EXAMENES DE LABORATORIO: Hemograma, Reactantes de Fase Aguda e Inmunofluorescencia.

HEMOGRAMA El hemograma completo es la prueba de laboratorio en la que se van a cuantificar y evaluar diferentes grupos celulares, glbulos rojos (eritrocitos), glbulos blancos (leucocitos), los trombocitos o plaquetas, el contenido de hemoglobina y otros parmetros relacionados con su cantidad, contenido y forma. El hemograma es un anlisis de sangre en el que se mide en global y en porcentajes los tres tipos bsicos de clulas que contiene la sangre, las denominadas tres series celulares sanguneas: Serie Roja o Eritrocitaria, Serie Blanca o Leucocitaria y Serie Plaquetaria. El hemograma es un examen relativamente simple y en algunas situaciones nos ayuda en la evaluacin diagnstica, pero sin entrar en mayores detalles, ya que es una herramienta que utilizamos a diario en nuestra prctica clnica, nos gustara recordar que cada una de estas series tiene una funcin determinada, y estas funciones a su vez, se vern perturbadas si existe alguna alteracin en la cantidad o caractersticas morfofuncionales de las clulas que las componen. En el hemograma se analiza tambin el frotis sanguneo, el que consiste en la evaluacin de la forma de los elementos sanguneos, siendo especialmente til en los pacientes con anemia, pero tambin en anormalidades de los leucocitos o plaquetas, ya que pueden ser de orientacin diagnstica. Utilidad: Ayuda diagnstica de ciertas infecciones; refleja capacidad de respuesta del organismo frente a la enfermedad y sirve de indicador de progreso en pacientes con infeccin y anemia. HEMOGRAMAS Y LABORATORIOS PATOLOGICOS ANEMIA FERROPRIVA Hemograma: Hemoglobina y Hematocrito Disminuido; VCM menor a 78 fl; CHCM menor a 31%; Reticulocitos Normales; Microcitosis; Hipocroma y Trombocitosis. Hemograma: Anemia (Hb> 10 g/dl) normoctica (VCM normal) y normocrmica (CHCM normal); Trombopenia; Neutropenia que puede ser Severa (< 100/mm3) 22%, Moderada (100-500/mm3) 22% o Leve (500-1 000/mm3) 18%; con presencia de Blastos. Mielograma: Infiltracin por Blastos > 25%; clasificacin FAB fueron catalogados como Linfoblastos

LEUCEMIA LINFOCITICA AGUDA

(L1 80%, L2 17% y Blastos no clasificables 3%).

SINDROME HEMOLITICO UREMICO Hemograma: Anemia hemoltica (hematocrito 30%); Observacin de Esquistocitos; Trombocitopenia (recuento de plaquetas < 150.000 /mm3) y Leucocitosis. Insuficiencia Renal Aguda: Creatininemia (> 1 mg/dl) y BUN aumentada.

Hemograma: Hemoconcentracin de 47 70%; Trombocitopenia de 52.000 mm3; Leucocitosis con Desviacin a Izquierda y presencia de Inmunoblastos. Otros: Elevacin de los valores de PCR, LDH, CPK, TTPK, BUN, Creatininemia y Amilasemia.

ENDOCARDITIS INFECCIOSA Hemograma: Hemoglobina Disminuida (70-90%); VCM y CHCM Normal; Neutroflia. PCR: Elevada, la cual disminuye con terapia exitosa y se usa para monitorizar las terapias VHS: Elevada, valor promedio de 55

FIEBRE TIFOIDEA Hemograma: Leucocitopenia; Aneosinofilia Absoluta; Desviacin a Izquierda. PCR: Elevada por sobre 40 mg/L VHS: Elevada (raro sobre 50 mm en la hora)

COQUELUCHE Hemograma (Periodo de Estado): Linfocitosis Absoluta (Lactantes: Sobre 15.000 por mm3 y Nios Mayores: Sobre 10.000 por mm3); Leucocitosis Mayor a 20-30.000 por mm3

ENFERMEDAD DE KAWASAKI Hemograma: Leucocitosis; Trombocitosis; Desviacin a Izquierda; Hemoglobina Disminuida y Eritrocitosis. PCR: Elevada mayor a 40 mg/L VHS: Elevada HANTA

MONONUCLEOSIS INFECCIOSA Hemograma: Linfocitosis Absoluta de 10% o ms (tipo Downey), Clulas no patognomnicas.

REFERENCIAS DE NORMALIDAD EN HEMOGRAMA SEGN EDAD.

DETERMINACIN HTO (%) GLBULOS ROJOS Hb (gr/dl) GLBULOS BLANCOS Neutr. Cayado (%) Neutr. Segm. (%) Eosinfilos (%) Basfilos (%) Linfocitos (%) Monocitos (%) Reticulocitos (%) Rto. de plaquetas

R.N. 45-64 4.000.000 5.600.000 14,5-22,5 8.000-30.000 10-18 35-62 2-3 0,6 26-36 5-8 2-5 100.000470.000 A

1 MES 40-60 4.000.000 5.500.000 11-19 5.000-19.000 6-12 15-35 2-4 0,5 41-70 6-7 0,5-1,5 200.000450.000 A

LACTANTES 30-45 3.100.000 4.500.000 10-14 6.000-15.000 0-10 20-45 1-7 0-2 25-60 3-7 0,5-1 200.000-400.000 A

NIOS MAYORES 35-44 3.800.000 5.300.000 11-13,5 7.000-13.000 0-5 35-60 1-5 0-1 25-50 1-6 1-6 150.000-400.000 A

REACTANTES DE FASE AGUDA Los Reactantes de Fase Aguda (RFA) cuya concentracin aumenta (RFA +) o disminuye (RFA-) al menos un 25% durante los procesos inflamatorios; es importante recordar que el hgado es la principal, pero no la nica fuente de protenas de fase aguda (sntesis extra heptica poco importante). Los RFA realizan importantes acciones en la mediacin de la reaccin inflamatoria, activacin del Sistema del Complemento, Inhibicin de proteasas, Opsonizacin, Depuracin de restos celulares y molculas liberadas en el foco inflamatorio, as como ejerce una accin inmunomoduladora con actividad antioxidante. Por otra parte, los RFA tienen utilidad en detectar la presencia de dao y la respuesta inflamatoria, as como evaluar la magnitud de la respuesta y la monitorizacin del tratamiento. Un RFA IDEAL es aquel que depende solo de la reaccin inflamatoria, independiente de la etiologa, debe tener cintica rpida y aumentar significativamente en reacciones inflamatorias moderadas, no solo frente a cuadros severos. Protena C reactiva (PCR)

Debe su nombre a su capacidad de interactuar con el polisacrido C de la capsula del neumococo y corresponde a una holoproteina pentamrica de subunidades idnticas organizadas (discos pentagonales simples o pentraxina). Niveles elevados de PCR en suero o plasma los encontramos como respuesta no especifica a infecciones o inflamaciones no infecciosas. Se puede decir que es el marcador ms til como RFA, constituyendo un mtodo directo para la estimacin de la respuesta inflamatoria aguda. Valores: <10 mg/l ausencia de inflamacin; 10-50: inflamacin ligera; > 50: inflamacin grave Caractersticas: Destaca su buena correlacin con variaciones en la actividad y la secuencia temporal, as como su alta especificidad, constituyndose en un marcador con alto valor predictivo negativo, en donde valores normales descartan, por lo tanto, es una herramienta de gran utilidad diagnstica, control y pronstico. Funciones: Produce una variedad de acciones entre las que destacan la induccin de la actividad fagoctica, elevndose en la inflamacin y necrosis tisular, siendo adems importante en la evaluacin de estrs, traumatismo, infeccin e inflamacin. Utilidad: Dentro de su utilidad esta el uso como indicador precoz de inflamacin (incluso antes que la clnica, ya que se eleva a las 3 horas), en post-ciruga (complicacin quirrgica: nivel elevado tras 2 das), en fase precoz postransplante (rechazo), buena respuesta al tratamiento antibitico (disminucin), marcador de riesgo cardiovascular (cardiopata isqumica), necrosis tisular (apendicitis, colecistitis) y en asociacin con elevacin en las primeras horas o das de alfa-1 glucoprotena en neonatos sugiere infeccin bacteriana.

Procalcitonina (PCT) Corresponde a la pro hormona de la calcitonina, la cual se eleva rpidamente infecciones bacterianas grave sin aumento de la hormona Calcitonina. En humanos sanos los valores sricos de PCT son prcticamente indetectables: menores a 0.05 ng/ml ascendiendo muy rpidamente hasta 1000 ng/ml en fiebre sptica o shock sptico. Las endotoxinas bacterianas y las citoquinas pro inflamatorias son fuertes estimulantes para la produccin de la PCT, as como el TNF-a y la IL 2. Es importante destacar que la PCT se produce en las clulas C de la tiroides y que frente a infecciones severas y sepsis es posible detectarla en sangre y en rganos diferentes de los que

se encuentra originalmente; as mismo, se cree que la procedencia de la PCT en condiciones de infecciones graves es de clulas como los macrfagos y monocitos especialmente de origen heptico as como de clulas neurocrinas del pulmn y del intestino. Funcin: su funcin biolgica certera es an desconocida, pero con gran relacin experimental como mediador en la infeccin bacteriana. Valores: PCT en el plasma <0.5 ng/ml (origen bacteriano poco probable); PCT >2 ng/ml (alta posibilidad de fiebre de origen bacteriano); PCT entre 0.5 y 2 ng/ml (no excluir infeccin sistmica); siempre medir PCT nuevamente dentro 6-24 horas. Utilidad y Diferenciacin: Debe determinarse frente a la posibilidad de infeccin con fiebre de origen bacteriano y no viral, es ah su importancia y diferencia con otros marcadores como la PCR que tiene una cintica ms lenta, donde la PCT comienza a elevarse 2-3 horas despus del estimulo inicial, mientras que la PCR lo hace alrededor de las 12 horas cuando la PCT ya alcanzo su mximo valor de concentracin, por lo que la deteccin de la infeccin con la PCR es ms tarda y no sirve para el diagnostico de agudos. Otra diferencia importante es que el hgado continua sintetizando PCR durante varios das, incluso cuando el estimulo inflamatorio ha desaparecido, de forma que los valores plasmticos pueden pueden permanecer elevados aun cuando la infeccin est remitiendo, adems la PCR tambin es inducida por estados inflamatorios no infecciosos o vricas, de manera que aunque es ms sensible que la PCT tambin es menos especfica para infecciones bacterianas, donde destaca su real utilidad (PCT).

OTROS REACTANTES DE FASE AGUDA Alfa-1 glucoprotena cida; Ceruloplasmina; Alfa-1 antitripsina; Alfa-2 macroglobulina; Haptoglobina; Ferritina; Transferrina; Complejo Elastasa-Alfa1 antiproteasa; Prealbmina y la Albmina.

Conclusin: Los RFA son de gran ayuda en el diagnstico, respuesta al tratamiento y pronstico de la enfermedad, pero siempre interpretados a travs de la historia clnica.

INMUNOFLUORESCENCIA:

Es un procedimiento especializado que consiste en una reaccin Ag-Ac hecha visible por la incorporacin de un colorante fluorescente al anticuerpo, y una vez hecha la reaccin, se expone a la luz ultravioleta emitida por el microscopio para ser evidenciado por el fenmeno de fluorescencia. Ventajas: Dentro de las ventajas tenemos la mayor rapidez de los resultados; los cuales son reproducibles y permite tinciones dobles; adems, los cultivos y pruebas biolgicas pueden ser omitidos con la gran ventaja que pequeas cantidades de organismos o Ags se encuentran fcilmente, aun en muestras muy contaminadas sin necesidad de esterilidad y por otra parte produce diagnsticos correcto, an con organismos no viables para cultivo. Desventajas: Costo de equipos y reactivos; personal especializado y entrenado; sin resultados 100% especficos y ni reacciones permanentes, por lo tanto, es necesario fotografiar las reacciones que positivizan. INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA. Se realiza sobre un porta, donde depositamos una muestra en la que buscamos la presencia de un determinado Ag, luego aadimos un suero especfico del Ag problema marcado con Isotiocinato de fluorescena (conjugado), y si el Ag problema se encuentra presente en la muestra, se une el conjugado; en caso contrario el conjugado se elimina con un lavado del porta. Utilidad: es til para hallar Ag directamente en la muestra, usando Ac de gran especificidad para el Ag que se est estudiando; Otra aplicacin que tiene es la determinacin de Linfocitos y sus subpoblaciones, para lo cual la mayora de las veces se usan Ac monoclonales marcados. Algunos usos: VSR; Adenovirus; Influenza; Coqueluche INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA Se realiza sobre un porta, el cual lleva pegado un Ag conocido, aadimos el suero problema. Si ste contiene Ac especficos, se unen al Ag. los Ac del suero no especficos del Ag del porta se eliminan mediante un lavado; Posteriormente se aade un suero anti-inmunoglobulina humana marcada con isotiocianato de fluorescena (conjugado); luego el conjugado se une a los Acs especficos o se elimina mediante lavado, ya que haba Ac especficos en el suero. Utilidad: es til para hallar Ac especficos contra un determinado microorganismo. Este puede ser del tipo M, G y A, y se evidencia mediante un anti- Ac marcado con la sustancia fluorescente. Los diagnsticos de enfermedades se pueden realizar con 1 muestra cuando se busca la presencia de IgM (fase aguda), y con 2 muestras seriadas para determinar el aumento o la disminucin de la IgG. Algunos usos: Influenza; Parainfluenza; Mycoplasma Pneumoniae y Treponema pallidum.