HEMAGLUTININA

1
Arma molecular del virus de la influenza

El virus de la influenza es un enemigo peligroso. Normalmente el

sistema inmunitario combate las infecciones erradicando los virus tras unos
pocos días de malestar debidos a los síntomas gripales. La vacunación anual
prepara a nuestro sistema inmunitario dejándolo listo para combatir a las cepas
más comunes del virus de la influenza. Pero aproximadamente cada dos
décadas aparece una cepa mucho más patogénica que lo habitual y se
expande rápidamente. Esto ocurrió a fines de la Primera Guerra Mundial y la
pandemia resultante mató a 20 millones de personas, más del doble de los
muertos causados por la guerra.

Apunta y Dispara
La hemaglutinina es una de las causas
de que el virus de la influenza sea tan efectivo.
Es una proteína espigada que se extiende
desde la superficie del virus. En su forma
activa, vista aquí, la hemaglutinina está
compuesta por dos tipos diferentes de
cadenas representadas en azul y anaranjado.
Las cadenas azules son el mecanismo de
orientación: ellas buscan cadenas de
polisacáridos específicas unidas a las

1
Tomado de: Goodsell, David S. “Hemagglutinin” (April 2006. Molecule of the Month) RSCB –
Protein Data Bank
proteínas celulares. Cuando encuentran una apropiada, la hemaglutinina se
une a la célula y la cadena anaranjada inicia el ataque como veremos más
adelante. El nombre “hemaglutinina” hace referencia a la capacidad de la
influenza para aglutinar a los glóbulos rojos de la sangre: el virus está cubierto
por numerosas moléculas de hemaglutinina, que actuando en forma conjunta,
pueden adherir entre sí varios glóbulos rojos formado un grumo visible.

Subtipos furtivos
La especificidad y el consecuente peligro de cada cepa del virus de la
influenza, depende del tipo particular de hemaglutinina que posee. Se conoce
más de una docena de subtipos de hemaglutinina. Tres de ellos (denominados
H1, H2 y H3) atacan a los humanos. Estos se especializan en buscar las
cadenas de polisacáridos mencionadas en nuestro tracto respiratorio
provocando los síntomas conocidos de la gripe. Otros subtipos como el H5
atacan a las proteínas del sistema digestivo de las aves. En su mayoría no son
peligrosas para los humanos y tampoco suelen poner en riesgo la vida de las
aves existiendo como un reservorio invisible de genes virales. El peligro
potencial aparece cuando las distintas cepas comienzan a intercambiar genes.
La influenza aviar H5N12 –la “gripe del pollo”- fue noticia debido a que diezmó
poblaciones de aves. Sin embargo, no es actualmente un riesgo para nuestra
salud ya que no porta el tipo de hemaglutinina específico para el ser humano.
Pero existe la posibilidad de que adquiera este tipo específico de hemaglutinina
y entonces, estaríamos en problemas. Una de las maneras de que esto ocurra
tiene que ver con los cerdos. Los cerdos son susceptibles al ataque de virus de
influenza de diversos subtipos, tanto de los que atacan a las aves como de los
que nos atacan a nosotros. Si un solo cerdo es infectado por dos subtipos al
mismo tiempo, los virus pueden mezclarse e intercambiar genes durante la
infección. El resultado puede ser la creación de una cepa con la virulencia de la
influenza aviar combinada con la habilidad para infectar células humanas.

2
La denominación “N1” se refiere a un subtipo de otra proteína viral: la neuroamidasa
Agente letal
La hemaglutinina mostrada aquí fue tomada del virus de la pandemia de
gripe que mató a tanta gente en 1918. El ADN que codifica esta hemaglutinina
fue aislado de muestras preservadas y la molécula de hemaglutinina fue
sintetizada en el laboratorio a partir de esta información genética. Dos
estructuras cristalinas fueron obtenidas: una forma activa y su precursor. La
proteína está ligada a la superficie del virus a través de un corto segmento
proteico que no aparece en la estructura cristalina y que está representado en
la figura de abajo. Para más información vinculada a la hemaglutinina desde
una perspectiva bioinformática puede visitarse “Protein of the Month” en el sitio
del European Bioinformatics Institute.

Hemaglutinina en acción

La hemaglutinina es una mortífera máquina molecular que apunta y

ataca a la célula. Esto ocurre en varios pasos. Primero, los tres sitios de anclaje
en la parte superior de la proteína se unen a los polisacáridos de la membrana
celular representados en verde en la figura. Entonces, todo el virus es
arrastrado hacia el interior de la célula dentro del endosoma y la célula le
adiciona ácido; éste normalmente digiere el contenido del endosoma. Pero en
el caso del virus, el medio ácido sirve para armar el mecanismo de ataque. En
medio ácido, la hemaglutinina se despliega y repliega en una forma
completamente diferente. Las porciones representadas en rojo y anaranjado
están normalmente plegadas contra la proteína pero en medio ácido salen
afuera y apuntan hacia arriba como se muestra en el centro de la ilustración. La
porción roja denominada “péptido de fusión”, tiene fuerte afinidad por las
membranas por lo que se inserta en la membrana celular fijando al virus a la
célula. Entonces, como se muestra a la derecha, las porciones amarillas se
deslizan hacia los lados de la proteína, tirando de las dos membranas y
obligándolas a acercarse. Finalmente, la nueva conformación de la
hemaglutinina causa de alguna manera que las dos membranas se fundan –
esta parte aún no está bien comprendida- y el ARN viral entra en la célula
comenzando el proceso de infección.

Explorando la estructura
 Los anticuerpos son nuestra primera línea de defensa contra el virus de
la influenza. Aquí puede verse cómo un anticuerpo ataca a la hemaglutinina
bloqueándola de tal forma que no pueda unirse a la superficie de las células.
En la imagen de arriba puede verse a la hemaglutinina (en azul y anaranjado) y
tres copias del fragmento “fab” del anticuerpo (fragmento de unión al antígeno),
uno de los brazos del anticuerpo con forma de “Y”. Por supuesto que los virus
siempre encuentran maneras de evadir el ataque de los anticuerpos creando
nuevas cepas que nos infectan cada año. Una de ellas es cambiar de lugar a
las cadenas de carbohidratos en la superficie de la hemaglutinina. Algunas de
esas cadenas glucídicas son representadas aquí en verde. Si el virus agrega
una nueva cadena de carbohidrato en el lugar al que el anticuerpo se une, éste
ya no será efectivo.

Información adicional sobre la hemaglutinina

• JJ Skehel and DC Wiley (2000) Receptor binding and membrane fusion

in virus entry: the influenza hemagglutinin. Annual Review of
Biochemistry 69, 521-569.
• RG Webster and EJ Walker (2003) Influenza. American Scientist
91(March-April), 122- 129.
• TH Sollner (2004) Intracellular and viral membrane fusion: a uniting
mechanism. Current Opinion in Cell Biology 16, 429-435.

Fuente: RSCB - Protein Data Bank

Traducción: Roberto Calvo/UruguayEduca

 NEUROAMIDASA DE LA INFLUENZA Y GRIPE PORCINA1

El virus de la influenza está constantemente cambiando y cada década

aparece una nueva variedad peligrosa que representa una amenaza para la
salud pública. Este año tuvo lugar el brote de una nueva cepa de la gripe
H1N1, más conocida como la “gripe porcina”. La designación H1N1 hace
referencia a las dos moléculas que cubren la superficie del virus: la
hemaglutinina y la neuroamidasa. Juntas, esas dos moléculas controlan el
poder infeccioso del virus. La hemaglutinina asume el rol estelar cuando el
virus se aproxima a la superficie de la célula uniéndose a dos cadenas de
polisacárido en la superficie de la célula blanco para entonces inyectarle el
genoma viral. La neuroamidasa por su parte asume el rol principal después de
que el virus abandona la célula infectada. Su función es asegurar que el virus
no quede adherido a la superficie de la célula cortando los extremos de las
cadenas de polisacárido utilizadas en la primera etapa.

Cortando azúcares
La neuromidasa se compone de cuatro subunidades dispuestas en un
cuadrado. Se encuentra normalmente unida a la superficie del virus a través de
un largo tallo proteico –no mostrado en la figura-. Los sitios activos están en
una profunda depresión en la cara superior. Ellos son los responsables de la
unión del virus a las cadenas de polisacáridos y del corte de estas cadenas al
final del proceso. La superficie de la neuroamidasa es “decorada” por varias
cadenas de polisacáridos –que se extienden hacia arriba y hacia abajo en la
estructura representada- que se asemejan a las cadenas de polisacáridos
asociadas a las proteínas de la superficie de la célula.

1
Tomado de: Goodsell, David S. “Influenza Neuraminidase” (May 2009. Molecule of the Month)
RSCB – Protein Data Bank
Aves, cerdos, personas
Como la hemaglutinina, la neuroamidasa viene en una amplia variedad
de subtipos denominados N1-N9. Estos subtipos se definen por sus
interacciones con los anticuerpos: todas las variantes de un mismo subtipo
serán neutralizadas por el mismo juego de anticuerpos. Éstos son una de las
causas de la efectividad de la influenza como agente infeccioso. Algunos
subtipos promueven la infección de las personas, otros la de las aves; otros
blancos potenciales son los cerdos y otros mamíferos. Cuando los virus se
esparcen e infectan diferentes organismos pueden mezclarse, y al combinarse
los diferentes subtipos, formar al azar nuevos arreglos, ocasionalmente letales

Contraatacando
Dos drogas efectivas son utilizadas habitualmente
en la batalla contra la infección del virus de la influenza:
zanamivir (Relenza) y oseltamivir (Tamiflu). Estas drogas
fueron descubiertas usando las estructuras cristalinas
depositadas en la base de datos del Protein Data Bank.
Estudiando la unión de moléculas al sitio activo de
la neuroamidasa, los investigadores estuvieron en
condiciones de diseñar las moléculas de nuevas drogas
que se mimetizan como los sustratos naturales de la
enzima. Dos de las estructuras de esas drogas son
representadas aquí. En el centro, el zanamivir unido a la
neuroamidasa del virus de la “gripe española”, causante
de la pandemia de 1918. Abajo, el oseltamivir, unido al
virus de la gripe aviar.
Anticuerpos y vacunas
Cuando nos enfermamos de gripe, nuestro sistema inmunitario fabrica
anticuerpos para combatir al virus. La vacuna contra la gripe es la forma de
prepararnos para protegernos de esa agresión, desafiando al sistema
inmunitario con virus debilitados o fragmentos inofensivos del mismo,
estimulándolo a fabricar los anticuerpos apropiados antes de que se produzca
la infección. Como podría esperarse, estos anticuerpos reconocerán a las
proteínas de la superficie del
virus. Los más efectivos actúan
contra la hemaglutinina,
bloqueando la infección de
nuevas células. Los anticuerpos
contra la neuroamidasa, como los
mostrados aquí, pueden reducir la
severidad de la gripe, jugando un
rol de apoyo en la lucha contra el
virus.

Explorando la estructura

Cuando designamos una droga, caminamos sobre el filo de la navaja.

Las drogas necesitan ser diferentes del sustrato natural de la enzima para que
ésta no pueda catalizar la reacción que resultaría en su destrucción. Sin
embargo, las drogas deben ser también, lo suficientemente parecidas al
sustrato para unirse fuertemente a la enzima y bloquearla.
También es importante fabricar drogas similares al sustrato para eludir el
fenómeno de la resistencia al fármaco. Un ejemplo de este problema puede
ilustrarse mediante las siguientes tres estructuras.
 La primera estructura muestra la neuroaminidasa con ácido siálico en el
sitio activo. Puede verse cómo la enzima interactúa con los polisacáridos en el
proceso de una reacción normal. La segunda estructura muestra la unión del
oseltamivir (Tamiflu), una de las drogas utilizadas contra la influenza. Note que
es similar pero no idéntica al ácido siálico: es un poco más grande y esto fuerza
a un glutamato (en rosado) contra una histidina vecina (también en rosado). La
tercera estructura es una cepa resistente de la enzima. Una mutación sustituyó
la histidina por tirosina forzando al glutamato inferior contra la droga. Esta aún
está unida a la enzima pero no tan fuertemente, por lo que los polisacáridos del
sustrato pueden desplazarla fácilmente y la droga ya no será efectiva contra el
virus mutante. Queda así mucho espacio para que el ácido siálico pueda
unirse, por lo que la enzima sigue activa para cumplir su función de liberar al
virus.

Información adicional sobre la neuroamidasa

• P. M. Colman (1994) Influenza virus neuraminidase: structure,

antibodies, and inhibitors. Protein Science 3, 1687-1696.
• M. von Itzstein (2007) The war against influenza: discovery and
development of sialidase inhibitors. Nature Reviews Drug Discovery 6,
967-974.

Fuente: RSCB - Protein Data Bank

Traducción: Roberto Calvo/UruguayEduca