UNIVERSIDAD CATÓLICA DE LA SSMA.

CONCEPCIÓN
CARRERA DE MEDICINA

Trabajo Práctico de Laboratorio

Permeabilidad de la Membrana Celular

Las membranas celulares son selectivamente permeables, es decir, hay

sustancias que la atraviesan facilmente, por ej., el agua. Algunos solutos, como el
NaCl y carbohidratos, la atraviesan lentamente pero otros, como la urea lo hacen tan
rápido como el agua. La respuesta osmótica de una célula frente a una solución
dada, dependerá no solo de la osmolalidad de la solución sino que también del tipo
de soluto que contenga. Esta respuesta osmótica puede observarse en la práctica a
través de cambios en el volumen celular y los glóbulos rojos constituyen un modelo
para estudiar la difusión de agua a través de las membranas celulares. Así, la
entrada excesiva de H2O a la célula la hará distenderse y terminará rompiendo su
membrana celular, con el vaciamiento de los componentes intracitoplasmáticos al
LEC. Al romperse la membrana del eritrocito, difundirá la hemoglobina al líquido que
la rodea (hemólisis), lo que será facilmente detectable por cambios de coloración.

La sangre diluida en una solución similar al plasma aparece opaca, debido a la

suspensión (inicialmente homogénea) de sus elementos globulares. Esta opacidad
impide leer un texto impreso a través del tubo que la contiene. Al producirse la
hemólisis, la solución se hace transparente, pudiendo leerse el texto a través del
tubo (tiempo de hemólisis).

Objetivo
Demostrar el efecto de la inmersión de glóbulos rojos en soluciones de
diferentes solutos y a diferentes concentraciones, lo que permitirá deducir la
dirección preferencial y velocidad del paso de agua a través de la membrana celular.

Materiales:

Agua destilada Papel Parafilm, papel milimetrado

Soluciones de NaCl, urea y glucosa peachímetro
Detergente en polvo 1 g Regla (30 cm), Lápiz de
grafito,
10 Tubos de ensayo de 10 ml Goma de borrar
2 Matraces de 100 ml Cronómetro
1 Probeta de 10 ml
 2 Pipetas de 10 ml
10 ml de sangre
Heparina 5000 UI/ml

Procedimiento

1.- En una serie de 10 tubos de ensayo, coloque en cada uno 5 ml de las soluciones
que se detallan en la tabla adjunta. Agregue a cada tubo una gota de sangre,
mezcle bien, pero suavemente y determine con cronómetro los tiempos de
hemólisis para cada tubo, a partir del momento de la mezcla.
2.- En un tubo de ensayo coloque 5 ml de NaCl 0.15 M con detergente en polvo (Omo
1 g/l). Agregue unas gotas de sangre, mezcle bien y observe el resultado.
3.- Completa la tabla y analice los resultados

Tabla de Resultados

Solución Osmolaridad Tiempo de Hemolisis

(Volumen-concentración) (mosm/l) min. seg

1.- NaCl 0.05 M ------------- ------ ------

2.- NaCl 0.15 M ------------- ------ ------
3.- NaCl 0.30 M ------------- ------- ------
4.- Urea 0.15 M ------------- ------- ------
5.- Urea 0.30 M ------------- ------- ------
6.- Urea 0.60 M ------------- ------- ------
7.- Glucosa 0.30 M ------------- ------- ------
8.- Glucosa 0.60 M ------------- -------- ------
9.- NaCl 0.15 M +
Detergente (1 g/l) ------------- -------- ------
10.- Agua destilada ------------- -------- ------

Preguntas:

1.- De acuerdo, a los resultados obtenidos, ¿Cuales son las características de

permeabilidad de la membrana del eritrocito?
2.- ¿Qué concluye respecto de la velocidad de difusión pasiva del agua a través de la
membrana celular?
3.- ¿Qué enfermedades presentan fragilidad eritrocítica aumentada o disminuida?
4.- ¿Existen otros factores que afecten la resistencia de la membrana celular?
5.- ¿Por qué en la enfermedad renal crónica existe restricción de Na+ y otros
electrolitos, al igual que de líquidos?
6.- ¿Explique cómo afecta al intercambio transcapilar una hiperproteinemia y una
hipoprotreinemia?
7.- ¿Qué importancia presentan el suero fisiológico al 0,9% y el suero glucosado al
5%? y ¿En qué cuadros clínicos son considerados?