inhibiteur de la lipoprotéine lipase (LPL) qui conduit à une accumulation
sérique des lipides absorbés dans l’intestin. Trente minutes plus tard, six souris
ont été gavées avec de l’huile de tournesol (200 μl), riche en acide linoléique
omega-6, alors que les 6 autres ont reçu de l’huile de lin (200 μl), riche en acide
alpha-linolénique omega-3.
Résultats : La production la plus importante d’acide ruménique (c9t11-C18 : 2) et
vaccénique (t11-C18 : 1), deux métabolites majoritaires de l’acide linoléique, est
observée dans la partie distale de l’intestin (caeco-colon) des souris ayant reçu l’huile
de tournesol. Cependant, les augmentations de CLA dans le caeco-colon ne se tra-
duisent pas par des modifications de leur concentration sérique. Aucune modifica-
tion significative de ces métabolites bactériens n’est détectée dans le jéjunum et
l’iléon.
Conclusion : Ces résultats suggèrent que la production majoritaire de CLA a
lieu dans les parties distales de l’intestin, où le nombre de bactéries capables de
les synthétiser (Roseburia spp., Bifidobacterium spp. et Lactobacillus spp.) est le
plus important, mais où la capacité d’absorption de ces métabolites lipidiques
d’origine bactérienne est théoriquement inexistante. Les modifications des
teneurs en CLA dans les tissus intestinaux suggèrent un rôle local de ces iso-
mères sur le métabolisme intestinal.
O28 Diminution de la capacité des HDL de patients obèses,
diabétiques de type 1 et diabétiques de type 2 à activer
la NO synthase endothéliale
L. Duvillard1, S. Monier1, L. Perségol1, I. Robin2, B. Bouillet2,
M.-C. Brindisi2, J.-M. Petit2, B. Verges2
1 F. Alla2, H. Allemand2
Laboratoire de Biochimie, CRI 866, Dijon ;
2 Service d’Endocrinologie Diabétologie Nutrition Groupe Hospitalier Bichat – Claude
Service d’Endocrinologie, CRI 866, Dijon.
Introduction : HDL exercent leur effet anti-athérogène par des mécanismes
multiples dont l’activation de la NO synthase endothéliale (eNOS), via des voies
de signalisation impliquant Akt et la p38-MAP-kinase. Les HDL des patients
non diabétiques avec une obésité androïde (Ob), diabétiques de type 1 (DT1) et
diabétiques de type 2 (DT2), présentent des anomalies qualitatives avec notam-
ment respectivement un enrichissement en triglycérides, une glycation et les
2 anomalies combinées, ce qui est susceptible d’altérer leur fonctionnalité.
Patients et méthodes : Sur des cellules endothéliales humaines issues de cordons
ombilicaux, incubées avec les HDL de 12 patients Ob, 16 DT1, 18 DT2, et
20 sujets contrôles. nous avons quantifié la synthèse de NO à partir de L [3H]argi-
nine, ainsi que l’activation d’eNOS, Akt et p38 par phosphorylation respective-
ment de leur Ser1177, Ser473 et Tyr182 (quantification par cytométrie en flux).
Résultats : L’augmentation de la synthèse de NO induite par les HDL, était infé-
rieure pour les patients Ob, DT1 et DT2 comparés aux contrôles (+ 159 ± 98
(p < 0,01), 172 ± 61 (p < 0,01) et 129 ± 47 (p < 0,0001) vs 232 ± 53 %, respective-
ment). La Ser1177-phospho-eNOS était diminuée avec les HDL des patients Ob,
DT1 et DT2, comparées aux HDL des contrôles (+ 32 ± 12 (p < 0,01), 26 ± 9
(p < 0,001) et 19 ± 14 (p < 0,001) vs 46 ± 17 %, respectivement). L’activité et la
phosphorylation d’eNOS étaient supérieures avec les HDL des patients DT1
comparés aux DT2 (p < 0,05). L’activation d’Akt et de la p38-MAP-kinase était
également moindre avec les HDL des patients Ob, DT1 et DT2, comparées aux
HDL des contrôles (augmentation de la Ser473-phospho-Akt = 35 ± 16
(p < 0,01), 24 ± 17 (p < 0,0001) et 26 ± 28 (p < 0,0001) vs 59 ± 27 % respective-
ment, augmentation de la Tyr182-phospho-p38 = 87 ± 32 % (p = 0,06), 60 ± 21
(p < 0,0001) et 73 ± 26 (p < 0,01) vs 110 ± 47 %, respectivement).
Conclusion : En conclusion, la capacité des HDL des patients Ob, DT1et
DT2 à activer eNOS via Akt et p38-MAP-kinase est diminuée, ce qui est
susceptible de contribuer à l’altération du pouvoir anti-athérogène de ces
HDL.
O29 Diminution du contenu en sphingosine-1-phosphate
SFD
dans les lipoprotéines de haute densité (HDL)
au cours du diabète de type 1
D. Denimal1, J.-P. Pais De Barros2, A. Athias2, J.-M. Petit3, B. Bouillet3,
B. Verges3, L. Duvillard1
1
Laboratoire de Biochimie, Centre Hospitalier Universitaire de Dijon & Centre de
Recherche INSERM U866, Université de Bourgogne, Dijon ;
2
IFR 100 Santé STIC – Université de Bourgogne, Dijon ;
3
Service d’Endocrinologie, Diabétologie et Maladies Métaboliques, Centre Hospitalier
Universitaire de Dijon & Centre de Recherche INSERM U866, Université de Bour-
gogne, Dijon.
Introduction : La fonctionnalité des HDL des patients diabétiques de type 1
(DT1) est altérée. Ces anomalies sont en partie attribuables à des modifica-
tions glycoxydatives mais pourraient également s’expliquer par des varia-
tions de la composition en phospholipides et sphingolipides à la surface des
HDL, molécules qui jouent un rôle important dans les différentes fonctions
des HDL.
Patients et méthodes : Nous avons recruté 43 patients DT1 (âge : 44,3 ± 16,1 ;
17 hommes, 19 femmes) et 36 sujets contrôles normolipidémiques (âge : 40,3
± 14,6 ; 18 hommes, 25 femmes). Nous avons établi la composition en phospho-
lipides et sphingolipides des HDL par chromatographie liquide couplée à la
spectrométrie de masse en tandem.
Résultats : L’HbA1c était de 8,9 ± 2,0 % et la glycémie à jeun de 9,14 ± 4,38 mmol/l
chez les patients DT1. La HDL-cholestérolémie était équivalente entre les patients
DT1 et les contrôles (1,61 ± 0,17 vs 1,61 ± 0,25 mmol/l). Nous n’avons pas observé
de différence significative entre les patients DT1 et les contrôles, pour la concentra-
tion au sein des HDL des phosphatidylcholines (1 021 ± 181 vs 1 003 ± 97 μmol/l),
sphingomyélines (235 ± 79 vs 244 ± 53 μmol/l), phosphatidyléthanolamines
(44,4 ± 24,7 vs 39,6 ± 17,8 μmol/l), phosphatidylinositols (44,0 ± 7,7 vs 45,5 ±
7,8 μmol/l), lysophosphatidylcholines (9,9 ± 4,7 vs 10,7 ± 4,9 μmol/l). Par rapport
aux HDL des sujets contrôles, les HDL des sujets DT1 étaient appauvries en sphin-
gosine-1-phosphate (581 ± 165 vs 659 ± 148 nmol/l, p = 0,033), ainsi qu’en céra-
mides (8 248 ± 3 349 vs 10 851 ± 5 501 nmol/l, p = 0,013). L’activité phospholipid
transfer protein (PLTP) plasmatique était augmentée de 21 % chez les sujets DT1
par rapport aux contrôles (p = 0,001). Nous n’avons pas observé de corrélation entre
les variations de sphingosine-1-phosphate ou céramides et l’HbA1c, la glycémie à
jeun ou l’activité PLTP.
Conclusion : L’appauvrissement des HDL en sphingosine-1-phosphate est
susceptible de contribuer à l’altération de leur fonctionnalité au cours du
DT1, compte tenu de l’importance de cette molécule dans le pouvoir anti-
inflammatoire, antioxydant, vasodilatateur et protecteur de l’endothélium
des HDL.
O30 Utilisation des fibrates en prévention primaire chez
les diabétiques de type 2 à haut risque cardiovasculaire
R. Roussel1, C. Chaignot2, A. Weill2, F. Travert1, B. Hansel1, P. Ricordeau2,
1
Bernard, Paris ;
2
Direction de la stratégie, des études et des statistiques (DSES) Caisse Nationale de
l’Assurance Maladie des Travailleurs Salariés, Paris.
Objectif : Selon les recommandations les diabétiques en prévention primaire à haut
risque cardiovasculaire devraient recevoir une statine. Malgré ce consensus, il est
courant d’observer des fibrates prescrits à ces patients. Notre objectif est d’évaluer la
fréquence et les conséquences cliniques de l’utilisation des fibrates en prévention
primaire chez les diabétiques de type 2 à haut risque cardiovasculaire.
Patients et méthodes : Une étude de cohorte issue des bases de données
médico-administratives de l’assurance maladie (SNIIRAM) et du PMSI a
identifié du 01/07/08 au 31/12/09 les patients diabétiques ayant eu une ins-
tauration de fibrate ou de statine en monothérapie par un généraliste. Nous
avons sélectionné des patients à haut risque cardiovasculaire (hypertendus
traités), âgés de plus de 50 (hommes) ou 60 ans (femmes) et sans évènement
cardiovasculaire enregistré en ALD ou dans les 30 mois d’hospitalisation
précédents. Le suivi a été effectué jusqu’à 900 jours (infarctus du myocarde,
AVC, amputation, décès).
Résultats : Parmi les 31 652 sujets inclus, 4 058 (12,8 %) ont reçu un fibrate.
167 évènements sont survenus dans le groupe fibrate, contre 1 026 parmi les
27 594 patients traités par statine. Les taux annuels ajustés (sexe et âge) des évè-
nements étaient de 2,42 % (fibrate) et 2,21 % (statine). Les courbes de survie
suggéraient que l’hypothèse de proportionnalité requise pour le modèle de Cox
n’était pas respectée pour la variable fibrate/statine. Le modèle multivarié a
intégré tous les facteurs prédictifs en univarié, et un Hazard Ratio avant et
Diabetes Metab 2013, 39, A1-A20 A7