PRACTICA DE LABORATORIO I.

DATOS GENERALES

o Institucin: o Asignatura: o Nombre del laboratorio: o Titular: o Clase : o Alumno: o Lugar y fecha:

Universidad `Pedaggica Nacional Francisco Morazn Bioqumica Identificacin de protenas Lic. Lidis Torres Laboratorio de Ciencias Manuel Dionicio Montes San Pedro Sula 21abril 2008

II.

INTRODUCCION

Esboce con sus propias palabras ,considere el contenido otras bibliografas y el desarrollo de la practica. III. OBJETIVOS

1. Reconocer la presencia de protenas en diferentes sustancias utilizando la prueba de Biuret y la reaccin xantoproteica.
2. Observar la desnaturalizacin de la albmina del huevo.

IV.

MATERIALES 1. Tubos de ensayo (9) 2. Agua destilada 3. Acido ntrico 4. Acido actico o vinagre 5. Almidn 6. Gradilla 7. Solucin de hidrxido de sodio (NaOH) al 20%
8. Solucin de sulfato de cobre(II)

(Cu SO4) AL 1% 9. Probeta de 5 o 10 ml 10.Queso crema

11.Algodn 12.Leche 13.Goteros(3) 14.Clara de huevo

15.Uas 16.Pelos blancos de perro 17.Mechero 18.Fsforos

V. 1. 2. 3. 4.

MEDIDAS DE SEGURIDAD

Uso adecuado del equipo de laboratorio Traer puesta su gabacho u uniforme de laboratorio Realizar las medidas con exactitud No contaminar las sustancias( usar equipo indicado para la manipulacin de sustancias) 5. Seguir estrictamente los procedimientos indicados en su prctica. 6. Dejar aseado y ordenado el equipo y sala de laboratorio

VI.

TEORIA RESUMIDA

Entre las reacciones coloreadas especificas de la protena, que sirven por tanto para su identificacin, destaca la reaccin de Biuret. Esta reaccin la producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos ya que se debe a la presencia del enlace peptidico CO-NH que se destruye al liberarse los aminocidos. El reactivo de Biuret lleva sulfato de cobre (II) y un lcali (hidrxido de sodio), y el cobre en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces pepiticos formando un complejo de color violeta(Biuret) cuya intensidad de color depende del numero de enlaces pepiticos presentes en la protena. La reaccin xantoproteica es debida a la formacin de un compuesto aromtico nitrato de color amarillo, cuando las protenas son tratadas con acido ntrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas protenas con aminocidos portadores de grupos bencnicos, especialmente en presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un lcali vira un color anaranjado oscuro. Precaucin: el acido ntrico es corrosivo para su piel y telas. Lvate con abundante agua si te pones en contacto con este acido. Cualquier accidente comuncalo al encargado de laboratorio.

VII.

PROCEDIMIENTO

Toma dos tubos de ensayo y deposita en uno de ellos 3cc de agua y en el otro 3cc de gasolina u otro disolvente orgnico (ter). Aade a cada tubo 1cc de aceite y agita fuertemente. Observa la formacin de gotitas o micelas y deja en reposo. Se vera como el aceite se ha disuelto en gasolina y en cambio no lo hace en el agua, y el aceite subir debido a su menor densidad.

Agua mas aceite Agua Gasolina

Gasolina mas aceite

Enumera cinco tubos de ensayo del 1al 5 aade la siguiente sustancia en cada tubo
1.

ACIDO NITRICO 1. UAS 2. CLARA DE HUEVO 3. ALGODN ABSORVENTE 4. PELOS BLANCOS DE

2.Aade 5 gotas de acido ntrico concentrado en cada tubo de ensayo, calienta por un minuto. observa y anota los resultados en la siguiente tabla. tubo 1 2 3 4 5 sustancia Uas clara de huevo Algodn pelos blancos de perro queso crema color con el hno3 concentrado presencia de protenas si no

2. Enumera cuatro tubos de ensayo del uno al cuatro aade las siguientes sustancias

a cada tubo de ensayo. Tubo n0 1 Tubo no 2 huevo) 4 ml de agua destilada solucin de albumina de huevo (4 ml de agua y 2 ml de clara de

Tubo no 3 suspensiones de almidn (almidn con agua). Tubo no 4 4ml de leche

Agita fuertemente los tubos 2 y 3

3. Al contenido de cada tubo de ensayo aade 5 gotas de solucin de sulfato de

cobre y 5 gotas de solucin de hidrxido de sodio (prueba de Biuret). Agita para que se mezcle bien.

Clara de huevo

Na OH

gota a gota CuSO4

OBSERVA LOS RESULTADOS Y ANOTALOS EN LA SIGUIEN TE TABLA. SUSTANCIAS AGUA DESTILADA SOLUCION ALBUMINICA SUSPENSIN DE ALMIDON Y LECHE ALMIDON Coagulacin de protenas Las protenas debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formacin de cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70 grados centgrados o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos alcohol, etc. La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes indicados que al actuar sobre la protena la desordenan por la destruccin de su estructura terciaria y cuaternaria. COLOR DE LA PRUEBA DE BIURET PRESENCIA DE PROTEINAS SI NO

Para la coagulacin de las protenas se puede utilizar clara de huevo, para conseguir mas volumen puede prepararse para toda la clase una disolucin de clara de huevo en agua de forma que quede una mezcla aun espesa.

1. Coloca en un tubo de ensayo un apequena cantidad de clara de huevo. 2. Aade 5 gotas de acido actico y calienta el tubo a la llama de un mechero.

Calor Clara de huevo Gotas de acido actico

Formacin de cogulos

VIII.

ANLISIS E INTERPRETACIN 1. Qu pruebas utilizaste para identificar protenas? _________________________________________________________________ _______

2. Indica 5 ejemplos de protenas que contenga tu organismo y menciona las

funciones que desempea cada una de ellas.____________________________________________________________ ________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ ______________

3. Seala cuales de los siguientes alimentos contienen protenas.

 Un huevo hervido Carne de res Manzanas

Pan de trigo Pescado Banano

Frijoles Queso Leche

4. Como se manifiesta la desnaturalizacin de la clara de huevo? ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ________________________ 5. Qu coloracin da la reaccin de Biuret? una protena coagulada podra dar la reaccin de Biuret? ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ________________________ CONCLUSIONES _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________

IX.

BIBLIOGRAFIA