EDE Biotechnologies seconde

TP 1 : MISE EN EVIDENCE DES MICROORGANISMES DANS

Option BTK
L’ENVIRONNEMENT ET SUR L’HOMME

L’hygiène et notamment l’hygiène des mains est essentielle aussi bien au niveau alimentaire que
médical.

 Mettre en évidence la présence de microorganismes dans l’environnement et la flore

commensale de l’Homme.
 Comprendre la nécessité de prendre des mesures strictes d’hygiène pour contrôler
l’ambiance de laboratoire, les surfaces de travail et le matériel utilisé afin d’éviter toute
contamination manuportée ou environnementale

Partie A : MISE EN EVIDENCE DES MICROORGANISMES DANS L’ENVIRONNEMENT :

1) Expérience n°1 : Contrôle de l'air ambiant (boîte n°1)

 Ouvrez 1 boîte gélosée, annotée avec n° de boîte et vos initiales, durant 20 minutes à différents
endroits dans le laboratoire, la salle, dans l’établissement … : (remplir le tableau)
- dans la salle
- dans l'étuve du labo STL; ou dans zone stérile ou PSM
- à la Vie Sco
- au foyer
- à la cantine
- à l’administration
- au labo
- dans une salle de classe du 1er étage
- dans le réfrigérateur….

 Placez la boîte fermée et scotchée, couvercle en dessous, dans une étuve à 37°C, pendant
24H.

2) Expérience n°2 : Contrôle des surfaces (boîte n°2)

 Prenez un écouvillon stérile et appliquez-le en frottant quelques centimètres carrés sur

différentes surfaces :
- sur une poignée de porte
- sur un robinet d'eau
- sur une paillasse
- sur un clavier d’ordinateur …
 Etalez délicatement en faisant des zig-zags sur toute la surface de la gélose d’une boîte de
Pétri annotée avec n° de boîte et vos initiales.
 Placez la boîte fermée et scotchée, couvercle en dessous, dans une étuve à 37°C, pendant
24H.
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Partie B : MISE EN EVIDENCE DE LA FLORE COMMENSALE DE L’HOMME ET DE LA

TRANSMISSION MANUPORTEE :

1) Expérience n°3 : Mise en évidence de la flore cutanée (boîte n°3)

 Tracez un trait au feutre sur le fond d’une boîte de Pétri pour la diviser en 2 parties A et B.

 Sur la partie A :
- Déposez les empreintes de 3 doigts de la main (on touche, sans
appuyer, pendant quelques secondes le milieu gélosé contenu dans le
fond de la boîte).

 Sur la partie B :
- A l'aide d'une pince et d'une paire de ciseaux préalablement stérilisés à
l’alcool, déposez un morceau de cheveu sur le milieu et appuyez légèrement avec la pince
pour le faire adhérer à la surface.

 Refermez la boîte.
 Placez la boîte fermée et scotchée, couvercle en dessous, dans une étuve à 37°C, pendant
24H.

2) Expérience n°4 : Contrôle de l’efficacité du lavage des mains (boîte n°4)

Tracez un trait au feutre sur le fond d’une boîte de Pétri pour la diviser en 2 parties A et B.

 Sur la partie A :
- Appliquez les doigts sur une gélose avant lavage

 Sur la partie B :
- Appliquez les doigts sur une gélose après lavage des mains à l’eau / au savon / au savon
antiseptique / au gel hydroalcoolique.

 Placez la boîte fermée et scotchée, couvercle en dessous, dans une étuve à 37°C, pendant
24H.

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NOM :

RESULTATS ET COMPTE-RENDU après incubation des boites 24h à 37°C

Travail préalable :

1) Recherchez la définition d’une colonie.

2) Recherchez la définition de la flore commensale.

3) Indiquez la définition des microorganismes et donner 3 exemples.

4) Indiquez les éléments physico-chimiques importants pour la croissance des bactéries.

Observation des résultats :

0) Vous pouvez prendre des photos avec vos smartphones, imprimer et légender/titrer.

1) Complétez le tableau ci-dessous (2e jour)

Expérience Expérience Expérience Expérience

n°1 n°2 n°3 n°4
Nombre de
colonies
Taille moyenne
colonies (mm)
Couleur
colonies

2) Comparez et discutez les résultats obtenus avec vos boîtes :

- Y a –t-il plusieurs sortes de bactéries ?

- Où observe-t-on le plus de bactéries (homme, surface, etc..) ? Le moins ?
- Le lavage des mains est-il efficace ? Quel produit est le plus efficace ?

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LAVAGE DES MAINS