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Activité 1 : C18 A1 TP- Mode d’action d’un antibiotique et résistance.

Et Activité 2 : C18 A2 : Comprendre l’origine de la résistance aux antibiotiques

Vous êtes biologiste hospitalier. Un médecin vous apporte un échantillon d’une souche bactérienne de
Staphylocoque doré (Staphylococcus aureus) qu’il soupçonne d’être MAINTENANT résistante à la
pénicilline, antibiotique utilisé en milieu hospitalier pour lutter JUSQU'A PRESENT contre les infections
causées par ce pathogène.
Objectifs des 2 activités : (1) Réaliser un antibiogramme pour valider ou non les craintes du médecin,
pour lui proposer, éventuellement, un autre antibiotique efficace puis (2) expliquez-lui l’émergence de
cette souche de bactéries résistantes.

Consigne : Votre compte rendu comportera des illustrations (photos, captures d’écran) et une
argumentation permettant d’atteindre les objectifs fixés par l’infirmier.

ACTIVITE A : Mode d’action des antibiotiques sur les bactéries.

Doc.1 : Des antibiotiques plus ou moins efficaces (1èreSpé-SVT-Bordas 2019, p.316)

TP : Déterminer la résistance d’une souche bactérienne à des antibiotiques.


Discuter avec vos camarades du mode opératoire à effectuer pour optimiser
Matériel :
vos résultats (pensez notamment aux contrôles). Après validation par -Boites de Pétri avec milieu gélosé
l’enseignant, réalisez le protocole ci-dessous : ensemencé avec les bactéries du patient.
Protocole : -3 solutions d’antibiotiques :
1. À l’aide d’une pince, prélever une pastille de papier et la N° 1 = Pénicilline notée P
plonger 15 sec dans un antibiotique pour l’imbiber. N° 2 = Doxorubicine notée D
2. Déposer précautionneusement, à plat, sans rayer la gélose, la N° 3 = Rifampicine notée R
pastille imbibée dans la boite de Pétri (comme sur la photo B).
3. RINCER sous l’eau du robinet la pince
4. Faire de même pour les 2 autres pastilles trempées dans les -Des pastilles de papiers.
autres solutions sans oublier de RINCER sous l’eau du robinet -Une pince fine.
la pince. -Un crayon feutre pour annoter votre
5. Patienter 15 MIN pour pouvoir lire les résultats des actions des boite.
3 ANTIBIOTIQUES. En attendant les résultats, passer à la suite.
6. Faire une photo des résultats et la mettre dans votre compte
rendu.
7. INTERPRETER VOS RESULTATS.
Activité B : Un mécanisme de résistance.

Doc.2 : Origine de la résistance aux antibiotiques.


Les bactéries Staphylococcus aureus sont naturellement sensibles
aux béta-lactamines (dont la pénicilline). Le rôle ces béta-
lactamines est de bloquer la production de la paroi cellulaire de
= enzymes
la bactérie, ce qui empêche sa multiplication et dans sa (protéine)
prolifération.

Dans cette population de staphylocoques, il existe des individus


qui vont être résistants à cet antibiotique.
Il existe plusieurs stratégies à cette résistance :
Certaines bactéries expriment un gène nommé β-lactamases qui,
lorsqu’il s’exprime, produit une enzyme. Cette enzyme va
détruire l’antibiotique avant qu’il puisse agir.
Il existe d’autres types de résistance comme le montre ce schéma
ci-contre.

Doc.3 : Effet d’un antibiotique sur des bactéries porteuses d’un gène conférant la résistance à un
antibiotique. (1èreSpé-SVT-Belin 2019, p.277)
En présence d’antibiotique, la plupart des bactéries sensibles à l’antibiotique meurent, les bactéries résistantes
survivent et se multiplient beaucoup.
En absence d’antibiotique, les 2 types de bactéries vivent et se multiplient autant l’un comme l’autre.

TP : Faire une analyse génétique pour expliquer l’apparition d’une souche de S.aureus résistante à la
pénicilline.
Protocole : Matériel :
Comparer les séquences d’ADN et les -Logiciel Anagène
séquences protéiques. -Séquences à télécharger depuis le Moodle « E.C-
Lactamase » =
Séquences en nucléotides du gène de la béta-lactamase de
deux souches de bactéries obtenues après séquençage de leur
génome (SHV1, Souche de S.aureus que l’on sait sensible à
la pénicilline ; SHV2, Souche de S.aureus isolée par le
médecin)
+
Séquences en acides aminés de l’enzyme béta-lactamase de
ces deux souches de bactéries.

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