UNIVERSIDADE PARANAENSE UNIPAR

RECONHECIDA PELA PORTARIA MEC N 1580, DE 09/11/93 DOU 10/11/93. MANTENEDORA ASSOCIAO PARANAENSE DE ENSINO E CULTURA APEC

Determinao de solo por espectrofotometria UV-VIS.

Curso: Qumica 4 Ano. Disciplina: Anlise Instrumental. Acadmicas: Regiane da Silva Gomes Alaine de Moura Lino Jos Luiz Banhara Jnior Professor: Jos Gaspar Ferrarezi. RA: 33890. RA: 34229. RA: 33875.

Abril 2007
INTRODUO A espectrofotometria o mtodo de anlise ptico mais usado nas investigaes biolgicas e fisico-qumicas. O espectrofotmetro um instrumento que permite comparar a radiao absorvida ou transmitida por uma soluo que contm uma quantidade desconhecida de soluto, e uma quantidade conhecida da mesma substncia. Todas as substncias podem absorver energia radiante, mesmo o vidro que parece completamente transparente absorve comprimentos de ondas que pertencem ao espectro visvel. A gua absorve fortemente na regio do infravermelho. A absoro das radiaes ultravioletas, visveis e infravermelhas dependem das estruturas das molculas, e caracterstica para cada substncia qumica. Quando a luz atravessa uma substncia, parte da energia absorvida: a energia radiante no pode produzir nenhum efeito sem ser absorvida. A cor das substncias se deve a absoro de certos comprimentos de ondas da luz branca que incide sobre elas, deixando transmitir aos nossos olhos apenas aqueles comprimentos de ondas no absorvidos. O instrumento usado na espectroscopia UV/VIS chamado de espectrofotmetro. Para se obter informao sobre a absoro de uma amostra, ela inserida no caminho ptico do aparelho. Ento, luz UV e/ou visvel em certo comprimento de onda (ou uma faixa de comprimentos de ondas) passada pela amostra. O espectrofotmetro mede o quanto de luz foi absorvida pela amostra. A intensidade da luz antes de passar pela amostra simbolizada por I0, e a intensidade da luz depois de passar pela amostra simbolizada por I. A transmitncia da amostra definida pela razo (I / I0), a qual normalmente expressa em porcentagem de transmitncia (%T). A partir dessa informao, a absorbncia de ambos determinada para esse certo comprimento de onda ou como uma funo de uma faixa de comprimentos de onda. Os espectrofotmetros mais sofisticados normalmente fazem isso automaticamente. Existem dois tipos de espectrofotmetros: de feixe simples e de feixe duplo. Os espectrofotmetros so instrumentos de anlise que permitem: Selecionar o comprimento de onda (lmbda) da radiao adequado anlise de um determinado componente; Medir a intensidade I do feixe emergente que corresponde a um determinado feixe incidente I0, convertendo o sinal recebido no detector em medida de Absorbncia para o comprimento de onda da anlise. Determinar a concentrao de uma espcie em soluo a partir do grfico da variao de absorbncia (ou transmitncia) em funo da concentrao de vrias solues-padro. A preciso dos comprimentos de onda para anlise chamada de bandas de passagem, mais comum na ordem de 10nm. O espectro da anlise mais comum de 360nm a 1000nm para a faixa visvel. Apesar de, as amostras poderem ser slidas (ou mesmo gasosas), elas usualmente so lquidas. Uma cela transparente (ou seja, que no absorve radiao na faixa de comprimentos de onda usada), comumente chamada de cubeta, preenchida com a amostra lquida e inserida no espectrofotmetro. O caminho ptico L pela a amostra ento a largura da cubeta. Espectrofotmetros mais simples (econmicos) usam cubetas com a forma cilndrica (tubos de ensaio), porm os mais sofisticados usam cubetas retangulares, geralmente com uma largura de 1 cm. Para espectroscopia apenas no visvel, simples cubetas de vidro podem ser usadas, porm a espectroscopia no ultravioleta requer cubetas especiais feitas de um material que (ao contrrio do vidro) no absorva luz UV, como o quartzo. Um espectro ultravioleta-visvel essencialmente 2

um grfico (ou plotagem) da absorbncia versus o comprimento de onda na faixa do ultravioleta e/ou visvel. Tal espectro pode facilmente ser produzido pelos espectrofotmetros mais sofisticados. O comprimento de onda freqentemente representado pelo smbolo . Da mesma forma, para uma dada substncia, um grfico psilon; vs. pode ser feito ou usado se um j est disponvel. Para uma dada substncia, o comprimento de onda no qual ocorre o mximo de absoro chamado de max (lmbda mximo). OBJETIVO Determinar o teor de fsforo disponvel em amostra de solos por espectrofotometria UVVis. MATERIAIS UTILIZADOS - Bales volumtricos de 50mL; - Tubos de ensaio de plstico com tampa; - Conta-gotas; - Pipeta de 5mL; - gua destilada; - Espectrofotmetro; - Cubetas; - Soluo de molibdato; - cido ascrbico; - Soluo de MEHLICH; - Amostra problema. PROCEDIMENTO A princpio foram preparadas cinco amostras de solos diferentes, contendo fsforo. Secou-se 5g de cada amostra de solo em estufa a 60C, durante 3 horas. Depois de seco, esfriouse, peneirou-se e adicionou-se 50 ml da soluo de MEHLICH e deixou-se em repouso por 24 horas em temperatura ambiente. Foram utilizados 5 bales volumtricos de 50mL para o experimento, conforme a tabela abaixo: Tab.1 Preparo de solues. Volume (ml) de sol. Balo n. de 50 ppm de P 1 0 2 1,0 3 2,0 4 3,0 5 4,0 Volume (ml) da sol. de MEHLICH
50 49 48 47 46

De acordo com a tabela 1, no balo n. 1, colocou-se 50mL da soluo MEHLICH. No balo n. 2, pipetou-se 1mL da soluo padro contendo o fsforo, e completou-se o volume do balo com a soluo de MEHLICH. No balo n. 3, pipetou-se 2mL da soluo padro, e 3

completou-se o balo com a soluo de MEHLICH. No balo n. 4, pipetou-se 3mL da soluo padro, e completou-se tambm seu volume com a soluo de MEHLICH. No balo n. 5, pipetou-se 4mL da soluo padro e completou-se seu volume com a soluo de MEHLICH at ao menisco. Posteriormente, no tubo n. 1 pipetou-se 5mL da soluo contida no balo n. 1, e adicionou-se 10mL da soluo de molibdato, e uma ponta de esptula de cido ascrbico. No tubo n. 2, pipetou-se 5mL da soluo contida no balo n. 2, e adicionou-se 10mL da soluo de molibdato, e uma ponta de esptula de cido ascrbico. No tubo n. 3 pipetou-se 5mL da soluo contida no balo n. 3, e adicionou-se 10mL da soluo de molibdato, e uma ponta de esptula de cido ascrbico. No tubo n. 4 pipetou-se 5mL da soluo contida no balo n. 4, e adicionou-se 10mL da soluo de molibdato, e uma ponta de esptula de cido ascrbico. No tubo n. 5, pipetou-se 5mL da soluo contida no balo n. 5, e adicionou-se 10mL da soluo de molibdato, e uma ponta de esptula de cido ascrbico. Em seguida, deixou-se os tubos em repouso por aproximadamente 30 40 minutos, para o desenvolvimento da cor e para a leitura mais precisa no espectrofotmetro. Feito isso, foi analisada cada soluo contida nos 5 tubos no aparelho de espectrofotometria em um comprimento de onde de 680nm. Com o auxlio de uma cubeta contendo a soluo do tubo n. 1, foi possvel calibrar o aparelho para descontar a absorbncia dos outros elementos presentes. Na soluo do tubo n. 1, por no conter nenhum teor de fsforo, no mediu-se a absorbncia, utilizou-a como o branco da anlise. Desprezou-se a soluo, e lavou-se a cubeta com a soluo do tubo n. 2. Aps ser lavada, adicionou-se a soluo do mesmo tubo, e verificou-se a absorbncia. Desprezou-se a soluo, e lavou-se a cubeta com a soluo do tubo n. 3. Aps ser lavada, adicionou-se a soluo do mesmo tubo, e anotou-se a absorbncia. Desprezou-se a soluo, e lavou-se a cubeta com a soluo do tubo n. 4. Aps ser lavada, adicionou-se a soluo do mesmo tubo, e anotou-se a absorbncia. Desprezou-se a soluo, e lavou-se a cubeta com a soluo do tubo n. 5. Aps ser lavada, adicionou-se a soluo do mesmo tubo, e anotou-se a absorbncia. Com os dados coletados durante a anlise de absorbncia dos tubos, foi possvel montar a curva de calibrao para a anlise (ver Fig.1). Em um tubo de ensaio, pipetou-se 5,0mL do sobrenadante da amostra n. 1 (amostra de solo preparada anteriormente) e adicionou-se 10,0mL da soluo de molibdato, e tambm uma ponta de esptula de cido ascrbico, deixou-se em repouso aproximadamente de 30 40 minutos para o desenvolvimento da cor para a leitura mais precisa no espectrofotmetro em 680nm. Em uma cubeta colocou-se essa soluo, e verificou-se a absorbncia, anotando-a.. RESULTADOS E DISCUSSES Com os dados coletados durante a anlise de absorbncia dos cinco tubos, pode-se encontrar o valor da concentrao de cada soluo, como segue os clculos abaixo: Balo 1: 0 ml de soluo de Fsforo 50 ppm. C1 . V1= C2 . V2 50 . 0 = C2 . 50 C2 = 0 ppm Balo 3: 2 ml de soluo de Fsforo 50 ppm. C1 . V1= C2 . V2 Balo 2: 1 ml de soluo de Fsforo 50 ppm. C1 . V1= C2 . V2 50 . 1 = C2 . 50 C2 = 1,0 ppm 50 . 2 = C2 . 50 C2 = 2,0 ppm Balo 4: 4

3 ml de soluo de Fsforo 50 ppm. C1 . V1= C2 . V2 Balo 5: 4 ml de soluo de Fsforo 50 ppm C1 . V1= C2 . V2 50 . 4 = C2 . 50 C2 = 4,0 ppm

50 . 3 = C2 . 50 C2 = 3,0 ppm

Encontradas as concentraes de todas as solues analisadas, montou-se uma tabela demonstrativa pra melhor visualizao dos dados. Tab. 2 Leitura de absorbncia de Fsforo e concentrao em ppm. Tubo n. Absorbncia Conc. (ppm) 1 0 0 2 0,154 1,0 3 0,381 2,0 4 0,444 3,0 5 0,593 4,0 * Amostra Problema 0,554 A tabela acima permite observar os valores de absorbncia das solues contendo fsforo, analisadas em um comprimento de onda de 680nm, em funo de suas concentraes (ppm), esboados graficamente (Fig. 1) para melhor visualizao:
0,7 0,6

Absorbncia

y = 0,1476x + 0,0192 2 R = 0,9751

0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 0 1 2 3 4 5

Concentrao (ppm)

Fig. 1 Varredura de Espectro de Absoro do Fsforo x Concentrao (ppm).

O grfico acima (fig.1), permite observar a variao da concentrao (ppm) de fsforo em funo da absorbncia. A partir dos resultados obtidos no grfico, pde-se encontrar a linearidade da reta R= 0,98747 (valor da reta) e atravs de sua equao, calcular a concentrao da amostra problema: Equao da reta: y = a + b.x y = 0,1476x + 0,0192 0,1476x = 0,554 0,0192 x = 3,62 ppm CONCLUSES Com base nos resultados observados, pde-se concluir que a curva de calibrao est de forma linear com os pontos obtidos no grfico (Fig.1), e que a margem de erro relevante, tendo em vista que o coeficiente linear (R) apresentou um valor no muito prximo de 1, aproximadamente 0,98747, devido ao fato do ponto 3 encontrar-se afastado da linha de tendncia. Dentre as possibilidades as quais podem ter gerado o erro responsvel pelo desvio que promoveu o afastamento do ponto 3, deve-se considerar a falta de ateno durante a execuo do procedimento, tanto para pipetar a quantidade correta de soluo, bem como o preenchimento incorreto, acima ou abaixo do menisco, ao completar o volume do balo. Deve-se considerar tambm, a possibilidade de erro ao manusear as cubetas, resultando em perdas por reflexo e espalhamento. Atravs do grfico (Fig.1) pode-se gerar a equao da reta, e assim calcular e obter o valor da concentrao da amostra problema, que foi de 3,62 ppm. Atravs da absorbncia e da concentrao encontrada na amostra pode-se verificar que a mesma se encontra dentre os pontos que compem a reta. BIBLIOGRAFIAS SKOOG, Douglas A., HOLLER, F. James, NIENAM, Timothy A. Princpios de anlise instrumental; Traduo: Ignez Caracelli et al. 5 ed. Bookman: Porto Alegre, 2002, p. 194, 276297. <http://pt.wikipedia.org/wiki/Espectrofotometria> Acesso em: 04 abr 2007.