Danglades Alexia et BENOIT Gaëtan CH1G 30/04/21

TP3.1 Spectrophotométrie
But : Dosage d’une solution de permanganate de potassium KMNO4

0/ Rappels
- Domaine électromagnétique

Ultraviolet [10 ;400] < Domaine visible : [400-800] < Infrarouge

La spectrophotométrie se fera dans le domaine de l’UV au visible.

- Quantification de l’énergie

A l’état fondamental, une molécule à une énergie qui est la somme de : énergie de spin + énergie
de rotation + énergie de vibration (1 à 3kJ/mol) + énergie électronique (100 à 300 kJ/mol).

hc
∆ E=
λ
On travaillera en spectrophotométrie d’absorption moléculaire.

I/ Analyse spectrophotométrique
I0
A=log ( )
It
=ε . l .C , souvent l=1cm, ε est le coefficient d’extinction molaire en mol/cm 2, et C la

concentration en mol/cm3. A ≤ 1

ɛ dépend de la longueur d’onde utilisé expérimentalement, de la température (supposé constante) et

de la substance. Donc, dans le cadre du TP il sera constant. Soit l’absorbance est proportionnelle à la
concentration.

Problèmes rencontrés  :

- « l » doit est connue.

- La loi de Beer-Lambert doit être vérifié.
- Choix du solvant : l’eau. L’eau absorbe
- Matière de la cuve : verre (qui absorbe les UV, car le plastique peut réagir avec la substance
et/ou le solvant.

Choix de la longueur d’onde de travail :

Sur le spectre de bandes, on prend la où c’est le plus élevé pour avoir le signal sur bruit de fonds le
plus élevé possible. L’appareil balaye les longueurs d’ondes entre 400 et 800 nm et nous fournit
ensuite le spectre de la substance pour choisir notre λ de travail.

Principe  :

On mesure l’absorbance AX de notre solution inconnue pour doser l’ion métallique MNO 4-. Puis, on
A X =k . C X
mesure AE notre absorbance de la solution étalon soit on a : { A E =k . C E
, puis on fait le rapport pour

trouver notre inconnue CX. Mais cela nécessite une qualité de manipulation irréprochable.
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Soit, nous allons faire une droite d’étalonnage. On va donc préparer plusieurs solutions diluées à
partir de la solution étalon.

ε Mn o =2,5.106 c m2 .mo l −1 ¿ ,
−¿ ,525nm soit on peut en déduire Cmax :
4

A 1
C max= = =4.10−7 mol . co m−3=4.10−4 mol . L−1
l . ε 1∗2,5.106

On va donc faire 4 solutions dilués pour tracer la courbe d’étalonnage.

C mère=2,2.10−2 mol . L−1, on va donc diluer une première fois la solution pour ne pas avoir à
prélever de volume trop petit lors de la préparation des 5 solutions.

C f . V f 2.10−3∗100
Soit : C m . V m =C f .V f ≫ V m= = =10 mL, on multipliera nos volumes à prélever
Cm 2.10−2
par 1,1.

On utilisera notre solution à 2.10-3 pour faire nos 4 solutions.

Tableau de dilution étalon

N° 1 2 3 4
Vprelevé [mL] 1 5 3 10
Vprélevé réel [mL] 1,1 5,5 3,3 11
QSP [mL] 20 50 20 50
Cfiole [mol/L] 1.10-4 2.10-4 3.10-4 4.10-4

Puis, nous allons préparer 2 solutions dilués à partir de notre solution de concentration inconnue.

CX = 2.10-3 mol/L, donc nous n’avons pas besoin de réaliser de dilution intermédiaire.

Tableau de dilution inconnue

N° 1 2
Vprélevé [mL] 1,5 3,5
QSP [mL] 20 20
CX [mol/L] 1,5.10-4 3,5.10-4

Mise en route de l’appareil et mesures  :

- Mettre sous tension l’appareil, attendre 3 minutes et allumer l’ordinateur et ouvrir Scan.
- Remplir les 2 premières cuves d’eau et les mettre dans les trous. Fermer la fenêtre pour
éviter la pollution lumineuse.
- X >> λ et Y >> A, balayage de 400 à 800nm et de 0,5 à 1,5.
- Baseline, correction de la ligne de base. Cliquer sur baseline correction, ligne de base faite.
- Puis on met la solution la plus concentrée pour faire le spectre. Et on appuie sur Start.
- Curseur mode pour trouver le λ de travail et lire les coordonnées.
- Ouvrir Simple Read, 2 réglages : λ=525nm et faire le zéro avec 2 cuves d’eau.
- Passer les cuves de la moins à la plus concentrée.
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Mode opératoire  :

On a tracé le spectre de la solution mère étalon entre 400 et 800nm (voir annexe 1). Nous en avons
déduit la valeur de λmax=525nm pour Amax<1.

On prend les mesures d’absorbance avec le spectrophotomètre de nos solutions dilués en utilisant la
même cuve que l’on nettoie après chaque mesure, en passant de la moins concentrée à la plus
concentrée. A λ=525nm dans Simple Read.

On trace ensuite la courbe A=f(C)(Annexe 2). La courbe obtenue est une droite linéaire
(proportionnelle) d’équation y=0,2654x. Soit on peut en déduire
A 1,02
ε λmax = = =2,5.104 L . c m−1 .mo l−1, théoriquement on a :
C . l 4.10 ∗1
−4

ε λmax =2.10 4 l . c m −1 . mol−1

II/ Résultats et exploitations

Nous avons obtenu les résultats ci-dessous grâce à l’utilisation du spectrophotomètre.

C [10-4MOL/L] A
0 0
1 0,26
2 0,53
3 0,78
4 1,08

CX [10-4MOL/L] A
1,5 0,45
3,5 1,02
Puis sur notre graphique en annexe, nous avons déterminé les concentrations des 2 C X. D’où CX1=
1,68.10-4 mol/L et CX2 = 3,85.10-4 mol/L.

Ayant utilisé les volumes entiers pour manipuler avec une plus grande précision, nous devons donc
rajouter un facteur 1,1 pour trouver notre concentration inconnue.

1,68.10−4∗20
C X 1= ∗1,1=0 , 002464
1,5

3,85.10−4∗20
C X 2= ∗1,1=0 , 00242
3,5
C X 1 +C X 2 0,002464 +0,00242
C´ X = = =0,002442
2 2
Uc 5 5. C 5∗0,002442 −4 −1 −1
= ≫ U c= = =1,22.10 mol . L soit U c =0,0001 mol . L
C x 100 100 100
Donc on obtient finalement une concentration de 0,0024 ± 0,0001 mol/L.
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On mesure la gamme d’absorbance du moins concentré au plus concentré car si le nettoyage n’est
pas très bien fait, on travail avec une quantité de matière qui croît, tout comme l’absorbance, donc
c’est OK.

Et l’ordre de grandeur maxima pour l’absorbance est défini grâce au spectre fait avec la solution la
plus concentré, comme ça on obtient le maximum d’absorbance pour le maximum de matière mis en
jeu (concentration la plus haute).

Et on effectue donc le spectre sur la plus concentré pour éviter les bruits de fonds qui faussent les
signaux qui seraient faible (pour les faibles concentrations).

Lors de ce TP nous avons réalisé le dosage d’une solution de KMnO 4 à l’aide du spectrophotomètre
UV-visible CARY. Nous avons pu déterminer ainsi la concentration de notre solution qui vaut 2,4.10 -3
± 0,0001 mol/L.