2008 Lyon 076

ECOLE NATIONALE VETERINAIRE DE LYON
Année 2008 - Thèse n°
INTERET DE L’ASSOCIATION ENTRE L’ENROFLOXACINE ET LA

COLISTINE AINSI QUE DE L’ENROFLOXACINE ET LA
BROMHEXINE DANS LE TRAITEMENT DES INFECTIONS
RESPIRATOIRES AVIAIRES.
THESE
Présentée à l’UNIVERSITE CLAUDE-BERNARD - LYON I

(Médecine - Pharmacie)
et soutenue à huis clos le 21 Novembre 2008
pour obtenir le grade de Docteur Vétérinaire
par
WIDMANN Sandra
Née le18 juillet 1983
à Nice
ECOLE NATIONALE VETERINAIRE DE LYON
Année 2008 - Thèse n°
INTERET DE L’ASSOCIATION ENTRE L’ENROFLOXACINE ET LA

COLISTINE AINSI QUE DE L’ENROFLOXACINE ET LA
BROMHEXINE DANS LE TRAITEMENT DES INFECTIONS
RESPIRATOIRES AVIAIRES.
THESE
Présentée à l’UNIVERSITE CLAUDE-BERNARD - LYON I

(Médecine - Pharmacie)
et soutenue à huis clos le 21 Novembre 2008
pour obtenir le grade de Docteur Vétérinaire
par
WIDMANN Sandra
Née le18 juillet 1983
à Nice
2
3
4
REMERCIEMENTS
A Monsieur le Professeur Jacques DESCOTES,

Du Centre Hospitalier Universitaire de Lyon,
Qui nous a fait le grand honneur d’accepter la présidence de notre jury de thèse.
Hommages respectueux.
A Monsieur le Professeur Gérard KECK,

De l’Ecole Nationale Vétérinaire de Lyon
Qui m’a apporté son soutien et son aide tout au long de ce travail,
Qu’il trouve ici le témoignage de ma reconnaissance.
A Monsieur le Professeur Pierre BEZILLE,

De l’Ecole Nationale Vétérinaire de Lyon,
Qui nous a fait l’honneur de s’intéresser à ce travail et d’accepter de participer à notre jury de
thèse,
Sincères remerciements.
A Monsieur le Docteur Arnaud ANTY,

Du Laboratoire CEVA,
Qui nous a apporté ses conseils, son temps et son aide,
Qu’il trouve ici l’expression de notre profonde reconnaissance.
5
6
A mes parents,
Pour votre soutien durant toutes ses années, pour m’avoir permis de réaliser mon rêve de
petite fille, celui de devenir un jour vétérinaire et aussi pour vous remercier de ce que je suis
aujourd’hui, un peu grâce à moi et beaucoup grâce à vous.
Merci de m’avoir toujours soutenue dans les moments heureux mais surtout dans les moments
plus difficiles et d’avoir toujours cru en moi. Je vous aime tendrement.
A ma sœur Violaine,
Parce que tu es la petite sœur parfaite qui a toujours rempli son rôle. Au temps passé à
m’écouter, à me comprendre et me soutenir. Nos liens sont uniques et inaltérables.
Aujourd’hui je te souhaite plein de bonheur dans ta vie d’adulte, tu es peut être devenue une
femme mais tu resteras toujours ma « ptite sœur ».
A la famille Widmann-Bouyssou,
Pour votre soutien et votre joie de vivre. Evelyne garde cette gaieté qui te caractérise, Caro et
Micka croyez fort en vos rêves, vous y parviendrez. Je serai toujours là pour vous.
A ma grand-mère Marcelle,
Parce que c’est chez toi que j’ai découvert les vaches et autres animaux qui m’ont donné
envie de devenir vétérinaire. La distance fait qu’on ne se voit pas assez souvent mais je pense
souvent à toi.
A ma grand-mère Marie,
Ma «mémé » qui aurait été si fière de voir que j’ai réalisé mon rêve. Ta disparition a laissé un
grand vide dans ma vie mais ton souvenir restera à jamais gravé dans mon cœur.
A la famille Martin, ma deuxième famille,

A votre accueil si chaleureux, à votre gentillesse et générosité envers moi.
A Alice, Elsa et Marjo, à nos virées et nos soirées entres filles, que nos liens restent les
mêmes …….prochaines vacances dans le sud-est !!!!
A Greg, Marie, Marc, Che, Plane, Spartou et Ptichou, pour ce fabuleux groupe de clinique. Je
ne vous oublierai pas.
A tous les autres amis et connaissances que je n’ai pas nommés mais qui m’ont tous apporté
leur amitié, leur soutien et leur patience.
A Ado, l’homme que j’aime tant,

« Aimer ce n'est pas se regarder l'un l'autre, c'est regarder ensemble dans la même direction »
Je suis si heureuse de te dire enfin OUI l’année prochaine. Merci pour ta patience, ta
générosité et ton amour sans limite durant toutes ces années. Tu me rends si heureuse et nous
avons encore tant de choses à partager.
Je t’aime.
7
8
Table des matières
Table des illustrations ......................................................................................................................... 12

Liste des abbréviations : ..................................................................................................................... 13
Première partie: Etude pharmacologique et toxicologique de l’enrofloxacine, de la colistine et de la
bromhexine............................................................................................................................................ 17
I. Etude pharmacologique et toxicologique de l’enrofloxacine .................................................. 19
A. Propriétés physico-chimiques................................................................................................ 19
1. Structure chimique et relation structure-activité .................................................................. 19
2. Propriétés physiques ............................................................................................................ 20
3. Présentations et formes pharmaceutiques ............................................................................ 21
B. Etude pharmacologique......................................................................................................... 22
1. Activité anti-bactérienne...................................................................................................... 22
a. Concentrations minimales inhibitrices (CMI) ................................................................. 22
b. Spectre d’activité et activité in vivo................................................................................. 24
c. Etude de l’efficacité in vivo ............................................................................................. 25
d. Etude de la bactéricidie.................................................................................................... 28
e. Effet post-antibiotique ..................................................................................................... 29
2. Mécanisme d’action ............................................................................................................. 29
3. Résistances........................................................................................................................... 31
C. Etude pharmacocinétique...................................................................................................... 32
1. Posologie.............................................................................................................................. 33
2. Résorption ............................................................................................................................ 33
3. Distribution .......................................................................................................................... 36
a. Volume de distribution .................................................................................................... 37
b. Distribution tissulaire ...................................................................................................... 37
c. Distribution cellulaire ...................................................................................................... 39
d. Biotransformation............................................................................................................ 39
e. Elimination ...................................................................................................................... 40
D. Toxicité, effets indésirables et interactions médicamenteuses............................................ 40
1. Toxicité aigue....................................................................................................................... 40
2. Toxicité chronique et subaiguë ............................................................................................ 41
a. Toxicité articulaire........................................................................................................... 41
b. Neurotoxicité ................................................................................................................... 42
c. Toxicité rénale ................................................................................................................. 42
d. Modifications hématologiques......................................................................................... 42
e. Toxicité testiculaire ......................................................................................................... 42
3. Embryotoxicité, tératogénicité et fonction de reproduction................................................. 43
4. Cytotoxicité.......................................................................................................................... 43
5. Effets indésirables................................................................................................................ 43
a. Effets sur le tractus digestif ............................................................................................. 43
b. Effets cardio-vasculaires.................................................................................................. 43
c. Troubles cutanés .............................................................................................................. 43
6. Interactions médicamenteuses.............................................................................................. 44
a. Modulation de la biodisponibilité.................................................................................... 44
b. Anti-inflammatoires non-stéroidiens ............................................................................... 45
c. Xanthine........................................................................................................................... 45
d. Antibiotiques ionophores................................................................................................. 46
e. Antivitaminiques K1 coumariniques ............................................................................... 46
II. Etude pharmacologique et toxicologique de la colistine ..................................................... 47
1. Structure chimique ............................................................................................................... 47
3. Présentations et formes pharmaceutiques ............................................................................ 48
B. Etude pharmacologique......................................................................................................... 48
9
1. Activité anti-bactérienne...................................................................................................... 48
a.
Spectre d’activité ............................................................................................................. 48
b.
Concentrations minimales inhibitrices ............................................................................ 49
c.
Bactéricidie...................................................................................................................... 49
2. Mécanisme d’action ............................................................................................................. 49
3. Résistances (Maure D, 1986) ............................................................................................... 50
4. Interactions avec les endotoxines bactériennes.................................................................... 51
C. Etude pharmacocinétique...................................................................................................... 52
1. Résorption ............................................................................................................................ 52
2. Distribution .......................................................................................................................... 53
a. Dans le tube digestif ........................................................................................................ 53
b. Concentrations plasmatiques, cinétiques ......................................................................... 53
c. Fixation aux protéines ..................................................................................................... 55
d. Distribution tissulaire ...................................................................................................... 55
e. Diffusion dans les liquides biologiques........................................................................... 57
3. Biotransformations............................................................................................................... 57
4. Elimination........................................................................................................................... 57
D. Etude toxicologique ................................................................................................................ 58
1. Blocage neuro-musculaire.................................................................................................... 58
2. Néphrotoxicité...................................................................................................................... 59
3. Action sur la gestation.......................................................................................................... 59
4. Autres manifestations........................................................................................................... 59
III. Etude pharmacologique et toxicologique de la bromhexine............................................... 60
1. Structure chimique ............................................................................................................... 60
B. Etude pharmacocinétique...................................................................................................... 61
1. Résorption ............................................................................................................................ 61
2. Distribution .......................................................................................................................... 62
3. Biotransformation ................................................................................................................ 62
4. Elimination........................................................................................................................... 63
C. Etude pharmacodynamique .................................................................................................. 64
1. Synthèse des sécrétions bronchiques ................................................................................... 64
2. Composition des sécrétions bronchiques ............................................................................. 65
3. Mode d’action de la bromhexine ......................................................................................... 67
4. Propriétés pharmacologiques ............................................................................................... 68
a. Action sur les cellules bronchiques ................................................................................. 68
b. Action anti-inflammatoire ............................................................................................... 69
c. Action anti-oxydante ....................................................................................................... 69
d. Autres propriétés.............................................................................................................. 70
5. Modalité d’administration et usage thérapeutique ............................................................... 71
6. Effets indésirables............................................................................................................ 71
Deuxième partie: Associations médicamenteuses dans le traitement des maladies respiratoires
bactériennes des volailles. ..................................................................................................................... 73
I. Les infections respiratoires des volailles................................................................................... 75
A. Les infections à Escherichia coli............................................................................................ 75
1. Etiologie............................................................................................................................... 75
a. Les principaux sérotypes ................................................................................................. 75
b. Les facteurs de virulences................................................................................................ 76
1. Les fimbriae ..................................................................................................................... 76
α) Fimbriae de type 1....................................................................................................... 76
β) Fimbriae de type P....................................................................................................... 76
2. La résistance au sérum ..................................................................................................... 77
3. Le système de captation du fer......................................................................................... 77
(1) Hémagglutination.................................................................................................. 77
10
c.Epidémiologie et facteurs environnementaux.................................................................. 78
2. Etude clinique et lésionnelle ................................................................................................ 79
a. Mortalité embryonnaire et du jeune poussin.................................................................... 79
b. Maladie respiratoire chronique et septicémie .................................................................. 79
c. Le syndrome infectieux de la grosse tête......................................................................... 80
d. Autres manifestations cliniques....................................................................................... 80
B. La mycoplasmose.................................................................................................................... 80
1. Etiologie............................................................................................................................... 80
2. Epidémiologie.................................................................................................................. 81
3. Etude spécifique................................................................................................................... 81
a. Mycoplasma gallisepticum .............................................................................................. 81
b. Mycoplasma méleagridis ................................................................................................. 81
c. Mycoplasma synoviae...................................................................................................... 82
C. La pasteurellose ...................................................................................................................... 82
1. Etiologie............................................................................................................................... 82
2. Epidémiologie ...................................................................................................................... 82
3. Pathogénie et clinique .......................................................................................................... 82
D. Le coryza infectieux................................................................................................................ 83
II. Associations médicamenteuses impliquant l’enrofloxacine : intérêts dans le traitement
des pathologies respiratoires des volailles ......................................................................................... 84
A. Les principes généraux des associations antibiotiques et définitions des différents types
d’interactions................................................................................................................................... 84
1. Définitions des différents types d’interactions..................................................................... 84
2. Principes généraux des associations .................................................................................... 85
B. L’association enrofloxacine/colistine .................................................................................... 87
1. Principaux avantages d’une association antibiotique appliquée à l’association
enrofloxacine/colistine.................................................................................................................. 87
a. Elargissement du spectre antibactérien............................................................................ 87
b. Prévention de l’émergence de mutants résistants ............................................................ 88
c. Obtention d’un effet synergique ...................................................................................... 88
d. Diminution du risque toxique .......................................................................................... 89
2. L’association est-elle envisageable ? ................................................................................... 90
a. Propriétés physico-chimiques.......................................................................................... 90
b. Propriétés pharmacocinétiques ........................................................................................ 90
1. Résorption :...................................................................................................................... 90
2. Distribution ...................................................................................................................... 91
3. Biotransformations........................................................................................................... 91
4. Elimination....................................................................................................................... 91
C. L’association enrofloxacine/bromhexine.............................................................................. 92
CONCLUSION
BIBLIOGRAPHIE ............................................................................................................................ 101
11
Table des illustrations
Liste des figures :

Figure 1 : Structure chimique de l’enrofloxacine.................................................................... 19
Figure 2 : Chélation des fluoroquinolones. ............................................................................. 20
Figure 3 : Rôle de l’ADN gyrase............................................................................................. 30
Figure 4 : Mode d’action des quinolones contre l’ADN-gyrase et la topoisomérase IV ........ 31
Figure 5 : Cinétique plasmatique sur 24heures après administration par voie orale de
difloxacine(5mg/kg) et de marbofloxacine (5mg/kg). ..................................................... 34
Figure 6 : Cinétique plasmatique sur 24 heures après une administration orale
d’enrofloxacine de 2,5mg/kg chez le veau....................................................................... 34
Figure 7 : Cinétique plasmatique chez le veau après une unique administration I.V ou sous-
cutané d’enrofloxacine à 2,5mg/kg .................................................................................. 34
Figure 8 : Concentration plasmatique après une administration unique sous cutané chez le
chat de 2,5 et 5mg/kg d’enrofloxacine. ............................................................................ 35
Figure 9: Concentrations plasmatiques chez le veau après une administration de 3 fois
2,5mg/kg et 3 fois 5mg/kg d’enrofloxacine (SC-PO-PO).............................................. 35
Figure 10 : Concentration plasmatiques chez des poulets après une administration via l’eau de
boisson d’enrofloxacine pendant 14 jours à 25,50 et 100ppm. ........................................ 36
Figure 11: Concentrations plasmatiques chez des poulets après une administration via la
nourriture (ad libitum) d’enrofloxacine pendant 14 jours à 50 ou 200ppm. .................... 36
Figure 12 : Concentration de l’enrofloxacine dans les tissus et les liquides biologiques du
veau et du chien, 1 heure après une administration intra-musculaire d’une dose unique de
5 mg/kg............................................................................................................................. 38
Figure 13 : Structure de la colistine......................................................................................... 47
Figure 14 : Concentrations sériques de colistine chez les brebis traitées en IM avec 7,5 et 3,5
mg/kg de CS et avec 7,5 et 3,5 mg/kg de CMSS. ........................................................... 54
Figure 15: Fixation des polymyxines aux protéines plasmatiques chez le chien en fonction de
la concentration sérique en antibiotique........................................................................... 55
Figure 16 : Structure chimique du chlorhydrate de bromhexine............................................. 60
Figure 17 : Structure chimique du chlorhydrate d’ambroxol .................................................. 61
Figure 18 : Principales voies de biotransformations de la bromhexine chez le lapin. (---
déméthylation, …..cyclisation , hydroxylation). D’après Schraven et al. ............... 63
Figure 19 : Cumul de la radioactivité excrétée dans les urines et les fécès de plusieurs
espèces, 96 heures après une administration orale de 14C-bomhexine (exprimée en
pourcentage). .................................................................................................................... 64
Figure 20 : Structure du revêtement de l’arbre respiratoire supérieur. ................................... 65
Figure 21 : Représentation schématique de l’escalator muco-ciliaire..................................... 66
Figure 22 : Schématisation de la structure fibrillaire du mucus bronchique- association
mucines-protéines. ........................................................................................................... 66
Figure 23 : Mode d’action des mucolytiques. ......................................................................... 68
Figure 24 : Système enzymatique spécifique de dégradation des radicaux libres. ................. 69
Figure 25 : Association de deux antibiotiques (A et B) : cinétique de bactéricidie ................ 84
Figure 26 : Associations d’antibiotiques (lois de Jawetz) ....................................................... 85
Figure 27 : Concentration d’oxytétracycline dans le plasma , les sécrétions bronchiques et
nasales après administration de 10 mg/kg d’oxytétracycline IV avec ou sans
administration simultanée de bromhexine à 2mg/kg IM.................................................. 92
Figure 28: Pharmacocinétique de la spiramycine avec (B) ou sans bromhexine (A). ........... 94
Figure 29 : Variation de la concentration de céphalotine ajustée au taux de protéine dans le
liquide broncho-alvéolaire................................................................................................ 95
12
Liste des tableaux :
Tableau I : Relation structure/activité des quinolones. ........................................................... 20

Tableau II et III : Solubilité de l’enrofloxacine en g/100ml à 20°C dans différents milieux.21
Tableau IV : CMI de l’enrofloxacine et de la tétracycline pour quelques espèces
bactériennes. ..................................................................................................................... 23
Tableau V : Spectre antibactérien des quinolones .................................................................. 24
Tableau VI : Efficacité in vivo de l’enrofloxacine envers différentes espèces bactériennes
chez les volailles............................................................................................................... 26
Tableau VII : Concentration de l’enrofloxacine dans les tissus et les liquides biologiques du
poulet après administration d’une dose unique de 10mg/kg dans l’eau de boisson........ 38
Tableau VIII : Toxicité aigue après administration orale et parentérale chez plusieurs
espèces.............................................................................................................................. 41
Tableau IX : Spectre antibactérien des antibiotiques polypeptiques ...................................... 48
Tableau X : CMI (µg/ml) de la colistine pour quelques espèces bactériennes ....................... 49
Tableau XI : Inactivation des endotoxines d’E.coli par la polymyxine B et la colistine dans
du lait de mammite........................................................................................................... 52
Tableau XII : Paramètres pharmacocinétiques des polymyxines chez le brebis. ................... 54
Tableau XIII : Concentration de colistine sous forme libre et liée dans les tissus et liquides
biologiques de veaux après une injection IV de CS......................................................... 56
Tableau XIV : Quantité de colistine (en pourcentage) présente dans les différents organes et
liquides biologiques chez le veau après une injection IV de CS (5mg/kg)...................... 56
Tableau XV : Toxicités aigues comparées de différents antibiotiques. .................................. 58
Tableau XVI : Caractéristiques chimiques des trois phases obtenues par centrifugation du
produit d’une expectoration à laquelle est ajouté trois volumes d’eau distillée.............. 67
Tableau XVII : Résultats théoriques des associations au cours de la phase précoce de
l’activité bactéricide des antibiotiques. ............................................................................ 86
Tableau XVIII : Concentration de la spiramycine (µg/g) dans les sécrétions nasales de
bovins recevant de la spiramycine (S) ou de la spiramycine + bromhexine (SB). .......... 94
Tableau XIX : Résultats comparés des différentes études sur l’association entre la
bromhexine ou l’ambroxol et divers antibiotiques........................................................... 97
Liste des abbréviations :
CMI : Concentration minimale inhibitrice

h : heure
I.M : Intra-musculaire
I.P : Intra-péritonéal
I.V : Intra-veineux
J : Jour
Kg : kilogramme
mg : Milligramme
P.O : per os
P.V : Poids vif
S.C : Sous-cutané
13
14
INTRODUCTION
En élevage de volailles, toute pathologie infectieuse et potentiellement contagieuse fait

courir un grave risque sanitaire et économique à l’éleveur. En effet, les maladies infectieuses
en élevage aviaire sont responsables de pertes économiques très importantes et tout
particulièrement les maladies respiratoires, qui y sont surreprésentées. Elles sont favorisées
par les conditions environnementales de ces élevages intensifs de volailles. Ces maladies sont
soit d’origine bactérienne soit compliquées secondairement par une bactérie. Pour cette raison
les antibiotiques sont souvent utilisés dans le traitement de ces maladies respiratoires.
Ce travail bibliographique s’attachera à évaluer la pertinence d’une association entre
l’enrofloxacine et la colistine ainsi qu’entre l’enrofloxacine et la bromhexine dans le
traitement de ces pathologies infectieuses respiratoires aviaires.
L’enrofloxacine est un antibiotique de la famille des quinolones. Il s’agit plus
précisément d’une fluoroquinolone de troisième génération possédant un spectre d’activité
large. L’enrofloxacine a la particularité de n’être utilisée qu’en médecine vétérinaire et ce
depuis plusieurs années. Cet antibiotique est couramment utilisé en médecine aviaire.
La colistine quant à elle, appartient à la famille des antibiotiques polypeptidiques et
possède un spectre étroit dirigé essentiellement contre les bactéries à gram négatif. C’est un
antibiotique ancien utilisé en médecine vétérinaire depuis de très nombreuses années.
La bromhexine est un mucomodificateur encore peu utilisé en médecine vétérinaire
alors qu’il est souvent employé en association avec un antibiotique dans le traitement des
maladies infectieuses respiratoires chez l’homme.
Cette étude va permettre dans une première partie de réaliser la monographie de

chacune des molécules en s’attardant notamment sur les aspects pharmacodynamiques et
pharmacocinétiques de celles-ci. Ensuite, la seconde partie s’attachera à décrire les
pathologies respiratoires d’origine bactériennes les plus fréquentes en élevage aviaire et enfin
nous étudierons les associations enrofloxacine/colistine et enrofloxacine/bromhexine afin de
dégager les bénéfices et les inconvénients dans le traitement de ces pathologies respiratoires.
15
16
PREMIERE PARTIE :
Etude pharmacologique et toxicologique de l’enrofloxacine, de la colistine et de

la bromhexine.
17
18
I. Etude pharmacologique et toxicologique de l’enrofloxacine
A. Propriétés physico-chimiques
1. Structure chimique et relation structure-activité
L'enrofloxacine appartient à la famille des quinolones dont le chef de file, l'acide

nalidixique, fut découvert en 1962. L’enrofloxacine fut synthétisée quant à elle pour la
première fois en 1983.
Les quinolones dérivent fondamentalement de la quinoléine ou bien sont des isostères
de ce noyau. Il s’agit donc de molécules planes, ce qui leur permet de s’intercaler entre deux
chaînes d’ADN. Les quinolones sont classées en trois générations en fonction de leur
structure et de leur activité antibactérienne.
L’enrofloxacine est une quinolone de troisième génération : elle associe dans sa
structure un cycle pipérazine positionné en C7 et un atome de fluor en C6. C’est pourquoi les
quinolones de troisième génération sont aussi appelées fluoroquinolones. C’est aussi la seule
quinolone de cette génération développée spécialement pour la médecine vétérinaire.
Formule brute : C19 H22 F N3 O3

Formule développée : acide 1-cyclopropyl 7-(4’-ethyl-1-pipérazinyl) 6-fluoro1,4-dihydro-4-
oxo-3-quinoléine carboxylique
Masse moléculaire : 359,4 daltons
Figure 1 : Structure chimique de l’enrofloxacine
Les substituants du noyau quinolone sont les supports de différentes propriétés

pharmacologiques (Antras V, 1994) : le groupement cyclopropyle en 1, conjointement au
groupement éthyle en position para du noyau pipérazine, augmente la liposolubilité. Ils
favorisent la distribution du médicament dans les tissus à partir du flot sanguin ainsi que le
passage au sein du milieu intracellulaire.
Le fluor, substituant en position 6, est responsable de l’activité accrue contre les
bactéries à Gram négatif et de l’extension du spectre à certains germes Gram positif dont
Staphylococcus sp. et Streptococcus sp.
Le noyau pipérazine situé en position 7 est à l’origine de l’activité sur Pseudomonas
sp. et certains mycoplasmes. Ce substituant hétérocyclique améliore par ailleurs la distribution
tissulaire et diminue la toxicité pour le système nerveux central.
19
Comme toutes les quinolones de troisième génération, l'enrofloxacine présente un
caractère amphotère dû à la présence d’un hétérocycle azoté saturé et d’un groupement
carboxylique (-COOH).
Les fluoroquinolones présentent aussi des propriétés chélatrices qui participent
notamment à l’activité bactérienne. Ces propriétés ne sont possibles qu’avec certains cations
bivalents comme le magnésium et le cuivre. L’enrofloxacine est donc capable de fixer deux
cations par molécules et ainsi de former des chélates. (Bahri L.E et Blouin A, 1991, Figure 2)
Le tableau I récapitule les relations entre structure et activité. (Barry et al, 2001)
Tableau I : Relation structure/activité des quinolones.
Figure 2 : Chélation des fluoroquinolones.
2. Propriétés physiques
A l’état pur, l’enrofloxacine se présente sous forme d’une substance cristalline,

jaunâtre, inodore et amère, dont le point de fusion est compris entre 222 et 226°C. Le pH
20
d’une solution obtenue par dissolution d’un gramme de composé dans 100ml d’eau distillée
est de 6,4.
L’enrofloxacine est un composé amphotère, qui se comporte comme un acide faible au
pH physiologiques. Les quinolones, sous leurs formes non ionisées, sont généralement
insolubles dans l’eau pure mais hydrosolubles dans les solutions acides (pH<6) et basiques
(pH>9) où elles forment des sels stables. La molécule présente par contre une bonne
liposolubilité. (Antras V, 1994)
Les caractéristiques de la solubilité de l’enrofloxacine dans différents milieux sont
présentées dans les tableaux II et III.
L’enrofloxacine présente une légère instabilité à la lumière, ce qui justifie des mesures
de précaution pour sa conservation : les flacons sont teintés pour limiter les phénomènes de
photolyse. (Cordelette, 2000)
Solutions acides (pH 3 à 5) Eau 0,01

Ethanol 0,2
Acide formique >20
Acide chlorhydrique 0,1 N 0,17
Acide acétique >20
Soude 1 N 1,19
Acide propionique >20
Acide lactique >20
Acide chlorhydrique >20
Solutions basiques (pH>
11)
Soude >10
Potasse >30
Alcool benzylique >20
Tableau II et Tableau III : Solubilité de l’enrofloxacine en g/100ml à 20°C dans différents milieux.
3. Présentations et formes pharmaceutiques
Il existe aujourd’hui plusieurs spécialités vétérinaires à base d’enrofloxacine

commercialisée à ce jour. Le BAYTRIL® (Bayer Pharma) fut la première spécialité sortie et
fut la seule pendant de nombreuses années. Le BAYTRIL® existe en solution injectable à 5%
d'enrofloxacine à destination des porcins, bovins et chiens, ainsi qu’à 10% pour les bovins.
Les voies d’administrations sont les voies sous-cutanée, intra-veineuse et intra-musculaire. Il
existe en solution buvable à 2.5% à destination des veaux et à 10% à destination des volailles.
BAYTRIL Bolus® est utilisable chez le veau. Enfin BAYTRIL® existe sous forme de
comprimés à diverses doses (15, 50 et 150 mg) et à destination des chats et chiens. Une
utilisation chez les petits mammifères ainsi que chez les psittacidés peut être envisagée.
(Goebel T, 1996 ; Decos de lahitte, 1996). Les excipients utilisés pour les formes injectables
sont le n-butanol (solvant), l'hydroxyde de potassium, et l'eau. La solution injectable est stable
21
avant ouverture pendant 3 ans. Après une première ponction, la conservation est limitée à 28
jours à température ambiante.
Très récemment (juin 2008) est sorti le XEDEN® (SOGEVAL). Il s’agit d’un
délicament à base d’enrofloxacine à destination des carnivores domestiques. Il existe sous 3
dosages différents : 15, 30 et 75mg par comprimé. Le laboratoire revendique une utilisation
en seconde intention.
B. Etude pharmacologique
1. Activité anti-bactérienne
a. Concentrations minimales inhibitrices (CMI)
La CMI, qui représente in vitro l’activité d’un antibiotique que l’on teste vis-à-vis d’un
certain nombre d’espèces bactériennes, s’exprime en mg/l ou en µg/ml. Elle se définit par la
plus petite quantité d’antibiotique, qui, dissout dans 1 ml de culture, est capable d’inhiber la
croissance macroscopique de l’inoculum dans des conditions définies expérimentalement.
Plusieurs travaux ont été réalisés sur l’enrofloxacine et ont permis d’établir les CMI
pour de nombreuses bactéries. Les résultats sont récapitulés dans le tableau 5. (Scheer. M,
1987 a)
Grâce à l’analyse de ces CMI, on peut distinguer différents types de germes :

• Les germes ayant une très bonne sensibilité (en général leur CMI est inférieure à
1 µg/ml) : dans cette catégorie on trouve des bactéries Gram négatif aérobies,
comprenant les Enterobacteriaceae (E.coli, Klebsiella, Proteus.sp, salmonella
sp), Actinobacillus sp, Brucella sp, Haemophilus sp, Leptospira sp, Moraxella
sp, Pasteurella sp et Pseudomonas aeruginosa. Mycoplasma sp, Rickettsia sp,
Coxiella burnetti, Ehrlichia sp sont également sensibles, tout comme la plupart
des Staphylocoques.
• Les germes ayant une sensibilité intermédiaire c'est-à-dire variable et
généralement modérée (CMI entre 1 et 4 µg/ml) : cela concerne Listeria
monocytogenes, Bactéroides sp., certaines Mycobactéries et Treponema
hyodysenteriae.
• Les germes résistants comme Pseudomonas maltophilia ainsi que certaines
bactéries anaérobies.
22
Enrofloxacine Tétracycline
Valeurs CMI (µg/ml), valeurs
Germes sensibles CMI (µg/ml)
moyennes moyennes
E.coli <0.01-0.5 0.06 >64
Klebsiella spp. <0.03-0.5 0.06 >64
Salmonella spp. 0.003-0.5 0.03 >16
Proteus spp. 0.03-0.5 0.25 >16
Serratia marcescens 0.01-1.0 0.12
Citrobacter sp. 0.25-0.5 0.25
Yersinia spp. 0.01-0.04 0.01
Campylobacter spp. 0.03-0.25 0.25
Pseudomonas aeruginosa 0.25-2.0 0.75 >16
Brucella canis 0.1-0.25 0.25 0,2
Bordetella bronchiseptica 0.1-4.0 0.5 >16
Moraxella bovis 0.03-0.05 0.03 1
Haemophilus spp. 0.02-0.5 0.02 1,6
Pasteurella multocida <0.001-0.12 0.008 >16
Pasteurella haemolytica 0.008-0.12 0.06 >16
Vibrio parahaemolyticus <0.01-0.4 0.2
Treponema hyodysenteriae 4.0 4.0
Bacillus cereus 0.06-0.5 0.25
Staph. Aureus 0.03-1.0 0.12 >64
Staph. Hycius 0.01-0.4 0.12
Streptococcus spp. 0.06-4.0 0.75 2
Arcanobact. Pyogenes 0.06-4.0 0.75 16
Listeria monocytogenes 1.0-2.0 1.75 1
Erysipelothrix spp. 0.06-0.1 0.06 0,2
Mycoplasma spp. 0.01-1.0 0.25 0,03-33
Actinobacillus spp. 0.01-0.3 0.03 1
Bacteroides spp. 0.8-12.5 1.6 0,2- 25
Clostridium perfringens 0.2-2.0 0.5 40
Tableau IV: CMI de l’enrofloxacine et de la tétracycline pour quelques espèces bactériennes.
De plus grâce au tableau IV, il est facile de voir que les CMI de l’enrofloxacine sont
très nettement inférieures à celles de la tétracycline. La tétracycline a été prise pour
comparaison car il s’agit d’un antibiotique plus ancien. On remarque donc que les CMI de
l’enrofloxacine sont en moyenne presque toutes inférieures à 1 µg/ml alors que c’est loin
d’être le cas pour la tétracycline (avec de fréquentes CMI > 16 µg/ml). Les CMI de nombreux
germes sont donc plus facilement atteintes avec l’enrofloxacine. (Prescott J.F et Baggot J.D,
1993)
Une fois la CMI déterminée pour la bactérie (la CMI dépend du germe impliqué, et
toutes les souches n’ont pas la même sensibilité au sein d’un même espèce bactérienne), on la
compare à la concentration effective de l’antibiotique in vivo, afin d’évaluer si l’antibiotique
est en mesure de lutter in vivo contre une infection provoquée par cette bactérie.
Dans le cadre de l’établissement de l’antibiogramme d’un antibiotique, par un
laboratoire d’analyse médicale, il est admis que la concentration des antibiotiques aux sites
des infections était équivalente à la concentration sérique moyenne humaine obtenue chez un
individu avec des doses moyennes d’antibiotique. Pour plus de rigueur scientifique, il
conviendrait de comparer cette CMI à la concentration tissulaire de l’antibiotique au niveau
23
de l’organe infecté, en tenant compte des différentes espèces animales : surtout en ce qui
concerne des antibiotiques comme les fluoroquinolones qui ont une très large diffusion
cellulaire et tissulaire et pour qui, donc, les concentrations tissulaires excèdent souvent les
concentrations sériques.
Ainsi les CMI seules ne fournissent qu’une approche bactériologique de l’efficacité
d’un antibiotique ; c’est leur mise en relation avec les différents paramètres
pharmacodynamiques (variation de concentration in vivo en fonction des paramètres
pharmacocinétiques, étude de la bactéricidie temps ou concentration dépendant…) qui va
permettre d’envisager l’efficacité de l’antibiotique.
Cependant, la méthode classique d’évaluation du spectre d’un antibiotique, passe
actuellement toujours par l’appréciation des différentes valeurs des CMI.
b. Spectre d’activité et activité in vivo
Les fluoroquinolones de troisième génération présentent un spectre d’activité large,

étant actives aussi bien sur les bactéries Gram positif que Gram négatif. Elles possèdent en
outre une activité marquée sur les mycoplasmes et sur Pseudomonas aeruginosa. Les
bactéries anaérobies aussi bien Gram négatif (Bactéroides) que Gram positif (Clostridium)
sont naturellement résistantes à toutes les quinolones, de même que les Streptocoques y sont
très peu sensibles.
GRAM POSITIF GRAM NEGATIF

Salmonella P.aeruginosa
Clostridium Staphylocoque Corynébactérium Pasteurella E.coli
Proteus
Klebsiella
1 R R R HS MS R
2 R HS HS HS HS MS
Tableau V : Spectre antibactérien des quinolones

(1 : quinolones de première génération, 2-3 : quinolones de deuxième et troisième génération) d’après
Martindale, 1996
Bactéries Gram négatif aérobies :

L’enrofloxacine est très active sur les Enterobacteriacea, même contre des souches
résistantes aux aminosides et aux céphalosporines (Giguere S, 2006) : l’activité est donc
excellente contre de nombreux germes tel que Escherichia coli, Klebsielle spp., Salmonella
spp., Shigella spp., Yersinia enterocolitica et Proteus spp.
Elle est active aussi sur d’autres bactéries à Gram négatif comme Campylobacter
jejuni, Haemophilus, Actinobacillus spp, Vibrio sp. Elle est également active contre les
Pseudomonas même si cette activité est généralement plus limitée. (Pseudomonas
pseudomallei est même très peu sensible) (Bahri L.E et Blouin A, 1991 ; Brown S.A, 1996 ;
Near T.M, 1988)
24
Bactéries Gram positif aérobies :
Les bactéries à Gram positif sensibles à l’activité de l’enrofloxacine ont, dans
l’ensemble, une sensibilité plus faible à l’enrofloxacine que les Gram négatif. Cependant
l’enrofloxacine présente une bonne activité contre les Staphylocoques même ceux résistants à
la méticilline et à la gentamicine et des staphylocoques multirésistants. (Bahri L.E et Blouin
A, 1991; Boothe D.M, 1994; Brown S.A, 1996; Dalhoff A, 1995)
Actinomyces et Nocardia ne sont généralement pas sensibles aux doses usuelles
d’enrofloxacine.
Le point faible de l’enrofloxacine (et de toutes les fluoroquinolones) réside dans le
manque d’efficacité contre les Streptocoques pathogènes. D’autre part, l’activité contre
Listeria spp. est variable et controversée.
Germes intracellulaires :
Les fluoroquinolones grâce à leur importante diffusion cellulaire et à leur diffusion
dans les phagocytes ont un spectre qui englobe de nombreux germes intracellulaires. On
retrouve donc : Brucella spp., Legionella spp., Chlamydia spp., Mycoplasma spp. et
Rickettsiae spp.
Les mycoplasmes sont d’ailleurs très sensibles à l’enrofloxacine et à l’ensemble des
fluoroquinolones.
Des études in vivo ont montré l’efficacité de l’enrofloxacine contre Ehrlichia canis et
contre Rickettsia rickettsii chez le chien. (Boothe D.M, 1994)
Une étude d’activité anti-infectieuse conduite chez des hamsters inoculés avec
Leptospira icterohaemorragiae montre une efficacité au moins égale à celle de
l’oxytétracycline, résultats confirmés par des mesures de CMI sur 5 sérotypes de Leptospira
interrogans dont le sérotype L.interrogans icterohaemorragiae. (Takashima I et al, 1993 ;
Shalit I, 1990)
Toxoplasma spp. et Leishmania spp. ne semblent pas sensibles à l’enrofloxacine.
Les Mycobactéries :
L’activité contre les mycobactéries est variable notamment en fonction des souches.
Mycobacterium tuberculosis semble sensible contrairement à Mycobacterium avium. La
survenu de résistances pendant le traitement n’est pas rare, c’est pourquoi l’association avec
d’autres molécules actives contre les mycobactéries semble être à privilégier.
c. Etude de l’efficacité in vivo
L’efficacité de l’enrofloxacine a été testée sur différentes espèces de destination et sur

diverses bactéries. Les modèles des différentes maladies sont spontanés ou expérimentaux.
Nous allons donc voir tout d’abord l’efficacité in vivo de l’enrofloxacine chez les volailles
puis chez le veau et enfin chez les carnivores.
Concernant notre travail, l’étude la plus intéressante et la plus complète est celle de
Bauditz. Il a réalisé des essais cliniques sur des poulets et des dindes. Le but de cette étude
était de démontrer l’efficacité de l’enrofloxacine (Baytril®) contre E.coli, Mycoplasma spp.,
Haemophillus paragallinarum, Salmonella spp., Pasteurella multocida et Erysipelothrix
rusiopathiae. L’enrofloxacine était utilisée per os, dans l’eau de boisson. Les animaux sont
infectés expérimentalement et le traitement est initié après l’apparition des symptômes. Les
différents paramètres utilisés pour juger de l’efficacité du traitement étaient cliniques
(mortalité, morbité, poids, consommation de nourriture, prise de boisson), bactériologiques
25
(titre en anticorps et isolement de la bactérie) et pathologico-anatomiques (examen
nécropsiques).
Contre Mycoplasma gallisepticum, l’enrofloxacine se révèlent très efficace
(mycoplasmicide dans 100% des cas) et plus efficace que la tiamuline et la tylosine aussi bien
chez les poulets que chez les dindes. L’enrofloxacine est utilisé à la dose de 50ppm pendant 3
jours.
Des infections expérimentales avec E.coli, seule ou en association avec Mycoplasma
gallisepticum, Salmonella typhimurium ou le virus de la bronchite infectieuse ont également
servi pour étudier l’efficacité de l’enrofloxacine chez les poulets. Administrée à 50 ppm par
jour pendant 3 jours ou à 25 ppm par jour pendant 5 jours, les résultats sont excellents.
L’efficacité s’est révélée toute aussi bonne lors de l’utilisation contre Haemophilus
paragallinarum selon le même protocole. Cette efficacité est aussi largement supérieure à la
celle de la tylosine.
L’efficacité contre Pasteurella multocida est testée chez la dinde. Elle se révèle encore
une fois très bonne. (25 ppm pendant 7 jours)
Dans les infections latentes ou cliniques de salmonellose chez le poulet dues a
S.gallinarum ou S. typhymurium, l’enrofloxacine se montre aussi efficace que se soit à 50
ppm pendant 10 jours ou à 100ppm pendant 5 jours. La bactérie n’est pas réisolée 10 jours
après l’arrêt du traitement que ce soit dans les feces ou au niveau des organes.
Contre S.arizonae chez la dinde les résultats sont excellents (guérison à 100%) après
une administration par voie sous-cutanée de l’enrofloxacine à 0,5mg par oiseau.
L’efficacité est un peu moins bonne contre S. pullorum puisqu’on isole la bactérie
dans 20 % des cas 11 jours après l’arrêt d’un traitement de 6 jours à 100ppm. Cependant ces
résultats sont nettement supérieurs aux résultats obtenus avec de la fluméquine (100ppm
pendant 6 jours) ou bien de la furazolidone (100 ppm pendant 6 jours).
Enfin, l’efficacité de l’enrofloxacine a été étudiee chez la dinde contre Erysipelothrix
rhusiopathiae. L’efficacité avec un traitement à 100ppm est supérieure à celui à 50ppm.
On voit donc que les résultats de l’efficacité in vivo confirment les différentes CMI
trouvées. L’enrofloxacine est donc conseillée pour traiter les colisepticémies, les
mycoplasmoses, le coryza contagieux, les infections bactériennes mixtes et secondaires.
Bactérie Espèce Traitement Efficacité

poulet 50ppm 3ou 5jr "++++" >> tyamuline, tylosine
M.gallisepticum 50ppm 5j "++"
dinde
100 ppm 5jrs "++++"
E.coli poulet 50ppm 3j ou 25 ppm 5j "++++"
"+ I.B virus,
S.typhimurium, poulet 50ppm 3-5j "++"
M.gallisepticum
H.paragallinarum poule pondeuse 50ppm 3j ou 25 ppm 5j "++++ >> tylosine
P.multocida dinde 25ppm 7 j "+++"
S.typhimurium;
poulet 50ppm 10j ou 100 ppm 5j "+++" pas de réisolement de bactéries
S.gallinarum
S.arizonae dinde 0,5 mg/dinde SC "++++"
"++ 20% isolement de bactérie 11 jours
S.pullorum poulet 25,50,100ppm 6 j après le traitement >>
fluméquine, furazolidone
25 ppm "++"
E.rhusopathiae dinde
50ppm "++++"
Tableau VI: Efficacité in vivo de l’enrofloxacine envers différentes espèces bactériennes chez les volailles.
D’après Bauditz, 1987
26
L’ensemble des résultats est récapitulé dans le tableau VI.
L’efficacité de l’enrofloxacine a aussi été étudiée in vivo chez les bovins notamment le
veau. Espinasse et al ont noté une excellente activité de l’enrofloxacine sur des modèles
expérimentaux de colibacillose et de salmonellose chez le veau. (Espinasse J et al, 1987)
Toujours chez le veau Tonquist et Franklin ont également rapporté une excellente
activité de l’enrofloxacine vis-à-vis de Pasteurellose spontanée ou expérimentale. (Tonquist
M et Franklin A, 1986)
Delannoy a réalisé des essais cliniques sur des taurillons et des veaux (enrofloxacine à
5mg/kg/j pendant 3 jours PO chez les veaux et en IM chez les taurillons). L’efficacité clinique
de l’enrofloxacine est jugée très satisfaisante sur Pasteurella haemolytica. Cette efficacité est
appréciée sur des critères sensibles, spécifiques et globaux (Fréquence respiratoire, toux,
température, refus alimentaire, jetage, comportement, analyse nécropsique et bactériennes).
(Delannoy J, 1988)
Sur le même schéma thérapeutique (5mg/kg/j pendant 3jours PO) Floc’h montre que
l’enrofloxacine est efficace sur les gastro-entérites néonatales du veau. Ses différents critères
sont la consistance, le volume et la fréquence des selles ainsi que la température, la
déshydratation, le refus alimentaire et le comportement général. (Floc’h S, 1997)
Savary réalise des essais cliniques sur l’enrofloxacine administrée en sous-cutané sur
des veaux de boucherie atteints de broncho-pneumonie enzootique (BPIE). Il compare
l’efficacité de l’enrofloxacine à l’efficacité de l’Excenel® (ceftiofur, céphalosporine de
troisième génération). L’utilisation de l’Excenel® est reconnue dans le traitement des BPIE. Il
en résulte que l’efficacité est la même que celle de l’Excenel® c’est à dire très bonne vis-à-vis
des germes responsables des BPIE chez le veau de boucherie. (Savary T, 1997)
Rizet quant à lui a aussi comparé l’efficacité de l’enrofloxacine à celle de l’Excenel®
mais sur la pasteurellose chez le veau. L’enrofloxacine à 5mg/kg PO pendant 5 jours est aussi
efficace que le ceftiofur sur les pasteurelloses bovines. (Rizet C, 1994)
Catella a testé l’efficacité in vivo de l’enrofloxacine sur Mycoplasma bovis selon un
modèle expérimental. L’enrofloxacine est efficace contre Mycoplasma bovis à la posologie
habituelle de 5mg/kg pendant 5 jours en sous-cutané. (Catella S, 2003)
Causse démontre expérimentalement que l’enrofloxacine PO est efficace contre
Escherichia coli chez le veau (modèle expérimental de colibacillose chez le veau). (Causse F,
1987)
Chez les carnivores l’efficacité de l’enrofloxacine a aussi été démontrée. Jankowski

montre qu’on obtient 90% de guérison en utilisant l’enrofloxacine (5mg/kg/j PO) sur les
infections du tractus urinaire du chien. Antras quant à elle montre que l’efficacité in vivo de
l’enrofloxacine est similaire à celle de la doxycycline dans le traitement des pathologies
respiratoires supérieures du chat. Le protocole de traitement est de 5mg/kg/j PO pendant 5
jours si l’infection est aigue ou pendant 10 jours si l’infection est chronique. (Jankowski F,
1994)
Okerman et al ont testé l’efficacité in vivo de plusieurs antibiotiques vis-à-vis de

Pasteurella multocida chez le lapin. Ils ont utilisé des souches responsables de sévères
septicémies. Les résultats sont intéressants puisque seule l’enrofloxacine a permis d’obtenir
des guérisons cliniques. Les autres antibiotiques étaient la tétracycline, la spiramycine,
l’érythromycine et l’association sulfamerasine/triméthoprime. L’enrofloxacine était utilisée
per os (par le biais de la boisson). (Okerman L et al, 1990)
27
Dubois montre que l’administration de 5mg/kg/j PO chez les dindes permet non
seulement de lutter contre la mycoplamose de l’adulte mais qu’elle empêche aussi le
développement de Mycoplasma iowae dans les œufs. En effet les concentrations obtenues
dans le blanc et dans le jaune de l’œuf après un traitement oral des dindes sont supérieures
aux CMI de M.iowae et inhibent ainsi leur croissance en protégeant le poussin. (Dubois A.M,
1996)
On voit donc que l’efficacité in vivo de l’enrofloxacine a été étudiée de nombreuses

fois, sur différentes espèces et contre diverses espèces bactériennes.
Ce que l’on peut retenir dans notre objectif de traitement des pathologies respiratoires c’est
l’excellente efficacité in vivo de l’enrofloxacine contre Escherichia coli, Pasteurella sp et
Mycoplasma sp. Les différentes voies d’administrations testées sont celles qui sont le plus
souvent utilisées à savoir la voie per os et sous-cutanées. De plus on remarque que l’efficacité
dépend peu de l’espèce de destination.
d. Etude de la bactéricidie
On distingue chez les antibiotiques deux dominantes comportementales de

bactéricidie :
♦ Antibiotiques concentration-dépendants
Leur vitesse de bactéricidie croit avec la concentration. Leur vitesse de bactéricidie est
généralement élevée. Le facteur principal d’activité sera alors le pic plasmatique, si bien que
l’intérêt thérapeutique résidera dans l’administration d’une dose la plus élevée possible, pour
une fréquence d’administration réduite, la limitation la plus importante étant d’ordre
toxicologique. Par conséquent, afin de prévoir l’activité anti-bactérienne in vivo, le paramètre
fondamentale à envisager, pour un antibiotique concentration-dépendant, est la concentration
maximale (Cmax) et plus précisément le rapport Cmax/CMI dans le tissu qui sera le lieu de
l’infection.
♦ Antibiotiques temps-dépendants
Dans ce cas, l’effet bactéricide atteint, dès la CMI, un maximum d’intensité. L’activité
bactéricide est alors directement liée à la durée d’exposition. La vitesse de bactéricidie est
généralement plus faible que pour les précédents. L’application thérapeutique qui en découle
est le maintien d’une durée pendant laquelle les concentrations plasmatiques seront
supérieures à la CMI du germe considéré, ce qui implique la réadministration de l’antibiotique
dès que les concentrations plasmatiques sont inférieures à la CMI (en pratique cela revient à
diminuer les doses, tout en augmentant la fréquence d’administration). Dans ce cas pour
prévoir l’efficacité de l’antibiotique in vivo, le paramètre principal à envisager est la durée
pendant laquelle la concentration tissulaire se maintient au dessus de la CMI du germe à
combattre. (Puyt J-D, 2004 ; Cordelette R, 2000)
Pour beaucoup d’auteurs l’activité des fluoroquinolones sur germe quiescent et en

multiplication est globalement considérée comme concentration-dépendant. Cependant ces
28
notions ne sont valables que pour un antibiotique et un germe donné (notion de couple). Il est
communément admis en médecine vétérinaire que les fluoroquinolones sont considérées
comme des antibiotiques temps-dépendants vis-à-vis des germes Gram positifs et
concentration-dépendants vis-à-vis des Gram négatifs. (Keck G et Born P.M, 1995)
e. Effet post-antibiotique
Certains antibiotiques qui se fixent sur les bactéries ou sur leur structure intra-
cellulaire, comme c’est le cas pour l’enrofloxacine, continuent d’inhiber le développement
bactérien, alors que les taux sériques sont inférieurs à la CMI. Ainsi, l’effet post-antibiotique,
retrouvé chez de nombreuses bactéries (dont Escherichia coli et Pseudomonas aeruginosa) se
définit comme la période de temps nécessaire à des bactéries, ayant survécu à l’exposition à
un antibiotique, pour reprendre une croissance logarythmique. (Giguère S et al, 2006). Pour
les antibiotiques concentration-dépendants, les administrations à dose élevée et en prise
unique potentialisent la durée de l’effet post-antibiotique ; en revanche pour les antibiotiques
temps-dépendants c’est l’augmentation de la durée de contact qui augmente l’effet post-
antibiotique.
Les fluoroquinolones possèdent un effet inhibiteur persistant sur les germes pendant 3
à 5 heures in vitro. L’effet post-antibiotique, in vitro, dure entre 2 et 8 heures contre E.coli,
Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa et Serratia. (Cordelette R, 2000) Ces valeurs sont
mesurées in vitro et ne doivent pas être extrapolées tel quel in vivo comme une durée d’action
plus longue. Cependant cet effet post-antibiotique apporte une sécurité clinique : si la
concentration de l’antibiotique dans le tissu infecté passe en dessous du seuil d’inhibition,
l’activité sera quand même maintenue.
2. Mécanisme d’action
L’enrofloxacine pénètre dans la cellule à la fois par diffusion transmembranaire et

passage à travers les canaux protéiques en fonction du gradient de concentration et du
gradient électrique. Son pouvoir anti-bactérien est de type bactéricide et met en jeu deux
mécanismes distincts.
L’enrofloxacine bloque la réplication et la transcription de l’ADN. Elle agit sur deux

cibles spécifiques : la topo-isomérase II (ADN gyrase) et la topo-isomérase IV. Ces topo-
isomérases sont des enzymes très conservées dans le monde bactérien mais n’existe pas chez
les organismes supérieurs, ce qui favorise leur inocuité. Ces enzymes modifient la
conformation topologique de l’acide désoxyribonucléique (ADN). Ces enzymes interviennent
dans les phases de croissance et de division cellulaire, ce qui explique en partie l’activité
bactéricide de l’enrofloxacine.
L’ADN gyrase est une métallo-enzyme à magnésium composée de deux sous-unités A

et de deux sous unité B (codées respectivement par les gène gyrA et gyrB) qui ne fonctionnent
que lorsqu’elles sont associées entre elles et au chromosome :
• Les sous-unités A sectionnent et dissocient les brins d’ADN, ce qui permet la mise en œuvre
des processus de réplication, transcription et recombinaison. Puis, elles réparent ces coupures.
• Les sous-unités B permettent le super-enroulement, responsable de l’aspect compact et
ramassé du chromosome bactérien.
C’est la seule enzyme capable d’induire un super-enroulement négatif de l’ADN (en
coopération avec la topoisomérase I) (cf figure 3)
29
Figure 3 : Rôle de l’ADN gyrase
La topoisomérase IV, enzyme membranaire, présente des sous-unités homologues à

celle de l’ADN gyrase (sous-unité C et D codées par les gènes parC et parD). Elle est
responsable de la séparation des brins d’ADN après la réplication. Elle intervient aussi dans la
partition des chromosomes lors de la croissance bactérienne. L’inhibition de la topo-
isomérase IV se traduit par un arrêt lent de la réplication.
Grâce à sa structure plane l’enrofloxacine (comme toutes les quinolones) s’intercale

entre les deux chaînes d’ADN et se lie aux topo-isomérases en formant des chélates
magnésiens. De ce fait la transcription et la réplication sont impossibles, que la bactérie soit
en phase de repos ou de multiplication. De plus, les coupures faites sur les brins d’ADN ne
peuvent plus être réparées. La présence de fragments libres d’ADN induit la formation
d’enzymes protéolytiques. En conséquence, le métabolisme cellulaire est arrêté, et l’action
des enzymes protéolytiques accélère la destruction du germe.
Le schéma général du mode d’action intracellulaire des quinolones proposé par Drlica
et Zhao (1997) est représenté dans la figure 4.
Les complexes formés entre l’ADN et l’ADN-gyrase sont piégés par les quinolones
dans une réaction réversible qui bloque la synthèse d’ADN et la croissance cellulaire.
30
Figure 4 : Mode d’action des quinolones contre l’ADN-gyrase et la topoisomérase IV
3. Résistances
Généralités : (Courvalin, 2008)
Sur le plan génétique, la résistance des bactéries aux antibiotiques résulte soit d’une
résistance naturelle soit d’une résistance acquise. La résistance naturelle ou intrinsèque est un
caractère d’espèce qui touche toutes les cellules de toutes les souches alors que, la résistance
acquise est un caractère qui ne concerne que quelques (ou parfois de nombreuses) souches
d’une espèce donnée.
La résistance naturelle est stable, transmise à la descendance mais pas ou peu
transmissible sur un mode horizontal. Inversement, la résistance acquise est moins stable,
mais elle se propage souvent de façon importante dans le monde bactérien.
Les seules résistances actuellement connues aux quinolones sont de nature
chromosomique ce qui représente un énorme avantage par rapport aux antibiotiques. En effet
les résistances chromosomiques se caractérisent par leur rareté, leur spécificité, leur stabilité
et leur spontanéité. Le taux de mutation chez la plupart des micro-organismes est d’environ
10^-6 à 10^-8. En conséquence, le risque de sélectionner des souches résistantes augmente de
31
façon importante lors de traitement prolongé à des doses insuffisantes ou sur des foyers mal
irrigués.
La résistance à l’enrofloxacine est souvent croisée avec les autres quinolones mais ne
concerne en général pas les autres familles d’antibiotiques.
Il est à noter que l’apparition de souches resistantes à l’enrofloxacine semble rare en
Europe et en Amérique du Nord mais que l’on retrouve dans certains pays d’Afrique du Nord
(Maroc, Algérie) et des pays de l’Europe de l’est des pourcentages de résistances très élevés
(allant jusqu’à 30% des souches d’Eschérichia coli). (Nadeau et al, 2000 ; Raedmonck et al
,1992 ; Sanders et al, 2001 ; Peighambari et al, 1995 ; Mellata et al, 1998 ; Amara et al,
1995 ; Webber M et Piddock L.J, 2000) On peut se demander quelles sont les raisons d’une
telle disparité dans l’apparition de résistance. En fait comme souvent avec les antibiotiques il
s’agit d’une « usure » prématurée. En effet, les pays où l’on note le plus de resistance à
l’enrofloxacine sont les pays où l’enrofloxacine est la plus utilisée (les prix de ventes étant
très bas). Ces résultats prouvent que l’utilisation abusive et non raisonnée des antibiotiques,
contribue à l’apparition rapide de résistances et cela même lorsque les antibiotiques utilisées
sont réputés pour ne pas developper de résistance comme c’est le cas pour l’enrofloxacine.
Mécanismes biochimiques de la résistance : (Euzéby J.P, 2006)
Pour les quinolones, deux mécanismes biochimiques ont été mis en évidence : une
diminution de la perméabilité et surexpression des systèmes d’efflux ainsi que la modification
de la cible.
Des systèmes d’efflux constitutifs ont été identifiés chez de nombreuses bactéries à
Gram négatif. Ces mécanismes d’efflux actif ont été décrits à l’origine chez Escherichia coli
et Pseudomonas aeruginosa. Ils s’exercent vis-à-vis de nombreux antibiotiques dont la cible
d’action est intracellulaire (comme les quinolones) et ils sont qualifiés de pompes d’efflux
multidrogues. L’efflux repose sur une pompe insérée dans la membrane interne et capable
d’éjecter l’antibiotique hors de la bactérie grâce un canal présent dans la membrane externe et
grâce à une protéine de jonction périplasmique. La surexpression du gène responsable de cet
efflux conduit à une diminution de la concentration intracellulaire de l’antibiotique et donc
une résistance de la bactérie à celui-ci.
Des mutations dans le gène gyrA peuvent modifier la sous unité A de l’ADN gyrase et
diminuer l’affinité des quinolones pour leur cible ce qui provoque une résistance croisée, à
des degrés divers, pour l’ensemble des quinolones. In vivo, les mutations du gène gyrA sont
beaucoup plus fréquentes que celles du gène gyrB. Des mutations du gène parC, codant pour
les sous-unités ParC de la topo-isomérase IV ont été mis en évidence chez la poule récemment
et provoquent également un phénotype de résistance aux quinolones. (Le carrou J et al, 2006)
C. Etude pharmacocinétique
La pharmacocinétique est l’étude du devenir, ou métabolisme, des médicaments dans

l’organisme. Son étude est fondamentale, qu’il s’agisse des aspects pratiques de l’utilisation
de ces antibiotiques, ou bien des divers effets indésirables révélés lors de cette utilisation.
(Keck G, 1978b ; Cordelette R, 2000)
Ainsi nous envisagerons successivement chacune des étapes : résorption, distribution,
biotransformation et élimination.
32
1. Posologie
Le schéma thérapeutique optimal de l'enrofloxacine est de 5mg/kg de poids vifs par

jour par voie sous-cutanée pour les bovins et chiens. Il est de 2,5mg/kg de poids vif par jour
chez les porcins. Chez les volailles la posologie optimale est de 10 mg/kg de poids vif et par
jour dans l’eau de boisson. La durée du traitement (proposée par le fabricant) varie aussi en
fonction de l’espèce. Elle est de 3 jours pour les porcins, 5 jours pour les bovins et les
volailles et de 10 jours pour les chiens. (Bayer, 1996)
2. Résorption
La résorption est définie comme l’étape initiale par laquelle les molécules pénètrent
dans la circulation générale à partir d’un lieu d’administration. (Keck G, 1978b)
Quelles que soit la voie et la quinolone en cause, la résorption est très bonne. Ainsi la
voie d’administration a peu d’influence sur la quantité de principe actif libéré et la
biodisponibilité de toutes les fluoroquinolones est relativement élevée. (Cordelette R, 2000)
• Administration per os : en tant qu’acides faibles liposolubles, suite à une

administration per os, les fluoroquinolones (très peu ionisées en milieu acide) sont
facilement résorbées dans l’estomac des carnivores, des porcs et des volailles, un peu
moins bien chez les ruminants et les chevaux.(Brown S.A 1996 ; Paton J.H et Reeves
D.S 1988 ; Wolfson J.S et Hooper D.C 1989 ; Scheer M 1987b). Des études ont aussi
mis en évidence que lors d’une administration orale chez les monogastriques, les
fluoroquinolones étaient également résorbées par le duodénum et le jéjunum.
• Administration parentérale : par voie parentérale, voie exclusive chez les ruminants, la
biodisponibilité est complète pour toutes les fluoroquinolones. En ce qui concerne
l’enrofloxacine, l’absorption après une administration parentérale est la plupart du
temps plus rapide qu’après une administration per os. Les voies intra-musculaire et
sous-cutanée présentent généralement le même profil pharmacocinétique. Après une
injection par voie intra-veineuse, les concentrations sériques initiales, très élevées,
s’aplanissent après 2 heures et deviennent comparable à celles obtenues après une
injection par voie I.M ou S.C.
Les figures 5, 6 et 7 montrent les courbes cinétiques après une administration orale ou
sous-cutanée d’enrofloxacine chez le chien, le veau et le chat. Ces courbes mettent en
évidence le pic plasmatique qui survient entre une et deux heures après l’administration. Cela
permet aussi de se rendre compte que chez le veau une administration à la base de la langue
est très nettement préférable à une administration par le biais du lait reconstitué et que chez le
chat la dose de 5mg/kg est préférable à celle à 2,5mg/kg. (Scheer M, 1987 b)
33
Figure 5 : Cinétique plasmatique sur 24heures après administration par voie orale de difloxacine(----5mg/kg) et
de marbofloxacine (-5mg/kg).
Figure 6 : Cinétique plasmatique sur 24 heures après une administration orale d’enrofloxacine de 2,5mg/kg chez
le veau.
Figure 7 : Cinétique plasmatique chez le veau après une unique administration I.V ou sous-cutané
d’enrofloxacine à 2,5mg/kg
34
Figure 8 : Concentration plasmatique après une administration unique sous cutané chez le chat de 2,5 et 5mg/kg
d’enrofloxacine.
Le suivi des concentrations plasmatiques peut se faire sur plusieurs jours. Cela permet
de vérifier et de valider le schéma thérapeutique. En effet la concentration plasmatique en
enrofloxacine doit se maintenir au dessus des CMI des bactéries pathogènes visées. Chez le
veau un traitement de 3 jours à 5mg/kg par voie orale après une première administration par
voie sous-cutanée apporte de bons résultats et permet de rester au dessus des CMI.
Chez les volailles les deux voies d’administration les plus faciles à utiliser (par le biais
de l’alimentation ou par le biais de l’eau) donne de bons résultats avec des concentrations qui
restent stables même lors d’un traitement long (14 jours). (figures 9, 10 et 11)
Figure 9: Concentrations plasmatiques chez le veau après une administration de 3 fois 2,5mg/kg () et 3 fois
5mg/kg () d’enrofloxacine (SC-PO-PO)
35
Figure 10 : Concentration plasmatiques chez des poulets après une administration via l’eau de boisson
d’enrofloxacine pendant 14 jours à 25,50 et 100ppm.
Figure 11: Concentrations plasmatiques chez des poulets après une administration via la nourriture (ad libitum)
d’enrofloxacine pendant 14 jours à 50 ou 200ppm.
3. Distribution
C’est l’étape où la molécule se répartit dans l’organisme et rejoint les lieux de son
action biologique, la diffusion dans l’organisme étant fonction des différents paramètres
physico-chimiques. (Keck G, 1978b)
Les fluoroquinolones présentent un taux de fixation aux protéines plasmatiques et

tissulaires faible (le taux de fixation aux protéines plasmatiques est généralement compris
entre 10 et 30% suivant les molécules) et sont peu ionisées au pH sanguin. Le passage
transmembranaire est ainsi optimisé, ce qui facilite la diffusion passive et de manière
importante dans les tissus. (Neuman M, 1990) La biodisponibilité est estimée à 85% après
une administration I.V ou I.M chez le mouton. Elle se situe entre 65% et 70% environ après
une administration par voie orale et 95% après une administration par voie intra-veineuse
chez le poulet. (Mengozzi G et al, 1996 ; Anadon A et al, 1995 ; Bayley TA, 1996))
36
a. Volume de distribution
Généralement les fluoroquinolones ont la réputation d’avoir une large distribution. Le

premier témoin de la diffusion tissulaire globale est le Volume de distribution à l’état
stationnaire (Vss, pour sdeady-state volume) : ce volume fictif illustre la diffusion corporelle
d’une substance. Plus le Vss est élevé, plus la molécule correspondante diffuse dans les
organes et les cellules. On admet qu’un Vss supérieur à 0,8 L/kg indique que la molécule
concernée pénètre dans le secteur intracellulaire. Le Vss est variable selon l’espèce. Il est de 2
L /kg chez les poulets (Garcia et al, 1999), de 7,0 L /kg chez le chien (Kunk K et al, 1993),
2,5 L/kg chez le cheval (Bermingham E.C et al, 2000), 1,42 chez la chèvre (Rao G.S, 2001).
On voit que les variations sont importantes suivant les différentes espèces mais que dans tous
les cas la diffusion tissulaire est très élevée.
b. Distribution tissulaire
Dans les organes, la diffusion peut être évaluée par le ratio tissu/plasma, c'est-à-dire le
rapport entre les concentrations tissulaires et plasmatiques. La concentration plasmatique est
la quantité d’antibiotique par volume de sang (en µg/ml), et la concentration tissulaire est la
quantité d’antibiotique par poids d’organe (en µg/g) : ainsi un rapport supérieur à 1 indique
une bonne diffusion dans les organes et les cellules. Ainsi, en fonction des tissus, les
antibiotiques peuvent atteindre des concentrations supérieures à celle du plasma. (Cordelette
R, 2000)
D’une manière générale, les fluoroquinolones ont une distribution tissulaire excellente,
ce qui constitue un des principaux arguments de vente pour les laboratoires car les infections
siègent au niveau des tissus. Les fluoroquinolones sont donc retrouvées à des concentrations
efficaces dans les tissus suivants : liquide céphalo-rachidien, encéphale, synoviale, salive,
sécrétions et muqueuses nasales, sécrétions bronchiques, poumons, os et cartilage, peau, voies
biliaires, voies urinaires, prostate, liquide séminal et milieu intracellulaire. Grâce à leur
liposolubilité, les fluoroquinolones passent également les barrières placentaires et oculaires.
L’enrofloxacine est généralement très concentrée dans la bile, l’urine, le tractus
urinaire, les sécrétions prostatiques, la salive, le foie, les reins et les poumons. Après une
administration intra-musculaire de 2,5mg/kg chez le veau on retrouve par ordre décroissant de
diffusion tissulaire : bile, urine, foie, reins, cœur, poumons. On retrouve ce même ordre chez
le chien, le porc. Les résultats sont illustrés dans la figure 12 (Scheer M, 1987b).
37
Veau Chien
Figure 12 : Concentration de l’enrofloxacine dans les tissus et les liquides biologiques du veau et du chien, 1
heure après une administration intra-musculaire d’une dose unique de 5 mg/kg
En revanche chez le poulet et la dinde, la diffusion tissulaire n’est pas la même. En

effet on a par ordre décroissant de diffusion tissulaire : foie, reins, cœur, rate, muscle,
poumons et sérum. (Scheer m, 1987b)
Tableau VII: Concentration de l’enrofloxacine dans les tissus et les liquides biologiques du poulet après
administration d’une dose unique de 10mg/kg dans l’eau de boisson.
38
c. Distribution cellulaire
Comme nous l’avons ci-dessus, les fluoroquinolones ont un volume de distribution

élevé et une très bonne diffusion tissulaire mais elles sont aussi capables de se concentrer dans
les cellules. Cette capacité à pénétrer dans les cellules représente un avantage majeur. Dans un
premier temps, elles vont pouvoir éradiquer des germes intracellulaires stricts ou facultatifs.
Dans un second temps, elles sont aussi capables de se concentrer dans les cellules
phagocytaires (on y retrouve des concentrations 7 à 14 fois plus élevées que dans le liquide
extracellulaire : macrophage alvéolaires, granulocytes neutrophiles, leucocytes
polymorphonucléaires). Il s’agit d’un atout extrêmement intéressant étant donné que tout
processus infectieux se développant dans un tissu entraîne une réaction inflammatoire avec
une arrivée massive de polynucléaires au site de l’infection. Ces polynucléaires se comporte
alors comme des transporteurs naturels de fluoroquinolones au sein des tissus infectés. (Neer
T.M, 1988 ; Boothe D.M, 1994)
Ainsi la diffusion dans l’organisme des fluoroquinolones est un atout thérapeutique et

prophylactique considérable, le principe étant d’obtenir des concentrations tissulaires
supérieures au CMI des germes à l’origine de l’infection.
d. Biotransformation
Les biotransformations correspondent aux transformations biochimiques d’un

xénobiotique sous l’action des diverses enzymes de l’organisme. (Keck G, 1978b)
Le nombre de biotransformation est réduit pour les fluoroquinolones et on distingue

deux types principaux de biotransformations : les hydroxylations des cycles conduisant à des
métabolites qui conservent en général toute leur activité biologique et les
glucuronoconjugaisons qui conduisent à des métabolites hydrosolubles facilement
éliminables. (Puyt J-D, 2004)
Le mécanisme prépondérant de biotransformation de l’enrofloxacine est le N-
déalkylation qui produit alors la ciprofloxacine (principal métabolite actif). La fraction
d’enrofloxacine métabolisée en ciprofloxacine dépend de la voie et de l’espèce. Par exemple
chez le mouton 35% de l’enrofloxacine administrée par voie I.V est métabolisée en
ciprofloxacine et c’est 55% après injection I.M. Chez les poulets cette transformation est
encore plus importante (Mengozzi G et al, 1996 ; Anadon A et al, 1995).
La ciprofloxacine fait ensuite l’objet d’une oxydation de son cycle pipérazine,
formant ainsi des oxo-métabolites plus facilement éliminables. Ces oxo-métabolites sont les
métabolites qui interagissent le plus fortement avec le métabolisme de la théophylline, par le
phénomènee d’inhibition compétitive du cytochrome P450, ce qui limite la déméthylation de
la théophylline. Elle diminue également l’élimination de la caféine. (Lecoeur-Bitchatchi S et
Kolf-Clauw M, 1999) (Nous reverrons ça plus en détail dans les interactions
médicamenteuses)
39
e. Elimination
L’enrofloxacine est excrétée par voie biliaire, urinaire et fécale.

L’excrétion biliaire peut donner lieu à un cycle entéro-hépatique d’importance
variable. Ce cycle semble très important chez le chien et ce recyclage dépend de l’action des
β-glucuronidases, contenues dans le tractus gastro-intestinal.
L’excrétion rénale, généralement prépondérante varie aussi en fonction des espèces,
mais dans tous les cas la filtration glomérulaire a lieu pour la fraction non liée de la molécule.
30 à 40% de l’enrofloxacine est éliminée par voie rénale, (cette proportion montant à 60%
pour la ciprofloxacine dans de nombreuses espèces).
La sécrétion tubulaire active intervient de façon variable selon les fluoroquinolones
mais il semble que celle-ci soit importante dans le cas de la ciprofloxacine.
L’élimination de l’enrofloxacine dans le lait est généralement faible : 0,2% de la dose

totale administrée à des vaches laitières quelque soit la voie d’administration. Cette
élimination est très rapide. En effet 48 heures après administration d’enrofloxacine par voie
I.V celle-ci est indétectable dans le lait. (Lecoeur-Bitchatchi S et Kolf-Clauw M, 1999)
Le temps de demi-vie plasmatique varie en fonction des espèces : il est de 3 à 5 heures

chez le chien après une administration par voie sous-cutanée et de 2 à 3 heures après une
administration par voie orale. Chez le chat il est de 3 à 4 heures. Le temps de demi-vie
plasmatique est de 5 à 6 heures chez le veau et de 6 à 7 heures chez le porc. Chez le poulet
cette demi-vie oscille entre 2 et 4 heures après une administration orale et entre 2 et 6 heures
après une injection sous-cutanée. A noter que chez la dinde ce temps de demi-vie n’est que de
1,4 heure. (Scheer M , 1987b)
D. Toxicité, effets indésirables et interactions médicamenteuses
1. Toxicité aigue
L’enrofloxacine utilisée sur des animaux de laboratoire (rat, souris, cobaye) à des
doses élevées (10 fois la dose thérapeutique) n’a entraîné aucun effet sur la composition
chimique, les taux de glucose et de triglycérides dans le sang. L’urine et les excrétions
électrolytiques demeurent inchangées, excepté une augmentation de la concentration de
potassium pour des doses supérieures à 100mg/kg. Des investigations au niveau du système
nerveux central n’ont démontré aucune modification de comportement, si ce n’est une légère
stimulation de la mobilité spontanée pour des doses supérieures à 100mg/kg. En outre ces
études toxicologiques n’ont montré aucune influence sur le système cardio-circulatoire.
(Altreuther P, 1987 ; Vanberg N.E.M, 1995)
Lors d’expérimentations menées sur des rats, souris et lapins, on s’aperçoit que
l’enrofloxacine présente une très faible toxicité aigue après administration unique per os et un
peu plus élevée après administration par voie intra-veineuse. En effet la DL50 chez la souris et
le rat per os sont supérieures à 5000mg/kg alors qu’en I.V elle est à peu près égale à
200mg/kg. Chez le lapin per os elle est comprise entre 500 et 800mg/kg (Altreuther.P, 1987).
Les résultats sont indiqués dans le tableau VIII. On remarque que par voie orale
l’enrofloxacine possède un index thérapeutique élevé.
40
Tableau VIII : Toxicité aigue après administration orale et parentérale chez plusieurs espèces.
2. Toxicité chronique et subaiguë
Ce type de toxicité se manifeste cliniquement de façons différentes.
a. Toxicité articulaire
Selon certains auteurs, boiteries et myalgies sont des effets indésirables pouvant être
rencontrés chez les jeunes suite à l’administration de fluoroquinolones. (Lecoeur-Bitchatchi S
et Kolf-Clauw M, 1999) Des premières quinolones aux quinolones de dernières générations,
toutes les molécules possèdent un potentiel chondrotoxique et sont susceptibles d’induire des
arthropathies dégénératives chez des animaux juvéniles sur toutes les articulations
diarthrosiques. La dégénérescence cartilagineuse est ainsi le principal effet indésirable
rapporté chez les animaux en croissance pour l’enrofloxacine notamment lors de traitements
prolongés. (Boothe D.M, 1994 ; Anadon A, 1992) Cette chondrotoxicité, typiquement
localisée au niveau de la zone intermédiaire des cartilages épiphysaires-articulaires, induit des
lésions d’arthropathie érosive non-inflammatoire. Globalement toutes les espèces en
croissances sont sensibles à cette chondrotoxicité, néanmoins le chien semble de loin l’espèce
la plus sensible. Cet effet indésirable apparaît principalement chez les grandes races et les
races géantes, lors de leur phase de croissance rapide c'est-à-dire vers l’age de 3 mois. Chez
les jeunes chiens en croissance, ces troubles peuvent apparaîtrent dès le deuxième jour de
traitement (à des doses plus élevées que les doses thérapeutiques) avec des manifestations de
boiteries et de souffrances.
Certains auteurs signalent que l’enrofloxacine administrée par l’intermédiaire du lait
de jabot à des oisillons provoquent des retards de croissances et des lésions cartilagineuses
irréversibles dose-dépendantes. (Boothe D.M, 1994 )
Ainsi le laboratoire commercialisant l’enrofloxacine indique dans ces contre-
indications : « Ne pas administrer chez les jeunes chiens âgés de moins de 12 mois (petites
races) ou moins de 18 mois (grandes races) en raison d’une altération possible des cartilages
de conjugaison chez les chiots en croissance. » « Ne pas administrer chez les chats de moins
de 3 mois ou pesant moins de 3 kg ».
Cependant il faut noter que ces effets indésirables se rencontrent lors de traitement de
longue durée à des doses supérieures aux doses thérapeutiques (par exemple chez le chien :
15mg/kg pendant plus d’un mois).
41
b. Neurotoxicité
Les quinolones sont connues pour posséder un effet convulsivant, cependant les
fluoroquinolones semblent être bien tolérées sur ce plan, et des effets sur le système central
n’ont été notés chez le chien qu’à des doses importantes ou sur des chiens déjà traité pour de
l’epilepsie (rare).
Chez les animaux (en particulier les carnivores) ces effets neurotoxiques se traduisent
par une baisse d’activité locomotrice et des convulsions. Chez le chien une augmentation de
l’incidence de troubles nerveux a été rapportée suite à l’administration d’enrofloxacine et des
troubles convulsifs ont été rapportés chez un chien lors d’administration de 10mg/kg
d’enrofloxacine. Chez le chat la dose doit être supérieure à 50mg/kg pour qu’apparaissent des
signes neurologiques.
On note donc que, comme pour la chondrotoxicité, la neurotoxicité a été démontrée
mais à des doses non thérapeutique ce qui impose bien sûr la prudence mais qui ne fait pas de
cette molécule une molécule très neurotoxique.
c. Toxicité rénale
L’enrofloxacine atteint d’importantes concentrations dans l’urine. La solubilité du

produit étant minimale pour des pH compris entre 6 et 9, on peut observer des cristaux en
aiguilles dans le tractus urinaire lors de l’administration de doses dépassant 50 à 100mg/kg.
Chez les animaux insuffisants rénaux le risque de cristallurie est majoré tout comme chez des
individus déshydratés. Il faudra donc veiller à une bonne hydratation des animaux traités avec
des fluoroquinolones. Il faut noter que cette cristallurie ne semble pas porter à conséquence
puisque les études de toxicités effectués chez le rat, le chien et le chat n’ont pas permis de
mettre en évidence une quelconque toxicité rénale. (Antras V, 1994)
d. Modifications hématologiques
Des anémies et altérations de la coagulation sanguine ont été décrites chez différentes
espèces animales suite à l’administration de fluoroquinolones. Ces troubles surviennent très
rarement mais sont susceptibles d’intervenir à des doses thérapeutiques. Par ailleurs on peut
observer une baisse de l’hématocrite et du taux de protéines sériques, en particulier des
globulines. Cependant la gravité de ces troubles est considérée comme modérée.
e. Toxicité testiculaire
Des chiens traités pendant 3 mois par de la norfloxacine, molécule voisine de

l’enrofloxacine, ont présenté une atrophie testiculaire. Le mécanisme, inconnu, pourrait
mettre en jeu des facteurs neuro-endocriniens. Aucune étude comparable n’est disponible à ce
jour pour l’enrofloxacine, mais on a mis en évidence un défaut de maturation des
spermatozoïdes chez des rats traités durant 13 semaines avec 5000 ppm dans leur ration (soit
environ 630 mg/kg !).
42
3. Embryotoxicité, tératogénicité et fonction de reproduction
Des études menées chez le rat ont montrés que l’administration quotidienne
d’enrofloxacine à une femelle gravide du sixième au quinzième jour de gestation n’avait mis
en évidence aucun effet tératogène (la plus forte dose étant 875mg/kg). On note toute de
même une diminution du poids et de la taille des produits dans les groupes recevant plus de
210mg/kg. Dans le lot recevant la plus haute dose on note même une embryotoxicité. Il faut
cependant relativiser ces résultats car aucun n’effet embryotoxique ou tératogène n’a été
montré à des doses thérapeutiques sur les animaux de destination. (Altreuther.P, 1987)
Chez les carnivores des études toxicologiques de longue échéance, menées chez des
chiens traités avec des fluoroquinolones, ont montré des effets abortifs (Lecoeur-Bitchatchi S
et Kolf-Clauw M, 1999)
4. Cytotoxicité
Les fluoroquinolones utilisées en médecine vétérinaire sont bien tolérées chez les
animaux. Elles ont une toxicité considrée comme nulle envers les cellules eucaryotes. Ceci est
principalement à mettre en relation avec la forte sélectivité des fluoroquinolones pour les
topoisomérases bactériennes, leur affinité pour les topoisomérases des cellules eucaryotes
étant 100 à 1000 fois moindre. (Cordelette, 2000)
Compte tenu du mode d’action des fluoroquinolones, l’étude de leur potentiel

cancérogène et mutagène revêt une importance considérable. Des tests in vitro et in vivo ont
été réalisés sur plusieurs fluoroquinolones. Malheureusement l’enrofloxacine n’est pas la plus
étudiée. Ses effets mutagènes ont été explorés par Altreuther in vitro sur des cellules d’ovaires
de hamster : cette étude n’a montré aucun effet mutagène. Cependant la ciprofloxacine, la
norfloxacine, l’ofloxacine et la péfloxacine ont été testées in vitro sur des cellules de rat et les
résultats sont positifs quant à leur effet cancérigène. Toutefois pour la ciprofloxacine et la
norfloxacine ces résultats se sont avérés négatif in vivo. (Vanberg N.E.M, 1995)
5. Effets indésirables
a. Effets sur le tractus digestif
Aux doses thérapeutiques (administrées par voie orale ou parentérale) les principaux
effets indésirables engendrés par l’enrofloxacine sont des troubles gastro-intestinaux tels que
nausées, vomissements et diarrhées. Les surdosages favorisent l’apparition de ces troubles.
b. Effets cardio-vasculaires
L’injection I.V de 10 à 30 mg/kg d’enrofloxacine à des animaux anesthésiés (chiens et

chats) ainsi que l’administration orale de très fortes doses (supérieure à 120mg/kg)
provoquent une tachycardie et une hypotension probablement dues à une libération
d’histamine. (Antras V, 1994)
c. Troubles cutanés
L’administration d’enrofloxacine sous forme injectable semble être susceptible de

causer une inflammation locale (cutanée ou musculaire) c’est pourquoi il est généralement
43
recommandé par le fabricant de limiter les administrations parentérale à une injection.
Cependant cet effet n’est pas systématique.
Chez les ruminants, des injections par voie intra-veineuse d’enrofloxacine sont
susceptibles d’induire des phlébites et des thromboses. Les signes d’intolérance locale suite à
l’administration par voie intra-musculaire semblent être plus rares.
Outre les douleurs engendrées et le remaniement du tissu musculaire des animaux de
rente, le principal inconvénient de cette inflammation est la diminution de la biodisponibilité.
(Cordelette R, 2000)
6. Interactions médicamenteuses
Les interactions médicamenteuses ont très rarement fait l’objet d’études chez les
animaux, en effet la grande majorité des études est réalisée chez l’homme. Cependant compte
tenu des analogies métaboliques existant entre l’homme et l’animal, l’étude de ces
interactions présente un grand intérêt en médecine vétérinaire.
a. Modulation de la biodisponibilité
Les modifications concernant la biodisponibilité de l’enrofloxacine suite à des

interactions avec d’autres molécules sont dues principalement aux propriétés physico-
chimiques de celle-ci. En effet la résorption gastrique est diminuée par les cations bivalents
compte tenu de l’activité chélatrice de l’enrofloxacine. De même l’absorption concomitante
de lait diminue la biodisponibilité de l’enrofloxacine : les minéraux contenus dans le lait
peuvent être à l’origine de réaction de chélation et l’absorption s’en trouve amoindrie. De
même l’absorption est nettement diminuée en présence d’aliments. (Hoogkamer J.F.W et
Kleinbloesem C.H, 1995)
Les anti-acides contenant de l’hydroxyde d’aluminium ou de magnésium diminuent et
retardent aussi l’absorption de l’enrofloxacine (toujours à cause de réactions de chélations) si
bien qu’il faut respecter un délai de deux heures entre la prise de ces deux molécules.
D’autres anti-acides agissant par inhibition des récepteurs H2 à l’histamine (comme la
ranitidine) diminuent aussi l’absorption d’enrofloxacine : c’est la modification du pH, donc de
l’ionisation, qui est à l’origine d’une biodisponibilité moindre.
Par contre le métoclopramide, en accélérant la vidange stomacale et en augmentant la
motilité intestinale, réduit le temps nécessaire pour atteindre le pic plasmatique.
De telles associations sont donc à éviter compte tenu du risque d’échec thérapeutique
qu’elles peuvent engendrer.
De plus, les propriétés physico-chimiques ne sont pas les seules à être responsables
des phénomènes d’interaction médicamenteuse : en effet l’action des fluoroquinolones au
niveau de certains récepteurs est également importante à considérer. Le fonctionnement du
système nerveux est ainsi concerné par l’interaction des fluoroquinolones avec les anti-
inflammatoires non-stéroidiens (AINS).
44
b. Anti-inflammatoires non-stéroidiens
L’administration concomitante des fluoroquinolones avec certains AINS peut abaisser

le seuil convulsivant de certains animaux. L’association des fluoroquinolones avec les AINS
peut être considérée comme épileptogénique. Cependant ces effets sont à nuancés car ils
apparaissent préférentiellement avec le fenbufène (et surtout son métabolite), AINS qui n’est
pas utilisé en médecine vétérinaire. De plus les fluoroquinolones possédant des cycles
pypérazinyl non substitués sont les plus concernées par ces interactions, ce qui n’est pas le cas
de l’enrofloxacine mais de son métabolite. (Bryskier A et Chantot J.F, 1995)
Des mesures sur la croissance in vitro de certaines bactéries comme E.coli,

Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae en présence d’acide acétylsalicylique et
salicylique à des doses thérapeutiques (chez l’homme) ont été réalisées et ont montré que ces
anti-inflammatoire favorisaient le développement d’une résistance aux quinolones.
Cependant cette observation n’a pas été vérifiée in vivo.
Ainsi l’administration de fluoroquinolones et d’anti-inflammatoires non stéroidiens

doit être envisagée avec précaution par le clinicien ; il en est de même lors de l’association de
fluoroquinolones avec des molécules métabolisées par certaines isoenzymes du cytochrome
P450.
c. Xanthine
Puisque les fluoroquinolones présentent une bonne activité in vitro face aux bactéries
Gram positif et Gram négatif et montrent une bonne diffusion dans les sécrétions bronchiques
et le tissu pulmonaire, le clinicien peut être amené à les associer avec des broncho-dilatateurs,
comme la théophylline, notamment dans le traitement de bronchite chronique.
Or les fluoroquinolones (surtout lorsqu’elles sont administrées de façon répétée)
interfèrent avec le métabolisme de la théophylline, ce phénomène s’étendant aussi à la
caféine, l’aminophylline et l’étamiphylline. (Brown S.A, 1996) Ces associations sont donc
potentiellement capables d’augmenter les taux sériques de ces molécules et par conséquent de
majorer leurs effets indésirables. Le mécanisme semble être du principalement à une
inhibition compétitive des biotransformations et plus particulièrement de la déméthylation de
la théophylline par des enzymes du cytochrome P450. (Anadon A, 1992)
Chez le chien, des études récentes ont permis de prouver que l’administration de doses
thérapeutiques d’enrofloxacine était capable d’inhiber directement l’activité des isoenzymes
IA1 et IA2 du cytochrome P450. Il conviendra donc de prendre des précautions lors
d’administration concomitante d’enrofloxacine avec des médicaments métabolisées par ces
isoenzymes ; c’est notamment le cas de molécules telles que les phénothiazines, la
phénacétine et la warfarine. Cette étude portant sur le cytochrome P450 révèle aussi que
l’enrofloxacine stimule modérément, aux doses thérapeutiques, l’activité et le contenu des
isoenzymes IIB : cette stimulation aurait des retentissements extrêmement limités.
(Vancutsem P.M et Babish J.G, 1996)
Par ailleurs l’activité des fluoroquinolones sur les enzymes du cytochrome P450 est
favorisée par le grand volume de distribution des molécules concernées et par les fortes
concentrations tissulaires hépatiques atteintes : chez le chien, l’enrofloxacine se retrouve dans
le foie à des concentrations supérieures aux concentrations hépatiques d’un facteur égal à 6,4.
Ce type d’interaction est d’avantage marqué chez les animaux âgés.
45
Il est donc conseillé de diminuer les doses de théophylline, en cas d’administration
concomitante à l’enrofloxacine. De plus compte tenu de l’existence de cette interaction avec
le cytochrome P450, il semblerait logique d’éviter l’administration conjointe de médicament
se métabolisant par voie hépatique et présentant un index thérapeutique bas, avec
l’enrofloxacine. Cela semble être le cas avec les anticoagulants.
d. Antibiotiques ionophores
Les polyéthers ionophores constituent un ensemble d’antibiotiques doués d’une

activité antibactérienne et anticocidienne. Ils sont très largement utilisés en
antibiosupplémentation en élevage de volailles comme anticoccidien de prévention des
coccidioses aviaires. Les polyéthers ionophores constituent le groupe d’anticoccidiens le plus
utilisé en prévention, ceci en raison de l’absence quasi-complète de résistances. Le monensin
est le plus utilisé. (Puyt J.D, 2004)
Il existe des interactions entre l’enrofloxacine et les antibiotiques ionophores. En effet
une étude a montré que l’administration concomitante d’enrofloxacine (10mg/kg) et de
monensin (100mg/kg d’aliment) per os pendant 3 jours consécutifs entraînait une diminution
d’activité de l’aniline hydroxylase à partir du troisième jour de traitement. Cette diminution
est par ailleurs rapidement réversible. Cette association ne produit aucune modification au
niveau du cytochrome b5 par contre on note une élévation importante de la créatine kinase
(CK), l’alanine amino transférase (ALT) et l’aspartate amino transférase (AST).
Cette étude démontre donc la réversibilité de l’inhibition de l’activité des enzymes du
cytochrome P450 par l’enrofloxacine ce qui se traduit par une augmentation des CK, AST,
ALT lors de la coadministration avec le monensin chez les volailles. (Sureshkumar V et al,
2004)
Il faudra donc veiller à ne pas administrer d’antibiotiques ionophores en même temps
que l’enrofloxacine à cause de ce risque d’inhibition du cytochrome P450. On peut tout de
même noter qu’il s’agit d’une contre-indication relative et non pas absolue comme l’est
l’association antibiotiques ionophores/tiamuline chez la dinde et le cheval.
e. Antivitaminiques K1 coumariniques
Ce ne sont pas des molécules qui sont utilisée couramment en thérapeutique

vétérinaire mais elles représentent surtout un point important en toxicologie lors de l’ingestion
de raticides coumariniques.
La pharmacovigilance humaine rapporte que les effets de ces anticoagulants sont
augmentés lors d’association avec l’ofloxacine (fluoroquinolone). (Brown S.A, 1996)
Cette interaction est aussi dû à une inhibition de l’activité d’enzymes du cytochrome
P450. Des modifications de fixation aux protéines interviendraient aussi.
Il est important de tenir compte des interactions cliniques lors de la pratique de la

médecine vétérinaire. On doit donc, dans la mesure du possible, éviter d’associer
l’enrofloxacine à des médicaments à métabolisme hépatique important et ayant un index
thérapeutique bas. Cependant il ne faut pas oublier que l’enrofloxacine fait partie tout de
même d’une famille d’antibiotiques peu toxique.
46
II. Etude pharmacologique et toxicologique de la colistine
1. Structure chimique
La colistine, aussi appelée polymyxine E, appartient à la famille des antibiotiques

polypeptidiques et plus précisément à celle des polymyxines. Elle a été extraite pour la
première fois par Y. Koyama et al, de cultures d’un bacille mésophile sporulé isolé du sol au
Japon. C’est un décapeptide constitué par :
- un hexapeptide cyclique formé de quatre molécules d’acide α-γ-diaminobutyrique
(DAB), de deux molécules de D leucine et d’une molécule de thréonine.
- une chaîne latérale linéaire formée de molécules d’acide α-γ-diaminobutyrique liées
entre elles, d’une molécule de thréonine et portant sur la fonction amine libre du dernier acide
DAB un acide gras saturé (acide méthyl-6-octanoïque).
La colistine (et toutes les polymyxines), grâce à sa chaîne alkyle terminale possède un
caractère hétéropolaire avec une partie lipophile, la chaîne alkyle terminale, et une partie
hydrophile, la partie peptidique de la molécule. Cette structure lui confère des propriétés
tensio-actives.
Figure 13 : Structure de la colistine
On remarque la présence de la D-leucine, les acides aminés de la série D étant

exceptionnels dans les composés naturels organiques.
On note aussi la présence de l’acide DAB qui est spécifique du groupe des
polymyxines.
47
La colistine sulfate (CS) et la colistine méthane-sulfate de sodium (CMSS), se

présentent sous la forme de poudre microcristalline blanche ou légèrement jaunâtre, inodore et
de saveur légèrement amère.
Elles sont très solubles dans l’eau (40%) et insoluble dans l’alcool, l’acétone et les
solvants organiques. (Puyt J-D, 2004)
Elles résistent bien à la chaleur à l’état sec (100°C à 250°C)
La colistine, comme tous les antibiotiques polypeptidiques, se caractérise par des

propriétés de bases fortement ionisées (pKa=10,4). La protonisation des polymyxines en
solution aqueuse permet à ces antibiotiques de se comporter comme des surfactifs, ou
détergents cationiques, ce qui explique leur mode d’action, leur activité antibactérienne et leur
toxicité.
3. Présentations et formes pharmaceutiques
La colistine est utilisée en présentation injectable sous forme de solutions aqueuses de

sulfate (sulfate de colistine). La colistine est présentée dans de nombreuses spécialités
vétérinaires sous des formes pharmaceutiques variées : comprimés, solutions buvables et
surtout sous formes locales : tablettes, crèmes mammaires, crème cutanée ou auriculaire ainsi
que collyres.
B. Etude pharmacologique
1. Activité anti-bactérienne
a. Spectre d’activité
La colistine, antibiotique bactéricide, possède un spectre d’activité réduit. En effet, elle

est uniquement active sur les bactéries Gram négatif. Elle présente d’ailleurs une excellente
activité vis-à-vis d’Escherichia coli et de Pseudomonas. La colistine n’est pas active vis-à-vis
des bactéries anaérobies ni des mycoplasmes.
GRAM POSITIF GRAM NEGATIF

Staphylocoque Salmonella P.aeruginosa
Clostridium Corynébactérium Pasteurella E.coli
Streptocoque Proteus
Klebsiella
1 R R R HS HS MS
2 HS HS HS R R R
Tableau IX : Spectre antibactérien des antibiotiques polypeptiques

(1: polymyxines -2: bacitracine, thiostrepton)
HS: espèces habituellement sensibles, MS:modérément sensibles, R: résistantes
48
b. Concentrations minimales inhibitrices
En raison de la mauvaise diffusion de la colistine et des sels, la méthode des disques

ne pourra pas être utilisée quantitativement : elle ne donnera qu’une indication qualitative
(germe sensible, germe résistant ou intermédiaire). La CMI d’un germe sera donc
nécessairement précisée par des méthodes de dilution en milieu solide (agar).
Pour les germes sensibles, la CMI varie en fonction des souches, mais pour la plupart,
elles sont inférieures à 1µg/ml. Le tableau X présente les CMI établies pour différents
germes.
GERMES SENSIBLES COLISTINE

(µg/ml)
Escherichia, coli 0,01 - 4

Klebsiella pneumoniae 0,01 - 8
Enterobacter 0,25 - 4
Citrobacter spp 0,5 2
Salmonella sp 0,01 - 4
Shigella sp 0,12 - 16
Yersinia spp 0,25 - 16
Pseudomonas aeruginosa 0,12 - 8
Aerobacter aerogenes 0,5 - 4
Haemophilus 0,5 - 2
Bordetella bronchiseptica 0,01 - 4
Pasteurella multocida 0,4
Neisseria 0,8 - 6,2
Aerobacter 0,4 - 3,1
Proteus spp >128
Tableau X : CMI (µg/ml) de la colistine pour quelques espèces bactériennes
Les bactéries d’importance pathologiques les plus sensibles à la colistine sont :

Escherichia coli, Salmonella spp., Klebsiella spp., Pseudomonas aeruginosa et Aerobacter
aerogenes.
c. Bactéricidie
La cinétique de bactéricidie de la colistine n’a pas été étudiée. En revanche l’activité

de la polymyxine B est concentration-dépendante et apparaît être proportionnelle au ration
AUC/CMI (aire sous la courbe sur la concentration minimale inhibitrice (Tam et al, 2005).
Etant donné la proximité de ces molécules au niveau de leur activité antibactérienne on peut
supposer que la colistine est concentration dépendante.
2. Mécanisme d’action
La colistine a une activité bactéricide très rapide qui s’exerce à la fois vis-à-vis des
bactéries en phase de repos et sur les bactéries en phase active de multiplication. Les
polymyxines, grâce à leur structure hétéropolaire, agissent de façon non spécifique comme
des tensio-actifs cationiques au niveau de la membrane externe de la paroi des bactéries à
49
Gram négatif. Elles agissent par interaction hydro et électrostatiques avec les phospholipides
(PL) et la fraction lipidique A des lipopolysaccharides perturbant ainsi le fonctionnement et la
perméabilité membranaire. Plus précisément, les polymyxines entraînent des modifications
morphologiques comme la formation de vésicules, puis la membrane cytoplasmique est
atteinte, ce qui provoque la fuite de substances intracellulaires et la mort des bactéries.
(Neuman M, 1979 ; KawamataJ et NakajimaK,1965)
La connaissance de ce mécanisme d’action permet d’expliquer la toxicité élective des
polymyxines pour les cellules riches en polylyposaccharides, la possibilité de résistance
adaptative (rare) de certaines souches bactériennes par diminution du taux d’acides gras
insaturés dans les polylyposaccharides membranaires, et l’inhibition des endotoxines
bactériennes (qui sont des lypopolysaccharides (LPS)). Cette dernière propriété, essentielle
sur le plan thérapeutique, sera développée plus loin.
3. Résistances (Maure D, 1986)
Les résistances innées :
Les bactéries Gram positif sont insensibles aux polymyxines même si la composition
de leur membrane cytoplasmique ne diffère que de très peu de celles des Gram négatif. Leur
paroi, constituée essentiellement de peptidoglycanes et d’acides teichoïques, donc très pauvre
en LPS et PL, rend impossible toute liaison avec ces antibiotiques et par là même toute action
antibactérienne.
Sogaard attribue la résistance de Protéus mirabilis et probablement d’autre bactérie à

Gram négatif soit à l’absence de fixation des polymyxines sur leur parois, soit au rôle de
verrou que jouerait l’espace périplasmique de ces bactéries envers les polypeptides.
La résistance naturelle des cellules des mammifères semble déterminée par la présence
d’une quantité importante de lécithines et de sphingomyélines, phospholipides qui ne se lient
pas suffisamment aux polymyxines.
Les résistances acquises :
La résistance acquise, que ce soit in vitro ou in vivo est une éventualité survenant
rarement quelle que soit l’espèce bactérienne envisagée. Les études effectuées montrent que
cette résistance est adaptative ou phénotypique et réversible : elle correspond à une altération
de l’architecture de la paroi bactérienne. En outre elle est d’apparition lente.
Cependant récemment des résistances acquises ont été mis en évidence vis-à-vis de
Pseudomonas aeruginosa. Même si le mécanisme n’a pas été élucidé, cette résistance semble
résulter de la perte du LPS ou du remplacement d’une protéine de la membrane externe par du
magnésium. (Tam et al, 2005) Chez l’homme on retrouve des résistances acquises vis-à-vis de
Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumanii et Klebsiella pneumoniae. (Harvley J.S et
al, 2008 ; Matthaiou D.K et al, 2008)
Le déterminisme de cette modification est uniquement chromosomique, le plus
souvent à un seul échelon. La résistance plasmidique ou extra chromosomique n’a jamais été
démontrée.
50
Les raisons d’absence d’usure de la colistine tiennent donc à la nature même de la
résistance, qui, comme nous l’avons vu est adaptative : soit parce que la transmission de cette
résistance par plasmides reste sans effet compte tenu du mode d’action de l’antibiotique, soit
parce que le mécanisme permettant aux bactéries de neutraliser la colistine n’est pas
transférable, du fait de l’impossibilité pour ces bactéries de former un pont entre elles.
Les résistances croisées :
Elles ne concernent que les polymyxines B et E.
Les souches de germes résistants à la colistine sont donc extrêmement rares, même si
elles commencent à apparaître, et c’est ce qui fait la force de cet antibiotique. L’expérience
clinique montre que chez l’homme comme chez l’animal, en France comme à l’étranger la
colistine présente une activité antibactérienne qui ne s’altère que très peu. (Maure D, 1986)
4. Interactions avec les endotoxines bactériennes
Les polymyxines E et B ont la propriété unique parmi les antibiotiques de neutraliser

les endotoxines émises par un certain nombre de bactéries Gram négatif. Ainsi in vitro, la
polymyxine B sulfate peut inactiver les endotoxines de plusieurs espèces bactériennes
sensibles (E.coli, K.pneumoniae, N.meningitidis) ou résistantes (P.mirabilis, B.fragilis).
(Cooperstosck M.S, 1974). L’activité résiduelle d’endotoxine étant appréciée par le test du
lysat de l’Amébocyte de Limulus. Les résultats sont récapitulés dans le tableau XI. (Ziv et al,
1978)
In vivo, l’activité neutralisante de la polymyxine B sulfate a été démontrée chez
l’embryon de poulet (par appréciation du taux de mortalité), et chez la souris. (Maure D,
1986)
L’interaction des polymyxines avec les endotoxines permet donc de neutraliser

certains effets biologiques. Le mécanisme de ce phénomène, affinité des groupements aminés
des polymyxines pour la fraction lipidique A des LPS, explique que la neutralisation soit plus
importante pour les dérivés sulfates qu’avec les méthanes sulfates.
51
Tableau XI : Inactivation des endotoxines d’E.coli par la polymyxine B et la colistine dans du lait de mammite
C. Etude pharmacocinétique
La pharmacocinétique de la colistine est dominée d’une part par le caractère fortement

polaire propre aux antibiotiques polypeptidiques (pKa >10) qui lui confère une importante
solubilité et d’autre part, par son affinité pour les membranes cellulaires. Ces deux propriétés
apparemment contradictoires font des polymyxines des molécules à part sur le plan
pharmacocinétique.
1. Résorption
Administrée par voie orale, la colistine ne traverse pratiquement pas la barrière

intestinale. Cette voie n’est donc utilisable que pour des indications digestives. (Puyt J-D,
2004) En effet aucune trace de colistine n’a été retrouvée chez le chien après administration
orale de 30000 UI/kg, rectale de 10000UI/kg ou duodénale de 125000UI/kg. Il en est de
même avec les bovins.
En solution aqueuse, la résorption parentérale de la colistine est en revanche assez
rapide et complète mais on verra plus tard que la cinétique de la CS et de la CMSS est
différente. Toutes les voies sont utilisées en médecine vétérinaire à savoir la voie IM, SC, IV
et IP (intra-péritonéale). L’administration par voie parentérale est obligatoire dans le
traitement d’une affection systémique.
52
Les polymyxines, administrées en aérosol, franchissent la barrière pulmonaire et sont
retrouvées dans le sang à des concentrations égales ou supérieures à 20% de celles obtenues
après une intramusculaire à la même dose. (Martin R et al, 1959)
L’administration par voie mammaire donne lieu à une résorption très faible.
2. Distribution
a. Dans le tube digestif
Des différences inter-spécifiques ont été observées au niveau de la distribution de la

CS au niveau du tube digestif : alors que chez le poulet, une administration de 25 mg/kg de
CS permet d’obtenir dans l’intestin grêle une concentration de 60µg/g de contenu digestif,
cette concentration n’est que de 4 µg/g chez le porcelet. (Ziv G et al, 1980)
Chez des génisses sevrées il a été montré que l’administration intraruminale de 24000
UI/kg chlorhydrate de colistine n’était suivi d’aucune activité décelable d’antibiotiques au
niveau du liquide ruminal : ceci tendrait à montrer que les polymyxines administrée per os
chez les bovins sont inactivée lorsqu’elle transitent par le rumen. (Escoula et al, 1981a)
b. Concentrations plasmatiques, cinétiques
Les cinétiques plasmatiques de la colistine et de la polymyxine B sont très proches

chez l’homme et chez l’animal. Les facteurs de variations sont l’age du patient, son état
physiopathologique, le type de sel utilisé ainsi que la voie d’administration. Ziv et al ont
étudiés la cinétique plasmatique de la colistine chez la brebis et chez le veau, Archimbault et
al chez le veau et la vache laitière. (Ziv et al, 1982 ; Archimbault et al, 1980)
Pic plasmatique :
Après une administration intra-musculaire, le pic sérique est atteint en deux heures
environ, quelque soit la dose injectée, le sel utilisé et l’espèce. Ce sont par contre les valeurs
de ces pics sériques qui diffèrent notamment selon le sel utilisé.
Les résultats obtenus chez la brebis sont illustrés dans le tableau XII (Ziv G et
Sulman F.G, 1973) et la figure 14 (Ziv G, 1973).
Comparés aux molécules mères on se rend compte que les dérivés méthane-sulfonés
produisent des pics sériques plus marqués et des temps de ½ vie plus courte.
53
Figure 14 : Concentrations sériques de colistine chez les brebis traitées en IM avec 7,5(●) et 3,5 (○) mg/kg de
CS et avec 7,5 (▲) et 3,5(∆) mg/kg de CMSS.
Tableau XII : Paramètres pharmacocinétiques des polymyxines chez le brebis.
Temps de ½ vie :
La demi-vie d’élimination est fonction du sel utilisé, de la voie administrée et de

l’espèce. Ainsi chez la brebis, le temps de demi-vie après une administration IM est de 6h
pour la CS et de 4h pour la CMSS. Chez le veau après administration IV de CS la demie-vie
d’élimination est de 4,5 heures et lors d’administration IM celle-ci varie entre 4 et 5 heures.
Pour la demi-vie d’élimination de la CMSS après administration IM les auteurs ne sont pas
d’accord et les résultats varient entre 2 et 5 heures. Chez la vache laitière le temps de demi-vie
est plus long que chez le veau lors d’administration IM de CMSS : il est de 6 à 8heures.
(Archimbault et al, 1980, Ziv et al, 1982)
54
c. Fixation aux protéines
Le caractère de base fortement ionisée des polymyxines ne les prédispose pas à se lier
aux protéines plasmatiques. De fait le taux de fixation est très faible chez l’homme, de l’ordre
de 10 à 15%, modérée chez le veau : de 45 à 55% selon les concentrations, mais il est de 70%
chez la brebis.
Les dérivés méthane-sulfoné apparaissent moins fixés (ce qui est normal puisque les
fonctions amines sont occupées), mais avec de grandes variations individuelles et inter-
spécifiques : 43% chez la brebis et 5 à 10% chez le chien ! (Al khayyat A.A et Aronson A.L,
1973 ; Ziv G et al, 1982)
Al Khayyat et Aronson ont montré que le pourcentage de liaison aux protéines
plasmatiques de la colistine sulfate, qui est élevé chez le chien (70%), est inversement
proportionnel à la concentration en antibiotiques. (Fig 15), vraisemblablement du fait de la
saturation des sites de fixation des protéines sériques.
Figure 15: Fixation des polymyxines aux protéines plasmatiques chez le chien en fonction de la concentration
sérique en antibiotique.
d. Distribution tissulaire
Grâce à leur caractère hautement polaire (pKa=10,4), les polymyxines devraient

diffuser relativement peu dans les tissus pour se localiser dans le secteur extra-cellulaire. En
fait il n’en est rien, car leur grande affinité avec les membranes biologiques est à l’origine
d’une importante fixation aux cellules et aux tissus.
Sur un plan global, le volume de distribution des polymyxines est assez élevé (1,6/kg
chez le veau, 0,6 L/kg chez l’homme). Cependant le volume de distribution apparent de la
forme libre de la colistine est plus faible. Il est évalué par Ziv à 0,35L/kg pour la colistine
sulfate. Al Khayyat et coll ont montré que le volume de distribution diminue lorsque la dose
d’antibiotique augmente : ainsi quand la dose de CS passe de 1,1 à 2,2 puis à 4,4 mg/kg, le
volume de distribution passe de 74% à 44% puis à 33%.
La fixation tissulaire, contrairement à la fixation aux protéines plasmatiques, est due à
l’attraction électrostatique qui s’exerce entre les groupements amines primaires des
polymyxines et les charges négatives des phospholipides membranaires. Les concentrations
tissulaires seront donc fonction d’une part du sel utilisé et d’autre part de la richesse des
organes en phospholipides. Les concentrations les plus importantes sont retrouvées dans le
cerveau, les reins et le foie essentiellement sous forme liée, alors que le muscle contient des
concentrations plus faibles. (Ziv et Sulman, 1972)
55
Tableau XIII : Concentration de colistine sous forme libre et liée dans les tissus et liquides biologiques de
veaux après une injection IV de CS.
Aucune forme libre n’est retrouvée dans le cerveau et aucune forme liée ne l’est dans
les urines (Tableau XIII). Les concentrations obtenues sous forme libre au niveau des
poumons sont comparables aux concentrations plasmatiques : au niveau du foie et des reins,
elles leur sont supérieures.
Sur le plan quantitatif, ce sont les muscles qui contiennent la masse la plus importante
d’antibiotique ; en effet bien que les concentrations dans ces organes ne représentent que 10 à
29% des concentrations retrouvées dans le foie et les reins, les quantités totales de colistine y
sont respectivement 15 à 20 fois et 3 à 8 fois supérieures. (Tableau XIV) Cet aspect sera à
prendre en compte pour l’établissement des délais d’attente, au même titre que la persistance
prolongée de la colistine dans les tissus. (Ziv et coll, 1982)
Tableau XIV : Quantité de colistine (en pourcentage) présente dans les différents organes et liquides
biologiques chez le veau après une injection IV de CS (5mg/kg)
56
La persistance dans les organes est très prolongée : le tableau XIV montre qu’après
48 heures plus de 30% de la dose administrée chez le veau se trouve encore dans les tissus
sous forme liée.
e. Diffusion dans les liquides biologiques
Le passage de la colistine dans les liquides physiologiques est faible, en relation avec
son poids moléculaire élevé et son affinité pour les membranes cellulaires.
Neuman estime que les concentrations de colistine dans le LCR après administration
parentérale de doses thérapeutiques sont satisfaisantes. Cependant il apparaît que les dérivés
méthane-sulfonés produisent des concentrations plus élevées dans le LCR. (Neuman, 1979)
Les polymyxines ne diffusent pas dans les liquides synoviaux et oculaires, ni dans les
épanchements pleuraux. (Maure D, 1986)
3. Biotransformations
La colistine, compte tenu de sa stabilité et de son défaut de solubilité dans les solvants
organiques, ne subit que très peu de biotransformations. Peu de données sont disponibles dans
la littérature sur les biotransformation de la colistine sulfate.
Neuman estime que 40% de la colistine est métabolisée dans l’organisme. Chez
l’homme la colistine est exclusivement éliminée par voie rénale sous forme active. On
retrouve 80% de la dose administrée dans les urines au bout de 24 heures.
Il n’y a pas d’élimination par voie biliaire chez toutes les espèces.
La CMSS est hydrolysée in vivo et in vitro en CS. Chez la brebis, 2 heures après une
injection IM de CMSS, 75% de l’activité colistine dans le sérum est due à la CMSS ; trois
quarts d’heure plus tard 80% de l’activité est déjà le fait de la molécule mère. On comprend
mieux pourquoi l’administration de CMSS est suivie de concentrations tissulaires
importantes : très tôt après l’injection, la CMSS qui n’est pas encore hydrolysée, diffuse dans
l’organisme. La transformation en CS qui s’en suit permet d’aboutir à une activité anti-
bactérienne dans des tissus ordinairement inaccessibles à la colistine sous forme libre.
Les biotransformations de la colistine sont peu connues mais elles sont très
minoritaires puisque l’essentiel de la molécule est éliminée par voie rénale sous forme
inchangée.
4. Elimination
Après administration orale, la colistine est éliminée presque exclusivement par les
fécès. Une infime partie a été retrouvée dans les urines lors de très fortes doses. L’élimination
se fait sous forme inactive puisque la molécule se fixe aux LPS et PL des bactéries Gram
négatif.
Après administration par voie parentérale, le rein constitue la principale voie

d’élimination, comme on l’a vu précédemment. Les données établies montrent que cette
élimination est relativement lente contrairement à de nombreux antibiotiques. Elle s’effectue
par filtration glomérulaire.
57
En fait la colistine apparaît dans l’urine très précocement après l’administration et y
persiste plusieurs jours. Sa clairance est d’ailleurs inférieure à celle de la créatinine. La
colistine n’est pas réabsorbée par les tubules rénaux. (Neuman M, 1979)
Chez le veau par exemple, Ziv et al ont montré qu’en 24heures, 50% de la dose de
colistine sulfate administrée par voie IV ont été éliminés et en 48heures seulement 65%. Chez
le chien l’élimination est aussi lente.
Cependant on doit noter que la colistine sous forme de méthane-sulfonate (comme on
peut s’y attendre) se comporte différemment. En effet, étant moins fixée par les tissus, son
élimination est plus rapide.
D. Etude toxicologique
Les polymyxines constituent l’un des groupes d’antibiotiques utilisés en thérapeutique

les plus dangereux, du moins par voie générale et non par voie locale (orale…). (Tableau
XV) L’indice thérapeutique de la colistine, pourtant l’un des moins toxique du groupe, est à
peine de 2. Cette forte toxicité est la conséquence de leur mécanisme d’action non spécifique
sur les membranes biologiques, action qui peut s’exercer aussi bien sur les cellules des
animaux supérieurs que sur les bactéries. Cette toxicité est tellement élevée pour la plupart
des représentants qu’elle en interdit l’usage par voie générale. Seule la colistine est
administrée par voie générale. (Pyut J-D, 2004)
Les polymyxines peuvent être responsables principalement de deux types d’accidents :
- des accidents de toxicité aigue avec un blocage neuro-musculaire
- des accidents de toxicité chronique avec une néphrotoxicité
Tableau XV : Toxicités aigues comparées de différents antibiotiques.
1. Blocage neuro-musculaire
Les antibiotiques polypeptidiques agissent sur la jonction neuro-musculaire, en

bloquant la libération pré-synaptique de l’acétyl-choline et en réduisant la sensibilité des
récepteurs post-synaptiques. Cette action est d’autant plus marquée que, comme on l’a vu
précédemment, la quantité d’antibiotique présente au niveau musculaire est importante. Cet
effet peut être compensé par l’administration de calcium.
Ces accidents sont surtout observés lors de surdosages thérapeutiques. Il semblerait
que le veau y soit particulièrement sensible, cependant toutes les espèces sont sensibles à cette
toxicité. On constate cliniquement une ataxie, des convulsions, des modifications
58
respiratoires rapidement mortelles. Aux doses sub-létales on observe une paralysie avec une
dépression respiratoire accompagnée d’une cyanose.
2. Néphrotoxicité
Les antibiotiques polypeptidiques peuvent également être à l’origine d’accidents de

néphrotoxicité lors d’emploi pendant quelques jours seulement à dose normale (3 jours
d’utilisation). Cette toxicité est liée à la fixation de ces antibiotiques à la surface des
membranes des cellules tubulaires du néphron. Cela se traduit par une néphrite interstitielle
albuminurique. (Pyut J-D, 2004)
3. Action sur la gestation
Les effets de la colistine (sous sa forme méthane-sulfonate) sur la gestation et le

développement fœtal on été étudiés sur des souris, rats et lapins. La colistine est utilisée dans
cette étude à des doses situées entre une et dix fois la dose thérapeutique. La colistine n’a
modifié ni la gestation, ni le développement foetal des espèces citées et n’a montré aucun
effet tératogène. (Maure D, 1986)
4. Autres manifestations
Elles sont en générales bénignes : intolérance digestive, douleur, rougeur et

gonflement au point d’injection, fièvre, prurit, nausées et vomissements. (Maure D, 1986)
59
III. Etude pharmacologique et toxicologique de la bromhexine
1. Structure chimique
La bromhexine est un mucolytique commercialisé depuis le début des années 80 chez

l’homme comme chez l’animal. Ses propriétés, ainsi que celle de son principal métabolite,
l’ambroxol, en ont fait une substance très employée. Puis, devant la complexité de la
physiopathologie des affections respiratoires, le difficulté de mettre en évidence de réels
bénéfices cliniques et la nécessité de donner la priorité aux médicaments permettant de
soulager rapidement l’animal (antibiotiques, anti-inflammatoires et bronchodilatateurs) le
recours à la bromhexine est devenu moins fréquent. Cependant de récentes publications, sur
l’homme et sur les animaux de laboratoire (notamment rat et souris) pourraient lui donner un
regain d’intérêt. (Gogny M, 2004)
Propriétés physico-chimiques :
Dénomination commune internationale : Bromhexine

Formule brute : C14H20Br2N2
Dénomination chimique : 2-Amino-3,5-dibromo-N-cyclohexyl-N-methylbenzylamine
Poids moléculaire : 412,59 Daltons
Noms commerciaux vétérinaires : QUENTAN®, FLUBRON®
Noms commerciaux humains : BISOLVON®
Figure 16 : Structure chimique du chlorhydrate de bromhexine
La bromhexine est un dérivé semi-synthétique de la vasicine, un alcaloïde extrait d’un

arbuste indien, Adhatoda vasica, ainsi que de Peganum harmala. Elle est très largement
employée en médecine traditionnelle asiatique, notamment dans le traitement de l’asthme, de
la tuberculose et de la toux.
Le principal métabolite de la bromhexine est l’ambroxol. Il se forme après une
hydroxylation ainsi qu’une déméthylation au niveau du cytochrome P450 lors des
biotransformations. Il est structuralement très proche de la bromhexine. Ce métabolite est
fréquemment utilisé dans le traitement des pathologies respiratoires en médecine humaine.
60
Ambroxol :
Formule brute : C13H18Br2N2O
Dénomination chimique : 2-amino-3-5-dibromo-N-(trans-4-hydroxycyclohexyl)
benzylamine.
Poids moléculaire : 414,56 Daltons
Figure 17 : Structure chimique du chlorhydrate d’ambroxol
La bromhexine se présente comme une poudre cristalline blanche, pratiquement

insoluble dans l’eau. Sa structure aromatique et ses substituants lui confèrent en revanche une
bonne solubilité dans les solvants organique.
L’atome d’azote entre les deux cycles aromatiques lui donne un caractère légèrement
basique, ce qui permet d’en préparer un sel d’acide chlorhydrique et de la mettre en solution.
La molécule est assez stable mais il est quand même recommandé de la conserver à l’abri de
la lumière.
B. Etude pharmacocinétique
1. Résorption
La biodisponibilité de la bromhexine par voie orale varie selon les auteurs entre 10 et
25% de la dose administrée en raison d’un effet de premier passage hépatique important. En
effet le ratio d’extraction hépatique (soit l’effet de premier premier passage) est estimé à 0,92
chez le rat et 0,75 chez l’homme ce qui est considérable. Iwaki et al ont montré que la
biodisponibilité orale de la bromhexine chez le rat correspond à peine à 1,8 à 3,9% de la
biodisponibilité par voie intra-veineuse (Iwaki M et al, 1990, Bechgaard et Nielsen, 1982)).
Le temps de demi-vie plasmatique de la bromhexine est assez élevé. Il oscille entre 6
et 8 h chez l’homme, entre 8,9 et 11heures chez le rat et entre 3 et 4 heures chez le cheval.
(Iwaki M et al ; 1990, Gogny M; 2004)
La fixation aux protéines plasmatiques est très importante : entre 95 et 99%.
61
2. Distribution
Après avoir marqué au carbone 14 la molécule de bromhexine, Kopitar et Leder l’ont

administrée à la dose de 10mg/kg en intra-veineuse et à la dose de 25mg/kg par voie orale
chez des rats et des souris.
Après l’administration par voie intra-veineuse, le 14C fut retrouvé dans les différents
tissus du rat 5 minutes plus tard. La bromhexine possède une bonne affinité pour le tissu
adipeux, le poumon, le rein, le foie, les surrénales, les glandes lacrimales et l’hypophyse. En
effet la distribution de la bromhexine est celle d’une base faible liposoluble c'est-à-dire
qu’elle se distribue très largement dans l’organisme (le volume de distribution est important).
Après l’administration par voie orale, la bromhexine se retouve dans l’organisme une
heure après (pic plasmatique) mais n’atteint son pic de distribution maximale qu’après 36h.
Le poumon présente une radioactivité intense 12h après administration qui diminue ensuite
rapidement en 24h. Une étude historadiographique de la répartition du produit radioactif a
montré que la bromhexine se concentrait surtout au niveau des pneumocytes de type II. Il n’y
a aucun stockage bronchique. (Kopitar et Leder, 1971)
La pénétration cutanée de la bromhexine a aussi été étudiée chez le rat. Elle se révèle
très basse ainsi que la biodisponibilité qui en découle (2,6% seulement). Cette voie n’est donc
pas à envisager. (Ogiso et al, 1991)
3. Biotransformation
La bromhexine fait l’objet d’un métabolisme intense. De nombreux métabolites ont été
mis en évidence. Il semblerait que la proportion ainsi que le nombre de ces métabolites soit
liés à l’espèce. Ainsi, chez le porc, neuf métabolites différents ont été observés (Meijer I.A et
al), chez le lapin onze (Vandecasteele-thienpont et al, 1980) et chez l’homme douze. Les
réactions les plus importantes sont toujours une hydroxylation et/ou une déméthylation, la
combinaison de ces deux transformations permettant la formation d’ambroxol (métabolite
VIII). L’ensemble des réactions de biotransformation est représenté sur la figure 18.
Il est à noter que chez le cheval, les principaux métabolites de la bromhexine sont
l’hydroxy-bromexhine et la desmethyl-bromhexine. L’ambroxol est fabriqué en très faible
quantité.
62
Figure 18 : Principales voies de biotransformations de la bromhexine chez le lapin. (--- déméthylation,
…..cyclisation , hydroxylation). D’après Schraven et al.
4. Elimination
L’élimination de la bromhexine semble là encore être fortement corrélée à l’espèce. En

effet chez l’homme et le lapin l’excrétion est très largement urinaire (78-88%). Chez la souris
elle est aussi urinaire à hauteur de 60%. Par contre chez le rat et le chien l’excrétion est à plus
de 50% fécale. Ces résultats sont obtenus après administration de bromhexine par voie orale
(Kopitar et al, 1973) et sont représentés sur la figure 19.
Il est très net que la pharmacocinétique de la bromhexine est extrêmement corrélée à

l’espèce chez qui elle est administrée. Il n’existe malheureusement aucune étude portant sur la
pharmacocinétique de la bromhexine chez les volailles.
63
Figure 19 : Cumul de la radioactivité excrétée dans les urines et les fécès de plusieurs espèces, 96 heures après
une administration orale de 14C-bomhexine (exprimée en pourcentage).
C. Etude pharmacodynamique
La bromhexine fait partie des mucomodificateurs. Ces derniers sont classés en trois
catégories :
-les mucolytiques vrais qui agissent directement sur le mucus, provoquant une
modification structurale, aboutissant à leur fluidification (les mucolytiques sont aussi appelés
fluidifiants bronchiques)
-les mucorégulateurs qui modifient la synthèse du mucus en agissant sur les cellules
elles-mêmes.
-les expectorants augmentant le volume de la phase sol.
La bromhexine appartient à la sous-catégorie des mucorégulateurs, même si elle

possède à la fois une action mucolytique et mucorégulatrice.
Afin de comprendre les différentes actions de la bromhexine il est important de

comprendre la synthèse et la composition des sécrétions bronchiques.
1. Synthèse des sécrétions bronchiques
Les sécrétions bronchiques physiologiques : le film liquide qui vient

physiologiquement recourir le pôle apical des cellules épithéliales bronchiques est
quantitativement peu important. Il est normalement dégluti. L’origine de ces sécrétions est
double :
64
- les glandes bronchiques : elles sont situées dans la sous-muqueuse bronchique. On
distingue les glandes séreuses, les glandes muqueuses et les glandes mixtes. Ces glandes se
raréfient au fur et à mesure que l’on pénètre plus profondément dans l’arbre respiratoire.
- les cellules calciformes à mucus : ces cellules font partie du revêtement muqueux
superficiel et sont nombreuses dans l’arbre respiratoire supérieur et se raréfient en périphérie.
La somme de ces deux sécrétions constitue le film des sécrétions bronchiques.
(Bonnaud F et Germouty J, 1979)
Figure 20 : Structure du revêtement de l’arbre respiratoire supérieur.
2. Composition des sécrétions bronchiques
La composition de ces sécrétions est complexe mais importante à connaître pour

comprendre les mécanismes d’action des mucomodificateurs. On a coutume de dissocier :
- une phase séreuse (phase sol), fluide, profonde, dans laquelle se meuvent facilement
par ondulation les cils vibratils des cellules épithéliales ciliées chargés de l’élimination
vers le pharynx.
- une phase muqueuse superficielle (phase gel) plus épaisse qui profite du glissement
progressif de la couche sous-jacente pour accompagner le mouvement des cils (escalator
muco-ciliaire). Ainsi ce tapis muqueux est assimilable à une interface protectrice entre le
milieu aérien et les structures pulmonaires (au niveau des bronchioles et des alvéoles ce tapis
disparaît pour laisser place au surfactant et aux cellules de Clara).
L’équilibre entre la phase sol et la phase gel est indispensable à l’efficacité du
battement ciliaire, à sa coordination et à son orientation dans un même sens propulsif. (figure
21) (Gogny M, 1995)
65
Figure 21 : Représentation schématique de l’escalator muco-ciliaire.
La centrifugation d’une expectoration permet de distinguer trois couches : une couche

superficielle mousseuse, une phase aqueuse, et surtout une phase profonde de poids
moléculaire beaucoup plus élevée dite fibrillaire (voir tableau XVI). Cette phase contient la
majorité des molécules responsables des propriétés rhéologiques du mucus. On distingue au
sein de cette phase les mucines et les molécules protéiques.
Les mucines, constituant du gel, sont une catégorie de protéoglycanes ou
mucopolysaccharides acides. Une fois sécrétées, ces mucines établissent des liaisons
covalentes entre elles essentiellement par des ponts dissulfures (SS). Ces mucines ont aussi
une importante capacité de fixation des protéines. Le réseau ainsi créé (association protéines
et mucines) est responsable de la structure fibrillaire du mucus, représenté sur la figure 22.
(Bonnaud F et Germouty J, 1979)
La progression des sécrétions vers les voies supérieures dépend d’une part de l’activité
ciliaire et d’autre part des caractéristiques du mucus. En cas d’affections respiratoires, la
sécrétion est en général augmentée au début, puis elle s’épuise vite et sa composition change :
les mucines n’ont plus la même structure et la concentration en protéine augmente. La
viscosité est donc augmentée, surtout lors de complications infectieuses purulentes, avec leurs
constituants cellulaires, bactériens et leucocytaires.
Figure 22 : Schématisation de la structure fibrillaire du mucus bronchique- association mucines-protéines.
66
Tableau XVI: Caractéristiques chimiques des trois phases obtenues par centrifugation du produit d’une
expectoration à laquelle est ajouté trois volumes d’eau distillée.
3. Mode d’action de la bromhexine
Les mucolytiques peuvent rompre les liaisons entre les chaînes glycoprotéiques du
mucus ou fragmenter ces chaînes elles-mêmes de différentes manières. La figure 23 récapitule
les différents modes d’action des mucolytiques. (Gogny M, 1995)
67
Figure 23 : Mode d’action des mucolytiques.
L’action mucolytique de la bromhexine est due à son action réductrice. Les ponts
dissulfures associant les chaînes glycoprotéiques sont rompus. La viscosité et l’élasticité des
sécrétions, si elles sont anormalement élevées, diminuent rapidement et l’activité ciliaire se
normalise. L’augmentation du volume liée à cette activité est nette. Une augmentation
transitoire du jetage précède donc parfois l’amélioration de l’état clinique de l’animal. La
bromhexine agit aussi par dépolymérisation des chaînes de mucopolysaccharides acides
entraînant ainsi une fluidification du mucus. (Gogny M, 1995)
Le mécanisme de l’action mucorégulatrice est beaucoup moins connu. La bromhexine
agit donc directement sur les cellules glandulaires. Elle agirait spécifiquement sur un
transporteur d’ion qui modifierait les concentrations ioniques du mucus et viserait à diminuer
la viscosité de celui-ci (le volume de l’hydrophase s’accroît). (Hasegawa et al, 2006) La
perméabilité de la muqueuse est aussi augmentée. L’action mucorégulatrice est plus
intéressante car, en agissant sur les cellules productrices de mucus elles-mêmes et non pas sur
le mucus une fois celui-ci déjà produit, les risques de modification excessive des paramètres
de viscosité sont diminués.
4. Propriétés pharmacologiques
a. Action sur les cellules bronchiques
La bromhexine permet une amélioration significative du drainage muco-ciliaire

(Thomson et al, 1978). Il a été prouvé que la fréquence du battement ciliaire est augmentée de
10% en présence d’ambroxol (les modifications de cette fréquence n’ont pas été quantifiées
en présence de bromhexine pour permettre ainsi une comparaison) L’expectoration est ainsi
facilitée même si ce n’est pas à proprement parlé une substance expectorante (n’augmente pas
le volume de la phase sol).
D’autre part la bromhexine permet la régénération des cellules bronchiques ciliées et
serait capable de stimuler la production de surfactant. (Renovanz H.D, 1997)
68
b. Action anti-inflammatoire
Plusieurs études ont récemment mis en évidence l’aptitude de la bromhexine et surtout

de l’ambroxol, à moduler la réaction inflammatoire dans les voies respiratoires. Cette
propriété semble particulièrement intéressante dans les affections d’origine allergique ou à
composante allergique. Ainsi, lors d’une stimulation par des endotoxines, l’ambroxol inhibe
la dégranulation des mastocytes et des basophiles, diminue la libération d’histamine et de
leucotriène LTB4 et LTC4, réduit la production des cytokines comme l’IL4 et l’IL13,
augmente la libération d’IL12 et favorise ses actions immunomodulatrices et enfin diminue la
production de radicaux libres oxygénés. (Aihara M et al, 2000, Nawrocka A et al, 1999)
c. Action anti-oxydante
La bromhexine ainsi que son principal métabolite sont des anti-oxydants puissants.
Ces effets ont été démontrés dans plusieurs études. Ce mécanisme est assez complexe. Il
convient de revenir sur la formation des radicaux libres afin de comprendre l’action anti-
oxydante de la bromhexine.
L’utilisation de l’oxygène au niveau cellulaire est à l’origine de la formation d’entités
très réactives : les radicaux libres (reactive oxygen species). Il s’agit en particulier de l’anion
radical superoxyde (O2-), du peroxyde d’hydrogène (H2O2) et du radical hydroxyle (HO).
Toutes ces entités se forment lors de la réduction de l’oxygène moléculaire en eau :
O2 + 4e- + 4H+ 2 H2O
Cette réaction se déroule en réalité en plusieurs étapes et fait appel à des réactions
d’oxydo-réduction dont les radicaux libres sont les intermédiaires (Bergendi L et al, 1999). Ce
sont donc des produits normaux du métabolisme cellulaire. Or ils possèdent une forte toxicité
cellulaire : altération de l’ADN, altération des protéines et des lipides (notamment
membranaires) entraînant la mort cellulaire. Il existe donc un système enzymatique spécifique
très complexe visant à maintenir un équilibre entre la production et la dégradation de ces
radicaux libres. Les principales enzymes intervenant sont la superoxyde dismutase, la catalase
et la glutathion peroxidase.
Figure 24 : Système enzymatique spécifique de dégradation des radicaux libres.
Lors d’inflammation (notamment lors d’infection) cet équilibre est changé : la

formation de ces radicaux est exacerbée ou bien la dégradation est insuffisante. Il en résulte
une accumulation anormale et délétère de ces radicaux libres appelée stress oxydant. (Horton
H.R et al, 1994)
69
La bromhexine et l’ambroxol sont capables d’accélerer les réactions de dismutation
du radical superoxyde respectivement de 3 et 2,5 fois in vitro. Cette action serait dû à la
capacité des groupements aromatiques de l’ambroxol et de la bromhexine à capter un électron
provenant du radical superoxyde. De plus ils piègeraient le radical hydroxyle apportant ainsi
un autre élément de protection contre les dommages induits par les radicaux libres. (Felix K et
al, 1996). La bromhexine et l’ambroxol stabilisent les membranes cellulaires en inhibant la
phospholipase A2 (enzyme de la peroxydation lipidique directement induite par les radicaux
libres). (Heath M.F et al, 1985)
Plus récemment, plusieurs études confirment les propriétés anti-oxydantes de

l’ambroxol in vitro. Ainsi Ottonello et al ont prouvé que l’ambroxol inhibe de façon plus
importante que la bromhexine la production de radicaux libres en agissant directement sur les
neutrophiles. (Ottonello et al, 2003)
L’ambroxol réduit la dégradation de l’acide hyaluronique de 93% (soit 1,5 fois plus
que le Trolox utilisé comme anti-oxidant de référence), il inhibe la peroxydation lipidique de
96% au niveau des mitochondries du foie (chez le rat) et de 74% sur de la muqueuse gastrique
(cet effet est concentration-dépendant). L‘intérêt de cette étude (Stetinova et al, 2004) tient au
fait que les propriétés anti-oxydantes de l’ambroxol ont été testées in vivo. Cette approche in
vivo est particulière : l’ambroxol était administré à 10, 30 et 50mg/kg, à 5, 30 et 60 minutes
avant l’administration d’indométhacine chez le rat (anti-inflammatoire non stréroïdien créant
des lésions du corps et de l’antre gastrique).Ces lésions induites par l’indométhacine chez le
rat servent de modèle pour les pathologies dues aux radicaux libres car ces radicaux sont un
facteur très important dans l’étiologie des lésion gastriques induites ou non par
l’indométhacine .
Les résultats sont assez surprenants : l’administration de l’ambroxol 5 et 30 min avant
l’indométhacine produit une inhibition dose-dépendante du nombre et de la taille des lésions.
La plus forte dose (50mg/kg) administrée 30 minutes avant nous montre les effets les plus
importants (38% d’inhibition du nombre et 62% d’inhibition de la taille des lésions). La
même dose administrée 60 minutes avant montre aussi des résultats satisfaisant. Cependant la
dose de 50mg/kg est une dose très élevée : les auteurs précisent que cette dose est 88 fois
supérieure à la dose utilisée en pratique chez l’homme ! Conclure à un effet anti-oxydant de
l’ambroxol in vivo est donc délicat.
De plus certains résultats sont mêmes en défaveur de cette propriété. Ainsi
l’administration d’ambroxol à 10 et 30 mg/kg, 60 minutes avant l’indométhacine aggrave les
lésions gastriques ! Les auteurs pensent que la concentration d’ambroxol est déjà trop basse
60 minutes après l’injection pour contrer les lésions dues à l’administration d’indométhacine.
On peut se poser des questions quant à la véritable action anti-oxydante de l’ambroxol si
celui-ci n’est administré en prétraitement comme c’est le cas dans cette étude (ce qui n’est pas
le cas en pratique).
d. Autres propriétés
L’ambroxol est capable de moduler l’expression de protéines spécifiques du surfactant

(SP), produites par les pneumocytes de type II et les cellules de Clara, et indispensable dans
l’homéostasie, la fonctionnalité et la structure du surfactant. L’ambroxol augmenterait la
production de certaines de ces protéines et cela de manière spécifique. Comme de nombreuses
maladies respiratoires mènent à une raréfaction de ces protéines, cette propriété semble
intéressante. (Seifart et al, 2004)
70
L’effet le plus intéressant est probablement l’aptitude de ces composés (bromhexine et
dérivés) à augmenter la concentration locale en antibiotiques administrés en même temps.
Plusieurs études, dans différentes espèces l’ont confirmée. Cette propriété serait extrêmement
intéressante dans l’optique d’une association bromhexine-enrofloxacine. (Gogny M, 1995 ;
Kieffer P, 1985). On verra donc plus tard les avantages qu’offrirait cette association.
5. Modalité d’administration et usage thérapeutique
Par voie intramusculaire, la dose quotidienne recommandée est de 0,1 à 0,3 mg/kg. Par
voie orale, elle est de 0,5 mg/kg. Dans tous les cas un traitement de 5 jours est recommandé
pour maintenir une concentration locale suffisante et obtenir une amélioration clinique. Il
serait intéressant de connaître son activité et sa posologie lors d’utilisation d’inhalations.
La bromhexine a sa place dans le traitement des affections aigues des voies

respiratoires en complément de l’emploi des antibiotiques et des anti-inflammatoires dès
l’instant qu’un jetage est présent ou que des sécrétions bronchiques entraînent des difficultés
respiratoires. La forme injectable semble être la forme qui offre la meilleure biodisponibilité
malheureusement ce n’est pas la voie la plus adaptée dans le traitement des volailles.
6. Effets indésirables
Par voie orale et à la dose recommandée, le seul effet indésirable parfois décrit est une
légère irritation gastro-intestinale, accompagnée d’une diarrhée passagère. Chez le chien, le
chat et le lapin une bradycardie a été rapportée à partir de 10mg/kg. La dose létale 50 (DL50)
chez le chien et le lapin est supérieure à 10g/kg c'est-à-dire que son indice thérapeutique est
élevé.
La bromhexine est inscrite en annexe II ce qui la dispense de la détermination d’une
limite maximale de résidus (LMR) pour les bovins, les porcins et les volailles.
71
72
DEUXIEME PARTIE :
Associations médicamenteuses dans le traitement des maladies respiratoires

bactériennes des volailles.
73
74
Les maladies respiratoires sont très fréquentes en élevage industriel de volailles. En
effet l’intensification de la filière rend les conditions environnementales difficiles à gérer. Le
stress est un facteur très nettement favorisant et forcément présent. La promiscuité est un autre
facteur favorisant. Les conséquences de ces maladies peuvent être très importantes
notamment au niveau économique. Ces maladies peuvent être virales, bactériennes ou
parasitaires. Dans cette étude nous nous attacherons aux maladies respiratoires bactériennes.
Nous verrons donc d’abord quelles infections bactériennes touchent les volailles, puis
nous nous attacherons à montrer l’intérêt ou non des associations enrofloxacine/colistine et
enrofloxacine/bromhexine dans le traitement de ces pathologies.
I. Les infections respiratoires des volailles
A. Les infections à Escherichia coli
Les infections aviaires à Escherichia coli comprennent la colibacillose respiratoire, la

colisepticémie, les ovarites, les omphalites et la coligranulomatose. Les maladies
colibacillaires affectent essentiellement les jeunes oiseaux à cause de leur système
immunitaire immature. L’intervention unique du colibacille en pathologie aviaire est rare, en
effet les maladies colibacillaires sont souvent le résultat de défauts d’élevage (facteurs
environnementaux) ou sont favorisées par l’intervention d’autres agents infectieux comme les
mycoplasmes ou les virus. Les maladies colibacillaires sont des pathologies dominantes en
élevage industriel et dont les conséquences économiques peuvent être très importantes. On
détaillera plus particulièrement la colibacillose respiratoire.
1. Etiologie
Escherichia coli est une bactérie commensale du tractus digestif des volailles. C’est
une bactérie Gram négatif, pourvue de pilis. Seul un certain nombre de sérotypes est
pathogène et appelé « Avian Pathogenic Escherichia Coli » (APEC). Certains sérotypes bien
particuliers sont associés au syndrome de la colibacillose.
a. Les principaux sérotypes
Les colibacilles possèdent des

- des antigènes somatiques (O) : on en connaît 157 actuellement.
- des antigènes capsulaires (K) : 99 ont été dénombrés.
- des antigènes flagellaires : 55 sont connus actuellement.
On connaît plus de 1000 sérotypes différents mais seuls quelques uns sont pathogènes pour
les volailles.
Les plus souvent identifiés sont O1 K1, O2 K1 ainsi que 078 K80. Ils représentent la
majorité des souches pathogènes de colibacilles aviaires. (Heller E.D et Drabkin N, 1977 ;
Sojkaw J et Carnaghan R.B.A, 1961)
75
On peut cependant rencontrer d’autres sérotypes moins fréquents mais représentés de
manière significative : O8, O15, O16, O35, 088, 0115, 0116. (Dho-Moulin M et Fairbrother
J.M, 1999)
b. Les facteurs de virulences
1. Les fimbriae
Ce sont des adhésines qui sont impliquées dans l’adhérence des bactéries au tractus
respiratoire. Il semble évident que la capacité de certaines souches à adhérer à l’épithélium
respiratoire des poulets est un facteur de virulence importance. Les études portant sur les
adhésines ont été nombreuses afin de connaître celles qui interviennent dans la virulence des
souches pathogènes d’E.coli. Les études menées ont essentiellement porté sur deux types
d’adhésines : les fimbriae de type 1 (F1) et les fimbriae de type P.
α) Fimbriae de type 1
Les fimbriae de type 1 sont constituées d’une protéine majeure FimA associée à
d’autres protéines ancillaires et d’une adhésine FimH. Celles-ci sont codées par un ensemble
comprenant 9 gènes dont 7 sont présents sur le même opéron. Plusieurs variants des fimbriae
de type 1 existent chez les APEC et semblent associées aux sérotypes des souches, notamment
02 et 078 (Dho-moulin M et al, 1990).
Les fimbriae de type 1 furent longtemps considérées comme des facteurs de virulence
importants. En effet, Ike et son équipe rapportaient que 87 des 151 souches d’E.coli prélevées
sur des poulets atteint de colisepticémie étaient porteur des fimbriae de type 1 (soit près de
58%). (Ike K et al, 1990)
Wooley, quant à lui, a trouvé que l’ensemble des 40 souches d’E.coli isolées lors de
colisepticémie portait une fimbria de type 1 alors que seulement 23 souches intestinales sur 40
possédaient cette propriété. (Wooley et al, 1992)
Cependant, depuis ces résultats, d’autres études donnent des résultats qui diffèrent. En
effet des expériences menées sur un mutant dont la totalité de l’opéron fim est délété montre
que l’expression des fimbriae n’est pas nécessaire à la colonisation de la trachée et des sacs
aériens (Marc D et al, 1998). Une autre étude portant sur un mutant fimH a donné les mêmes
conclusions (Arne P et al, 2000). De plus un essai de vaccination à partir du domaine fimH
sur des poulets n’a révélé aucune protection contre les APEC (Vandemaele F et al, 2005).
β) Fimbriae de type P
Les fimbriae de type P sont codées par un ensemble de 11 gènes situés sur le
chromosome. La fimbria est constituée d’une sous-unité majeure (PapA) et d’une adhésine
terminale (PapG). L’adhésine possède trois variants différents.
La présence des fimbriae de type P est significativement plus fréquente chez les
souches isolées de poulets atteints de colisepticémie que chez les souches isolées de poulets
76
sains. (Dozois C.M et al, 1992) Cette fimbria semble jouer un rôle non pas dans l’adhésion au
niveau du pharynx et de la trachée mais semble plutôt intervenir tardivement dans le
processus infectieux.
2. La résistance au sérum
La résistance à l’effet bactéricide du complément dans le sérum, médiée par

différentes structures bactériennes comme la capsule, le lipopolysaccharide, les protéines de la
membrane externe, est associée aux souches APEC, surtout celles isolées de lésions de
septicémie. Ainsi il a été démontré qu’une corrélation existe entre la résistance au sérum et la
virulence sur des souches inoculées par voie intra-veineuse chez des dindes de 3 semaines (18
souches sur 25 (72%) résistantes à l’effet bactéricide du sérum étaient virulentes, 5 résistantes
à l’effet bactéricide du sérum étaient non virulentes et 2 étaient sensibles à l’action bactéricide
du sérum et avirulentes). (Ellis M.G et al, 1988)
3. Le système de captation du fer
La faible quantité de fer disponible dans les liquides physiologiques ne permet pas aux
bactéries de pouvoir s’y multiplier. C’est pourquoi, elles ont acquis un système très efficace
de captation du fer leur permettant de survivre en présence de faibles concentrations de fer.
Ce système d’acquisition du fer est appelé aérobactine. Plusieurs études ont montré que la
plupart des souches APEC possèdent ce système alors que les souches non pathogènes le
produisent moins fréquemment (Lafont et al, 1987). Ainsi Linggood et son équipe ont montré
que 89% des 61 souches d’E.coli responsables de septicémie produisaient ce système alors
que seulement 11% des souches d’E.coli issus de poulets sains l’expriment (Linggood MA et
al, 1987). Ces résultats sont confirmés par d’autres études : pour Dozois et al ce sont 98% des
souches APEC qui expriment ce système et pour Emery et al cela représente 74% des
souches. (Emery D.A et al, 1992 ; Dozois C.M et al, 1992)
Ce système, dont l’opéron est situé sur un grand plasmide (colV), fonctionne in vivo et
son rôle principal serait de permettre aux bactéries de se multiplier dans le sang ou les organes
autres que l’intestin.
La corrélation élevée entre la production d’aérobactine et la virulence des souches
APEC (notamment des souches responsables de septicémie) a permis le développement d’un
test de diagnostic (détection enzymatique d’une protéine du récepteur membranaire du
complexe aérobactine-fer).
(1) Hémagglutination
Il a été montré récemment que le gène tsh isolé de souches APEC et codant pour une
hémagglutinine est associé préférentiellement à ce type de souche et ne se retrouve pas chez
des souches d’E.coli isolées de fécès d’animaux sains. D’ailleurs une étude (Dozois et al,
77
2000) portant sur une collection de plus 300 souches APEC a montré que parmi les souches
possédant le gène tsh, 90% font partie des souches les plus virulentes.
Il est à noter que ce gène n’est pas nécessaire pour la colonisation du tractus
respiratoire mais qu’il contribue au développement de lésions au niveau des sacs aériens.
Il semble donc que chez les oiseaux (comme chez les mammifères) le pouvoir
pathogène d’Escherichia coli est à déterminisme plurifactoriel.
c. Epidémiologie et facteurs environnementaux
La colibacillose peut affecter les poulets, les dindes et les canards. On retrouve
cependant plus fréquemment la colibacillose sous sa forme septicémique chez les très jeunes
poulets.
Il est couramment admis que la colibacillose se déclare à la suite d’une baisse
transitoire de l’immunité qui peut être due soit à l’intervention d’un mycoplasme ou d’un
virus soit à cause de mauvaises conditions environnementales (défaut de ventilation et taux
d’ammoniac trop élevé par exemple qui fragilise l’épithélium de la trachée et favorise
l’implantation des colibacilles).
La voie d’entrée principale de l’agent pathogène est le tractus respiratoire, via
l’inhalation de particules de poussières contaminées par des E. coli excrétés du tube digestif
d’animaux sains. Les intestins sont en effet le réservoir le plus important des E.coli
pathogènes aviaires (Stordeur P et Mainil, 2002). Le passage des bactéries dans le tractus
digestif permet à celles-ci d’acquérir des facteurs d’adhésion qui faciliteront l’invasion et la
colonisation du tractus respiratoire d’un nouvel hôte après excrétion dans le milieu extérieur.
Cet aspect est important à prendre en considération car si on diminue cette excrétion on
diminue la pression infectieuse de l’environnement.
Chez les poulets, on trouve près de 10^9 colonies formant unité de bactéries par
gramme de fécès et parmi celles-ci 10^6 sont représentées par E.coli. De plus 10-15% de
celles-ci appartiennent à des sérotypes pathogènes. (Harry E.G et Hemsley L.A, 1965; Gyles
C.L, 1994)
L’environnement est un facteur essentiel dans l’épidémiologie de la maladie et de
nombreuses études ont été menées afin de déterminer et de maîtriser les principaux facteurs
prédisposants. Ainsi on sait que les fécès et la poussière présents dans l’environnement des
volailles sont une source très importante d’E.coli pathogènes. En effet la poussière peut
contenir jusqu’à 10^6 bactéries par gramme et il existe une étroite relation entre les
sérogroupes retrouvés dans la poussière et ceux trouvés lors de septicémie (Carlson H.C et
Whenham G.R, 1968). Cependant l’inverse n’est pas vrai : les sérotypes identifiés lors
d’infections systémiques ne sont pas nécessairement les mêmes que ceux retrouvés dans le
tractus digestif.
Le taux d’humidité est aussi un facteur déterminant et plus ou moins contrôlable. Ainsi
une atmosphère poussiéreuse et peu humide permet la survie de la bactérie alors que le niveau
de contamination est réduit lorsque le niveau d’humidité augmente. Après brumisation, le
niveau de contamination peut être réduit de 85 à 95% en moins de 7 jours. (Harry E.G, 1964)
Les fécès des rongeurs peuvent aussi être des réservoirs de colibacilles pathogènes tout
comme la nourriture. Dans celle-ci, les coliformes résistent si l’humidité est de 5-10% mais
meurent pour un degré d’humidité de 15-20%. Enfin, l’eau source potentielle de
78
contamination peut être facilement contrôlée par chloration (Nagi M.S et Raggi L.G, 1972 ;
Boado E et al, 1988)
Après une multiplication au niveau du tractus respiratoire supérieur, les bactéries
colonisent les voies respiratoires profondes (sacs aériens et poumons) grâce à leur facteur
d’adhésion. Les bactéries atteignent ensuite le compartiment sanguin et colonisent ainsi les
organes profonds (cœur, foie et rate).
La contamination peut également être verticale. Les œufs sont contaminés lors de la
ponte et E. coli est capable de pénétrer à l’intérieur de l’oeuf.
2. Etude clinique et lésionnelle
Les manifestations cliniques de la colibacillose varient notamment suivant l’age de

l’animal et le sérotype infectant. Il en résulte des syndromes variés évoluant sous forme
septicémique ou localisée.
a. Mortalité embryonnaire et du jeune poussin
Cette expression de la colibacillose est responsable d’une forte mortalité chez les
poussins de moins d’une semaine. La contamination de l’œuf (et plus précisément de la
membrane vitelline) se fait essentiellement lors de la ponte au passage du cloaque. Les œufs
contaminés présentent une coquille de moins bonne qualité, plus chaude et mouillée. On note
en parallèle des mortalités embryonnaires. Ces mortalités se poursuivent après l’éclosion et
ce, pendant une période de 3 semaines. Durant cette période les poussins peuvent présenter
des omphalites ainsi que des lésions de péricardite. Cependant la manifestation la plus
fréquente est une diminution du gain moyen quotidien, ce qui engendre des pertes
économiques conséquentes. (Lecoanet J, 1992)
b. Maladie respiratoire chronique et septicémie
Cette pathologie constitue la principale manifestation de la colibacillose et représente

une dominante pathologique chez les poulets de chair élevés industriellement. Elle affecte les
faisans, les dindes, les canards et les poulets entre l’âge de 2 et 12 semaines. Ces derniers sont
particulièrement sensibles et cette pathologie peut entraîner une mortalité importante.
Cependant l’impact économique est surtout dû au taux de morbité important (pouvant
aller jusqu’à 50%), à une réduction significative de la croissance ainsi qu’aux saisies à
l’abattoir.
La contamination se fait par voie respiratoire et est secondaire à une infection par des
mycoplasmes, par des virus à tropisme respiratoire ou bien à une irritation du tractus
respiratoire par des agents irritants de l’air.
On note d’abord une chute importante de la consommation alimentaire, accompagnée
d’une forte hyperthermie. Les animaux refusent de bouger et présentent ensuite des
larmoiements, jetages, râles, toux et sinusite. L’évolution vers une septicémie n’est pas rare.
Les principales lésions sont une aérosacculite, une péricardite, une périhépatite voire
une péritonite.
79
Il existe des formes subcliniques se traduisant seulement par une diminution de la
prise alimentaire. (Stordeur P et Mainil J, 2002)
c. Le syndrome infectieux de la grosse tête
Cette maladie apparaît le plus souvent vers la trentième semaine. Elle est caractérisée
par une inflammation aiguë des cellules de la peau et du tissu sous-conjonctif de la tête. On
note donc un œdème de la tête et de la région périorbitaire. Cette pathologie n’est pas très
fréquente mais la majorité des animaux présentant ces symptômes y succombent.
La contamination par les colibacilles est toujours secondaire à une infection par des
agents prédisposants (Coronavirus, Paramyxovirus). (Lecoanet J, 1992)
d. Autres manifestations cliniques
- Forme génitale : on assiste alors à des ovarites ou des salpingites qui font suite à la
contamination du sac aérien abdominal gauche. Les bactéries se propagent alors par
continuité. Les animaux touchés meurent en six mois.
- Coligranulomatose (Hjarres’s disease) : elle est peu fréquente, mais peut entraîner un
taux de mortalité important (jusqu’à 75%). On note l’apparition de granulomes dans le
foie, le duodénum, le caecum et le mésentère mais jamais sur rate. Il faut réaliser le
diagnostic différentiel avec la leucose et la tuberculose.
B. La mycoplasmose
Les mycoplasmes aviaires sont cosmopolites et leur importance en élevage industriel

n’est pas négligeable. La mycoplasmose rentre dans le complexe Maladie Respiratoire
Chronique. (Villate D, 2001)
1. Etiologie
Les mycoplasmes sont des procaryotes appartenant à la classe des Mollicutes. Ils sont
délimités par une simple membrane cytoplasmique ce qui les rend peu résistants dans le
milieu extérieur et sensibles à la plupart des désinfectants. Ce sont des bactéries très
sommaires mais de culture lente et difficile.
Les oiseaux peuvent abriter une vingtaine de sérotypes de mycoplasmes différents. Les
espèces les plus pathogènes sont : Mycoplasma gallisepticum, Mycoplasma synoviae,
Mycoplasma meleagridis et secondairement Mycoplasma iowae.
80
2. Epidémiologie
Les mycoplasmes peuvent affecter tout type de volaille (dinde, poule, canard, oie,
pigeon). L’installation d’une mycoplasmose respiratoire nécessite l’association de plusieurs
facteurs agissant en combinaison ou en synergie.
La transmission des mycoplasmes peut être verticale ou horizontale. La transmission
horizontale se fait entre animaux ou par le biais du matériel, de l’aliment ou de l’eau dans
laquelle le germe peut survivre quelques jours. La transmission verticale des mycoplasmes
résulte surtout du contact des sacs aériens et de l’ovaire. L’ovaire ainsi colonisé assure la
pérennité verticale à ceux-ci. (Thiaucourt L, 1984)
3. Etude spécifique
a. Mycoplasma gallisepticum
● Genre Gallus : la maladie s’exprime lors d’un stress quelconque (manipulation, vaccination,
entrée en ponte…) et complique souvent une maladie virale à expression respiratoire comme
la bronchite infectieuse ou la maladie de Newcastle. Elle est souvent compliquée ou associée
à une colibacillose.
Les symptômes observés sont des râles trachéaux et bronchiques, du jetage et de la
toux. Au niveau des lésions, on retrouve une desquamation de l’épithélium ainsi qu’un
dépolissement des sacs aériens associés parfois à la présence de bouchons caséeux. Il y a
souvent une pneumonie, une périhépatite, une péricardite fibrineuse ou purulente lors de
complications. Le microscope révélera un décapage des cils de l’escalator mucociliaire.
● Genre Meleagridis : la maladie, affectant le dindon, se traduit souvent par une sinusite sub
ou infraorbitaire chronique bilatérale. Elle peut s’étendre à toutes les membranes de l’œil.
L’inflammation est parfois telle, que l’oiseau ne peut plus ouvrir les yeux ni se nourrir.
On entend des râles trachéo-bronchiques avec dyspnée. L’examen nécropsique révèlent des
lésions trachéiques, bronchiques ainsi qu’une aérosacculite en plus de la sinusite à contenu
caséeux. ( Thiaucourt L, 1984)
b. Mycoplasma méleagridis
Il s’agit d’une mycoplasmose spécifique du dindon. Cette maladie est transmise par
l’œuf et se traduit par des aérosacculites ou des retards de croissance chez les jeunes oiseaux.
L’expression et l’aggravation de la maladie sont largement favorisées par les conditions
d’élevage.
A l’examen nécropsique on note un épaississement des sacs aériens ainsi que la
présence d’un enduit jaunâtre.
81
c. Mycoplasma synoviae
Ce mycoplasme est le plus souvent l’agent occulte d’infections respiratoires

subcliniques. Associé à des virus spécifiques, il provoque une aérosacculite. C’est aussi
l’agent essentiel de la synovite infectieuse du poulet : l’oiseau présente d’abord un retard de
croissance, une baisse de l’état général puis des lésions ostéo-articulaires s’installent.
C. La pasteurellose
La pasteurellose est une maladie infectieuse et contagieuse d’évolution le plus souvent

aiguë (septicémie) mais parfois chronique. Elle est susceptible de toucher tous les oiseaux
sauvages ou domestiques. On envisagera plus particulièrement l’aspect chronique de la
maladie qui est responsable d’une forme de maladie respiratoire chronique.
1. Etiologie
Les pasteurelles sont des bactéries Gram négatif et se présentent sous la forme de
coccobacilles ovoïdes, immobiles et encapsulés. Ces germes ne sporulent pas et sont sensibles
aux rayons solaires, à la dessiccation ainsi qu’aux désinfectants usuels.
Le genre Pasteurella est classé dans la famille des Pasteurellacea et contient de
nombreuses espèces : P. multocida, P.haemolytica, P.gallinarum. Pasteurella multocida est
responsable du choléra aviaire. Les autres pasteurelles sont plutôt des germes opportunistes
venant compliquer des affections primitives et notamment des maladies respiratoires.
2. Epidémiologie
Il s’agit d’une affection des oiseaux adultes ou subadultes. Il existe de très nombreux
porteurs sains. La transmission horizontale est surtout directe et le passage de la bactérie dans
l’organisme se fait au travers des muqueuses. Le germe pénètre essentiellement par voie
respiratoire. Les matières virulentes sont les sécrétions buccales, nasales et conjonctivales.
Tout stress est un facteur nettement favorisant de l’affection.
3. Pathogénie et clinique
Les conditions d’élevage et les affections intercurrentes immunodépressives jouent un

rôle important dans la pathogénie de la maladie. Les formes aiguës et suraiguës sont surtout
dues au choc endotoxinique et à l’invasion septicémique de la bactérie.
82
Les formes subaiguës ou chroniques compliquent souvent des mycoplasmoses ou des
affections virales.
L’expression de la pasteurellose est très variable. En ce qui concerne la pasteurellose
respiratoire on note un jetage, des éternuements, une conjonctivite, des râles trachéaux, une
aérosacculite, une périhépatite ainsi qu’une péricardite. On note certaines fois des foyers de
pneumonie.
D. Le coryza infectieux
Il s’agit d’une maladie infectieuse et contagieuse provoquée par une bactérie Gram
négatif : Avibacterium paragallinarum (anciennement Haemophilus paragallinarum). Elle se
traduit par une inflammation aiguë des voies respiratoires supérieures : conjonctivite et
sinusite. C’est un coryza capable d’affecter toutes les espèces de gallinacés. Ce sont
essentiellement les oiseaux de plus d’un mois qui sont touchés.
L’incidence de cette maladie s’est considérablement amoindrie en Europe ces
dernières décennies. Le coryza entraîne plus de morbidité que de mortalité mais il se
complique facilement. Les germes de surinfection sont comme toujours les mycoplasmes et
les colibacilles.
Les lésions sont situées au niveau de l’arbre respiratoire supérieur (muqueuse nasale,
oculaire, sinus infra-orbitaire). (Jordan et al, 2002)
On a vu l’importance des maladies respiratoires bactériennes dans la filière aviaire.

Les pertes économiques relatives à ces maladies sont extrêmement importantes. Ces pertes
peuvent être directes avec les mortalités engendrées par ces maladies mais sont surtout
indirectes avec des retards de croissances, des diminutions de ponte, des saisies à l’abattoir et
le coût des traitement ou de la prophylaxie.
Il est à noter la prédominance des bactéries à Gram négatif dans ces maladies
(Colibacilles, Pasteurelles, Haemophilus) et des Mycoplasmes.
Autre point important à retenir: le rôle de l’environnement et des facteurs de stress
dans le déclenchement de la maladie. De plus, on a vu que les infections sont très souvent le
résultat d’une synergie entre mycoplasmes, bactéries et virus. Les surinfections sont
pratiquement la règle dans les maladies respiratoires. Les bactéries profitent d’une baisse de
l’immunité de l’animal pour se multiplier. Cette baisse de l‘immunité est due au passage d’un
virus (qu’il soit sauvage ou vaccinal), d’un mycoplasme mais aussi due aux facteurs
environnementaux (humidité, ventilation, ammoniac et hygiène générale).
Il faut donc avant tout maîtriser l’ensemble des facteurs zootechniques afin de lutter
contre les maladies respiratoires bactériennes. Cependant lorsque la maladie est installée le
recours aux antibiotiques est en général la seule solution en matière de traitement. Ces
antibiotiques doivent avoir un spectre et une activité adaptés aux bactéries en cause. Comme
nous l’a vu précédemment la majorité des bactéries incriminées sont des bactéries Gram
négatif et donc dans ce cadre, l’utilisation de la colistine ou de l’enrofloxacine semble être
adaptée
83
II. Associations médicamenteuses impliquant l’enrofloxacine : intérêts dans le traitement
des pathologies respiratoires des volailles
A. Les principes généraux des associations antibiotiques et définitions des

différents types d’interactions
1. Définitions des différents types d’interactions
Les premiers travaux concernant les associations antibiotiques remontent à Jawetz et

Gunnison qui ont décrit quatre types d’interactions. Quand on associe un antibiotique A et un
antibiotique B il en résulte sur le plan bactériologique soit :
♦ Un effet additif : l’effet de l’association est égale à la somme des effets de
chaque antibiotique étudié de façon isolée à la même concentration que dans
l’association : (A+B) = (A) + (B)
♦ Un effet indifférent : l’activité de l’un des antibiotiques n’est pas affecté par la
présence de l’autre
♦ Un effet synergique : l’effet de l’association est significativement supérieur à
l’efficacité de l’antibiotique le plus actif : (A + B) > (A) + (B)
♦ Un effet antagoniste : l’association diminue l’activité de l’un ou de l’autre des
antibiotiques. Son activité est inférieure à l’effet de l’antibiotique le plus actif :
(A + B) < (A) + (B)
Les deux premiers cas sont l’effet d’une parfaite indépendance d’action alors que les
deux derniers témoignent d’une interaction au niveau des mécanismes d’actions.
On définit aussi un autre type d’interaction en cinétique de bactéricidie: la dominance.
L’antibiotique dominant impose à l’association sa dynamique d’action (cela se manifeste
pendant la phase précoce de bactéricidie). (Loussouarn M, 1998 ; Puyt J.D, 2004)
Les différents types d’interactions sont schématisés sur la figure 25.
Figure 25 : Association de deux antibiotiques (A et B) : cinétique de bactéricidie
84
2. Principes généraux des associations
Les associations devraient par principe rester l’exception et ne devraient en pratique

jamais dépasser deux antibiotiques.
Le choix d’une association de deux antibiotiques doit tenir compte des propriétés
bactériologiques de chaque antibiotique pour éviter les phénomènes d’antagonisme. Sur ces
propriétés ont été édictées les lois de Jawetz (1953) : (Loussouarn M, 1998)
♦ Règle 1 : Les antibiotiques bactéricides actifs sur les germes en

croissance (β-lactamines) présentent le plus souvent un effet antagoniste
avec les antibiotiques bactériostatiques.
♦ Règle 2 : Les antibiotiques actifs sur les germes en croissance (β-
lactamines) présentent le plus souvent un effet synergique ou indifférent
avec les antibiotiques bactéricides actifs sur les germes en phase de repos
(aminosides, polymyxines…)
♦ Règle 3 : Les antibiotiques bactéricides actifs sur les germes en phase de
repos présentent un effet additif ou synergique avec les antibiotiques
bactériostatiques (tétracyclines, chloramphénicol, macrolides,
lincosamides…)
♦ Règle 4 : Les antibiotiques bactériostatiques présentent habituellement
entre eux un effet additif.
L’ensemble des lois édictées par Jawezt est schématisé sur la figure 26.
Figure 26 : Associations d’antibiotiques (lois de Jawetz)
85
L’association enrofloxacine/colistine respecterait donc ces lois puisque ce sont deux
antibiotiques bactéricides l’un actif sur les germes en phase de repos et l’autre sur les germes
en phase de multiplication et de repos. Cependant il est difficile de savoir sans mesures
expérimentales si cette association mène à une synergie ou à une totale indifférence. Nous
verrons plus loin qu’une synergie entre ces deux molécules n’a été démontrée que pour deux
germes.
Le choix d’une association doit aussi tenir compte de la notion d’antibiotique

concentration ou temps-dépendant associée à la notion de dominance comme le montre le
tableau XVII.
Si l'antibiotique dominant est concentration-dépendant alors l'association sera

concentration-dépendante. Associé à un antibiotique B temps-dépendant, il y aura synergie si
l’antibiotique temps-dépendant favorise l'activité de l’antibiotique concentration dépendant,
sinon seulement addition ou indifférence. Associé à un antibiotique concentration-dépendant,
il y aura le plus souvent indifférence ou addition.
L'antibiotique dominant est temps-dépendant, l'association sera alors temps-
dépendante. Associé à un antibiotique concentration-dépendant, il y aura antagonisme.
Associé à un antibiotique temps-dépendant, les interactions seront faibles et dépendront de
l'antibiotique ayant la vitesse de bactéricidie la plus rapide : si c'est le dominant il y aura
indifférence, sinon un léger antagonisme.
ANTIBIOTIQUE DOMINANT
Concentration-dépendant Temps-dépendant
Association Association temps-

Temps- concentration- dépendante
dépendant dépendante (Synergie, (Indifférence ou
addition ou indifférence) antagonisme)
ANTIBIOTIQUE
ASSOCIE Association
Association temps-
Concentration- concentration-
dépendante
dépendant dépendante (Addition ou
(Antagonisme)
indifférence)
Tableau XVII : Résultats théoriques des associations au cours de la phase précoce de l’activité bactéricide des
antibiotiques. (Drugeon H.B et al, 1987)
Lors d’une association d’antibiotique on constate qu’un des deux partenaires associés
impose sa vitesse de bactéricidie à l’autre : c’est l’antibiotique dominant. Ainsi il apparaît
intéressant d’associer un antibiotique concentration dépendant dominant à un partenaire
temps-dépendant conduisant généralement à une thérapeutique synergique à vitesse de
bactéricidie rapide de type « concentration-dépendante ». La forte bactéricidie d’une telle
association va permettre de faire rapidement chuter l’inoculum bactérien. (Veber B, 2004)
86
La colistine et l’enrofloxacine sont toutes les deux concentration-dépendant vis-à-vis
des bactéries Gram négatif. La phase précoce de bactéricidie sera donc forcément de type
concentration-dépendante et cette association ne bénéficiera pas de synergie. L’avantage
d’avoir deux antibiotiques concentration-dépendants (ou temps dépendant) c’est que le
rythme d’administration des deux substances sera proche.
En revanche vis-a-vis des bactéries Gram positif l’enrofloxacine est temps-dépendant
et la colistine concentration-dépendant. Si l’antibiotique dominant est la colistine alors
l’association bénéficiera d’une cinétique de bactérécidie rapide de type concentration-
dépendant qui ferait rapidement chuter l’inoculum bactérien (Veber B, 2004). Si
l’enrofloxacine est l’antibiotique dominant alors il y aura antagonisme.
B. L’association enrofloxacine/colistine
Lorsque l’on souhaite associer deux antibiotiques, c’est pour en retirer certains
avantages. Plusieurs raisons théoriques et pratiques peuvent justifier la prescription d’une
association. Nous allons voir donc quels sont les intérêts et les inconvénients d’une telle
association, particulièrement dans le traitement des pathologies respiratoires des volailles.
1. Principaux avantages d’une association antibiotique appliquée à l’association

enrofloxacine/colistine
a. Elargissement du spectre antibactérien
Il s’agit, en effet, d’un des principaux motifs d’association en médecine vétérinaire.

Alors qu’en médecine humaine les traitements anti-bactériens sont très souvent mis en place
après indentification de la bactérie, en médecine vétérinaire ce n’est pas le cas et ce sont des
traitements anti-bactériens probabilistes qui sont mis en place.
Les infections respiratoires chez les volailles (mais aussi dans les autres espèces) sont
fréquemment pluri-bactériennes. Donc en première intention le clinicien doit utiliser un
antibiotique large spectre ou bien une association.
Dans notre cas, le spectre de la colistine est, comme nous l’avons vu précédemment,
assez étroit puisqu’elle n’est active que contre les bactéries à Gram négatif. Il faut noter
l’excellente activité vis-à-vis de Pseudomonas spp et d’E.coli.
Le spectre de l’enrofloxacine est, quant à lui, déjà considéré comme large. L’activité
vis-à-vis de Pseudomonas est variable.
L’association de la colistine à l’enrofloxacine renforcerait l’efficacité contre
Pseudomonas aeruginusa mais ce n’est pas le germe le plus impliqué dans les pathologies
respiratoires des volailles.
On a remarqué que la plupart des germes impliqués dans les pathologies respiratoires
sont des germes Gram négatif sur lesquels la colistine est très active. Cependant utilisée seule,
la colistine ne permet pas de lutter contre les Mycoplasmes, assez fréquemment mis en cause.
L’enrofloxacine est quant à elle active vis-a-vis des mycoplasmes. L’association semblerait
alors judicieuse, cependant l’enrofloxacine est active elle aussi sur les bactéries Gram négatif
et suffirait à elle seule à couvrir le spectre des principales bactéries mis en cause dans les
infections respiratoires des volailles.
87
On remarque aussi que malheureusement aucune des deux molécules n’est active
contre les bactéries strictement anaérobies (même si elles ne sont pratiquement jamais
responsables des infections respiratoires des volailles).
Il a néanmoins été démontré la synergie de l’association enrofloxacine/colistine sur

Proteus et Serratia mais ces bactéries ne sont pratiquement jamais responsables d’infections
chez les volailles. (Neuman M, 1990)
b. Prévention de l’émergence de mutants résistants
En ce qui concerne les résistances chromosomiques, on a vu que l’acquisition du

caractère résistant se fait par mutation, phénomène rare. Cette dernière propriété signifie que
la probabilité d’observer dans une population bactérienne sensible à deux antibiotiques, un
mutant (R) pour les deux antibiotiques est représenté par un taux de mutation double égal au
produit des deux taux de mutations.
La probabilité d’observer une population doublement résistante est alors très faible,
d’où l’excellente justification de l’emploi d’une association d’antibiotiques à cet effet. Les
associations d’antibiotiques sont importantes lorsqu’on utilise des antibiotiques connus pour
déterminer une fréquence de mutation élevée (streptomycine, rifamycines, fosfomycine et
novobiocine par exemple) qui empêche leur utilisation en monothérapie. Cela n’est pas encore
le cas avec l’enrofloxacine et la colistine.
L’utilisation de l’association colistine/enrofloxacine peut cependant se justifier.
Comme nous l’avons vu précédemment l’incidence des résistances contre la colistine est très
faible et celle contre l’enrofloxacine est variable selon les pays. Cette association peut donc
être envisagée dans les pays où les résistances contre l’enrofloxacine sont importantes et
croissantes. Cette association peut quand même être utile dans les autres pays, dans la mesure
où nous savons maintenant que ces résistances sont possibles et peuvent devenir importantes,
dans le but d’empêcher leur apparition.
Une étude récente a démontré que la présence de colistine, même à des concentrations
subinhibitrices, diminuait de manière significative l’apparition de mutants résistants à
l’enrofloxacine lorsqu’elle est associée à celle-ci. (Ceva, 2003) Il s’agit d’une propriété
importante qui permettrait de diminuer l’incidence des résistances à l’enrofloxacine et ainsi de
limiter l’usure précoce de cet antibiotique. Le gros risque inérant à cette association est de
voir apparaitre des germes multi-résistants.
c. Obtention d’un effet synergique
L’obtention d’une synergie et d’une action bactéricide rapide constitue la raison

principale d’une association d’antibiotiques. Il faut avant tout éviter les antagonismes.
On a vu qu’entre la colistine et l’enrofloxacine, d’après les lois de Jawetz, on peut
s’attendre à une synergie ou une indifférence. Il est donc important d’effectuer au préalable
des tests in vitro pour s’assurer de l’existence d’une synergie pour une souche donnée et
précisement de rechercher la vitesse de bactéricidie la plus rapide par méthode cinétique.
Une étude réalisée in vitro sur différentes souches bactériennes a montré un léger effet
synergique et au minimum un effet additif. Aucun effet antagoniste n’a été démontré sur la
vingtaine de souches bactériennes testées (Gram négatif). (Ceva, 2003)
88
Cependant, en pratique et en première intention, on peut se baser sur des antibiotiques
reconnus synergiques sur certaines bactéries.
L’effet synergique de l’association enrofloxacine/colistine a été démontré sur deux
bactéries : Proteus et Serratia. Le genre Serratia et certains Protéus produisent une enzyme
capable d’inactiver les polymyxines ; cette résistance est levée par l’adjonction de quinolones
qui supprimant la production de cette enzyme. Il s’agit donc d’une véritable synergie
démontrée entre la colistine et l’enrofloxacine, malheureusement peu utile dans le cadre du
traitement des pathologies respiratoires des volailles. Il reste cependant à noter que cette
association a été très peu étudiée et que par conséquent de nombreuses bactéries n’ont pas
bénéficié de tests in vitro dans le cadre de cette association. (Neuman M, 1998)
Il faut noter qu’une étude très récente a été réalisée sur l’incidence d’un traitement aux
quinolones sur la sensibilité de certaines souches bactériennes aux antibiotiques
polypeptidiques. Cette étude particulière est très intéressante dans le cadre d’une association
enrofloxacine/colistine. En effet, les auteurs ont voulu évaluer dans quelle mesure un
traitement avec des quinolones, à des concentrations sub-inhibitrices, pouvait altérer la
sensibilité des souches bactériennes à un traitement aux antibiotiques polypeptidiques. Les
résultats sont surprenants : 1 heure après avoir traité Klebsiella pneumoniae avec 0,25 fois la
CMI de la ciprofloxacine cette bactérie est plus sensible aux polymyxines (B et E) et aux
défenses immunitaires. La lévofloxacine et l’acide nalidixique à 0,25 fois la CMI augmentent
aussi la sensbilité de Klebsiella pneumoniae aux polymyxines alors que la gentamycine et la
ceftazidime utilisées dans les mêmes conditions n’ont pas cet effet. Deux autres bactéries
pathogènes, à savoir Pseudomonas aeruginosa et Haemophilus influenzae, deviennent aussi
plus sensibles aux polymyxines après un traitement avec 0,25 fois la CMI de ciprofloxacine.
Les auteurs précisent que la ciprofloxacine et levofloxacine augmentent la perméabilité de la
membrane externe de Klebsiella pneumoniae et Pseudomonas aeruginosa. Ils démontrent
aussi que ces deux fluoroquinolones augmentent la liaison des antibiotiques polypeptidiques
à la membrane externe de ces bactéries. (Campos A.M et al, 2006)
On voit donc ici que les conclusions de cet article semblent intéressantes dans le cadre
de notre association, cependant ces résultats doivent être confirmés en utilisant des
concentrations égales aux CMI car c’est le schéma thérapeutique utilisé actuellement. En effet
si l’on associe la colistine à l’enrofloxacine dans le traitement des infections respiratoires on
utilisera des doses qui permettent d’obtenir, au site d’infection, des concentrations égales aux
CMI des germes impliqués, puisqu’il s’agit de la base de l’antibiothérapie actuelle. On peut
noter aussi que les germes qui ont été testés, sont des germes qui sont souvent retrouvés lors
d’infections respiratoires chez les volailles comme il a été décrit précédemment. Par ailleurs,
les auteurs pensent que ces résultats peuvent ouvrir de nouvelles perspectives dans le cadre
des traitements antibactériens.
d. Diminution du risque toxique
On pourrait être tenté de prescrire une association dans le but de diminuer les risques
toxiques en réduisant les posologies de chaque produit et étant donné la toxicité de la colistine
on pourrait penser qu’il s’agit d’un avantage indéniable. Or ce n’est pas envisageable puisque
la réduction des doses entraînerait des taux plasmatiques et tissulaires insuffisants. La
conséquence peut être des échecs thérapeutiques ou l’apparition de résistances.
De plus, la règle veut que l’on utilise chaque substance à la même dose que celle
utilisée lorsqu’elle est administrée seule, ce qui est une nécessité absolue en cas
89
d’indifférence. Il en découle que, non seulement, une association d’antibiotique ne diminuera
jamais le risque toxique mais en plus l’inverse pourra être observé. En effet la toxicité des
deux antibiotiques s’ajoute, voire se potentialise. Par exemple, chez les insuffisants rénaux
l’utilisation d’antibiotiques néphrotoxiques comme la colistine va accentuer cette insuffisance
et provoquer une diminution de l’excrétion rénale de celui-ci. L’antibiotique et son associé
ont la possibilité d’augmenter très nettement les concentrations tissulaires et sanguines jusqu'à
atteindre des concentrations nettement toxiques.
On voit donc que l’association entre l’enrofloxacine et la colistine, dans le traitement

des pathologies respiratoires, présente peu d’inconvénients mais que les avantages, même s’ils
existent, sont aussi limités.
Nous allons voir maintenant si cette association est envisageable au niveau physico-
chimique et pharmacocinétique.
2. L’association est-elle envisageable ?
a. Propriétés physico-chimiques
On a vu dans la première partie les différentes propriétés physico-chimiques de

l’enrofloxacine ainsi que de la colistine. On se rend compte que cette association semble être
difficilement réalisable au niveau chimique. Effectivement l’enrofloxacine est soluble dans les
solvants organiques alors que la colistine ne l’est pas du tout. La colistine est base plutot forte
alors l’enrofloxacine est amphotère.
Le mélange d’une solution d’enrofloxacine avec une solution ou de la poudre de
colistine conduit rapidement à la formation d’un précipité (en une vingtaine de minute). Des
stabilisteurs ou des tampons doivent être utilisés pour stabiliser un mélange
enrofloxacine/colistine.
b. Propriétés pharmacocinétiques
1. Résorption :
C’est à ce niveau que l’on a la plus grosse incompatibilité. En effet, la résorption orale
de la colistine est quasi-nulle alors que celle de l’enrofloxacine est rapide et complète. On ne
pourra pas utiliser cette association par voie orale dans le but de traiter directement une
infection respiratoire et si l’on veut que les deux antibiotiques soient présents au niveau du
foyer infectieux. La résorption parentérale de la colistine et de l’enrofloxacine est rapide et
complète. Ce seront donc les voies parentérales qui seront à privilégier pour cette association
dans le traitement des infections respiratoires des volailles. Cependant l’utilisation par voie
orale de la colistine n’est pas abérrante pour autant. Comme nous l’avons vu précedemment,
les bactéries, et plus précisément les Escherichia coli acquièrent une facteur d’adhésion dans
le tube digestif. C’est à ce niveau là que l’utilisation de la colistine est très interessante. En
effet la colistine possède une excellente activité dans le tube digestif sur Escherichia coli
lorsqu’elle est administrée par voie orale. Le bénéfice de l’utilisation de la colistine par voie
orale est donc indirect mais très intéressant dans le cadre d’une maladie contagieuse pour
90
laquelle l’influence de l’environnement est grande. L’association peut donc s’utiliser par voie
voie parentérale et orale. Chez les volailles, la voie la plus facile et la plus utilisée est la voie
orale. En effet l’eau d’abreuvement est fréquemment utilisée comme voie d’administration
surtout lorsqu’il s’agit de traiter un lot d’animaux ce qui est le cas lors de pathologies
d’élevages fortement contagieuses.
Une alternative à cette voie d’administration pour traiter de nombreux
animaux simultanément est la voie pulmonaire par nébulisation ou brumisation. Cette voie est
intéressante car la résorption pulmonaire des deux antibiotiques est bonne. De plus dans le
cadre du traitement de pathologies respiratoires cette voie est tout à fait adaptée.
2. Distribution
La distribution de la colistine est pratiquement exclusivement extra-cellulaire alors que

la distribution de l’enrofloxacine est très large et plutôt tissulaire. L’association trouve ici une
justification puisqu’il y a une complémentarité dans les propriétés de diffusion au sein du
foyer infectieux.
Les deux antibiotiques se lient peu aux protéines plasmatiques, il ne risque donc pas
d’y avoir une trop grande compétition au niveau du site de fixation de ces protéines. En effet,
on sait que l’administration simultanée de deux composés se fixant sur les même sites
protéiques conduit à des phénomènes de compétition, augmentant la fraction libre active dans
des proportions notables et l’apparition d’effets toxiques. Ceci pourrait avoir de graves
conséquences notamment vis-à-vis de la toxicité de la colistine. Cependant étant donné le
faible taux de fixation des deux molécules aux protéines ces effets toxiques semblent peu
importants à prendre en considération. Pour une sécurité maximale, notamment chez la brebis
et le veau (et le chien avec le dérivé) il serait tout de même intéressant de le vérifier.
3. Biotransformations
La colistine subit peu de biotransformations en raison de sa faible solubilité dans les

solvants organiques et de sa stabilité. L’enrofloxacine possède un effet inhibiteur sur le
cytochrome p450: cette inhibition pose un problème si l’on souhaite associer à l’enrofloxacine
une molécule très biotransformée passant par la voie du cytochrome p450. Cela n’est pas le
cas de la colistine.
La vitesse de biotransformation doit être prise en compte. En effet pour que
l’association persiste efficacement dans l’organisme il faut que les vitesses d’élimination des
deux antibiotiques soient proches. C’est effectivement le cas dans cette association
enrofloxacine/colistine. Les temps de demi-vie des deux antibiotiques sont assez proches
même s’il existe des variations inter-spécifiques. Cette association ne devrait pas poser de
problème pour cette donnée pharmacologique.
4. Elimination
L’élimination des deux molécules se fait en majeure partie (voire quasi exclusivement
pour la colistine) par voie rénale. Cette élimination rénale est très importante à prendre en
91
considération. Chez les insuffisants rénaux, cette association sera sans doute contre-indiquée
ou du moins, si elle est tout de même utilisée, les doses devront être réduites. C’est un point
extrêmement important compte tenu de la toxicité rénale de la colistine. Cette association sera
contre-indiquée pour les mêmes raisons chez les animaux déshydratés ou fortement débilités.
C. L’association enrofloxacine/bromhexine
Compte tenu des différentes propriétés mucorégulatrice, anti-inflammatoire et anti-

oxydante de la bromhexine, son emploi lors de pathologies respiratoires semble judicieux. La
prescription de mucorégulateurs lors d’infections respiratoires chez l’homme est d’ailleurs
très répandue.
Une propriété très importante, évoquée précedemment est la faculté de la bromhexine a
accroître les concentrations locales d’antibiotiques lors de leur administration concomitante.
Cette propriété semble particulièrement intéressante dans l’objectif d’association de la
bromhexine à l’enrofloxacine. C’est pour cela que l’on développera plus particulièrement
cette propriété. Plusieurs études, sur différentes espèces l’ont confirmée. (Gogny M, 1995 ;
Kieffer P, 1985).
Une étude, réalisée chez des poulets, a montré une concentration en ciprofloxacine
nettement plus élevée dans de nombreux organes lorsque l’enrofloxacine est utilisée en
association avec la bromhexine que lorsqu’elle est utilisée seule. (Ceva, 2005)
Martin G.P et al ont montré une augmentation significative de la concentration
d’oxytétracycline dans les sécrétions bronchiques de mini porcs lors d’association à la
bromhexine. L’étude est réalisée sur seulement 3 mini-porcs. Ils réalisent cette étude en co-
administrant 40 mg/kg deux fois jour d’oxytétracycline et 0,5mg/kg de bromhexine per os
pendant 5 jours. Outre ce résultat, ils montrent que la bromhexine anihile l’augmentation de
viscosité crée par l’oxytétracycline. (Martin G.P et al, 1993).
Les résultats se révèlent être différents dans l’étude de Friis et al réalisée sur des veaux
de 8 à 10 semaines. Les résultats de cette étude, présentés sur la figure 27, sont obtenus après
une unique co-administration d’oxytétracycline à 10 mg/kg en intra-veineux et de bromhexine
à 2 mg/kg en intra-musculaire.
Figure 27 : Concentration d’oxytétracycline dans le plasma ○, les sécrétions bronchiques ● et nasales ▲ après
administration de 10 mg/kg d’oxytétracycline IV avec ou sans administration simultanée de bromhexine à
2mg/kg IM.
92
On remarque donc que l’administration simultanée de bromhexine n’augmente la
concentration ni dans les sécrétions bronchiques, ni dans les sécrétions nasales.
L’auteur propose deux hypothèses pour expliquer les différences entre ses résultats et
les résultats obtenus dans d’autres études notamment celle de Kotzian J et al. La première
serait que ces différences soient dues à l’utilisation de méthodes analytiques différentes. Dans
l’étude de Kotzian, les analyses avaient été réalisées grâce à des dosages microbiologiques
alors que dans celle-ci les dosages ont été réalisés par chromatographie liquide à haute
performance. L’auteur pense que la bromhexine peut influencer les résultats des dosages
microbiologiques. L’autre hypothèse émise par l’auteur serait que la bromhexine n’est pas
capable d’augmenter la concentration d’oxytétracycline après une unique injection.
L’augmentation de la concentration d’oxytétracycline dans les différentes sécrétions de
l’arbre respiratoire grâce à la bromhexine nécessiterait plusieurs administrations. Cette
hypothèse est probablement à privilégier car l’administration unique d’antibiotique et de
bromhexine n’est scientifiquement pas fondée.
Les conclusions tirées de cette étude doivent être prises avec précaution vu le petit
nombre d’animaux utilisés. En effet cette étude a été menée sur 4 veaux frisons ce qui signifie
que n=2 veaux par lot. On peux donc réellement s’interroger surla représentativité de ces lots
et par conséquent sur la significativité de ces résultats. (Friis C et al, 1995)
Friis voulait comparer ces résultats à ceux de Kotzian. En effet Kotzian et al ont aussi
réalisé une étude sur l’association bromhexine/oxytétracycline chez les bovins. Et les résultats
sont totalement opposés puisque cette étude montre une augmentation de plus de 360% de la
concentration d’oxytétracycline dans les sécrétions bronchiques ! (Kotzian et al, 1976)
Pashov D et al ont également travaillé sur le sujet en étudiant l’association

bromhexine/tylosine chez le porc. Dans cette étude, on utilise de la tylosine à 10mg/kg en IM
et de la bromhexine à 0,6 mg/kg en IM. Les analyses sont réalisées par des méthodes
microbiologiques. Les résultats montrent une augmentation significative de la concentration
de tylosine dans le sérum, les sécrétions nasales et les organes internes (comme le poumon). Il
semblerait que l’absorption et la biodisponibilité de la tylosine soit aussi augmentée. (Paschov
D et al, 1997)
Escoula et al ont également testé les effets de la bromhexine sur des bovins. La
bromhexine est ici utilisée en I.M une fois par jour pendant 3 jours (45mg/animal).
L’antibiotique testé est de la famille des macrolides : la spiramycine (20mg/kg les deux
premiers jours). Cet antibiotique est retrouvé dans le tractus respiratoire à une concentration
10 fois supérieure à celle trouvée dans le sang. Escoula se demandait si la bromhexine
permettait d’augmenter encore cette concentration. Les résultats de cette étude mettent en
avant plusieurs choses remarquables.
Premièrement, en suivant la pharmacocinétique de la spiramycine, on s’apercoit que le
pic plasmatique de concentration est différent suivant le groupe. En effet le pic de
concentration de spiramycine sans bromhexine se situe à 30 min post-injection alors qu’en
présence de bromhexine il se situe à 2 heures post-injection. Cela suggère un mode de
distribution différent sous l’influence de la bromhexine.
Deuxièmement on s’aperçoit qu’en présence de bromhexine, la concentration de
spiramycine dans les sécrétions nasales est plus importante (Figure 28 : l’aire sous la courbe
est proportionnelle à la concentration). Cette augmentation est de 6% le premier jour, 42% le
deuxième jour et de 32% le dernier jour. On peut remarquer que l’action de la bromhexine est
peu visible le premier jour et par contre maximale le deuxième jour. Ces résultats pourraient
expliquer les résultats obtenus par Friis. (Escoula L et al, 1982)
93
Enfin, on remarque que la concentration de spiramycine est encore élevée 48h après la
dernière injection de l’antibiotique et 24h après la dernière injection de bromhexine alors
qu’elle n’est plus détectée dans le sang. (Tableau XVIII)
Figure 28: Pharmacocinétique de la spiramycine avec (B) ou sans bromhexine (A).
Tableau XVIII : Concentration de la spiramycine (µg/g) dans les sécrétions nasales de bovins recevant de la
spiramycine (S) ou de la spiramycine + bromhexine (SB).
94
Bergogne-Berezin a réalisé une étude en associant la bromhexine à deux
antibiotiques : l’érythromycine et l’amoxicilline. Cette étude a été réalisée sur 48 patients en
milieu hospitalier. L’erythromycine est utilisée à la dose habituelle (0,5g deux fois par jour)
pendant 3 jours et l’amoxicilline à la dose de 1g/BID pendant 7 jours. Deux doses de
bromhexine, (48mg et 96mg/j) sont utilisées. L’action de la bromhexine est montré par le
ratio de la concentration dans les sécrétions bronchiques sur la concentration du sérum au
même moment. Les résultats montrent une élévation significative de la pénétration de
l’erythromycine et de l’amoxicilline dans les sécrétions bronchiques en présence de
bromhexine. Il est à noter également que le pourcentage de pénétration est plus élevé lorsque
la dose de bromhexine est de 96mg (4,3% contre 7,5%). Pour l’auteur ces résultats confirment
l’efficacité de la bromhexine : cette molécule à la capacité de rompre les chaînes de
mucopolysaccharides des sécrétions bronchiques et ainsi de favoriser localement l’absorption
de l’antibiotique. (Bergogne-berezin E et al, 1985)
L’aptitude de la bromhexine à augmenter la concentration d’antibiotiques au niveau de

l’arbre respiratoire et de ses sécrétions est démontrée par toutes les études hormis une, qui
reste critiquable.
Est-ce que le principal métabolite de la bromhexine, l’ambroxol permet également
cette potentialisation ? Les études qui suivent sont relatives à ce sujet.
Ainsi, une étude réalisée sur cinq purs-sangs a montré une augmentation de 50% de la
concentration de la céphalotine (béta-lactamine) dans le liquide broncho-alvéolaire lors
d’association à l’ambroxol par voie orale. Les résultats de cette étude sont présentés sur la
figure 29.
Figure 29 : Variation de la concentration de céphalotine ajustée au taux de protéine dans le liquide broncho-
alvéolaire. Céphalotine plus ambroxol, céphalotine seule.
On peut noter que le nombre d’animaux utilisé est ici faible (5) mais l’auteur précise
que l’expérience a été répété sur chaque cheval quatre fois à une semaine d’intervalle et que
les résultats sont des moyennes. On remarque aussi que l’effet de l’ambroxol apparaît ici
après seulement une heure. (Matsuda Y,1999)
95
Une autre étude, associant l’ambroxol (PO) à l’ampicilline, à l’amoxicilline ou à
l’érythromycine, a été réalisée chez le rat. Les résultats de cette étude sont sans équivoque :
l’ambroxol permet une augmentation significative (p<0,05) de la concentration
bronchopulmonaire d’ampicilline de plus de 234%, de celle de l’érythromycine de 27% et de
celle de l’amoxicilline de 27%. (Wiemeyer J-C, 1981)
Spatola et al a aussi testé l’association amoxicilline /ambroxol (60mg trois fois par
jour, PO) chez l’homme et les résultats sont du même ordre. On note une augmentation de la
concentration d’antibiotique dans les tissus pulmonaires ainsi qu’un ratio concentration
pulmonaire sur concentration du sérum augmenté. (Spatola et al, 1987). Des résultats
identiques sont obtenus dans l’étude de Gene et al : l’augmentation de la concentration
d’amoxicilline est objectivée dans le liquide broncho-alvéolaire. (Gene et al,1987)
La seule étude de ce genre faisant intervenir une quinolone est celle de Pagagnin et al.
Celui-ci recherchait les effets de l’ambroxol sur la concentration d’ofloxacine dans les tissus
pulmonaires chez l’homme. Elle est réalisée sur 24 patients souffrant de maladie pulmonaire
chronique. Le groupe testé reçoit 200mg BID d’ofloxacine et 30mg TID d’ambroxol pendant
10 jours. Les analyses sont réalisées au terme du dixième jour. Les résultats montrent que
l’ambroxol n’augmente pas la concentration bronchique d’ofloxacine de manière
significative. Cependant la concentration d’ofloxacine est trois fois plus élevée dans les
cellules alvéolaires du groupe testé que dans le groupe témoin. L’auteur précise que la
concentration d’ofloxacine est naturellement élevée dans les tissus pulmonaires. Cet argument
n’explique pas totalement ces résultats étant donné que l’ofloxacine n’est pas le seul
antibiotique à diffuser largement dans les tissus pulmonaires. En effet les antibiotiques de la
famille des macrolides ont aussi une concentration pulmonaire élevée. Or on a vu
précédemment que certains macrolides voient leur concentration pulmonaire augmenter en
présence d’ambroxol (et même de bromhexine) (Paganin F et al, 1995) Cependant les
résultats de cette étude paraissent montrer que l’association d’une fluoroquinolone avec
l’ambroxol ne permet pas une synergie comme celle décrite avec les β-lactamines, les
macrolides, tétracyclines ou céphalosporines, permettant une augmentation de la
concentration d’antibiotique dans les sécrétions bronchiques et/ou les tissus pulmonaires.
Cependant l’extrapolation de ces résultats à l’association bromhexine/enrofloxacine reste
difficile à réaliser car il s’agit du dérivé de la bromhexine et qu’il ne s’agit pas du même
antibiotique (même s’il appartient à la même famille). L’ensemble de ces résultats est
récapitulé dans le tableau XIX.
96
Antibiotiques
Bromhexine/Ambroxol Voie Espèce Résultat Auteur/Date
Famille Molécule
Quinolone Enrofloxacine Bromhexine PO Poulet Positif Ceva
Tétracycline Oxytétracycline Bromhexine PO Mini-porc Positif Martin G.P et al/1993
Tétracycline Oxytétracycline Bromhexine IV Veau Négatif Friis et al/1991
Tétracycline Oxytétracycline Bromhexine Bovin Positif Kotzian et al/1976
Macrolide Tylosine Bromhexine IM Porc Positif Paschov et al/1997
Macrolide Spiramycine Bromhexine IM Bovin Positif Escoula et al/1981
Macrolide Erythromycine Bromhexine PO Homme Positif Bergogne-berezin E et al/1985
Béta-lactamine Amoxicilline Bromhexine PO Homme Positif Bergogne-berezin E et al/1985
Béta-lactamine Céphalotine Ambroxol PO Cheval Positif Matsuda Y et al/1999
Béta-lactamine Ampicilline Ambroxol PO Rat Positif Wiemeyer J-C/1981
Béta-lactamine Amoxycilline Ambroxol PO Rat Positif Wiemeyer J-C/1981
Béta-lactamine Amoxycilline Ambroxol PO Homme Positif Gene et al/1987
Béta-lactamine Amoxycilline Ambroxol PO Homme Positif Spatola et al/1987
Macrolide Erythromycine Ambroxol PO Rat Positif Wiemeyer J-C/1981
Quinolone Ofloxacine Ambroxol Homme Positif/Négatif Pagagnin F et al/1995
Tableau XIX : Résultats comparés des différentes études sur l’association entre la bromhexine ou l’ambroxol et divers antibiotiques
97
Il est à noter que très peu d’auteurs peuvent justifier cette synergie. En effet, les
mécanismes d’action de la bromhexine ou de l’ambroxol vis-à-vis des anti-infectieux restent
flous. On s’aperçoit seulement que l’accès de l’anti-infectieux au site infectieux est facilité et
sa concentration in situ augmentée. Wiemeyer avance tout de même quelques hypothèses. Il
pense que l’ambroxol augmente la perméabilité des vaisseaux sanguins et du tractus
respiratoire.
Une étude expérimentale portant sur la bromhexine et l’enrofloxacine en association

nous permettrait de savoir avec certitude si la concentration d’antibiotique dans les diverses
sécrétions du tractus respiratoire est réellement accrue en présence de bromhexine. Il est à
noter qu’il est possible que ces résultats soient variables en fonction de l’espèce et que la
probable synergie devra être étudiée sur plusieurs espèces. D’autres paramètres ont été
analysés lors d’une étude expérimentale réalisée en 2007 sur des poulets par le laboratoire
CEVA. Ainsi la morbidité, la mortalité, le score lésionnel et le gain moyen quotidien ont été
étudiés sur des lots traités avec de l’enrofloxacine seule ou en association avec de la
bromhexine lors d’une colibacillose expérimentale. Tous ces paramètres ont permis de
calculer un index d’efficacité clinique. Bien qu’en faveur de l’association
enrofloxacine/bromhexine en ce qui concerne la mortalité et l’efficacité clinique, on ne peut
conclure à une supériorité de celle-ci par manque de puissance statistique (les résultats ne sont
pas significatifs). Les traitements se sont toutefois montrés très efficaces.
Compte tenu des nombreuses propriétés de la bromhexine et des résultats obtenus lors
de son association avec l’enrofloxacine, l’association lors d’infections respiratoires chez les
volailles, semble judicieuse.
99
100
BIBLIOGRAPHIE
AIHARA M, DOBASHI K, AKIYAMA M, NARUSE I, NAKAZAWA T, MORI M.

(2000)
Effects of N-acetylcysteine and ambroxol on the production of IL-12 and IL-10 in human
alveolar macrophages, Respiration. 67(6), 662-671.
AL KHAYYAT A.A, ARONSON A.L (1973)

Pharmacological and toxicologic studies with the polymyxins. Comparative pharmacologic
studies of the sulphate and methanesulfonate salts of polymyxin B and colistin in dogs,
Chemotherapy, 19, 2, 75-97.
ALTREUTHER P. (1987)
Data on chemistry and toxicology of Baytril, Vet. Med. Rev.,(2), 87-90.
AMARA A, ZIANI Z, BOUZOUBAA K (1995)

Antibioresistance of Escherichia coli strains isolated in Morocco from chickens with
colibacillosis, Vet. Microbiol., 43, 325-330.
ANADON A. (1992)
Les fluoroquinolones: aspects pharmacodynamiques et toxicologiques, Bull. Acad. Vet De
France, 65, 207-216.
ANADON A, MARTINEZ-LARRAÑAGA M.R, DIAZ M.J, BRINGAS P, MARTINEZ

M.A, FERNANDEZ-CRUZ M.L, FERNANDEZ M.C, FERNANDEZ R. (1996)
Pharmacokinetics and residues of enrofloxacin in chickens. Am J Vet Res.,56(4),501-506.
ANTRAS V. (1994)
Essais cliniques de l’enrofloxacine sur les infections respiratoires supérieures du chat. Thèse
de Doctorat Vétérinaire, Université Claude Bernard, Lyon, 140p.
ARCHIMBAULT P, BOUTIER C, FELLOUS R, MUSCAT G. (1980)

Etude pharmacocinétique de la colistine chez les bovines, Rec. Med. Vet, 156, (9), 612-626.
ARNE P, MARC D, BREE A, SCHOULER C, DHO-MOULIN M. (2000)

Increased tracheal colonization in chickens without impairing pathogenic properties of avian
pathogenic Escherichia coli MT78 with a fimH deletion. Avian Dis. ,44(2),343-55.
BAHRI L.E, BLOUIN A. (1991)

Fluoroquinolones: a new family of antimicrobials, Comp. Educ. Pract. Vet. 13, 9, 1429-1434.
BAILEY T.A, SHEEN R.S, SILVANOSE C, SAMOUR J.H, GARNER A, HARRON

D.W. (1998)
Pharmacokinetics of enrofloxacin after intravenous, intramuscular and oral administration in
houbara bustard (Chlamydotis undulata macqueenii). J Vet Pharmacol Ther. 21(4),288-297.
BAUDITZ R. (1987)
Results of clinical studies with Baytril in Poultry, Vet. Med. Rev., (2), 130-136.
101
BAYER (1996)
Baytril. Enrofloxacine: approche rationelle de l’antibiothérapie, Bayer fiche technique 1-10.
BECHGAARD E, NIELSEN A. (1982)

Bioavailability of bromhexine tablets and preliminary pharmacokinetics in humans, Biopharm
Drug Dispos. , 3(4), 337-344.
BEHRA S. (2003)
Influence d'un traitement oral à la fluméquine sur la résistance aux quinolones des souches
d'Escherichia coli dans la flore fécale des porcs, Thèse de Doctorat Vétérinaire, Faculté de
Médecine de Nantes, 77p.
BERGENDI L, BENES L, DURACKOVÁ Z, FERENCIK M. (1999)

Chemistry, physiology and pathology of free radicals, Life Sci. 65(18-19),1865-1874.
BERGEROT P. (1993)
Contribution à l’étude des quinolones ; intérêt de leur utilisation lors des maladies néonatales
du veau. Thèse de Doctorat Vétérinaire, Université Claude Bernard, Lyon, 67p.
BERGOGNE-BEREZIN E, BERTHELOT G, KAFE H.P, DOURNOVO P.(1985)

Influence of a fluidifying agent (bromhexine) on the penetration of antibiotics into respiratory
secretions Int J Clin Pharmacol Res. 5(5):341-4.
BERMINGHAM E.C, PAPICH M.G, VIVRETTE S.L. (2000)

Pharmacokinetics of enrofloxacin administered intravenously and orally to foals. Am J Vet
Res., 61(6), 706-709.
BLANCO J.E, BLANCO M, MORA A, BLANCO J. (1997)

Prevalence of bacterial resistance to quinolones and other antimicrobials among avian
Escherichia coli strains isolated from septicemic and healthy chickens in Spain, J Clin
Microbiol., 35 (8),2184-2185
BOADO E, GONZALIZ A, MASDEU V, FONESCA C, VIAMONTES O, CANEJO V.J

(1988)
Chloracion del agua de beber contra la coliseptacemia, Revista agricultura, 32, 45-58
BONNAUD F, GERMOUTY J. (1979)

Les fluidifiants bronchiques, Gaz. Med. De France, 86 (9), 901-908.
BOOTHE D.M (1994)

Enrofloxacin revisited, Veterinary Medicine, 744-753.
BROWN S.A. (1996)

Fluoroquinolones in animal health. J. Vet. Pharmacol. Therap., 19, 1-14
BRYSKIER A, CHANTOT J.F. (1995)

Classification and structure-activity relationships of fluoroquinolones, Drugs, 49,supp 2, 16-
28.
102
CAMPOS A.M, MAUREY P, BENGOECHEA J.A. (2006)
Quinolones sensitize Gram-negative bacteria to Antimicrobial Peptides, Antimicrobial Agents
and Chemotherapy, 50 (7), 2361-2367.
CARLSON H.C, WHENHAM G.R. (1968)

Coliform bacteria in chicken broiler house dust and their possible relationship to coli-
septicemia, Avian disease, 12, 297-302.
CATELLA S. (2003)
Evaluation de l'efficacité de Baytril nd 5 % solution injectable dans le traitement d'une
infection respiratoire à Mycoplasma bovis chez le veau, Thèse de Doctorat vétérinaire,
Faculté de médecine de Créteil, Maison-Alfort, 101p.
CAUSSE F. (1987)
Reproduction expérimentale de la colibacillose septicémique chez le veau : traitement par une
nouvelle quinolone : le Baytril (nd), Thèse de Doctorat vétérinaire, Faculté de médecine de
Créteil, Maison-Alfort, 87p.
CHABRE B (1984)
Les modificateurs du mucus respiratoire, Thèse de Doctorat Vétérinaire,Faculté de médecine
de Créteil, Maison-Alfort, 105p.
CLOUD S.S, ROSENBERG J.K, FRIES P.A, WILSON R.A, ODOR E.M (1986)
In vitro and in vivo characterization of avian Escherichia Coli. Serotypes, metabolic activity
and antibiotic sensitivity,29, (4), 1084-1093.
COOPERSTOCK M.S (1974)

Inactivation of endotoxin by polymyxin B. Antimicrob. Agents Chemother., 6, 422-425.
CORDELETTE R. (2000)
Pharmacovigilance des fluoroquinolones de troisième génération chez les animaux de
compagnie: étude bibliographique. Thèse de Doctorat Vétérinaire, Université Claude Bernard,
Lyon, 166p.
COURVALIN P. (2008)
La résistance des bactéries aux antibiotiques : combinaisons de mécanismes biochimiques et
génétiques, Bull. Acad. Vét. Fr. 161, (1) , 7-12.
DALHOFF A. (1995)
Pharmacodynamics of quinolones, Drugs, 49, Suppl. 2, 197-199.
DELANNOY J. (1988)
Reproduction expérimentale de la pasteurellose pulmonaire chez les jeunes bovins. Essai de
traitement par une nouvelle quinolone : l'enrofloxacine, Thèse de Doctorat vétérinaire, Faculté
de médecine de Créteil, Maison-Alfort, 74p.
DHO-MOULIN.M, FAIRBROTHER.J.M (1999)

Avian pathogenic Escherichia Coli (APEC), Vet Res., 30, 299-316.
103
DHO-MOULIN M, VAN DEN BOSH J.F, GIRARDEAU J.P, BREE A, BARAT T,
LAFONT J.P. (1990)
Surface antigens from Escherichia coli O2 and O78 strains of avian origin, Infect Immun.,
58(3), 740-745.
DISSE B.G, ZIEGLER H.W. (1987)

Pharmacodynamic mechanism and therapeutic activity of ambroxol in animal experiments, 51
Suppl 1,15-22.
DOZOIS C.M, DHO-MOULIN M, BREE A, FAIRBROTHER J.M, DESAUTELS C,

CURTISS R. (2000)
Relationship between the Tsh autotransporter and pathogenicity of avian Escherichia coli and
localization and analysis of the Tsh genetic region. Infect Immun. 68(7), 4145-4154.
DOZOIS C.M, FAIRBROTHER J.M, HAREL J, BOSSE M. (1992)

Pap-and pil-related DNA sequences and other virulence determinants associated with
Escherichia coli isolated from septicemic chickens and turkeys. Infect Immun., 60(7),2648-
2656.
DRLICA K, ZHAO X. (1997)

DNA gyrase, topoisomerase IV, and the 4-quinolones. Microbiol Mol Biol Rev. 61(3),377-92.
DRUGEON H.B, DELLAMONICA P, CAILLON J. (1987)

Synergie, addition, indifference, antagonisme et dominance, Path. Biol., 35 (5), 495-500.
DUBOIS A.M (1996)

Etude pharmacocinétique de l'enrofloxacine dans les oeufs de dindes traitées en cours de
ponte. Application à la prévention de la mycoplasmose dans cette espèce, Thèse de Doctorat
vétérinaire, Faculté de médecine de Nantes, 70p.
DUCOS DE LAHITTE J. (1996)

Clinical use of fluoroquinolones in exotic animals. Suppl. Compend. Contin. Educ. Pract.
Vet., 18(2), 58.
ELLIS M.G, ARP L.H, LAMONT S.J (1988)

Serum resistance and virulence of Escherichia coli isolated from turckeys, Am. J. of Vet.
Res., 46, 2034-2037.
EMERY D.A, NAGARAJA K.V, SHAW D.P, NEWMAN J.A, WHITE D.G (1992)
Virulence factors of Escherichia Coli associated with colisepticemia in chickens and turkeys,
Avian Dis, 36, 504-511.
ESCOULA L, COSTE M, LARRIEU G (1981)a

Biodisponibilité de l’association Erythromycine-colistine chez les veaux, Ann. Rech. Med,
12, 321-326.
ESCOULA L, LARRIEU G, CAMGUILHEM R. (1981)b

Enhancement of spiramycin concentration by bromhexin in the bovine nasal secretions. Ann
Rech Vet. 12(3), 317-320.
104
ESPINASSE J, DELLAC B, SILMI A, KHELEF D, VISO M. (1987)
Essai d’une nouvelle quinoloneBAYTRIL dans la salmonellose et colibacillose du veau.
XXIII Congres Mondial Vétérinaire, Montréal, 16-21 aout 1987,10.1.8.
EUZEBY J.P (2006)

Société de Bactériologie Systématique et Vétérinaire (SBSV), Abrégé de Bactériologie
Générale et Médicale à l'usage des étudiants de l'Ecole Nationale Vétérinaire de Toulouse,
adresse URL : http://www.bacteriologie.net
FELIX K, PAIRET M, ZIMMERMANN R. (1996)

The antioxidative activity of the mucoregulatory agents: ambroxol, bromhexine and N-acetyl-
L-cysteine. A pulse radiolysis study. Life Sci. 59(14),1141-1147.
FEVE C (1997)
Approche rationnelle des antibiotiques et antibiogrammes, Document Bayer 65p.
FILALI E, BELL J.G, EL HOUADFI M, HUGGINS M.B, COOK J.K., (1988)

Antibiotic resistance of Escherichia coli strains isolated from chickens with colisepticaemia in
Morocco, Comp Immunol Microbiol Infect Dis., 11(2), 121-124.
FLOC’H S, (1997)
Utilisation de l'enrofloxacine dans le traitement des gastro-entérites néonatales du veau, Thèse
de Doctorat vétérinaire, Faculté de médecien de Nantes, 75p.
FRIIS C, BJERREGAARD J, HOFFMANN K, (1991)

Pharmacokinetics of bromhexine an dits effect on oxytetracycline penetration into bronchial
secretions in calves, Acta Vet. Scandinavia, sup 87, 158-160.
GARAU J, XERCAVINS M, RODRÍGUEZ-CARBALLEIRA M, GÓMEZ-VERA JR,

COLL I, VIDAL D, LLOVET T, RUÍZ-BREMÓN A. (1999)
Emergence and dissemination of quinolone-resistant Escherichia coli in the community,
Antimicrob Agents Chemother, 43(11), 2736-2741.
GARCÍA OVANDO H, GORLA N, LUDERS C, POLONI G, ERRECALDE C,

PRIETO G, PUELLES I. (1999)
Comparative pharmacokinetics of enrofloxacin and ciprofloxacin in chickens. J Vet
Pharmacol Ther., 22(3),209-212.
GEORNARAS I, HASTINGS JW, VON HOLY A. (2001)

Genotypic analysis of Escherichia coli strains from poultry carcasses and their susceptibilities
to antimicrobial agents. Appl Environ Microbiol., 67(4),1940-1944.
GENE R, PODEROSO J.J, CORAZZA C, LASALA M.B, WIEMEYER J.C,

FERNANDEZ M, GUERREIRO R.B. (1987)
Influence of ambroxol on amoxicillin levels in bronchoalveolar lavage fluid,
Arzneimittelforschung., 37(8),967-968.
GIGUERE S, PRESCOTT J.F, BAGGOT J.D, WALKER R.D, DOWLING P.M. (2006)
Antimicrobila Therapy in Veterinary Medicine, 4eme edition, Ames, Blackwell Publishing,
629p.
105
GOEBEL T. (1996)
Clinical use of fluoroquinolones in exotic animals and small mammals. Suppl. Compend.
Contin. Educ. Pract.VET., 18(2), 49-57.
GOGNY M. (1995)
Thérapeutique en pathologie respiratoire, Encyclopédie Vétérinaire, Paris, Pharmacologie-
toxicologie 0300, 1-9.
GOGNY, M. (2004)
Principe actif la bromhexine, Nouv. Prat. vét. equine, (1), 61-62.
GOGNY M, SOUILEM O. (1994)

La toux chez les carnivores, I Physio-pathologie et étiologie, Le Point Vét.,(25), 156,741-745.
GOGNY M, SOUILEM O. (1994)

La toux et son traitement chez les carnivores. II Attitude thérapeutique, Le Point Vét., 25,
(156), 747-752.
GYLES C.L (1994)

Escherichia coli in domestic animals and human, Wallingford CAB International, 666 p.
HARRY E.G, (1964)

The survival of Escherichia coli in the dust of poultry houses, Vet. Record, 76, 466-470.
HARRY E.G, HEMSLEY L.A. (1965)

The association between the presence of septicaemic strains of Escherichia coli in the
respiratory and intestinal tracts of chickens and the occurrence of coli septicaemia. Vet record,
77, 241-245.
HASEGAWA I, NIISATO N, IWASAKI Y, MARUNAKA Y. (2006)

Ambroxol-induced modification of ion transport in human airway Calu-3 epithelia, Biochem
Biophys Res Commun. 5, 343(2), 475-482.
HAWLEY J.S, MURRAY C.K, JORGENSEN J.H (2008)

Colistin heteroresistance in acinetobacter and its association with previous colistin therapy,
Antimicrob. Agents. Chemother, 52 (1), 351-352.
HEATH MF, JACOBSON W. (1985)

The inhibition of lysosomal phospholipase A from rabbit lung by ambroxol and its
consequences for pulmonary surfactant. Lung. 163 (6),337-344.
HELLER E.D, DRABKIN N (1977)

Some characteristic of pathogenic Escherichia coli, British Vet. Journal, 133, 572-578.
HOOGKAMER J.F.W, KLEINBLOESEM C.H (1995)

The effect of milk consumption of the pharmacokinetics of fleroxacine and ciprofloxacin in
healthy volunteers, Drugs, 49, Supp.2, 346-348.
HORTON H.R, MORAN L.A, OCHS R.D, RAW J.D, SCRIMGEOUR K.G .(1994)
Principe de biochimie, Bruxelles, De Boeck Université, 720p.
106
IKE K, KUME K, KAWAHARA K, DAMBARA H. (1990)
Serotyping of O and pilus antigens of Escherichia coli strains isolated from chickens with
coli-septicemia, Nippon Juigaku Zasshi., 52(5), 1023-1027.
IWAKI M, OGISO T, ITO Y. (1990)

Pharmacokinetics and first-pass effect of bromhexine in rats. J Pharmacobiodyn 13(8), 475-
82.
JORDAN, F.T.W. , PATTISON, M. , ALEXANDER, D.J. , FARAGHER, T.(2002)

Poultry diseases. 5th edition, London: W.B. Saunders Company, 571 p
KAWAMATA J, NAKAJIMA K. (1965)

Mode of action of colistin, Antimicrob. Agents Chemother, 1965, 5, 403-407.
KECK G. (1978) a
Les medicament de la toux, Le Point Vétérinaire, 7, (33), 39-43.
KECK G. (1978) b
Métabolisme des médicaments et des toxiques, Point Vet, 7, (35), 15-24, 8(36), 41-49 ; 8,
(37), 23-36 ; 8, (38), 11-19.
KECK G, BORNE P.M. (1995)

Nouvelles conceptions en antibiothérapie et leurs applications pratiques en médecine
vétérinaire, Revue Méd. Vet., 146,5, 309-320.
KEMPF I , GESBERT F, GUITTET M, FROYMAN R, DELAPORTE J, BENNEJEAN

G. (1995)
Dose titration study of enrofloxacine (Baytril) against respiratory colibacillosis in Muscovy
Ducks, Avian Dis. vol39, 480-488.
KIEFFER P. (1985)
Les thérapeutiques non spécifiques en pathologie respiratoire. Comtribution à l’étude d’un
mucolytique chez le veau de boucherie. Thèse de Doctorat Vétérinaire, Faculté de médecine
de Créteil, 117p.
KOPITAR Z, LEDER O. (1971)

Autoradiographic studies on the distribution of 14 C-labelled Bisolvon in the rat and mouse,
Arzneimittelforschung. 21(7), 914-918.
KOPITAR Z, JAUCH R, HANKWITZ R, PELZER H. (1973)

Species differences in metabolism and excretion of bromhexine in mice, rats, rabbits, dogs
and man, Eur J Pharmacol., 21(1), 6-10.
KOTZIAN J., ABDOU M.A.F. SALAMON E. (1976)

Communication 9ème congrès international sur les maladies du bétail. Tome 3
KÜNG K, RIOND JL, WANNER M. (1993)

Pharmacokinetics of enrofloxacin and its metabolite ciprofloxacin after intravenous and oral
administration of enrofloxacin in dogs. J Vet Pharmacol Ther., 16(4),462-468.
107
LAFONT J.P, DHO M, D'HAUTEVILLE H.M, BREE A, SANSONETTI P.J. (1987)
Presence and expression of aerobactin genes in virulent avian strains of E coli. Infect Immun.
55(1), 193-197.
LECARROU J, REINHARDT A.K, KEMPF I, GAUTIER-BAUCHARDON A.V (2006)

Persistence of Mycoplasma synoviae in hens after two enrofloxacin treatments and detection
of mutations in the parC gene, Vet. Res. 37, 145-154.
LECOANET, J (1992)
Colibacilloses aviaires in BRUGERE-PICOUX.J , SILIM.A, Manuel de pathologie aviaire,
381p.
LECOEUR-BITCHATCHI S, KOLF-CLAUW M. (1999)

Les nouvelles quinolones en médecine vétérinaire Rec. Méd. vét., vol. 175, (1/2), 7-14.
LE FUR B , MOULINE C , CHASLUS-DANCLA E , GUILLOT J.F. (1995)

Etude de la colonisation du tube digestif du poussin axénique par des souches d'E. coli
sensibles ou résistantes à l'enrofloxacine. In: ITAVI, INRA, CNEVA (eds). 1ères journées de
la recherche avicole, Angers, 28-30 mars, 228-230.
LEGEAY Y, CLERC B. (1978)

Traitement de la toux, Le Point Vétérinaire, (7), 33, p 47-49.
LEZE V. (2005)
Modalité d’utilisation des antibiotiques en élevage et résistance des Escherichia coli dans la
flore fécale des porcs. Mécanisme de résistance aux quinolones. Thèse de Doctorat
Vétérinaire, Faculté de Médecine de Nantes, 174 p.
LINGGOOD M.A, ROBERTS M, FORD S, PARRY S.H, WILLIAMS P.H. (1987)

Incidence of the aerobactin iron uptake system among Escherichia coli isolates from
infections of farm animals. J Gen Microbiol., 133(4), 835-842.
LOUSSOUARN M. (1998)
Cinétique de bactéricidie in vitro de quelques associations d'antibiotiques .Thèse de Doctorat
Vétérinaire, Université Nantes, 78 p.
MAINIL J. (2003)
Facteurs de virulence et propriétés spécifiques des souches invasives d’Escherichia Coli :
franchissement des muqueuses et propriétés invasives, Ann. Med. Vet, 147, 159-171.
MARC D, ARNE P, BREE A, DHO-MOULIN M. (1998)

Colonization ability and pathogenic properties of a fim- mutant of an avian strain of
Escherichia coli. Res Microbiol. ,149(7), 473-485.
MARTIN G.P, LOVEDAY B.E, MARRIOTT C. (1993)

Bromhexine plus oxytetracycline: the effect of combined administration upon the rheological
properties of mucus from the mini-pig. J Pharm Pharmacol.45(2),126-130.
MARTIN R, SUREAU B, CHABBERT Y, MARTIN L, HUTINEL B. (1959)

La colimycine. Rev. Med. Fr. Actualités thérapeutiques, 161-171.
108
MATSUDA Y, HOBO S, NAITO H. (1999)
Transferability of cephalothin to the alveolar cavity in thoroughbreds.J Vet Med Sci. 61(3),
209-12.
MATTHAIOU D.K, MICHALOPOULOS A, RAFAILIDIS P.I,

KARAGEORGOPOULOS D.E, PAPAIOANNOU V, NTANI G, SAMONIS G,
FALAGAS M.E (2008)
Risk factors associated with the isolation of colistin-resistant gram-negative bacteria: a
matched case-control study, Crit. Care Med., 36 (3), 807-811.
MAURE, D. (1986)
Etude pharmacologique et toxicologique de la colistine. Applications aux maladies néonatales
du veau,, Thèse de Doctorat Vétérinaire, Université Claude Bernard, Lyon, 160 p.
MEIJER LA, VERSTEGEN JC, BULL S, FINK-GREMMELS J. (2004)

Metabolism of bromhexine in pig hepatocyte cultures J Vet Pharmacol Ther. 27(4):219-25.
MEISSONNIER, E. (1976)
Société Mondiale de Buiatrie, 9ème congrès international sur les maladies du bétail. Tome 3
,Paris, 205 p.
MELLATA, M. , JACQUEMIN, E. , BAKOUR, R. , MAINIL, J. (1998)

Résistance aux antibiotiques de souches d'Escherichia coli bovines et aviaires isolées en
Algérie, Ann. Méd. Vét. 142, (2), 129-138.
MENGOZZI G, INTORRE L, BERTINI S, SOLDANI G. (1996)

Pharmacokinetics of enrofloxacin and its metabolite ciprofloxacin after intravenous and
intramuscular administrations in sheep. Am J Vet Res. Jul;57 (7),1040-3.
MOGENET L. , BEZILLE P. , GUYONNET J. , KAREMBE H. (1997)

Comparaison de la fluméquine (Flumisol) à l'amoxicilline (Vetrimoxin poudre orale) dans
deux modes d'administration par voie orale, en traitement de la colibacillose du poulet :
approche pharmacodynamique et clinique. Rev. Méd. vét. 148, (10), 793-804.
NADAU M, COTE G, HIGGINS R, (2000)

Surveillance de l’antibiorésistance chez des bactéries d’origine aviaire et porcine de 1993 à
1999 au Québec, le médecin vétérinaire du québec, 30, 4, 195-199.
NAGI M.S, RAGGI L.G. (1972)

Importance to airsac disease of water contamined with pathogenic Escherichia coli, Avian
disease, 16, 718-723
NAWROCKA A, PAPIERZ W, BIALASIEWICZ P, STOLAREK R, KOMOS J,

NOWAK D. (1999)
N-acetylcysteine and ambroxol inhibit endotoxin-induced phagocyte accumulation in rat
lungs. Pulm Pharmacol Ther.12(6),369-375.
NEER T.M (1988)

Clinical pharmacologic features of fluoroquinolones antimicrobial drugs, J.A.V.M.A, 193 , 5,
577-580.
109
NEUMAN M. (1979)
Polypeptides cycliques surfactifs, in Vade-mecum des antibiotiques et agents
chimiothérapiques anti-infectieux, 4eme édition, Maloine éditeur, Paris, 711p.
NEUMAN M. (1990)
Les fluoroquinolones In : Neuman M. Vade-Mecum Des Antibiotiques Maloine, Paris, 701-
732.
OGISO T, IWAKI M, TSUJI S. (1991)

Percutaneous absorption of bromhexine in rats, Chem Pharm Bull (Tokyo). 39(6),1609-1611.
OKERMAN L, DEVRIESE L.A, GEVAERT D, UYTTEBROEK E, HAESEBROUCK

F (1990)
In vivo activity of orally administered antibiotics and chemotherapeutics against acute
septicaemic pasteurellosis in rabbits, Laboratory animals, 24, 341-344.
OTTONELLO L, ARDUINO N, BERTOLOTTO M, DAPINO P, MANCINI M,

DALLEGRI F. (2003)
In vitro inhibition of human neutrophil histotoxicity by ambroxol: evidence for a multistep
mechanism, Br J Pharmacol., 140(4),736-742.
PAGANIN F, BOUVET O, CHANEZ P, FABRE D, GALTIER M, GODARD P,

MICHEL FB, BRESSOLLE F. (1995)
Evaluation of the effects of ambroxol on the ofloxacin concentrations in bronchial tissues in
COPD patients with infectious exacerbation. Biopharm Drug Dispos.,16(5),393-401.
PASCHOV D, KANELOV I, LASHEY L, BORISOV I, LJUTSKANOV M, STOYKOV

D (1997)
Pharmacokinetics, toxicity and clinical efficacy of tylosin co-administered with bromhexine
to pigs, J.Vet. Pharmacol.Therap, 20 (suppl. 1), 143.
PATON J.H., REEVES D.S. (1988)

Fluoroquinolone antibiotics. Microbiology, pharmacokinetics and clinical use. Drugs, 36 (2),
193-228.
PEIGHAMBARI S.M, VAILLANCOURT J.P, WILSON R.A, GYLES C.L. (1995)

Characteristics of Escherichia coli isolates from avian cellulites, Avian Dis., 39(1), 116-124.
POLU J-M, PUCHELLE E, SADOUL P. (1978)

Les fluidifiants bronchiques: conceptions actuelles, Nouv. Press. Med, 7, 557-563.
PRESCOTT J.F, BAGGOT J.D. (1993)

Antimicrobial Therapy in Veterinary Medicine, 2éme Ed, Iowa State University Press, 612p.
PUYT J-D. 2004

Médicaments anti-infectieux en medecine vétérinaire, document destiné aux étudiants de
deuxième cycle des Ecoles Nationales Vétérinaires, 215p.
110
RAEMDONCK D.L, TANNER A.C, TOLLING S.T, MICHENER S.L. (1992)
In vitro susceptibility of avian Escherichia coli and Pasteurella multocida to danofloxacin and
five other antimicrobials, Avian Dis., 36(4), 964-967.
RAO GS, RAMESH S, AHMAD AH, TRIPATHI HC, SHARMA LD, MALIK
JK.(2001)
Pharmacokinetics of enrofloxacin and its metabolite ciprofloxacin after intramuscular
administration of enrofloxacin in goats. Vet Res Commun.,25(3),197-204.
RIZET C. (1994)
Etude clinique d'un nouvel antimicrobien, l'enrofloxacine, dans le traitement des infections
respiratoires des jeunes bovins, Thèse de Doctorat vétérinaire, Université Claude Bernard,
Lyon, 116p.
SANDERS P, (1999)
Traitements thérapeutiques et antibiorésistance, Le point Vét., 30 (198), 23-30, 203-210.
SANDERS P, GICQUEL M, HUMBERT F, PERRIN-GUYOMARD, SALVAT G.

(2002)
Plan de surveillance de la résistance aux antibiotiques chez les bactéries indicatrices isolées de
la flore intestinale des porcs et de la volaille 1999-2001, Bull. acad. Vet. De France,155, 267-
270.
SAVARY, T.(1997)
Utilisation de l'enrofloxacine dans traitement des broncho-pneumonies infectieuses
enzootiques chez le veau de boucherie. Illustration à l'aide d'un essai comparatif.Thèse de
Doctorat Vétérinaire, Faculté de médecine de Nantes, 111 p.
SCHEER,M. (1987)a
Studies on the antibacterial activity of Baytril, Vet. Med. Rev.,(2),90-100.
SCHEER,M. (1987)b
Concentration of active ingredient in the serum and in tissues after oral and parenteral
administration of Baytril , Vet. Med. Rev.,(2), 104-118.
SCHRAVEN E, KOSS FW, KECK J, BEISENHERZ G. (1967)

Excretion, isolation and identification of the metabolites of Bisolvon, Eur J Pharmacol. 1(5),
445-451.
SEIFART C, CLOSTERMANN U, SEIFART U, MÜLLER B, VOGELMEIER C, VON

WICHERT P, FEHRENBACH H. (2005)
Cell-specific modulation of surfactant proteins by ambroxol treatment. Toxicol Appl
Pharmacol. 203(1),27-35.
SHALIT I, BARNEA A, SHAHAR A.(1989)

Efficacy of ciprofloxacin against Leptospira interrogans serogroup icterohaemorrhagiae.
Antimicrob Agents Chemother.33 (5),788-789.
111
SOGAARD H. (1982)
The pharmacodynamics of Polymyxin antibiotics with special referenceto drug resistance
liability, J.Vet.Pharmacol. Therap., 5(4), 219-231.
SOJKAW.J, CARNAGHAN R.B.A (1961)

Escherichia coli infection in poultry, Research in veterinary science 2, 340-352.
SPÁTOLA J, PODEROSO JJ, WIEMEYER JC, FERNÁNDEZ M, GUERREIRO RB,

CORAZZA C , (1987)
Influence of ambroxol on lung tissue penetration of amoxicillin. Arzneimittelforschung.
37(8), 965-6.
STETINOVÁ V, HEROUT V, KVETINA J (2004)

In vitro and in vivo antioxidant activity of ambroxol. Clin Exp Med.4(3),152-158.
STORDEUR P, MAINIL J. (2002)

La colibacillose aviaire. Ann. Méd. vét. 146 , 11-18.
STRAPKOVÁ A, NOSÁL'OVÁ G, FRANOVÁ S. (1999)

Mucolytics and antioxidant activity, Life Sci. 65(18-19),1923-1925.
SURESHKUMAR V, VENKATESWARAN K.V, JAYASUNDAR S (2004)

Interaction between enrofloxacin and monensin in broiler chickens, Vet. Human. Tox. , 46(5),
242-245.
TAKASHIMA I, NGOMA M, HASHIMOTO N. (1993)

Antimicrobial effects of a new carboxyquinolone drug, Q-35, on five serogroups of
Leptospira interrogans, Antimicrob Agents Chemother. 37(4),901-902.
TAM V.H, SCHILLING A.N, VO G, KABBARA S, KWA A.L, WIEDERHOLD N.P,

LEWIS R.E (2005)
Pharmacodynamics of polymyxin B against Pseudomonas aeruginosa, Antimicrob Agents
Chemother. 2005 Sep;49 (9),3624-3630.
TONQUIST M, FRANKLIN A. (1986)

Etude prospective de terrain avec une nouvelle substance antibacterienne dans les infections
des voies respiratoires du veau. XIV World congress on disease of cattle, Dublin, 1986,
World Association of buiatrics, 57-62.
UBOH CE, RUDY JA, SOMA LR, FENNELL M, MAY L, SAMS R, RAILING FA,
SHELLENBERGER J, KAHLER M. (1991)
Characterization of bromhexine and ambroxol in equine urine: effect of furosemide on
identification and confirmation, J Pharm Biomed Anal. 9(1), 33-39.
VANBERG N.E.M (1995)

Les quinolones en médecine vétérinaire, Thèse de doctorat Vétérinaire, Université Paul
Sabatier, Toulouse, 206p.
112
VANCUTSEM P.J, BABISH J.G (1996)
In vitro and in vivo study of the effects of enrofloxacin on hepatic cytochrome p450. Potential
for drugs interactions, Vet. Human Toxicol., 38, 4, 254-259.
VANDECASTEELE-THIENPONT LM, BELPAIRE FM, BRAECKMAN RA, DE

LEENHEER AP. (1980)
Pharmacokinetics of bromhexine in the dog, Arzneimittelforschung. 30(10),1643-1645
VANDEMAELE F, VEREECKEN M, DERIJCKE J, GODDEERIS BM.

Incidence and antibiotic resistance of pathogenic Escherichia coli among poultry in Belgium.
Vet Rec. 2002 Sep 21;151(12),355-356.
VANDEMAELE F, VERVERKEN C, BLEYEN N, GEYS J, D'HULST C, ADDWEBI

T, VAN EMPEL P, GODDEERIS BM. (2005)
Immunization with the binding domain of FimH, the adhesin of type 1 fimbriae, does not
protect chickens against avian pathogenic Escherichia coli. Avian Pathol. 34(3), 264-272.
VEBER B, (2004)
Antibiothérapie probabiliste des états septiques graves, , Paris, Elsevier, 228p.
VILLATE, D.(2001)
Maladies des volailles. 2ème édition, Paris : Editions France Agricole , 399 p.
WEBBER M, PIDDOCK LJ. (2001)

Quinolone resistance in Escherichia coli, Vet Res.,32 (3-4), 275-284.
WIEMEYER J.C (1981)

Influence of ambroxol on the bronchopulmonary level of antibiotics. Arzneimittelforschung.
31(6),974-976.
.
WOOLEY R.E, SPEARS K.R, BROWN J, NOLAN L.K, DEKICH M.A (1992).
Characteristics of conjugative R-plasmids from pathogenic avian Escherichia coli Avian Dis.
vol. 36, (2), 348-352.
WOOLEY R.E, SPEARS K.R, BROWN J, NOLAN L.K, FLETCHER O.J, (1992)
Relationship of complement resistance and selected virulence factors in pathogenic avian
Escherichia coli, Avian Dis.36 (3), 679-684.
WOLFSON J.S, HOOPER D.C, (1989)

Fluoroquinolone antimicrobial agents. Clin . microbiol. Rev., 2 (4), 378-424.
ZIV G, HARTMAN I , TORTENM. (1978)

In vitro activation of endotoxin by polymixin B and Colistin in mastitic milk, J. Vet.
Pharmacol. Ther., 1, 213-216.
ZIV G, NOUWS J.F.M, GINNEKEN C.A.M, (1982)

The pharmacokinetics and tissue level of Polymyxin B, colistin and gentamycin in calves. J.
Vet. Ther., 5, (1), 45-48.
113
114
WIDMANN Sandra
Intérêt de l’association entre l’enrofloxacine et la colistine ainsi que de l’enrofloxacine

et la bromhexine dans le traitement des infections respiratoires aviaires.
Thèse Vétérinaire : Lyon, le 21 Novembre 2008
RESUME:
La plupart des élevages de volailles dans le monde sont concernés par les pathologies
respiratoires. Du fait de leur impact économique important leur traitement est un enjeu à part
entière.
Le premier objectif de ce travail est d’étudier la pharmacologie et toxicologie de trois

substances : l’enrofloxacine, la colistine et la bromhexine.
La seconde partie présente dans un premier temps les principales infections bactériennes à
tropisme respiratoire et leurs agents causals qui sévissent chez les volailles, puis dans un
second temps d’analyser différentes associations proposées : l’enrofloxacine et la colistine
ainsi que l’enrofloxacine et la bromhexine.
Enfin les bénéfices et inconvénients de ces associations, bromhexine dans le traitement des
pathologies respiratoires des volailles, sont exposés.
MOTS CLES :
- Antibiotique
- Enrofloxacine
- Colistine
- Bromhexine
- Association
JURY :
Président : Monsieur le Professeur Jacques DESCOTES
1er assesseur : Monsieur le Professeur Gérard KECK

2ème assesseur : Monsieur le Professeur Pierre BEZILLE
Membre invité : Monsieur le Docteur Arnaud ANTY
DATE DE SOUTENANCE : 21 Novembre 2008
ADRESSE DE L’AUTEUR :
18 av de la république
69160 Tassin la demi-lune

2008 Lyon 076

Transféré par

Informations du document

Titre original

Copyright

Formats disponibles

Partager ce document

Partager ou intégrer le document

Options de partage

Avez-vous trouvé ce document utile ?

Ce contenu est-il inapproprié ?

Droits d'auteur :

Formats disponibles

2008 Lyon 076

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

ECOLE NATIONALE VETERINAIRE DE LYON

Année 2008 - Thèse n°

INTERET DE L’ASSOCIATION ENTRE L’ENROFLOXACINE ET LA

Présentée à l’UNIVERSITE CLAUDE-BERNARD - LYON I

INTERET DE L’ASSOCIATION ENTRE L’ENROFLOXACINE ET LA

Présentée à l’UNIVERSITE CLAUDE-BERNARD - LYON I

A Monsieur le Professeur Jacques DESCOTES,

A Monsieur le Professeur Gérard KECK,

A Monsieur le Professeur Pierre BEZILLE,

A Monsieur le Docteur Arnaud ANTY,

A la famille Martin, ma deuxième famille,

A Ado, l’homme que j’aime tant,

Table des illustrations ......................................................................................................................... 12

Liste des figures :

Tableau I : Relation structure/activité des quinolones. ........................................................... 20

Liste des abbréviations :

CMI : Concentration minimale inhibitrice

En élevage de volailles, toute pathologie infectieuse et potentiellement contagieuse fait

Cette étude va permettre dans une première partie de réaliser la monographie de

Etude pharmacologique et toxicologique de l’enrofloxacine, de la colistine et de

1. Structure chimique et relation structure-activité

L'enrofloxacine appartient à la famille des quinolones dont le chef de file, l'acide

Formule brute : C19 H22 F N3 O3

Figure 1 : Structure chimique de l’enrofloxacine

Les substituants du noyau quinolone sont les supports de différentes propriétés

Tableau I : Relation structure/activité des quinolones.

Figure 2 : Chélation des fluoroquinolones.

A l’état pur, l’enrofloxacine se présente sous forme d’une substance cristalline,

Solutions acides (pH 3 à 5) Eau 0,01

3. Présentations et formes pharmaceutiques

Il existe aujourd’hui plusieurs spécialités vétérinaires à base d’enrofloxacine

a. Concentrations minimales inhibitrices (CMI)

Grâce à l’analyse de ces CMI, on peut distinguer différents types de germes :

b. Spectre d’activité et activité in vivo

Les fluoroquinolones de troisième génération présentent un spectre d’activité large,

GRAM POSITIF GRAM NEGATIF

Tableau V : Spectre antibactérien des quinolones

Bactéries Gram négatif aérobies :

c. Etude de l’efficacité in vivo

L’efficacité de l’enrofloxacine a été testée sur différentes espèces de destination et sur

Bactérie Espèce Traitement Efficacité

Chez les carnivores l’efficacité de l’enrofloxacine a aussi été démontrée. Jankowski

Okerman et al ont testé l’efficacité in vivo de plusieurs antibiotiques vis-à-vis de

On voit donc que l’efficacité in vivo de l’enrofloxacine a été étudiée de nombreuses

On distingue chez les antibiotiques deux dominantes comportementales de

Pour beaucoup d’auteurs l’activité des fluoroquinolones sur germe quiescent et en

L’enrofloxacine pénètre dans la cellule à la fois par diffusion transmembranaire et

L’enrofloxacine bloque la réplication et la transcription de l’ADN. Elle agit sur deux

L’ADN gyrase est une métallo-enzyme à magnésium composée de deux sous-unités A

La topoisomérase IV, enzyme membranaire, présente des sous-unités homologues à

Grâce à sa structure plane l’enrofloxacine (comme toutes les quinolones) s’intercale

Généralités : (Courvalin, 2008)

Mécanismes biochimiques de la résistance : (Euzéby J.P, 2006)

La pharmacocinétique est l’étude du devenir, ou métabolisme, des médicaments dans

Le schéma thérapeutique optimal de l'enrofloxacine est de 5mg/kg de poids vifs par

• Administration per os : en tant qu’acides faibles liposolubles, suite à une

Les fluoroquinolones présentent un taux de fixation aux protéines plasmatiques et

Généralement les fluoroquinolones ont la réputation d’avoir une large distribution. Le

En revanche chez le poulet et la dinde, la diffusion tissulaire n’est pas la même. En

Comme nous l’avons ci-dessus, les fluoroquinolones ont un volume de distribution

Ainsi la diffusion dans l’organisme des fluoroquinolones est un atout thérapeutique et

Les biotransformations correspondent aux transformations biochimiques d’un

Le nombre de biotransformation est réduit pour les fluoroquinolones et on distingue