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  • Practica1 Microscopio

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    practica1 microscopio

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    7 $ 400 Manual de précticas y talleres en Biologia General - Universidad det Valle — Departamento de Biologia 11 F. Castro, M.C. Vélez, F. Rondén, C.Rosero - Agosto 2004 PRACTICA 1 MICROSCOPIA E INSTRUMENTACION EN BIOLOGIA 1, EL MICROSCOPIO COMPUESTO INTRODUCCIO! El Microscopio es un instrumento éptico que permite observar, medir y cuantificar objetos y organismos muy pequefios. Existen diferentes tipos de Microscopios los cuales varian en su poder de aumento y resolucién. Los rangos aproximados de magnificacién se encuentran entre 4X y 40X (Microscopio Estereoscépico), 20X-25X (Microscopio Simple o Lupa), 40X-1500X (Microscopio Compuesto), 10.000X-16.000X (Microscopio Electrénico), donde X es el ntimero de veces que se avmenta el tamaifio real del objeto. Ademis de estos existen algunos Microscopios especiales como los Microscopios de Contraste de Fase y los Microscopios Invertidos. Una comparacién entre la forma como acttian los Microscopios Optico, Electrénico de Transmisi6n y Microscopio Electrénico de Barrido. OBJETIVO E] propésito del siguiente ejercicio es Ia adquisicién de experiencia sobre el uso y cuidado del Microscopio. Asf, podremos aprender; Primero: cémo disponer el Equipo para las observaciones; Segundo: los nombres de las diferentes partes del Microscopio y sus funciones; Tercero: la técnica de observar objetos y de preparar materiales para la observacin, as{ como el ajuste y enfoque corrects; Finalmente, estudiaremos las formas de medir los tamafios de los objetos microscépicos. Al finalizar el Laboratorio Usted debers haber adquirido desireza en el cuidado y uso del Microscopio. IATERIALES ¥ PROCEDIMIEN 1. Disposicién del Microscopio: Al recoger El Microscopio tmelo con ambas manos, de tal forma que una lo sostenga por el Brazo, y la otra por debajo de la Base. Deposite 0 descargue el instrumento suavemente y oriéntelo de manera que el Brazo quede mirando hacia Usted. Enciéndalo y apaguelo con fa menor intensidad lumfnica; no mover ni golpear cuando este encendido. 2. Partes del Microscopio: Utilizando la figura 1. distinga los nombres de las distintas partes del Microscopio localizndolas en su propio aparato: Oculares, Objetivos, Revolver, Porta-Objetos, Diafragma-Iris, Condensador, Fuente de uminacién, Base, Brazo, Platina, Carro Mecénico, Tomillo Macto y Micrométrico. Coloque el Objetive de Menor Aumento (el mas pequefio), haciendo rotar tinicamente desde el revolver. Gradue Ja intensidad de luz reflejada y sea observable en el Condensador. Observe a través del Microscopio y ajuste el Diafragma, de manera que el Campo Visual se encuentre ilumiiado en forma homogénea. Si el Ocular o ci Objetivo se encuentran empolyados 0 empaiiados, limpieles cuidadosamente con una porcién de Papel ‘Manual de practicas y talleres en Biologia Generst - Universidad det Valle - Departamento de Biologia 12 F Castro, M. C. Vélez, F.Rondén, C. Rosero - Agosto 2004 Lente. NO USE en ningiin caso, otto tipo de material para tal efecto. Si la visién no se aclara consuite al Instructor. 3. Preparacién de Materiales: Los materiales para Observacién MicroscSpica se colocan en una Lamina de Vidrio que generalmente es de 1" x 3" y tiene el nombre de Porta- Objeto y/o Lamina y se cubren con Laminillas ylo Cubre-Objetos. Tanto éste como el Porta-Objetos deben estar dpticamente limpios, la limpieza del Porta-Objetos debe hacetse con agua y sosteniéndolo por los bores y luego se trota suavemente con una Toalla de Papel Absorbente para secarlo. Los Cubre-Objetos son muy frdgiles y por tanto deben manejarse con mucho cuidado, su limpieza debe hacerse en forma similar a la descrita antes teniendo asi mismo el cuidado de no tocar la superficie con los dedos. Corte un cuadro de Papel Periédico que tenga unos 7 mm, que contenga Ia letra e. Coldquelo Iuego en el centro del Porta-Objetos con el lado derecho de la letra e hacia arriba. Ponga una gota de agua sobre el papel, Después de esperar unos segundos hasta que el agua haya empapado el papel, cologue la Laminilla 0 Cubre-Objetos sobre la preparacién; evitando que queden burbujas de aire que pueden dificultar la observacién. 4. Como enfocar El Microscopio: Coloque Ia preparacién sobre la Platina en forma tal gue el cuadro de papel quede justamente encima de la abertura y luego fije la Lémina mediante las Pinzas que hay en la Platina. Enfoque a letra e con Ia ayuda del movimiento e los Tornillos Macro, y Micrométricos. Es importante tener en cuenta que siempre que se haga una observacién al Microscopio debe usarse en primer lugar el Objetivo de Menor Aumento Deseriba ia posicién de la letra € (como es la imagen o su orientecién) Mueva ahora la Lamina sobre la Platina de derecha a izquierda, mueva la Platina hacia delante 0 hacia atrés en qué direccién se mueve la imagen?. Suba ahora el Tubo usando el Tornillo Mactométrico y rote el Revolver para cambiar a un Objetive de Mayor Aumento (40X), enfoque nuevamente en forma lenta evitando quebrar la Lamina Porta-Objetos, conteste: Ha cambiado la posicién de la imagen con respecto a la observada con el Objetivo de Menor Aumento?, {Es el Campo de Observacién mayor o menor?, ;Es la Tluminacién més © menos brillante que con el Objetivo de Menor Aumento?, Describa y compare lo observado en el Campo de Menor y Mayor Aumento, Retire la preparacién cuidadosamente de la Platina y consérvela para observaciones posteriores. 5. Medidas Microscépicas: La Unidad de Longitud mas frecuentemente usada en Microscopia es la micra © micrén “u“que equivale a 1/1000 mm 0 1/1°000.000 m. En los Laboratorios de Investigacién se utiliza un instrumento, el Micrémetro 0 Reticulo Micrométrico, sin embargo, es posible estimar el tamaiio de los Objetos Microsedpicos conociendo ej diémetro del Campo correspondiente a cada Objetivo, Manual de pricticas y alleres en Biologia General - Universidad del Valle - Departamento de Biologia 13 F Castro, M.C. Vélez, F. Rondén, C. Rosero - Agosto 2004 jercic 1- Coloque un pedazo de papel milimetrado sobre 1a Platina de tal manera que al enfocar E1 Microscopio pueda observarlo, mida entonces el didmetro del campo correspondiente al objetivo de menor aumento en milimetros y su conversi6n en micras. También con los otros aumentos disponibles. 2- Con el dato anterior es posible determinar el dismetro del Campo correspondiente al Objetivo de Mayor Aumento; hasta dividir el didmetro encontrado pot la razén entre las magnificaciones del Objetivo de Mayor Aumento y del Menor Aumento. Por ejemplo, sf el aumento del Objetivo de Mayor Aumento es de 45 X y el otro es de 15 X, la tazn mencionada sera 45/15 =3. Si el campo correspondiente al objetivo de menor aumento tiene un diémetro de 1.500 1, el didmetro del campo para el de mayor aumento es, de 1.500/3 = 500 j1. Calcule ahora el didmetro del campo correspondiente a todos los objetivos de sw Microscopio, complete Ia informacién de Ia tabla en la pagina 18. 3- {Cual es la dimensién de Ia letra € observada anteriormente en milfmetros y en micras? 4- Monte ahora un pedazo de un grabado de una revista, ,Cudintos puntos puede ver en el Campo del Objetivo de Menor Aumento?, {Qué distancia hay en promedio entre cada dos puntos? Este ejercicio proporciona un ejemplo del Poder de Resolucién. Asi, a “simple vista” solo podemos ver las diferentes densidades del grabado, mientras que con El Microscopio nos es Posible distinguir puntos, es decir distinguimes o resolvemos los puntos. 2. EL MICROSCOPIO ESTEREOSCOPICO ‘oscopio Binocular Estereoscépico (también llamado Microscopio de Diseccién) presenta ciertas ventajas én muchos tipos de trabajo microscépico: Objetivos y Oculares dobles proveen una visién tridimensional. Puede usarse para observar objetos con luz reflejada y con luz transmitida. Existen varios modelos de Microscopios Estereose6picos. En la mayorfa de ellos se utiliza un dispositive giratorio, a manera de Revolver Porta-Objetos para cambiar de aumento ‘mediante una simple rotacién del mismo, que puede tener dos o tres juegos de Objetivos. Cuando se utiliza cualquier tipo de Estereoscopio hay que rotar el Revolver de tal manera que quede en posicién el objetivo de menor aumento, antes de hacer las observaciones. En tal operacién, se debe tomar el Revolver por su parte superior y no por los Objetivos mismos. Este instrumento se utiliza en la observacién y diseccién de objetos que por su tamaiio no alcanzan a ser vistos por El Microscopio Optico, Los aumentos proporcionados por este Manual de précticas y taleres en Biologia General - Universidad del Valle ~ Departamento de Biologia 14 F. Castro, M.C. Vélez, F, Rondén, C.Rosero - Agosto 2004 tipo de Microscopio varfan entre SX a 60X, atin cuando hay alguno gue pueden aumentar 400 veces un objeto. Los propésitos de los ejercicios siguientes son: 1) Aprender el manejo y las partes de un Estereoscopio; 2) Comparar este Microscopio con El Microscopio Compuesto Corriente. 3) Hacer observaciones sobre varios objetos opacos y transparentes. LPROCEDIMIENTO 1. Después de sacar el Estereoscopio de su estuche coléquelo sobre ia mesa de tal manera que su Superficie Superior quede bien iluminada, Comience las observaciones uitilizando la menor magnificacién, tal como ya se ha mencionado. 2. Como en el caso de! Microscopio reconozca las partes del Estereoscopio con ta ayuda de la figura 3. 3. La separacién de los Oculares debe ajustarse de tal forma que la visién sea cémoda y que pueda observar con ambos ojos al mismo tiempo. Tal separacién adecuada a la de los ojos de cada observador particular se obtiene mediante separacién © aproximacién de los Oculares. 4. Coloque un pedazo de papel impreso, de 7 cm de fongitud y de ancho, sobre el Porta objetos y haga descender o ascender los objetivos observando a través de los Oculeres hasta que obtenga una imagen nitida del impreso. A continuacién reajuste el enfoque, Ia iluminacién y la separaciGn de tos Oculares. Mueva ahora el impreso de izquierda a derecha. {En qué sentido se mueve la imagen?. Mueva el impreso hacia adelante y observe, {Se mueve la imagen en la misma direccién?. Compare os resultados anteriores con los obtenidos pata los mismos ejercicios con El Microscopio Compuesto. 5. Aumente la magnificaci6n cambiando de Objetivos y si es necesario ajuste el enfoque y Ia iluminaci6n. El tamafio aparente de la imagen es mayor o menor que en el caso antetior?. {Ha cambiado el tamafio del campo?. Examine y dibuje los objetos que le centregaré el instructor. Redacte una nota breve donde compare El Microscopio compuesto y El Microscopio Estereosodpico. Haga una lista de las utitidades e inconvenientes de cada uno de ellos. NOTA: Para una mayor informacién sobre Microscopfa pueden consultar las siguientes paginas de Internet: hurp/iwww funsei.com/fun3_ivsfera/sfera.htm http/Avww.chem.uniromal.iv~chemus/pagine_sito/strumenti/strum_VET_SIN/16_strument i/Microscopio.htm hutp//www terra.es/personal/manmig/pages/microsco.htm hutp//www.newnet.itveapecchi/microscopi.htm http/Avww-salonhogar.comvciencias/Micros:opia/micro!. htm ‘Manual de précticas ytalleres en Biologta General - Universidad del Valle — Departamento de Biologia 15 F Castro, M.C. Vélez, F.Rondén, C.Rosero - Agosto 2004 hup//www macprof.macity ivtest/microseope.html httpl/www esic.es/hispano/patrimo/microl/microevo. hun ttp//www usuarios iponet.es/jan3d/Microscopio hutp/www-nesa.uiue.edu/Edu/Fractal_Home.htmi hup//www2.comune.bologna it/bologna/malpighi/mostra/micto3.htm. http//cuhwww.upr.clu.edu/biologia/micro/portada htm http/fusuarios.iponet.es/jan3d/2000/ordenador/MICROSCOPIO/Microscopio.htsal http//micro.fa.uam.es/Laboratorio/Microscopio.htinl http//www.ips.itscuola/concorso_99/aequa_I/microse.html hupy/www.csic.es/hispano/patrimo/micro /microele.htm hup:/www.shimadzu.com.br/analiticalesp/Productos/Microscopio/S$550.htm ittp://edafologia.ugr.es/Oy line/intro/microse.htm http://www aldeaeducati va.com/aldea/tareas2.asp?which=40 hutp://www.drpez.com/demicro.htm |ttp://www.crosswinds.net/~librostecnicos/comofunciona/eomofunciona23.html http:/Avww.monografias.com/trabajos/miczoscopio/microscopio.shtml BIBLIOGRAFIA: HAWELLS, MR. & J. Abril 1991. pag 52. LICHTMANN. J. W. 1994. Microscopia cofocal. Investigacién y Ciencia, Octubre 1994, , 1991, Microscopia de Rayos X. Investigacién y Ciencia. pig 20. : WICKRAMASINGHE, H. K. 1989. Microscopio de sonda de barrido, Investigacién y Ciencia, Diciembre 1989. pig 28. 8,7 BINNGNG, G. & H. ROHRER. 1985. Microscopio de"efecto de tunel. Investigacién y™ Ciencia, Octubre de 1985. pag 30 Manual de pricticas ytalleres en Biologia General - Universidad det Valle - Departamento de Biologia 16 F. Castro, M.C. Vélez, , F- Rondon - Agosto 2003 OCULAR pee REVOLVER » “Pi onemns GAO PLATINA- CARRO. MECANICO CONDENSADOR SS 4 TORNILLO | MACROMETRICO LAMPARA TORN! MICROMETRICO. Figura 1. Microscopio Compuesto Manval de précticas y talleres en Biolovia General - Universidad del Valle ~ Departamento de Biologia 17 F. Castro, M. C. Vélez, F.Rond6n, C.Rosero - Agosto 2004 ANEXO 1 El Microscopio £Cé6mo funciona? Partes del Microscopio 6ptico ‘Aunque conto ¢s légico, Ja forma y partes de un Microscopio pueden variar y varian de un modelo a ols, cexisten unas partes comunes que aparecen representadas a manera de esquemia en el dibujo adjunto y cuya

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