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Gram positivo

- Forma esférica;
- Reacção ao método de Gram;
- Ausência de endosporos

Aeróbios catalase positivos – Staphylococcus, Micrococcus, Kocuria,


Kytococcus e Alloiococcus;
Aeróbios catalase negativos – Streptococcus, Enterococcus;
Anaeróbios – Peptostreptococcus.
.

Staphylococcus

Características gerais
- Família das Microccacea;
- “Cocos em cacho”, podem aparecer como células isoladas, aos pares ou em
cadeias curtas;
- Diâmetro entre 0.5 a 1 µm;
- Imóveis;
- Aeróbios ou anaeróbios facultativos;
- Catalase positivos;
- Crescem em meio contendo 10% de NaCl e em temperaturas q variam entre
18 a 40 ºC;
- Presentes na pele e membranas mucosas dos humanos, em outros mamíferos e
em aves;
- Existem pelo menos 30 espécies:
- Staphylococcus Aureus (coagulase +, colónias douradas)
- Staphylococcus coagulase negativos
Factores de virulência
Componentes estruturais
- Cápsula: inibe a quimiotaxia e a fagocitose; inibe a proliferação de células
mononuclerares; facilita a aderência a corpos estranhos;
- Peptidioglicano: proporciona estabilidade osmótica; estimula a produção de
pirogêneo endógeno (actividade semelhante à endotoxina); quimiotático para
leucócitos (formação de abcessos); inibe a fagocitose;
- Ácido teicóico: regula a concentração de catiões na membrana celular; liga-se
à fibronectina;
- Proteína A: inibe a eliminação dos microrganismos mediada por anticorpos
através da ligação dos receptores Fc de IgG1, IgG2 e IgG4; quimiotática para
leucócitos; anticomplementar;
- Membrana citoplasmática: barreira osmótica; regula o transporte para dentro e
para fora da célula; sítio de enzimas biossintéticas e respiratórias;

Toxinas
- Citotoxinas (α, β, δ, γ, leucocidina P-V): tóxicas para muitas células,
incluindo leucócitos, eritrócitos, macrófagos, plaquetas e fibroblastos;
- Toxinas esfoliativas (ETA, ETB): serina proteases q clivam as pontes
intercelulares na camada granulosa da epiderme;
- Enterotoxinas (A-E, G-I): superantigénios (estimulam a proliferação das
células Te libertação de citocinas); estimulam a libertação de mediadores
inflamatórios nos mastócitos, aumentam o peristaltismo intestinal e a perda
de líquidos, bem como náusea e vomito;
- Toxina 1 da Síndroma do Choque Tóxico: superantigénio ( estimula a
proliferação de células T e a libertação de citocinas); produz extravasamento
ou a destruição das células endoteliais.
Enzimas
- Coagulase: converte fibrinogénio em fibrina;
- Catalase: catalisa a remoção do peróxido de hidrogénio;
- Hialuronidase: hidrolisa o ácido hialurónico no tecido conjuntivo,
promovendo a disseminação dos Staphylococcus nos tecidos;
- Fibrinolisina: dissolve coágulos de fibrina;
- Lipases: hidrolisa lipideos;
- Nucleases: hidrolisa DNA;
- Penicilinase: hidrolisa penicilinas.

Epidemiologia
- Coagulase negativos presentes sobre a pele de todas as pessoas, também
presentes na orofaringe e nos tratos gastrointestinal e urogenital;
- Colonização transitória de Staphylococcus Aureus nas dobras cutâneas
húmidas é comum;
- Colonização do coto umbilical, da pele e da área perineal dos recém-nascidos
por Staphylococcus Aureus;
- O estado de portador a curto prazo ou persistente de crianças de mais idade e
adultos é mais comum na nasofaringe anterior do que na orofaringe;
- 15% dos adultos sadios normais são portadores persistentes de Staphylococcus
Aureus na nasofaringe, com maior incidência em pacientes hospitalizados,
equipa médica, pessoas com doenças cutâneas eczematosas e pessoas q
utilizam agulhas de modo ilícito ou por razões médicas;
- Sensíveis a altas temperaturas e a desinfectantes e soluções anti-sépticas;
- Pode sobreviver, por longos períodos, em superfícies secas;
- Transmissão pode ocorrer de modo directo ou indirecto (por exemplo roupas);
Síndromas clínicos
 Staphylococcus Aureus:
- Síndroma da Pele Escaldada por Staphylococcus (sinal de Nikolsky; impetigo
bolhoso);
- Síndroma do choque tóxico;
- Infecções cutâneas;
- Bacteremia e Endocardite;
- Pneumonia e Empiema;
- Osteomielite e Artrite Séptica;

 Staphylococcus epidermis e outros Staphylococcus coagulase negativos


- Endocardite
- Infecções de Cateteres e Derivações;
- Infecções de Próteses Articulares;
- Infecções das vias urinárias.

Diagnóstico laboratorial
Recolha:
- Raspagem da base de um abcesso com uma zaragatoa, seguindo-se a coloração
pelo método de Gram;
- Pus aspirado, tem uma pequena quantidade de microrganismos, logo não é o
melhor método;
- Sangue, também possui poucos microrganismos, mas pode ser utilizado
realizando uma cultura.
Cultura:
- Meio de cultura: Agar Sangue;
- Staphylococcus Aureus: cresce no meio Agar Manitol Sal (o Manitol é
fermentado pelo Staphylococcus Aureus, mas não pela maioria dos
Staphylococcus; o Sal inibe o crescimento da maioria dos microrganismos, mas o
Staphylococcus Aureus);
- Crescem rapidamente em meios de cultura não selectivos, tanto em condições
aeróbias quanto anaeróbias, com formação de grandes colónias lisas em 24h;

Identificação:
- Prova da Catalase: a enzima catalase desdobra o peróxido de hidrogénio em
água e oxigénio (borbulhar  positivo); meio de Agar Sangue pode dar falsos
positivos; culturas com mais de 24h podem dar falsos negativos;

- Prova da Coagulase: pode ser feito em lâmina (10-15segundos) ou em tubo


(4h); a Coagulase actua sobre o fibrinogénio transformando-o em fibrina, logo
caso se verifique aglutinação o teste é positivo (Staphylococcus Aureus); só
válido para estirpes que não apresente autoaglutinação;

- Prova da DNase: positivo quando ocorre transparentização do Agar em


volta das colónias, o DNA não hidrolisado aparece mais opaco;

- Prova da Gelatinase: determinados microrganismos têm capacidade para


produzir a gelatinase, que actua hidrolisando a gelatina em aminoácidos; a
hidrólise da gelatina é uma característica importante na diferenciação dos
microrganismos e pode também ser usada para determinar a sua
patogenicidade; se a gelatina foi hidrolisada pela gelatinase, o meio
mantém-se liquido após refrigeração;
- Provas de sensibilidade à Novobiocina: o Staphylococcus saprophyticus
(coagulase negativo) é resistente à Novobiocina; o teste é realizado colocando um
disco de Novobiocina na placa; se a zona de inibição for menor ou igual a 16mm
indica resistência.

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