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Paix-Travail-Patrie Peace-Work-Fatherland
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MINISTERE DE LA SANTE PUBLIQUE MINISTRY OF PUBLIC HEALTH
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SECRÉTARIAT GENERAL SECRETARIAT GENERAL
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DELEGATION REGIONALE DE LA WEST REGIONAL DELEGATION
SANTE PUBLIQUE POUR L’OUEST OF PUBLIC HEALTH
-------------- --------------
Complexe Privé de Formation des Personnels Médico-Sanitaires
« Fondation TSOPJIO ET TAKOUDJOU » Dschang
Crée par Décision N° 0344/D/MINSANTE/SG/DRH du 28 Avril 2010
B.P. Dschang –CAMEROUN Tél.: 243 07 03 21
E-mail: ftettdschang@yahoo.fr
PROTOCOLE DE RECHERCHE
Par :
KOUOTOU NTIECHE HERVE
Matricule : 19TPMSAM-9
PROMOTION 2020-2022
Portage asymptomatique du Plasmodium chez les donneurs du sang au sein
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de la banque de sang de l’hôpital de district de Foumban et l’hôpital 21
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I. Lieu de l’étude…………………………………………………………………...21
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Figure (2) Schéma du cycle évolutif du Plasmodium chez l’hôte définitif et intermédiaire
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Dr : Docteur
MGG : May-Grünwald-Giemsa
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INTRODUCTION
Le paludisme ou malaria est une maladie parasitaire due à un protozoaire. Il est
transmis à l’homme par la piqure de la femelle d’un moustique du groupe des anophèles. Le
parasite appelé Plasmodium fut découvert en 1880 par Laveran, le médecin militaire Français.
Le Plasmodium infecte les cellules hépatites des sujets infectés puis circule dans le sang en
colonisant les globules et en les détruisant. Le taux d’incidence des cas du paludisme est passé
de 80 en l’an 2000 à 57 en l’an 2019. Le nombre total de cas a diminué passant de 238
millions en 2000 à 229 millions en 2019 ( www.who.int> Word-malaria-reports). Mais cela
ne tient pas lieu de négliger l’éthique sécuritaire pour la transmission de cette maladie. La
transfusion sanguine représente la troisième voie de transmission du plasmodium (July 2019,
Volume 21, Issue 1 ). L’incidence du paludisme a entrainé une augmentation de la proportion des
donneurs de sang ayant été en contact avec le parasite. La transmission du Plasmodium par la
transfusion sanguine chez les receveurs déjà vulnérables reste toujours une réalité dans le pays
où le dépistage du Plasmodium ne se fait pas systématiquement chez les donneurs de sang.
Alors que chez les receveurs vulnérables l’infection palustre peut être fatale. Dans la banque
de sang de l’hôpital de district de Foumban, et l’hôpital protestant de Njissé comme dans
beaucoup de pays endémique par le Plasmodium, le dépistage du Plasmodium n’est pas
effectué de façon systématique chez les donneurs de sang. Pour remédier à cela la banque de
sang de l’hôpital de district de Foumban et protestant de Njissé font rarement la goute épaisse
pré don pour éliminer une éventuelle infection palustre chez les donneurs ou pour éliminer les
donneurs porteurs du Plasmodium susceptibles de le transmettre aux receveurs. Cette étude a
pour objectif de déterminer la prévalence du portage du Plasmodium chez les donneurs de
sang au sein de HDF et HPN. Le portage du paludisme se définit par un TDR positif et
GE/FM positifs ou un TDR négatif et GE/FM positifs ou un TDR positif et GE/FM négatifs
alors que les donneurs ne présentaient pas un syndrome palustre. Afin de mener à bien notre
travail, nous commencerons par présenter le cadre scientifique de notre recherche, ensuite la
revue de littérature puis faire ressortir la méthodologie du travail avant de procéder à la
présentation des résultats, suivi de la synthèse et discussion et enfin, nous déboucherons sur
une conclusion.
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CARDRE SIENTIFIQUE DE LA
CHAPITRE I RECHERCHE
I-1- CONTEXTE
La transfusion sanguine peut sauver des vies, mais peut également transmettre des
infections virales, bactériennes et parasitaires Potentiellement mortelles Il a été estimée
qu'environ 40% (13 million d'unités) de sang donné dans les pays en développement ne font
pas l'objet d'un dépistage de principales infections transmissibles par le sang (Allain JP et al
2014). Tandis que des efforts considérables ont été réalisés ces dernières années pour la
réduction du risque de transmission des maladies qu'on ne sait pas encore soigner comme
l'hépatite B, l'hépatite C, le SIDA, on s'inquiète peu des maladies infectieuses curables comme
le paludisme. Le paludisme transfusionnel est une réalité en Afrique Central, en raison de son
endémicité et des transfusions sanguines peu ou non contrôlées et où les donneurs sont en
majorité potentiellement porteurs (asymptomatiques) d'hématozoaires. En zone d'endémie, la
prévalence des donneurs de sang impaludés varie selon les régions et peut aller jusqu'à 55%,
ce qui traduit un risque potentiel de transmission du parasite par cette voie (Noubouossié D et
al 2017). Au Cameroun en général et dans la ville de Foumban en particulier, peu de données
sont disponibles sur le risque de paludisme transfusionnel. C'est dans ce cadre que la présente
étude se propose de déterminer la prévalence du portage asymptomatique du plasmodium
chez les donneurs bénévoles de sang à Foumban
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I-3 LA PROBLEMATIQUE
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Eviter toute éventuelle transfusion sanguine avec le sang d’un donneur porteur
asymptomatique du plasmodium en posant un diagnostic par la méthode de la goute épaisse et
le frottis mince colorés au Giemsa.
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Cette étude a pour but de décrire la prévalence du paludisme chez les donneurs de sang afin
de contribuer pour la prévention du paludisme transfusionnel, mettre un accent sur le
diagnostic du paludisme pré-transfusion dans les banques de sang
Par cette étude, nous voulons apporter notre modeste contribution dans l’élimination du
paludisme transfusionnel
Du point de vue social, cette étude permettra d’éliminer toute transmission du paludisme due
à une transfusion sanguine d’un donneur asymptomatique du paludisme à un receveur
vulnérable de sang. Diminuer les dépenses chez le receveur suite à un éventuel traitement
contre le paludisme.
I-6-3-Intérêt personnel
Cette étude nous permettra d’abord d’approfondir nos connaissances sur le paludisme et
ensuite, elle nous aidera à obtenir notre diplôme de technicien principal medico-sanitaire en
analyses médicales.
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CHAPITRE II
REVUE DE LITTERATURE
REVUE DE LA LITTERATURE
Dans cette partie, nous allons faire ressortir une revue de la littérature en passant par l’étude
du paludisme, son cycle évolutif, sa physiopathologie, son diagnostic et son épidémiologie.
LE PALUDISME
Le cycle se déroule successivement chez l’homme (phase asexuée chez l’hôte intermédiaire)
et chez l’anophèle (phase sexuée chez l’hôte définitif). Chez l’homme le cycle est lui-même
divisé en 2 phases : la phase hépatique ou pré-érythrocytaire (= exo-érythrocytaire) : elle
correspond à la phase d’incubation, cliniquement asymptomatique. - la phase sanguine ou
érythrocytaire : elle correspond à la phase clinique de la maladie.
Chez l'homme
● Schizogonie pré-érythrocytaire
Les sporozoïtes inoculés par l’anophèle femelle lors de son repas sanguin restent pendant une
trentaine de minutes maximum dans la peau, la lymphe et le sang. Beaucoup sont détruits par
les macrophages mais certains parviennent à gagner les hépatocytes. Ils se transforment en
schizontes pré-érythrocytaires ou « corps bleus » (formes multinucléées) qui, après 7 à 15
jours de maturation, éclatent et libèrent des milliers de mérozoïtes dans le sang (10 000 à 30
000 mérozoïtes en fonction des espèces). La schizogonie hépatique est unique dans le cycle,
la cellule hépatique ne pouvant être infectée que par des sporozoïtes. Dans les infections à P.
vivax et P. ovale, certains sporozoïtes intra-hépatiques restent quiescent (hypnozoïtes) et sont
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responsables d’une schizogonie hépatique retardée, qui entraîne la libération dans le sang de
mérozoïtes plusieurs mois après la piqûre du moustique, expliquant ainsi les reviviscences
tardives observées avec ces deux espèces. Les hypnozoïtes n’existent pas dans l’infection à P.
falciparum (pas de rechute) et ils n’ont pas été mis en évidence non plus dans l’infection à P.
malariae, malgré l’existence de rechutes tardives, ni-semble-t-il pour P. knowlesi.
● Schizogonie érythrocytaire
Très rapidement les mérozoïtes pénètrent dans les globules rouges. La pénétration du
mérozoïte dans l’érythrocyte et sa maturation en trophozoïte puis en schizonte prend 24, 48
ou 72 heures (en fonction de l’espèce) et conduit à la destruction du globule rouge hôte et à la
libération de 8 à 32 nouveaux mérozoïtes. Ces mérozoïtes pénètrent dans de nouveaux
globules rouges et débutent un nouveau cycle de réplication. Cette partie du cycle correspond
à la phase clinique : la parasitémie s’élève, le sujet devient fébrile, c’est l’accès palustre. En
l’absence de traitement, tous les parasites évoluent progressivement au même rythme (on dit
qu’ils deviennent synchrones), tous les schizontes érythrocytaires arrivent à maturation au
même moment, entraînant la destruction d’un grand nombre de globules rouges de manière
périodique, toutes les 24 heures (pour P. knowlesi), 48 heures (fièvre tierce de P. falciparum,
P. vivax ou P. ovale) ou toutes les 72 heures (fièvre quarte de P. malariae). En pratique on
observe que la fièvre de tierce due à P. falciparum est rarement synchrone. Après un certain
nombre de cycles érythrocytaires, certains mérozoïtes subissent une maturation d’une dizaine
de jours, accompagnée d’une différenciation sexuée : ils se transforment en gamétocytes à
potentiel mâle ou femelle, qui vont rester en circulation dans le sang pendant 10 à 15 jours.
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Les gamétocytes, ingérés par le moustique lors d’un repas sanguin sur un sujet infecté, se
transforment en gamètes mâles et femelles qui fusionnent en un œuf libre, mobile appelé
ookinète. Cet ookinète quitte la lumière du tube digestif, se fixe ensuite au paroir externe de
l’estomac et se transforme en oocyste. Les cellules parasitaires se multiplient à l’intérieur de
cet oocyste, produisant des centaines de sporozoïtes qui migrent ensuite vers les glandes
salivaires du moustique. Ces sporozoïtes sont les formes infectantes prêtes à être inoculées
avec la salive du moustique, lors d’un repas sanguin sur un hôte vertébré. La durée du
développement sporogonique des Plasmodium varie en fonction des conditions climatiques :
entre 9 et 20 jours pour P. falciparum (entre, respectivement, 30°C et 20°C), un peu plus
rapide pour P. vivax à températures équivalentes, plus long pour P. malariae.
intermédiaire [5]
III. PHYSIOPATHOLOGIE
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Le sang
La rate
Le foie
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VI. DIAGNOSTIQUE
Signes d'orientation
Orientation clinique
1) « Toute fièvre au retour d’une zone d’endémie est un paludisme jusqu’à preuve du
contraire »
2) Face à une suspicion d’accès palustre il convient de rechercher immédiatement des signes
cliniques de gravité, notamment neurologiques. La présence d’un signe neurologique, quel
qu’il soit, impose l’hospitalisation en urgence du malade.
Orientation biologique
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variable, mais parfois sévère (< 50 000 / mm3). C’est un très bon signe d’orientation mais sa
valeur pronostique est encore controversée.
● Anémie : une anémie hémolytique est un bon signe d’orientation mais elle peut manquer,
surtout au début d’un accès de primoinvasion. L’anémie sera plus souvent présente chez un
sujet présentant des accès de reviviscence.
C’est un diagnostic d’urgence qui repose sur la mise en évidence des formes érythrocytaires
de Plasmodium sur un prélèvement de sang périphérique. Le résultat doit être obtenu dans
un délai maximal de 2 heures avec un contact direct entre le médecin prescripteur et le
biologiste.
Le prélèvement
Le plus simple est de recueillir, sur une lame porte-objet de microscope, une ou deux gouttes
de sang par piqûre au doigt (face latérale de l’annulaire), au lobe de l’oreille ou au talon (chez
l’enfant) et de confectionner immédiatement les étalements (frottis minces et/ou goutte
épaisse).
Techniques de référence
Goutte épaisse
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Frottis mince
La lame est colorée selon la méthode de May-Grünwald-Giemsa ou par du Giemsa après
fixation à l’alcool. Les parasites, colorés en rouge (noyau) et bleu (cytoplasme) sont retrouvés
à l’intérieur des globules rouges (pas d’hémolyse dans cette technique). Le diagnostic positif
et le diagnostic d’espèce s’en trouvent facilités. Par contre la quantité de sang examinée est
plus faible que sur une goutte épaisse et cette méthode peut être mise en défaut en cas de
parasitémie faible (sensibilité théorique 20 à 30 fois moindre qu’avec la goutte épaisse). Les
recommandations de la conférence de consensus de 2007, demandent d’associer frottis mince
et goutte épaisse.
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Figure (11) Frottis de sang. Plasmodium ovale. Schizonte (MGG x1000) [5]
Figure (12) Frottis de sang. Plasmodium vivax. Trophozoïtes et gamétocytes (MGG x1000) [5]
Figure (13) Frottis de sang. Plasmodium malariae. Schizonte en plaque équatoriale (MGG x1000) [5]
Autres techniques
La sérologie n’est d’aucun apport pour le diagnostic d’urgence de l’accès palustre ; une
sérologie positive signe uniquement un contact préalable avec le parasite. Les indications de
la sérologie sont :
– le diagnostic rétrospectif d’un accès palustre (par exemple, patient traité en zone
d’endémie sans argument biologique de certitude) ;
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A. Immunité naturelle
Bien qu’encore imparfaitement connus, il existe très probablement des facteurs génétiques
conférant à certains sujets une immunité naturelle, au moins partielle. On évoque des facteurs
érythrocytaires : trait drépanocytaire (sujet hétérozygote AS), groupe sanguin Duffy négatif,
et des facteurs non érythrocytaires : groupe HLA, polymorphisme de la réponse immune,
facteurs ethniques …
B. Immunité acquise
Elle joue incontestablement un rôle essentiel dans le paludisme. Cette immunité s’acquiert
progressivement en situation d’exposition continue. Cette immunité n’est pas stérilisante
(elle n’empêche pas d’être de nouveau contaminé) et ne permet pas de se débarrasser
totalement du parasite. En revanche elle empêche progressivement la survenue de formes
cliniques graves. Cela explique que, en zone de transmission intense, les jeunes enfants
payent le plus lourd tribut à la maladie, à partir de l’âge de 4 à 6 mois lorsque la protection
maternelle transmise s’amenuise et jusqu’à 4 à 6 ans. Progressivement le risque d’accès grave
diminue alors que le sujet tolère des parasitémies de plus en plus importantes tout en restant
cliniquement asymptomatique. En zone de transmission intense il est exceptionnel qu’un sujet
adulte fasse un accès grave.
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Cette immunité est donc « non stérilisante », fonction de l’espèce, et ne se développe qu’après
une longue période d’exposition ininterrompue. Elle est transmissible (nouveau-nés). En
revanche elle n’est jamais totale et jamais définitive. Un sujet transplanté en zone tempérée
pendant 2 ou 3 ans perd progressivement sa protection. Lorsqu’il retourne dans son pays, il est
redevenu vulnérable, au même titre un sujet « neuf » récemment arrivé en zone d’endémie.
Cette situation est fréquemment observée dans les hôpitaux français où, chaque année, de
nombreux accès palustres sont diagnostiqués chez des sujets africains, vivant en France
depuis plusieurs années, et qui sont retournés dans leur pays pour des vacances.
En raison des caractéristiques de cette protection, on utilise plus volontiers le terme d’état de
prémunition plutôt que d’immunité. Bien évidemment un sujet n’ayant jamais vécu en zone
d’endémie (voyageur, expatrié récent) est totalement exposé au risque de paludisme grave,
quel que soit son âge.
Indices paludométriques
Ces indices sont les outils qui permettent aux épidémiologistes d'évaluer, dans une région
donnée, le niveau de l'endémie palustre.
CHAPITRE III
Le troisième chapitre de notre travail est celui qui nous fait rentrer dans le cadre concret de
notre étude. Il sera subdivisé en trois sous-parties. Nous commencerons tout d’abord par
présenter la zone d’étude, puis nous présenterons l’approche méthodologique et enfin nous
démontrerons l’opérationnalisation de notre sujet à travers les variables que nous comptons
mobiliser dans nos hypothèses de recherche.
I- LIEU DE L’ETUDE
I-1 Choix et justification du lieu d’étude.
Ils sont parmi les centres qui consultent plus dans le département du Noun.
Ils répondent aux critères de choix de notre étude de part leur plateau technique
(existence d’une banque de sang).
Ils disposent d’un personnel qualifié et disponible pour une meilleure prise en charge.
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HISTORIQUE
HISTORIQUE
L’HÔPITAL PROTESTANT DE NJISSE (HPN) voit le jour comme case de santé en 1906
par Mme GOHRING, Allemande, sagefemme et épouse du pasteur GOHRING. Il devient par
la suite hôpital en1926 par le docteur DEBARGE de nationalité Française. Il en suivra une
multitude de médecin avec des nationalités différentes .il est actuellement sur la direction de
Dr SIMO SIMO ARMAND MOISE.
Il s’agira d’une étude quantitative transversale descriptive à visée analytique. En réalité, elle
consistera à définir ou encore déterminer la prévalence des hemoparasites transfusionnels cas
particulier du Plasmodium chez les donneurs de sang au laboratoire de l’hôpital de district de
Foumban et l’hôpital protestant de Njissé par Foumban.
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Quantitative car les répondants seront quantifiés pour pouvoir faciliter l’évaluation
du taux de risque de l’infestation du paludisme liée à une transfusion sanguine.
Descriptive car elle permettra de décrire un état de santé chez les personnes venues
pour un don de sang pensant qu’elles sont saintes.
Transversale parce que l’étude sera faite dans une courte durée et de façon continue
Analytique car nous allons réaliser des analyses sur l’échantillons des donneurs avant
de déterminer la prévalence.
La population cible de notre étude sera tout donneur de sang retenu ou prêt à donner son sang
a un patient anémié et également le sang déjà prélevé et conservé dans la banque de sang pour
secourir les patients en cas de manque d’un donneur.
Seront inclus dans notre étude les donneurs qui rempliront les conditions sous citées.
Avoir au moins 18 ans pour les filles et 16 ans pour les garçons
Etre de sérologie (VIH, HEPATITE VIRALE B & C, SIPHYLICE…) négative
Avoir gun taux d’hémoglobine inférieur ou égal à 12 pour les femmes et 13 pour les
hommes
Avoir passé au minimum 2 mois après le dernier don de sang pour les hommes et 3
mois pour les femmes
Etc…
Ne seront pas inclus dans notre étude, les donneurs qui ne rempliront pas tous les critères sur-
citées
Dans notre étude, seront exclus les donneurs qui au cours de notre étude ne respecteront pas a
la lettre les critères sur-citées
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Notre technique d’échantillonnage sera celle non probabiliste de convenance qui consistera à
prélever le sang chez tous les donneurs de sang.
Pour réaliser cette collecte de données, nous nous munirons de l’autorisation de collecte que
nous obtiendrons du délégué régional de la santé publique de L’ouest. Dans nos
investigations, nous présenterons et expliquerons à chaque répondante le but de notre travail
avant la distribution du guide d’entretien.
Pour réaliser cette collecte, les données seront recueillies à l’aide d’un guide d’entretien
préalablement établi qui comportera trois sections à savoir :
Section 1 : caractéristique sociodémographique du donneur.
Section 2 : connaissances du donneur sur son état de santé.
Section 3 : facteurs favorisants l’infestation au paludisme.
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- Le garrot
- Tube EDTA
- Sparadrap
- Gants
- Les lame
- Le Giemsa
- L’alcool
Methode de prélèvement
- Une fois que les matériels soient préparés, nous allons choisir le site de prélèvements
la veine au pli du coude.
- Désinfecter le site de prélèvements avec un coton imbibé d’alcool à 700 ayant placé le
garrot au préalable.
- En utilisant une seringue, nous prélèverons dans la veine la plus présentée une quantité
de sang suffisante pour notre analyse.
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Pendant l’enquête sur le terrain, les sujets ne seront approchés que lorsqu’ils seront disposés à
l’entretien.
Après l’enquête de terrain, les données recueillies feront l’objet d’une analyse et la
publication des résultats ne seront exploités qu’à des fins académiques et sociales.
CONCLUSION
Notre étude intitulée : « prévalence du paludisme transfusionnel chez les donneurs de sang à
la banque de sang de l’hôpital de district de Foumban et l’hôpital protestant de Njisse-
Foumban » nous permettra premièrement de définir le taux de risques d’infestation du
paludisme auxquels sont exposés les patients receveurs de sang internés dans ces hôpitaux et
secondairement de mettre en exergue l’importance de ce diagnostic pré-transfusionnel chez
les donneurs de sang pour diminuer le nombre de cas du paludisme dans cette circonférence.
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REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
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2. Lee HH, Allain JP. Improving blood safety in resource-poor settings. Vox Sanguinis. 2014
; 87 (Suppl. 2) : S176-S179. PubMed | Google Scholar]
4. www.cameroon-tribune.cm]
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6. imagesante.net
7. (http://www.invs.sante.fr/beh)
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1) AGE___________. 2) SEXE : M F
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