Jos Luis Dvalos Ros

UNIVERSIDAD DEL AZUAY FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGA ESCUELA DE BIOLIOGIA DEL MEDIO AMBIENTE

Diseo al Trabajo de graduacin previo a la obtencin del ttulo de Bilogo

TEMA: Aplicacin de protocolos de germinacin de la palmera Parajubaea cocoides

AUTORES: Jos Luis Dvalos Ros

CUENCA ECUADOR

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Jos Luis Dvalos Ros 1. TEMA: Aplicacin de protocolos de germinacin de la palmera Parajubaea cocoides 2. ANTECEDENTES Cuenca es una de las ciudades del Ecuador, que constituyen elementos vegetales y rboles con un gran valor ambiental, esttico e histrico. Dentro de la ciudad se declararon algunas especies vegetales como rboles patrimoniales. Entre estos podemos encontrar la palmera nacional o tambin llamado coquito, nominada como frutal, cuya procedencia es propia de la regin andina pero con baja cantidad de individuos dentro de la ciudad y el pas, por lo que cabe realizar trabajos que ayuden a su propagacin y futura agro forestara. 3. PROBLEMTICA Con respecto a la palmera nacional Parajubaea cocoides, que presentan unas semillas con germinaciones irregulares y un tiempo prolongado en romper su dormancia, as como pudiendo dar un porcentaje bajo en las tasas de germinacin. En la actualidad la empresa municipal de aseo (EMAC), la cual esta a cargo de reas verdes dentro de la ciudad, no contiene protocolos especficos de germinacin de esta palmera para su futura siembra, por lo que seria necesario experimentar algunas tcnicas y formas de propagacin, con el fin de brindar aportes y nuevos estudios de esta palmera. 4. JUSTIFICACIN Este proyecto propone la realizacin de diferentes protocolos de germinacin y propagacin a partir de semillas de la palma nacional, el cual se realizarn comparaciones, verificar los mejores mtodos, medir los porcentajes de germinacin y el tiempo de germinacin. Se conoce que la semilla pueda tener dos tipos de dormancia como: Dormancia del tegumento o dormancia externa, que es causada por la presencia de la cubierta dura que protege el endocarpio y embrin, lo cual no permite la entrada del agua o el oxigeno hasta el embrin. Dormancia del embrin o dormancia interna, es causada por la condicin del embrin que no permite la germinacin. Tambin la dormacia puede suceder cuando las condiciones o factores ambientales son desfavorables. 5. ALCANCE El estudio de esta palmera andina y por ser propia de un clima templado, se desconoce la influencia de la temperatura como variable, lo cual tambin podra ser medido de acuerdo a cada protocolo de germinacin que se pueda establecer para obtener un mayor nmero de datos y resultados para sus respectivas comparaciones dentro de un ambiente de invernadero y al ambiente. As tambin poder comparar los tipos de escarificacin que se realicen.

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Jos Luis Dvalos Ros 6. OBJETIVOS Objetivo general - Establecer protocolos de germinacin y propagacin de la palmera nacional Parajubaea cocoides. Objetivos especficos - Establecer los factores de temperatura que determinen la emergencia de las semillas. - Determinar el porcentaje de semillas germinadas de cada protocolo. - Estimar el tiempo de germinacin de cada protocolo. - Verificar el mtodo de escarificacin mas apropiado. 7. MARCO TERICO En la actualidad, un considerable nmero de palmeras con diversos atributos morfolgicos, estn siendo evaluadas por investigadores y viveristas para ser utilizadas como plantas ornamentales en parques, jardines y espacios de interior. Las palmeras, en general, son principalmente propagadas por semilla cuya germinacin se caracteriza por ser variable entre especies, relativamente lenta, errtica y baja (Broschat, 1994). Sin embargo, a travs del manejo adecuado de su semilla se puede optimizar el tiempo de la germinacin y la emergencia. Generalmente, se menciona que la germinacin exitosa est determinada por el uso de semillas provenientes de frutos maduros y frescos, o bien, almacenados, procesados y adecuadamente sembrados (Broschat, 1994; Hodel, 1998); Sin embargo, Broschat (1994) consider que especies que presentan germinacin lenta y no uniforme deben ser sujetas a pruebas. Las condiciones ambientales que determinan la germinacin en muchas palmeras son poco conocidas (Tomlinson, 1990). El clima tiene una gran importancia en el proceso de propagacin, tanto en el modo en que se lleva a cabo, como en el grado de resistencia al fro de cada planta. Por ejemplo, en los climas mas fros se debe realizar bajo cubierta o bien con una fuente de calor artificial, mientras que en las regiones templadas o tropicales las plantas se reproducen al aire libre sin problemas. Por lo general, el xito de la propagacin depende si se ha proporcionado un ambiente adecuado para el material vegetal utilizado y, posteriormente, las nuevas plantas. Por ultimo, se abordan los principales problemas que suelen afectar a las plantas y se dan ideas para su posible solucin (Enciclopedia de la propagacin de plantas, 2000). Tratamientos de semillas La preparacin de las semillas explota su habilidad natural para detener el desarrollo si las condiciones del suelo son desfavorables, con lo que se mejora la velocidad y uniformidad de la germinacin. Las semillas empiezan una germinacin previa con una cantidad controlada de agua y entonces se vuelve a secar justo antes de que emerja la radcala (raz embrionaria). El tiempo del tratamiento resulta crucial, y la verdadera germinacin no tiene lugar hasta que se siembran las semillas. Las semillas redondas estn recubiertas de un material inerte, como un polmetro, que se libera en contacto con el agua. La cubierta puede contener fungicidas, nutrientes y una tintura fluorescente, con lo que facilita la siembra (Enciclopedia de la propagacin de plantas, 2000).

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Periodo de latencia de las semillas Las semillas permanecen inactivas hasta que se dan las condiciones adecuadas para germinar, es decir, una buena temperatura, as como cierto grado de humedad y, en algunos casos, de luz. Si estas condiciones estn presentes, una semilla que no este en periodo de latencia germinara tan pronto como haya absorbido la cantidad de agua necesaria. En zonas con veranos calidos e inviernos fros, o en lugares donde se da una alteracin de estaciones secas y hmedas, la latencia evita que las semillas germinen nada ms madurar, al final de su fase de desarrollo, con lo que las plntulas se moriran a causa del fro, el calor o la sequa. La latencia tambin permite retrasar la germinacin de las semillas con el fin de reducir la competitividad entre los vstagos. Normalmente, el periodo de la latencia de las semillas se consigue por diversos medios, entre ellos el recubrimiento de la semilla con una cscara dura llamada pericarpo, o bien la inmadurez o la inhibicin qumica del embrin. Dependiendo del grado persistencia del periodo de inactividad, se habla de latencia ligera, intermedia o intensa. En todo caso, es importante que las semillas, una vez preparadas para la germinacin, se mantengan estables, pues cualquier cambio en las condiciones, como un incremento de calor, sequedad o perdida de oxigeno, comportara un nuevo periodo de latencia extremadamente difcil de romper (Enciclopedia de la propagacin de plantas, 2000). Latencia de las cubiertas de las semillas Algunas cubiertas de semillas presentan una impermeabilidad que se ve disminuida gradualmente por las bajas temperaturas hasta que, finalmente, acaban cayendo por la accin de las bacterias y los hongos del suelo. Puesto que una semilla no germina hasta haber absorbido cierto grado de humedad, la sequedad de la cubierta de la semilla cuando esta madura tambin produce inactividad. La escarificacin o degradacin fsica de la cubierta de la semilla permite que la humedad alcance al embrin. Esto puede lograrse frotando las semillas contra una superficie abrasiva como papel de lija, o, en el caso de las semillas grandes, rompindolas con una navaja. Manipule solo una zona pequea y procure no daar las semillas. A nivel industrial, las semillas se tratan con acido, pero este mtodo resulta demasiado peligroso para un jardinero. Recoger las semillas tan pronto como alcanzan su mximo desarrollo (pero al principio del desarrollo de la cubierta de la semilla) reduce el tiempo de descomposicin de la cubierta, de forma que la germinacin es ms segura. Las semillas que presentan una pelcula impermeable en la cubierta, pueden sumergirse en agua caliente. Esta extraer la capa impermeable, permitiendo que la semilla absorba el agua. Someter las semillas a un cambio de temperatura, proceso denominado escarificacin, bien sea antes o despus de la siembra, es la opcin mas sencillas y con frecuencia las mas efectiva, ya que intenta emular el proceso natural (Enciclopedia de la propagacin de plantas, 2000). Palmeras A menudo no se tiene la sensacin de que las palmeras y las cicadceas sean un legado de una poca en la que el mundo de las plantas se encontraba en una fase embrionaria, ya que las hojas de muchas de ellas tienen un contorno semejante al de un fsil. Aunque normalmente pensamos que las palmeras son rboles altos, con

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Jos Luis Dvalos Ros hojas arracimadas en su copa, lo cierto es que muchas de ellas adoptan formas de mata o de arbustos. Todas pertenecen a la familia palmae (Arecaceae), que abarcan aproximadamente 200 gneros y 2600 especies, aunque algunos especialistas afirman que existen 211 gneros y 2779 especies. Principalmente son nativas de las zonas tropicales y subtropicales, si bien algunas de ellas pueden sobrevivir en zonas de temperatura templada (Gua completa para seleccionar y cultivar 220 especies de palmeras y cicadceas, Squire David, 2008).

La temperatura Al igual que muchas otras plantas, las palmeras y cicadceas son fciles de cultivar en sus regiones nativas, pero no siempre se dan bien en zonas que les resulta ajenas, especialmente en aquellas que tienen un clima diferente y mas fri. Las temperaturas tropicales y subtropicales son esenciales para muchas palmeras, aunque algunas de ellas pueden desarrollarse perfectamente en climas que cuentan con temperaturas templadas. Sin embargo, en las regiones con temperaturas fras, muchas palmeras y algunas cicadceas deben crecer en interiores o en invernaderos de preferencia (Gua completa para seleccionar y cultivar 220 especies de palmeras y cicadceas, Squire David, 2008). Las palmeras pueden propagarse de dos maneras, a partir de semillas o mediante divisin. La mayora crecen mejor a partir de semillas, las cuales resultan relativamente fciles de obtener, pero algunas palmeras producen retoos o vstagos y pueden ser multiplicadas ms rpidamente por divisin. Palmeras a partir de semillas Las palmeras presentan inflorescencias formadas por multitud de pequeas flores. Algunas florecen en repetidas ocasiones, mientras que otras florecen una sola vez y mueren. Los frutos poseen una pulpa carnosa y otras una pulpa seca. Las semillas se recogen cuando el fruto esta maduro y cambia de color. Limpie la pulpa para evitar que se pudra y envuelva las semillas en un tejido hmedo o en musgo. Si se trata de pulpa seca, sumerja los frutos en agua tibia durante uno o dos das hasta que se ablanden y extraiga las semillas. Si estas poseen una cubierta dura es mejor sembrarlas frescas, pero, si piensa almacenarlas, colquelas en una bolsa de plstico en un lugar con sombra a unos 20oC. La mayora de las semillas conservan su capacidad para germinar durante 4-8 semanas. Las semillas que compre pueden estar secas; si es as, sumrjalas en agua tibia durante al menos 24 horas y hasta dos semanas dependiendo del tamao, y a continuacin simbralas rpidamente. Extraiga las cubiertas ms externas de las semillas leosas o rmpalas con cuidado para permitir que la humedad alcance las semillas y estas puedan germinar (Enciclopedia de la propagacin de plantas, 2000).

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Siembra de semillas de palmera Es mejor sembrar las semillas de palmera en macetas. Las macetas hondas de arcilla evitan el encharcamiento y dejan que el aire llegue a las races de la plntula. Llene la maceta con un substrato adecuado para semillas, por ejemplo con partes iguales de fibra de coco y arena fina (5mm), riegue bien y deje que drene. Por ultimo, siembre las semillas con cuidado. Una temperatura del aire 30 - 35oC y una humedad alta resultan esenciales para aumentar las posibilidades de germinacin. Por ello, no deje nunca que las semillas se sequen, ya que de lo contrario morirn. La germinacin puede tener lugar entre 3 semanas y 18 meses despus, aunque no espere que germinen ms de dos tercios de las semillas. Normalmente las semillas sembradas en climas calidos germinan hasta una semana antes que en zonas templadas. Proteja las macetas con semillas del sol fuerte colocndolas en un lugar con sombra con 30 - 45% de sombra dependiendo de la zona. En climas frescos, coloque un propagador con calefaccin que proporcione un calor de fondo de 25 - 28oC en una zona soleada del invernadero para lograr el mximo de calor y luz. Mantenga la humedad regando regularmente y pulverizando ligeramente las plantas. Como alternativa utilice un sistema de propagacin con vapor. Un sobrecalentamiento podra provocar la podredumbre de las semillas, de modo que debe ventilar el lugar regularmente. Si desea plantar grandes cantidades de palmeras, hgalo en hileras sobre un bancal elevado en un suelo hmedo, ligero y con buen drenaje o en un substrato con el fin de minimizar el dao producido a las races al transplantar las plntulas (Enciclopedia de la propagacin de plantas, 2000).

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Pregerminacin de semillas de palmera Si el espacio es limitado, las semillas de palmera pueden ser pregerminadas en una bolsa de substrato libre de tierra o musgo hmedo, en un banco de invernadero o en un armario aireado. Las semillas tratadas de esta forma germinan antes, por lo general en el periodo de cuatro a ocho semanas, dependiendo de la especie. Compruebe las semillas diariamente en busca de seales de brotes y plntelos antes de que sean demasiado grandes. Las semillas forman primero races y luego vstagos, pero pueden plantarse tan pronto como tengan races. Plante en macetas un poco mas grandes que las races para reducir el riesgo de podredumbre, con una mezcla a partes iguales de corteza gruesa, marga, arena fina (5mm) y fibra de coco, u otra a partes iguales de fibra mineral laxa, substrato con base de marga y perlita, junto a dos gramos por litro de abono de liberacin lenta. Mantenga las plntulas bajo una sombra hmeda entre cuatro y seis semanas despus de plantarlas, hasta que se hayan establecido (Enciclopedia de la propagacin de plantas, 2000).

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Especie de palmera Parajubaea cocoides Ficha tcnica: 12 - 15 metros de altura 4,5 - 6 metros de circunferencia en palmeras maduras Esta palmera necesita un suelo bien frtil, bien drenado y capaz de retener la humedad, as como una temperatura templada. Crece a mucha altura y no es adecuada para los trpicos. Es mejor que este a pleno sol y que las noches sean frescas. Se cultiva ampliamente como palmera decorativa en climas mediterrneos, as como en su hbitat original. El plante de una semilla fresca; necesita mucho tiempo para germinar, por lo que conviene empapar las semillas en agua o agujerar o romper la cscara de la semilla. Si lo prefiere colquela en un lugar calido durante 6 - 8 semanas (algunas especialistas aconsejan hasta seis meses) antes de sembrarla para fomentar una rpida germinacin. Ecuador y Colombia

Descripcin Tambin conocida como cumbe, coco cumbe o coquito. Esta palmera andina es propia de los valles andinos (secos y hmedos) ecuatoriales, y se lo encuentra en las principales ciudades del pas, desde Loja hasta Ibarra. Aunque se cultiva como ornamental y sus frutos son comestibles ( Convocatoria publica a nominacin de rboles patrimoniales de Cuenca, 2008).

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Jos Luis Dvalos Ros Los foliolos son de color verde oscuro brillante, plateados por el reverso, alcanzan los 60cm de largo y forman parte de hojas de 3 3,6 metros de largo y con pecolos de 90cm. Las hojas estn arqueadas y toda la planta recuerda la palmera del coco, pero, esta tiene un crecimiento ms rpido y tolera mejor las condiciones frescas. Los frutos pequeos de color verde oscuro adquieren un tono marrn cuando maduran. El tronco solitario de color gris claro a gris oscuro que muchas veces alcanzan los 45cm de dimetro y al principio esta cubierto por bases de hojas de color gris oscuro a canela. Se encuentra ligeramente abultado en la base (Gua completa para seleccionar y cultivar 220 especies de palmeras y cicadceas, Squire David, 2008). Sus grandes semillas germinan irregularmente y con alguna dificultad. Existen varias tcnicas, como por ejemplo, alterar temperaturas da/noche, romper la cscara de la semilla, baarlas en oxigeno puro o en un lecho de musgo hmedo, o cualquier combinacin de las indicadas. Para su cultivo requiere un lugar soleado y suelo bien drenado. Aunque prefiere un clima templado (libre de heladas), puede soportar bajas temperaturas. No soporta las altas temperaturas ( Convocatoria publica a nominacin de rboles patrimoniales de Cuenca, 2008).

8. DISEO EXPERIMENTAL Materiales y mtodos Lugar de estudio El sitio de estudio comprende en la parte urbana de la ciudad de Cuenca, donde cuenta con la presencia de algunas palmeras (parajubaea cocoides), las cuales se recolectaran sus semillas para la realizacin de los protocolos de germinacin y la toma de datos. Los lugares de colecta se encontraran ubicados en la zona del Parque Caldern, zona del puente roto, barranco, Colegio Borja y ciertos sectores donde estn presentes algunas palmeras. Posteriormente se llevaran a cabo las prcticas pregerminativas y germinativas en un invernadero y laboratorio. Preparacin de los sustratos de germinacin Para el sustrato de germinacin en el invernadero y ambiente, se utilizar la mezcla de la turba TS1 en una relacin de 33% (0,050m 3), arena de ro en un 33% (0,050m3) previamente desinfectada en cloro y lavada en abundante agua; y tierra negra en un 33% (0,050m3). Posteriormente esta mezcla se coloca en las bandejas de madera de (1m x 1m y 0,25m de alto), las cuales van a ser usadas en los diferentes ambientes y tipos de escarificacin se la semilla a tratarse.

Preparacin de las semillas Luego de colectar las semillas se realizar un pretratamiento, el cual consiste en lavar las semillas en agua tibia con jabn lquido durante 20 minutos, remojarlas en abundante agua a chorro y posteriormente limpiarlas con alcohol industrial al 70%

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Jos Luis Dvalos Ros durante 5 minutos. Luego del lavado y desinfeccin, se proceder a la realizacin de diferentes formas y tipos de escarificacin que se pondr a prueba. Escarificacin de las semillas Extraccin de de la corteza que cubre el embrin: Este mtodo consiste en seleccionar 200 semillas las cuales, cuidadosamente se pelan y cortaran la estructura dura por la mitad con una caladora antes de llegar al embrin, posteriormente con un desarmador pequeo abrimos con cuidado la corteza y finalmente se extrae la pequea estructura endospermo con el embrin. Posteriormente sembramos 100 semillas en la bandeja del invernadero y 100 en la bandeja que esta al aire libre. Semillas sumergidas en Acido giberelico New Gib 10%: Seleccionando 200 semillas, extraemos la corteza carnosa, sometemos las semillas en el acido giberlico disuelto en agua por 24 horas y enterramos las semillas a medio descubiertas en las bandejas dentro del invernadero y al ambiente.

Siembra de las semillas sin tratamiento de escarificacin como testigo Tomando 200 semillas previamente desinfectadas, se siembra directamente en las 100 en la bandeja al aire libre y 100 en la del invernadero. Siembra de embriones en el laboratorio Cuidadosamente se cortaran la estructura dura de la semilla por la mitad con una caladora antes de llegar al embrin, dejando una sea; a continuacin se realiza un protocolo de desinfeccin: Lavar las semillas a usarse bajo el chorro de agua de la llave durante 20 minutos. Enjage tres veces el material con jabn lquido. Colocar el material vegetal en alcohol al 75% durante un minuto y enjage con agua esteril. Lavar el material en cloro al 1% durante 10 minutos. Enjage dos veces el material en agua estril dentro de la cmara de flujo con los materiales a usarse y manos previamente desinfectados. Se extrae la cubierta dura y se siembran los embriones en frascos de medio MS estndar de Murashige y Skoog de agua de coco.

Anlisis estadstico Luego de la toma de datos, se va seleccionar un test estadstico que permita comparar los resultados y las variables que se tomaron en cuenta en los diferentes protocolos de germinacin como el tiempo y el porcentaje de emergencia de las semillas en los ambientes a probarse. En el caso de tener un bajo porcentaje de germinacin se podr aplicar un test estadstico chi cuadrado. Se utiliza anova en el

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Jos Luis Dvalos Ros caso de tener alto porcentaje de germinacin. Para interpretar el tiempo de germinacin se podr aplicar un anlisis de varianza.
Escarificaci Escarificacin con n sin corteza acido giberlico Testigo # # semillas # semillas semillas 100 100 100 100 In vitro # semillas 100 100 Germinacin Tiempo %

variables Invernade ro 100 Ambiente 100

9. RECURSOS 9.1 Recursos humanos Autores: Sr. Jos Luis Dvalos 9.2 Recursos materiales Computadora Internet Libros Impresora Cmara digital Marcador Invernadero pequeo Laboratorio y materiales (reactivos) Bandejas de madera Bandeja metlica Regadera Arena de ri Sustrato turba rubino TS1 Tierra negra Semillas de la palmera Acido giberlico NewGibb Cierra caladora Alcohol industrial Cloro Jabn liquido Guantes Pala pequea Desarmador pequeo plano Termmetro Calefactor

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10. CRONOGRAMA DE TRABAJO Cronograma de trabajo Actividad Informacin bibliogrfica Recolecta de semillas y pretratamientos Siembra y uso de laboratorio Monitoreo de las semillas sembradas Anlisis de resultados Conclusiones y discusiones Elaboracin del informe Mes 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 12

11. PRESUPUESTO
Rubros Materiales Laboratorio y reactivos Invernadero pequeo Bandejas de madera Regadera Pala pequea Guantes Alcohol industrial Cloro Acido Giberelico New Gibb Jabn liquido Termmetro Calefactor Cmara digital Subtotal Imprevistos Edicin y difusin Impresiones Total $ 180.00 Cuadro de costos Unidad Valor unitario 1 1 6 1 1 1 1 galn 1 galn 10 1 1 1 1 $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ 400.00 300.00 8.00 7.00 8.00 1.50 12.00 7.00 1.70 10.00 25.00 140.00 120.00 Total $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ 400.00 300.00 48.00 7.00 8.00 1.50 12.00 7.00 17.00 10.00 25.00 140.00 120.00

$ 1,095.50 $ 180.00

90.00

90.00

$ 1,365.50

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12. BIBLIOGRAFIA Toogood, Alan. 2000. Enciclopedia de la propagacin de plantas. Editado por BLUME Av. Mare de Deu de Lorda, 2008034 Barcelona. I.S.B.N. 84-8076-356-6 Impreso en Singapur. 320p. 65-67p. Squire, David. 2008. Palms and Cycads. Gua completa para seleccionar, cultivar y propagar 220 especies de palmeras y cicadceas. Editado por Blume Av. Mare de Deu de Lorda, 2008034 Barcelona. I.S.B.N. 978-84-8076-733-0. Impreso en Malasia. 160p. 110p. Hurtado M, Daniel V., Merino M, Maria Eugenia. 1988. Cultivo de Tejidos Vegetales. Editorial Trillas, S.A de C. V., Av. Ro Churubusco385, Col Pedro Maria Anaya. Deleg. Benito Jurez, 03340, Mxico, D. F. ISBN 968-24-2159-4. Impreso en Mxico. 132p. Cuenca Municipalidad, CGA Comisin de gestin ambiental, EMAC Empresa municipal de Aseo, Universidad de Cuenca, Universidad del Azuay, Universidad Politcnica Salesiana y Colegio de ingenieros Agrnomos del Azuay. 2008. I Convocatoria Pblica a nominacin de rboles patrimoniales de Cuenca. Cuenca Ecuador. 27p. 20-23p. MACIEL, N y BRICENO, A. Efecto de la madurez de frutos, escarificacin de la semilla y temperatura en la emergencia de Syagrus stenopetala Burret. Rev. Fac. Agron. [online]. jun. 2009, vol.26, no.2 [citado 29 Abril 2011], p.196-211. Disponible en la World Wide Web: <http://www.scielo.org.ve/scielo.php? script=sci_arttext&pid=S0378-78182009000200004&lng=es&nrm=iso>. ISSN 0378-7818. Capisto, Carlos. 2004. Germinacin de las semillas de palma. Avepalmas. paisajismoenred@cantv.net http://www.avepalmas.org/germina.htm [citado 29 Abril 2011]. http://www.goldengatepalms.com/public_html/coconut.htm [citado 29 Abril 2011]. http://www.pacsoa.org.au/palms/Parajubaea/cocoides.html [citado 29 Abril 2011]. http://www.rarepalmseeds.com/es/pix/ParCoc.shtml [citado 29 Abril 2011]. www.infojardin.com/foro/attachment.php?attachmentid=51422... [citado 29 Abril 2011].

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