ESTUDIO DE POLIMORFISMOS USANDO LA TCNICA DSC

ESTUDIO DE POLIMORFISMOS USANDO LA TCNICA DSC INDICE

1. Introduccin 2. Deteccin de polimorfismos 3. Comportamiento de sustancias polimficas 1) Transicin monotrpica slido-slido de sulfapiridina 2) Transicin enantiotrpica slido-slido de perclorato de potasio 3) Alotropa del azufre 4) Modificacin de la transicin metaestable de la fenilbutazona a la forma estable a travs de la fase lquida 5) Transicin pseudo-polimrfica de glucosa monohidratada 6) Transiciones mesofsicas de cristal lquido 4. Conclusiones 5. Bibliografa

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ESTUDIO DE POLIMORFISMOS USANDO LA TCNICA DSC 1. Introduccin El polimorfismo es una propiedad especial que presentan algunos compuestos qumicos y puede existir en diferentes formas cristalinas segn las diferentes condiciones de cristalizacin. Estas diferentes formas cristalinas se diferencian porque tienen diferentes ordenaciones internas y consecuentemente diferentes estructuras, aunque tengan una misma composicin, como el diamante y el grafito o la calcita y el aragonito. Tambin se tiene que tener en cuenta que las propiedades fsicas (punto de fusin, el color, solubilidad, el ndice de refraccin, la dureza, la conductividad, etc.) varan de una forma polimrfica a otra, aunque las diferentes formas cristalinas fundan al mismo tiempo. Se definen como compuestos alotrpicos (Alotropa) a las diferentes formas de un mismo elemento en el cul los enlaces qumicos entre los tomos son diferentes y por lo tanto dan lugar a unidades moleculares tambin diferentes, en un mismo estado fsico. Ejemplo de algunos elementos que presenten alotropa son tales como el azufre, carbono (grafito, diamante), el fsforo, as como numerosos minerales y sustancias orgnicas. Las formas polimrficas de sustancias farmacuticamente activas son de gran importancia en el uso prctico. Dado que la solubilidad y las velocidades de disolucin de las diferentes formas polimrficas son muy diferentes, la reabsorcin y la biodisponibilidad en el cuerpo tambin difieren. La eficacia teraputica depende de la modificacin de que se trate; una forma metaestable, por ejemplo, puede ser dos veces ms activa que la forma estable. El polimorfismo no slo es importante para la eficacia farmacolgica, sino que tambin desempea un importante papel en la produccin, elaboracin y formulacin. Las formas estables en un cierto rango de temperaturas, se simbolizan en letras griegas (, ) o nmeros romanos (I, II, III), y los estados metaestables, se simbolizan por letras griegas prima (, ), estas tambin pueden existir con una transformacin gradual en estados estables que pueden tomar horas o inclusos aos. Muy a menudo, es ms fcil de obtener formas metaestables cuando se calienta lentamente el material amorfo (obtenido por enfrentamiento rpido de la masa fundida) por encima de la temperatura de transicin vtrea. Las formas metaestables tambin pueden cristalizar a partir de soluciones de la sustancia en determinados disolventes. La tendencia a generar cristales por encima de la temperatura de transicin vtrea se llama desvitrificacin. Se pueden distinguir dos tipos de polimorfismo: - Monotrpico: se define como la transicin slido-slido desde un estado metaestable a otro estable, exotrmicamente. Dicho en otras palabras, la estabilidad relativa entre las dos fases slidas permanece invariable a medida que cambia la temperatura.

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Este proceso es solo unidireccional ( ), no es reversible. El punto de fusin de es menor que el de la fase ms estable .

Figura 1. Diagrama de fases para un proceso monotrpico.

- Enantiotrpico: se definen as las transformaciones slido-slido reversibles, en que existe una temperatura de transicin a la cual se invierte la estabilidad de las dos fases. En otras palabras, existe cuando la Tg entre dos fases y es inferior a las correspondientes temperaturas de fusin.

La transicin desde la forma de baja temperatura a la de alta temperatura es endotrmica. As pues, el calor de fusin de la forma es mayor que la de la forma .

Figura 2. Diagrama de fases para un proceso enantiotrpico.

1) Esta regla slo vale para pequeas diferencias relativas de los puntos de fusin hasta aprox. 20C. Si las diferencias son ms grandes, la cp se tienen que tener en cuenta. Por otro lado, tambin podemos encontrar pseudo-polimorfismos, que ocurren cuando al cristalizar la sustancia incluye de manera estequiomtrica el disolvente con el que entr en contacto, llamado solvato (presenta diferentes propiedades fsicas). La incorporacin del disolvente en la red cristalina modifica la celda unitaria del cristal con respecto al cristal anhidro, generando un solvato con propiedades fsico-qumicas diferentes. Las molculas de disolvente atrapadas no sern liberadas hasta que se alcance la temperatura de fusin. Adems, existen algunos compuestos orgnicos que no se transforman a un estado lquido (completamente libre) en una transicin. Por encima del punto de fusin aparece una fase lquida especial, llamada mesofase, que corresponde a un estado lquido cristalino; y se caracteriza porque las partculas constituyentes de la misma presentan una fase fluida (lquida) con orden orientacional pero no posicional. El aumento adicional de la temperatura el lquido se convierte en isotrpico.

ESTUDIO DE POLIMORFISMOS USANDO LA TCNICA DSC El cristal lquido se presenta entre los siguientes tipos de mesofases: a. Fase esmctica: Son observados planos separados, que fluyen unos a travs de otros b. Fase colestrica: Sus molculas no poseen un orden posicional, pero tienen una tendencia a apuntar en promedio en la misma direccin. c. Fase nemtica: Las molculas se orientan de forma paralela, son libres de moverse en cualquier direccin.

2. La deteccin de poliformismo Los mtodos ms frecuentes utilizados para estudiar polimorfismo son: DSC Es una tcnica de anlisis trmico en la que se analiza la diferencia de cantidad de calor necesaria para aumentar la temperatura de una muestra respecto a una referencia; se mide en funcin de la temperatura. Tanto la muestra como la referencia se mantienen casi a la misma temperatura durante todo el experimento. En general, el programa de temperatura para un anlisis DSC est diseado de tal forma que la temperatura de la muestra aumenta linealmente en funcin del tiempo. La muestra de referencia debe tener bien definida la cp en el rango de temperaturas que se va a escanear. TOA Es un anlisis termo-ptico que se caracteriza porque la muestra se observa entre filtros de polarizadores cruzados. Tiene un programa de temperaturas similar al del DSC. Los cambios de fase se pueden observar al instante como los cambios de la refraccin doble. Investigaciones de solubilidad Mtodos de difraccin X-RAY en polvo Espectrometra infrarroja

ESTUDIO DE POLIMORFISMOS USANDO LA TCNICA DSC 3. Comportamientos de sustancias polimrficas A continuacin se describen los comportamientos de algunas sustancias tpicas polimrficas mediante el uso del mtodo de DSC con el sistema METTLER TOLEDO STAR: 1) Transicin monotrpica slido-slido de sulfapiridina Una muestra de sulfapiridina, con un peso de 7.954 mg, la cual se somete a un proceso de calentamiento a una velocidad de 5K/min. Aproximadamente a 190C se encuentra el punto de fusin de la modificacin estable. Seguidamente se le realiza un enfriamiento rpido, mediante la deposicin del crisol en un plato giratorio que se encuentra a temperatura ambiente (25C), donde se obtiene la sulfapiridina slida en estado amorfo. La muestra se somete a un segundo ciclo de calentamiento a la misma velocidad de calentamiento. En la curva obtenida se observan los siguientes procesos: I. Transicin vtrea. Alrededor de los 60C hay un desplazamiento de la lnea base. II. Cristalizacin endotrmica. El slido cristaliza y adopta una forma metaestable. III. Transicin slido-slido monotrpica. Alrededor de 125C se produce una modificacin ms estable que es representado por un pico endotrmico. El punto de fusin de estas modificaciones se encuentra aproximadamente a 179C, est representada por un pico exotrmico. IV. Cristalizacin a la forma estable. El fundido experimenta una ltima cristalizacin, pico endotrmico, el cual corresponde a la forma estable del compuesto y observado en el primer barrido. Esta forma estable funde a 190C.

Figura 3. Termograma DSC de la sulfapiridina.

ESTUDIO DE POLIMORFISMOS USANDO LA TCNICA DSC 2) Transicin enantiotrpica slido-slido de perclorato de potasio En este segundo caso, se trabaja con perclorato de potasio. Se calientan 13.800 mg de este compuesto a una velocidad de 10 K/min hasta aproximadamente 320 K. En este ciclo se observa un pico exotrmico que corresponde a la transicin de la forma , sistema cristalino ortorrmbico y cbico respectivamente, y donde la muestra desprende 102.46 J/g. Posteriormente la muestra se enfra mediante un proceso isotrmico a 292C, la cual se encuentra 8C por debajo de la temperatura de equilibrio. En este proceso isotrmico se produce la transicin inversa a una temperatura notablemente inferior a la del equilibrio trmico, transicin de la forma , representado por varios picos endotrmicos que corresponden a la formacin de varios ncleos de cristalizacin, y donde el calor absorbido corresponde a 103.53 J/g. La probabilidad estadstica de las distintas transiciones constituir la estructura final de la muestra.

Figura 4. Termograma DSC de perclorato de potasio.

3)

Alotropa del azufre En este tercero caso, se calienta una muestra de azufre que pesa 10.56 mg en un crisol hermtico de aluminio oxidable y a una velocidad de 5 K/min. La forma estable a temperatura ambiente del sulfuro es la forma rmbica del -sulfuro que consiste en molculas S8. A 95.6C se observa la transicin slido-slido exotrmica, que desprende 12 J/g, y donde hay una formacin de una estructura monoclnica de sulfuro, que funde a 119C punto de fusin ideal. Por otro lado, si la muestra se enfra a 5 K/min e inmediatamente se mide otra vez se observa como el punto de fusin ideal disminuye debido a la formacin de molculas S4 y S6 en la transicin slido-slido. Sin embargo, si se deja la muestra enfriar a temperatura ambiente durante 3 das, se observa una recuperacin parcial de la muestra, se realiza un barrido de

ESTUDIO DE POLIMORFISMOS USANDO LA TCNICA DSC calentamiento con las mismas condiciones que el anterior; se puede observar de nuevo la transicin slido-slido pero con una exoterma menor y un aumento del punto de fusin hasta los 115C. Este punto de fusin ahora es nombrado como punto de fusin natural, debido a la formacin de las molculas S4 y S6, siendo 110C para el -sulfuro y de 114.5 C para el -sulfuro.

Figura 5. Termograma DSC del sulfuro

4) Transicin de la modificacin metaestable de la fenilbutazona a la forma estable a travs de la fase lquida En este caso se estudian los cambios de fase de la fenilbutazona. Se realiza un primer calentamiento de una muestra de 7.20 mg de fenilbutazona con la que se llega a una temperatura de fusin de 105C, que corresponde al punto de fusin de la modificacin estable. Si a este fundido se le aplica un enfriamiento se forma un vidrio. Seguidamente, se hace un segundo barrido calentando a una velocidad de 5 K/min y se observan, en este orden, los siguientes picos: Cristalizacin I: Pico endotrmico donde se forma una estructura metaestable (II) a una temperatura de 40C. Fusin I: Fusin de la forma metaestable II a una temperatura de 95C. Cristalizacin II: Pico endotrmico donde se forma otra estructura metaestable (III). Fusin II: Fusin de la forma metaestable III a una temperatura de 102C. Fusin III: Fusin de la forma estable I a una temperatura de 105C.

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Figura 6. Termograma DSC de la fenilbutazona.

A partir de los conceptos expuestos en el apartado de la introduccin, podemos decir que este polimorfismo estudiado es de tipo enantiotrpico, ya que la fusin observada en el segundo barrido es menor que el del primer barrido debido los picos endotrmicos de cristalizacin.

5) Transicin pseudo-polimrfica de glucosa monohidratada En este apartado se estudian los cambios de fase que puede presentar la glucosa monohidratada. Primeramente se realiza un calentamiento de una muestra de glucosa monohidratada con un peso de 4.64 mg en un recinto cerrado a una velocidad de calentamiento de 10 K/min donde se observa un pico eutctico de agua y glucosa, donde el flujo de calor es de 176 J/g. Se procede a un segundo barrido pero en este caso en un recinto abierto con una velocidad de calentamiento de 10 K/min; se observa el pico eutctico a 83C. El exceso de agua a 120C ha evaporado, de esta forma se evita la formacin de la fase lquida. Por ltimo el compuesto anhdrido funde a 155C. La prdida de peso despus del ensayo fue de 9.9%, el valor esperado estequiomtricamente era de 9.1%. Esta diferencia puede explicarse por una ligera caramelizacin de la glucosa. El flujo de calor total es de 400 J/g. El flujo de calor restante con el calor de vaporizacin del agua, que son 228 J/g tericos (176 y 228 suman 404 J/g, muy aproximado al valor experimental obtenido).

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Figura 7. Termograma DSC de la glucosa monohidratada.

En este caso el fenmeno que se observa es el de pseudo-polimorfismo ya que al cristalizar la glucosa, esta incluye en su estructura molculas de agua. Estas molculas de agua atrapadas no pueden ser liberadas en el primer ensayo, aunque en el segundo ensayo s, y los valores de los calores nos lo demuestran.

6) Transiciones mesofsicas cristal lquido Por ltimo, en este ensayo se estudian los cambios de fase de una muestra de miristato de colesterol con un peso de 12.48 mg a una velocidad de calentamiento de 5K/min. Se aprecian, en este orden, los picos endotrmicos de: - Fusin. Deja de ser slido para ser cristal lquido en fase esmctica. - Primera transicin mesofsica. Pasa de mesofase esmctica a mesofase colestrica. - Segunda transicin mesofsica. Pasa de mesofase colestrica a lquido. Cabe destacar que la energa requerida en los cambios mesofsicos (1.8 y 1.4 J/g) es mucho menor que la de fusin (55 J/g). La fusin es isotrpica por encima de 86 C.

Figura 8. Termograma DSC de cristal lquido.

ESTUDIO DE POLIMORFISMOS USANDO LA TCNICA DSC 4. Conclusiones Todas las transiciones polimrficas implican un cambio de entalpa. Esta es la razn por la que la tcnica DSC es excelente para la investigacin de este tipo de transiciones. Para interpretar las curvas DSC es necesario conocer los diferentes tipos de polimorfismo que existen.

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5. Bibliografa J.L. Ford and P. Timmins, Pharmaceutical Thermal Analysis, Ellis Horwood, 1989. D.Giron, J. Pharmaceutical & Biomedical Analysis, Vol. 4,n6, 755-770,1986. G. Widmann, Thermochimica Acta, 112 (1987), 137-140. A. Burger, Acta Pharmaceutica Technologica 28 (1) 1982. Snchez G.E., Jung C.H., Ypez M.L., Hernndez A.V. Relevancia del polimorfismo en el rea farmacutica. Revista Mexicana de Ciencias Farmacutica, 2(38); 57-76.