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CANULACIN DUODENAL E ILEAL PARA ESTUDIOS DE DIGESTIN EN CERDOS

DUODENAL AND ILEAL CANNULATION FOR DIGESTION STUDIES IN PIGS


Miguel Cervantes-Ramrez, Vctor Gonzlez-Vizcarra, Salvador Rodrguez-Rub, Julio S. Gonzlez-Monreal y Leopoldo Flores-Aguirre Instituto de Ciencias Agrcolas, Universidad Autnoma de Baja California. Obregn y Julin Carrillo s/n. Mexicali, B. C. (miguel.cervantes@sia.mxl.uabc.mx)

RESUMEN
La evaluacin de la calidad de las fuentes protenicas para los cerdos incluye la determinacin de la digestibilidad de los aminocidos y la secrecin y actividad de las proteasas pancreticas, para lo cual se requiere de muestras de digesta duodenal e ileal. En este trabajo se describe el procedimiento quirrgico para la canulacin en duodeno proximal e leon terminal de cerdas en crecimiento (35 kg peso vivo promedio). La recuperacin de los animales a la ciruga fue de 10 d, pero una cerda muri a los 30 d post-ciruga a pesar de haber manifestado una recuperacin completa. Las cinco cerdas restantes mantuvieron un flujo normal de digesta intestinal a travs de ambas cnulas por periodos de hasta 10 meses. En general, el procedimiento y la coleccin de contenido duodenal e ileal es simple y ofrece la oportunidad de determinar simultneamente, en el mismo cerdo, la digestibilidad ileal de aminocidos y la secrecin, as como la actividad de las proteasas pancreticas. Palabras clave: Canulacin, cerdos, duodeno, leon.

ABSTRACT
The quality evaluation of protein sources for pigs includes the determination of amino acid digestibility as well as the secretion and activity of pancreatic proteases, which require to obtain duodenal and ileal digesta samples. In this report, a procedure for cannulating growing pigs (35 kg average liveweight) at proximal duodenum and terminal ileum is described. The recovery of pigs from the surgery took around 10 d, but a gilt died 30 d after the surgery, even though she appeared to be completely recovered. The remaining five pigs maintained a normal and easy flow through both cannulas, for up to 10 months. In general, both the surgical and sampling procedure are simple and offer an opportunity for simultaneous determination, of the ileal amino acid digestibility and the secretion-activity of pancreatic proteases, in the same pig. Key words: Cannulation, pigs, duodenum, ileum.

INTRODUCTION

INTRODUCCIN a digestibilidad de los aminocidos es uno de los factores ms importantes para calificar la calidad de la dieta y la respuesta productiva de los animales; la cual desde hace aos se ha determinado en cerdos a travs del muestreo del contenido ileal (Sauer et al., 1977; Jorgensen et al., 1984). La digestibilidad ileal, en lugar de la total, es preferida por varios investigadores debido a que la digestin y la absorcin total de protena cruda (PC) y aminocidos es prcticamente completa en intestino delgado, mientras que la digestin y absorcin en intestino grueso es muy pequea y sin valor para el cerdo (Just et al., 1981). El nivel de protena en la dieta puede efectar la digestibilidad aparente de PC y aminocidos en cerdos (Kephart y Sherrit, 1990; Fan et al., 1994; Cervantes et al., 1995). Estudios con ratas (Temler et al., 1984; Liddle et al., 1986) indican que la secrecin y actividad de las enzimas pancreticas es dependiente del tipo y concentracin del
Recibido: Marzo, 1998. Aprobado: Octubre, 1999. Publicado como NOTA en Agrociencia 34: 135-139. 2000. 135

he amino acid digestibility is one of the most important factors involved in the quality of the diet and the productive response of the animals, which has been determined through the sampling of the ileal content since some years ago (Sauer et al., 1977; Jorgensen et al., 1984). Ileal, rather than total digestibility, is preferred by several researchers because both the digestion and absorption of crude protein (CP) and amino acids is practically complete in the small intestine, whereas the digestion and absorption in the large intestine is very small and useless for the pig (Just et al., 1981). The dietary protein level may affect the apparent digestibility of CP and amino acids in pigs (Kephart and Sherrit, 1990; Fan et al., 1994; Cervantes et al., 1995). Studies conducted with rats (Temler et al., 1984; Liddle et al., 1986) indicate that the secretion and activity of pancreatic enzymes depend on both type and concentration of dietary substrate. These studies were conducted with animals which were killed after they consumed their experimental diets; however, only one ileal digesta sample can be collected under these conditions. This implies: a) the need to use a large number of animals in each study, and b) the animals cannot be used as their own controls (Nyachoti et al., 1997). Thus, it would be important to

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sustrato en la dieta. Estos estudios se efectuaron en animales que fueron sacrificados despus de haber consumido sus dietas experimentales respectivas; sin embargo, en estas condiciones slo se puede obtener una muestra de digesta intestinal por cada animal sacrificado, lo cual implica: a) la necesidad de utilizar un gran nmero de animales en cada estudio, y b) los animales no pueden ser usados como sus propios testigos (Nyachoti et al., 1997). Por lo tanto, sera importante disponer de animales a los que se les pudiera extraer simultneamente muestras de digesta duodenal e ileal, en repetidas ocasiones antes y despus de haber ingerido el alimento. En la literatura consultada no se encontr informe alguno en el que se hubieran utilizado animales a los que se les tomaran muestras de digesta intestinal en repetidas ocasiones por lapsos prolongados de tiempo. El objetivo de este trabajo consiste en describir la implantacin de cnulas en duodeno e leon de cerdos para utilizarlos en evaluaciones de digestibilidad ileal de aminocidos, y secrecin y actividad de las enzimas pancreticas. MATERIALES Y MTODOS
Se utilizaron seis cerdas cruzadas (Yorkshire x Landrace x Hampshire) con 35 kg peso vivo promedio, de la Granja Experimental Porcina de la Universidad Autnoma de Baja California. Las cnulas se construyeron en forma de T con tubo de plstico Tygon (Fisher Sci. Co., Pittsburgh, PE) de 11 mm de dimetro interno y 3 mm grosor de la pared; la longitud de las partes vertical y horizontal de la T fueron de 10 cm, las cuales se soldaron con ciclohexanona (Spectrum Chemical Mfg. Co., Gardena, CA). Las cerdas fueron privadas de alimento por 24 h previo a la ciruga, pero tuvieron agua a libre acceso. Se aplic por va intramuscular 1 mL de tranquilizante Sural (Chinoin Productos Farmacuticos, Mxico, D. F.) por cada 20 kg de peso vivo de los animales; 15 a 20 min despus se aplicaron, por va intraperitoneal, 1.5 mL de anestsico Metomidil (Chinoin Productos Farmacuticos, Mxico, D. F.) por cada 20 kg de peso vivo. Se prepar la regin quirrgica sobre el flanco izquierdo del animal, la cual comprenda de la ltima costilla a la ltima vrtebra lumbar y de la lnea media dorsal a la lnea media ventral; se lav con agua y jabn, luego se depil y desinfect con una solucin de yodo a 10 %. En el centro de esta rea se hizo una incisin primaria a travs de la pared abdominal de aproximadamente10 cm de longitud, iniciando 6 a 7 cm por debajo de la lnea dorsal, con sentido vertical y en direccin hacia la lnea ventral, hasta alcanzar la cavidad abdominal. El peritoneo se sujet con pinzas hemostticas, se le hizo un corte pequeo con hoja de bistur, luego se cort cuidadosamente con tijeras evitando rasgaduras del mismo. Al estar expuesto parte del tubo gastrointestinal se localiz al ciego, 2 a 3 cm posterior a la incisin primaria, se exterioriz y se identific el ligamento ileo-cecal; luego, sujetando unos 4 5 cm del segmento ileal ms distal, se regres el ciego al interior de la cavidad abdominal y enseguida se exterioriz un segmento cercano a 10 cm del leon terminal, distante 15 cm de la

have animals that could provide, simultaneously, duodenal and ileal digesta samples, at several occasions, before and after having consumed their feed. In the available literature there was not any report regarding the use of live animals for repeated collection of intestinal digesta, during large periods of time. The objective of this work is to describe the implantation of both duodenal and ileal cannulae in pigs used for conducting studies to determine the ileal amino acid digestibility, as well as the secretion and activity of pancreatic enzymes. MATERIALS AND METHODS
Six crossbred (Yorkshire-Landrace-Hampshire) gilts (35 kg average body weight-BW), from the Swine Experimental Farm of the Universidad Autnoma of Baja California, were used. The T type cannulae were constructed with Tygon plastic (Fisher Sci. Co., Pittsburgh, PE), measuring 11 mm inside diameter and 3 mm wall thickness. The length of both, the vertical (barrel) and horizontal (flange) parts of the T cannula was 10 cm; cyclohexanone (Spectrum Chemical Mfg. Co., Gardena, Calif.) was used to weld both parts each to the other. The gilts were fasted for 24 h before the surgery, but water was always available for them. One mL of the tranquilizer Sural (Chinoin Productos Farmacuticos, Mxico, D. F.) per 20 kg BW was intramuscularly injected; 15 to 20 min after tranquilization, 1.5 mL of anesthesia (Metomidil, Chinoin Productos Farmacuticos, Mxico, D. F.), per 20 kg BW, was intraperitoneally injected. The surgical area extending from the last rib to the last lumbar vertebrae, and from the dorsal to the ventral midline was prepared on the left flank of the animal. This area was scrubbed, cleaned with soap and water, shaved and disinfected with a 10 % iodine solution. A transversal incision, through the abdominal wall, was performed at the center of the surgical area, beginning 6 to 7 cm below the dorsal midline and continuing ventrally for 10 cm. The peritoneum was then clasped with haemostats, a small incision was made in it using a scalpel, and afterwards it was cut carefully with scissors. After exposing part of the gastrointestinal tract the caecum was found 2 to 3 cm behind the primary incision. The caecum was exteriorized and the ileo-caecal valve was identified. Then, holding the last 4 to 5 cm of the terminal ileum, the caecum was returned inside the abdominal cavity, and a 10 cm segment of ileum, about 15 cm away from the ileo-caecal valve, was isolated. A purse string structure of absorbable suture # 2, the size of the external diameter of the cannula barrel, was incorporated into the submucosa, in the antimesenteric border of the ileum. A longitudinal incision through the intestinal wall (around 1 cm) was made in the center of the purse string. One end of the cannula flange was introduced into the cannula barrel, and the other end of the flange was carefully inserted into the intestinal lumen; then, the end inside the barrel was carefully pushed out of it with the help of haemostats, and the pursestring suture was firmly secured around the cannula barrel. Both sides of the cannula flange were tied to the intestinal wall with two single transversal points of suture.

CERVANTES ET AL.: CANULACIN DUODENAL E ILEAL EN CERDOS unin ileo-cecal. En el centro de ste, se coloc una jareta (pliegue en circunferencia) con sutura absorbible (Vicryl, Ethicon, Johnson & Johnson, Brasil) calibre 2-0, del tamao del dimetro externo del cuerpo de la cnula, en la superficie opuesta al mesenterio del leon. En el centro de la jareta se hizo una incisin longitudinal a travs de la pared intestinal, de aproximadamente 1 cm de longitud. Con mucho cuidado y con la ayuda de pinzas hemostticas de puntas alargadas, se introdujo un ala de la cnula al lumen ileal; enseguida, se introdujo la otra ala con el auxilio de las pinzas. Ambas alas se fijaron a la pared intestinal con dos puntos transversales simples de sutura. Posteriormente, se cerr la jareta obligando al intestino a ceirse al cuerpo de la cnula. La cnula se fij mediante un pequeo orificio hecho en la pared abdominal. Se hizo una pequea incisin a travs de la pared abdominal, de unos 2 cm posterior a la incisin primaria, que permitiera apenas el paso del cuerpo de la cnula y que, una vez fijada en su lugar definitivo, mantuviera presin sobre el mismo, evitando el uso de sutura en piel, peritoneo y capas musculares subcutneas. Se pas el cuerpo de la cnula a travs del orificio, cuidando no girarla dentro del intestino para evitar una posible torsin intestinal; el extremo ileal proximal permaneci cranealmente, mientras que el extremo terminal permaneci caudalmente. Se coloc un tapn de hule en el cuerpo de la cnula para evitar el flujo de contenido ileal hacia el exterior; el tapn se fij a la cnula con dos agujas hipodrmicas calibre 16 de 1.9 cm de longitud, atravesando la pared de la cnula y el tapn de hule. En el mismo tapn, en posicin longitudinal al mismo, se coloc otra aguja igual que funcionara como asa para facilitar el destape de la cnula al momento de cada muestreo. Posteriormente, se procedi a localizar el sitio de implantacin de la cnula duodenal. Primero se visualiz al yeyuno a travs de la incisin original y se le desplaz ventralmente para exponer al pncreas, el cual se localiza por debajo del polo anterior del rin izquierdo. Debajo del pncreas se localiza el ligamento duodeno-clico, el cual une al duodeno medio, colon y pncreas; se exterioriz un segmento de duodeno (unos 10 cm), aproximadamente 15 a 20 cm caudal a la desembocadura del ltimo conducto pancretico. En este sitio se hizo la implantacin de la cnula, siguiendo el mismo procedimiento descrito para la implantacin de la cnula ileal. La cnula duodenal se extrajo a travs de un orificio localizado a 2 cm craneal a la incisin original, de la misma manera que se hizo para la cnula ileal. Se coloc y se fij el tapn de hule en la cnula duodenal igual como se hizo con la cnula ileal. La incisin original se cerr con sutura absorbible calibre 1; el peritoneo, las capas musculares y la grasa subcutnea se cerraron con candados continuos, mientras que la piel se cerr de manera interrumpida o discontinua. Despus de cerrar cada capa se hizo aplicacin local de penicilina (Penestrex, Laboratorios Syntex, Mxico, D. F.) y de cicatrizante (Topazone, Laboratorios Columbia, Mxico, D. F.) a lo largo de la incisin original y los orificios por los que se extrajeron las cnulas. Inmediatamente despus de la ciruga se aplicaron a cada cerda 22 000 UI de penicilina por kg de peso vivo y 2 cm de analgsico (Syngesin, Laboratorios Syntex, Mxico, D. F.); esto se repiti por 5 d consecutivos. Durante la recuperacin, la cual dur de 10 a 12 d, las cerdas se mantuvieron aisladas en corraletas de 1.2 x 2.0 m, con

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The cannula was fixed through a small hole made in the abdominal wall. A small incision was made through the abdominal wall, around 2 cm back from the primary incision, which barely allowed the passing of the cannula barrel; this, prevented the use of suture in skin, peritoneum, and muscle layers. The barrel was forced to pass through the orifice; care was taken to prevent the rotating of the flange inside the lumen, avoiding a possible intestinal torsion; the proximal ileum end resided cranially, whereas the terminal end resided caudally. A rubber stopper was placed into the external end of the barrel to prevent the out-flow of digesta; the stopper was fixed to the cannula by transverselly penetrating two 1.9 cm long syringe needles (# 16) through them. Another needle was longitudinally introduced into the stopper which functioned as a handle to facilitate the removing of the stopper from the cannula, every time samples were collected. Immediately after that, we proceeded to locate the implantation site of the duodenal cannula. First, the jejunum was observed through the original incision and moved ventrally in order to expose the pancreas, which was found just below the anterior pole of the left kidney. Then, the duodeno-colic ligament, which joints the mid-duodenum, colon, and pancreas, was located below the pancreas. A 10 cm segment of this part of the duodenum, about 15 to 20 cm back from the last pancreatic duct, was exteriorized. The cannula was placed in this site following the same procedure described for the ileal cannulation. The duodenal cannula was exteriorized through a hole made across the abdominal wall, located 2 cm cranial from the original incision, the same way it was done for the ileal cannula. A rubber stopper was placed into the barrel the same way it was done to the ileal cannula. The original incision was closed with absorbable suture # 1; peritoneum, muscle layers, and subcutaneous fat were closed in a continuous lockstitch, while the skin was closed in a discontinuous manner. Penicillin (Penestrex, Laboratorios Syntex, Mxico, D. F.) was locally applied after closing each layer (skin, muscle, fat) and topazone (Laboratorios Columbia, Mxico, D. F.) was applied along the wound and orifices through which the cannulae were exteriorized. Penicillin (22 000 IU kg-1 BW) and an analgesic (Syngesin, Laboratorios Syntex, Mxico, D. F.) were intramuscularly injected to each gilt immediately after surgery, and during the following five days. During convalescence, which lasted 10 to 12 d, the gilts were individually housed in concrete-floor 1.2 x 2.0 m pens. Water was always available, but feed was offered again 24 h after the surgery. After recovering from the surgery, the gilts were fed diets with different nutrient characteristics in three digestion studies; that is, typical or semipurified diets, with important variations in fiber (0 to 6 %) and crude protein (0 to 20 %) content.

RESULTS AND DISCUSSION The cannulation of six growing gilts in duodenum and ileum resulted satisfactory. All gilts recovered completely about 10 d after the surgery as evidenced by the lack of inflammation in the surgical area and return to presurgery dietary intake. The gilts were individually housed to prevent biting of the cannulae. After the surgery all gilts were checked at least two times daily for loss of the cannulae

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piso de cemento. El agua estuvo disponible todo el tiempo, mientras que el alimento se ofreci 24 h despus de la ciruga. Despus de la recuperacin, las cerdas fueron alimentadas con dietas de caractersticas diversas, tpicas y semipurificadas, con variaciones importantes en el contenido de fibra cruda (0 a 6 %), y en el contenido de protena cruda (0 a 20 %) en tres estudios de digestin.

RESULTADOS Y DISCUSIN La instalacin de cnulas en duodeno e leon de seis cerdas en crecimiento result satisfactoria. Todas las cerdas se recuperaron completamente 10 das despus de la ciruga, lo cual se evidenci por la recuperacin del consumo normal de alimento y la falta de inflamacin alrededor del sitio de abordaje quirrgico y los orificios por los que se extrajo el cuerpo de cada cnula. Las cerdas se mantuvieron en jaulas individuales para evitar el mordisqueo de las cnulas entre ellas mismas. Despus de la ciruga las cerdas se revisaron cuidadosamente, al menos dos veces diariamente, para prevenir la prdida de la cnulas y corregir el posible escurrimiento de digesta intestinal entre la parte externa de la cnula y la piel del animal. Una de las cerdas muri aproximadamente 30 d despus de la ciruga por aparente peritonitis, a pesar de haber mostrado signos de recuperacin total a los 10 d posteriores a la ciruga. La implantacin de cnulas en leon de cerdos generalmente se hace en el flanco derecho del animal. La primera porcin del duodeno (primeros 15 cm posteriores al ploro) se localiza en el lado derecho de la cavidad abdominal del cerdo, pero al final de esta porcin, el duodeno atraviesa el pliegue duodeno-clico dirigindose hacia el lado izquierdo de la cavidad abdominal. As, la exteriorizacin del duodeno medio, sitio ideal para la implantacin de la cnula duodenal, es posible solamente a travs del flanco izquierdo del cerdo. Por otra parte, el ciego, el cual es el punto de referencia para la localizacin del leon terminal, se encuentra sobre la lnea media ventral de la cavidad abdominal del cerdo, y puede desplazarse a cualquier lado (izquierdo, derecho) de la cavidad abdominal del cerdo. Por tanto, la exteriorizacin de ambas cnulas (Figura 1), en el mismo cerdo, puede hacerse por el lado izquierdo de la cavidad abdominal del animal para evitar doble abordaje quirrgico (pared abdominal izquierda y derecha). La utilidad de la cnula ileal en la determinacin de la digestibilidad de aminocidos ha sido ampliamente demostrada (Easter y Tanksley, 1973; Fan et al., 1994). Igualmente se ha evidenciado la utilidad de canular cerdas lactantes en estmago para provocar la sobrealimentacin de las mismas en las etapas cuando se encuentran en balance negativo de energa (Pluske et al., 1995). Sin embargo, no se encontr en la literatura consultada ningn informe relacionado con la canulacin duodenal o

and for spillage of intestinal digesta between the external part of the cannula and the skin of the animal. One gilt died approximately 30 d after surgery, even though she had shown signs of complete recovery about 10 d after surgery. The ileal cannulation of pigs is usually performed on the right flank of the animal. The first segment of duodenum (first 15 cm away from the pylorus) is located on the right side of the abdominal cavity of the pig, but at the end of this segment, the duodenum moves to the right side of the abdominal cavity, passing through the duodeno-colic ligament. Thus, the exteriorization of midduodenum, ideal site for the duodenal cannulation, can be done only through the left flank of the animal. On the other hand, the caecum, which is the reference point during the ileal cannulation, is located over the ventral midline of the abdominal cavity. Therefore, the exteriorization of both cannulae (Figure 1) is done through the right flank of the pig to avoid performing two major incisions on the abdominal wall (left and right sides). The value of the ileal cannulae in determining the digestibility of amino acids has been thoroughly demonstrated (Easter and Tanksley, 1973; Fan et al., 1994). Also, it has been established the convenience of the stomach cannulation to provoke over feeding of lactating gilt when they are in negative energy balance (Pluske et al., 1995). However, no reports were found in the available literature regarding the cannulation in duodenum or in both the duodenum and ileum of pigs. Several literature reports show the effect of various dietary factors (i.e., type of ingredient, protein level, etc.), age and condition of the animal (i.e., sucking, weaning, etc.) which can affect the ileal digestibility of amino acids and other nutrients. Also, a number of proteolytic enzymes of microbial origin, that apparently can improve the protein digestibility

Figura 1. Ubicacin de las cnulas ileal y duodenal en el flanco izquierdo de la pared abdominal del cerdo. Figure 1. Localization of the duodenal and ileal cannulae on the left flank of the pig abdominal wall.

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duodeno-ileal de cerdos. Varios informes en la literatura muestran el efecto de diversos factores de la dieta (i.e., tipo de ingrediente, nivel de protena, etc.), edad y condicin del animal (i.e., lechones, destete, etc.) que pueden afectar la digestibilidad ileal de aminocidos y de otros nutrientes. Asimismo, recientemente se ha empezado a ofrecer en el mercado una serie de enzimas proteolticas de origen microbial que aparentemente pueden mejorar la digestibilidad de la protena de la dieta. Sin embargo, en la literatura disponible no se encontr informacin relacionada con la forma de accin de estas enzimas y su impacto en la digestibilidad ileal de aminocidos; tampoco se encontr informacin que ayudara a explicar el efecto del nivel de protena y tipo de ingrediente de la dieta sobre la digestibilidad ileal de aminocidos en cerdos. Este procedimiento ofrece la oportunidad de analizar esas variables y correlacionar la secrecin y actividad de las enzimas pancreticas con la digestibilidad ileal de aminocidos; adems, ofrece la oportunidad de conocer los cambios que ocurren con la capacidad de produccin y secrecin de enzimas pancreticas con respecto a la edad al destete de los cerdos. CONCLUSIONES La canulacin en duodeno e leon de cerdos es un procedimiento simple que ofrece la oportunidad para determinar simultneamente la digestibilidad ileal de aminocidos y la actividad de las proteasas pancreticas. Este procedimiento tambin permite analizar los cambios que ocurren en la funcin digestiva del cerdo a diferentes tiempos despus de la alimentacin. La permanencia de las cnulas en sus sitios de implantacin es satisfactoria y permite efectuar estudios prolongados con animales lactantes y gestantes, adems de los estudios cortos con animales de destete o en crecimiento-finalizacin. LITERATURA CITADA
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in pigs, are now available in the market. But, in the available literature, there is not any report showing the mode of action of these enzymes and their impact on the ileal amino acid digestibility in pigs; no information was found with respect to the effect of the dietary protein level and type of ingredient on the ileal amino acid digestibility either. This procedure offers the opportunity to analyze these variables and correlate the secretion and activity of pancreatic enzymes to the ileal amino acid digestibility; also, it offers the opportunity to know the changes in production and secretion of pancreatic enzymes that occur at different ages of the pig. CONCLUSIONS The cannulation of pigs in duodenum and ileum is a simple procedure which offers the opportunity to determine, at the same time, the ileal amino acid digestibility and the activity of pancreatic proteases. This procedure is also useful to analyze the changes that occur in the digestive function of the pig at different times after feeding. The cannulae remained satisfactorily at their implantation sites; this allows the conduction of long lasting studies with gestating and lactating animals, besides short studies with weaning or growing-finishing animals.
End of the English version

Just, A., H. Jorgensen, and J. A. Fernandez. 1981. The digestive capacity of the caecum-colon and the value of the nitrogen absorbed from the hindgut for protein synthesis in pigs. Brit. J. Nutr. 46: 209-219. Kephart, K. B., and G. W. Sherrit. 1990. Performance and nutrient balance in growing swine fed low-protein diets supplemented with amino acids and potassium. J. Anim. Sci. 68: 1999-2008. Liddle, A. R., G. M. Green, C. K. Conrad, and J. A. Williams. 1986. Proteins but not amino acids, carbohydrates, or fats stimulate cholecystokinin secretion in the rat. Am. J. Physiol. 251(Gastrointest. Liver Physiol. 14): G243-G248. Nyachoti, C. M., C. F. M. de Lange, and H. Schulze. 1997. Estimating endogenous amino acid flows at the terminal ileum and true ileal amino acid digestibilities in feedstuffs for growing pigs using the homoargninine method. J. Anim. Sci. 75: 3206-3213. Pluske, J. R., I. H. Williams, A. C. Cegielski, and F. X. Aherne. 1995. Stomach cannulation of pregnant gilts for nutrition studies during lactation. Can. J. Anim. Sci. 75: 497-500. Sauer, W. C., S. C. Strothers, and G. D. Phillips. 1977. Apparent availabilities of amino acids in corn, wheat and barley for growing pigs. Can. J. Anim. Sci. 57: 775-785. Temler, R. S., CH. A. Dormond, E. Simon, B. Morel, and C. Mettraux. 1984. Response of pancreatic proteases to dietary proteins, their hydrolysates and soybean trypsin inhibitor J. Nutr. 114: 270-278.

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