• Examen du 6 juin 2000 (1 heure) (de Mr Nicolas)

1. Citer 2 types de cellules qui peuvent être infectées par le virus Epstein Barr (EBV) .

2. Un de ces deux types cellulaires est présent dans le sang. Mises en contact avec le
Virus Epstein Barr, ces cellules vont acquérir de nouvelles propriétés. Les quelles ?

3. Vous disposez de plusieurs lignées de laboratoire infectées par le virus EBV.

Comment prouveriez-vous que certaines d'entre-elles produisent du virus infectieux ?

4. Quelles sont les caractéristiques virologiques d'une lignée infectée par l' EBV non-
productrice de virus infectieux ?

5. Quelles sont les caractéristiques virologiques d'une lignée infectée par l'EBV et
productrice de virus infectieux ?

6. Peut-on activer la réplication du virus dans une lignée non-productrice de virus ?

Comment ?

7. On se propose d'identifier le ou les gènes qui réactivent le cycle lytique. A cette fin, on
dispose
a) de cellules infectées par l'EBV non-productrices de virus infectueux
b) de l'ensemble des gènes viraux (latents et lytiques) cloné séparément dans des
vecteurs d'expression eucaryotes
Comment feriez-vous pour identifier le(s) gène(s) impliqué(s) dans la réactivation
virale ? A quelle catégorie de gènes viraux appartiennent-ils ?

8. Ces expériences montrent que le fragment BamH1 (gène ZEBRA) du génome viral est
capable d'activer le cycle lytique et d'induire la production de particules virales. Quelle
est ma fonction de ce gène ?

9. On établit une lignée à partir

a) de cellules prélevées chez un sujet sain séropositif pour l'EBV
b) des cellules d'une tumeur de Burkitt.
Les cellules d'une des deux lignées présentent des altérations chromosomiques
majeures. Quelle est cette lignée et quelle(s) est(sont) ces altération(s) ?

10. On veut analyser l'expression virale dans ces deux lignées. Citez deux techniques que
l'on peut utiliser.

11. Quel(s) est(sont) la(les) protéine(s) exprimée(s) dans la lignée de Burkitt ?

12. Quel(s) est(sont) la(les) protéine(s) exprimée(s) dans la lignée établie à partir du sang
circulant du sujet sain ?

13. -Quelle est la seule protéine virale constamment exprimée dans les tumeurs de Burkitt
qui apparaissent chez les sujets immunocompétents ? Quel est le rôle de cette
protéine ?
-Pourquoi les cellules qui expriment cette protéines ne sont pas éliminées par le
système immunitaire ? Existe t-il une explication à ce phénomène ?
 14. On veut maintenant identifier le réservoir du virus Epstein Barr chez le sujet sain. On
sait qu'il se trouve dans les lymphocytes B mais on sait qu'il existe plusieurs catégories
de lymphocyte B différentiables par des marqueurs de surface. Proposez une technique
de séparation de ces différentes catégories de lymphocytes B.

15. Quelle catégorie de lymphocytes B constitue le réservoir de virus Epstein Barr chez le
sujet sain ? Quelles sont les protéines virales exprimées dans ces cellules ? Comment
détecter le virus ?

Les réponses à ses questions seront données ultérieurement lorsque le site sera plus
avancé....