INTRODUCCIÓN

Se hace necesario conocer e identificar la microbiota presente en aguas Residuales y

estancadas, las cuales presentan gran variedad de microorganismos, y lograr
reconocer a lo largo de la carrera cuales pueden ser útiles como control biológico y
biorremediación de las mismas.

El objetivo que se persigue es aislar, identificar, clasificar, reconocer y observar al

microscopio los diferentes microorganismos que se encuentran en las aguas
residuales y concluir cuales pueden servir de ayuda ambientalmente. También se
quiere identificar el papel biológico que desempeñan los microorganismos presentes
en las aguas residuales, los cuales pueden transmitir enfermedades o bien ayudarnos
en la biorremediacion de las mismas.
 1. MARCO REFERENCIAL

1.1. MARCO HISTORICO

Los métodos de depuración de aguas residuales se remontan a la antigüedad y se han

encontrado instalaciones de alcantarillado en lugares prehistóricos de Creta y en las
antiguas ciudades asirias. Las canalizaciones de desagüe construidas por los romanos
todavía funcionan en nuestros días. Aunque su principal función era el drenaje, la
costumbre romana de arrojar los desperdicios a las calles significaba que junto con el
agua viajaban grandes cantidades de materia orgánica. Hacia finales de la edad media
empezaron a usarse en Europa excavaciones subterráneas privadas primero y, más
tarde, letrinas. Cuando éstas estaban llenas, unos obreros vaciaban el lugar en nombre
del propietario. El contenido de los pozos negros se empleaba como fertilizante en las
granjas cercanas o era vertido en los cursos de agua o en tierras no explotadas.

Unos siglos después se recuperó la costumbre de construir desagües, en su mayor

parte en forma de canales al aire o zanjas en la calle. Al principio estuvo prohibido
arrojar desperdicios en ellos, pero en el siglo XIX se aceptó que la salud pública
podía salir beneficiada si se eliminaban los desechos humanos a través de los
desagües para conseguir su rápida desaparición. Un sistema de este tipo fue
desarrollado por Joseph Bazalgette entre 1859 y 1875 con el objeto de desviar el agua
de lluvia y las aguas residuales hacia la parte baja del Támesis, en Londres. Con la
introducción del abastecimiento municipal de agua y la instalación de cañerías en las
casas llegaron los inodoros y los primeros sistemas sanitarios modernos. A pesar de
que existían reservas respecto a estos por el desperdicio de recursos que suponían, los
riesgos para la salud que planteaban y su elevado precio, fueron muchas las ciudades
que los construyeron.

A comienzos del siglo XX, algunas ciudades e industrias empezaron a reconocer que
el vertido directo de desechos en los ríos provocaba problemas sanitarios. Esto llevó a
la construcción de instalaciones de depuración. Aproximadamente en aquellos
mismos años se introdujo la fosa séptica como mecanismo para el tratamiento de las
aguas residuales domésticas tanto en las áreas suburbanas como en las rurales. Desde
la década de 1970, se ha generalizado en el mundo industrializado la cloración, un
paso más dentro del tratamiento químico, con el objetivo de desinfectar el agua y
hacerla apta para el consumo humano.
La cantidad total de agua que existe en la Tierra, en sus tres fases (sólida, líquida y
gaseosa) siempre se ha mantenido constante. Esto ha sido posible gracias a un ciclo
cerrado (evaporación, precipitaciones, infiltraciones, salida al mar) conocido como
ciclo hidrológico del agua.

Se puede definir este ciclo como un seguido de fenómenos por medio de los cuales el
agua pasa de la superficie terrestre a la atmósfera en forma de vapor (evaporación
directa y transpiración de las plantas y animales) y más tarde regresar en estado
líquido o sólido.

El vapor de agua es transportado por la circulación atmosférica y más tarde se

condensa, formando así, nieblas y nubes. El agua contenida en las nubes regresará a
la superficie terrestre en forma de nieve, granizo o lluvias. Las aguas que precipitan
en tierra pueden tener varios destinos: una parte es devuelta directamente a la
atmósfera por evaporación, otra parte se infiltra en el suelo y la parte que queda se
desliza formando ríos hasta ir a desembocar a lagos y océanos

Debido al ciclo hidrológico del agua, estas aguas contaminadas nos vuelven en forma
de lluvias, por lo que antes de ser consumida la debemos tratar, y esta es la función
básica de las potabilizadoras, conseguir un agua desinfectada y limpia de
contaminación, evitando así el riesgo de salud, epidemias...

Por contaminación de las aguas se entiende el aporte de materias o formas de energía

de una manera directa o indirecta que impliquen una alteración o modificación de su
calidad en relación a sus usos posteriores o a su función ecológica.

Del mismo modo que todos pedimos una red de abastecimiento, también es necesaria
una de saneamiento para depurar las aguas. Hasta hace bien poco no se le daba
importancia al tratamiento del agua, pero en vista de los grandes problemas que
aporta la contaminación, la construcción de plantas depuradoras y potabilizadoras va
en aumento. Gracias a programas de saneamiento y de depuración de aguas residuales
que permiten la vuelta del agua a su estado natural, eliminando los elementos
contaminantes y protegiéndola, se está consiguiendo una mejor calidad en el agua de
los ríos de toda España.

Actualmente, la contaminación de los cauces naturales tiene su origen en tres fuentes:

• Vertidos urbanos
• Vertidos industriales
• Contaminación difusa (lluvias...)1

1.2. MARCO TEORICO

1
http://html.rincondelvago.com/tratamiento-de-aguas-residuales.html
K. El Mabrouki1. Realizaron Algunos ensayos analíticos de laboratorio realizados
utilizando tomamuestras de succión cerámicos y de teflón con aguas residuales
urbanas, la cual Se exponen los resultados de retenciónliberación obtenidos en
laboratorio para tres tipos de tomamuestras de succión (dos de tipo cerámico y uno de
teflón). Los ensayos se realizaron con aguas desionizadas, “limpias” y residuales
urbanas, y las determinaciones analizadas fueron la demanda bioquímica de oxígeno
(DBO5), demanda química de oxígeno (DQO), sólidos en suspensión (SS),
coliformes fecales (CF), coliformes totales (CT), estreptococos fecales (EF),
clostridios sulfitoreductores (CSR), bacterias aerobias a 22ºC (BA22) y a 37 ºC
(BA37), así como los principales aniones y cationes mayoritarios2.

MOLLEDA, Patricia. Realizaron un estudio sobre el Análisis Microbiológico de

las aguas residuales tratadas por un humedal artificial de tipo M.J.E.A.en León. se
ha implementado un sistema de depuración basado en un Mosaico Jerarquizado de
Ecosistemas Artificiales (MJEA)®, que combina un lagunaje convencional con un
humedal artificial. Se tomaron muestras de agua en cuatro lagunas. Durante los
periodo de verano y otoño se estudio la presencia y remoción de los microorganismos
indicadores de contaminación fecal E coli, coliformes totales, Clostridium y huevos
de helmintos. Se observo reducción de los microorganismos indicadores tales como
coliformes totales y E. coli en este sistema de depuración y una mayor eliminación
del número de microorganismo en el periodo de verano que en el de otoño3.
Experimento # 2 (Coliformes totales). En esta experiencia la siguientes 6 placas
fueron rotuladas (10-1, 10-2 y 10-3), con Agar violeta Rojo Billis (VRBA), a esta placas
le agregamos 1 ml de la muestra (a cada una de las 6 placas).
Estas placas la incubamos x 24 horas a 37 ºC, aquí no se presentaron crecimiento de
coliforme; el cual nos indica, que el H2O tratado este experimento está debidamente
saneada, como lo estipula la norma COVENIN, que el H2O potable debe ser limpia,
fresca, sin sabores ni olores desagradables o que cause rechazo de quien la consume.
Esta prueba dio negativa, no hubo crecimiento de bacterias coliforme, por lo ya
señalado anteriormente por lo que se considera que el agua es de calidad o como lo
dice COVENIN: agua de calidad es la expresión de todos los factores físicos,
químicos y microbiológicos que están presentes en el H2O.
Si la prueba fuese positiva, las colonias tienen que ser roja, dada por los pigmentos.

2
http://carpena.ifas.ufl.edu/ZNS/4canarias/iii-01.pdf.
3
http://www.fundacionglobalnature.org/macrophytes/documentacion/Conferencias%20y%20P
%F3sters/P-3%20Molleda%20P...pdf.
La finalidad de esta experiencia es de observar crecimiento de coliformes totales, en
este caso la Escherichia coli que es la especie clásica de este grupo4.
Bacteria Coliforme:
Incluyen E. Coli y otras bacterias que se asemejan morfológica y fisiológicamente.
Estos M.O. con frecuencia difieren entre si en características pequeñas. Las bacterias
coliforme suelen encontrarse en el aparto intestinal del hombrey animal. E. Coli, rara
vez se encuentra fuera del intestino
Las bacterias coliformes son bacilos cortos, gram negativos que fermentan la lactosa
y forman ácido y gas.
Son anaeróbios facultativos, se multiplican a mayor rapidez a temperaturaentre 30 y
37 ºC, crecen a gran abundancias en medios corrientes, como caldo y agar.
La colonia de E. Coli en agar E.M.B (eosina y azul de metileno) tienen 2 a 4 mm de
diámetro, un centro grande de color oscuro e incluso negro, y tienen brillo verde
metálico cuando se observan con luz refleja.
Se han creado otras pruebaspara diferenciar tipos de bacterias coliformes, suelen
emplearse 4 y se han juntado sus iniciales en la palabra nemotécnica IMViC (Indol,
Rojo Metilo (R.M.), Borges – Proskauer (V:P) y utilizada de citrato.
La reacción de IMViC de algunas bacterias coliformes como E.coli ++ --, significa
que el M:O: produce Indol y es positivo al rojo metilo y negativo al V.P.
Hay 16 combinaciones posibles de resultados prueba negativa y positiva.
Se considera que todas las bacterias coliformes, tienen importancia en el H2O desde
el punto de vista sanitario aunque muchos autores an tratado de diferenciar el tipo
fecal (e.coli) y el nofecal (A: aurogenes)
Análisis sanitario del H2O
El diagnostico de las colonias coliformes en la muestra de H2O se basa en la
capacidad de dicho M:O: para producir gas a partir de la lactosa.

Filtración:
Es un medio eficaz de eliminar M.O. y otras sustancias de suspensión del H2O.

Cloración:
Es el método más eficaz de hacer potable el H2O. La cantidad de cloro que se agrega
depende del grado de contaminación del abasto hídrico y su contenido de sustancias
orgánicas. El cloro mata la mayor parte delas bacterias no esporágenas. El H2O
clorada, en consecuencia no siempre es estéril, pero suele brindar seguridad para
consumo por el ser humano.
Recuento de Coliformes en Filtro de Membranas (Método):
Se hace pasar parte de la muestra por una membrana de filtración de acetatos de
celulosacon poros y diámetro tal capte la bacteria, en tanto que permita el paso libre
del H2O.

4
http://www.monografias.com/trabajos15/analisis-agua/analisis-agua.shtml.
La membrana de filtración se coloca asépticamente en una caja de Petri en un
cojincillo absorbente saturado con una sal nutritiva P. Ej., caldo M. Endo, se incuba a
24 ºC durante 24 horas. Después se examina la membrana con microscopio de poca
potencia y se cuentan las colonias verdes violáceos con resplandor metálico, si
considera que son bacterias coliformes.

H2O potable:
Sea limpia, fresca, sin olores o sabores desagradables o que causen rechazo de quien
lo consume y sin sustancias químicas o M.O. nocivos.5

5
www.monografias.com › Biología
 1.3. MARCO CONCEPTUAL

Microorganismos patógenos que habitan en un medio acuático

Campilobacter
Este organismo es la causa principal de diarrea en aves de corral. Es microaerófilico.
Leptospira
Infecta animales y puede causar hemorrágia e ictericia.
Mycobacterium
Infecta animales y organismos de vida libre. Se requiere un método complejo para su
recuperación y cultivo.
Salmonella enteritidis
Se encuentran en el tracto intestinal de animales. Es muy común en ambientes
acuáticos.
Yersinia enterocolitica
Causa gastroenteritis debido al agua consumida. Es frecuente encontrarla en animales
y en el ambiente acuático.
Giardia lamblia
Es la principal causa de la gastroenteritis. Se encuentra principalmente en agua
localizada en climas templados.

Análisis microbiólogico del agua

Los coliformes, incluyendo E.coli, son miembros de la familia Enterobacteriaceae.
Estos constituyen el 10% de los microorganismos intestinales de los seres humanos y
otros animales de sangre caliente. Se utilizan ampliamente como organismos
indicadores de contaminación fecal en el agua. Cuando estas bacterias no se detectan
en un volumen específico en el agua, ésta se considera potable o adecuada para el
consumo humano. Este grupo incluye Enterobacter aerogenes y Klebsiella
pneumoniae. Para analizar la presencia de coliformes totales y coliformes fecales
existen diversas pruebas, entre éstas tenemos:

Filtración por membrana

Es el método más común y preferido para evaluar las características microbiólogicas
del agua. Se pasa la muestra de agua por un filtro de membrana. El filtro con las
bacterias atrapadas se transfiere a la superficie de un medio sólido o a un soporte
absorbente, conteniendo el medio líquido deseado. El uso del medio apropiado
permite la detección rápida de los coliformes totales, coliformes fecales y
estreptococos fecales.
Prueba de presencia-ausencia (P-A)
Esta prueba puede emplearse para coliformes. Es el método más simple para
determinar coliformes fecales. Se utiliza una muestra de agua (100ml) con caldo de
lactosa, de lauril triptosa e indicador púrpura de bromo cresol. Esta prueba se basa en
la suposición de que no debe haber coliformes en el agua potable. Una prueba
positiva ocasiona la producción de ácido (color amarillo) y constituye una presunción
positiva que requiere confirmación.

Prueba Colilert
Se utiliza para analizar otros coliformes así también como E. coli. En esta prueba se
añade una muestra de agua de 100ml a un medio especializado. Si hay coliformes, el
medio adquiere un color amarillo en 24 horas a 35 C. Esto ocurre debido a la
hidrólisis de ONPG (o-nitrofenil-B-D-galactopiranósido). Para comprobar la
presencia de E. coli, se observa el medio con luz UV. Si la prueba es negativa para la
presencia de coliformes, se considera al agua aceptable para el consumo humano.
Otros microorganismos indicadores de contaminación fecal en agua salobre y de mar
son los entero-cocos fecales. En aguas saladas, estas bacterias mueren a una
velocidad más lenta que los coliformes fecales, siendo indicadores más seguros de
una contaminación reciente.

¿Qué microorganismos acuáticos provocan enfermedades?

A veces se pueden encontrar en el agua potable microorganismos causantes de
enfermedades. Sin embargo, como hoy en día el agua potable es
meticulosamente desinfectada, las enfermedades provocadas por
microorganismos son raramente causadas por beber agua. Las personas que
nadan en las piscinas encontrarán que el agua en el que nadan está desinfectada
con cloro, ozono , UV o dióxido de cloro. Pero hay personas que nadan en el
exterior en aguas superficiales todos los años. Estas son las personas mas
susceptibles de contraer infecciones bacterianas e infecciones causadas por
otros microorganismos, porque los microorganismos a menudo acaban en las
aguas superficiales a través de vertidos industriales y excrementos animales.
Los nadadores de espacios exteriores deben ser cuidadosos y leer los carteles
situados en las orillas, porque el agua en la que pretenden nadar puede estar
infectada, por ejemplo con el botulismo.
Hay varias bacterias y protozoos que pueden provocar enfermedades cuando
están presentes en aguas superficiales.
Las bacterias no solo pueden provocar enfermedades cuando entran en el cuerpo
humano a través de los alimentos, las aguas superficiales también pueden ser
una fuente importante de infecciones bacterianas. El la siguiente tabla puede
ver varias bacterias que se pueden encontrar en aguas superficiales, y las
enfermedades que causan cuando son ingeridas en grandes cantidades, junto
con los síntomas.
Bacteria Enfermedad/infección Síntomas
Diarrea muy líquida, con
Aeromonas Enteritis
sangre y moco
Gripe, diarres, dolor de
Campylobacter jejuni Campilobacteriosis cabeza y estómago, fiebre,
calambres y náuseas
Infecciones del tracto
Diarrea acuosa, dolores de
urinario, meningitis
Escherichia coli cabeza, fiebre, uremia
neonatal, enfermedades
homilética, daños hepáticos
intestinales
Náuseas, dolores de
estómago y diarrea acuosa, a
Plesiomonas shigelloides Plesiomonas-infección
veces fiebre, dolores de
cabeza y vómitos
Salmonella typhi Fiebre tifoidea Fiebre
Mareos, calambres
Salmonella sp. Salmonelosis intestinales, vómitos, diarrea
y a veces fiebre leve
Enfermedad (gastro) Dolores de estómago, diarrea
Streptococcus
intestinal y fiebre, a veces vómitos
Vibrio El Tor (agua dulce) Cólera (forma leve) Fuerte diarrea
Los protozoos se pueden acumular en ciertas partes del cuerpo, después de haber
penetrado en el cuerpo humano. Las acumulaciones se llaman cistos.
debido a su naturaleza parasitaria, los protozoos pueden provocar diferentes
enfermedades.
En esta tabla puede ver diversos protozoos que se pueden encontrar en aguas
superficiales, y las enfermedades que causan cuando son ingeridos en grandes
cantidades, junto con los síntomas.
Microorganismo Enfermedad Síntomas
Fuerte diarrea, dolor de
cabeza, dolor abdominal,
escalofríos, fiebre; si no se
Amoeba Disenteria ameboide
trata puede causar abscesos
en el hígado, perforación
intestinal y muerte
Cryptosporidium parvum Criptosporidiosis Sensación de mareo, diarrea
 acuosa, vómitos, falta de
apetito
Diarrea, calambres
Giardia Giardiasis abdominales, flatulencia,
eruptos, fatiga
Gripe, inflamación de las
glándulas linfáticas
Toxoplasm gondii Toxoplasmosis En mujeres embarazadas
aborto e infecciones
cerebrales

¿Cómo eliminamos del agua los microorganismos dañinos?

Para eliminar del agua los microorganismos dañinos solemos usar desinfectantes.
Algunos ejemplos de desinfectantes son cloro, UV, ozono (O3) y dióxido de
cloro (ClO2). Existen unas cuantas ventajas y desventajas diferentes entre las
diversas técnicas de desinfección, como se muestra en nuestra página de
desinfección. Los compuestos químicos que son dañinos para cierto tipo de
microorganismos se utilizan a menudo para eliminarlos. Estos compuestos
químicos son conocidos como biocidas, porque son mortales para los
microorganismos.
¿Cómo se pueden utilizar los microorganismos durante el tratamiento del agua?
Los microorganismos se pueden utilizar para descomponer contaminantes en aguas
residuales. Este tipo de tratamiento de agua se denomina tratamiento biológico
del agua. Durante el tratamiento biológico del agua los microorganismos
descomponen la materia orgánica del agua, nitratos y fosfatos. Esta es una
breve explicación de como funcionan esos procesos de tratamiento biológico
del agua.
Eliminación de materia orgánica
La purificación biológica del agua se lleva a cabo para disminuir la carga de
compuestos orgánicos disueltos. Los microorganismos, principalmente las
bacterias, realizan la descomposición de estos compuestos. Hay dos categorías
principales de tratamiento biológico: tratamiento aeróbico y tratamiento
anaeróbico. El tratamiento aeróbico del agua significa la descomposición de
materia orgánica que necesita oxígeno durante su proceso de descomposición.
El tratamiento anaeróbico del agua significa descomposición de materia
orgánica por medio de microorganismos que no utilizan oxígeno. En los
sistemas aeróbicos el agua es aireada con aire comprimido (en algunos casos
con solamente oxígeno), mientras que los sistemas anaeróbicos funcionan bajo
condiciones libres de oxígeno.
Eliminación de amoniaco y nitratos
La eliminación de amonio y nitratos es bastante compleja. Es un proceso de
tratamiento del agua que necesita conversión tanto aeróbica como anaeróbica
para eliminar los contaminantes. En la fase de conversión aeróbica hay dos
especies bacterianas implicadas. Primero, las bacterias Nitrosomonas
convierten el amoniaco en nitrito. Segundo, las bacterias Nitrobacter convierten
los nitritos en nitratos. Estos dos procesos juntos son comúnmente conocidos
como el proceso de nitrificación.
Después de eso, las bacterias anaeróbicas entran a actuar. Estas bacterias convierten
los nitratos en nitrógeno gaseoso atmosférico. Este proceso se llama
desnitrificación. La desnitrificación es realizada por con muchas bacterias
anaeróbicas, tales como Achromobacter, Bacillus y Pseudomonas. La primera
fase de la desnitrificación es el proceso inverso a la nitrificación, vuelve a
transformar el nitrato en nitrito. La segunda fase de la desnitrificación
transforma el nitrito en nitrógeno gas. Este gas puede ser liberado a la
atmósfera sin causar daños ambientales.

Eliminación de fosfatos
Los fosfatos pueden ser eliminados de las aguas residuales por una bacteria aeróbica
(oxígeno-dependiente), llamada Acinetobacter. Esta bacteria acumula
polifosfatos en los tejidos celulares. Acinetobacter puede absorber una mayor
cantidad de fosfatos de la que necesita para su síntesis celular. La cantidad extra
de fosfatos es almacenada en las células en forma de polifosfatos. El
almacenamiento de polifosfatos hace que las Acinetobacter sean capaces de
sobrevivir temporalmente en circunstancias anaeróbicas. Cuando las
Acinetobacter residen en una zona anaeróbica en las aguas residuales, absorbe
ácidos grasos y los almacena como sustancias de reserva. Durante este proceso,
los polifosfatos se descomponen para obtención de energísa, haciendo que se
liberen fosfatos en la zona aeróbica. Cuando las Acinetobacter entran en la zona
aeróbica absorven fosfatos y los almacenan en forma de polifosfatos en los
tejidos celulares. Esto hace que el contenido en fosfatos del agua residual
disminuya.6

6
http://www.lenntech.es/faq-microbiologia-del-agua.htm
 1.4. MARCO LEGAL

DECRETO No. 1905 DE 2000. Por el cual se modifican los estatutos y el

reglamento de funcionamiento de la Comisión de Regulación de Agua Potable y
Saneamiento Básico7

República de Colombia ley 9 de 1979. Artículo 3 para el control sanitario de los

usos del agua8

Decreto 155 de 2004. Ministerio de ambiente, vivienda y desarrollo territorial. Por el

cual se reglamenta el artículo 43 de la ley 99/93 sobre tasas por utilización de aguas y
se adoptan nuevas disposiciones. Las autoridades ambientales competentes cobraran
las tasas por utilización de agua mensualmente mediante factura expedida con la
periodicidad que estas determinen, la cual no podrá ser mayor a un año9.
Decreto 1575 De 2007.Establece el sistema para la protección y control de la calidad
del agua para consumo humano10.

Decreto 1541 de 1978. Reglamenta normas relacionadas con el recurso agua en

todos sus estados11

7
educasitios.educ.ar/grupo077/?q=node/57
8
http://www.car.gov.co/documentos/1_17_2005_6_01_09_PM_Ley_9_1979_C
%C3%B3digoSanitario.pdf.
9
http://www.cormacarena.gov.co/DECRETO%204742%20DE%202005.pdf.
10
http://vlex.com/tags/decreto-1575-2007-284260
11
http://corponarino.gov.co/modules/mimodulo/fuentes/tramites/dec1541.html.
 2. MATERIALES Y METODOS

MATERIALES.

• Erlenmeyer
• Agar nutritivo
• Agitador de vidrio
• Balanza
• Mechero de bunsen
• Trípode y maya de asbesto
• Cinta de enmascarar
• Papel aluminio
• Papel periódico
• Pipetas graduadas
• Cajas de petri
• Termómetro
• Colorantes (color violeta, lugol, alcohol, cetona, fuscina)
• Solución salina, aceite de inmersión
• Autoclave
• Microscopio

METODO.
Para la siembra se prepara el agar nutritivo que es para el aislamiento de bacterias,
después de preparado y esterilizado se dispone 1ml de la muestra de agua residual en
la caja de petri (esto se debe hacer en medio de tres mecheros para evitar la
contaminación), se le agrega el agar nutritivo hasta que cubra el fondo de la caja, se
espera que se solidifique y se sella herméticamente, se anotan las observaciones de la
aparición de colonias de bacterias hasta las 72 horas, luego se refrigera para bajar la
actividad de los microorganismos y evitar así que se sigan reproduciendo, luego se
hace microscopia en el laboratorio.
Para hacer el repique de los microorganismos del agua residual ya formadas las
colonias, se dispone nuevamente del agar nutritivo, pero esta vez se espera que se
solidifique para hacer la siembra, se toma una lupada de los microorganismos
dispuestos a repicar de la siembra hecha anteriormente, para el repique se divide
imaginariamente la capsula por la mitad, se siembran los microorganismos con
mucho cuidado en forma de zigzag, luego imaginando que la otra mitad esta
igualmente dividida en dos se siembra de la misma forma en cada una de las partes
pero sin recoger más muestra de microorganismos, esta siembra se denomina siembra
por agotamiento, y se utiliza para aislar cultivos axenicos; después de hecha la
siembra se cierra herméticamente la capsula, se hacen las respectivas observaciones
sobre las colonias formadas hasta las 72 horas, y se procede igual que en la siembra.
Para hacer la microscopia tanto de la siembra como del repique se procede así:
Se echa una gota de solución salina en el portaobjeto, se toma una lupada de los
microorganismos a observar, no se debe olvidar que se debe abrir la capsula entre tres
mecheros para no contaminar la muestra, luego, se hace un frotis en espiral con los
microorganismos recogidos, luego se hace tinción de gran para la identificación de las
bacterias presentes. Después de esto se hace la microscopia con el objetivo de 100X.
 3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS

La muestra que se tomo fue de agua residual de desechos fecales.

OBSERVACIONES MACROSCOPICAS:

Observaciones de la siembra:
Las colonias se empiezan a formar a las 12 horas, las colonias que se forman son
pequeñas unas de borde entero y otras de borde erosionado. En dos colonias se
observa un borde rizoide, no tienen brillo lo que indica que son colonias bacterianas,
su crecimiento es cóncavo.

Observaciones del repique:

Las colonias se forman mucho más rápido, a las 7 horas, las colonias crecen entre el
surco hecho con el asa bacteriológica al hacer la siembra, en una parte de la capsula
crecen colonias de borde rizoide, y en la otra colonias de borde entero, con esto se
puede afirmar que en el repique hecho hay todavía varios tipos de bacterias aisladas
ya que hay colonias con características diferentes.

OBSERVACIONES MICROSCOPICAS

Se observaron cocos y staphilococos Gram positivos.

Se observan también streptococos, sarcinas y staphilococos Gram negativos.
 4. CONCLUSIONES

• La mayoría de microorganismos presentes en el agua residual son agentes

patógenos, tanto de animales como del hombre.

• Se logró aislar, repicar, clasificar y observar al microscopio los microorganismos

que se encuentran en el agua residual.

• No se logro identificar el nombre de las bacterias presentes en el agua observadas

al microscopio.
 5. BIBLIOGRAFIA

http://html.rincondelvago.com/tratamiento-de-aguas-residuales.html
2
http://carpena.ifas.ufl.edu/ZNS/4canarias/iii-01.pdf.
3
http://www.fundacionglobalnature.org/macrophytes/documentacion/Conferencias
%20y%20P%F3sters/P-3%20Molleda%20P...pdf.
4
http://www.monografias.com/trabajos15/analisis-agua/analisis-agua.shtml.
5
www.monografias.com › Biología
6
http://www.lenntech.es/faq-microbiologia-del-agua.htm
7
educasitios.educ.ar/grupo077/?q=node/57
8
http://www.car.gov.co/documentos/1_17_2005_6_01_09_PM_Ley_9_1979_C
%C3%B3digoSanitario.pdf.
9
http://www.cormacarena.gov.co/DECRETO%204742%20DE%202005.pdf.
10
http://vlex.com/tags/decreto-1575-2007-284260
11
http://corponarino.gov.co/modules/mimodulo/fuentes/tramites/dec1541.html.