La espectroscopia tambin pronunciada espectroscopa es el estudio de la interaccin entre la radiacin electromagntica y la materia,con absorcin o emisin de energa radiante.

Tiene aplicaciones en qumica, fsica y astronoma, entre otras disciplinas cientficas.

Espectro de luz de una llama de alcohol.

Luz visible como parte del espectro electromagntico.

El anlisis espectral en el cual se basa, permite detectar la absorcin o emisin de radiacin electromagntica a ciertas longitudes de onda, y relacionar stas con los niveles de energa implicados en una transicin cuntica. Existen tres casos de interaccin con la materia: 1. choque elstico: Existe slo un cambio en el impulso de los fotones. Ejemplos son los rayos X, la difraccin de electrones y la difraccin de neutrones. 2. choque inelstico: Por ejemplo la espectroscopa Raman. 3. Absorcin o emisin resonante de fotones.

Aspectos generales

La Est

t ia en

laci

la

ayora

los casos a la t rcera i teracci

e frecuencia o longitud de onda una substancia uede absorber o emitir

energa en forma de un cuanto de luz. La energa de un cuanto de luz de una onda electromagntica o su correspondiente frecuencia, equi ale a la diferencia de energa de dos estados cunticos de la substancia estudiada:

h es la constante de Planck , es la frecuencia del cuanto de luz y

E es la

diferencia de energa. Esta ecuaci n es conocida tambin como la ecuaci n bsica de la espectroscopa. Las diferencias de energa entre estados cunticos dependen de la composici n qumica de la prueba o de la estructura de la molcula, y es por eso que este mtodo proporciona informaci n importante para qumicos, fsicos y bi logos. Por medio de un espectrofot metro se mide el espectro de la luz (Intensidad de la luz absorbida, reflejada o emitida en funci n de la frecuencia o de la longitud de onda). Los espectros se diferencan considerablemente de elemento a elemento. En general, se denota como espectro a la distribuci n de la intensidad en funci n de la frecuencia o de la longitud de onda . Adems de de la luz isible, la espectroscopa cubre oy en da una gran parte del espectro electromagntico, que de las microondas asta los rayos gamma. El objeti o de la espectroscopa es obtener informaci n acerca de una prueba o de una cuerpo radiante, por ejemplo:
 la estructura interna o la temperatura (por ejemplo de estrellas)  la composici n o la dinmica un una reacci n qumica  la espectroscopa analtica identifica tomos o molculas por medio de sus

espectros
            
Puede distinguirse entre espectroscopa: atmica o molecular. Los mtodos espectroscpicos estn basados en la interaccin radiacin electromagntica materia. Encocontramos con que la materia puede estar en forma de: tomos libres o molculas. La espectroscopa es el estudio e interpretacin de los espectros. Cuando podemos medir algo dentro de un espectro estamos en la espectrometra. Podemos distinguir aqu: 1.- Espectrografa. Cuando el espectro se recoge en una placa fotogrfica 2.- Espectrofotometra. Cuando se miden variaciones de intensidad. Tipos de espectroscopa: Espectroscopa atmica Fotometra de llama Espectroscopa de emisin Espectroscopa de emisin de plasma Espectroscopa de absorcin atmica Espectroscopa de fluorescencia

      

Espectroscopa molecular Espectroscopa de microondas Espectroscopa de infrarrojos Espectroscopa de visible-ultravioleta Espectroscopa de Raman Espectroscopa de RMN (resonancia magntica nuclear) En la espectroscopa de microondas se producen cambios en los niveles de rotacin en las molculas al interaccionar la REM con la materia. En la visible se estudian los fenmenos de vibracin, esta se encuentra ligada a cambios de los electrones. La de fluorescencia se encuentra unida a fenomenos de fluorescencia, la Raman al efecto de la dispersin de la luz por la materia y la resonancia magntica nuclear al estudio de la vibracin de los ncleos. En la espectroscopa de emisin se calcula lo que la muestra emite mientras que en la de absorcin lo que la muestra es capaz de absorber.

Introduccin a la Espectroscopa

Newton, en 666, observ que cuando un rayo de luz natural (luz blanca) pasa a travs de un prisma ptico se descompone en otros colores ms simples; es decir, el prisma dispersa o separa los colores simples o luces monocromticas-que componen la luz blanca o cualquier otra luz compleja o policromtica-.

El fenmeno de la dis persin de la luz se debe a que las distintas radiaciones que componen una luz compleja se propagan con distinta velocidad en los diversos medios transparentes y, en consecuencia, experimentan distinto ngulo de refraccin. Como esta velocidad de propagacin es directamente proporcional a la longitud de la onda de la radiacin e inversamente proporcional al ndice de refraccin del medio, resulta que las radiaciones de menor longitud de onda son las ms desviadas.

As entre las radiaciones que componen la luz blanca, las rojas (P!% Y las violetas (P!% las que ms se desvan de su trayectoria inicial.

Hasta la segunda mitad del siglo XX, la estructura de una sustancia era determinada usando informacin obtenida de reacciones qum icas. Esta informacin inclua la identificacin de grupos funcionales con ensayos qumicos, junto con los resultados de experimentos de degradacin en los cuales las sustancias se rompan en otras ms pequeas, o sea, en fragmentos ms fcilmente identifi cables. Un ejemplo tpico de este mtodo es la demostracin de la presencia de un doble enlace en un alqueno mediante la idrogenacin cataltica y su localizacin mediante ozonlisis.

Despus de considerar todas las evidencias qumicas disponibles, el q umico propona la estructura candidata ( o estructuras) que estaba de acuerdo con las observaciones. La prueba de la estructura se consegua al convertir la sustancia en un compuesto ya conocido o mediante su sntesis.

Los ensayos cualitativos y las degradaciones qumicas como pruebas estructurales an sido suplementadas y en gran medida sustituidas en la qumica orgnica actual por mtodos instrumentales de determinacin de la estructura. Las ms destacadas de estas tcnicas son la espectroscopa de re sonancia magntica nuclear (rmn), espectroscopa de infrarrojos (ir), espectroscopa de ultravioleta -visible (uv-vis), y la espectroscopa de masas (EM). A pesar de ser distintas, todas ellas estn basadas en la absorcin de energa por una molcula y todas examinan cmo la molcula responde a esa absorcin de energa.

Al describir estas tcnicas ar nfasis en su aplicacin a la tarea de la determinacin de la estructura. El anlisis sobre la naturaleza de la radiacin electromagntica es un aspecto fundamental para entender las bases fsicas de las que depende la espectroscopia molecular.

Tipos de Espectros
Si un az de rayos luminosos atraviesa primero una rendija y despus un prisma ptico, experimentar una descomposicin en tantos rayos distintos como colores tenga la luz compleja inicial. ecogiendo en una pantalla, o en una placa fotogrfica todos los rayos de luz que salen del prisma, se obtendrn una serie de rayas o bandas diversamente coloreadas que no son otra cosa que las imgenes de la rendija inicial. Estas imgenes reciben el nombre de rayas espectrales, y al conjunto de todas ellas se le denomina espectro. Segn eso el espectro es el anlisis de las distintas radiaciones o longitudes de onda emitidas por un foco luminoso. CLASES DE ESPECTROS Los espectros pueden ser : de emisin, si son originados por radiaciones emitidas por cuerpos incandescentes. Se dividen en: -continuos: si poseen todos los colores de la luz blanca (rojo, anaranjado, amarillo, verde azul, ndigo, y violeta.) En general los espectros continuos de emisin proceden de slidos y lquidos incandescentes. -discontinuos : si solamente contienen algunos colores de los siete que componen el espectro visible. Estos pueden ser: a) de bandas, si la franja coloreada es suficientemente ancha. Proceden de gases y vapores en forma molecular. b) de rayas, si la franja coloreada se reduce a una lnea. Proceden de gases y vapores en forma atmica. En realidad, los espectros de bandas e stn constituidos por una serie de rayas muy prximas entre s, pudiendo resolverse la banda si la dispersin es grande.

de absorcin, son los obtenidos por absorcin parcial de las radiaciones emitidas por un foco luminoso cuando la luz producida por l atraviesa una sustancia en estado gaseoso, ya que todo gas o vapor absorbe, a cualquier temperatura, las mismas radiaciones que es capaz de emitir si estuviera incandescente. El estudio experimental de los espectros condujo a una serie de consecuencias, prcticas y tericas, que resumimos seguidamente:

p Cada elemento qumico, convenientemente excitado, emite siempre unas radiaciones caractersticas de l y que sirven, por lo tanto, para identificarlo. p La presencia de tales radiaciones es independien te de que el elemento est solo, mezclado, o combinado con otros elementos; sus rayas espectrales son siempre las mismas y ningn otro elemento las puede emitir. p La intensidad de las radiaciones emitidas y, por lo tanto, la de las rayas espectales; es decir, su mayor o menor colorido en la placa, depende del nmero de tomos excitados, y ste, de la mayor o menor concentracin del elemento.
El hecho de que cada elemento qumico posea su propio espectro permite suponer que las longitudes de onda de las radiaciones emitidas por l, una vez excitado, estn relacionadas entre s mediante alguna expresin matemtica; lo que, en definitiva, vendra a demostrar que en el tomo solamente son posibles ciertos estados energticos. Durante mucho tiempo, la ciencia trat de encontrar frmulas que relacionaran entre s las frecuencias o las longitudes de onda, de estas radiaciones, sin llegar a ningn resultado positivo. Fue en 885 cuando el fsico suizo Balmer, al estudiar el espectro del hidrgeno observ que la longitud de onda, expresada en cmde las radiaciones correspondientes a las rayas estudiadas, vena dada por : 1/P = R (1/4-1/n) donde n es un nmero entero que puede tomar valores3,4,5,...y es una constante, llamada constante de ydberg, cuyo val or aproximadamente es 09740 cm . Al conjunto de rayas comprendidas en la zona visible del espectro del hidrgeno se le dio el nombre de serie de Balmer. El descubrimiento realizado por Balmer tuvo una importancia extraordinaria por que confirmaba con toda seguridad la existencia de determinados niveles energticos dentro del tomo; de este modo, la emisin de una cierta radiacin definida por una concreta longitud de onda correspondera a la p roduccin de

un fotn cuya energa fuese igual a la diferencia entre esos dos estados energticos del tomo. utherford en su modelo atmico supone que los electrones giran alrededor del ncleo. Ha de ser as para poder explicar que no se precipiten sobr e el ncleo debido a la atraccin electrosttica, ya que movindose, la fuerza culombiana de atraccin ejercera sobre el electrn una accin centrpeta, obligndole a describir una rbita alrededor del ncleo. Para evitar las dificultades que presenta e l modelo atmico de utherford y con el fin de ofrecer una interpretacin al porqu de los espectros atmicos, el fsico dans Bohr propuso un nuevo modelo atmico basado en los siguientes postulados: Slo son posibles unas rbitas determinadas, llamada s rbitas estacionarias, en las que el electrn situado en ellas no emite energa. En estas rbitas, adems se cumplir que el momento angular del electrn ha de ser un mltiplo entero de h/2 T. El salto de un electrn desde una rbita estacionaria de may or energa a otra rbita estacionaria de menor energa da lugar a la emisin de una radiacin electromagntica de tal modo que el valor de la energa emitida es un fotn o cuanto de luz. Evidentemente para que el salto sea posible, habr que excitar al electrn previamente comunicndole energa para obligarle a subir a rbitas ms energticas. La aplicacin de las leyes de la Fsica clsica y la de los postulados de Bhor al caso concreto del tomo de hidrgeno (tomo constituido por un protn en el ncleo y un electrn en la corteza) condujo a los siguientes resultados:

A)Respecto a los radios de las rbitas: los radios de las rbitas estn relacionados entre s como los cuadrados de los nmeros naturales. B)Respecto a las frecuencias: Bohr generaliz la ley de Balmer a la siguiente expresin:
1/P = R ( 1/J-1/K ) siendo K>J

De este modo se presenta la posibilidad de existencia de nuevas series espectrales correspondientes a radiaciones producidas al saltar el electrn desde rbitas superiores a rbitas cualesquiera ms inferiores. Sabemos que los saltos a la rbita n=2 dan espectro visible, por lo tanto los saltos a la rbita n=1, n=3, n=4, ... darn espectros situados en la zona del infrarrojo y del ultravioleta . En definitiva, el estudio de los espectros conduce a la existencia de diversos niveles energticos dentro del tomo. Estos niveles

corresponden a los posibles estados de distribucin de los electrones en la corteza atmica.

Espectrofotometra

Espectrofotometro.

La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en las investigaciones qumicas y biolgicas. Elespectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que con tiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.

Principio de la Espectrofotometra
Todas las sustancias pueden absorber energa radiante, aun elvidrio que parece ser completamente transparente absorbe radiacin de longitudes de ondas que no pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la regin del infrarrojo. La absorcin de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica. uando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida; la energa radiante no puede producir ningn efecto sin ser absorbida. El color de las sustancias se debe a que stas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbidas. La espectrofotometra ultravioleta-visible usa haces de radiacin del espectro electromagntico, en el rango V de a nm, principalmente de 2 a nm y

en el de la luz visible de 400 a 800 nm , por lo que es de gran utilidad para caracterizar los materiales en la regin ultravioleta y visible del espectro. Al campo de luz uv de 200 a 400 nm se le conoce tambin como rango de uv cercano , la espectrofotometra visible solamente usa el rango del campo electromagntico de la luz visible , de 400 a 800 nm. Adems, no est de menos mencionar el hecho de que la absorcin y trasmitancia de luz depende tanto de la cantidad de la concentracin y de la distancia recorrida. [editar]Ley

de Beer

La Ley de Beer declara que la cantidad de luz absorbida por un cuerpo depende de la concentracin en la solucin. Por ejemplo, en un vaso de vidrio tenemos agua con azcar diluida y en otro tenemos un vaso con la misma cantidad de agua pero con ms azcar diluida. El detector es una celda fotoelctrica, y la solucin de azcar es la que se mide en su conc entracin. Segn la ley de Beer, si hiciramos que un rayo de luz atravesara el primer vaso, la cantidad de luz que saldra del otro lado seria mayor que si repitiramos esto en el segundo; ya que en el segundo, las ondas electromagnticas chocan contra un mayor nmero de tomos o/y molculas y son absorbidos por estos. [editar]Ley

de Lambert

En la Ley de Lambert se dice que la cantidad de luz absorbida por u n objeto depende de la distancia recorrida por la luz. Por ejemplo, retomando el ejemplo de los vasos, pero ahora, pensemos que ambos tiene la misma cantidad de agua y la misma concentracin de azcar, pero, el segundo tiene un dimetro mayor que el otro.

Segn la ley de Lambert, si hiciramos que un rayo de luz atravesara el primer vaso, la cantidad de luz que saldra del otro lado seria mayor que si repitiramos esto en el segundo; ya que en el segundo, las ondas electromagnticas chocan contra un mayor nmero de tomos o/y molculas y son absorbidos por estos; de la misma forma que se explic en la ley de Beer. [editar]Ley

de Bouguer-Beer-Lambert

Una ley muy importante es la ley de Bouguer -Beer-Lambert (tambin conocida como ley Lambert Bouguer y Beer ) la cual es solo una combinacin de las citadas anteriormente.

[editar]Transmitancia

y absorcin de las radiaciones

Al hacer pasar una cantidad de fotones o de radiaciones, por las leyes mencionadas anteriormente, hay una prdida que se expresa con la ecuacin: It/Io=T -kdc'' Donde It , es la intensidad de luz que sale de la cubeta y que va a llegar a la celda fotoelctrica (llamada radiacin o intensidad transmitida ); y Io que es la que intensidad con la que sale al atravesar la celda ( radiacin intensidad incidente ) y la relacin entre ambas ( T) es la transmitancia. En el exponente, el signo negativo se debe a que la energa radiente decrece a medida que el recorrido aumenta. Donde k es la capacidad de la muestra para la captacin del haz del campo electromagntico, d es la longitud de la cubeta de espectrofotometra que recorre la radiacin, y c es la concentracin del soluto en la muestra ya ubicada en la cubeta. La ecuacin simplificada de la ley de Beer-Lambert A = .d.c Comprende a la mnima ecuacin que relaciona la concentracin (c), la absorbancia de la muestra (A), el espesor recorrido por la radiacin (d) y el factor de calibracin ( ). El factor de calibracin relaciona la concentracin y la absorbancia de los estndares. La absorcin (o absorbancia) es igual a A, la es el logaritmo del reciproco de la transmitancia: 1 A= log 1/T lo que es igual a: A= -log T Las ecuaciones mencionados de las leyes son v alidas solo y solo s: 1
  

La radiacin incidente es monocromtica. Las especies actan independientemente unas de otras durante la absorcin. La absorcin ocurre en un vo lumen de seccin trasversal uniforme

ESPECTROFOTOMETRIA La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en las investigaciones biolgicas. El

espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia. Todas las sustancias pueden absorber energa radiante, aun el vidrio que parece ser completamente transparente absorbe longitud de ondas que pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la regin del infrarrojo. La absorcin de las radiaciones ultravioleta, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica. Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida; la energa radiante no puede producir ningn efecto sin ser absorbida. El color de las sustancias se debe a que stas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbida.

MTODOS FOTOMTRICOS DE ANLISIS

1. NATURALEZA DE LA RADIACIN ELECTROMAGNTICA

La Radiacin Electromagntica es una forma de Energa radiante que se propaga en forma de ondas. En este fenmeno ondulatorio se define: Longitud de onda (P): es la distancia entre dos mximos de un ciclo completo del movimiento ondulatorio. Se expresa, segn el S.I. en nanmetros (nm) y sus equivalencias son: 1nm = 1mQ =10 A0 = 10-9 m. b) Frecuencia (R): es el nmero de ciclos por segundo. Es inversa a la longitud de onda. Su frmula es: R = c/P, y se mide en ciclos por segundo o hertzios. c) Fotones: la luz est formada por fotones, y estos son paquetes discontinuos de E. La E de un fotn depende de la frecuencia y de la longitud de onda, segn la siguiente expresin: E = h x R = h x c/R (h = Cte. de Planck = 6,62.10-27 erg/seg.). La Energa Electromagntica se mide el Ergios. La relacin entre la longitud de onda y la Energa es inversa, por lo tanto a menor longitud de onda mayor Energa y viceversa. d) Espectro Electromagntico: cubre un amplio intervalo de E radiante, desde los rayos K de longitud de onda corta hasta las ondas de radio, de longitud de onda larga. Se divide en varias regiones, las ms interesantes para nosotros son: Regin Ultravioleta: P = 10-380 nm Regin Visible: P = 380-780 nm Regin Infrarroja: P = 780-30.000 nm En la Regin Visible, la luz se descompone en colores. La luz blanca contiene todo el espectro de longitudes de onda. Si interacciona con una molcula puede ser dispersada o absorbida.

a)

2. FENMENOS DE INTERACCIN ENTRE LUZ Y MATERIA A.

FENMENO DE ABSORCIN Cuando una partcula que se encuentra en estado de

reposo o estado fundamental interacciona con un haz de luz, absorbe E y se transforma en una partcula en estado excitado. La molcula absorbe la E de la onda y aumenta su energa, y ese aumento de energa es igual a la E de la Radiacin Electromagntica absorbida (E = h.R). La partcula en estado excitado tiende a volver de forma espontnea a su estado de reposo desprendiendo la E absorbida en forma de calor. Espectro de Absorcin. Cada especie absorbente, que recibe el nombre de cromgeno, tiene un determinado espectro de absorcin. El espectro de absorcin es un grfico donde se representa en ordenadas la Absorbancia y en abcisas la longitud de onda. La medida de la cantidad de luz absorbida por una solucin es el fundamento de la espectrofotometra de absorcin. Por eso es importante trabajar a la longitud de onda a la que la sustancia estudiada absorbe la mayor cantidad de luz (a mayor cantidad de luz, mayor cantidad de sustancia).

B.

FENMENO DE EMISIN

Algunos compuestos, tras ser excitados por la luz, vuelven al estado fundamental produciendo la emisin de energa radiante. En este caso, lo que se mide es la energa emitida y, en este fenmeno se basa la fotometra de llama o la fluorescencia.

3. LEYES DE ABSORCIN
Cuando un haz de luz pasa a travs de un medio, se registra una cierta prdida de intensidad, debido a la absorcin por parte de la sustancia. Se llama TRANSMITANCIA (T) a la relacin entre la luz incidente y la luz transmitida: T = Is / I0 ; %T = (Is / I0 ) x 100. Se puede perder intensidad por la interaccin con la cubeta o el solvente. Para evitar este error se hace una primera medida con una solucin de referencia o

BLANCO, que contiene todos los posibles compuestos que intervienen en la lectura menos el que vamos a medir. Todas las medidas que se hagan con posterioridad sern referidas a esta medida inicial y se harn en la misma cubeta que se utiliz en la medida del blanco. La Transmitancia se usa poco, se emplea ms la Absorbancia (A) porque la relacin entre A y la concentracin de una solucin es directamente proporcional y la de la T es inversamente proporcional. La relacin entre la absorbancia y la transmitancia es la siguiente: 100 = 0 Si el %T = 0 A = 2-log 0 = g En los aparatos que se usan actualmente se presentan absorbancias, pero el aparato lo que mide realmente es %T que luego transforma a absorbancia. 3.1. LEY DE BEER La absorbancia de una solucin es directamente proporcional ala concentracin y a la longitud del paso de la luz. A = I . b. c Siendo: A: absorbancia. No tiene unidades.
I: el coeficiente de extincin molar, tambin llamado coeficiente de absorcin. Es constante para un compuesto dado siempre que se fijen condiciones de longitud de onda, de pH, de temperatura, de solventes, etc. Sus unidades son 1/ (mol/cm).

Si el %T = 100

A = 2-log T = 2-log

b: es la longitud de paso de la luz, en cm. c: es la concentracin del absorbente. Se mide en mol/L.

La aplicacin prctica de la Ley de Beer es, que conociendo la absorbancia de una sustancia podemos averiguar su concentracin y esto lo podemos hacer de

dos formas: Por comparacin con una solucin conocida: si tenemos 2 soluciones, una problema (P) y una estndar (S), podemos establecer la siguiente relacin matemtica entre ellas: 2. A travs de una curva de calibracin: la curva de calibracin es la representacin grfica en un eje de coordenadas de la Absorbancia (eje de ordenadas) frente a la Concentracin (eje de abcisas). Se ensayan varias soluciones de concentracin conocida y se determinan sus A, construyndose la curva de calibrado, que es una recta. Una vez ensayadas las soluciones problemas, su concentracin se averigua por interpolacin de las A de las soluciones problema en la curva de calibracin. 1. Hay que tener en cuenta la LINEALIDAD, que es el intervalo de concentraciones del cromgeno entre las cuales existe una relacin lineal entre Absorbancia y Concentracin. Cuando la concentracin del cromgeno sobrepasa los lmites de linealidad se deja de cumplir la Ley de Beer, convirtindose la recta en una curva. La lectura de la Absorbancia fuera de los lmites de linealidad se traduce en una concentracin falsamente baja de cromgeno. En esta situacin, hay que diluir la muestra para que su concentracin entre en los lmites de la linealidad. Empleo de los Factores de Calibracin: Para reactivos estables y sistemas fotomtricos estables, este factor se puede mantener constante, siendo slo necesario ensayar las muestras problema multiplicando la A resultante por el factor F.

4. ESPECTROFOTMETRO

5. Se distinguen dos tipos de aparatos:

y Fotmetro o Colormetro: se caracterizan porque utilizan filtros que solo permiten el paso de una determinada longitud de onda. y Espectrofotmetros: utilizan cromadores. Con ellos se obtiene un haz de luz monocromtico cuya longitud de onda se vara a voluntad. Los monocromadores pueden ser de dos tipos: prismas y redes de difraccin.

Monocromador de Prisma

2.2.

COMPONENTES DEL ESPECTROFOTMETRO Un espectrofotmetro es un instrumento usado en la fsica ptica que sirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones. Tambin es utilizado en los laboratorios de qumica para la cuantificacin de sustancias y microorganismos. Hay varios tipos de espectrofotmetros, puede ser de absorcin atmica o espectrofotmetro de masa. Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones: 1. Dar informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra 2. Indicar indirectamente qu cantidad de la sustancia que nos interesa est presente en la muestra

Cubetas de espectofotometra. En un primer plano, dos de cuarzo aptas para el trabajo con luz ultravioleta; en segundo plano, de plstico, para colorimetra (es decir, empleando luz visible).

Componentes de un espectrofotmetro

Cubetas de espectofotometra. En un primer plano, dos de cuarzo aptas para el trabajo con luz ultravioleta; en segundo plano, de plstico, para colorimetra (es decir, empleando luz visible).
[edi r] Fuente de luz

La fuente de luz que ilumina la muest a debe cumpli con las si uiente condiciones: s estabilidad, di eccionabilidad, dist ibuci n de energa espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son: l mpara de wolframio (tambi n llamado tungsteno), l mpara de arco de xenn y l mpara de deuterio que es utilizada en los laboratorios atmicos.
[editar] Monocromador

El monocromador asla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se reflejan desde el conjunto, se usa para obtener luz monocromtica. Est constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersin. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida. Es un lente que lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un prisma el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud deseada se dirige hacia otra lente que direcciona ese haz hacia la rendija de salida.
[editar] Compartimiento de Muestra

Es donde tiene lugar la interaccin, R.E.M con la materia (debe producirse donde no haya absorcin ni dispersin de las longitudes de onda). Es importante destacar, que durante este proceso, se aplica la ley de Lambert Beer en su mxima expresin, en base a sus leyes de absorcin, en lo que concierne al paso de la mol cula defundamental excitado.

[editar] Detector

El detector, es quien detecta una radiacin y a su vez lo deja en evidencia, para posterior estudio. Hay de dos tipos: a) los que responden a fotones; b) los que responden al calor
[editar] Registrador

Convierte el fenmeno fsico, en nmeros proporcionales al analito en cuestin.

[editar] Fotodetectores

En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotodetectores para percibir la seal en forma simultnea en 16 longitudes de onda, cubriendo el espectro visible. Esto reduce el tiempo de medida, y minimiza las partes mviles del equipo.

1. Fuente de luz: proporciona energa radiante en forma de luz visible o no visible.

y

Tipos de lmparas: Lmparas de filamento de tungsteno: se utilizan para longitudes de onda del espectro visible y el ultravioleta prximo. Son fuentes de un espectro continuo de energa radiante entre 360-950 nm. Lmparas de filamentos de haluros de tungsteno: son de mayor duracin y emiten energa radiante de mayor intensidad. Lmparas de Hidrgeno y Deuterio: producen un espectro continuo en la regin ultravioleta entre 220-360 nm. Lmparas de vapores de Mercurio: Emiten un espectro discontinuo o espectro de lneas que se utilizan para calibracin de longitudes de onda, se emplean solo para espectrofotmetros y cromatografa HPLC. y Precauciones: - Las subidas y bajadas bruscas de tensin producen sufrimiento de la lmpara y cambios en las lecturas de la Absorbancia. - La lmpara tiene una vitalidad limitada y se debe vigilar para que funcione bien el aparato.

(03/10/01) 2. Rendija de entrada: tiene como funcin reducir al mximo la luz difusa y evitar que la luz dispersa entre en el sistema de seleccin de longitud de onda. 3. Monocromadores. Pueden ser: Prismas: son fragmentos con forma de cua de un material que permite el paso de la luz. Ej. De vidrio para trabajar en el espectro visible o cuarzo para trabajar en el ultravioleta lejano.

Redes de difraccin: son un gran nmero de lneas paralelas situadas a distancias iguales entre s y son hendiduras sobre un vidrio o una superficie metlica. Cada una de estas hendiduras se comporta como un pequeo prisma. 4. Rendija de salida: tiene como funcin impedir que la luz difusa atraviese la cubeta de la muestra, que provocara desviaciones a la Ley de Beer. (04/10/01) 5. Cubeta: es el recipiente donde se coloca la muestra para la medicin. Pueden ser de distintos tipos y tamaos (cuadradas, rectangulares, redondas). Se obtienen mejores resultados usando cubetas de bordes paralelos. Si se utilizan cubetas redondas se deben marcar e introducir en el aparato siempre en la misma posicin. Suelen estar fabricadas en vidrio o en plstico. 6. Detector. Puede ser de dos tipos:
y Fotoclulas o clulas fotovoltaicas:

Es una lmina de Cobre sobre la que se extiende una capa de Selenio o de xido de Cobre. A sto se le conoce como semiconductor. Sobre el semiconductor hay una capa de metal transparente que sirve de electrodo. La luz incide sobre el Selenio y ste desprende electrones, que pasan a la placa de Cobre originando una diferencia de potencial por existir carga negativa sobre el Cobre y positiva sobre el Selenio. El conjunto se conecta a un ampermetro que seala el paso de corriente. Caractersticas: son resistentes; econmicas; sensibles desde el ultravioleta hasta los 1.000 nm. de longitud de onda; no se requiere batera externa, ni vaco,...; la corriente producida es directamente proporcional a la Energa que llega y tienen efecto fatiga, es decir, que presentan una subida inicial de corriente, que luego decrece progresivamente hasta el equilibrio. Por eso hay que esperar entre 30-60 segundos entre una lectura y otra.
y Fototubos multiplicadores:

Un fototubo multiplicador es un tubo que contiene un ctodo que emite electrones de forma proporcional a la Energa que incide sobre l. Tiene un nodo que recoge los electrones y la corriente se multiplica varias veces al chocar los electrones sobre sucesivos nodos que van teniendo un voltaje superior al precedente. La seal se amplifica en cientos o miles de veces. Caractersticas: el tiempo de respuesta es muy rpido, no tienen efecto fatiga tan altos como la anterior y son muy sensibles. 7. Medidor: son sistemas de lectura de la Energa elctrica que recoge el detector y que puede ser lectura directa (se utiliza una clula fotovoltaica) o puede ser amplificadores de seal como en el caso del fototubo multiplicador. Los actuales aparatos incorporan lectura digital y clculos automticos de concentraciones con relacin a las curvas de calibracin. (

4.2 TIPOS DE APARATOS  ESPECTROFOTMETRO DE HAZ SIMPLE: es igual que la descripcin dada para el espectrofotmetro en general. Consta de los mismos elementos (Ej. Bilirrubinmetro: para determinar bilirrubina directa en capilar). ESPECTROFOTMETRO DE DOBLE HAZ EN EL ESPACIO: todos los componentes estn duplicados, menos la lmpara y el medidor. Dos haces de luz pasan al mismo tiempo por los distintos componentes separados en el espacio. Esto compensa las variaciones de intensidad de luz y de absorbancia.

ESPECTROFOTMETRO DE HAZ DOBLE EN EL TIEMPO: utilizan los mismos componentes que el espectrofotmetro de haz simple. Dos haces de luz pasan por los mismos componentes pero no al mismo tiempo. Emplean un Chopper consistente en un interruptor rotativo del haz luminoso colocado a continuacin de la rendija de salida. Un sistema de espejos dirige la porcin de luz reflejada por el chopper a travs de una cubeta de referencia y de ah al detector comn. El detector lee alternativamente el haz procedente de la muestra y el de la cubeta de referencia. Esto compensa la variacin de energa radiante.

MEDIDAS FOTOMTRICAS

1. FLUORIMETRA 1.1 CONCEPTOS GENERALES A. B. A. B. Luminiscencia Fluorescencia Fluormetro Espectrofluormetro

1.2 INSTRUMENTACIN FLUOROMTRICA

1.3 CARACTERSTICAS DE LA FLUORIMETRA 1.4 APLICACIONES 2. FOTOMETRA DE LLAMA 2.1 CONCEPTOS GENERALES A. Generalidades B. Fundamento C. Interpretacin 2.2 INSTRUMENTAL 3. ESPECTROFOTOMETRA DE ABSORCIN ATMICA

3.1 PRINCIPIOS 3.2 INSTRUMENTAL A. B. C. Lmpara de ctodo hueco Quemador Componentes fotomtricos 3.3 ABSORCIN ATMICA 4. NEFELOMETRA Y TURBIDIMETRA 4.1 PRINCIPIOS. LEY DE RAYLEIGH 4.2 DETECCIN DE LA LUZ DISPERSADA A. Turbidimetra Nefelometra

 ESPECIFICACIONES: Rango de longitud de ondas: 350-1000nm Exactitud de longitus de onda: 2nm Resolucin: 1nm Monocromador: re de difraccin de 1200 lneas/mm Fuente de luz: lmpara halgena Detector: fotodiodo de silicio

Rango fotomtrico: -0,1 a 2,5 Abs Exactitud fotomtrica: 0,005 Abs

Modos de medicin: %T, Abs y concentracin Admite celdas de 25mm de dimetro y c betas de 10mm

Dimensiones: 35 x 28
Rango de longitud de onda: 190 a 860 nm - Paso de banda espectral: 0,2 n a 200 nm Dispersin lineal recproca: . a 200 nm - 0,1 nm/mm . a 800 nm - 0,4 nm/mm - Efecto Zeeman, longitudinal inverso - Atomizacin: calentamiento transversal del horno de grafito, calentamiento elctrico - Rango de medidas de: . Absorbancia -0,5 a 2000 . Concentracin 0,0001 a 9999 unidades de concentracin . Factor de expansin 0,01 a 100 . Tiempo de lectura 1 a 60 segundos . Tiempo de demora 0 a 60 segundos Aplicaciones Estndar con Espectrofotmetro UV Mini Modo fotomtrico para longitud de onda fija Con el modo fotomtrico, Ud. puede medir la absorbancia o la transmitancia en la longitud de onda fija. Anlisis cuantitativo fijo usando el mtodo Factor-K puede tambin ser usado. Resultados son automticamente impresos o son mandados a la puerta RS-232C. Con varios posicionadores de celda opcionales o con configuracin sipper/auto-muestra, medidas continuas de muestras tambin es posible. Modo espectro para barrido de longitud de onda Con ese modo estndar, Ud. puede lograr espectro UV-Visible completo de muestras de 190nm a 1100nm. Barrido repetido le permite a Ud. medir automticamente cualquier cambio espectral en todo el rango. Tambin disponible en la configuracin estndar, la funcin de procesamiento de datos espectral como plotar grfico y deteccin de picos / valles. Modo cuantificacin para anlisis de longitud simple

 Este modo le permite a Ud. preparar curva de calibracin para determinaciones fciles de concentraciones de muestras desconocidas. Estn disponibles modos de uno, dos o tres longitudes de onda. Mtodos cuantitativos posibles de seleccionar incluyendo factor-K, curva de calibracin de un punto o multi-puntos . Ajuste de primero, segundo o tercero orden tambin son posibles de seleccionar. ESPECTROFOTOMETRIA UV-VIS TU 1800 Uv-Vis Spectrophotometer El TU1800/1800S es el ms popular espectofotmetro de P-General. Su ptica adopta el sistema de medicin SPLIT-BEAN con un detector formado por dos fotodiodos de estado slido de alta sensibilidad. Las operaciones del instrumento estan controladas a travs de un microchip interno en conjunto con una pantalla de cristal lquido (LCD) y un teclado Soft-Touch con salida para impresora. Su compartimiento es para 8 celdas y adems posee una fuente de luz accesible. El TU1800/1800S efecta mediciones fotomtricas, mediciones espectrales y cuantitativas, es fcilmente operable con caracterstiCAS sobresalientes, Escaneo de longitudes de onda automtico entre 1100-200 nm., chequea automticamente la linea de base.