FACULTE DE PHARMACIE DE PARIS

COURS D’
’HEMATOLOGIE
2ème année
________

PHYSIOLOGIE DES CELLULES SANGUINES

Prof. David SMADJA

2020-2021

Sommaire
1- Le sang et les organes hématopoïétiques

2- Hématopoïèse et facteurs de croissance

3- La lignée érythroblastique

4- La lignée mégacaryocytaire

5- La lignée granulocytaire

6-La lignée monocytaire

7-La lignée lymphocytaire

8- Méthodes d’’exploration du sang, de la moelle et des organes lymphoïdes

secondaires …

+1 Séance d’Enseignement Dirigé très très fortement recommandé pour la

préparation de l’examen…

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 Le sang
Définition (dictionnaire Garnier-Delamare):
- Tissu liquide contenu et circulant dans le cœur, les artères,
les veines et les capillaires. Il comprend le plasma et des cellules

Cellules de plusieurs types :

* anucléées = . hématies = érythrocytes = globules rouges,

. plaquettes ou thrombocytes

* nucléées = leucocytes = globules blancs :

. Granulocytes/polynucléaires
(neutrophiles, éosinophiles, basophiles)
. lymphocytes,
. monocytes

Les organes hématopoïétiques

Organes hématopoïétiques:
Moelle osseuse
Ganglions et système lymphatique (Foie, rate)

Sang= « lieu de passage » des cellules sanguines circulantes

Moelle Sang Organes

Osseuse Lymphoïdes

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 Hémogramme
Hémogramme= numération sanguine + formule sanguine (NFS)

Numération= données quantitatives concernant 3 lignées

Formule: données quantitatives concernant les globules blancs

Avec possibilité de description des anomalies morphologiques des
cellules = données qualitatives

Comment réaliser un Hémogramme

Prélèvement sanguin au pli du coude:

examen peu invasif
De réalisation aisée
Possibilité de prélever de faibles volume (enfants)

Numération et formule sanguine réalisées sur un automate

intervention humaine en cas d`anomalie
frottis sanguin colore au MGG

Cours numéro 8

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Sang recueilli sur tube sec : Sang recueilli sur un
coagulation anticoagulant

plasma
sérum leucocytes,
plaquettes

caillot hématies

Sang recueilli sur un anticoagulant: chélateurs du Calcium

Tube EDTA
Numération
formule
sanguine
plasma

leucocytes,
plaquettes
Tube Citrate
hématies Etude
hémostase
(plasma)

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 LE SANG

I – Définition : les 3 types de cellules

1. Les globules rouges ou hématies

2. Les leucocytes
a) Granulocytes ou polynucléaires
b) Lymphocytes
c) Monocytes

3. Les plaquettes

Aspect quantitatif: NFS

Numération: données quantitatives des 3 lignées sanguines

Globules Rouges

Quantité en T/L Plaquettes

Ou en 106/mm3
Quantité en G/L
Avec précision de Ou cellules/mm3 Globules Blancs
constantes:
Hb, Ht, VGM Quantité en G/L
TCMH, Ou cellules/mm3
CCMH

5
Aspect quantitatif: NFS

Hématies F : 4,2 à 5,2 x 1012/l (Tera/l)

H : 4,5 à 5,7 x 1012/l

Plaquettes 150 à 450 x 109/l (giga/l)

Leucocytes 4 à 10 x 109/l

Formule leucocytaire

PN neutrophiles: 2 à 7,5 x 109/l (40-75 %)

PN éosinophiles: < 0,5 x 109/l (<5 %)
PN basophiles : < 0,1 x 109/l (< 1 %)
Lymphocytes : 0,8 à 4 x 109/l (20-40 %)
Monocytes : 0,08 à 1 x 109/l (2-10 %)

II - Méthodes d’
’étude: formule sanguine/aspects morphologiques

a) Frottis sanguin

• Contrôle au microscope
– Des leucocytes (proportions chaque types)
– Des GR et plaquettes (aspect)

• 1 goutte de sang étalée sur une lame

• Le frottis doit être correctement étalé afin de bien séparer les

cellules

• Coloration: May Grünwald Giemsa

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 PRÉPARATION DES FROTTIS

• Déposer une goutte de sang sur une lame propre

• A l’aide d’une lame plus étroite, étaler le sang

• Laisser sécher à l’air

II - Méthodes d’
’étude
a) Frottis sanguin
Coloration de May-Grünwald Giemsa
(Coloration panoptique)
Noyau : rouge violet ou rose

Cytoplasme
- acidophile : rose
- basophile : bleu ciel ou bleu foncé
- polychromatophile : grisâtre

Granulations
- neutrophiles : violet/marron
- éosinophiles : orangées
- basophiles : bleu fonce/noir
- azurophiles : rouge pourpre

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b) Critères de reconnaissance

Taille, forme du noyau, aspect de la chromatine, couleur du

cytoplasme, granulations

Plaquette

Hématie
7 µm

CELLULES ANUCLÉÉES

Hématies
Taille 7 µm
Durée de vie 120 jours
Hémoglobine
Fonctions transport de
l’oxygène

Plaquettes
2-3 µm
Durée de vie 8 à 10 jours
Granules
Fonctions : hémostase
(clou plaquettaire, coagulation)

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b) Critères de reconnaissance
Taille, forme du noyau, aspect de la chromatine, couleur du
cytoplasme, granulations

2-3 µm Plaquette

7 µm Hématie

8-12 µm petit

Lymphocytes

12-20 µm grand

Neutrophile
12-18 µm PNN

12-18 µm Éosinophile Polynucléaires

PNE
(Granulocytes)

Basophile
12-18 µm
PNB

15-22 µm Monocyte

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 Taille Cytoplasme Noyau
µm
Teinte Granulations N/C Forme Chromatine
Nombreuses
PNN 12 à 15 beige fines, 0,3 3 à 5 lobes dense
violettes/marron
"billes" orangé à
PNE 12 à 15 beige 0,3 2 à 3 lobes dense
chamois
"tâches"
à peine lobes peu dense, peu
PNB 12 à 15 irrégulières 0,5
teinté marqués visible
violet foncé

Petits très réduit rond, ovalaire très dense

8à9 absence 0,9
lymphocytes bleu foncé excentré violet foncé
régulier,
Grands bleuté ou parfois 10 à 15
10 à 15 0,7 ovalaire ou aspect laqué
lymphocytes hyalin rouge vif
quadrangulaire
gris, irrégulier,
très fines aspect
cendré, réniforme ou
Monocytes 20 à 25 rouges, à peine 0,5 martelé
bords forme de
visibles "spongieux"
irréguliers « fœtus »

LA MOELLE OSSEUSE
I - Introduction Plan

II - Localisation de l’
’hématopoïèse
1. Avant la naissance
2. Chez l’
’adulte

III - Organisation de la moelle

1. Localisation
2. Histologie
3. Vascularisation
4. Stroma médullaire
a) Cellules réticulaires fibroblastiques
b) Adipocytes
c) Macrophages
d) Cellules endothéliales

IV – Les cellules hématopoïétiques

1. Les 3 compartiments
2. Les différents types de cellules
3. Les lignées médullaires

V – Régulation de l’
’hématopoïèse

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 I- Introduction
Production permanente de cellules du sang à partir d’
’une cellule souche
hématopoïétique, régulée pour s’
’adapter aux besoins de l’
’organisme

II - Localisation de l’
’hématopoïèse 3 stades principaux:
1- Stade primitif mésodermique
1. Avant la naissance 2- Stade hépatosplénique
3- Stade médullaire
100 %
1 2 3

75 %

Sac vitellin
50 % Foie
Moelle osseuse
Rate
25 %

1 2 3 4 5 6 7 8 9
Mois de gestation

2. Chez l’
’adulte
Moelle rouge (active) moelle jaune (inactive)

0-4 ans : 100 % de moelle rouge

> 4 ans : involution adipeuse
chez l ’adulte : os plats (côtes, sternum, crâne, vertèbres)

Moelle rouge (%)

100

80
Vertèbres
60 Sternum
Côtes
40 Fémur
Tibia
20

0
0 20 40 60 80
Age (années)

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III - Organisation de la moelle osseuse

1. Localisation
Organe volumineux (5 % du poids) et diffus
Os spongieux (logettes osseuses)

Cellules hématopoïétiques Trame de soutien

Vascularisation
Trabécules osseuses
(endoste)

Ostéoblastes/ostéoclastes
Cellules stromales

2. Histologie

Lamelle osseuse (trabécule)

Adipocytes

Moelle osseuse :
cellules hématopoïétiques + stroma

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3. Vascularisation
Elément central de la microstructure médullaire:
permettant passage substances stimulantes et libération cellules sanguines
Permet de définir UNITE STRUCTURALE ELEMENTAIRE HEMATOPOIETIQUE
dispose de manière adjacente entre artériole et un sinus = groupe de
cellules hématopoïétique adhèrent un même réseau de cellules stromales

Réseau sinusoïdal anastomosé

Barrière médullaire sanguine
Artère nourricière
Cellules Cellules souches
matures
Corticale osseuse
Moelle Sang
Réseau sinusoïdal

Sang Moelle
Sinus central

Veine Diabase « Homing »

Migration
transendotheliale

4. Stroma médullaire

Cellules stromales et matrice extracellulaire = rôle majeur dans l’

’hématopoïèse

a) Cellules réticulaires fibroblastiques/cellules stromales (souches) mesenchymateuses

Réseau tridimensionnel lâche qui structure les niches hématopoïétiques
Synthèse de collagène III, laminine, fibronectine, cytokines

b) Adipocytes
Remplissage moelle jaune
(90 % chez le sujet âgé)

c) Macrophages
- Ilots érythroblastiques
- Synthèse de facteurs de croissance et de cytokines
- Hémolyse physiologique
d) Cellules endothéliales
Cytokines, facteurs de croissance, passage transendothélial
des cellules matures

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IV - Les cellules hématopoïétiques

Ensemble des cellules qui vont donner naissance aux différentes cellules du sang circulant
1. Les 3 compartiments

0,01 %
Multipotentes Cellules
Autorenouvellement souches
Phase G0

Potentiel de prolifération 0,1 %

Engagement progressif
Progéniteurs
et irréversible vers
une lignée

> 99 %
Différenciation
3 à 5 mitoses Précurseurs
Lignées identifiables morphologiquement
Maturation identifiables

Cellules matures

2. Les différents types de cellules

Cellules souches

- « homing » des cellules souches

« Niche » permettant le maintien des propriétés de multipotence et
d’
’autorenouvellement
Rôle des cellules de l’
’endoste, de la matrice extracellulaire, du réseau
vasculaire
- Caractéristiques
Phase G0
Marqueurs : CD34+ - lin- - CD33+
Multipotence Autorenouvellement

Progéniteurs
- Cellules souches engagées dans 1 ou plusieurs lignées
- CFU = colony forming unit et BFU = burst forming unit

Lignées hématopoïétiques
Localisation

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3. Les lignées hématopoïétiques médullaires
Hémangioblaste ?
CSH
Cellules souches

Progéniteur myéloide commun

Progéniteur Ly T
CFU-GEMM
lymphoïde Ly B
Ly NK

Progéniteurs

Erythroblastique Mégacaryocytaire Granulocytaire Monocytaire

Précurseurs
+ Lignées matures 10 à 30 % + à +++ 50 à 70 % 2à3%

Cellules Hématies Plaquettes Granulocytes Monocytes

circulantes neutrophiles

Tissus Macrophages

V - Régulation de l’
’hématopoïèse
Adaptation aux besoins physiologiques et pathologiques
a) Facteurs circulants
Erythropoïétine (Epo) synthèse rénale
Thrombopoïétine (TPo) synthèse hépatique
b) Cytokines
SCF (stem cell factor)
Interleukines (Il) : Il3, Il5, Il6
Colony stimulating factor (CSF) : GM-CSF, G-CSF, M-CSF

Synthèse ubiquitaire dont moelle osseuse (stroma et cellules hématopoïétiques)

Mobilisation des cellules souches par G-CSF et GM-CSF…

Cours numéro 2

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 Comment analyser la moelle osseuse ?

• Ponction medullaire + frottis:

Myélogramme (trocard de
mallarmé)
étude cytologique réalisée par le
biologiste

• Biopsie ostéomédullaire (trocard

de Jamshidi): carotte osseuse,
coupes anatomo-pathologiques
étude histologique réalisée par l’
anatomopathologiste

Les maladies du Sang

Anomalie Moelle
qualitative ou Phénomène
Osseuse « central »
quantitative d
une ou plusieurs
lignées

Sang Phénomène
« Périphérique »

Organes
Lymphoïdes
ED Hématologie 2eme année

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 Lignées Hématopoïétiques
1- CS Progéniteurs Précurseurs
cellules matures

2- Régulation: Quels facteurs de croissance

pour quel stade ?

3- Durée de formation lignée dans moelle

osseuse et marqueurs clés de
différentiation

4- Fonctions de la cellule mature

LEXIQUE

• CSF: colony stimulating factor (facteur de croissance)

• CFU: colony forming unit (ce sont des cellules progénitrices)

• Moelle épinière n est pas la moelle osseuse…

• Le plasma ce n’est pas le sérum…

• -Blaste: précurseur immature

• Erythro-: lignée des globules rouges
• Thrombo-: lignée des plaquettes
• Myélo-: lignée des granuleux
• Mono-: lignée des monocytes
• Lympho-: lignée des lymphocytes

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