Vous êtes sur la page 1sur 5

Université Elhadj Lakhdar Batna Module : méthodes chromatographiques

département de chimie et électrophorétiques


Parcours : Master I
TD N° 1

Exercice n°1 :
Déduire, d’après les résultats du tableau ci-dessous et d’après la force des trois solvants, la phase
mobile la mieux adaptée pour la séparation des différents solutés.
Composés de K’
l’échantillon 50% MeOH/50%eau 40% AcN /60% eau 37%THF/63%eau
1 Aniline 1.3 1.5 1.7
2 Phénol 1.6 1.4 2.3
3 Anisole 4.5 4.3 3.9
4 Benzène 4.7 4.7 4.7
5 Chlorobenzène 9.2 7.7 6.5
MeOH : méthanol, AcN : acétonitrile, THF : tétrahydrofuran

Exercice n°2
Les paramètres thermodynamiques des produits suivants ont été mesurés sur une colonne capillaire
ayant pour phase stationnaire un polysiloxane.
Les termes H° et S° correspondent aux variations d'enthalpie et d'entropie de dissolution des
produits entre la phase gazeuse et la phase stationnaire.
Décane Butyl acétate 1-Heptanol 1-Bromobutane Hexyl acétate

H° Kj/mol -47,2 -34 -36.9 -31 -42


S° en j/mol K -75.4 -58 -58 -51 -66

Quelle sera l'ordre d'élution de ces produits à 120°C ? Justifier votre réponse par un calcul simple.
Exercice n°3
Soit une courbe de V.D. expérimentale, obtenue en HPLC, [ Int .Lab 30, 20 (2000)]; en ordonnée est
reportée la hauteur de plateau réduite h = H/dp (où dp = 5 mm est le diamètre des particules. On
considère deux points particuliers A et B sur cette courbe.
1- Au point A (débit = 1 ml/mn, U = 0,65 mm/s et h = 2), calculer le temps mort et le temps
d'analyse.
2- Même question au point B (débit = 2,75 ml/mn, U = 1,7 mm/s et h = 2,5).
3- Calculer la perte d'efficacité de la colonne entre A et B. Conclusion.
Exercice n°4
Le chromatogramme de la nicotine a été obtenu dans les conditions suivantes :
CPG. Colonne remplie, Phase stationnaire: 10% Carbowax 20M/2%, KOH sur 80/100 Chromosorb
W AW , Dimensions de la colonne: Longueur 6‘
, (183cm) x 2mm (diamètre intérieur) , Débit de la phase mobile: 20mL/min.Quantité injectée:1µL
Four: 200°C. Temps de rétention de la nicotine = 3,20 mn
Four: 180°C. Temps de rétention de la nicotine = 6,60 mn
Questions :
1-Calculer la vitesse linéaire (en cm/ sec)
de la phase mobile dans la colonne.
2- En déduire le temps mort de cette analyse.
3-Calculer le temps de rétention de la nicotine à 160°C.
4- Peut-on éluer la nicotine en 1 mn, sachant que
la température limite d’utilisation de la colonne et de 250°C ?
Université Elhadj Lakhdar Batna Module : méthodes chromatographiques
département de chimie et électrophorétiques
Parcours : Master I
TD N° 2

Exercice n°1
On donne ci-après un tableau des valeurs du facteur de capacité K’ pour quatre gaz de raffinerie,
étudiés à trois températures différentes sur une même colonne capillaire (L = 30 m, diam.int =
250μm) dont la phase stationnaire est du type SE-30.

Température de la colonne
Composé Temp eb °C -35 25 40
Ethylène -104 0.249 0.102 0.0833
Ethane -89 0.408 0.148 0.117
Propène -47 1.899 0.432 0.324
propane -42 2.123 0.481 0.352

1- D’après l’ordre d’élution peut-on dire si la phase SE-30 est polaire ou non ?
2- Calculer le facteur de sélectivité pour le couple propène-propane aux trois températures
3- Pourquoi K’ diminue-il lorsque la température croit, pour un même composé

Exercice n°2
Plusieurs injections du meme mélange de composés sont effectuées en isothèrme, à des températures
différentes sur une meme colonne.
A 120°C le composé X qui nous intéresse sort à 15.2 min, le tm est de 0.2 min
A 150°C, ce meme composé sort à 10.1 min, le tm est de 0.17 min.
Suite à l’interprétation de plusieurs chromatogrammes, il semble que la température de travail la plus
adaptée pour séparer les composés qui nous intéressent soit 132°C.
A quel temps de rétention tr devrait sortir le composé X, si tm = 0.19min ?

Exercice n°3
Dans une expérience CPG, on injeste un mélange de n-alcanes et de 1-butanol sur une colonne en
régime isotherme. L’équation de la droite est : Logt’r = 0.39 n – 0.29 (t’r en sec).
t’r de butanol = 168 sec. Sachant que son indice de rétention de kovats sur colonne squalane est 590,
en déduire la constante de McReynolds du butanol sur cette colonne.

Exercice n°4
Un mélange de deux médicaments A et B conduit après migration à é taches aux caractéristiques
suivantes (distance de migration x et diamètre de spot w) :
X(A) = 27mm ; wA =2mm
X(B) = 33 mm ; wB = 2,5 mm
La migration du front de solvant dans cette expérience est de 60 mm.
1/ calculer le facteur Rf, N et H pour chacun des composés ;
2/ Calculer le facteur de résolution entre les deux composés A et B ;
Université Elhadj Lakhdar Batna Module : méthodes chromatographiques
département de chimie et électrophorétiques
Parcours : Master I
TD N° 3

Exercice n°1

Le chromatogramme 3.1 décrit la séparation des composés suivants :

O
H
N

N O
H
benzène uracil biphényl naphtalène

Questions :
 Proposer une identification probable des pics.
 Quelle serait l’allure du chromatogramme si la proportion d’eau était augmentée dans la PM ?
 Quelle serait l’allure du chromatogramme si la proportion d’eau était diminuée dans la PM
Exercice n°2

OH OH
O H
C

O
CH3
pic 1 pic 2 pic 3 pic 4
benzène benzaldéhyde alcool benzylique alcool 4-méthoxybenzylique
Questions :
 Quel type de phase stationnaire est-il utilisé ?
 Quelle serait l’allure du chromatogramme si la proportion d’isopropanol était augmentée dans la PM ?
Exercice n°3
Quel est l’ordre d’élution des acides suivants en HPLC avec une colonne dont la phase stationnaire est de type
C18 et une phase mobile un tampon formiate C = 200 mM, de pH 9.
1- Acide linoléique : H3C–(CH2)4–CH=CH–CH2–CH=CH–(CH2)7–COOH
2- Acide arachidique : CH3-(CH2)18-COOH
3- Acide oléique : CH3(CH2)7CH=CH(CH2)7COOH)

Exercice N°4

OR
phtalates (R et R' variables)
OR'

Questions :
 Quel type de phase stationnaire est-il utilisé ?
 Proposer des solvants A et B convenant au gradient.

Exercice n°5
On étudie par HPLC la séparation de deux composés A et B avec une colonne de type RP-18. La phase mobile
est un mélange binaire d’eau et d’acétonitrile. On admettra qu’il existe une relation linéaire entre le
logarithme du facteur de capacité et le pourcentage d’acétonitrile du mélange binaire eau/acétonitrile utilisé. A
partir de 2 chromatogrammes obtenus l’un avec pour phase mobile un mélange eau/acétonitrile 70/30 V/V et
l’autre avec un mélange eau/acétonitrile 30/70 v/v, les équations des deux droites sont :
Pour le composé A : log kA = - 6,075 10-3 (%ACN) + 1,3283
Pour le composé B : log kB = - 0,0107 (%ACN) + 1,5235
1- Trouver la composition de la phase binaire qui conduirait à un facteur de sélectivité de 1.
2- On suppose que pour chaque composé, la largeur du pic correspondant sur le chromatogramme à mi-
hauteur est la même et que l’efficacité de la colonne n’est pas modifiée suivant la composition de la
phase mobile. La résolution entre les deux pics est-elle meilleure pour la phase mobile contenant 70%
d’eau ou 30% d’eau ?montrer l’intérêt pratique du choix précédent.

Vous aimerez peut-être aussi