Cours Bio instrumentation et biocapteurs Chapitre II : les différents types de biorécepteur

REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE POPULAIRE

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA
RECHERCHE SCIENTIFIQUE
CENTRE UNIVERSITAIRE DE TISSEMSILT
Institut des sciences et de la technologie

Polycopié de cours

Bio instrumentation et biocapteurs

« Chapitre II : les transducteurs (les électrodes)»

Domaine : Sciences et technologies
Filière : électronique
Spécialité : instrumentation

Préparé par : Dr. CHEBBAH KHEIRA.

Maitre assistant classe « B »
Année universitaire : 2019/2020.
Les étudiants concernés par le support : Master 1 « instrumentation ».

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II. Transducteur (l’électrode)

Définition 1 :
Le transducteur permet de transforment l’événement de reconnaissance en un signal physique
mesurable.

Définition 2 :
C’est le composant qui permet de détecter le changement physique se produisant dans
l’élément reconnaissance moléculaire suite la liaison de l’analyte et les convertis en un signal
de sortie, il peut être amplifié, afficher et sauvegarder.

II. 1 principe du mode de transducteurs

La combinaison d’un biorécepteur et d’un transducteur devrait déboucher sur un grand

nombre de biocapteurs. En réalité, il faut qu’il y ait compatibilité entre le transducteur et le
biorécepteur pour l’obtention d’un signal électrique. On ne peut pas, par exemple, utiliser un
transducteur thermométrique si la réaction de transformation du substrat ne donne pas lieu à
une variation d’enthalpie. Quatre systèmes de transduction, basés sur des principes différents,
sont généralement utilises afin de convertir la reconnaissance moléculaire en un signal
électrique exploitable.

II. 2 Différents modes de transduction :

Dans le domaine des biocapteurs, différents systèmes de transduction, basés sur des principes
différents, sont généralement utilisés afin de transformer la reconnaissance moléculaire issue
d’une interaction entre un analyte et le biorécepteur en un signal électrique exploitable. Le
type de transducteur est choisi selon les modifications biochimiques générées par le
biorécepteur. L’adéquation entre ces deux entités permet d’obtenir un signal sensible,
facilement exploitable et avec un bruit de fond minimal ce qui assure un meilleur seuil de
détection et améliore ainsi l’efficacité du biocapteur. La nature du transducteur sert souvent
de base pour la classification des différents biocapteurs.
Signal biologique signal électrique
BR TRD

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II. 2.1 Transducteurs optiques

Détection du spectre de l’échantillon de la dispersion de la lumière par photodiode (oxymétrie

de pouls).

Ce type de transducteur permet d’effectuer des mesures in situ et en temps réel avec une
bonne sensibilité, une robustesse et des faibles temps de réponse. Une autre particularité est
leur miniaturisation ainsi que leur capacité de détection simultanée de plusieurs analytes.

II. 1.2 Transducteurs thermiques

Les transducteurs thermiques aussi appelés capteurs enthalpimétriques ont été développés
dans les années 1974. Ils sont destinés à déterminer la concentration d’un substrat par la
variation d’enthalpie associée à des réactions exo ou endothermiques. Leur principe est basé
sur l’immobilisation des récepteurs biologiques qui sont reliés à un microcalorimètre ou à une
résistance thermique capable de mesurer les changements d’enthalpie ou de température dues
aux réactions avec l’analyte

II. 1.3. Transducteurs mécaniques

Au cours des dernières années, différents transducteurs mécaniques ont été largement
répandus en tant que systèmes de détection de biocapteurs parmi lesquels nous trouvons les
transducteurs basés sur l’effet piézoélectrique et les microsystèmes biologiques
électromécaniques.

a) Transducteurs basés sur l’effet piézoélectrique

Ce type de transducteur a été mis au point par Shons et al. en 1972 et il repose sur le
phénomène piézoélectrique, qui induit à l’apparition d’un potentiel électrique à la
surface d’un matériau lorsque celui-ci subit une contrainte mécanique. Le biocapteur à
effet piézoélectrique le plus utilisé est connu sous le nom de microbalance à quartz
(QCM). Il est basé sur la mesure de l’oscillation d’un cristal de quartz immergé dans
un liquide et sur lequel est immobilisé le composé biologique. Par la suite ce système
entraîne un changement de masse à la surface du cristal provoquant un changement
quantifiable de la fréquence de résonance. Depuis plusieurs études ont été consacrées à
son utilisation dans la détection des marqueurs tumoraux , des résidus de pesticides ,
des toxines alimentaires, …etc.

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b) Transducteurs basés sur les microsystèmes électromécaniques

Les microsystèmes biologiques électromécaniques dits Bio-MEMS ou Biological Micro-

Electro-Mechanical-Systems en Anglais sont des systèmes mécaniques de taille nanométrique
permettant la conversion des interactions biomoléculaires en une grandeur mécanique [64]. La
fabrication de ce système se base sur la fixation d’une micro-biomembrane, formant l’élément
sensible du Bio-MEMS sur un substrat de silicium. Lorsque la biomembrane est en contact
avec une solution aqueuse contenant des espèces à détecter (cible), celles-ci sont captées par
des molécules fonctionnalisant sa surface appelées sondes et conduisant à son alourdissement.
La quantité d’analytes présente dans le liquide est estimée par la mesure de la variation de
fréquence de résonance issue des vibrations de cette membrane.

II. 2.4 Transducteurs électrochimiques

Les transducteurs électrochimiques transforment l’interaction électrochimique entre l’analyte

et l’électrode en un signal porteur d’information. Leur principe de fonctionnement est basé sur
le fait que certaines molécules électro-actives en solution peuvent échanger les électrons avec
la surface de l’électrode selon le potentiel auquel cet échange a lieu. Les transducteurs
électrochimiques restent les plus utilisés grâce à leurs principaux avantages liés à leur
simplicité, leur coût de revient relativement faible et leur rapidité de réponse. Dans cette
catégorie nous distinguons: les transducteurs potentiométriques, ampérométriques,
impédimétriques, conductimétriques et voltammétriques

a) Transducteurs potentiométriques

Ce type de transducteur est basé sur la mesure de la différence du potentiel établi entre une
électrode de référence à potentiel constant et une électrode indicatrice sous une intensité de
courant nulle. Les potentiels mesurés sont proportionnels à la concentration de l’analyte dans
la solution qui est généralement le substrat d’une enzyme, d’une cellule entière, d’un
anticorps, ou d’une ADN.

b) Transducteurs ampérométriques

Ces transducteurs mesurent le courant généré par une réaction d’oxydo-réduction entre une
électrode de travail et une électrode de référence à un potentiel constant. La valeur de ce
courant est proportionnelle à la concentration d’analyte en solution. Ce type de transducteur

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est caractérisé par sa haute sensibilité et sa large gamme de linéarité comparé aux
transducteurs potentiométriques.

c) Transducteurs conductimétriques

Transducteurs conductimétriques sont des alternatifs aux potentiométriques et

ampérométriques, leur principe repose sur la mesure des propriétés conductimétriques d’un
milieu entre deux électrodes parcourues par un courant alternatif.

d) Transducteurs impédimétriques

Le principe de ce type de transducteur repose sur la technique de la spectroscopie

d’impédance basée sur l’application d’une contrainte sous forme d’une variation sinusoïdale
en tension de quelques millivolts d’amplitude, entre l’électrode de référence et l’électrode de
travail et la mesure du courant généré entre l’électrode de travail et l’électrode auxiliaire en
fonction de la fréquence. Cette variation de potentiel d’entrée est de la forme :

E= Va sin(𝜔𝑡 + 𝜑)

Avec : ω: vitesse angulaire = 2πf

ωt : Angle de phase.

La réponse sinusoïdale de sortie est obtenue en courant et accompagnée d’un déphasage (𝜑)
dépendant des éléments électriques présents dans le système (Figure 1)

I= Ia sin(𝜔𝑡 + 𝜑)

Avec : 𝜑 : Le déphasage entre les deux signaux

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Figure 1: Déphasage entre la perturbation électrique en potentiel d'entrée et le signal de sortie

en courant.

Le rapport du potentiel appliqué à l’intensité du courant mesurée indique l’impédance du

système électrochimique traduite par un circuit électrique équivalent.

𝑬 𝑬𝟎 𝐬𝐢𝐧( 𝝎𝒕) 𝐬𝐢𝐧( 𝝎𝒕)

Z= = = Z0× = Z0× (𝐜𝐨𝐬 𝝋 + 𝒋 𝐬𝐢𝐧 𝝋)
𝑰 𝑰𝟎 𝐬𝐢𝐧(𝝎𝒕+𝝋) 𝐬𝐢𝐧(𝝎𝒕+𝝋)

e) Transducteurs voltammétriques

Les transducteurs voltammétriques sont fréquemment employés, grâce à leurs robustesses,

simplicité et haute sensibilité [69]. Ils sont basés sur la mesure du flux de courant résultant de
la réduction ou de l’oxydation des composés présents en solution sous l’effet d’une variation
contrôlée de la différence de potentiel E entre l’électrode de travail et celle de référence. En
voltammétrie, le potentiel E appliqué à l’électrode de travail varie en fonction du temps et le
courant i est mesuré entre l’électrode de travail et l’électrode auxiliaire en fonction du
potentiel E. Les courbes i=f(E) obtenues sont appelées voltammogrammes qui sont la somme
d'un courant capacitif dû à la charge de l'électrode et à un courant faradique, résultant d'un
transfert d’électrons entre l'électrode de travail et la solution d’analyte.

II.3 Différents types des biocapteurs :

Nous venons de faire ainsi une étude comparative des types de biocapteurs. Celle-ci nous a
permis de comprendre le principe de fonctionnement, de recenser les avantages et
inconvénients des uns et des autres et nous permet d’avoir une orientation préalable de la
méthodologie à adopter pour la proposition d’une méthode alternative de détection de
pathogènes.

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Figure 2: Familles de biorécepteur et de transducteur

Le tableau I ci- dessous présente les avantages et les inconvénients des différents types de
biocapteurs.

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Tableau I: Avantages et inconvénients des différents types de biocapteurs

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II. 4 Domaines typiques d’applications des biocapteurs

Le tableau II ci-dessous recense quelques domaines d’applications des biocapteurs et leurs

usages.
Biorécepteur(BR) Transduction Domain d’application et Exemples d’éléments
leurs d’utilisations détectés

Electrochimie -Station d’épuration

- Santé
- Environnement
- Enzymes détection du Electrode redox et
trichlorfon9(2.10-4nM)
- Tissu (plante ou Potentiométrie sélectives aux ions (ex :
- détection des composés
animal) organophosphorés électrode venue,
(toxiques)
- Anticorps manqué électrode sélectives Co2
avec un enzyme , NH3 )

Ampèremètrie - mesure des métaux Détection de H2O2 /O2

lourds (Cr, Mn, Mo)
électrodes aux enzymes
- mesure de polluants
organiques (cyanure
d’éthyl-n-
dimethylphosphoramide,
phosphonofluorure
d’isopropylmethyle,
phosphonofluorure de
picacolyméthyle).
- détection de arbamate8
(carbofuran :0,01nM).
- mesure de pesticides
organophosphorés de
concentration de l’ordre
de 10-12 mol /l
-estimation du glucose,
urée,cholestérol,
glutamate.
- concentration du lactate
dans le sang des
athlètes pour prévenir la
fatigue musculaire et
les crampes.
- détection de l’éthanol
dans le souffle, la

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salive et le sang humain;

- permet d’étudier l’effet
des pesticides sur
les paramètres
cytogénétiques et
biochimiques des souris et
leurs embryons.
- détection des pathogènes
à l’exemple du
Mycobacterium
tuberculosis, Vibrio
cholerae, Treponema
pallidium ; salmonella.
- traitement de la maladie
d’Alzheimer.
-Enzymes Conductimétrie Electrodes interdigitées
- Biocouche lipide pour déterminer le
changement de
conductivité due a la
production d’ions
Optique Agroalimentaire
-Anticorps Fluorescence -quantification des divers Bi Acore ( avec surface
acides
- Acide nucléique Réseau du Plasmas carboxyliques comme d’ Au ou d’Ag
- Anticorps de sf (SPR) l’acide ascorbique
(dans les jus de fruits) et
- Antigène l’acide citrique
(fruits, jus de fruits, boissons
- Enzyme
pour sportifs)
l’évaluation du taux
d’antioxydant ( les
polyphénols) dans l’huile
d’olive, le vin et le
thé vert.
- détection des
contaminants (pathogènes,
pesticides,
microorganismes et
toxine).
- détection de
sulfaméthazine dans le lait
et
dans des échantillons de
bile de porc, en
utilisant un seuil

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déterminé de 0,4 μg/ml

Thermique
-Enzyme Thermistance
-cellules

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