LA CLONACIN

El anuncio hecho pblico en febrero de 1997, sobre el primer mamfero logrado a travs del proceso de clonacin, despert toda clase de interrogantes, temores, admiracin y especulacin en diferentes mbitos, que van desde los cientficos hasta los religiosos, pasando por los legales. Si bien, el hecho cientfico como tal es de gran valor para el desarrollo del conocimiento y hace realidad un evento que hasta este momento se consideraba imposible y que slo haca parte de la ciencia-ficcin, esto no imposibilita el cuestionamiento sobre la aplicabilidad y desarrollos futuros, teniendo como base esta metodologa. Por lo tanto, se hace necesario el conocimiento y comprensin de lo que significa la clonacin y con base en esto, acercarnos a la construccin de una posicin crtica que nos permita evaluar los pro, contras y alcances de este nuevo hecho cientfico. Clonacin de genes, el proceso mediante el cual puede aislarse un gen de entre todos los genes diferentes que existen en un organismo, lo que permite realizar su caracterizacin. Esto se consigue con la preparacin de una batera de bacterias que contienen todos los genes distintos presentes en un organismo de manera que cada una de ellas contiene un solo gen. Esto se lleva a cabo efectuando cortes del ADN de un individuo. Otra alternativa es la de crear un conjunto de todas las secuencias de ADN expresadas en una clula especfica mediante la produccin de copias complementarias de ADN a partir del ARNm hallado en dichas clulas (v ase Biologa molecular). En ambos casos, los fragmentos de ADN se unen a un vector, un virus bacteriano conocido como bacterifago o a un ADN circular denominado plasmido, que se introduce en una bacteria de forma que cada una adquiere solo una copia del vector y por tanto recibe solo un fragmento de ADN. Los grupos preparados de esta forma se pueden examinar para identificar la bacteria que contiene el gen objeto de estudio. Entonces, se toma esta bacteria y se hace crecer para producir un clon de bacterias idnticas. Como el vector que contiene el ADN insertado se replica siempre que la clula bacteriana se divide, se produce la cantidad suficiente de ADN insertado clonado necesaria para caracterizar el gen. De esta manera es posible estudiar los genes que codifican protenas que tienen un inters especial, o aquellos cuya inactivacin, consecuencia de una mutacin, origina una enfermedad especfica. Por ejemplo, podemos determinar su secuencia y la naturaleza de la mutacin que da lugar a una enfermedad. Con posterioridad, el gen se puede expresar en la clula bacteriana para producir la protena especfica que se puede emplear en el tratamiento de enfermedades como la diabetes mellitus (insulina) o el enanismo (hormona del crecimiento). Recientemente, se han podido introducir genes funcionales clonados en los individuos, para tratar una enfermedad de forma ms directa. Es

probable que el empleo de estos procedimientos de tratamiento gentico con ADN clonado aumente en el futuro.

La clonacin molecular consiste en introducir un fragmento de ADN extrao en el interior de una bacteria para que sea replicado. De esta manera se consigue obtener en breve tiempo un nmero muy elevado de copias. Gracias a las tcnicas de clonacin se pueden obtener determinadas protenas a nivel industrial (insulina), ya que el primer paso de este proceso es la clonacin del gen que codifica la protena en cuestin. Pero la clonacin es, dems, la nica forma de disponer de grandes cantidades de un mismo gen, lo que posibilita estudiar sus secuencias y establecer verdaderas bibliotecas (genotecas) o archivos de secuencias de genes. CLONACIN Y SECUENCIA DEL ADN Desde mediados de los aos 70, el campo de la gentica molecular ha experimentado un crecimiento explosivo, evidente no solamente para los genticos sino tambin para los mdicos clnicos e investigadores de la medicina, los agrnomos, los zologos, los inversionistas y el publico general. Desde el punto de vista de los mdicos clnicos e investigadores , se han puesto a su desposicinnuevos mtodos para el tratamiento de enfermedades. Los agrnomos ven la posibilidad de aumentar en gran manera el rendimiento de los cultivos, y los zootcnicos de hacer lo mismo con la produccin de alimentos a partir de los anbimales domsticos. Los genticos y los bilogos moleculares estn consiguiendo importantes avances en la comprensin de la expresin gentica y su regulacin. Las nuevas tcnicas de manipulacin del DNA, centradas en el aislamiento, amplificacin, secuenciacin y expresin de genes estn basadas en la insercin de un determinado fragmento de DNA en un vector: un plsmido o un fago. Un plsmido se introduce en una clula husped. Procariota o eucariota, la cual entonces se reproduce( produciendo un clon) y vector con su fragmento de DNA forneo tambin se replica. En ambos casos el gen forneo resulta amplificado en nmero. Puede ser tambin expresado (transcrito y traducido a protena) cuando est en un plsmido que se ha introducido en una clula husped. Una clula husped usada comnmente es E. coli .Despus de su amplificacin se puede purificar el DNA forneo y determinar su secuencia de nucletidos. Cuando se expresa, se puede obtener grandes cantidades de su producto gnico. La nueva tecnologa se conoce por diversos nombres como :Clonacin gnica, tecnologa del DNA recombinante o ingeniera gentica. BENEFICIOS PRCTICOS DE LA CLONACIN DE GENES A lo largo del captulo hemos mencionado aplicaciones de la ingeniera gentica. Aqu resumiremos algunos de los logros y direcciones futuras en la medicina, la agricultura y la industria.

MEDICINA En biomedicina, la ingeniera gentica ha obtenido logros extraordinarios. Por una parte, el conocimiento bsico sobre el funcionamiento de los genes (y sobre cmo no funcionan) ha progresado tremendamente. Por otra parte, la metedologa del ADN recombinante ha hecho que estn disponibles grandes cantidades de substancias que anteriormente se obtenan en pequeas cantidades. Entre stas tenemos la insulina, el interfern (agente antivrico), la hormona de crecimiento, factores de crecimiento, factores de coagulacin de la sangre y vacunas para enfermedades como la hepatitis B, el herpes y la rabia. Los adelantos en la investigacin sobre el SIDA y el cncer se comentarn. La ingeniera gentica est haciendo posible fabricar anticuerpos por encargo y diagnosticar ytratar enfermedades. La secuenciacin del genoma humano ayudar a la medicina mediante la identificacin de los genes de diversas enfermedades, un primer paso en el descubrimiento de curaciones. Ya hemos explicado el uso de los polimorfismos de longitud de fragmentos de restriccin y la reaccin en cadena de la polimerasa como tcnicas de una gran capacidad para la identificacin de los individuos. En otro frente, los ratones transgnicos han demostrado que la ingeniera gentica se puede aplicar a los organismos superiores. Su empleo en el tratamiento de las enfermedades humanas, sin embargo, solamente est empezando. En julio de 1990, dos comits del NationalInstitutes of Health aprobaron tratamientos de terapia gentica en humanos. En el primer caso, se tena que inyectar un gen de factor de necrosis de tumor en gente con cncer. El factor de necrosis a menudo reduce los tumores. El gen est en linfocitos que han sido manipulados. El primer grupo que se tratar ser el de los que tengan un melanoma maligno, una forma incurable de cncer de piel. En otro estudio, a un nio se le inyectaron clulas para reemplazar el gen del enzima adenosina desaminasa, un enzima cuya falta provoca una disfuncin del sistema inmune. El SIDA, la hemofilia y la diabetes don otras enfermedades que deberan ser asequibles a la terapia gentica en un futuro prximo. Agricultura Se est trabajando activamente en varias reas de investigacin agrcola. Se han modificado bacterias para proporcionar proteccin frente a la congelacin en plantas. Se ha modificado Pseudomonassyringae , mediante la deleccin de un gen para una protena que acta como ncleo en la formacin de cristales de hielo. Si estas bacterias consiguen substituir a las normales, el hielo no se formar tan fcilmente cuando la temperatura descienda por debajo del punto de congelacin. Otros proyectos sobre bacterias incluyen la amplificacin de la fijacin de nitrgeno en Rhizobiummeliloti y la introduccin de toxinas de insectos en pseudonomasfluorescens para proteger las races de las plantas. Otras tcnicas empeladas para proteger incluyen el desarrollo de cepas bacterianas y virales para eliminar plagas tales como el gusano de algodn y lw polilla del abeto de Douglas.

Como ya hemos mencionado anteriormente, las plantas y el ganado se estn manipulando directamente. Las plantas se estn modificando para la resistencia a la ssequia, para la resistencia a los virus y para la mejora de cualidades deseadas por los consumidores. Por ejemplo, los tomates con actividad reducida del enzima poligalacturonosa , que rompe las paredes celulares en la maduracin, tienen una vida mas larga en almacenaje. El ganado esta siendo modificado para caracteres de crecimiento y de resistencia a enfermedades. INDUSTRIA Las aplicaciones industriales de la biotecnologa incluyen la modificacin de bacterias para degradar residuos txicos, la utilizacin de la celulosa por levaduras para producir glucosa y alcohol para combustible, el uso de algas en acuicultura marina (cultivo de organismos marinos en sus ambientes naturales) para producir alimentos y otros productos tiles y el uso de la ingeniera gentica en la industria de la alimentacin para mejorar los mtodos de procesamiento y conversin de residuos. Como ejemplo, la levadura del pan ( Saccharomyces cerevisitae-9 ha sido modificada con un plsmido que contiene dos genes de la celulosa, una edoglucanasa y una exoglucanasa, que convierte la celulosa en glucosa. Entonces la glucosa es convertida en alcohol etlico por la levadura. Estas levaduras ahora son capaces de digerir la madera(celulosa) y convertirla directamente en alcohol. Existe la posibilidad de obtener alcohol producido por la levadura como combustible para substituir los combustibles fsiles cuyas reservas disminuyen y estn contaminando el planeta. Como se puede ver, la biotecnologa no va en una sola direccin. Se estn consiguiendo muchos adelantos que pueden afectar la vida de todos nosotros de una manera beneficiosa. Un optimismo prudente es lo que procede.