Rapport de Stage 2e Année TS-CI

DOSAGE DE LA CAFEINE DU GARCINIA KOLA PAR SPECTROPHOTOMETRIE
DEDICACE
A ma famille et à mon pays la Côte d’Ivoire
RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 i

REMERCIEMENTS
Ce présent rapport constitut l’ensemble des travaux relatifs au stage effectué au sein du Laboratoire
des Procédés Industriels de Synthèse, de l’Environnement et des Energies Nouvelles (LAPISEN).
Nous voulons exprimer notre reconnaissance à l’égard de tous ceux qui ont contribués de près ou
de loin à l’acquisition du stage ainsi qu’à son bon déroulement.
Nous tenons à remercier particulièrement :
- Pr. ADIMA Amissa Augustin maitre de stage, encadreur pédagogique et directeur du

département Génie Chimique Agro-alimentaire (GCAA) qui a bien voulu nous accorder
le stage au LAPISEN ;
- Dr.Ing KONE Kouwelton pour ses conseils qui nous ont permis de nous organiser pour
la rédaction de ce rapport dans le temps imparti ;
- Dr. SORO pour sa disponibilité, sa simplicité et ses conseils pour la cohérence dans la
rédaction de ce rapport ;
Nous voulons aussi remercier :
- M. KOFFI N’Guessan, Directeur Général de l’Institut National Polytechnique Félix

Houphouët Boigny (INP-HB) pour son bon sens du leadership et du travail qui permet à
cet institut d’être de plus en plus moderne et d’acquérir le matériel nécessaire pour la
bonne formation de ses étudiants ;
- Pr. TANOH Aka, Directeur de l’Ecole Supérieur d’Industrie (ESI) pour les moyens qu’il
offre afin que ses étudiants soient bien formés ;
- Dr. FANOU Didier, Directeur d’étude de la filière génie chimique pour sa signature nous
ayant permis avoir un logement au sein de la cité centre de l’INP-HB pour effectuer notre
stage ;
- Mme. ADJOUMANI, chef de de la cité centre de l’INPHB qui nous a attribué une chambre
située dans un cadre paisible pour le bon déroulement du stage.
RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 ii

AVANT-PROPOS
L’Institut National Polytechnique Félix HOUPHOUËT BOIGNY (INP-HB) est issu de la

restructuration, par décret présidentiel N° 96-678 du 4 Septembre 1996 des quatre prestigieuses
grandes écoles : l’Ecole Nationale Supérieure des Travaux Publics (ENSTP), l’Institut National
Supérieur de l’Enseignement Technique (INSET), l’Ecole Nationale Supérieure d’Agronomie
(ENSA) et l’Institut Agricole de Bouaké (IAB) en vue d’améliorer la gestion de celles-ci. De cette
restructuration, sont nées six grandes écoles qui constituent l’INP-HB actuel . Ce sont :
• l’Ecole Supérieure d’Industrie (ESI);

• l’Ecole Supérieure d’Agronomie (ESA);
• l’Ecole de Formation Continue et de Perfectionnement des Cadres (EFCPC) ;
• l’Ecole Supérieure de Commerce et d’Administration des Entreprises (ESCAE) ;
• l’Ecole Supérieure des Mines et de Géologie (ESMG) ;
• l’Ecole Supérieure des Travaux Publics (ESTP);
L’Ecole Supérieure d’Industrie dont nous sommes issus, compte deux cycles de formation : un
cycle long d’une période de cinq ans pour les ingénieurs et un cycle court qui propose, après trois
années de formation, des Techniciens Supérieurs aux entreprises. Leurs responsabilités dans le
secteur industriel témoignent de leur excellente formation qui se couronne par un stage d’initiation
à partir de la première année d’étude, un stage découverte pour le renforcement des connaissances
et du savoir-faire pratique acquis depuis la première année d’étude et en fin un stage de fin de cycle.
Les deux premiers stages sont sanctionnés par la rédaction d’un rapport de stage et le dernier stage
par un mémoire de fin de cycle : tous ces stages sont à soutenir devant un jury. Dans le cadre du
renforcement de notre connaissance et savoir-faire pratique, nous avons effectué un stage de deux
mois du 14 Août au 14 Octobre 2020 au sein du Laboratoire des Procédés Industriels de Synthèse,
de l’Environnement et des Energies Nouvelles (LAPISEN) sur le thème : Dosage de la caféine du
Garcinia kola par spectrophotométrie.
RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 iii

LISTE DES ILLUSTRATIONS

LISTE DES FIGURES
Figure 1 : Les différents groups du LAPISEN et leurs directeurs ................................................... 4

Figure 2 : Petits cola ayants atteint la maturation ........................................................................... 7
Figure 3: Formule chimique développée de la caféine ................................................................. 11
Figure 4: Aspect physique de la caféine ....................................................................................... 11
Figure 5: Principaux organes influencés par la consommation de la caféine ............................... 13
Figure 6: Effets secondaire due à une surdose en caféine ............................................................. 14
Figure 7 : Gamme d’étalons et échantillon à doser ....................................................................... 23
Figure 8 : Vortex utilisé pour les homogénéisations ..................................................................... 23
Figure 9: Extrait solide caféine obtenu après extraction ............................................................... 25
Figure 10 : Droite d’étalonnage de la caféine obtenue avec Excel 365 ........................................ 26
LISTE DES TABLEAUX

Tableau 1 : Composition approximative du Garcinia kola ............................................................ 8
Tableau 2: Analyse quantitative des composés phytochimiques .................................................... 8
Tableau 3 : Analyse quantitative des composés anti-nutritifs ........................................................ 9
Tableau 4: Teneur en caféine permise par Santé Canada pour les boissons énergisantes ............ 16
Tableau 5: Limites recommandées de l'apport quotidien en caféine chez la population en bonne
santé ................................................................................................................................................ 17
Tableau 6: Tableau de de remplissage des tubes de la gamme d’étalons ..................................... 22
Tableau 7: Valeurs des absorbances obtenues en fonction de la concentration en caféine de chaque
tube ................................................................................................................................................. 26
Tableau 8: Quantité maximal de G. kola à utiliser comme source de caféine pour la production de
boissons énergisantes ou gazeuses en fonction des normes de santé canada ................................. 29
Tableau 9: Equivalence de G. kola en fonction de la teneur maximale de caféine
recommandée/jour en fonction des normes de santé canada .......................................................... 30
RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 iv

RESUME
La caféine est une substance psychoactive légalement consommée dans le monde. Il

existe même de nombreux aliments et boissons qui en contiennent et jouent un rôle important dans
certaines cérémonies africaines. Bien que cette substance puisse produire un effet stimulant
recherché, elle a aussi des effets négatifs sur l’organisme. Même lors d'une consommation modérée
de caféine, certaines personnes peuvent ressentir des effets désagréables tels que : maux de tête,
palpitations, agitation, irritabilité, nervosité, tremblements et troubles gastro-intestinaux.
L’objectifs visé par la présente étude est de doser la caféine de Garcinia kola aussi appelé petit
cola par spectrophotométrie en vue d’établir une règlementation de sa consommation au cas où sa
teneur en caféine est élevée. Ainsi par cette règlementation il sera plus facile d’éviter des
intoxications dues à la caféine ou d’en être conscient. Pour la réalisation effective de cette tâche,
nous avons extrait la caféine solide contenue dans notre extrait liquide de Garcinia kola. A partir
des cristaux de caféine extraite nous avons préparé l’échantillon à doser. Nous avons par la suite,
à partir de standard de caféine pur à 99% préparé une série de solution de caféine de concentration
décroissante. L’absorbance de chaque solution a été mesurée au spectrophotomètre à 274nm pour
obtenir la droite d’étalonnage dont l’équation de régression est du type A = f (C). Pour finir, la
teneur en caféine du petit cola été déterminée en fonction de l’équation de régression après avoir
lue son absorbance. Le dosage effectué nous permet d’affirmer que les 4,75g dosés de Garcinia
kola contiennent 0,392mg de caféine. La teneur en caféine du Garcinia kola est donc de
82,52mg/Kg . Nous pouvons donc dire que la toxicité du petit cola est quasi nulle ou presque
inexistante donc il n’y a pas nécessité d’établir un règlement de sa consommation. Cependant il est
toujours important d’éviter tout abus de consommation car il pourrait avoir d’autres composés
capables d’induire des effets indésirables chez le consommateur.
Mots clé : Garcinia kola, caféine, spectrophotométrie, gamme d’étalons
RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 v

SOMMAIRE
DEDICACE......................................................................................................................................i
REMERCIEMENTS ..................................................................................................................... ii
AVANT-PROPOS ........................................................................................................................ iii
LISTE DES ILLUSTRATIONS ..................................................................................................iv
LISTE DES FIGURES..................................................................................................................iv
RESUME ......................................................................................................................................... v
INTRODUCTION GENERALE .................................................................................................. 2
PREMIERE PARTIE: GENERALITES ..................................................................................... 3
I. PRESENTATION DU LAPISEN ......................................................................................... 4
II. PROBLEMATIQUE ......................................................................................................... 5
III. PRESENTATION DE GARCINIA KOLA ......................................................................... 7
IV. GENERALITE SUR LA CAFEINE ............................................................................... 10
DEUXIEME PARTIE : MATERIEL ET METHODES .......................................................... 19
I. MATERIEL ......................................................................................................................... 20
II. METHODES ................................................................................................................... 21
TROISIEME PARTIE : RESULTATS ET DISCUSSION ...................................................... 24
I. CAFEINE OBTENUE APRES EXTRACTION ................................................................ 25
II. DETERMINATION DE LA TENEUR EN CAFEINE ET RENDEMENT

D’EXTRACTION ...................................................................................................................... 25
CONCLUSION GENERALE ..................................................................................................... 32
BIBLIOGRAPHIE ....................................................................................................................... 33
WEBOGRAPHIE ......................................................................................................................... 36
ANNEXES ....................................................................................................................................... I
RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 1

INTRODUCTION GENERALE
La noix de cola est une matière brute économiquement importante à la fois pour le secteur
informel et certains gouvernements dans l’Afrique de l’Ouest et dans l’Afrique Centrale. Des
études ont révélé que la noix de cola contient substantiellement une large proportion de composés
actifs tels que les polyphénols (en particuliers les flavonoïdes) et la caféine[0]. En effet la caféine
est un alcaloïde faisant partie des substances naturelles pharmacologiquement actives les plus
consommées dans le monde, principalement sous forme de boissons (thé, café et boissons à base
de Cola). Elle est essentiellement reconnue pour ses effets stimulants sur le système nerveux
central. Cependant, comme la plupart des substances actives, la caféine présente des effets
indésirables (augmentation de la diurèse, troubles du sommeil, excitation, ...) lorsqu’elle est
consommée à une certaine quantité et est potentiellement nuisibles à la santé humaine.
Dans les pays Africains, 90% des noix de cola seraient apparemment consommées directement en
la bouche. Compte tenu de leurs propriétés physiologiques et thérapeutiques, une infime partie est
utilisée dans l’industrie textile, pharmaceutique et agroalimentaire. Ce pourcentage de
consommation directe indique qu’il est nécessaire de connaitre la teneur en caféine dans la noix de
cola vu que cette substance n’est pas sans effets sur l’organisme car les noix de cola en contiennent.
Ainsi le résultat de ce dosage nous permettra de connaitre la toxicité de ce fruit sauvage en termes
de caféine et d’établir des recommandations si besoin y est.
C’est donc pour cette raison que nous avons reçu pour thème de stage : Dosage de la caféine du
Garcinia kola par spectrophotométrie. Pour atteindre cet objectif nous aurons tout d’abord à
préparer l’échantillon de petit cola afin d’y extraire la caféine. Nous déterminerons par la suite la
droite d’étalonnage à partir de standard de caféine pur à 99% et nous déterminerons la teneur de
caféine dans l’échantillon pour finir.
La rédaction de ce présent rapport de stage, a été scindé en trois grandes parties. La première partie fait
part des généralités ; la deuxième partie présente le matériel et les méthodes utilisées pour effectuer les
manipulations et enfin, la troisième partie met en exergue les résultats obtenus et la discussion qui en
découle.

PREMIERE PARTIE
--GENERALITES--
PREMIERE PARTIE: GENERALITES

I. PRESENTATION DU LAPISEN
I.1. Historique
Spécialisé dans le domaine des sciences de l’ingénieur, le LAPISEN a été créé en 1994 et est
actuellement sous la direction du Professeur YAO K. Benjamin .Les activités de recherche de ce
laboratoire sont axées principalement sur l’élaboration des solutions aux problèmes des industries
et la dispensation de connaissances académique.
I.2. Organisation
L’organisation du LAPISEN est fondée sur l’existence de quatre principaux groupes dont le :
• GPE : Groupe des Procédés et Environnement ;

• GNTA-BM : Groupe de Nutrition et Technologie Alimentaire et Biochimie Microbiologie;
• GENR : Groupe Energies Nouvelles et Renouvelables ;
• GCESNA : Groupe Chimie de l’Eau et Substance Naturelle.
DIRECTEUR DU LAPISEN
Prof. YAO K. Benjamin
Groupe des Groupe de Groupe Energies Groupe Chimie

Procédés et Nutrition et Nouvelles et de l’Eau et
Environnement Technologie Renouvelables Substance
Alimentaire et Naturelle
(GPE) Biochimie (GENR)
Microbiologie (GCESNA)
Prof. ADOUBY Prof. GBAHA
Kopoin (GNTA-BM) Prosper Prof. ADIMA
Amissa Augustin
Prof. ASSIDJO
E.
Figure 1 : Les différents groups du LAPISEN et leurs directeurs

I.3. Mission et activités du LAPISEN

Le LAPISEN a comme mission l’application pratique des recherches finalisées dans le but de
fournir aux décideurs gouvernementaux et industriels, des outils indispensables au développement.
Ainsi ce laboratoire dirige des activités d’intérêt communautaire tout en étant en partenariat avec
des organismes nationaux et internationaux spécialisés dans les domaines tels que la gestion des
ressources en eau, l’amélioration des techniques de conservation des aliments, la gestion des problèmes
liés à l’environnement et à l’énergie et la résolution des problèmes de santé humaine . Le LAPISEN se
propose par ailleurs de mener des travaux d’intérêt industriel en partenariat avec les industries
chimique et alimentaire en vue de l’amélioration des procédés mis en œuvre et d’apporter son
expertise pour la résolution des problèmes liés à l’environnement industriel.
II. PROBLEMATIQUE
Dans cette partie de la rédaction nous présenterons le contexte dans lequel s’inscrit le thème de ce
stage, le cahier de charges, les objectifs visés ainsi que la méthodologie de travail.
II.1. Contexte du problème

L’étude que nous menons sur le Garcinia kola est réalisée dans le cadre de la quantification de la
caféine contenue dans celui-ci. Cette quantification permettra d’évaluer la toxicité du Garcinia
kola en termes de caféine de donner des recommandations sur la consommation de Garcinia kola
si cela est nécessaire.
II.2. Cahier de charges

Afin de mener à bien notre étude nous réaliserons les tâches ci-dessous :
• Effectuer une bibliographie sur le Garcinia kola

• Effectuer une bibliographie sur la caféine
• Effectuer une bibliographie sur les techniques d’analyse de la caféine.
• Extraire la caféine contenue dans notre échantillon de Garcinia kola
• Doser cette caféine par spectrophotométrie à 274nm

II.3. Objectif visé

A travers le stage que nous effectuons, nous avons un objectif général précisant clairement ce à
quoi nous nous attendons à la fin de ce projet et des activités à réaliser pour atteindre l’objectif
spécifique.
I.3.1. Objectif spécifique

• Quantification de la teneur de caféine dans le petit cola par spectrophotométrie.
I.3.2. Activités à réaliser

• Préparation de l’échantillon de petit cola
• Extraction de caféine contenue dans l’échantillon de petit cola
• Préparation des tubes de la gamme d’étalons à partir de standard de caféine pur à 99%
• Détermination de la droite d’étalonnage en fonction de l’absorbance et la concentration de
chaque tube de la gamme d’étalons à partir de Excel 365
• Détermination de la teneur en caféine contenu dans l’échantillon à partir de la droite
d’étalonnage.
I.3.3. Méthode de travail

Pour l’atteinte effective de notre objectif nous suivrons en ordre les étapes ci-dessous :
1. Recherches bibliographiques du cahier de charge.

2. Réalisation des manipulations au laboratoire (Extraction de la caféine du Garcinia kola,
préparation des solutions de la gamme étalon, dosage de la caféine contenue dans
l’échantillon par spectrophotométrie).
3. Rédaction du rapport de stage.

III. PRESENTATION DE GARCINIA KOLA

Le Garcinia kola connu sous l'appellation vernaculaire « petit cola» est aussi appelé Bitter kola du
fait de son goût amer. Le genre Garcinia doit son appellation à Laurence Garein, botaniste français
du 18e siècle, qui l'a décrit pour la première fois [1]. C’est une espèce de plantes à fleurs dans la
famille Clusiaceae ou Guttiferae originaire des forêts tropicales du monde et comportant environ
40 genres et 1200 espèces dont 16 espèces en Afrique Centrale et quelques espèces signalées en
Afrique de l'Ouest, Orientale et Australe. On note 200 espèces sous les tropiques [2] . Son habitat
naturel est la forêt humide de basse altitude subtropicale ou tropicale. En dépit de son importance
socio-économique, la culture de Garcinia kola est très limitée. Les difficultés rencontrées dans la
germination réduisent la disponibilité des plantes dans les pépinières agroforestières. La plupart
des arbres en production sont ceux qui ont été laissés dans les parcelles agricoles.
Noix du petit cola

Couverture externe ou protectrice
Figure 2 : Petits cola ayants atteint la maturation
III.1. Composition de la noix Garcinia kola

L’analyse approximative, aussi appelé analyse de weende est une méthode chimique permettant
d’avoir accès et d’exprimer la valeur nutritionnelle d’un aliment. Cette analyse prend en compte
six paramètres dont : l’humidité, la cendre (les minéraux), la fibre brute, la matière grasse brute et
la protéine brute (azote total) contenues dans l’échantillon en pourcentage d’échantillon sec. Le
taux d’hydrocarbure est déterminé par soustraction des six paramètres ci-dessus dans 100%
d’échantillon sec.

Tableau 1 : Composition approximative du Garcinia kola
Paramètres (%)
Humidité 7,2±0,08
Protéine brute 1,86±0,15
Fibre brute 1,23±0,15
Cendre 0,47±0,09
Matière grasse brute 0,19±0,32
Taux d’hydrocarbure 88,30±0,08
Source : Advance Journal of Food Science and Technology (February 2012) [3]
En plus des éléments du Tableau 1, le Garcinia kola est constitué des composés phytochimiques
et anti-nutritifs (Tableau 2 et 3).
Tableau 2: Analyse quantitative des composés phytochimiques
Paramètres (g/100g)
Phénols 0,147±0,00
Saponines 2,471±0,00
Alcaloïdes 0,647±0,20
Flavonoïdes 2,041±0,30
Glycosides 3,421±0,00
Selon la littérature la teneur en caféine du Garcinia kola est de 80.08±2.91/Kg. Quant aux autres
colas tels que le Cola nitida blanc, le Cola nitida rouge et le Cola nitida violet, elles ont des teneurs
respectives de : 10678.38±2.03/Kg ; 10812.48±6.27/Kg ; 7129.66±3.06/Kg [4] .

Tableau 3 : Analyse quantitative des composés anti-nutritifs
Paramètres (g/100g)
Tannins 0,342±0,00
Oxalates 0,423±0,00
Phytates 0,570±0,05
Inhibiteur de trypsine 0,370±0,12
III.2. Propriétés pharmacologiques du Garcinia kola
Garcinia kola est une plante utilisée pour ces nombreuses vertus thérapeutiques. Les différentes
parties de la plante (feuilles, graines, écorces, racines) sont utilisées et présentent un grand intérêt
sur le plan médicinal [5]. Garcinia kola est une plante médicinale contenant de nombreux
composés chimiques et ayant des vertus thérapeutiques très importantes. Les phytocomposés que
cette plante renferme possèdent plusieurs propriétés, notamment des activités antioxydantes qui
protègent les cellules des dommages oxydatifs afin de réduire le développement de certains types
de cancer. La présence de composés tels que les flavonoïdes dans la noix de Garcinia kola lui
confère des propriétés antimicrobiennes, antifongique et anti-hépatite [6] .Ces propriétés
permettent au Garcinia kola d’éliminer les microorganismes Gram (+) et Gram (-). Ils permettent
aussi de lutter contre les allergies, les radicaux libres et les hepatoxines [7] . Cette espèce de plante
est aussi utilisée pour le traitement de la diarrhée, du diabète et des maux de gorge [8]. Les graines
de Garcinia kola sont réputées pour Leurs propriétés aphrodisiaques .[9]La caféine que ces graines
contiennent fait d'elles un stimulant[5]. Les graines de Garcinia kola contiennent des substances
efficaces dans le traitement des ulcères [10]. Elles sont riches en hydroxyméthyle, anthraquinones,
phlobatannins, polyphénols, réducteurs, composés glucosides. Les extraits des graines sont utilisés
dans le traitement de la bronchite, des infections de la gorge, pour guérir les maux de tête ainsi que
la toux [11].

La mastication de deux graines par jour permet de lutter contre les troubles de l'érection sexuelle
masculine[12]. Aussi une décoction de l'écorce de Garcinia kola est utilisée pour induire
l'expulsion de fœtus mort et permet également de lutter contre la stérilité féminine [5].
IV. GENERALITE SUR LA CAFEINE
IV.1. Historique et principales sources de caféine
Les humains consomment la caféine depuis le paléolithique[13]. Les premiers peuples ont
découvert que le fait de mâcher les graines, l'écorce ou les racines de certaines plantes diminuait
provisoirement la fatigue, et stimulait la vigilance ou améliorait l'humeur. C'est bien plus tard qu'il
fut constaté que l'effet de la caféine augmentait en faisant tremper certains composants végétaux
séchés et/ou torréfiés et broyés dans l'eau chaude. La caféine a été découverte en 1819 par le
chimiste allemand Friedlieb Ferdinand Runge. En effet à cette date, ce chimiste a isolé pour la
première fois de la caféine relativement pure. Il la nomma « kaffein » en tant que composé
chimique du café, qui en français devint caféine[14]. Ferdinand Runge effectua cette nomenclature
à la demande du chimiste allemand Johann Wolfgang von Goethe[15]. La caféine est décrite par
Pierre Joseph Pelletier et Pierre-Jean Robiquet deux ans après sa découverte c’est-à-dire en 1821 .
En 1827, Oudry a isolé la théine du thé dont Gerardus Mulder et Jobat ont montré, en 1838, qu'il
s'agit de la même substance que la caféine[16]. La structure de la caféine a été élucidée vers la fin
du XIXe siècle par Hermann Emil Fischer qui a été également le premier à en réussir la synthèse
totale[17]. Fischer sera d'ailleurs récompensé par le Prix Nobel de chimie de 1902 en partie pour
ce travail. La caféine est présente dans les graines, les feuilles et les fruits de différentes plantes.
Des boissons très populaires contiennent de la caféine comme le café, le thé et le maté.
On en trouve également dans certains sodas et boissons énergisantes à base de la noix de kola, qui
en contient de grandes quantités.

IV.2. Caractéristiques physico-chimiques

La caféine ou 1,3,7-triméthylxanthine ou encore 1,3,7-triméthyl-1H-purine-2,6-dione (Figure 3),
de masse molaire M = 194,14g/mol a pour formule brute C8H10N4O2 et est une molécule de la
famille des méthylxanthines, qui comprend également la théophylline et la théobromine. Sous sa
forme pure, elle consiste en une poudre blanche d'un goût extrêmement amer (Figure 4) dont le
caractère aromatique est dû au fait que les atomes d'azote y sont essentiellement plans (dans
l'orbitale d'hybridation sp2). La caféine est modérément soluble dans l'eau et les solvants
organiques. À haute température, la solubilité de la caféine dans l'eau augmente. Elle est cependant
très solide dans les solvant organochlorés (comme le chloroforme, le dichlorométhane, …). La
caféine, stable dans les milieux relativement acide et basique, est une base faible et peut réagir avec
des acides pour donner des sels. Cependant, dans une solution aqueuse normale, elle n'est pas
ionisée. Dissoute, elle peut être présente sous forme de dimères ainsi que de polymères. La caféine
est une substance absorbant dans l'UV avec un maximum à la longueur d'onde de 274 nm. La
caféine n'est généralement pas synthétisée car elle est déjà disponible en grande quantité en tant
que sous-produit de la décaféination[18]. On peut cependant la synthétiser à partir du
diméthylurée et de l'acide malonique[19].
N N O
N
N
O
Figure 3: Formule chimique développée de la caféine
Figure 4: Aspect physique de la caféine

IV.3. Mode d’action et effets physiologiques

IV.3.1. Mode d’action de la caféine
La molécule de caféine agit sur le système nerveux d'une part comme la nicotine en traversant la
barrière qui sépare la circulation sanguine du cerveau du reste du corps appelée barrière hémato-
encéphalique et d'autre part sur le cœur[19]. Son action une fois à l'intérieur du cerveau est de
s'opposer à l'action des récepteurs à l'adénosine. L'adénosine est une substance qui joue un rôle
important dans la transmission du message hormonal, on parle alors d'AMP cyclique: Adénosine
monophosphate cyclique[19]. En effet, la caféine peut se fixer à ces récepteurs du fait qu'elle est
une structure moléculaire similaire à l'adénosine. Elle a donc un effet inhibiteur sur l'adénosine.
Cependant, l'action de l'ANP cyclique étant de supprimer l'activité neuronale en partie, la caféine
qui neutralise ces récepteurs a ainsi un effet désinhibiteur sur l'activité cérébrale[19]. Cette
augmentation de l'activité nerveuse provoque la libération d'adrénaline qui est une hormone. Ainsi,
les effets de l'adrénaline sont une accélération du rythme cardiaque et une augmentation de la
capacité qu'ont les myocytes (cellules musculaires du cœur) de contracter[19]. C'est pourquoi la
caféine parvient à accélérer notre rythme cardiaque. Cependant, certains de ces mécanismes sont
encore aujourd'hui méconnus. Il s'ensuit donc une augmentation de l'apport de sang aux muscles
de notre corps . (Figure 5 et 6).[19]
IV.3.2. Effets physiologiques de la caféine
Elle est consommée pour réduire la fatigue physique mais aussi pour améliorer la vigilance
lorsqu'un état de somnolence se fait ressentir. Grâce à ses effets sur le système nerveux central, elle
permet une meilleure coordination des mouvements du corps et possède en outre la capacité
d'augmenter le travail mental. [19]

Figure 5: Principaux organes influencés par la consommation de la caféine
Source : lesboissonsenergisantes.e-monsite.com [20]
De nombreuses expériences ont notamment fait apparaître des résultats spectaculaires, en effet, des
études sur des sportifs
Figure entraînés ont
5 : Principaux révéléinfluencés
organes que pour une dose
par la de 9 mg de caféine
consommation par kg de masse
de la caféine
corporelle il y avait une augmentation de 44% d'endurance et une augmentation d'environ 51%
d'endurance à vélo par rapports à des sujets témoins. [19]
Figure 5 : Principaux organes influencés par la consommation de la caféine
Figure 5 : Principaux organes influencés par la consommation de la caféine

Figure 6: Effets secondaire due à une surdose en caféine
Source : lesboissonsenergisantes.e-monsite.com [20]
IV.4. Technique d’analyse de la caféine

Les premières méthodes d’analyse
Figure 6 : Effetsdesecondaire
la caféinedue
dans les surdose
à une produitsenà caféine
base de café (méthodes de
Bailey-Andrew), étaient basées sur une détermination par gravimétrie ou sur un dosage de l’azote
ammoniacal de l’alcaloïde, après son extraction au chloroforme[21]. Par la suite, diverses méthodes
se sont appuyées sur la propriété de la caféine à présenter un maximum d’absorption à une longueur
d’onde de 272 à 276 Figure
nm [21].
6 :Mais cessecondaire
Effets méthodesdue
nécessitaient une étape
à une surdose préalable de clarification
en caféine
afin d’éliminer les différents composés responsables d’interférences. La méthode développée par
ISHLER et coll. (1948) est un exemple parmi toutes les méthodes spectrophotométriques de ce
type, où les impuretés sont éliminées par un traitement à l’oxyde de magnésium ou au ferrocyanide
de zinc.
Figure 6 : Effets secondaire due à une surdose en caféine

IV.4.1. Méthodes spectrophotométriques

A de rares exceptions près, l’extraction de la caféine et de ses dérivés a toujours été, et reste une
étape préliminaire indispensable à toute analyse des méthylxanthines, quel que soit la méthode de
dosage utilisée. Les principales raisons de cette opération sont l’élimination des interférences et la
concentration des métabolites [22] ;[23]. L’extraction de la caféine peut être évitée lorsque la
molécule est dosée dans un milieu limpide, comme certains milieux de culture synthétiques. La
mesure spectrophotométrique directe permet alors un dosage de toutes les méthylxanthines sans
distinction, puisque ces molécules présentent toutes un maximum d’absorption à une longueur
d’onde identique[24] ;[25].
IV.4.2. Méthodes chromatographiques

Chronologiquement, les premières méthodes étaient basées sur le principe de la chromatographie
de surface sur papier, puis sur plaque de silice. L’évaluation quantitative des méthylxanthines était
réalisée par spectrophotométrie après récupération des composés séparés[26] ;[27]. Par la suite,
l’utilisation de scanners (détection UV) a permis une lecture directe des chromatographes
[28] ;[29]. L’étude du métabolisme de la caféine chez les plantes a conduit à l’utilisation de
produits radiomarqués[30]. Ces produits étaient également séparés par chromatographie de surface
puis récupérés et quantifiés à l’aide d’un compteur à scintillation [31] ;[32];[33]. Par ailleurs,
certains auteurs ont utilisé la spectrométrie de masse (couplée à la chromatographie en phase
gazeuse) pour confirmer l’identification des méthylxanthines séparées par chromatographie sur
couche mince [34] ;[35]. Actuellement, la plupart des méthodes d’analyse de la caféine et de tous
ses dérivés s’appuie sur la technique de Chromatographie Liquide Haute Performance (CLHP),
couplée à un système de détection UV. Ces méthodes ont pour finalités :
• le dosage des méthylxanthines dans les boissons et les aliments,

• la détermination du pool endogène des méthylxanthines produites dans les plantes,
• l’analyse pharmacocinétique des méthylxanthines,
• le dosage des produits de dégradation de la caféine obtenus in vitro, B partir d’extraits de
cellules animales, végétales ou microbiennes.

IV.4.3. Autres méthodes

Deux autres techniques originales ont été récemment proposées pour le dosage de la caféine dans
des aliments ou dans les grains de café. Dans le premier cas, il s’agit d’une technique
d’électrophorèse capillaire[36], et dans le deuxième cas, il s’agit d’une technique de gel filtration
[36]. Comparées à des techniques d’analyse par chromatographie liquide haute performance, ces
deux méthodes se sont montrées toutes aussi performantes à doser la caféine.
IV.5. Règlementations
Nous consommons de la caféine en tant que composé naturel du café, du thé, du chocolat, de
certains arômes comme ceux provenant du cola et du guarana. Aussi nous la consommons à travers
des boissons énergisantes et gazeuses dans lesquelles elle est ajoutée. Lorsqu'elle est utilisée dans
les aliments, la caféine est réglementée au même titre que les additifs alimentaires en vertu du
règlement sur les aliments et drogues qui exige un examen approfondi d'innocuité par les
scientifiques. Les tableaux 4 et 5 sont proposés par santé Canada.
Tableau 4: Teneur en caféine permise par Santé Canada pour les boissons énergisantes
et les boissons gazeuses
Teneur maximale permise Exemple d’équivalence

par contenant
Boissons énergisantes
Contenants non Canette de 250 ml : max. 100mg
Teneur maximale permise
Maximum 400 mg/L ou 180 Canette de 473 ml : max. 180 mg
Exemple d’équivalence
refermables et contenants mg par contenant Canette de 710 ml: max. 180 mg
de moins de 750 ml par contenant
Teneur maximale
Boissons permise
énergisantes
Contenants refermables de Boissons énergisantes Canette dede250
Bouteille 1L:mlmax.
: max.
360100mg
mg
Maximum 180 mg/500ml Exemple d’équivalence
Canette de 473 ml : max. 180 mg
plus de 750 ml (360
Maximum
Teneur 400mg/L)
maximale mg/L ou 180
permise
Canette de 710
par ml: max. 180 mg
contenant
mg par contenant
Boissons gazeuses
Bouteille de 1L: max. 360 mg
Cola Maximum 200mg/L Canette de 355 ml: max. 71mg
Exemple
Boissons énergisantes Canette de 250d’équivalence
ml : max. 100mg
Boissons énergisantes Canette de 473 ml : max. 180 mg
par contenant
Maximum 180 mg/500ml Canette de 710 ml: max. 180
Bouteille de 1L: max. 360 mgmg
(360
Maximum 400mg/L)
mg/L ou 180
mg par contenant
Canette 1L:ml
Bouteilledede250 : max.
max. 360100mg
mg
Boissons énergisantes Canette de 473 ml : max. 180 mg
Boissons gazeuses
Autres boissons énergisantes Maximum 150mg/L Canette de 355 ml : max.53mg
Source : Laurie Plamondon (2011) [37]
Tableau 5: Limites recommandées de l'apport quotidien en caféine chez la population en bonne

santé
Apport quotidien maximal Equivalence en tasse de

Population café filtré contenant
de caféine recommandée
135mg de caféine
Population
Enfants de 12 ans et moins 2,5 mg/kg de poids corporel
Apport quotidien maximal
de caféine recommandée Equivalence
environ 1/3en de tasse
tasse de
4-6 ans 45mg café filtré contenant
Population 2,5 mg/kg de poids corporel 135mg 1/2
environ de caféine
de tasse
7-9 ans 62,5mg
Apport quotidien maximal environ 1/3 de tasse
45mg environ 2/3 de tasse
10-12Population
ans 85mg Equivalence en tasse de
2,5 mg/kg de poids corporel
62,5mg café filtré contenant
2,5 mg/kg de poids corporel environ
135mg 1/2 de tasse
de caféine
1/3
Adolescents âgés 45mg
de 13 ans et plus Apport quotidien maximal
de2,5 mg/kg
caféine 85mg
de poids corporel
recommandée
62,5mg environ 2/3 de tasse
13 ans: fille ou garçon (45 kg) =112 mg environ 3/4 de tasse
Equivalence
environ 1/3ende tasse
tasse de
45mg
17 ans: fille (55 kg) = 138 mg; café filtré contenant
85mg environ 1/21de
environ tasse
; 1/4 de tasse
garçon 62,5mg
(65kg) = 162 mg 135mg de caféine
2,5fille
13 ans: mg/kgou de poids(45
garçon corporel
kg) =112 mg environ 2/3 de tasse
Femmes Enceinte 300mg environ
environ3/42 de
¼ detasse
tasses 17 ans: fille85mg
(55 kg) = 138 mg;
garçon (65kg) = 162 mg environ 1/21de tasse
environ ; 1/4 de tasse
Adultes garçon (45 kg) =112 mg
13 ans: fille ou400mg environ 3 tasses
17 ans: fille (55 kg) = 138 mg; environ 2/3 de tasse
environ 3/4 de tasse
2,5 mg/kg
garçon de poids
(65kg) corporel
= 162 mg
Source : Joel Rotstien, Jennifer Borber, Carl Strowbridge, Stephen Hayward, Rong Huang et
Samuel Benrejeb Godefroy, Guin (2013) [38] environ 1 ; 1/4 de tasse
13 ans: fille ou garçon (45 kg) =112 mg
17 ans: fille (55 kg) = 138 mg;
garçon (65kg) = 162 mg environ 3/4 de tasse
2,5TS
RAPPORT DE STAGE mg/kg de industrielle
chimie poids corporel
2e année / 2019-2020 17
environ 1 ; 1/4 de tasse
De cette première partie, nous retenons que la caféine agit effectivement sur l’organisme humain
que ce soit positivement ou négativement : sa consommation est donc régie par des normes . La
quantification de la caféine contenue dans une plante, un aliment nécessite un prétraitement qui
consiste donc à extraire cette caféine. Cependant l’extraction ne permet d’avoir une caféine pure
mais débarrassée en majorité des alcaloïdes autres que la caféine. Après donc ces généralités, nous
abordons la deuxième partie qui traite du matériel et méthodes utilisés au cours de nos travaux.

DEUXIEME PARTIE
-- MATERIEL ET METHODES --
DEUXIEME PARTIE
--
DEUXIEME
DEUXIEME PARTIE :PARTIE
MATERIEL ET
METHODES
-- MATERIEL ET METHODES --
DEUXIEME PARTIE
--

La réalisation de ce dosage nécessite un certain nombre de moyens matériels qui sont choisis en
fonction de la manipulation à effectuer. Certaines de ces manipulations sont en préludes à la
quantification c’est-à-dire permettent d’aboutir à l’extraction de la caféine et d’autres à la
quantification de cette caféine.
I. MATERIEL
I.1. Matériel végétal
Le matériel végétal utilisé pour l’extraction de la caféine est le Garcinia kola acheté au marché et
séché à l’étuve et broyé (annexe 1)
I.2. Matériel technique

I.2.1. Produits chimiques
• Solution d’acide sulfurique à 0,5M obtenue à partir de la solution commerciale pure à 96%
et de qualité analytique
• Etalon ou standard de caféine pure 99%
• Carbonate de Sodium
• Sulfate de Magnésium
• Chloroforme
I.2.2. Verrerie et appareils

• Béchers
• Verre de montre
• Entonnoir
• Eprouvette graduée
• Ampoule à décanter
• Tubes à essai et portoirs
• Spectrophotomètre de type Jenway genova plus (Annexe 1)
• Bain de sable (Annexe 1)
• Vortex
• Agitateur magnétique/Plaque chauffante de type Fisherland (Annexe 1)

• Etuve de type Memmert (Annexe 1)

• Balance électronique au 100e près de type Startorius (Annexe 1)
I.3. Matériel informatique

Le logiciel utilisé pour tracer la droite d’étalonnage est Excel 365 installé à partir de Windows 10.
(annexe 1)
II. METHODES
II.1. Extraction de la caféine
Pour extraire la caféine dans la poudre de petit cola, 4,75g de poudre sèche de Garcinia kola ont
été pesés sur une balance électronique au 100e près et délayés dans 200mL d’eau distillée contenues
dans une fiole jaugée de 200mL. A l’aide d’un barreau aimanté le mélange contenu dans la fiole
posée sur la plaque chauffante a été homogénéisé et chauffé pendant environ une heure à 50°C
pour solubiliser la caféine contenue dans la poudre de petit cola. Une fois le temps de chauffage
atteint, la fiole a été retirée de l’agitateur pour que l’extrait liquide de Garcinia kola refroidisse et
soit filtré au papier filtre . Une masse de carbonate de Sodium égale à 6g a été ajoutés aux 200mL
de filtrat, agité à froid pendant 15 minutes à l’aide du barreau et de l’agitateur puis laissé reposer
pendant 5 minutes par la suite. Le filtrat mélangé au carbonate de Sodium a été filtré à nouveau au
papier filtre. Ce nouveau filtrat a été transvaser dans une ampoule à décanter de 500mL et mélangé
à 140mL de Chloroforme . Le contenue de l’ampoule à décanter est agité et dégazé en ouvrant le
robinet de l’ampoule à décanter, cette action a été répétée à dix reprises et le mélange a été laissé
décanté pendant 20 minutes. Après que les 20 minutes ont eu été écoulées, la phase organique (elle
contient la caféine), soluble dans le chloroforme se trouvant en dessous du filtrat car plus dense
(Annexe 2), a été récupéré dans un bécher . Du sulfate de Magnésium a été ajouté à la phase
organique et le bécher a été posé sur le bain de sable pour que le chloroforme s’évapore pour ainsi
récupérer la caféine (Annexe 2).

II.2. Préparation de la gamme d’étalons et de l’échantillon

La gamme d’étalons a été réalisée en dissolvant 0,1g de caféine pure dans 1L d’acide sulfurique de
concentration 0,5mol/L contenue dans une fiole jaugée de 1L pour ainsi obtenir une solution de
caféine à 0,1g/L. La caféine extraite du petit cola a été dissout dans 100mL du même acide,
l’échantillon à doser a ainsi été obtenu. Le remplissage des tubes étiquetés de selon le Tableau 6
a été effectué à l’aide de deux micropipettes à volume variable entre 100 et 1000µL et d’une pipette
graduée de 10mL en suivant les valeurs du Tableau 6.
Tableau 6: Tableau de de remplissage des tubes de la gamme d’étalons
Tubes 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 E
Solution de 0 1 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0
caféine (mL)
Acide sulfurique 10 9 9,1 9,2 9,3 9,4 9,5 9,6 9,7 9,8 9 ,9 8
à 0,5M (mL)
Echantillon (mL) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2
Volume final 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10
(mL)
II.3. Dosage spectrophotométrique

La longueur d’onde du spectrophotomètre a été réglée à 274nm pour lire les différentes
absorbances. Pour effectuer la lecture des différentes absorbances, par ordre du numéro de tube
c’est-à-dire du tube 0 au tube E (Figure 9), le tube 0 est passé au vortex (Figure 10) pour une
bonne homogénéisation du contenue. Le petit tube permettant de lire l’absorbance a été rempli du
contenu homogénéisé et les contours de celui-ci sont soigneusement essuyés à l’aide de papier
hygiénique. Le tube de lecture d’absorbance a été placé dans le spectrophotomètre. Le
spectrophotomètre fermé, le bouton lecture a été appuyé pour obtenir la valeur de l’absorbance puis
cette valeur est notée dans un tableau Exel. L’absorbance de chaque tube est lue de la même
manière que celle du tube 0.

Après lecture des absorbances la courbe étalon A = f (C) a été tracé sur Excel 365 et la concentration
de l’échantillon a été déterminée en fonction de l’équation de la droite obtenue avec le logiciel.
Figure 7 : Gamme d’étalons et échantillon à doser
Figure 8 : Vortex utilisé pour les homogénéisations

Par la méthode utilisée nous avons extrait la caféine de l’échantillon de Garcinia kola . Cette
Figure 8pure.
caféine extraite est supposée : Vortex utilisé
Après pour
avoir les présenté
donc homogénéisations
le matériel et la méthodologie
employés pour notre étude, la suite de notre travail sera consacrée aux résultats et discussions, qui
feront l’objet du troisième chapitre.

TROISIEME PARTIE
-- RESULTATS ET DISCUSSION --
TROISIEME PARTIE
--
TROISIEME--PARTIE
TROISIEME PARTIE : RESULTATS ET
DISCUSSION
TROISIEME PARTIE
-- RESULTATS ET DISCUSSION --
--
--
La loi de Beer lambert en lien l’absorbance et la concentration de composé dosé ( la caféine dans
notre cas). Elle est utilisée dans notre cas pour quantifier la caféine contenue dans notre échantillon
en fonction de on absorbance à 274nm. Ainsi dans cette partie nous présentons le résultat du dosage
spectrophotométrique appuyé d’une discussion permettant de commenter ce résultat.
I. CAFEINE OBTENUE APRES EXTRACTION

La caféine obtenue sous forme de trace après extraction( Figure 9) n’est pas totalement pure mais
exemptée de la majorité susceptible d’interférer dans le dosage spectrophotométrique. La poudre
blanche contenant majoritairement la caféine permettra de connaitre la quantité de caféine contenue
dans notre échantillon.
Figure 9: Extrait solide caféine obtenu après extraction
II. DETERMINATION DE LA TENEUR EN CAFEINE ET

Figure 9 : Extrait solide caféine obtenu après extraction
RENDEMENT D’EXTRACTION
Les concentrations calculées

Figure 9et: Extrait
les absorbances (Tableau
solide caféine 7) après
obtenu lues ont été multipliées par 103 pour
extraction
une bonne résolution de l’échelle car les valeurs originales sont très faibles et ne permettent pas un
alignement raisonnable des points.
Figure 9 : Extrait solide caféine obtenu après extraction

Tableau 7: Valeurs des absorbances obtenues en fonction de la concentration en caféine de

chaque tube
Tubes 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Absorbance à
0 53 97 141 183 231 279 335 377 427 460
274nm x 103
Concentration
0 1 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1
mg/mL x 103
Par l’équation de la droite d’étalonnage A274nm = 46,884C (Annexe 2) nous pouvons calculer la
concentration en caféine de notre échantillon de petit cola en fonction de l’absorbance du tube E
(A274nm = 0,096.10-3).
Droite d'étalonnage de la caféine A274nm=f(C)

500
450
400
A274nm = 46,844C
Absorbance .103
350
300 R² = 0,9997
250
200
150
100
50
0
0 2 4 6 8 10 12
Concentration massique.103 en mg/mL
Figure 10 : Droite d’étalonnage de la caféine obtenue avec Excel 365
L’échantillon n’a pas été dilué et son absorbance a été multipliée par 10 3. Ainsi les calculs ci-
dessous sont effectués :

A274nm
A274nm = 46,884C C=
46,884
0,096
Application Numérique : C = C = 0,196 .10-2 mg/mL
46,884
Les 4,75g de poudre de petit cola ont permis d’avoir 200mL d’extrait liquide pour l’extraction de
la caféine :
0,196 .10-2mg 1mL 200 x 0,196 .10-2

mcaféine =
1
mcaféine 200 mL
mcaféine = 0,392 mg
Cette masse correspond donc à la masse de caféine dans 4,75g de petit cola. La masse de caféine
dans 1 Kg de petit cola est donc : mcaféine = 0,392 mg
0,392 mg 4,75g mcaféine = 0,392 1mg

x 0,392
Teneur =
4,75
Teneur 1Kg
mcaféine = 0,392 mg
Teneur = 82,52 mg/g de petit cola
Le rendement de l’extraction de la caféine (supposée pure) est calculé comme suit :

masse de caféine extraite

Rendement =
masse
Teneur = 82,52 mg/gd’échantillon
de petit colatraité
0,392
Application Numérique : Rendement = x 100
4750

Rendement = 8,25.10-3 %
Comme les résultats l’indiquent, la teneur en caféine dans le petit cola est de 8,252 mg/Kg (avec
un très faible rendement d’extraction de la caféine) alors que selon la littérature cette concentration
est de 8,008 ± 2.91 mg/Kg ( résultat obtenu par chromatographie liquide à haute performance) .
Cette différence de résultat s’explique tout d’abord par le fait que les techniques d’analyses utilisées
dans chaque cas ne sont pas les mêmes. En effet la CLHP prend en compte des facteurs tels que le
temps de rétention de la molécule à quantifier en plus de son maximum d’absorption. Ainsi même
si l’extrait de caféine n’est pas totalement séparé des autres méthylxanthines il n’y aura pas
d’interférences car les temps de rétention varient d’une molécule à une autre.
Par ce résultat nous voyons que la probabilité d’intoxication en caféine après consommation de
Garcinia kola , bien qu’existante est négligeable (le rendement d’extraction de la caféine dans le
Garcinia kola nous en dit plus) car le Garcinia kola est très amer de gout. Les Tableau 7 et 8 nous
en disent plus en indiquant les quantités de Garcinia kola maximales pour la production de boisson
caféinées et celles à consommer pour atteindre le teneur journalier de caféine recommandée .De
plus selon le British Journal of Applied Science & Technology ( 2014), l’ingestion de caféine de
façon générale à travers le cola est de 4,31 à 1313,05 mg/jour pour 0,6 à 183g de cola. Cela signifie
donc que le cola n’est pas assez consommé journalièrement par chaque individu. Le Garcinia kola
est une très mauvaise source de caféine. Il serait judicieux de choisir comme source de caféine le
Cola nitida plutôt que le Garcinia kola pour une utilisation industrielle car le Cola nitida est 10 à
100 fois plus riche en caféine. En effet ce choix permettra de réduire le cout d’achats de la matière
première car bien qu’étant pauvre en caféine, ce cola est très couteux sur le marché en raison de
ses vertus tant appréciées et permet d’avoir une faible quantité de caféine pour une grande quantité
de Garcinia kola utilisée.

Tableau 8: Quantité maximal de G. kola à utiliser comme source de caféine pour la production
de boissons énergisantes ou gazeuses en fonction des normes de santé canada
Teneur maximale permise Equivalence en

Poudre Garcinia kola séché
Contenants non Teneur maximale permise 4847g/L
Maximum 400 mg/L ou 180 Equivalence en
refermables et contenants mg par contenant
de moins de 750 ml Poudre Garcinia kola séché
Teneur maximale
Boissons permise
énergisantes 4847g/L
Contenants refermables de Boissons énergisantes 2181g /500mL (4,362g/L)
Equivalence en
Maximum 180 mg/500ml
plus de 750 ml (360
Maximum
Teneur 400mg/L)
maximalemg/L ou 180
permise
mg pargazeuses
Boissons contenant 4847g/L
2423g/L
Cola Maximum 200mg/L
Boissons gazeuses
énergisantes Equivalence en
Boissons 2181g /500mL (4,362g/L)
Boissons énergisantes 4847g/L
Maximum 180 mg/500ml 1817g /L
Autres boissons énergisantes Maximum
(360 150mg/L
Maximum 400mg/L)
mg/L ou 180
mg par contenant 2423g/L
Formule ayant permis d’obtenir les résultats de ce tableau : 2181g /500mL (4,362g/L)
Boissons énergisantes 1817g /L
Eq G.kola = Maximum 180 mg/500ml
(Tcaféine G.kola)-1
x Acaféine max .103
(360 mg/L)
Maximum 400 mg/L ou 180 2423g/L
mg par contenant
Avec : Eq G.kola : Equivalence en Poudre Garcinia kola séché (g)
2181g /500mL (4,362g/L)
Boissons
Mcaféine G.kola : Teneur de caféine dans énergisantes
le Garcinia kola ( mg/Kg) 1817g /L
Acaféine max : Apport maximal de caféine180

Maximum recommandée
mg/500ml (mg)
2423g/L
(360 mg/L)
Le facteur 103 permet de ramener en g
Source : Suggestion basée sur les normes du Tableau 4 1817g /L

Tableau 9: Equivalence de G. kola en fonction de la teneur maximale de caféine

recommandée/jour en fonction des normes de santé canada
Apport quotidien maximal Equivalence en noix

Population fraîches de Garcinia kola
Population 2,5 mg/kg de poids corporel 32,476g/kg de poids corporel

Enfants de 12 ans et moins Apport quotidien maximal Equivalence en noix
de caféine recommandée fraîches584,585g
de Garcinia kola
4-6 ans 45mg
Population 2,5 mg/kg de poids corporel 32,476g/kg de poids corporel
811,924g
7-9 ans 62,5mg
Apport quotidien maximal Equivalence
584,585gen noix
de caféine45mg
recommandée fraîches1104,217g
de Garcinia kola
10-12Population
ans 85mg 32,476g/kg de poids corporel
2,5 mg/kg de poids corporel 811,924g
62,5mg
Adolescents âgés 2,5 mg/kg de poids corporel 584,585g
45mg Equivalence
1104,217gen noix
de 13 ans et plus Apport quotidien maximal
de2,5 mg/kg85mg
de poids fraîches
32,476g/kgde
1454,968g corporel
de
Garcinia
poids kola
caféine
13 ans: fille ou garçon
62,5mg (45corporel
recommandée kg) =112 mg 811,924g
17 ans: fille (55 kg) = 138 mg; 584,585g

45mg 1104,217g; 2104,507g
1792,729g
garçon (65kg) = 162 mg
85mg 811,924g
1454,968g
62,5mg
13 ans:
2,5fille
mg/kgou de
garçon
poids(45 kg) =112 mg
corporel
Femmes Enceinte 17 ans: fille300mg
(55 kg) = 138 mg; 1104,217g
3897,237g
Adultes garçon (65kg)
85mg
400mg = 162 mg 1454,968g
5196,316g
1792,729g ; 2104,507g
13 ans: fille ou garçon (45 kg) =112 mg
17 ans: fille (55 kg) = 138 mg;
Formule ayant permis d’obtenir les résultats de ce tableau : 1454,968g
garçon (65kg) = 162 mg
2,5 mg/kg de poids corporel
1792,729g ; 2104,507g
13 ans: (mou
fille G.kola + T Humidité )
garçon (45 kg) = 112 mg
Eq N G.kola = fille (55 kg) = 138 mg; x Acaféine max /jour . 103
17 ans:
mcaféine =G.162
garçon (65kg) kola
mg
Avec : Eq N G.kola : Equivalence 2,5

en noix fraîches
mg/kg Garcinia
de poids kola (g)
corporel 1792,729g ; 2104,507g
mcaféine G.kola : masse de caféine dans l07,2g de Garcinia kola ( mg) égale à 8,252mg
Acaféine max / jour : Apport maximal de caféine recommandée par jour (mg)
mG.kola : masse de Garcinia kola égale à 100g

T Humidité : Teneur d’humidité du Garcinia kola 7,2 %
Le facteur 103 permet de ramener en g
Source : Suggestion basée sur les normes du Tableau 5
Après Donc cette ces résultats appuyés d’une discussion nous retenons que le Garcinia kola
contient une très faible quantité de caféine de sorte à ne pas être causé une intoxination en caféine
lors d’une simple consommation.

CONCLUSION GENERALE
La tâche qui nous a été assignée est de quantifier par spectrophotométrie la caféine contenue dans
le Garcinia kola. Evidement comme échantillon nous avons utilisé des noix de Garcinia kola que
nous avons séché et broyé à sec. Pour parvenir à ce dosage spectrophotométrique nous avons
débarrassé l’échantillon des composés responsables d’interférence lors du dosage. En effet la
mesure spectrophotométrique directe de l’extrait liquide de Garcinia kola prend en compte tous
les méthylxanthines sans distinction puisque ces molécules présentent un maximum d’absorption
a une longueur d’onde identique. Le dosage spectrophotométrique des 4,75g de notre échantillon
a montré que celui-ci contient 0,392mg de caféine ce qui nous permet d’affirmer que le Garcinia
kola contient 82,52mg/Kg de caféine. Ce résultat pourra être utile dans le domaine alimentaire,
médical dans la mesure ou le Garcinia kola sert de matière première pour les produits qui y sont
fabriqués. En plus de cela il pourra permettre de consommer ce cola sans intoxiqué par la caféine
qu’il renferme. Cependant, le résultat du dosage peut être amélioré par l’utilisation d’autres
techniques analytiques telle que la chromatographie liquide à haute performance couplée à une
spectrophotométrie UV (CLHP) car cette technique sépare les composés à analyser et s’appuie sur
leur temps de rétention pour les identifier et les quantifier.

BIBLIOGRAPHIE
[0] British Journal of Applied Science & Technology 4(35): 4846-4859, 2014 ISSN: 2231-0843,7p
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Samuel Benrejeb Godefroy, Guin 2013). Boissons énergisantes: une évaluation des
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WEBOGRAPHIE
[14] https://www.dictionary.com/browse/caffeine le 07/10/2020 à 8h53
[15]http://archive.wikiwix.com/cache/index2.php?url=http%3A%2F%2Fnobelprize.org%2Fnobe
l_prizes%2Fchemistry%2Flaureates%2F1902%2Fpress.html le 16/10/2020 à 10h08
[19] http://www.chm.bris.ac.uk/webprojects2001/tilling/synthesis.html le 16/10/2020 à 10h10
[20]http://lesboissonsenergisantes.e-monsite.com/pages/les-rubriques-du-site/tout-savoir-sur-la-
cafeine/cafeine-quel-est-son-mode-d-action.html le 16/10/2020 à 13h51

ANNEXES
Annexe 1: Matériel ......................................................................................................................... II

Annexe 2 : Extraction de la caféine ............................................................................................... II
RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 I

Annexe 1: Matériel
Poudre sèche de G.kola Spectrophotomètre de type Etuve de type Memmert

JENWAY genova
Etuve de type Memmert

Poudre sèche de G.kola
Spectrophotomètre de type
JENWAY genova
JENWAY genova
JENWAY genova
Agitateur magnétique chauffant de Balance électronique à deux chiffres de Bain de sable
type Fisherbrand type Sartorius
Bain de sable
Agitateur magnétique chauffant de Balance électronique à deux chiffres de
Bain de sable

type Fisherbrand type Sartorius Bain de sable
Excel Microsoft 365

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 II
Annexe 2 : Extraction de la caféine
Phase liquide
Phase organique
Extraction de la phase organique dans le Evaporation du chloroforme sur bain de

Chloroforme sable
RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 III

Table des matières

DEDICACE......................................................................................................................................i
REMERCIEMENTS ..................................................................................................................... ii
AVANT-PROPOS ........................................................................................................................ iii
LISTE DES ILLUSTRATIONS ..................................................................................................iv
LISTE DES FIGURES..................................................................................................................iv
RESUME ......................................................................................................................................... v
INTRODUCTION GENERALE .................................................................................................. 2
PREMIERE PARTIE: GENERALITES ..................................................................................... 3
I. PRESENTATION DU LAPISEN ......................................................................................... 4
I.1. Historique ........................................................................................................................................ 4

I.2. Organisation .................................................................................................................................... 4
I.3. Mission et activités du LAPISEN ...................................................................................................... 5
II. PROBLEMATIQUE ......................................................................................................... 5
II.1. Contexte du problème.................................................................................................................... 5

II.2. Cahier de charges ........................................................................................................................... 5
II.3. Objectif visé .................................................................................................................................... 6
I.3.1. Objectif spécifique ........................................................................................................................ 6
I.3.2. Activités à réaliser ........................................................................................................................ 6
I.3.3. Méthode de travail ....................................................................................................................... 6
III. PRESENTATION DE GARCINIA KOLA ......................................................................... 7
III.1. Composition de la noix Garcinia kola ............................................................................................ 7

III.2. Propriétés pharmacologiques du Garcinia kola ............................................................................ 9
IV. GENERALITE SUR LA CAFEINE ............................................................................... 10
IV.1. Historique et principales sources de caféine .............................................................................. 10

IV.2. Caractéristiques physico-chimiques............................................................................................ 11
IV.3. Mode d’action et effets physiologiques ...................................................................................... 12
RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 IV

IV.3.1. Mode d’action de la caféine ..................................................................................................... 12

IV.3.2. Effets physiologiques de la caféine .......................................................................................... 12
IV.4. Technique d’analyse de la caféine .............................................................................................. 14
IV.4.1. Méthodes spectrophotométriques .......................................................................................... 15
IV.4.2. Méthodes chromatographiques .............................................................................................. 15
IV.4.3. Autres méthodes ...................................................................................................................... 16
IV.5. Règlementations ................................................................................................................ 16
DEUXIEME PARTIE : MATERIEL ET METHODES .......................................................... 19
I. MATERIEL ......................................................................................................................... 20
I.1. Matériel végétal ............................................................................................................................ 20

I.2. Matériel technique ........................................................................................................................ 20
I.2.1. Produits chimiques ..................................................................................................................... 20
I.2.2. Verrerie et appareils ................................................................................................................... 20
I.3. Matériel informatique ................................................................................................................... 21
II. METHODES ................................................................................................................... 21
II.1. Extraction de la caféine ................................................................................................................ 21

II.2. Préparation de la gamme d’étalons et de l’échantillon ............................................................... 22
II.3. Dosage spectrophotométrique .................................................................................................... 22
TROISIEME PARTIE : RESULTATS ET DISCUSSION ...................................................... 24
I. CAFEINE OBTENUE APRES EXTRACTION ................................................................ 25
II. DETERMINATION DE LA TENEUR EN CAFEINE ET RENDEMENT

D’EXTRACTION ...................................................................................................................... 25
CONCLUSION GENERALE ..................................................................................................... 32
BIBLIOGRAPHIE ....................................................................................................................... 33
WEBOGRAPHIE ......................................................................................................................... 36
ANNEXES ....................................................................................................................................... I
RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 V

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 VI

Rapport de Stage 2e Année TS-CI

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DOSAGE DE LA CAFEINE DU GARCINIA KOLA PAR SPECTROPHOTOMETRIE

A ma famille et à mon pays la Côte d’Ivoire

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 i

Nous tenons à remercier particulièrement :

- Pr. ADIMA Amissa Augustin maitre de stage, encadreur pédagogique et directeur du

Nous voulons aussi remercier :

- M. KOFFI N’Guessan, Directeur Général de l’Institut National Polytechnique Félix

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 ii

L’Institut National Polytechnique Félix HOUPHOUËT BOIGNY (INP-HB) est issu de la

• l’Ecole Supérieure d’Industrie (ESI);

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 iii

LISTE DES ILLUSTRATIONS

Figure 1 : Les différents groups du LAPISEN et leurs directeurs ................................................... 4

LISTE DES TABLEAUX

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 iv

La caféine est une substance psychoactive légalement consommée dans le monde. Il

Mots clé : Garcinia kola, caféine, spectrophotométrie, gamme d’étalons

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 v

AVANT-PROPOS ........................................................................................................................ iii

LISTE DES ILLUSTRATIONS ..................................................................................................iv

LISTE DES FIGURES..................................................................................................................iv

INTRODUCTION GENERALE .................................................................................................. 2

PREMIERE PARTIE: GENERALITES ..................................................................................... 3

I. PRESENTATION DU LAPISEN ......................................................................................... 4

II. PROBLEMATIQUE ......................................................................................................... 5

III. PRESENTATION DE GARCINIA KOLA ......................................................................... 7

IV. GENERALITE SUR LA CAFEINE ............................................................................... 10

DEUXIEME PARTIE : MATERIEL ET METHODES .......................................................... 19

II. METHODES ................................................................................................................... 21

TROISIEME PARTIE : RESULTATS ET DISCUSSION ...................................................... 24

I. CAFEINE OBTENUE APRES EXTRACTION ................................................................ 25

II. DETERMINATION DE LA TENEUR EN CAFEINE ET RENDEMENT

CONCLUSION GENERALE ..................................................................................................... 32

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 1

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 2

PREMIERE PARTIE: GENERALITES

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 3

• GPE : Groupe des Procédés et Environnement ;

Prof. YAO K. Benjamin

Groupe des Groupe de Groupe Energies Groupe Chimie

Figure 1 : Les différents groups du LAPISEN et leurs directeurs

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 4

I.3. Mission et activités du LAPISEN

II.1. Contexte du problème

II.2. Cahier de charges

• Effectuer une bibliographie sur le Garcinia kola

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 5

II.3. Objectif visé

I.3.1. Objectif spécifique

I.3.2. Activités à réaliser

I.3.3. Méthode de travail

1. Recherches bibliographiques du cahier de charge.

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 6

III. PRESENTATION DE GARCINIA KOLA

Noix du petit cola

Figure 2 : Petits cola ayants atteint la maturation

III.1. Composition de la noix Garcinia kola

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 7

Tableau 1 : Composition approximative du Garcinia kola

Tableau 2: Analyse quantitative des composés phytochimiques

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 8

Tableau 3 : Analyse quantitative des composés anti-nutritifs

III.2. Propriétés pharmacologiques du Garcinia kola

RAPPORT DE STAGE TS chimie industrielle 2e année / 2019-2020 9