ESCUELA PREPARATORIA FEDERAL POR COOPERACIÓN

SOR JUANA INÉS DE LA CRUZ CLAVE EMS-2/44

LABORATORIO DE BIOLOGÍA II

Nombre del alumno: ______________________________________Grupo:__________

Fecha: ________________Número de mesa_______________

PRÁCTICA NÚMERO 2
SANGRE PARTE I
Punción capilar. Elementos formes.
Técnica de Coloración de Wright.
Cuenta diferencial de leucocitos.

OBJETIVOS.

 Que el alumno aprenda a hacer un extendido sanguíneo utilizando sangre periférica con
la técnica de: Obtención de sangre por punción capilar.

 El alumno aplicará la técnica de coloración de Wright para observar la morfología de

los elementos formes de la sangre en un extendido sanguíneo.

 Que el alumno conozca y diferencie la morfología de los elementos formes de la sangre

periférica en el extendido sanguíneo.

 El alumno realizará la cuenta diferencial de leucocitos, identificando los diferentes tipos

en sangre periférica humana.

JUSTIFICIÓN.

Un análisis diferencial de los leucocitos o cálculo porcentual puede ser de gran utilidad para
descubrir infecciones enmascaradas de tipo subagudo o crónico que generalmente no ocasiona
un aumento del recuento de glóbulos blancos total.

MARCO TEÓRICO.

La sangre ha sido considerada por muchos autores como un tejido líquido. Es un líquido de
color rojo escarlata si esta en las arterias y rojo oscuro si está en las venas, que cuando se extrae
de los vasos donde circula normalmente, coagula espontáneamente. Su pH es ligeramente
alcalino (pH 7.4) que representa cerca del 7 % del peso corporal. El volumen total de sangre del
adulto promedio es de cerca de 5 litros, circula por todo el cuerpo dentro de los vasos
sanguíneos.

La sangre es un tejido conectivo especializado compuesto por elementos figurados, eritrocitos,

leucocitos y plaquetas, que se encuentran suspendidos en un componente líquido, llamado
plasma. Los eritrocitos (glóbulos rojos), son células desprovistas de núcleo, flexibles, de color
amarillo, discoidales de contorna circular, que vistos de perfil son bicóncavos. Miden 7.2 micras
de diámetro y 1.5 micras de espesor en borde. Los glóbulos blancos o leucocitos, se han
denominado así por carecer de color propio, están provistos de núcleo y citoplasma.
MATERIAL.

Lancetas estériles y desechables*. Torundas de algodón

Papel seda Aceite de inmersión
Portaobjetos Colorante de Wright
Puentes para coloración Buffer de fosfatos pH 6.4
Microscopio óptico

* Material que deberán traer los alumnos

DESARROLLO.

Para estudiar la morfología de los elementos formes de la sangre, obtendremos un extendido de

ésta que teñiremos con la técnica de coloración Wright.

La región a puncionar no debe encontrarse cianótica ni edematosa ya que es esencial que la

sangre pueda fluir libremente para obtener resultados reproducibles que se puedan comparar con
los de la sangre venosa.

La piel fría y cianótica es una fuente de errores pues da cifras altas falsas de glóbulos rojos y
blancos, esto se evita dando masaje a la piel hasta que esté rosada y caliente antes de efectuar la
punción.

En esta práctica efectuaremos la punción en el lóbulo de la oreja.

TÉCNICA DE OBTENCIÓN DE SANGRE POR PUNCIÓN CAPILAR.

1.- Limpiar perfectamente la piel del lóbulo de la oreja con una torunda empapada en alcohol.

2.- Puncionar la piel del borde lateral del lóbulo de la oreja con una lanceta desechable estéril
con un movimiento rápido de suficiente profundidad como para producir la salida de la sangre.

3.- Desechar las dos primeras gotas de sangre, puede presionarse ligeramente a cierta distancia
de la herida para obtener algunas gotas de sangre, no es conveniente presionar con fuerza
porque esta se diluirá con líquidos titulares (de la piel).

TÉCNICA PARA OBTENCIÓN DE EXTENDIDO DE SANGRE.

1.- Colocar en la superficie de un portaobjetos desengrasado, cerca del extremo del lado derecho
una gota de sangre.

2.- Sostener el portaobjetos con que se hará el extendido, justo ala izquierda de la gota de sangre
y deslizarlo hasta el borde de la gota. Esta se extiende por capilaridad a lo ancho del
portaobjetos.

3.- Deslizar el portaobjetos con que se hace el extendido hacia la izquierda. El movimiento tiene
que ser rápido pero uniforme. El extendido será grueso o fino, dependiendo de la lentitud o
rapidez del movimiento y también del ángulo entre los dos portaobjetos. Este ángulo oscilará
entre 30 y 45°. Un buen extendido será liso, homogéneo, sin ralladuras y con bordes uniformes.
TÉCNICA DE COLORACIÓN DE WRIGHT.

1.- Colocar la película de sangre secada al aire con el lado del extendido hacia arriba sobre un
puente o soporte de coloración. Emplear de preferencia extendidos de sangre fresca.

2.- Cubrir el extendido por completo, con un número conocido de gotas de colorante, dejar
actuar durante 5 a 7 min. para que se fije el extendido.

3.- Colocar el mismo número de gotas que se emplearon de colorante de solución amortiguadora
o de agua para diluir el colorante. Mezclar ambas soluciones sobre el extendido soplando sobre
el portaobjetos. Se formará una película verde de aspecto metálico. Se deja actuar el colorante
que en este momento ya se encuentra disociado durante 10 min.

4.- Lavar el colorante una vez transcurrido el tiempo de coloración. El lavado debe realizarse
con agua, por flotación, esto es, agregando el agua cuando el portaobjetos todavía está en
posición horizontal, pues de lo contrario, la película de colorante tenderá a precipitarse sobre el
portaobjetos siendo muy difícil su eliminación posterior.

5.- Una vez que se ha lavado perfectamente el extendido, se coloca sobre uno de sus bordes en
posición vertical para que se seque. Ya seco observar al microscopio con objetivo de inmersión.

RESULTADOS.

1.- Realiza un esquema de cada uno de los elementos formes observados al microscópico. No
olvides ponerle su nombre a cada uno, usa colores y ponle nombres a cada estructura de la
célula.
CUESTIONARIO.

1.- Menciona de que esta compuesta la sangre.

2.- Menciona tres funciones que cumple la sangre en el organismo.

3.- ¿Qué es una cuenta diferencial de leucocitos?

4.- ¿Para qué sirve una cuanta diferencial en un laboratorio clínico?

5.- Ordena los pasos que se llevaron a cabo en ésta práctica en orden cronológico, dándole el
número (1) al primer paso el (2) al segundo paso y así sucesivamente.

( ) Agregar el regulador y mezclar.

( ) Lavar por flotación.
( ) Hacer un extendido fino y homogéneo.
( ) Contar los glóbulos blancos con un contador manual.
( ) Desinfectar el lóbulo de la oreja con alcohol.
( ) Observar al microscopio con objetivo de inmersión.
( ) Cubrir el extendido con el colorante de Wright.
( ) Puncionar la piel con una lanceta desechable

DISCUSIÓN.
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CONCLUSIONES.
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BIBLIOGRAFÍA.
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