Mac Conkey Agar.

Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fcil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clnicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.

Fundamento
En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorcin en las colonias, y la precipitacin de las sales biliares. Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras. Frmula (en gramos por litro) Peptona 17.0 Pluripeptona 3.0 Lactosa 10.0 Mezcla de sales biliares 1.5 Cloruro de sodio 5.0 Agar 13.5 Rojo neutro 0.03 Cristal violeta 0.001 pH final: Instrucciones

Suspender 50 g del polvo por litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar. Calentar suavemente y hervir 1 a 2 minutos hasta disolver. Esterilizar en autoclave a 121C durante 15 minutos.

7.1 0.2

Siembra
- Sembrar en superficie. - Utilizando la tcnica de Pour Plate: sembrar 1 ml de muestra y agregar aproximadamente 15 ml de medio de cultivo fundido y enfriado a 45-50 C.

Incubacin
Durante 18-48 horas, a 35-37 C, en atmsfera aerbica

Resultados
Microorganismos Escherichia coli ATCC 25922 Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Salmonella typhimurium ATCC 14028 Shigella flexneri ATCC 12022 Proteus mirabilis ATCC 43071 Enterococcus faecalis ATCC 29212 Colonias Rojas con halo turbio Rosadas mucosas Incoloras, transparentes Incoloras, transparentes Incoloras, transparentes Diminutas, incoloras, opacas

Caractersticas del medio

Medio preparado: rojo prpura

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 C. Medio preparado: a 2-8 C.

AGAR EOSINA Y AZUL DE METILENO

BIBLIOGRAFA RESULTADOS PREPARACIN FORMULA EXPLICACIN USO Blv.
-20-95 53-84-20-70 53-84-20-50

ESPECIFICACIONES
El Agar Eosina y Azul de Metileno es un medio utilizado para el aislamiento y diferenciacin de bacilos entricos Gram negativos. Este medio tambin es conocido como Agar EMB por sus siglas en ingls.

La frmula original del Agar EMB fue desarrollada por Holt -Harris y Teague. El uso de la eosina y del azul de metileno permite la diferenciacin de las colonias fermentadoras de lactosa de las no fermentadoras. La sacarosa est incluida en el medio para detectar a los miembros del grupo coliforme que fermentan ms rpidamente la sacarosa que la lactosa. Este medio se considera superior al Agar ENDO, ya que resulta ser un medio ms sensible, estable y seguro y permite una diferenciacin mas temprana entre las colonias fermentadoras y no fermentadoras de lactosa. Holt-Harris y Teague desarrollaron posteriormente la formulacin para el Agar de Levine para la diferenciacin de organismos coliformes fecales y no fecales. Este medio permite diferenciar al grupo Salmonella y otros organismos lactosa negativos de organismos coliformes. El Agar EMB es una combinacin de la frmula original y la de Levine donde las peptonas proveen la fuente de nitrgeno, la eosina y el azul de metileno son colorantes que se combinan para formar un precipitado a pH cido. Los colorantes actan como inhibidores e indicadores. Las carbohidratos proporcionan la fuente de energa, las fosfatos actan como buffer y el agar como agente solidificante. Digerido Pancretico de Gelatina 10.0 Lactosa 5.0 Sacarosa 5.0 Fosfato Dipotsico 2.0 EosinaY 0.4 Azul de Metileno 0.065 Agar Bacteriolgico 15.0 pH 7.2 0.2

Mtodo:
Suspender 36 g del medio en un litro de agua purificada. Calentar con agitacin suave hasta su completa disolucin y hervir durante un minuto. Esterilizar en autoclave a 121C (15 libras de presin) durante 15 minutos. Dejar enfriar a una temperatura entre 45-50C y vaciar en placas de Petri estriles.

Procedimiento:
1. Recolectar las muestras y sembrarlas tan pronto lleguen al laboratorio, sembrando las placas por estra. 2. Incubar las placas 35- 37C durante 18 a 24 horas y observar el crecimiento. Las colonias de Salmonella y Shigella son translcidas, de color mbar o incoloras. Los coliformes que utilizan la lactosa y/o sacarosa producen colonias de color azul a negro con centros obscuros y brillo metlico. Otros coliformes como Enterobacter presentan colonias mucosas de color rosa. Las cepas de Enterococcus faecalis son parcialmente inhibidas. Almacenamiento: 2-30 C. Caducidad: 5 aos en frasco cerrado. Presentacin: Frasco con 450 g Caja con 20 sobres para un litro Medio preparado en paquete con 10 placas

Salmonella Shigella Agar.

Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y de algunas especies de Shigella spp. a partir de heces, alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche su presencia.

Fundamento
Es un medio de cultivo selectivo y diferencial. La selectividad, esta dada por la sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas, de la mayora de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp. Es diferencial debido a la fermentacin de la lactosa, y a la formacin de cido sulfhdrico a partir del tiosulfato de sodio. Los pocos microorganismos fermentadore s de lactosa capaces de desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de pH, obtenindose colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo. Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa, crecen bien en el me dio de cultivo, y producen colonias transparentes. La produccin de cido sulfhdrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la formacin de sulfuro de hierro. Para aumentar la selectividad, se recomienda incubar previamente la muestra en Selenito caldo (B02-120-05). Frmula (en gramos por litro) Pluripeptona 5.0 Extracto de carne 5.0 Lactosa 10.0 Mezcla de sales biliares 8.5 Citrato de sodio 8.5 Tiosulfato de sodio 8.5 Citrato frrico 1.0 Agar 13.5 Verde brillante 0.00033 Rojo neutro 0.025 Instrucciones

Suspender 60 g del polvo por litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar hasta homogeneizar. Calentar a ebullicin durante 2 o 3 minutos. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Enfriar a 45-50C y distribuir unos 20 ml por placa. Secar la superficie del medio unos minutos en la estufa.

pH final: 7.0 0.2

Siembra
Sembrar por estriado la superficie del medio de cultivo. Recomendaciones, se aconseja sembrar en forma conjunta una placa de agar E.M.B. (B02-101-05) o de agar Mac Conkey (B02-114-05).

Incubacin
Durante24-48 horas a 35-37 C, en aerobiosis.

Resultados
Microorganismos Salmonella typhimurium ATCC 14028 Shigella flexneri Shigella sonnei Proteus mirabilis ATCC 43071 Escherichia coli ATCC 25922 Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Enterococcus faecalis ATCC 29212 Colonias Transparentes, centro negro Incoloras Incoloras Transparentes, centro negro Rosadas a rojas Rosadas cremosas y mucosas Incoloras, de muy escaso crecimiento

Caractersticas del medio

Medio preparado: rojo naranja.

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 C.

Presentacin x 100g :Cdigo: B02-138-05 X 500g :Cdigo: B02-138-06

Nutritivo Agar
Medio de cultivo utilizado para propsitos generales, para el aislamiento de microorganismos poco exigentes en lo que se refiere a requerimientos nutritivos. Su uso est descripto en muchos procedimientos para el anlisis de alimentos, aguas y otros materiales de importancia sanitaria.

Fundamento
Por las caractersticas de sus componentes es un medio usado para el cultivo de microorganismos poco exigentes en sus requerimientos nutricionales. No contiene inhibidores del desarrollo bacteriano. La pluripeptona es la fuente de carbono y nitrgeno para el desarrollo bacteriano. El agregado de cloruro de sodio permite el enriquecimiento con sangre de carnero u otras sustancias para facilitar el cultivo de microorganismos exigentes. Frmula (en gramos por litro) Pluripeptona Extracto de carne Cloruro de sodio Agar Instrucciones Suspender 31 g de polvo por litro de agua destilada. Mezclar y dejar reposar 5 minutos. Calentar suavemente agitando y hervir 1 o 2 minutos hasta su disolucin. Distribuir y esterilizar a 121C durante 15.0 15 minutos. pH final: 7.3 0.2 5.0 3.0 8.0

Siembra
En superficie o por la tcnica de pour plate, segn el uso a que se destine.

Incubacin
En aerobiosis, a 35-37 C durante 24 horas.

Resultados
a-Agar nutritivo:

Microorganismos

Crecimiento

P. mirabilis ATCC 43071 E. coli ATCC 25922 S. aureus ATCC 25923 B. cereus ATCC 10876 E. faecalis ATCC 29212 P. aeruginosa ATCC 27853

Bueno-excelente Bueno-excelente Bueno-excelente Bueno-excelente Bueno-excelente Bueno-excelente

b-Agar nutritivo suplementado con 5% de sangre de carnero:

Microorganismos S. pyogenes ATCC 19615 S. pneumoniae ATCC 6305 S. pneumoniae ATCC 49619

Crecimiento Abundante Abundante Abundante

Hemlisis Beta Alfa Alfa

Caractersticas del medio

Medio preparado: mbar claro a medio ligeramente opalescente.

Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C. Medio preparado: a 2-8 C.

x 100g :Cdigo: B02-122-05

Presentacin x 500g :Cdigo: B02-122-06

6 x 50 ml: B04-122-84

Verde Brillante Agar.

Medio de enriquecimiento altamente selectivo para el aislamiento de Salmonella spp., excepto S. typhi y S. paratyphi, a partir de muestras clnicas, alimentos, y otros materiales de importancia sanitaria. No se recomienda para el aislamiento de Shigella spp. Es de un valor excepcional cuando se investiga un gran nmero de muestras de heces o alimentos, por su alta capacidad de diferenciacin de las colonias sospechosas.

Fundamento
En el medio de cultivo, la pluripeptona y el extracto de levadura, constituyen la fuente de nitrgeno, vitaminas y minerales. La lactosa y la sacarosa son los hidratos de carbono fermentables, el rojo fenol es el indicador de pH, que vira al amarillo cuando hay produccin de cido a partir de la fermentacin de azcares, el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y el verde brillante acta como agente selectivo. Frmula (en gramos por litro) Pluripeptona 10.0 Extracto de levadura 3.0 Cloruro de sodio 5.0 Lactosa 10.0 Sacarosa 10.0 Rojo fenol 0.08 Verde brillante 0.0125 Agar 20.0 pH final: Instrucciones

Suspender 58 g de polvo por litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar calentando a ebullicin durante 2 o 3 minutos. Distribuir y esterilizar en autoclave a 118-121C durante 15 minutos. Secar la superficie del medio por unos minutos en la estufa.

6.9 0.2

Siembra
Sembrar en superficie por estriado a partir de una dilucin del material a investigar o de un cultivo previo en un medio de enriquecimiento selectivo, como Selenito caldo (B02-120-05) o Tetrationato caldo (B02-145-05). Para el tratamiento de materia fecal se recomienda hacer cultivo primario en medios menos selectivos, como Salmonella Shigella agar (B02-138-05), o Mac Conkey agar (B02-114-05).

Incubacin
Incubar 24 horas a 35 -37C.

Resultados

Microorganismos Escherichia coli ATCC 25922 Salmonella enteritidis ATCC 13076 Salmonella typhi Salmonella typhimurium ATCC 14028 Shigella flexneri. ATCC 12022 Staphylococcus aureus ATCC 25923

Caractersticas de las colonias Amarillo-verdosas sobre fondo amarillento Rosas, blancas o transparentes sobre fondo rojo Crecimiento inhibido Rosas, blancas o transparentes sobre fond o rojo Crecimiento inhibido Crecimiento inhibido

Caractersticas del medio

Medio preparado: verde.

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 C. Medio preparado: a 2-8 C.

Presentacin x 100g :Cdigo: B02-124-05 x 500g :Cdigo: B02-124-06

AGAR METODOS ESTANDAR

BIBLIOGRAFA RESULTADOS PREPARACIN FORMULA EXPLICACIN USO
Blv. Centro Industrial N 1017, Fracc. Ind. Puente de Vigas, C.P. 54070, Tlalnepantla, Edo. de Mxico Telfono y Fax: 53-84-20-95 53-84-20-70 53-84-20-50

ESPECIFICACIONES
El Agar Mtodos Estandar es un medio utilizado para el recuento de bacterias aerbicas a partir de agua, aguas residuales, alimentos y productos lcteos. Este medio tambin es conocido como Agar Cuenta Estandar. El Agar Mtodos Estandar fue desarrollado por Buchbinder Baris and Goldstein en 1953 como un requerimiento de la American Public Health Association. Este medio se formula con los ingredientes originales. El extracto de levadura y la peptona de casena han sido utilizados en medios diseados para estudiar la presencia de microorganismos termoflicos en productos lcteos desde 1928. La peptona de gelatina y el extracto de levadura proporcionan la fuente de carbono y nitrgeno. La dextrosa es el carbohidrato fermentable y el agar es adicionado como agente solidificante. Peptona de Casena 5.0 Dextrosa 1.0 Extracto de Levadura 2.5 Agar Bacteriolgico 15.0 pH 7.0 0.2

Mtodo:
Suspender 23.5 g del medio en un litro de agua purificada. Calentar con agitacin suave hasta su completa disolucin y hervir durante un minuto. Esterilizar en autoclave a 121C (15 libras de presin) durante 15 minutos. Dejar enfriar a una temperatura entre 45-50 C y vaciar en placas de Petri estriles.

Procedimiento:
1. Consultar las referencias apropiadas respecto a los procedimientos para procesar y sembrar muestras de alimentos, agua y otros materiales. 2. Colocar alcuotas de la muestra en las placas Petri y vaciar el medio enfriado a 45 C. Mezclar, dejar solidificar e incubar. Este medio tambin puede utilizarse para hacer la siembra por filtracin de membrana. 3. Incubar las placas a 35 2 C durante 18-24 horas. Despus del perodo de incubacin se hace el conteo de colonias ya sea en la superficie del filtro o en el seno del medio, dependiendo de la tcnica utilizada. Almacenamiento: 2-30C. Caducidad: 4 aos en frasco cerrado. Presentacin: Frasco con 450 g Caja con 20 sobres para un litro Medio preparado en paquete con 10 placas

AGAR SOYA TRIPTICASEINA

BIBLIOGRAFA RESULTADOS PREPARACIN FORMULA EXPLICACIN USO
Blv. Centro Industrial N 1017, Fracc. Ind. Puente de Vigas, C.P. 54070, Tlalnepantla, Edo. de Mxico Telfono y Fax: 53-84-20-95 53-84-20-70 53-84-20-50

ESPECIFICACIONES
El Agar Soya Tripticasena es un medio utilizado para promover el crecimiento de microorganismos fastidiosos y adicionado de sangre para observa reacciones hemolticas. El Agar de Soya Tripticasena provee un excelente soporte de crecimiento para organismo aerobios y anaerobios, segn lo demostr Leavit en 1955. Este medio es recomendado en los procedimientos microbiolgicos de control de aguas , cosmticos y en la industria farmacetica. De aguerdo con la Farmacopea. Clnicamente se utiliza para diferenciar especies de Haemophylus debido a que no contiene los factores X y V requeridos para su crecimiento. As mismo este medio puede ser utilizado como base para preparar medios suplementados como el Agar Sangre y Agar Glosa Chocolate. En este medio las peptonas proveen la fuente de nitrgeno y minirales. El azcar de la Peptona de Soya provee la fuente de carbohidratos. El Cloruro de Sodio tiene su funcin en el balance osmtico y el Agar es incorporado como agente solidificante. Peptona de Casena 15.0 Peptona de Soya 5.0 Cloruro de Sodio 5.0 Agar Bacteriolgico 15.0 pH 7.3 0.2

Mtodo:
Suspender 40 g del medio en un litro de agua purificada. Calentar con agitacin suave hasta su completa disolucin y hervir durante un minuto. Esterilizar en autoclave a 121C ( 15 libras de presin) durante 15 minutos. Dejar enfriar a una temperatura entre 45-50C y vaciar en placas de Petri estriles. Para preparar Agar Sangre, adicionar ascticamente sangre desfibrinada estril al 5% despus de esterilizar y enfriar el medio. Almacenamiento: 2-30C. Caducidad: 5 aos en frasco cerrado. Presentacin: Frasco con 450 g Caja con 20 sobres para un litro Medio preparado en paquete con 10 placas Medio preparado en caja con 10 Tubos