Vous êtes sur la page 1sur 40

CAPTULO 14 A GLICLISE E O CATABOLISMO DAS HEXOSES 1. O QUE GLICLISE E SUAS FASES?

Na gliclise uma molcula de glicose degradada em uma srie de reaes catalisadas por enzimas para liberar duas molculas de piruvato. Durante as reaes seqenciais da gliclise parte da energia livre liberada da glicose conservada na forma de ATP. A gliclise foi a primeira via metablica a ser elucidada e provvel que, atualmente, seja a melhor entendida. Desde a descoberta de Eduard Buchner (em 1897) da fermentao que ocorre em extratos de clulas rompidas de levedura at o reconhecimento claro por Fritz\ Lipmann e Herman Kalckar (em l941) do papel metablico dos compostos de alta energia como o ATP, as reao da gliclise em extrato de levedura e de msculo foram o centro da pesquisa bioqumica. O desenvolvimento dos mtodos de purificao de enzimas, a descoberta e o reconhecimento da importncia de cofatores como o NAD e a descoberta do papel metablico polivalente dos compostos fosforilados vieram, todos, de estudos sobre a gliclise. Atualmente, todas as enzimas da gliclise de muitos organismos j foram cuidadosamente purificadas, estudadas, e as estruturas tridimensionais de todas as enzimas glicolticas so conhecidas a partir de estudos cristalogrficos com raios-X. A gliclise uma via central quase universal do catabolismo da glicose. a via atravs da qual, na maioria das clulas, ocorre o maior fluxo de carbono. Em certos tecidos e tipos celulares de mamferos (eritrcitos, medula renal, crebro e esperma, por exemplo), a glicose, atravs da gliclise, a principal, ou mesmo a nica, fonte de energia metablica. Alguns tecidos vegetais que so modificados para o armazenamento de amido, como os tubrculos da batata e alguns vegetais adaptados para crescerem em reas regularmente inundadas pela gua, derivam a maior parte de sua energia da gliclise; muitos tipos de microrganismos anaerbicos so inteiramente dependentes da gliclise. Fermentao um termo geral que denota a degradao anaerbica da glicose ou de outros nutrientes orgnicos em vrios produtos (caractersticos para os diferentes organismos) para obter energia na forma de ATP. A quebra anaerbica da glicose , provavelmente, o mais antigo mecanismo biolgico para obteno de energia a partir de molculas orgnicas combustveis, j que os organismos vivos apareceram primeiro em uma atmosfera destituda de oxignio. No curso da evoluo, esta seqncia de reaes foi completamente conservada; as enzimas glicolticas dos animais vertebrados so muito semelhantes na seqncia de aminocidos e na estrutura tridimensional s enzimas homlogas na levedura e no espinafre. O processo da gliclise difere de uma espcie para outra apenas em detalhes da sua regulao e no destino metablico subsequente do piruvato formado. Os princpios termodinmicos e os tipos de mecanismos reguladores na gliclise so encontrados em todas as vias do metabolismo celular. A glicose tem seis tomos de carbono e sua diviso em duas molculas de piruvato, cada uma com trs tomos de carbono, ocorre em uma seqncia de 10 passos e os cinco primeiros deles constituem a fase preparatria. Nestas reaes a glicose inicialmente fosforilada no grupo hidroxila em C-6. A D-glicose-6-fosfato assim formada convertida em D-frutose-6-fosfato, a qual novamente fosforilada, desta vem em C-1, para liberar D-frutose-1,6bifosfato. O ATP o doador de fosfato nas duas fosforilaes. Como todos os derivados dos acares que ocorrrem na via glicoltica so os ismeros D, omitiremos a designao D, exceto quando desejarmos enfatizar a estereoqumica. A seguir a frutose-1,6-bifosfato quebrada para liberar duas molculas com trs carbonos, a diidroxiacetona fosfato e o gliceraldedo-3-fosfato; este o passo em que ocorre a "lysis" que d o nome ao processo. A diidroxiacetona fosfato isomerizada em uma Segunda molcula de gliceraldedo-3-fosfato, e com isso termina a primeira fase da gliclise. Note que duas molculas de ATP precisam ser investidas para ativar, ou iniciar, a molcula de glicose para a sua quebra em duas partes com trs carbonos; haver, depois, um retorno positivo para este investimento. Resumindo: na fase preparatria da gliclise a energia do ATP investida, aumentando o contedo de energia livre dos intermedirios, e as cadeias carbnicas de todas as hexoses metabolizadas so convertidas em um produto comum, o gliceraldedo-3-fosfato. O ganho energtico provm da fase de pagamento da gliclise. Cada molcula de gliceraldedo-3-fosfato oxidada e fosforilada por fosfato inorgnico (no pelo ATP) para formar 1,3-bifosfoglicerato. A liberao de energia ocorre quando as duas molculas de 1,3-bifosfoglicerato so convertidas em duas molculas de piruvato. A maior parte dessa energia conservada pela fosforilao acoplada de quatro molculas de ADP para ATP. O produto lquido so duas molculas de ATP por molcula de glicose empregada, uma vez que duas molculas de ATP so investidas na fase preparatria da gliclise. A energia tambm conservada na fase de pagamento na formao de duas molculas de NADH por molcula de glicose. Nas reaes seqenciais da gliclise trs tipos de transformaes qumicas so particularmente notveis: 1. Degradao do esqueleto carbnico da glicose para produzir piruvato; 2. Fosforilao de ADP a ATP pelos compostos de fosfato de alta energia formados durante a gliclise; e 3. A transferncia de tomos de hidrognio ou eltrons para o NAD+, formando NADH. O destino do produto, o piruvato, depende do tipo de clula e das circunstncias metablicas.

2 -QUAIS SO OS PRINCIPAIS DESTINOS DA GLICOSE? E OS PROCESSOS OXIDATIVOS E NO OXIDATIVOS NA GLICOSE? A glicose pode ser armazenada (como um polissacardio ou como sacarose), pode ser oxidada a petoses, atravs da via das pentose fosfato (ou via do fosfogliconato), ou pode ser oxidada a compostos de trs tomos de carbono (piruvato. O piruvato, produto da gliclise, representa um ponto de juno importante no catabolismo dos carboidratos. Em condies aerbicas o piruvato oxidado a acetato, o qual entra no ciclo do cido ctrico e oxidado at CO2 e H2O. O NADH formado pela desidrogenao do gliceraldedo-3-fosfato reoxidado a NAD+ pela passsagem do seu eltron ao O2 no processo da respirao mitocondrial. Entretanto, sob condies anaerbicas (como em msculos esquelticos muito ativos, em plantas submersas, ou nas bactrias do cido lctico, por exemplo) o NADH gerado pela gliclise no pode ser reoxidado pelo O2. A incapacidade de regenerar o NADH em NAD+ deixaria a clula sem receptor de eltrons para a oxidao do gliceraldedo-3-fosfato e as reaes liberadoras de energia da glicose cessariam. O NAD+ precisa, portanto, ser regenerado atravs de outras reaes. As primeiras clulas a surgirem durante a evoluo viviam em uma atmosfera quase desprovida de oxignio e tiveram que desenvolver estratgias para desenvolver a gliclise sob condio anaerbicas. A maioria dos organismos modernos retiveram a habilidade de regenerar continuamente o NAD+ durante a gliclise anaerbica pela transferncia dos eltrons do NADH para formar um produto final reduzido, como o so o lactato e o etanol. 4 EXPLIQUE COMO E ONDE OUTROS CARBOIDRATOS ENTRAM NA VIA GLICOLITICA PARA SOFRER A DEGRADACAO FORNECEDORA DE ENERGIA. As unidades de glicose dos ramos externos da molcula do oxignio e do amido entram na via glicolitica atravs da ao seqencial de duas enzimas: a fosforilase do glicogenio (ou da sua similar nos vegetais, a fosforilase do amido) e a fosfoglicomutase. A fosforilase de glicogenio catalisa a reao em que uma ligao glicosidica reunindo dois residuos de glicose no glicogenio, sofre o ataque por fosfato inorgnico, removendo o resduo terminal de glicose como -d-glicose 1-fosfato. Esta reao de fosforlise, que ocorre durante a mobilizao intracelular do glicogenio armazenado diferente da hidrlise das ligaes glicosdicas pela amilase que ocorre durante a degradao intestinal do amido ou do glicogenio. Na fosforlise, parte da energia da ligao glicosidica preservada na formao do ster fosfrico, glicose-1-fosfato. O piridoxal fosfato um cofator essencial da reao da fosforilase do glicogenio; o seu grupo fosfato age como um catalisador acido geral, promovendo o ataque pela pi da ligao glicosidica. A fosforilase do glicogenio age nas extremidades no redutoras das ramificaes do glicogenio (ou da amilopectina), ate que seja atingido num ponto distante quatro resduos de uma ramificao. A continuao de uma degradao pode ocorrer apenas depois da ao de enzima de desrramificao ou oligo ( 1 6) para ( 1 4) glicano transferase, que catalisa as duas reaes sucessivas que removem as ramificaes. A glicose-1-fosfato convertida em glicose 6-fosfato pela fosfoglicomutase. A d-frutose pode ser fosforilada pela hexoquinase, sendo esta uma via importante nos msculos e nos rins dos vertebrados. No fgado, entretanto, a frutose entra na gliclise por uma via diferente. A enzima heptica frutoquinase catalisa a fosforilao da frutose em c-1: a frutose-1-fosfato ento quebrada ao meio para formar gliceraldedo e diidroxicetona fosfato pela frutose-1-fosfato aldolase. A diidroxicetona fosfato convertida em gliceraldeido-3-fosfato pela enzima glicolitica triose fosfato isomerase. Assim, os dois produtos da hidrlise da frutose entram na via glicolitica como gliceraldeido-3-fosfato. A d-galactose primeiro fosforilada pelo ATP em c-1 e atravs da enzima galactoquinase. A galactose-1-fosfat convertida a glicose-1-fosfato por um conjunto de reaes nas quais a uridina difosfato (UDP) funciona de forma semelhante a uma coenzima como transportadora de molculas de hexoses. Os dissacarideos no podem entrar diretamente na via gl;icolitica sem primeiro ser extracelularmente hidrolisados em monossacarideos. Assim formados, os monossacarideos so transportados para o interior das clulas que recobrem o intestino. partir delas eles passam para a corrente sangnea e so transportados ate o fgado. A eles so fosforilados e introduzidos na seqncia glicolitica como descrito. 5 COMO FEITA A REGULACAO DO METABOLISMO NO E NO FIGADO PELA FOSFORILASE DO GLICOGENIO ? No msculo, a finalidade da glicolise a produo de ATP, e a velocidade dela aumenta quando o msculo demanda mais ATP por contrair-se mais vigorosamente ou mais freqentemente. Nos micitos a mobilizao do glicogenio armazenado para fornecer combustvel para a glicolise realizada pela fosforilase do glicogenio, que degrada glicogenio em glicose-1-fosfato. No msculo esqueltico a fosforilase do glicogenio ocorre em duas formas: uma forma catabolicamente ativa, a fosforilase a , e uma forma quase sempre inativa, a fosforilase b, que predomina no msculo em repouso. A velocidade da quebra do glicogenio no msculo depende parcialmente do valor da relao

entre fosforilase a e fosforilase b, que ajustada pela ao de alguns hormnios como epinefrina. A epinefrina um sinal para o msculo esqueltico acionar o processo que leva produo de ATP, o qual necessrio para a contrao muscular. A fosforilase do glicogenio ativada para fornecer glicose-1-fosfato que ser lanada na via glicolitica. Superposta ao controle hormonal esta a regulao alosterica, muito mais rpida, da fosforilase b do glicogenio pelo ATP e Amp. A fosforilase b ativada pelo seu efetor alosterico AMP, o qual aumenta em concentrao no msculo durante a quebra do ATP na contrao. A estimulao da fosforilase b pelo AMP pode ser impedida por altas concentraes de ATP, que bloqueia o sitio de ligao do AMP, , s vezes, referido como forma AMP independente, e a fosforilase b como a forma dependente do AMP. A fosforilase do glicogenio, no msculo esqueltico tambm controlada pelo clcio, o sinalizador intracelular da contrao muscular, que u ativador alosterico da fosforilase b quinase. Quando um aumento transitrio do Ca 2+ intracelular dispara a contrao muscular, ele tambm acelera a converso da fosforilase b para a fosforilase a, mais ativa. No fgado serve para manter um nvel constante de glicose no sangue, produzindo e exportando glicose quando outros tecidos precisam dela, e importando e armazenado glicose quando fornecida em excesso pelo alimentos ingeridos na dieta. A fosforilase do glicogenio do fgado semelhante do msculo, entretanto, suas propriedades reguladoras so ligeiramente diferentes. O glicogenio heptico serve como reservatrio e libera glicose no sangue quando a glicose sangnea tem seus nveis abaixo do normal. A glicose-1-fosfato formada pela fosforilase do fgado convertida em glicose-6-fosfato pela ao da fosfoglicomutase. Ento, a glicose-6-fosfatase, uma enzima presente no fgado, porm no no msculo, remove o fosfato da hexose. Quando o nvel de glicose esta baixo no sangue, a glicose livre produzida do glicogenio do figado liberada na corrente sangnea e transportada aos tecidos que a requerem como combustvel. A fosforilase do glicogenio do fgado esta sobre controle hormonal, como o glucagon, que produzido pelo pncreas quando a glicose sangnea tem sua concentrao rebaixada para nvel menores que o normal. Esse hormnio desencadeia uma serie de eventos que resulta na converso da fosforilase b em fosforilase a , aumentando a velocidade de quebra de glicogenio e acelerando a velocidade de liberao da glicose no sangue. A fosforilase do glicogenio esta sujeita a regulao alosterica no pelo AMP, mas pela glicose. Quando a concentrao de glicose no sangue aumenta, a glicose entra nos hepatcitos e liga-se ao sitio regulador da fosforilase a do glicogenio que leva a desfosforilao provocada pela fosforilase fosfatase. Desta maneira a fosforilase do glicogenio age como sensor do fgado, diminuindo a quebra do glicognio sempre que o nvel de glicose no sangue esta alto. 6 EM QUAIS ASPECTOS A GLICOQUINASE DIFERE DAS ISOENZIMAS DAS HEXOQUINASES DO MSCULO ? Primeiro, a concentrao de glicose na qual a glicoquinase esta no meio saturada muito maior que a concentrao usual da glicose no sangue. Como a concentrao de glicose no hepatocitos mantida em valores prximos daqueles existentes no sangue, graas a um eficiente sistema de transporte de glicose, esta propriedade da glicoquinase permite a sua regulao direta pela nvel de glicose sangnea. A glicoquinase no inibida pelo seu produto de reao, a glicose-6-fosfato, mas por seu isomero, a frutose-6fosfato, a qual esta sempre em equilbrio com a glicose-6fosfato devido a ao da enzima fosfoglicose isomerase. A inibio parcial da glicoquinase pela frutose-6fosfato mediada por uma protena adicional, a protena reguladora. Esta protena reguladora tambm tem afinidade pela frutose-1-fosfato e compete com a frutose-6-fosfato, cancelando o seu efeito inibidor sobre a glicoquinase. 7 QUAL O PAPEL REGULADOR DA PIRUVATO QUINASE NA GLICOLISE ? Sempre que a clula tem uma alta concentrao de ATP, ou sempre que haja amplas quantidades de combustveis disponveis para a liberao de energia atravs da respirao celular, a glicolise inibida pelo rebaixamento da atividade da piruvato quinase. Quando a concentrao de ATP cai, a afinidade da piruvato quinase por fosfoenolpiruvato aumenta, possibilitando a enzima catalisar a sntese do ATP, mesmo que a concentrao de fosfoenolpiruvato seja relativamente baixa. O resultado uma alta concentrao de ATP no estado de equilibro estacionrio. 8 FALE SOBRE A REGULACAO ALOSTERICA DA FOSFOFRUTOQUINASE-1 . A glicose-6-fosfato pode fluir tanto para a glicolise como para uma das vias oxidativas secundarias. A reao irreversvel catalisada pela foafofrutoquinase-1 o passo que compromete a clula com a metabolizao da glicose atravs da glicolise. O ATP no apenas o substrato para a fosfofrutoquinase-1, mas tambm o produto final da via glicolitica. Quando nveis altos de ATP sinalizam que a clula esta produzindo o ATP mais depressa do que consome, o ATP inibe a fosfofrutoquinase-1 ligando-se a um sitio alosterico e diminuindo a afinidade da enzima pelo seu outro substrato, a frutose-6-fosfato. Quando o consumo de ATP sobrepassa a sua produo o ADP e o AMP aumentam em concentrao, e agem alostericamente para diminuir esta inibio pelo ATP. Esses efeitos combinamse para produzir atividades maiores da enzima quando a frutose-6-fosfato, ADP ou AMP aumentam de concentrao para baixar a atividade quando o ATP se acumula.

O citrato tambm age como um ragulador alosterico da fosfofrutoquinase-1. Concentraes altas de citrato aumentam o efeito inibidor do ATP, reduzindo ainda mais o fluxo da glicose atravs da glicolise. O regulador alosterico mais significativo da foafofrutoquinase-1 a frutose-2,6-bifosfato que ativa fortemente a enzima. A concentrao da frutose-2,6-bifosfato no fgado diminui em resposta ao hormnio glucagon, desacelerando a glicolise e estimulando a sntese de glicose pelo orago. 9 COMO A GLICOSE E A GLICONEOGENESE SO REGULADAS DE FORMA COORDENADA ? A gliconeognese emprega a maior parte das mesmas enzimas que agem na gliclise, mas ela no simplesmente o reverso desta via. Sete das reaes glicolticas so livremente reversveis e as enzimas que catalisam cada uma destas reaes tambm funcionam na gliconeogenese. Trs reaes da gliclise so to exergonicas que so essencialmente irreversveis : so aquelas catalisadas pela hexoquinase, fosfofrutoquinase-1 e piruvato quinase. A gliconeogenese emprega desvios ao redor de cada um desses passos irreversveis. Para prevenir o aparecimento de ciclos fteis nos quais a glicose simultaneamente degradada pela gliclise e ressintetizada pela gliconeogenese, as enzimas que so exclusivas para cada uma das vias so reguladas de maneira recproca por efetores alostricos comuns. A frutose-2,6-bifosfato, um ativador potente da PFK-1 do fgado e portanto da gliclise, tambm inibe a FBPase-1, e assim diminui a gliconeogenese. O glucagon, hormnio que sinaliza um baixo nvel de acar , diminui o nvel da frutose-2,6-bifosfato no fgado, baixando o consumo de glicose pela glicolise e estimulando a produo de glicose para exportao pela gliconeogenese. 10- O QUE SO AS VIAS SECUNDARIAS DA OXIDACAO DA GLICOSE E O QUE ELAS PRODUZEM ? EXPLIQUE COMO CADA PRODUTO FORMADO. So vias catabolicas que podem ser o destino da glicose e levam a produtos especializados necessrios para a clula, que so pentoses fosfato, acido uronico e acido ascobico, constituindo parte do metabolismo secundrio da glicose. A via das pentoses fosfato, tambm chamada de via do fosfogliconato, produz NADPH e ribose-5-fosfato e gera pentoses indispensveis, particulamente a D-ribose, empregada na biossintese de cidos nucleicos. A Primeira reao da via das pentose fosfsto a desidrogenao enzimatica da glicose-6-fosfato pela glicose-6-fosfato desidrogenase, para formar 6-fosfoglicono- -lactona, um ster intramolecular, que hidrolizado para a forma cida livre 6-fosfogliconato por uma lactonase especifica. O NADP+ o receptor de eltrons e o equilbrio final est muito deslocado na direo de formao do NADPH. No passo seguinte, o 6-fosfogliconato sofre desidrogenao e descarboxilacao pela 6-fosfogliconato desidrogenase para formar a cetopentose D-ribulose-5-fosfato, uma reao que gera a segunda molcula de NADPH. A fosfopentose isomerase converte ento a ribose-5-fosfato no seu isomero aldolase a D-ribose-5-fosfato. Em alguns tecidos , a via das pentoses fosfato termina neste ponto e a equao final pode ser escrita : Glicose-6-fosfato + 2 NADP+ + H2O ______ ribose-5-fosfato + CO2 + 2 NADPH + 2 H+ O resultado liquido a produo de NADPH para as reaes de reduo biossintetica e a produo de ribose-5fosfato como precursora para a sntese de nucleotideos. D- glicuronato, importante na detoxificacao e na excreo de compostos orgnicos estranhos, e acido ascorbico ou vitamina C so produzidos por vias secundarias da glicose. Nesta via, a glicose-1-fosfato primeiro convertida em UDP-glicose pela reao com UDP. A poro glicose da UDP-glicose ento desidrogenada para produzir UDP_glicuronato, um outro exemplo do uso de derivados do UDP como intermedirio das transformaes enzimatricas dos aucares. O D-glicuronato um intermedirio na converso da D-glicose em acido ascorbico. Ele reduzido pelo NADPH no acar de seis tomos de carbono L-gulonato, o qual convertido na sua lactona. A L-gulonolactona desidrogenada pela flavoproteina gulonolactona oxidase para formar o acido ascorbico. O homem no capaz de sintetizar o acido ascorbico, sendo necessrio obte-lo atravs da dieta. Pessoas com vitamina C insuficiente produz uma doena chamada escorbuto.

CAP . 14

1. Dividindo-se a gliclise em duas partes, indo a primeira desde a glicose at gliceraldedo-3-fosfato e diidroxicetona fosfato, chamada fase preparatria; e a segunda parte indo at piruvato, chamada fase de pagamento da gliclise. Faa um balano energtico (a nvel de ATP) comparando as duas fases.
Na fase preparatria da gliclise a energia do ATP investida, aumentando o contedo de energia livredos intermedirios, e as cadeias carbnicas de todas a hexoses metabolizadas so convertidas em um produto comum. o gliceraldedo-3- fosfato. O ganho energtico provm da fase de pagamento da gliclise. Cada molcula de gliceraldedo-3-fosfato oxidada e fosforilada por fosfato inorgnico para formar 1,3-difosfoglicerato. A liberao de energia ocorre quandoas duas molculas de 1,3-difosfoglicerato so convertidas a duas molculas de piruvato. A maior parte desta energia conservada pela fosforilao acoplada de 4 molculas de ADP para ATP. O produto lquido so duas molculas de ATP por molcula de glicose empregada, uma vez queque duas molculas de ATP so investidas na fase de preparao da gliclise. 2. Sabe-se que o piruvato formado na gliclise, no o produto final na obteno de energia. Cite quais as trs rotas alternativas da degradao deste produto(piruvato). Nos organismos aerbicos ou tecidos sob condies aerbicas, a gliclise constitui apenas um primeiro estgio da degradao completa da glicose. O piruvato oxidado com perda do seu grupo carboxila como CO2 , para liberar o grupo acetila da Acetil-coenzima A, a qual ento totalmente oxidada a CO2 pelo ciclo do cido ctrico. Os eltrons so dessas oxidaes so passados para o O2 de transportadores na mitocndria, formando H2O. A energia liberada nas reaes de transferncias de eltrons permite a sntese de ATP nas mitocndrias. A segunda rota para o metabolismo do piruvato a sua reduo a lactato atravs da chamada via da fermentao do cido ltico. Quando um tecido precisa funcionar anaerobicamente, como o tecido muscular esqueltico em contrao vigorosa, o piruvato no pode ser oxidado por falta de oxignio. Nestas condies o piruvato reduzido a lactato. Certos tecidos e tipos celulares ( retina, crebro, eritrcitos) convertem o glicose a lactato mesmo sob condies anaerbicas. O lactato tambm o produto da gliclise sob condies anaerbicas nos microrganismos que realizam a fermentao lctica. A terceira rota principal do metabolismo do piruvato leva ao etanol. Em alguns tecidos vegetais e em certos invertebrados e microrganismos como a levedura da fabricao da cerveja, o piruvato convertido anaerobicamente em etanol e CO2, em um processo chamado de Fermentao alcolica, fermentao do etanol ou, fermentao do lcool.

1.

Qual a provvel importncia dos grupos fosfatos em todos os intermedirios da gliclise?

a) Os grupos fosfatos so ionizados em pH 7, dando assim a cada um dos intermedirios da gliclise uma carga negativa. Como a membrana plasmtica impermevel s molculas que exibem cargas eltrivas, os intermedirios fosforilados no podem se difundir para fora da clula. Depois da fosforilaco inicial a clula no precisa mais despender energia para reter os intermedirios fosforilados, a respeito da grande diferena entre as concentraes intra e extra celulares desses compostos. b) Os grupos fosfato so componentes essenciais na conservao enzimtica da energia metablica. A energia liberada na quebra de ligaes anidros do cido fosfrico (como aquelas no ATP) parcialmente conservada na formao de steres de fosfato, tais como glicose-6-fosfato. Os compostos fosfricos de alta energia, formados na gliclise (1,3-difosfoglicerato e fosfenolpiruvato), doam grupos fosfato ao ADP para formar o ATP. c)A ligao de grupos fosfato aos stios ativos das enzimas fornece energia de ligao que contribui para baixar a energia de ativao e aumentara especificidade das reaes catalizadas enzimaticamente. Os grupos fosfato do ADP, ATP e dos intermedirios glicolticos formam complexos com Mg2+ e os stios de ligao dos substratos de muitas enzimas glicolticas so especficos para estes complexos de Mg2+. Praticamente todas as enzimas glicolticas requerem Mg2+ para atividade. 4. Descreva duas maneiras de inibir a enzima gliceraldeiddo- 3- fosfato desidrogenase e explique o acmulo das fosfato da via glicoltica. A enzima gliceraldeido -3 P -desidrogenase inibida pela adio de iodoacetato ou pela falta de NAD+ livre para o processo. O iodoacetato se liga ao grupo SH de um resduo essencial de cisteina no stio ativo da enzima . Desta forma , impede a transformao cataltica do gliceraldeido 3 -fostato em 1,3 bifosfoglicerato.

O NAD+ , presente no stio ativo da enzima, o responsvel pela oxidao (captao de hidrognio ) do intermedirio enzima-substrato , sendo convertido a NADH . Para que a enzima possa ser reutilizada, o NADH ligado a enzima reoxidado pelo NAD+ livre. Ento , na ausncia de NAD+ livre o processo no ocorre. A inativao da enzima gliceraldeido-3 P-desidrogenase permitiria o acmulo de gliceraldeido 3-fosfato por interromper a sua converso em 1,3 bifosfoglicerato . O que se verifica o acmulo de hexoses fosfatadas , como a frutose 1,6 bifosfato ,porque a quebra das hexoses gerando dois compostos de trs carbonos (diidroxicetona P e gliceraldido-3-P) um processo envolvendo G = 23.8KJ/mol . A formao G-3P a partir de DHAP tambm desfavorecida por G = 7.5 kJ/mol. 5. Louis Pasteur em seus estudos sobre a fermentao da glicose por leveduras , descobriu que o consumo da glicose um condies anaerbicas eram muitas vazes maior do que sob condies aerbicas. Justifique com base bioqumica o efeito Pasteur. O rendimento em ATP da gliclise sob condies anaerbicas ( 2 ATP por molcula de glicose ) muito menor do que o obtido na oxidao completa da glicose at CO sob condies aerbicas ( 36 ou 38 ATP por molcula de glicose ) . Portanto , para produzir a mesma quantidade de ATP , necessrio consumir perto de 18 vezes mais glicose em condies anaerbicas do que em aerbicas . 6. Comente sobre a canalizao de um substrato entre duas enzimas na via glicoltica. A converso do gliceraldeido 3-fosfato na via glicoltica envolve duas enzimas combinadas, a gliceraldeido 3fosfato desidrogenase com a 3-fosfogliceratoquinase , que catalisam a converso em dois passos . A combinao das enzimas permite que o intermedirio ( 1,3bifosfoglicerato ) seja transmitido da superfcie da desidrogenase para a superfcie da quinase de maneira mais rpida do que no ambiente aquoso ( o que ocorre na ausncia da quinase ) . No ambiente aquoso, onde o 1,3bifosfoglicerato se difunde at a quinase , a velocidade da primeira etapa maior do que o processo total com enzima conjugada. Estudos fsicos mostram que as duas enzimas podem formar um complexo estvel , como necessrio para haver canalizao do substrato entre elas. 7. Como o glicognio e o amido so degradados? As unidades de glicose dos ramos externos de molcula do glicognio e do amido ganham entrada na via glicoltica atravs da ao seqencial de duas enzimas: a fosforilase do glicognio ( ou da sua similar nos vegetais, a fosforilase do amido ) e a fosfoglicomutase. A fosforilase do glicognio catalisa a reao em que uma ligao glicosdica ( 1 4 ) , reunindo dois resduos de glicose no glicognio, sofre o ataque por fosfato inorgnico , removendo o resduo terminal de glicose como -D-glicose-1-fosfato. A fosforilase do glicognio ( ou fosforilase do amido ) age repetitivamente nas extremidades no redutoras das ramificaes do glicognio ( ou da amilopectina ) , at que seja atingido num ponto distante quatro resduos de uma ramificao ( 1 6 ) . Aqui cessa a ao da fosforilase do glicognio ou do amido. A continuao da degradao pode ocorrer apenas depois da ao de uma enzima de desramificao ou oligo ( 1 6 ) para ( 1 4 ) glicanotransferase , que catalisa as duas reaes sucessivas que removem as ramificaes, isto , transfere trs resduos de -D-glicose que esto ligados por ligaes ( 1 4 ) para a cadeia principal , aonde so fosforilados pela fosforilase do glicognio em glicose-1-fosfato, e quebra a ligao ( 1 6 ) do ultimo resduo de -D-glicose que fosforilado em glicose1-fosfato. A glicose-1-fosfato , o produto final das reaes de fosdorilase de glicognio e do amido , convertida em glicose6-fosfato pela fosfoglicomutase, que ento entra na gliclise. OBS: Esta reao de fosforlise , que ocorre durante a mobilizao intracelular do glicognio armazenado , diferente da hidrlise das ligaes glicosdicas pela amilase , que ocorre durante a degradao intestinal do amido ou do glicognio 8. Outros monossacardios podem entrar na via glicoltica , como feito esse processo? Cite um exemplo. Na maioria dos organismos vrias hexoses diferentes da glicose podem sofrer a gliclise, aps suas respectivas converses para um derivado fosforilado. Como exemplo temos a D-galactose, derivada por hidrlise do dissacardio lactose ( acar do leite ) , primeiro fosforilada pelo ATP em C-1 , atravs da enzima galactoquimase:

GALACTOSE + ATP GALACTOSE-1-FOSFATO + ADP

A galactose-1-fosfato convertida, ento , no seu epmero em C-4 , a glicose-1-fosfato , por um conjunto de reaes nas quais a uridina difosfato ( UDP ) funciona de forma semelhante a uma coenzima como transportadora de molculas de hexoses. 9. Como regulada a fosforilase do glicognio no msculo e no fgado?

MUSCULO: No msculo esqueltico, a fosforilase do glicognio ocorre em duas formas: uma forma cataliticamente ativa, a fosforilase A, e uma forma quase sempre inativa, a fosforilase B ; a ltima predomina no msculo em repouso. A velocidade da quebra do glicognio no msculo depende parcialmente do valor da relao entre fosforilase A ( ativa ) e fosforilase B ( menos ativa ) , que ajustada pela ao de alguns hormnios , como a epinefrina . A fosforilase A consiste de duas subunidades idnticas, em cada uma dessas subunidades um resduo de serina na posio 14 est fosforilado . A fosforilase B estruturalmente idntica , exceto pela no-fosforilao dos resduos de serina 14 . A fosforilase A convertida na fosforilase B , menos ativa , por desfosforilao , catalisada por uma enzima denominada fosforilase A fosfatase . A fosforilase B reconvertida em fosforilase A pela enzima fosforilase b quinase , que catalisa a transferncia do fosfato do ATP para a serima 14. Os hormnios , em ltima instncia , regulam a inter-converso da fosforilase A e B pela regulao da fosforilase A fosfatase e fosforilase B quinase. A epinefrina liberada no sangue pela glndula adrenal quando um animal subitamente confrontado por uma situao que requer atividade muscular vigorosa. A epinefrina um sinal para o msculo esqueltico acionar o processo que leva produo de ATP , o qual necessrio para contrao muscular. A fosforilase do glicognio ativada para fornecer glicose-1-fosfato , que ser lanada na via glicoltica. A ligao da epinefrina ao seu receptor especfico na membrana plasmtica de uma clula muscular ativa a fosforilase B quinase e inativa a fosforolase A fosfatase , deslocando o equilbrio na direo de formao da espcie ativa da fosforilase do glicognio. Quando a emergncia termina , a liberao de epinefrina cessa, a fosforilase B quinase reverte para sua forma original de baixa atividade e a relao de fosforilase A e fosforilase B retorna aquela que era no msculo em repouso. Superposta ao controle hormonal est a regulao alostrica , muito mais rpida , da fosforilase B do glicognio pelo ATP e AMP. A fosforilase B , a forma relativamente inativa , ativada pelo seu efetor alostrico AMP , o qual aumenta em concentrao no msculo durante a quebra do ATP que acompanha a contrao. A estimulao de fosforilase B pelo AMP pode ser impedida por altas concentraes de ATP , que bloqueia o stio de ligao do AMP. A atividade da fosforilase B reflete assim a relao entre as concentraes de AMP e ATP. A fosforilase A , que no estimulada pelo AMP , , s vezes , referida como a forma AMP independente , e a fosforilase B como a forma dependente de AMP. No msculo em repouso aproximadamente toda fosforilase est na forma B , que inativada porque o ATP est presente em concentrao muito maior que a do AMP. A atividade muscular vigorosa aumenta a relao AMP-ATP , muito rapidamente ativando por meios alostricos a fosforilase B . No msculo esqueltico ainda h um terceiro ripo de controle da fosforilase do glicognio . O clcio , o sinalizador intracelular da contrao muscular, tambm um ativador alostrico da fosforilase B quinase. Quando um aumento transitrio do Ca2+ intracelular dispara a contrao muscular , ele tambm acelera a converso da fosforilase B para a fosforilase A , mais ativa. FGADO: A fosforilase do glicognio do fgado semelhante quela do msculo; tambm ela um dmero de subunidades idnticas e a fosforilao e desfosforilaao na serina 14 interconverte as formas B e A .Entretanto , suas propriedades reguladoras so ligeiramente diferentes daquelas da enzima muscular , refletindo o papel diferente da quebra do glicognio no fgado. O glicognio heptico serve como um reservatrio e libera glicose no sangue quando a glicose sangnea tem seus nveis abaixo de normal ( 4 a 5 mM ) . A glicose 1-fosfato formada pela fosforilase do fgado convertida (como no msculo ) em glicose-6-fosfato pela ao da fosfoglicomutase. Ento , a glicose-6-fosfatase ,uma enzima presente no fgado , porm no no msculo , remove o fosfato da hexose:

GLICOSE-6-FOSFATO + H2O GLICOSE + Pi Quando o nvel de glicose sangnea est baixo , a glicose livre produzida do glicognio no fgado por essas reaes liberada na corrente sangnea e transportada aos tecidos que a requerem como combustvel.

A fosforilase do glicognio do fgado , como aquela do msculo , est sobre controle hormonal. O glucagon um hormnio produzido pelo pncreas , quando a glicose sangnea tem sua concentrao rebaixada para nveis menores que o normal . Quando o glucagon liga-se ao seu receptor na membrana plasmtica de um hepatcito , uma cascata de eventos essencialmente similares quela do msculo resulta na converso da fosforilase B em fosforilase A , aumentando a velocidade de quebra do glicognio e acelerando , a velocidade de liberao da glicose no sangue. A fosforilase do glicognio do fgado como quela do msculo est sujeita regulao alostrica, mas neste caso o regulador alostrico no o AMP , mas a glicose. Quando a concentrao de glicose no sangue aumenta , a glicose entra no hepatcito e liga-se ao stio regulador da fosforilase A do glicognio , provocando uma mudana conformacional que expe os de serina 14 fosforilado desfosforilao provocado pila fosforilase A fosfatase. Desta maneira , a fosforilase A do glicognio age como um sensor do fgado, diminuindo a quebra do glicognio sempre que o nvel de glicose no sangue est alto. 10 . Como se da a produo de D-ribose-5-fosfato atravs da via das pentoses fosfato (via secundria de oxidao da glicose ) ? A primeira reao da via das pentoses fosfato a desidrogenao enzimtica da glicose-6-fosfato pela glicose-6fosfato desidrogenase , para formar 6-fosfoglicono- -lactona , um ster intramolecular , que hidrolizado para a forma cida livre 6-fosfogliconato por uma lactonase especfica . O NADP+ o receptor de eltrons e o equilbrio final est muito deslocado na direo da formao do NADPH . No passo seguinte , o 6-fosfogliconato sofre desidrogenao e descarboxilao pela 6-fosfogliconato desidrogenase para formar a cetopentose D-ribulose-5fosfato , uma reao que gera a segunda molcula de NADPH. A fosfopentose isomerase converte ento a ribulose5-fosfato no seu ismero aldose a D-RIBOSE-5-FOSFATO. GLICOSE-6-FOSFATO + 2NADP+ + H2O RIBOSE-5-FOSFATO + CO2 + 2NADPH + 2H+ O resultado lquido a produo de NADPH para as reaes de reduo biossinttica e a produo de ribose-5fosfato como precursora para a sntese de nucleotdeos. CAPTULO 14: GLICLISE E O METABOLISMO DAS HEXOSES

1- Conceitue gliclise e descreva sucintamente sobre suas fases. A gliclise uma via central e quase universal do catabolismo da glicose. a via atravs da qual, na maioria das clulas, ocorre o maior fluxo de carbono. Em certos tecidos e tipos celulares de mamferos, a glicose, a partir da gliclise, a principal ou mesmo a nica fonte de energia metablica. Alguns tecidos vegetais obtm a maior parte de sua energia da gliclise; muitos microrganismos anaerbicos so inteiramente dependentes desta via. Na gliclise, uma molcula de glicose degradada em uma srie de reaes catalisadas por enzimas para liberar duas molculas de piruvato. Alis, todas as enzimas da gliclise de muitos organismos, atualmente, j foram cuidadosamente purificadas, estudadas e tiveram suas estruturas tridimensionais determinadas a partir de estudos cristalogrficos com raios-X. Durante as reaes seqenciais, parte da energia livre da glicose conservada na forma de ATP. O processo da gliclise difere de uma espcie para outra apenas em detalhes de sua regulao e no destino subsequente do piruvato formado. Os princpios termodinmicos e os tipos de mecanismos reguladores glicolticos so encontrados em todas as vias do metabolismo celular. A glicose tem seis tomos de carbono e sua diviso em duas molculas de piruvato, cada uma com trs tomos de carbono, ocorre em uma seqncia de 10 passos e os cinco primeiros constituem a fase preparatria. Nessas reaes, a glicose inicialmente fosforilada no grupo hidroxila em C-6 (carbono 6). A D-glicose-6-fosfato assim formada convertida em frutose-6-fosfato, a qual novamente fosforilada, desta vez em C-1, para liberar D-frutose1,6-difosfato (Como todos os derivados dos acares que ocorrem na via glicoltica so ismeros D, omitiremos a designao D, exceto quando quisermos enfatizar a estereoqumica). O ATP o doador de fosfato nas duas fosforilaes. A seguir, a frutose-1,6-difosfato quebrada para liberar duas molculas com trs carbonos cada, a diidroxiacetona-fostato e o gliceraldedo-3-fosfato. Este o passo em que ocorre a quebra ("lisys") que d nome ao processo. A diidroxiacetona-fosfato isomerizada em uma segunda molcula de gliceraldedo-3-fosfato e com isso termina a primeira fase da gliclise. Note que duas molculas de ATP precisam ser investidas para ativar, ou iniciar, a molcula de glicose para a sua quebra em duas partes com trs carbonos; haver, pois, um retorno positivo para este investimento. Resumindo: na fase preparatria da gliclise, a energia do ATP investida, aumentando o contedo de energia livre dos intermedirios e fazendo com que as cadeias carbnicas de todas as hexoses metabolizadas sejam convertidas em um produto comum, o gliceraldedo-3-fosfato.

O ganho energtico provm da fase de pagamento da gliclise. Cada molcula de gliceraldedo-3-fosfato oxidada e fosforilada por fosfato inorgnico (no pelo ATP) para formar 1,3-difosfoglicerato. A liberao de energia ocorre quando as duas molculas de 1,3-difosfoglicerato so convertidas em duas molculas de piruvato. A maior parte dessa energia conservada pela fosforilao acoplada de quatro molculas de ADP para ATP. O produto lquido so duas molculas de ATP por molcula de glicose empregada, uma vez que houve investimento de 2 ATP na fase preparatria da glicose. A energia tambm conservada na fase de pagamento na formao de duas molculas de NADH por molcula de glicose. Nas reaes seqenciais da gliclise trs tipos de transformaes so particularmente notveis: 1) Degradao do esqueleto carbnico da glicose para produzir piruvato; 2) Fosforilao de ADP a ATP pelos compostos de fosfato de alta energia formados durante a gliclise; e 3) Transferncia de tomos de hidrognio ou eltrons para o NAD+, formando NADH. O destino do produto (piruvato) depende do tipo de clula e das circunstncias metablicas. 2- Quais so as trs rotas catablicas alternativas que o piruvato formado pela gliclise pode seguir? Nos organismos aerbicos ou tecidos sob condies aerbicas, a gliclise constitui apenas um primeiro estgio da degradao completa da glicose. O piruvato oxidado com perda de seu grupo carboxila como CO2 para liberar o grupo acetila da Acetil-coenzima A (Acetil-CoA), a qual ento totalmente oxidada a CO2 pelo ciclo do cido ctrico (ciclo de Krebs). Os eltrons originados dessas oxidaes so passados para o O2 atravs de uma cadeia de transportadores na mitocndria, formando H2O. A energia liberada nas reaes de transferncia de eltrons permite a sntese de ATP nas mitocndrias. A segunda rota para o metabolismo do piruvato a sua reduo a lactato atravs da chamada via da fermentao do cido ltico. Quando um tecido precisa funcionar anaerobicamente, como o tecido muscular esqueltico em contrao vigorosa, o piruvato no pode ser oxidado por falta de O2. Nestas condies, o piruvato reduzido a lactato. Certos tecidos e tipos celulares (retina, crebro, eritrcitos) convertem a glicose a lactato mesmo em condies aerbicas. O lactado tambm o produto da gliclise sob condies anaerbicas nos microrganismos que realizam a fermentao lctica. A terceira rota principal do metabolismo do piruvato leva ao etanol. Em alguns tecidos vegetais e em certos invertebrados e microrganismos como a levedura da fabricao de cerveja, o piruvato convertido anaerobicamente em etanol e CO2, no processo chamado fermentao alcolica, ou do etanol ou do lcool. 3- Sabendo-se que todos os intermedirios da gliclise compreendidos entre a glicose e o piruvato so fosforilados, cite a importncia dos grupos fosfatos. Os grupos fosfatos so ionizados em pH 7, dando, assim, a cada um dos intermedirios, uma carga negativa. Como a membrana plasmtica impermevel s molculas carregadas, os intermedirios fosforilados no podem se difundir para fora da clula. Depois da fosforilao inicial, a clula no precisa mais gastar energia para reter tais intermedirios, a despeito da grande diferena entre as concentraes intra e extra-celulares desses compostos. Alm disso, os grupos fosfato so componentes essenciais na conservao enzimtica da energia metablica. A energia liberada na quebra de ligaes anidras do cido fosfrico (como aquelas no ATP) parcialmente conservada na formao de steres de fosfato, tais como a glicose-6-fosfato. Os compostos fosforilados de alta energia formados na gliclise (1,3-difosfoglicerato e fosfoenolpiruvato) doam grupos fosfato ao ADP para formar ATP. A ligao dos grupos fosfato so aos stios ativos das enzimas fornece energia de ligao que contribui para baixar a energia de ativao e aumentar a especificidade das reaes catalisadas enzimaticamente. Os grupos fosfatos do ADP, ATP e dos intermedirios glicolticos formam complexos com Mg2+ e os stios de ligao dos substratos de muitas enzimas glicolticas so especficos para estes complexos de Mg2+. Praticamente todas as enzimas glicolticas requerem Mg2+ para terem atividade. 4. Quais as enzimas que participam da gliclise? A reao irreversvel que transforma a glicose em glicose-6-fosfato catalisada pela hexoquinase. Para ser ativada, ela requer Mg2+, porque o verdadeiro substrato da enzima no o ATP-4, mas sim o complexo MgATP-2. A enzima fosfoexoisomerase catalisa a isomerizao reversvel de uma aldose, a glicose-6-fosfato, em uma cetose, a frutose-6-fosfato. Tal enzima tambm requer Mg2+ e especfica para as duas hexoses.

A enzima fosfofrutoquinase-1 catalisa a transferncia de um grupo fosfato do ATP para a frutose-6-fosfato, convertendo-a em frutose-1,6-difosfato. A reao essencialmente irreversvel nas condies celulares. A atividade da PFK-1 aumentada sempre que o suprimento de ATP da clula torna-se baixo ou quando existe um excesso de produtos da hidrlise do ATP, ADP e AMP, particularmente este ltimo. Esta enzima inibida sempre que a clula tem amplo suprimento de ATP e quando ela est bem suprida de outros combustveis como os cidos graxos. O citrato, um intermedirio chave na oxidao aerbica do piruvato tambm age como regulador alostrico da PFK-1. Concentraes altas de citrato aumentam o efeito inibidor do ATP, induzindo ainda mais o fluxo da glicose atravs da gliclise. O regulador alostrico mais significativo da PFK-1 a frutose-2,6-difosfato, que ativa fortemente a enzima. A enzima frutose-1,6-difosfato aldolase catalisa a condensao reversvel de grupos aldol. A frutose-1,6-difosfato quebrada para liberar duas trioses fosfato diferentes, o gliceraldedo-3-fosfato (aldose) e a diidroxiacetona-fosfato (cetose). Embora a reao da aldolase tenha uma variao da energia livre padro fortemente positiva na direo da diviso da hexose, na clula, ela pode ocorrer nas duas direes. A diidroxiacetona-fosfato rpida e reversivelmente convertida em gliceraldedo-3-fosfato pela enzima triose fosfato isomerase. O primeiro passo da fase de pagamento da gliclise a converso do gliceraldedo-3-fosfato em 1,3difosfoglicerato, catalisada pela gliceraldedo-3-fosfato desidrogenase. Nessa fase, os compostos sofrem oxidao e a coenzima NAD+ que recebe o on hidreto (:H-) transformando-se em sua forma reduzida NADH. A enzima fosfogliceroquinase transfere o grupo fosfato de alta energia do grupo carboxila do 1,3-difosfoglicerato para o ADP, formando ATP e 3-fosfoglicerato. A enzima fosfogliceromutase catalisa a transferncia reversvel do grupo fosfato entre C-3 e C-2 do glicerato, levando ao 2-fosfoglicerato. O on Mg2+ essencial nessa reao. A enolase promove a remoo reversvel de uma molcula de H2O do 2-fosfoglicerato para liberar fosfoenolpiruvato, sendo este um composto muito energtico. O ltimo passo da gliclise a transferncia do grupo fosfato do fosfoenolpiruvato para o ADP, catalisada pela piruvato quinase. Altas concentraes de ATP a inibem alostericamente, diminuindo sua afinidade pelo substrato, o fosfoenolpiruvato (PEP). 5- O que o processo de canalizao e como ele ocorre na via glicoltica? Neste processo, complexos multienzimticos garantem uma passagem eficiente do produto de uma enzima para a prxima enzima na via, para a qual este produto funciona como substrato. A converso do gliceraldedo-3-fosfato na via glicoltica envolve duas enzimas combinadas, a gliceraldedo-3-fosfato desidrogenase com a 3fosfogliceroquinase, que catalisam a converso em dois passos. A combinao das enzimas permite que o intermedirio (1,3-difosfoglicerato) seja transmitido da superfcie da desidrogenase para a da quinase de maneira mais rpida do que o ambiente aquoso (o que ocorre na ausncia da quinase). 6- Explique como o glicognio e o amido so degradados na fosforlise. As unidades de glicose dos ramos externos da molcula de glicognio e do amido ganham entrada na via glicoltica atravs da ao seqencial de duas enzimas: a fosforilase do glicognio e a fosfoglicomutase. A primeira catalisa a reao em que uma ligao glicosdica ( 1 4), que une dois resduos de glicose no glicognio, sofre ataque por fosfato inorgnico, removendo o resduo terminal da glicose como -D-glicose-1-fosfato. Esta reao de fosforlise, que ocorre durante a mobilizao intracelular do glicognio armazenado, diferente da hidrlise das ligaes glicosdicas pela amilase, que ocorre durante a degradao intestinal do amido ou do glicognio; na fosforlise, parte da energia da ligao glicosdica preservada na formao do ster fosfrico, glicose-1-fosfato. O piridoxal fosfato um cofator essencial da reao da fosforilase do glicognio; o seu grupo fosfato age como um catalisador cido geral, promovendo o ataque pelo Pi da ligao glicosdica. A fosforilase do glicognio (ou fosforilase do amido) age repetidamente nas extremidades no redutoras das ramificaes do glicognio (ou da amilopectina), at que seja atingido um ponto distante quatro resduos de uma ramificao ( 1 6). Aqui cessa a ao da fosforilase do glicognio (ou do amido). A continuao da degradao pode ocorrer apenas depois da ao de uma "enzima de desramificao" ou (1 6) para ( 1 4) glicanotransferase, que catalisa as duas reaes sucessivas que removem as ramificaes.

A glicose-1-fosfato, o produto final das reaes da fosforilase do glicognio e do amido, convertida em glicose-6fosfato pela fosfoglicoisomerase, que entra, ento, na gliclise. 7- Explique como a D-frutose pode entrar na via glicoltica. A D-frutose, presente em muitas frutas na forma livre e formada pela hidrlise da sacarose no intestino delgado, pode ser fosforilada pela hexoquinase originando frutose-6-fosfato. Esta uma via importante nos msculos e rins dos vertebrados. No fgado, a frutose entra na gliclise por uma via diferente. A enzima heptica frutoquinase catalisa a fosforilao da frutose no em C-6, mas em C-1, dando frutose-1-fosfato. Esta quebrada dando gliceraldedo e diidroxiacetona-fosfato. A ltima convertida em gliceraldedo-3-fosfato pela triose fosfato isomerase, e o gliceraldedo fosforilado pelo ATP a gliceraldedo-3-fosfato. Assim, os dois produtos da hidrlise da frutose entram na via glicoltica. Vrias outras hexoses, como a D-frutose, tambm entram na gliclise aps serem fosforiladas; como exemplo, temos a D-galactose e a D-manose. 8- Como feita a regulao do metabolismo no msculo e no fgado pela fosforilase do glicognio? No msculo, a finalidade da gliclise a produo de ATP, e a velocidade dela aumenta quando o msculo demanda mais ATP por contrair-se mais vigorosamente ou mais freqentemente. Nos micitos, a mobilizao do glicognio armazenado para fornecer energia para a gliclise realizada pela fosforilase do glicognio, que degrada o glicognio em glicose-1-fosfato. No msculo esqueltico, a fosforilase do glicognio ocorre em duas formas: uma forma catabolicamente ativa, a fosforilase a, e uma forma quase sempre inativa, a fosforilase b, que predomina no msculo em repouso. A velocidade da quebra do glicognio no msculo depende parcialmente do valor da relao entre fosforilase a e fosforilase b, que ajustada pela ao de alguns hormnios como a epinefrina. Esta um sinal para o msculo esqueltico acionar o processo que produz ATP, o qual necessrio contrao muscular. A fosforilase do glicognio ativada para produzir glicose-1-fosfato que ser lanada na via glicoltica. Superposta ao controle hormonal est a regulao alostrica, muito mais rpida, da fosforilase b do glicognio pelo ATP e AMP. A fosforilase b ativada pelo seu efetor alostrico AMP, o qual aumenta em concentrao no msculo durante a quebra do ATP na contrao. A estimulao da fosforilase b pelo AMP pode ser impedida por altas concentraes de ATP, que bloqueia o stio de ligao do AMP e, s vezes, referido como forma AMP independente, e a fosforilase b como a forma dependente do AMP. A fosforilase do glicognio no msculo esqueltico tambm controlada pelo clcio, o sinalizador intracelular da concentrao da contrao muscular, que um ativador alostrico da fosforilase b quinase. Quando um aumento transitrio do Ca2+ intracelular dispara a contrao muscular, ele tambm acelera a converso da fosforilase b para fosforilase a, mais ativa. No fgado, serve para manter um nvel constante de glicose no sangue, produzindo e exportando glicose quando outros tecidos precisam dela, e importando e armazenando glicose quando fornecida em excesso pelos alimentos ingeridos na dieta. A fosforilase do fgado semelhante do msculo, entretanto, suas propriedades reguladoras so ligeiramente diferentes. O glicognio heptico serve como reservatrio e libera glicose no sangue quando a glicose sangnea tem seus nveis abaixo do normal. A glicose-1-fosfato formada pela fosforilase do fgado convertida em glicose-6-fosfato pela ao da fosfoglicomutase. Ento, a glicose-6-fosfatase, uma enzima presente no fgado, porm no no msculo, remove o fosfato da hexose. Quando o nvel de glicose esta baixo no sangue, a glicose livre produzida do glicognio do fgado liberada na corrente sangnea e transportada aos tecidos que a requerem como combustvel. A fosforilase do glicognio do fgado esta sobre controle hormonal, como o glucagon, que produzido pelo pncreas quando a glicose sangnea tem sua concentrao rebaixada para nvel menores que o normal. Esse hormnio desencadeia uma serie de eventos que resulta na converso da fosforilase b em fosforilase a , aumentando a velocidade de quebra de glicognio e acelerando a velocidade de liberao da glicose no sangue. A fosforilase do glicognio esta sujeita a regulao alostrica no pelo AMP, mas pela glicose. Quando a concentrao de glicose no sangue aumenta, a glicose entra nos hepatcitos e liga-se ao sitio regulador da fosforilase a do glicognio que leva a desfosforilao provocada pela fosforilase fosfatase. Desta maneira a fosforilase do glicognio age como sensor do fgado, diminuindo a quebra do glicognio sempre que o nvel de glicose no sangue esta alto. 9- O que gliconeognese e como esta, juntamente com a gliclise, so reguladas de forma coordenada? Gliconeognese um processo no qual muitos organismos podem sintetizar glicose a partir de precursores simples como o piruvato e o lactato. Este processo ocorre primariamente no fgado e seu papel fornecer glicose para ser exportada para outros tecidos quando as outras fontes de glicose so exauridas. A gliconeognese emprega a maior parte das mesmas enzimas que agem na gliclise, mas ela no simplesmente o reverso desta via. Sete das reaes glicolticas so livremente reversveis e as enzimas que catalisam cada uma das reaes tambm funcionam na gliconeognese. Trs reaes da gliclise so to exergnicas que so essencialmente irreversveis: so aquelas catalisadas hexoquinase, fosfotrutoquinase-1 e piruvato quinase. A gliconeognese emprega desvios ao redor de

cada uma dessas reaes irreversveis. Por exemplo, na gliconeognese, a converso da frutose-1,6-difosfato para frutose-6-fosfato catalisada pela frutose-1,6-difosfatase (FDP-1). Para prevenir o aparecimento de ciclos fteis nos quais a glicose simultaneamente degradada pela gliclise e ressintetizada pela gliconeognese, as enzimas que so exclusivas para cada uma das vias so reguladas de maneira recproca por efetores alostricos comuns. A frutose-2,6-difosfato, um ativador potente da PFK-1 do fgado e, portanto, da gliclise, tambm inibe a FDPase-1, e assim diminui a gliconeognese. O glucagon, hormnio que sinaliza baixo nvel de acar, diminui o nvel de frutose-2,6-difosfato no fgado, baixando o consumo de glicose pela gliclise e estimulando a produo de glicose para exportao pela gliconeognese. 10- Quais a vias que a glicose pode seguir, alm da gliclise? A glicose tem outros destinos catablicos, como a via das pentoses-fosfato, que resulta na oxidao e descorboxilao na posio C-1 da glicose, produzindo NADPH e pentoses-fosfato; o NADPH fornece poder redutor para as reaes de biossntese e as pentoses-fosfato so componentes essenciais dos nucleotdeos e cidos nuclicos. Outras vias oxidativas transformam a glicose em cido glicurnico e cido ascrbico. A glicuromizao converte certas toxinas no polares em derivados polares que podem ser excretados pelos rins. Captulo 15 O CICLO DO CIDO CTRICO 1- A respirao celular compreende trs estgios principais. Explique resumidamente cada um deles. No primeiro estgio, as molculas dos combustveis orgnicos, glicose, cidos graxos e alguns aminocidos, so oxidados para liberar fragmentos de dois tomos de carbono na forma de um grupo acetila do acetilcoenzima A (acetil-CoA). No segundo estgio, esses grupos acetila so introduzidos no ciclo do cido ctrico, o qual oxida enzimaticamente at CO2 . A energia liberada pela oxidao conservada nos transportadores de eltrons reduzidos, NADH e FADH2 . No terceiro estgio da respirao, esses cofatores so oxidados desfazendo-se de prtons e eltrons. Os eltrons so conduzidos ao longo de uma cadeia de molculas transportadoras de eltrons, conhecida como cadeia respiratria, at O2 , o qual eles reduzem para formar H2O . Durante este processo de transferncia de eltrons uma grande quantidade de energia liberada e consumida na forma de ATP, atravs do processo chamado de fosforilao oxidativa. 2- Explique as etapas do ciclo do cido ctrico. O ciclo de Krebs inicia-se com a condensao da acetil CoA e oxalato para formar o citrato, uma reao catalisada pela citrato sintase. O citrato isomerizado a isocitrato pela enzima aconitase, atravs da formao intermediria do cis-aconitato. A isocitrato desidrogenase catalisa a descarboxilao oxidativa onde o a-cetoglutarato, com reduo de NAD+ . Segue-se outra descarboxilao oxidativa onde o com reduo a-cetoglutarato convertido em succinil-CoA e CO2 pela ao do complexo da a-cetoglutarato desidrogenase, o NAD+ serve como receptor de eltrons. Este complexo assemelha-se muito, em estrutura e em funo, ao complexo da piruvato desidrogenase. A succinil-CoA sintetase catalisa a transformao de succinil-CoA a succinato. O rompimento da ligao tioster do succinil-CoA libera energia que utlizada para a sntese de uma ligao anidrido fosfrico no ATP ou no GTP. Esta reao um exemplo de fosforilao a nvel do substrato. O succinato oxidato a fumarato pela flavoprotena succinato desidrogenase, cujo o grupo prosttico, FAD, reduzido a FADH2 . A succinato desidrogenase a nica enzima do ciclo do cido ctrico que ligada membrana. O fumarato hidratado a malato pela enzima estereospecfica fumarase. A

malato desidrogenase oxida o malato a oxaloacetato, reduzindo NAD+ e fechando o ciclo. 3- Sabe-se que nos organismos aerbicos, o ciclo do cido ctrico uma via anfiblica, isto ela serve tanto a processos catablicos quanto anablicos). Funcionando no apenas no catabolismo oxidativo de carboidratos, cidos graxos e aminocidos mas, como nos progenitores aerbicos, tambm fornece precursores para muitas vias biossintticas. Discuta esta afirmao. Atravs da ao de muitas anzimas auxiliares importantes, certos intermedirios do ciclo do cido ctrico, particularmente a-cetoglutarato e oxalacetato, podem ser removidos do mesmo para servirem como precursores de aminocidos. O aspartato e o glutamato tm os mesmos esqueletos carbonicos que o oxaloacetato e o a-cetoglutarato, respectivamente e a partir deles so sintetizados por simples transaminao. Atravs do aspartato e do glutamato os carbonos do oxalato e do a-cetoglutarato so empregados para a sntese de outros aminocidos, bem como dos nucleotdeos de purina e pirimidina. O succinil-CoA um intermedirio central na sntese do anel de porfirina dos grupos heme, que servem como transportadores de oxignio. Dado o grande nmero de produtos biossintticos derivados dos intermedirios do ciclo do cido do cido ctrico, fica evidente que este ciclo desempenha um papel crtico claramente diferente da sua funo no metabolismo de liberao de energia. 4- Explique em que se consiste uma reao anaplertica. D um exemplo. So reaes que ocorrem para repor os intermedirios do ciclo do cido ctrico ao serem removidos para servirem de percursores biossintticos para outras reaes. Uma reao anaplertica importante nos tecidos animais a carboxilao reversvel do piruvato por CO2 , para formar oxalato. Quando o ciclo do cido ctrico est deficiente em oxalacetato ou em qualquer outros intermedirios, o piruvato descarboxilado para produzir mais oxalato. 5- Que papel desempanha a vitamina Biontina? A biontina desempenha um papel chave em muitas reaes de carboxilao. Esta vitamina transportador especializado de grupos com tomos de carbono na sua forma oxidada: CO2 ( a tranferencia de grupos de um carbono em formas mais reduzidas medida por outros cofatores, principalmente o tetraidrofosfato e a S-adenosilmetionina). Os grupos carboxla so ligados biontina no grupo uredo no interior do sistema em anel de biontina. 6- Como feita a regulao do fluxo de metablitos atravs do ciclo do cido ctrico? A regulao se inicia com o piruvato atravessa o ciclo do cido ctrico. O complexo do piruvato desidrogenase inibido alostericamente por valores altos de relaes [ ATP] / [ADP] , [ NADH] / [NAD+] e [ Acetil-CoA] / [CoA] , os valores de todas elas indicam um estado suficiente de liberao de energia metablica. A diminuio destes valores resulta em ativao alostrica de oxidao do piruvato. 7- Quais os fatores que regulam a velocidade do fluxo de metablitos no ciclo do cido ctrico?

A velocidade do fluxo atravs do ciclo do cido ctrico pode ser limitada pela alta disponibilidade dos substratos acetil-CoA e oxalato, ou pela depleo do NAD+ atravs de sua reduo a NADH o que diminui a velocidade dos trs passos oxidativos nos quais o NAD+ cofator. A inibio retoativa pelo succinil-CoA, citrato e ATP tambm diminui a velocidade do ciclo por desacelerar as suas primeiras reaes. No tecido muscular, Ca2+ sinaliza o inicio da contrao e estimula o metabolismo liberador de energia, de maneira a repor o ATP consumido pela atividade muscular. 8- Nos vegetais, em certos invertebrados e alguns microrganismos como a E. coli e a levedura possuem uma via, a via do glioxalato. Explique para que serve o acetato nestes organismos e quais as formas que podem operar algumas enzimas do cido ctrico. O acetato pode servir tanto como combustvel rico em energia quanto como uma fonte de fosfoenolpiruvato para a sntese de carboidratos. O ciclo do glioxalato permite a converso lquida do acetato em oxaloacetato. Algumas enzimas do ciclo do cido ctrico operam de duas formas: A) elas podem funcionar no ciclo do cido ctrico para oxidao do acetil-CoA at CO2, como ocorre na maioria dos tecidos. B) elas podem operar como parte de uma modificao especializada, o ciclo do glioxalato. A formao do succinato, oxaloacetato e outros intermedirios do ciclo a partir do acetil-CoA. 9- Nos vegetais, as enzimas do ciclo do glioxalato so sequestradas em organelas presas as membranas chamadas glioxissomos. Os glioxissomos no esto presentes em todos os tecidos da planta e em todos os momentos. Explique como as plantas em germinao so capazes de passar para molculas de glicose o carbono presente nos lipdios das sementes e porque os animais vertebrados no podem realizar a sntese lquida da glicose a partir de lipdios. Os glioxissomos se desenvolvem em sementes ricas em lipdios durante a germinao, antes que o vegetal em desenvolvimento adquira a capacidade de sintetizar a glicose por fotossntese. O acetil-CoA formado a partir de lipdios convertido em malato atravs do ciclo do glioxalato e o malato serve como fonte de oxaloacetato (atravs da reao da malato desidrogenase) para gliconeognese. Os animais vertebrados no podem realizar a sntese l'iquida da glicose a partir de lipdios porque no possuem as enzimas especficas do ciclo do glioxalato, que so a isocitrato liase e a malato sintetase. 10- Nas sementes em germinao as transformaes enzimticas dos cidos di e tricarboxlicos ocorrem em trs compartimentos intracelulares: mitocondrias, glioxissomos e citosol. Entre esses compartimentos h um intercmbio contnuo de intermedirios. O aspartato transporta os esqueletos carbnicos do oxaloacetato do ciclo do cido ctrico (na mitocondria) para o glioxissomo onde ele condensa com o acetil-CoA derivado da quebra dos cidos graxos. O citrato ento formado convertido em isocitrato pela aconitase, e este rompido em glioxalato e succinato pela isocitrato liase. O succinato retorna mitocondria, onde ele reeentra no ciclo cido ctico, sendo transformado em oxaloacetato, o qual pode ser exportado (via aspartato) para o glioxissomo. O glioxalato formado no interior do glioxissomo combina com o acetil-CoA para formar malato, que entra no citosol e oxidado (pela malato desidrogenase citoslica) em oxaloacetato, o precursor da glicose na via da gliconeognese. Quatro vias distintas participam dessas

converses: A quebra dos cidos graxos em acetil-CoA (nos glioxissomos), o ciclo do glioxalato (nos glioxissomos), o ciclo do cido ctrico ( na mitocondria) e a gliconeogenese (no citosol). Captulo 15 O Ciclo do cido Ctrico 1) Qual a funo do ciclo do cido ctrico? O papel do ciclo do cido ctrico no est confinado oxidao do acetato, esta via o centro do metabolismo intermedirio. Produtos finais de quatro e de cinco tomos de carbono de muitos processos catablicos so introduzidos no ciclo para servirem de combustvel. O oxaloacetato e o a-cetoglutarato so, por exemplo, pruduzidos de aspartato e glutamato, respectivamente, quando so degradados os aminocidos provenientes das protenas da alimentao. Em outras circunstncias os intermedirios so retirados do ciclo para serem empregados como precursores em vrias vias metablicas. 2) Qual a diferena fundamental ente a gliclise e o ciclo do cido ctrico? A glicllise ocorre atravs de uma sequncia linear de passos catalisados enzimaticamente, enquato a sequncia de reaes do ciclo do cido ctrico cclica. 3) Descreva as etapas do ciclo de krebs. a- a primeira reao do ciclo a condensao do acetil-CoA com o oxaloacetato para formar citrato, catalisado pela citrato sintase. A hidrlise do tioster intermedirio de alta energia faz com que a reao seja altamente exergnica neste sentido. b- a enzima aconitase (uma hidratase) catalisa a transformao reversvel do citrato em isocitrato. c- no passo seguinte a isocitrato desidrogenase catalisa a descarboxilao oxidativa do isocitrato para formar o acetoglutarato, CO2 um NADH. d- o passo seguinte outra descarboxilao oxidativa, nela o a-cetoglutarato convertido em succinil-CoA e CO2 pela ao do complexo da o a-cetoglutarato desidrogenase; o NAD+ serve como receptor de eltrons. A energia de oxidao do a-cetoglutarato conservada na formao da ligao tioster do succinil-CoA. e- segue-se a converso reversvel do succinil-CoA em succinato catalisada pela succinil-CoA sintetase, pruduzindo uma molcula de GTP. f- o succinato formado apartir do succinil-CoA oxidado a fumarato pela flavoprotena succinato desidrogenase. Os eltrons retirados do succinato reduzem um FAD a FADH2. g- em seguida, ocorre a hidratao reversvel do fumarato em malato catalizada pela fumarase (fumarato hidratase). h- na ltima reao do ciclo do cido ctrico, a malato desidrogenase, ligada ao NAD, catalisa a oxidao do malato em oxaloacetato, que pode reiniciar o ciclo, produzindo-se um NADH nesta fase. 4) Como se explica o deslocamento do ciclo em sentido da formao do isocitrato, j que a adio de gua ao cis-aconitato pode ser feita tanto para a formao do citrato quanto do isocitrato? ( OBS.: cis-aconitato um intermedirio entre o citrato e o isocitrato) Embora a mistura em equilbrio nas condies celulares contenha menos de 10% de isocitrato, a reao deslocada para a direita, porque o isocitrato rapidamente consumido no passo subsequente do ciclo, diminuindo a concentrao de equilbrio estacionrio. 5) O que o malonato e como ele influencia o ciclo da cido ctrico? Ele um anlogo do succinato. um potente inibidor competitivo da succinato desidrogenase e por este motivo um bloqueador do ciclo do cido ctrico. 6) o ciclo do cido ctrico que promove a oxidao completa dos carbonos da acetil-CoA. No entanto, cada volta do ciclo produz apenas 1 molcula de ATP. Como se explica a alta eficincia no armazenamento de energia em molculas de ATP provenientes desta oxidao? Embora o ciclo do cido ctrico diretamente gere apenas uma molcula de ATP por volta (na converso de succinilCoA a succinato), os quatro passos de oxidao do ciclo fornecem um grande fluxo de eltrons para a cadeia respiratria e esta, eventualmente, leva formao de um grande nmero de molculas de ATP durante a fosforilao oxidativa. A energia liberada na gliclise, corresponde sntese de duas molculas de ATP para uma glicose metabolizada. Entretanto, quando duas molculas de piruvato so completamente oxidadas com a formao de seis molculas de

CO2 nas reaes catalisadas pelo complexo de piruvato desidrogenase e pelas enzimas do ciclo do cido ctrico e, quando logo subsequentemente, os eltrons respectivos so transferidos ao oxignio atravs da cadeia respiratria, so obtidos 38 ATP por molcula de glicose metabolizada. Em nmeros redondos isto representa a conservao de 40% do mximo terico disponvel para a oxidao completa da glicose. 7) Porque o ciclo do cido ctrico uma via anfiblica? (Serve tanto para processos anablicos quanto catablicos) Ela no funciona apenas no metabolismo oxidativo de carboidratos, cidos graxos e aminocidos, mas, como nos progenitores anaerbicos, tambm fornece precursores para muitas vias biossintticas. Atravs da ao de muitas enzimas auxiliares importantes, certos intermedirios do ciclo do cido ctrico, particularmente a-cetoglutarato e oxaloacetato, podem ser removidos do mesmo para servirem com precursores de aminocidos. O aspartato e o glutamato tm o mesmo esqueleto carbnico que o oxloacetato e o a-cetoglutarato, respectivamente, e a partir deles so sintetizados por simples transaminao. Atravs do aspartato e do glutamato , os carbonos do oxaloacetato e o a-cetoglutarato so empregados para a sntese de outros aminocidos, bem como dos nucleotdeos de purina e pirimidina. O oxaloacetato pode ser convertido em glicose no processo da gliconeognese. O succinil-CoA um intermedirio central na sntese do anel da porfirina dos grupos heme, que servem como transportadores de oxignio (na hemoglobina e mioglobina) e de eltrons (nos citocromos). 8) Como o ciclo do cido ctrico se mantm mesmo aps a retirada de intermedirios para a biossntese anablica? Esses intermedirios podem ser fornecidos novamente por meio das reaes anaplerticas permitindo a continuidade das reaes. Mas em condies normais as reaes pelas quais os intermedirios do ciclo so retirados e aquelas atravs das quais eles so fornecidos esto em equilbrio dinmico, de tal forma que as concentraes dos intermedirios do ciclo do cido ctrico permanecem quase que constantes. 9) Como se d a regulao do ciclo da cido ctrico? O fluxo de metablitos atravs do ciclo do cido ctrico est sob regulao estrita, porm no complexa. Trs fatores governam a velocidade do fluxo atravs do ciclo: disponibilidade de substratos, inibio por acmulos de produtos e inibio alostrica retroativas das primeiras enzimas da via pelos ltimos intermedirios. No ciclo, trs passos so altamente exergnicos; aqueles catalisados pela citrato sintase, isocitrato desidrogenase e a-cetoglutarato desidrogenase. Sob determinadas circunstncias, cada um deles pode se tornar o passo limitante da velocidade global . A disponibilidade de substratos para a citrato sintase varia com as condies metablicas e algumas vezes limita a velocidade de formao do citrato. O NADH, um produto do oxidao do citrato e do acetoglutarato, acumula-se sob determinadas condies, e quando a relao [NADH]/[NAD+] torna-se grande, as duas reaes de desidrogenao so severamente inibidas pela lei da ao das massas. De forma similar, a reao da malato desidrogenase est essencialmente em equilbrio na clula , e quando [NADH] grande, a concentrao de oxaloacetato pequena, desacelerando o primeiro passo do ciclo: a succinil-CoA inibe a a-cetoglutarato desidrogenase (e tambm a citrato sintase); o citrato bloqueia a citrato sintase; enquanto o produto final, ATP, inibe ambas: a citrato sintase e a isocitrato desidrogenase. A inibio da citrato sintase aliviada pelo ADP, um ativador alostrico desta enzima. Os ons clcio , que nos msculos dos vertebrados do sinal para contrao e o aumento da demanda por ATP, ativam ambas as enzimas, isocitrato desidrogenase e a-cetoglutarato desidrogenase, assim como o complexo da piruvato desidrogenase. Brevemente as concentraes de substratos e intermedirios do ciclo do cido ctrico regulam o fluxo atravs desta via em uma velocidade que fornece concentraes timas de ATP e NADH. 10) Como os tomos de carbono provenientes de aminocidos, carboidratos e cidos graxos entram no ciclo de krebs? Os esqueletos carbnicos dos acares e cidos graxos precisam ser degradados at o grupo acetila do acetil-CoA, a forma qumica atravs da qual o ciclo de krebs aceita a maior parte de seu combustvel. Muitos aminocidos tm uma rota diferente sendo metabolicamente degradados em outros intermedirios do ciclo.

CAPTULO 16: A OXIDAO DOS CIDOS GRAXOS

1- Quais so os principais passos da captao dos triacilgliceris ingeridos, no intestino de um animal vertebrado e da passagem dos cidos graxos aos tecidos muscular e adiposo? No intestino delgado, os sais biliares emulsificam as gorduras ingeridas formando micelas mistas de sais biliares e triacilgliceris. As lipases lipossolveis intestinais convertem os triacilgliceris em monoacilgliceris, diacilgliceris, cidos graxos livres e glicerol. Esses difundem-se para o interior das clulas da mucosa intestinal. L, eles so reconvertidos em triacilgliceris e agrupados com colesterol da dieta e com protenas especficas formando agregados lipoproteicos chamados quilomcrons. Os quilomcrons que contm a apoprotena C- II movem-se da mucosa intestinal para o sistema linftico, de onde eles entram na corrente sangunea e so transportados para os msculos e tecido adiposo. Nos capilares desses tecidos a enzima extracelular lipase lipoproteica hidrolisa os cidos graxos em triacilgliceris e glicerol. Esses so captados pelo tecido alvo. Nos msculos, os cidos graxos so oxidados para a obteno de energia, e no tecido adiposo, eles so reesterificados e armazenados como triacilgliceris 2- Qual o papel dos hormnios epinefrina e glucagon secretados em resposta a nveis baixos de glicose no sangue? Ativam a adenilato ciclase na membrana plasmtica do adipcito, aumentando a concentrao intracelular de AMP. Por sua vez, uma protena quinase, dependente de cAMP, fosforila e, ativa a lipase de triacilgliceris hormniosensvel, a qual catalisa a hidrlise de ligaes steres dos triacilgliceris. Os cidos graxos assim liberados difundem-se do interior do adipcito para o sangue, onde se ligam protena soroalbumina. Ligados a essa protena solvel, os cidos graxos, de outra forma insolveis so transportados para os tecidos. Aqui, os cidos graxos dissociam-se da albumina e difundem-se para o citosol das clulas nas quais serviro como combustvel.
c

3- Quais as reaes enzimticas os cidos graxos livres, provindos do sangue, sofrem antes de passarem para o interior das mitocndrias? 1) A acil-CoA sintetase, presente na membrana mitocondrial externa, cataliza a formao de uma ligao tioster entre o grupo carboxila do cido graxo e o grupo tiol da coenzima A para liberar um acil-CoA graxo; simultaneamente, o ATP sofre clivagem em AMP e PPi. A formao dos acil-CoA graxos favorecida pela hidrlise das duas ligaes de alta energia do ATP. 2) O grupo acil-graxo transientemente ligado ao grupo hidroxila da carnitina e o derivado acil-carnitina graxo transportado atravs da membrana mitocondrial interna por um transportador especfico, o transportador acilcarnitina/ carnitina. 3) O grupo acil-graxo transferido enzimaticamente da carnitina para a coenzima A intramitocondrial pela carnitina acil transferase II. Essa isoenzima est localizada na face interna da membrana mitocondrial interna, onde ela regenera o acil- CoA graxo e libera-o, juntamente com a carnitina livre, na matriz mitocondrial.

4- Quais so os estgios da oxidao mitocondrial dos cidos graxos? A oxidao mitocondrial dos cidos graxos ocorre em trs estgios. No primeiro estgio, -oxidao, os cidos graxos sofrem remoo oxidativa de sucessivas unidades de dois tomos de carbono na forma de acetil-CoA, comeando pela extremidade carboxila da cadeia do cido graxo. No segundo estgio da oxidao do cido graxo os resduos acetila do acetil-CoA so oxidados at CO2, atravs do ciclo do cido ctrico. Os primeiros dois estgios do processo de oxidao de cido graxo produzem os transportadores de eltrons reduzidos NADH e FADH2 que, em um terceiro estgio, transferem os eltrons para a cadeia respiratria mitocondrial, atravs do qual estes eltrons so transportados at o oxignio. Acoplada a este fluxo de eltrons est a fosforilao do ADP para a ATP, conservando assim a energia liberada pela oxidao dos cidos graxos. 5- Descreva os passos da intermedirios. Primeiro passo: Primeiro, a enzima acil-CoA desidrogenase (que tem o FAD como grupo prosttico) atravs de uma desidrogenao produz uma dupla ligao entre os tomos de carbono e (C-2 e C-3), liberando um transenoil- CoA. Os eltrons removidos do acil-CoA graxo so transferidos para o FAD e a forma reduzida da -oxidao dos cidos graxos especificando as enzimas envolvidas e os

desidrogenase transfere imediatamente os mesmos para um transportador de eltrons, a flavoprotena transportadora de eltrons (ETFP). A ETFP, uma protena integral da menbrana mitocondrial interna uma dos transportadores de eltrons da cadeia respiratria mitocondrial. Segundo passo: Uma molcula de gua adicionada dupla ligao do trans- -enoil-CoA para formar o estereoismero L do -hidroxiacil-CoA. Esta reao catalisada pela enoil-CoA hidratase. Terceiro passo: A L- -hidroxiacil-CoA desidrogenado para a forma -cetoacil-CoA pela ao da -hidroxiacil-CoA desidrogenase. O NAD+ o receptor de eltrons. Esta enzima absolutamente especfica para o estereoismero L .O NADH formado nesta reao transfere seus eltrons para a NADH desidrogenase , um transportador de eltrons da cadeia respiratria Quarto passo: A acil-CoA acetiltransferase (mais comumente chamada de tiolase) promove a reao do -cetoacil-CoA com uma molcula de coenzima A livre para romper o fragmento carboxilaterminal de dois tomos de carbono do cido graxo original na forma de acetil-CoA. O outro produto o tioster de coezima A do cido graxo original, agora diminudo de dois tomos de carbono. 6- A -oxidao dos cidos graxos insaturados requer duas reaes adicionais. Porque isto ocorre e como ocorre? As ligaes duplas presentes nos cidos graxos insaturados dos triacilgliceris e nos fosfolpedes de animais e vegetais esto na configurao cis e no podem sofrer a ao da enoil-CoA hidratase, a enzima que catalisa a adio de H2O na dupla ligao trans do -enoil-CoA .

As duas reaes que possibilitam a utilizao completa do cido graxo insaturado ser ilustrada atravs de dois exemplos. Primeiro, vamos seguir a oxidao do oleato, cido graxo com 18 tomos de carbono na cadeia e monoinsaturado, com uma dupla ligao ciis entre C-9 e C-10. O oleato convertido em oleoil-CoA, que passa por trs passos do ciclo de oxidao dos cidos graxos e libera trs molculas de acetil-CoA, alm do ster de coenzima A de um cido graxo insaturado de 12 tomos de carbono, ocisao da prxima enzima da via de correspondente L-enoil- CoA isomerizado para liberar o trans-hidroxiacil-CoA (trans-dodecenoil-CoA. Este produto no pode sofrer a -oxidao. Entretanto, pela ao da enzima auxiliar, enoil-CoA isomerase, o cis-enoil-CoA, que convertido pela enoil-CoA hidratase no -dodecenoil-CoA). Este intermedirio sofre agora a ao das enzimas

remanescentes da -oxidao para liberar acetil-CoA e um cido graxo saturado com 10 tomos de carbono como o seu ster de coenzima A. O ltimo sofre quatro outros passos atravs da via para liberar um total de nove molculas de acetil-CoA, resultante de uma molcula de oleato de 18tomoa de carbono. A outra enzima auxiliar (uma redutase) requerida pela oxidao de cidos graxos poliinsaturados. Como exemplo, vamos tomar o linoleato com 18 carbonos, que possui uma configurao cissofre trs passos atravs da seqncia padro de ,cis . O linoleoil-CoA ,cis. Este -oxidao para libertar trs molculas de acetil-CoA e um ster

de coenzima A de uma cido graxo insaturado com 12 carbonos e com uma configuraocis-

intermedirio no pode ser empregado pelas enzimas da -oxidao; as suas duplas ligaes esto em posies erradas e possuem aconfigurao errada (cis, e no trans). Entretanto, a ao combinada da enoil-CoA isomerase e da 2,4 dienoil-CoA redutase permite areentrada deste intermedirio na via normal de -oxidao e a sua degradao em seis molculas de acetil-CoA. O resultado global a converso do linoleato em nove molculas de acetil-CoA. 7- A oxidao de cidos graxos com nmero mpar de tomos de carbono na cadeia necessita de trs reaes a mais. Por que isso ocorre e como ocorre?

cidos graxos de cadeia longa e nmero mpar de tomos de carbono so oxidados pela mesma via dos cidos com nmero par de tomos de carbono, comeando sempre na extremidade da cadeia que contm a carboxila. Entretanto, o substrato para o ltimo passo atravs da seqncia de -oxidao um acil-CoA graxo no qual o cido graxo tem cinco tomos de carbono. Quando este cido clivado mais uma vez, os produtos so acetil-CoA e propionil-CoA. O acetil-CoA oxidado atravs da via do cido ctrico, mas o propionil-CoA toma uma via enzimtica incomum, envolvendo trs enzimas. O propionil-coA primeiro carboxilado para formar o estereoismero D do metilmalonil-CoA pela propionil-CoA carboxilase, que contm o cofator biotina. Nesta reao enzimtica o CO2 (ou sua forma hidratada o on HCO3-) ativado pela ligao biotina, antes de sua transferncia para o propionato. A formao do intermedirio carboxibiotina requer energia, e esta fornecida pela clivagem do ATP at AMP e PPi. O D-metilmalonil-CoA, assim formado, epimerizado enzimaticamente para o seu estereoismero L, pela ao da metilmalonil-CoA epimerase. O L-metilmalonil-CoA sofre um rearranjo intramolecular e forma o succinil-CoA, que pode entrar no ciclo do cido ctrico. Este rearranjo catalisado pela metilmalonil-CoA mutase, que requer como coenzima a desoxiadenosilcolamina, ou coenzima B12, derivado da vitamina B12. 8- O que so peroxissomos e glioxissomos? Como ocorre a oxidao de cidos graxos por essa via? Quais as principais diferenas entre essa via e a mitocondrial? Peroxissomos so compartimentos celulares enclausurados por membranas existentes em animais e em plantas, neles o perxido de hidrognio produzido por oxidao dos cidos graxos e, imediatamente a seguir, destrudo enzimaticamente. Os peroxissomos e glioxissomos so similares em estrutura e funo. Os glioxissomos ocorrem apenas durante a germinao das sementes, e podem ser considerados como um peroxissomo especializado. Como na oxidao dos cidos graxos na mitocndria, os intermedirios so derivados da coenzima-A e o processo consiste em 4 passos: 1. Desidrogenao; 2. Adio de gua dupla ligao formada; 3. Oxidao do -hidroxiacil-CoA a uma cetona; 4. Clivagem tioltica atravs de coenzima A. O sistema peroxissomal difere do mitocondrial em dois aspectos : 1. No primeiro passo oxidativo os eltrons passam diretamente ao O2, gerando H2O2; 2. O NADH formado na -oxidao no pode ser reoxidado e o peroxissomo precisa exportar equivalentes redutores para o citosol (estes eventualmente so passados para a mitocndria). A oxidao dos cidos graxos nos glioxissomos ocorre pela via peroxissomal. Nas mitocndrias, o acetil-CoA oxidado atravs do ciclo do cido ctrico. O acetil-CoA produzido pelos peroxissomos e glioxissomos exportado; o acetato dos glioxissomos serve como um precursor biossinttico. 9. Como a coenzima B12 catalisa a troca de posio do Hidrognio na reao catalisada pela metilmalonilCoA sem que ocorra qualquer mistura do tomo com o Hidrognio do solvente (H2O)? 1. Primeiro, a enzima rompe a ligao Co-C no cofator, deixando a coenzima em sua forma Co2+ e produzindo o radical livre 5- desoxiadenosil . 2. Esse radical agora retira um tomo de hidrognio do substrato, convertendo-o em um radical e produzindo 5desoxiadenosina. 3. O rearranjo do radical substrato produz outro radical. 4. Nele o grupo migrante X (-Co-S-CoA para a metilmalonil-CoA mutase) moveu-se para o carbono adjacente para formar um radical semelhante ao produto. O tomo de hidrognio inicialmente retirado do substrato agora parte do grupo CH3- da 5-desoxiadenosina; um dos hidrognios deste mesmo grupo CH3-(ele pode ser o mesmo que foi originalmente retirado) retorna para o radical semelhante ao produto, gerando o produto e regenerando o radical livre desoxiadenosil. 5. Finalmente, a ponte entre o cobalto e o grupo .CH2- do radical desoxiadenosil refeita, destruindo o radical livre e regenerando o cofator na sua forma Co3+, pronto para participar de outro ciclo cataltico. Neste mecanismo proposto, o tomo de hidrognio migrante nunca existe como espcie livre e, portanto, nunca est livre para ser trocado com os hidrognios das molculas de gua que constituem o solvente. 10. O que so corpos cetnicos? Como so formados? Qual o destino de seus componentes? Qual o fator determinante para a converso do acetil-CoA em corpos cetnicos? Corpos cetnicos o Acetil-CoA convertido em acetoacetato, D- -hidroxibutirano e acetona.

O primeiro passo na formao do acetoacetato no fgado a condensao enzimtica de duas molculas de Acetil-CoA, catalisada pela tiolase; essa reao uma simples revero do ltimo passo da -oxidao. Ento, o acetoacetil-CoA condensa-se com acetil-CoA para formar o -hidroxi- -metilglutaril-CoA (HMG-CoA), o qual quebrado para formar acetoacetato livre e acetil-CoA. O acetoacetato livre, assim produzido, reduzido em D- -hidroxibutirato atravs de uma reao reversvel catalisada pela D- -hidroxibutirato desidrogenase, uma enzima mitocondrial. Nas pessoas ss, a acetona formada quando o acetoacetato perde um grupo carboxila e isso ocorre em quantidades extremamente pequenas. O acetoacetato facilmente descarboxilado; o grupo carboxila pode ser perdido espontaneamente ou pela ao da acetoacetato descarboxilase. A acetona produzida exalada, o acetoacetato e o D- -hidroxibutirato so transportados pelo sangue para os tecidos extra-hepticos (msculos esqueltico,cardaco e crtex renal) onde so oxidados atravs da via do cido ctrico para fornecer a maior parte da energia requerida por esses tecidos. O crebro em condies de fome, quando a glicose no disponvel, pode adaptar-se para usar o acetoacetato ou o D- -hidroxibutirano na obteno de energia. A disponibilidade de oxaloacetato para iniciar a entrada do acetil-CoA no ciclo do cido ctrico o principal fator determinante da via metablica que ser tomada pelo acetil-CoA na mitocndria heptica. Em algumas circunstncias (como o jejum), as molculas de oxaloacetato so retiradas do ciclo do cido ctrico e empregadas na sntese de molculas de glicose (gliconeognese). Quando a concentrao de oxaloacetato est muito baixa, pouco acetil-CoA entra no ciclo de Krebs e, assim, a formao de corpos cetnicos favorecida. A produo dos corpos cetnicos pelo fgado e sua exportao para os tecidos extra-hepticos, em geral permitem a oxidao continuada dos cidos graxos no fgado, mesmo quando o acetil-CoA no est sendo oxidado atravs do ciclo do cido ctrico. A superposio de corpos cetnicos pode ocorrer em condies de jejum severo ou de diabetes no controlado por tratamento. Quando os aminocidos podem sofrer degradao oxidativa nos animais? Sob 3 circunstncias metablicas diferentes os aminocidos podem sofrer degradao oxidativa:

a. Durante a sntese e degradao normais das protenas celulares ( renovao das protenas ) alguns dos aminocidos liberados , durante a quebra das protenas sofrero degradao oxidativa caso eles no sejam necessrios para a sntese de novas protenas. b. Quando devido a uma dieta rica em protenas, os aminocidos so ingeridos em excesso com relao s necessidades corporais de biossntese de protenas , o excedente catabolisado, j que os aminocidos livres no podem ser armazenados. c. Durante o jejum severo ou o diabetes melitus, quando os carboidratos so inacessveis ou no utilizados adequadamente , as protenas corporais sero chamadas a servirem como combustvel.
Quais as principais enzimas que degradam protenas em aminocidos e onde elas atuam? No estmago, a pepsina hidrolisa as protenas ingeridas nas ligaes peptdicas do lado aminoterminal dos resduos de aminocidos aromticos , tirosina, fenilalanina e triptofano. No duodeno, as enzimas tripsina que hidrolisam as ligaes peptdicas cujos grupos de carbonila so fornecidos por resduos de lisina ou arginina ; a quimiotripsina que hidrolisa ligaes peptdicas cujos grupos carbonilas so fornecidos por resduos de fenilalanina, tirosina ou triptofano ; a carboxipeptidase que degrada pequenos peptdios removendo sucessivos resduos carboxilaterminais dos peptdios. Como a determinao da concentrao de aminotransferases no soro sangneo pode fornecer informaes a respeito das leses no msculo cardaco? No infarto do miocrdio, a leso provoca extravasamento na corrente sangnea das aminotransferases, entre outras enzimas, das clulas cardacas injuriadas. Atravs de testes de STGO e STGP e uma outra enzima cardaca, a creatina quinasse ( teste SCK ) , pode fornecer informaes a respeito da severidade e do estgio da leso no corao. Aps um ataque cardaco, a creatina quinase a primeira enzima a aparecer no sangue e tambm, a desaparecer rapidamente. A TGO a prxima enzima a aparecer e pouco depois aparece a TGP. A lactato desidrogenase tambm escapa do msculo cardaco injuriado ou anaerbico. Como a uria formada no fgado?

Uma molcula de ornitina ( aminocido) combina-se com uma molcula de amnia e uma de CO2 para formar a citrulina ( aminocido). Um segundo grupo amino adicionado citrulina para formar a arginina ( aminocido), esta , ento hidrolisada para liberar a uria, com regenerao da ornitina. A enzima arginase no fgado, presente em grandes quantidades nos animais ureotlicos ( amnia convertida em uria nos hepatcitos ), catalisa a hidrlise irreversvel da arginina em uria e ornitina. O que a chamada " bicicleta de Krebs "? Como as reaes do ciclo da uria e do cido ctrico esto inertricavelmente imbricadas, o conjunto dos dois tem sido chamado de " bicicleta de Krebs ". O fumarato, produzido na reao da argininosuccinato liase tambm um intermedirio do ciclo do cido ctrico. O fumarato entra na mitocndria onde as atividades combinadas da fumarase ( fumarato hidratase ) e da malato desidrogenase transformam o fumarato em oxalacetato . O aspartato, que age como um, doador de nitrognios na reao do ciclo da uria catalisada pelo argininosuccinato sintetase no citosol, formado do oxalacetato por transaminao com o glutamato, o -cetoglutarato o produto da transaminao e tambm um intermedirio do ciclo do cido ctrico. Qual a importncia do habitat na excreo do N2 do grupo amino ? A importncia do habitat na excreo do N2 do grupo amino ilustrada pela mudana na via de excreo de N2 que ocorre medida que o girino sofre metarmofose em sapo adulto. Os girinos so inteiramente aquticos e excretam o N2 amino como amnia, atravs de suas guelras. O fgado do girino no tem enzimas necessrias para a produo de uria, mas durante a metarmofose ele comea a sintetizar estas enzimas e perde a capacidade de excretar amnia. No sapo adulto, que um animal de hbitos muito mais terrestres, o N2 do grupo amino excretado quase integralmente como uria. 7- Quais os tipos de cofatores empregados na transferncia de unidades monocarbnicas? E a sua funo Os cofatores empregados so a biotina, tetraidrofolato, S-adenosilmetionina e sua funo transferir as unidades monocarbnicas em diferentes estados de oxidao. 8- Quais os aminocidos que entram no ciclo do cido ctrico apartir do piruvato e como o fazem? Os cinco aminocidos que entram atravs do piruvato so : alanina, glicina, serina, cistena e triptofano. A alanina libera piruvato diretamente por transaminao com o -cetoglutarato, e a cadeia lateral do triptofano separada do restante da molcula para liberar alanina e, portanto, piruvato. A cistena convertida em piruvato em dois passos um para remover o tomo de enxofre e o outro um transamino. A serina convertida em piruvato pela serina desidratase. A glicina tem duas vias de metabolizao. Ela pode ser convertida em serina pela adio enzimtica de um grupo hidroximetila. A Segunda via para glicina, que predomina nos animais, envolve a sua clivagem oxidativa em CO2, NH4+ e um grupo metileno. 9- Qual o papel biolgico do triptofano e da fenilalanina? Triptofano- biossntese de outras biomolculas importantes como nicotinato, um precursor do NAD e do NADP, nas plantas o fator de crescimento indolacetato, precursor da serotonina. Fenilalnina- hidroxilao para formar tirosina, precursor dos hormnios epinefrina e norepinefrina, neurotransmissor dopamina, melanina. 10- Qual o papel da enzima fenilalanina hidroxilase no catabolismo da fenilalanina? O papel da enzima fenilalanina hidroxilase inserir um dos dois tomos de oxignio do O2 na fenilalanina para formar o grupo hidroxila da tirosina . O outro tomo do oxignio reduzido a H2O pelo NADH, que tambm necessrio na reao.

CAPTULO 16

1) - Como ocorre a absoro das gorduras da dieta (trigliceris) Os trigliceris ingeridos na alimentao so emulsificados no intestino del;gado pelos sais biliares, hidrolisados por lipases intestinais, absorvidos pelas clulas epiteliais intestinais e reconveretidos em trigliceris; so a seguir, incluidos nos quilomcrons atravs da combinao com apolipoprotenas esdpecficas. Os quilomicrons liberam os trigliceris para os tecidos, onde a lipase lipoprotica libera os cidos agraxos livres para entrarem no interior das clulas que os armazemam (adipcitos). 2) - Descreva o mecanismo de entrada dos cidos graxos no interior da mitocndria atravs do transportador acilcsarnitina/carnitina. Uma vez no interior das clulas, os cidos graxos livres so ativadas na membrana mitocondrial externa por esterificao com a coenzima A formando tiosteres acil-coA graxos. Estes so convertidos em steres graxos do tipo acil-carnitina, que so ento carregados por um transportador especfico atravs da membrana mitocondrial interna (carnitina aciltransferase I e II) at a matriz mitoncondrial; ai os steres acil-coA graxos so novamente formados. Todos os passos subsequentes na oxidao dos cidos graxos ocorrem com estes na forma dos seus tiosteres de coenzima A, no interior da matriz mitocondrial. 3) - Como os triglicrois so armazenados na clula? So segregados em gotculas lpidicas, devido sua hidrofobicidade e extrema insolubilidade em gua, as quais no aumentam a osmolaridade do citosol e no contm peso extra com gua de solvatao. A relativa inrcia qumica dos triacilgilicrois permite a sua estocagem intracelular em grandes quantidades sem o risco de ocorrerem reaes qumicas no desejadas com outros componentes celulares. 4) - A oxidao mitocondrial dos cidos graxos ocorre em trs estgios. Caracterize cada estgio, descrevendo o fl;uxo de eltrons relacionado a eles. No primeiro estgio - B-oxidao - os cidos sofrem a remoo oxidativa de sucessivas unidades de dois tomos de carbono na forma de acetil-coA, comeando pela estremidade carboxila da cadeia do cido graxo. A formao de cada molcula de acetil-coA requer a ao de desidrogenases para a remoo de 4 tomos de hidrognio da poro acil-graxo da molcula. No segundo estgio, os resduos acetila do acetil-coA so oxidados at CO2 atravs do ciclo do cido ctrico, processo que tambm ocorre na matriz mitocondrial. No terceiro estgio, os eltrons provenientes das oxidaes ocorridas nos estgios 1 e 2 e rmazenados" nos tranportadores de eltrons reduzidos NADH e FADH2, so pasados para o O2 atravs da cadeia respiratria mitocondrial, formecendo energia para a sntese de ATP atavs da fosforilao oxidativa. 5) - Explique como os eltrons do acil-coA graxo chegam at a cadeia respiratria mitocondrial. A enzima, acil-coA desidrogenase, inclui o fad como grupo prosttico. Os eltrons removidos do acil-coA graxo so transferidos para o FAD e a forma reduzida desidrogenase transfere imediatamente os mesmos para um transportador de eltrons, a flavoprotena transportadora (ETFP). Esta uma protena integral, um dos transportadores de eltrons da cadeia respirtoria mitocondrial. 6) - Por que a oxidao de um acil-coA graxo monoinsaturado, exige uma enzima adicional (enoil-coA isomerase)? A enoil-coA isomerase ir reposicionar a dupla ligao, convertendo o ismero cis em ismero trans, que um intermedirio normal da B-oxidao e, portanto, poder sofrer ao das enzimas subsequentes liberando o acetil-coA graxo. 7) - Se uma pessoa precisasse sobreviver com uma dieta rica em gorduras e desprovida de carboidratos, qual o tipo de cido graxos seria melhor consumir; com nmero par ou impar de carbonos? Nmero mpar, pois a converso do propianil-coA em succinil-coA fornece intermedirios para o ciclo do cido ctrico. A glicose produz piruvato, o qual o principal produtor de oxalacetato. Com a ausncia da glicose na dieta, a velocidade do ciclo do cido ctrico que diminui, precisa ser compensada. 8) - Qual a diferana entre as vias de oxidao de cido graxos existentes nas mitocndrias e nos peroxissomos?

A diferena que nos peroxissomos a flavoprotena desidrogenase que introduz a dupla ligao passa seua eltrons diretamente para o O2, Produzindo H2O2, a qual um oxidante forte e potencilamente perigoso e , assim, logo decomposta em H2O e O2 pela catalase. Em contraste, na mitocndria, os eltrons removidos no primeiro passo de oxidao passam atravs de uma dadeia respiratria at o O2 e a H2O o produto final, acompanhado pela sintese de ATP. 9) - Qual o destino dos produtos da oxidao dos cidos graxos no figado dos mamferos? Durante a oxidao dos cidos graxos, o acetilcoA formado pode entrar no ciclo do cido citrco ou de ser convertido nos chamados corpos cetnicos, ou seja, em acetoacetato, d-B-hidroxibutirato e acetona, que so exportados para outros tecidos atravs da circulaa sanguinea. A acetona,l prodizida em menores quantidades, exalada. O acetoacetato ,e o d-B-hidroxibutirato so tranportados pelo sangue para os tecidos extrahepticos, onde so oxidados atravs da via do cido citrco para fornecer a maior parte da energia requerida para esses tecidos. O crebro que utiliza apenas a glicose como combustvel, em condies de fome, por falta da glicose, pode se adaptar para usar o acetoacetato ou o D-B-hiroxibutiraro na obterno de energia. 10) - Qual o prosesso metabolico da diabete? Devido a insuficiente insulina circulante os tecidos extra-hepaticos no consequem captar a glicose do sangue de forma eficiente. Para aumentar o nvel de glicose sanguinea, a gliconeognese no fgado acelerada, o que tambm ocorre com a oxidao dos cidos graxos no fgado e msculos, resultando em uma produo de corpos cetonicos em quantidade acima da capacidade de sua oxidao pelos tecidos extra-hepticos. O aumento no sangue de acetoacetato e de D-B-hidroxibutirato diminui o PH do sangue, provocando uma condio conhecida como acidose, que pode levar ao coma e em alguns casos at a morte Captulo 17 Com a oxidao dos aminocidos, qual o destino final do grupo amino? E o da cadeia carbnica remanescente? O grupo amino da maioria dos aminocidos retirado por um processo comum, que consiste na transferncia deste grupo para o -cetoglutarato, formando glutamato; a cadeia carbnica remanescente do aminocido convertida ao -cetocido correspondente. Qual a importncia das reaes de transaminao? Qual o reservatrio temporrio de grupos amino? Qual a coenzima utilizada pelas transaminases? Quais os produtos da aspartato transaminase e da alanina transaminase? Nessas reaes, o grupo -amino transferido para o tomo de carbono do -cetoglutarato, produzindo o respectivo -cetocido anlogo do aminocido. No ocorre perda de grupos amino, pois o -cetoglutarato torna-se aminado medida que o -aminocido desaminado. Os grupos amino de muitos aminocidos diferentes so coletados na forma de glutamato. A coenzima utilizada pelas transaminases derivada da vitamina B6. O aspartato transaminase catalisa a reao que tem como produtos o -cetocido e o glutamato. J a alanina transaminase d como produtos o piruvato e o glutamato. Por que podemos dizer que o emprego de alanina para transportar amnia dos msculos esquelticos, que executam trabalho fsico intenso, para o fgado, um exemplo de economia intrnseca dos organismos vivos? Os msculos esquelticos, que contraem vigorosamente, operam em anaerobiose, produzindo no apenas amnia da quebra de protenas, mas tambm grande quantidade de piruvato da gliclise. Estes dois produtos so resolvidos em um mesmo ciclo: a amnia convertida em uria e o piruvato reformado em molculas de glicose e retorna aos msculos. No fgado, a alanina libera piruvato, o material de partida para gliconeognese, e tambm NH4+ para sntese de uria. Todo ATP disponvel no msculo pode ser destinado para contrao muscular, por isto se fala em economia. Quais so os 5 passos para produo da uria a partir de amnia?

NH4+ gerado na mitocndria do fgado, mais HCO3- produzido pela respirao mitocondrial so empregados na sntese de carbamil fosfato, que catalisada por carbamil fosfato sintetase I e depende de ATP. Carbamil fosfato entra no ciclo da uria.

1.

2. Carbamil fosfato transfere grupo carbamil para a ornitina para formar citrulina e liberar Pi. Reao catalisada pela ornitina transcarbamilase. A citrulina liberada da mitocndria para o citosol.

3. O aspartato (gerado na mitocndria por transaminao transportado para o citosol) fornece o segundo grupo amino que introduzido no ciclo por uma reao de condensao entre o grupo amino do aspartato e o grupo uredo (carbonila) da citrulina para formar o argininossuccinato. catalisada pelo argininossuccinato sintetase, requer ATP e ocorre atravs do intermedirio citrulil-AMP.

4. O argininossuccinato clivado reversivelmente pela argininossuccinato liase para formar arginina livre e fumarato para integrar o conjunto de intermedirios do ciclo do cido ctrico.

5. A enzima citoslica arginase quebra a arginina para liberar uria e ornitina. A ornitina regenerada e pode, agora, ser transportada para a mitocndria para iniciar outra volta do ciclo da uria. Qual a conseqncia da deficincia de uma enzima no ciclo da uria? E como esse erro pode ser corrigido? Defeitos genticos em qualquer enzima envolvida na formao da uria tem uma capacidade diminuda de converter amnia em uria. Elas no podem tolerar uma alimentao rica em protenas, pois seno os aminocidos em excesso sero desaminados no fgado, produzindo amnia livre no sangue. A amnia muito txica, provoca desordens mentais, desenvolvimento retardado, coma e morte. Os pacientes com problemas no ciclo da uria so tratados, pela introduo na dieta de -cetocidos. Os aminocidos essenciais (que no podem ser sintetizados pelos aminocidos e precisam ser obtidos na dieta) podem ser sintetizados por transaminao a partir de -cetocidos anlogos aos aminocidos essenciais. Atravs da ao das aminotransferases, esses -cetocidos podem receber o grupo amino dos aminocidos no essenciais presentes em excesso. Deste modo, aminocidos essenciais ficam disponveis para a biossntese e os aminocidos no essenciais so impedidos de liberar seus grupos amino para o sangue na forma de aminocidos. Como a atividade do ciclo da uria regulada? O fluxo de nitrognio atravs do ciclo da uria varia com a composio dos nutrientes presentes na alimentao. Quando a dieta primariamente protica, o uso dos esqueletos carbnicos dos aminocidos como combustvel, resulta na produo de muita uria a partir dos grupos amino excedentes. Durante a desnutrio severa, a quebra das protenas musculares fornece a maior parte do combustvel metablico, e a produo da uria aumenta substancialmente. Essas variaes na demanda de atividade do ciclo da uria, a longo prazo, so satisfeitas pela regulao das velocidades da sntese das enzimas do ciclo da uria e da carbamil fosfato sintetase I no fgado. Todas essas enzimas so sintetizadas em velocidade maior, quer em indivduos com desnutrio protica ou com dietas de contedo protico alto. Em uma escala de tempo menor, o ajuste do fluxo atravs do ciclo da uria envolve a regulao alostrica de pelo menos uma enzima. A primeira enzima na via, a carbamil fosfato sintetase I, ativada alostericamente por N-acetilglutamato, que sintetizado de AcetilCoA e glutamato. A N-acetilglutamato sintase , por sua vez, ativada pela arginina, um intermedirio do ciclo da uria que se acumula quando a produo da mesma muito lenta para acomodar amnia produzida pelo catabolismo de aminocidos.

Quais os cofatores envolvidos na transferncia de unidades de um carbono, ou unidades monocarbnicas, nas reaes de catabolismo dos aminocidos? E quais so as suas funes? A transferncia destas unidades, em geral, envolve um dos trs seguintes cofatores: biotina, tetraidrofolato, ou S-adenosilmetionina. Estes cofatores so empregados para transferir as unidades monocarbnicas em diferentes estados de oxidao. A biotina transfere o CO2 que representa o estado de maior oxidao do carbono. Os outros dois cofatores so especialmente importantes no metabolismo dos aminocidos e dos nucleotdeos. O tetraidrofolato geralmente est envolvido na transferncia de grupos monocarbnicos nos estados de oxidao intermedirios; a forma mais reduzida do cofator transporta um grupo metila, uma forma mais oxidada transporta os grupos metenil, formil ou formino. A S-adenosilmetionina est envolvida na transferncia de grupos metila, o estado de maior reduo do carbono. A fenilcetonria a causa mais comum de nveis elevados de fenilalanina no sangue, que pode competir com outros aminocidos pelo transporte atravs da barreira hematoceflica, resultando em retardo mental. Explique como esta doena gentica acontece. Um defeito gentico na primeira enzima da via catablica da fenilalanina (fenilalanina hidroxilase) responsvel pela doena. A fenilalanina hidroxilase insere um dos dois tomos do O2 na fenilalanina para formar um grupo hidroxila da tirosina. O outro tomo de oxignio reduzido H2O pelo NADH, que tambm necessrio na reao. Quando a fenilalanina hidroxilase geneticamente defeituosa, uma via secundria do metabolismo da fenilalanina, normalmente pouco empregada, passa a ter grande atuao. Nesta via, a fenilalanina sofre transaminao com o piruvato para liberar fenilpiruvato. A fenilalanina e o fenilpiruvato acumulam-se no sangue e nos tecidos e tambm so excretados na urina. A maior parte do fenilpiruvato descarboxilada para produzir fenilacetato, ou reduzida para formar fenilactato. O acmulo de fenilalanina, ou seus metablitos, nos primeiros dias de vida, impede o desenvolvimento normal do crebro, provocando retardo mental severo. A succinil-CoA um intermedirio do ciclo do cido ctrico. Existem quatro aminocidos que so degradados por vias que formam a succinil-CoA. Comente. Aminocidos: Metionina / isoleucina / treonina / valina A metionina doa o seu grupo metila para um de vrios receptores possveis, e trs dos quatro tomos remanescentes do seu esqueleto carbnico so convertidos nos do propionato, na forma de propionil-CoA. A isoleucina sofre transaminao seguida de descarboxilao oxidativa do -cetocido resultante. O esqueleto remanescente com cinco tomos de carbono derivado da isoleucina sofre uma oxidao posterior, liberando acetil-CoA e propionil-CoA. A treonina tambm convertida em propionil-CoA. O propionil-CoA derivado destes trs aminocidos convertido em succinil-CoA por uma via em que: o propionato sofre carboxilao a metilmalonil-CoA, epimerizao do metilmalonil-CoA e, finalmente, sua converso em succinilCoA pela enzima dependente da coenzima B12 (metilmalonil-CoA mutase). A valina, depois de sua transaminao e descarboxilao, uma srie de reaes de oxidao converte os quatro carbonos remanescentes em metilmalonil-CoA, que transformado em succinil-CoA. O que so aminocidos cetognicos e glicognicos? Cite-os. Aminocidos glicognicos: so os que podem ser convertidos a piruvato, -cetoglutarato, succinil-CoA, fumarato e oxalacetato e, a partir destes, podem ser convertidos a glicose e glicognio. So eles: Triptofano, fenilanalina, tirosina, isoleucina. Aminocidos cetognicos: Alguns dos tomos de carbono destes aminocidos podem liberar corpos cetnicos no fgado, pela converso do acetoacetil-CoA em acetona e -hidrxido butirato. So eles: triptofano, fenilalanina, tirosina, isoleucina, leucina e lisina. CAPTULO 18 : FOSFORILAO OXIDATIVA E FOTOFOSFORILAO 01- DEFINA FOSFORILAO OXIDATIVA E FOTOFOSFORILAO.

Fosforilao oxidativa a sntese de ATP direcionada pela transferncia de eltrons ao oxignio e a fotofosforilao a sntese de ATP direcionada pela luz. Estes dois processos juntos so responsveis pela maioria da sntese de ATP pelos organismos aerbicos. A fosforilao oxidativa a culminao do metabolismo produtor de energia nos organismos aerbicos. Todas as etapas enzimticas na degradao oxidativa dos carboidratos, gorduras e aminocidos nas clulas aerbicas convergem para esta etapa final da respirao celular. Nos eucariotos, a fosforilao oxidativa ocorre nas mitocndrias. Envolve a reduo do oxignio gua com eltrons doados pelo NADH e FADH 2, e ocorre igualmente bem na luz ou na escurido. A fotofosforilao a maneira pela qual os organismos fotossintetizantes captam a energia da luz solar. Ocorre nos cloroplastos. Envolve a oxidao da gua a oxignio , com o NADP+ como receptor de eltrons, e absolutamente dependente da luz. Estes dois processos ocorrem atravs de mecanismos altamente semelhantes. 02- QUAIS OS TRANSPORTADORES DE ELTRONS QUE AGEM NA CADEIA RESPIRATRIA E COMO ELES FUNCIONAM ? O NADH e o NADPH so transportadores de eltrons hidrossolveis que se associam reversivelmente com as desidrogenases. O NADH age como um transportador difusvel carregando os eltrons derivados das reaes catablicas ao seu ponto de entrada na cadeia respiratria . O NADPH um transportador difusvel que supre de eltrons as reaes anablicas. As flavoprotenas ( que contm FMN ou FAD ) podem participar na transferncia de um ou dois eltrons. A ubiquinona ( Coenzima Q ou UQ ) uma benzoquinona lipossolvel com uma cadeia lateral isoprenide muito longa. capaz de atuar na juno entre um doador de dois eltrons e um receptor de um eltron. Ela facilmente difusvel dentro da bicamada lipdica da membrana mitocondrial interna. Os citocromos so protenas transportadoras de eltrons que contm ferro (presente no grupo heme). Os citocromos do tipo a e b e alguns do tipo c so protenas integrais da membrana. As protenas Fe-S so transferidas de eltrons que contm Fe em associao com os tomos de S inorgnicos e/ou tomos de S de resduos de Cys na protena. Estas protenas participam na transferncia de um eltron onde um dos tomos do Fe est oxidado ou reduzido. Complexo I : tambm chamado complexo da NADH desidrogenase, um grande complexo de flavoprotenas, est alocado na membrana mitocondrial interna. O complexo transfere um par de equivalentes redutores do NADH para seu grupo prosttico, FMN. O complexo tambm centros de Fe-S atravs dos quais os eltrons passam no seu caminho do FMN at a UQ. O Ubiquinol (UQH2) difunde-se na membrana do complexo I at o complexo III , onde oxidado a UQ. O fluxo de eltrons atravs da UQ do complexo I at o III acompanhado pela movimentao de prtons da matriz mitocondrial para o lado externo da membrana mitocondrial interna. Complexo II : succinato at a UQ. Tambm chamado succinato desidrogenase ( a nica enzima ligada membrana no ciclo do cido ctrico ). Contm dois tipos de grupos prostticos e pelo menos quatro protenas diferentes. Uma protena possui um FAD covalentemente ligado e um centro Fe-S com quatro tomos de Fe; uma segunda protena Fe-S est tambm presente. Acredita-se que os eltrons passem do succinato para o FAD, e depois dos centros Fe-S at a UQ. Complexo III : UQ at citocromo c . O complexo III, tambm chamado de complexo dos citocromos bc1 ou UQcitocromo c oxirredutase contm os citocromos b562 , citocromo c1, uma protena Fe-S e, pelo menos, seis outras subunidades proteicas. A passagem entre a UQ transportadora de dois eltrons, e os transportadores de um eltron (citocromos b562,b566, c1 e c ) realizada numa srie de reaes chamadas de ciclo Q. O efeito total da transferncia de eltrons : UQH2 oxidado a UQ e o citocromo c reduzido. O complexo III funciona como uma bomba de prtons; em razo da orientao assimtrica do complexo, os prtons produzidos quando a UQH2 oxidada a UQ so liberados para o espao entre as membranas, produzindo um gradiente de prtons.

Complexo IV: reduo do oxignio. O complexo IV tambm chamado de citocromo oxidase contm os citocromos a e a3 . Tambm contm dois ons cobre, Cu a e Cu b, que so cruciais para a transferncia de eltrons para o oxignio. O fluxo de eltrons do citocromo c para o oxignio, atravs do complexo IV , induz a movimentao de prtons da matriz para o espao entre as membranas, contribuindo para a fora motora do prton. 03- RELACIONE AGENTES QUE INTERFEREM COM A FOSFORILAO OXIDATIVA OU A FOTOFOSFORILAO. - Tipos de interferncia: Inibio da transferncia de eltrons: *Amital ( droga barbitrica ), Rotenona ( inseticida ) e antibitico Piericidina A inibem o fluxo dos eltrons dos centros Fe-S do complexo I at a UQ. *Antimicina A age no complexo III bloqueando a transferncia de eltrons do citocromo b ao citocromo c1. *Cianeto e CO inibem a citocromo-oxidase (complexo IV) *DCMU compete com Qb pelo stio de ligao no fotossistema II -Inibio da ATP sintase: *Oligomicina ou Venturicidina antibiticos txicos que se ligam ATP sintase na mitocndria inibem a F1 e CF1 *Dicicloexil carbodiimida (DCCD) bloqueia o fluxo de prtons atravs de F0 e CF0 . -Desacoplamento da fosforilao da transferncia de eltrons: *Carbonilcianeto fenilidrazona e 2,4-dinitrofenol (DNP) so cidos fracos com propriedades hidrofbicas; induzem o desacoplamento sem romper a estrutura mitocondrial. *Valinomicina tambm desacopla a fosforilao oxidativa. *Protena desacopladora (termogenina) forma poros que conduzem prtons na membrana interna da mitocndria da gordura marrom. -Inibio da troca ATP ADP : *Atractilosdio inibe a adenina nucleotdio translocase. 04- EXPLIQUE A DEPENDNCIA DA TRANSFERNCIA DE ELTRONS COM A SNTESE DE ATP NA MITOCNDRIA. A transferncia de eltrons ao longo da cadeia respiratria acompanhada pelo bombeamento de prtons para fora da membrana mitocondrial interna, levando a uma diferena de concentrao dos prtons. A membrana mitocondrial interna impermevel aos prtons, os quais podem reentrar na matriz apenas atravs de canais especficos dos prtons (F0 da ATP sintase). A fora prton-motora aparentemente supre a energia necessria para forar a dissociao do ATP fortemente ligado enzima. 05- EXPLIQUE COMO OCORRE A LIBERAO DO ATP RECM SINTETIZADO NA ATP SINTASE PELA FORA PRTON-MOTORA . A ATP sintase possui trs stios de ligao muito fortes para o ATP na sua poro F1. Em qualquer momento, um dos trs stios est na conformao T (forte, ligado ao ATP) , um segundo est na conformao L (fraca, ligada ao ADP + Pi) e um terceiro est na conformao O (aberta). A fora prton-motora provoca, pelo fluxo de prtons pelo canal F0 , uma mudana conformacional, onde o stio T convertido em O, liberando o ATP. O stio L convertido em T, onde ADP + Pi formam o ATP e o stio O torna-se um stio L, onde o ADP + Pi ligam-se fracamente. 06- SABENDO-SE QUE A MEMBRANA INTERNA DA MITOCNDRIA NO PERMEVEL AO NADH CITOSLICO, EXPLIQUE COMO O NADH GERADO PELA GLICLISE , DO LADO DE FORA DA

MITOCNDRIA, PODERIA SER UTILIZADO (REOXIDADO) PARA A SNTESE DE ATP COM TRANSFERNCIA DE ELTRONS. O NADH transfere os seus equivalentes redutores ao oxaloacetato citoslico produzindo malato. O malato passa para a matriz atravs do transportador malato cetoglutarato. Na matriz o malato passa dois equivalentes redutores ao NAD+ produzindo oxaloacetato e NADH matricial para ser usado na cadeia respiratria ( transferindo eltrons para a sntese de ATP). O oxaloacetato transaminado formando aspartato, que transportado para o citosol pelo transportador glutamato aspartato. O oxaloacetato regenerado no citosol. 07- COMO OCORRE A CONVERSO DA ENERGIA DE UM FTON ABSORVIDO PELA CLOROFILA EM SEPARAO DE CARGAS NO CENTRO DE REAO DO FOTOSSISTEMA ? Quando a clorofila da folha de um vegetal excitada pela luz visvel, muito pouca fluorescncia observada. Ao invs disso ocorre uma transferncia direta da energia da clorofila excitada que uma clorofila antena, para uma outra clorofila antena, permitindo que a primeira retorne ao seu estado fundamental. A clorofila antena, juntamente com o centro de reao fotoqumica formam um fotossistema. Porm a clorofila antena tem a funo de transmitir a energia luminosa para o centro de reao, que onde vo ocorrer as reaes fotoqumicas, ou seja a converso de um fton numa separao de cargas. A transferncia de energia entre clorofilas antenas chamada transferncia ressonante de energia, e repetida para uma subsequente vizinha, at que a clorofila do centro de reao fotoqumica torne-se excitada. Nesta molcula de clorofila especial, um eltron depois de excitado promovido a um orbital de energia superior. Ento esse eltron passa a um receptor de eltrons vizinhos que parte da cadeia de transferncia de eltrons do cloroplasto, que adquire uma carga negativa. Enquanto a molcula excitada fica com um orbital vazio. Mas no por muito tempo, pois uma molcula doadora vizinha doa um eo- para a molcula excitada e se torna positivamene carregada. Assim temos uma molcula carregada negativamente, uma neutra e outra carregada positivamente, ou uma separao de cargas. 08- DESCREVA COMO O COMPLEXO DO CITCROMO bf UNE OS FOTOSSISTEMAS II E I ? Depois da excitao do fotossistema II, os eltrons esto armazenados na QbH2 e so transferidos pro fotossistema I atravs do complexo do citocromo bf e da plastocianina. O complexo do citocromo bf formado de um citocromo b e um citocromo f. Da QbH2 os eltrons fluem para o citocromo f do complexo e desse para a plastocianina que vai doar os eltrons para a reduo do fotossistema I. Como o transporte feito do QbH2 , que carrega 2 eltrons , para a plastocianina que s carrega um eltron por vez, preciso que os eltrons passem por um ciclo Q, onde os eltrons passam do QbH2 ao citocromo b do complexo, um por vez . Este ciclo resulta no bombeamento de H+ do estroma para a luz do tilacide, tendo como resultado a formao de um gradiente de prtons. Como o tilacide possui volume pequeno, a diferena de PH medida entre o estroma e a luz do tilacide , representa uma poderosa fora impulsionadora para a sntese do ATP. 09- O QUE O FLUXO CCLICO DE ELTRONS EM CLOROPLASTO ? O fluxo cclico de eltrons envolve apenas o fotossistema I. Os eltrons que passam de P700 at a ferredoxina no continuam at o NADP+, mas se movimentam de volta atravs do complexo citocromo bf at a plastocianina. A plastocianina doa eltrons ao P700, a iluminao deste promove a transferncia de eltrons at a ferredoxina. Desta forma, a iluminao do fotossistema I pode induzir que os eltrons ciclem continuamente par fora do centro de reao fotossistema I e voltem a ele, cada eltron sendo propelido no ciclo pela energia produzida pela absoro de um fton. O fluxo cclico de eltrons no acompanhado pela formao lquida do NADPH ou a produo de O2. Entretanto, ele acompanhado pelo bombardeamento de prtons e pela fosforilao do ADP em ATP, referida como fosforilao cclica. Acredita-se o fluxo cclico de eltrons e a fotofosforilao ocorrem quando as clulas das plantas j esto amplamente supridas com poder redutor na forma de NADPH, mas necessitam de ATP adicional para outras necessidades metablicas. Regulando partilha dos eltrons entre a reduo do NADP+ e a fosforilao cclica, a planta ajusta a relao NADPH e ATP produzido nas reaes luminosas para ajustar as necessidades desses produtos nas reaes de fixao do carbono e outros processos que requeiram energia. 10- COMO AS BACTRIAS HALOFLICAS USAM A ENERGIA LUMINOSA PARA SINTETIZAR O ATP? A bactria haloflica conserva a energia derivada da luz solar absorvida , por uma variante do princpio empregado pelos organismos fotossintetizantes verdadeiros. A membrana plasmtica dessas bactrias contm reas de pigmentos que absorvem luz, chamadas de reas prpuras. Essas reas so constitudas de molculas empacotadas da protena bacteriorrodopsina que contm o

retinal como grupo prosttico (aldedo da vitamina A). Quando as clulas so iluminadas as molculas da bacteriorrodopsina so excitadas por um fton absorvido. medida que as molculas excitadas revertem ao estado inicial, uma alterao conformacional induzida leva liberao de prtons para fora da clula , formando um gradiente de PH atravs da membrana plasmtica . Os prtons tendem a se difundir de volta para a clula atravs do complexo ATP sintase na membrana , semelhante quele das mitocndrias e cloroplastos , suprindo a energia da sntese de ATP. Desta forma a halobactria pode usar a luz para suplementar o ATP sintetizado pela fosforilao oxidativa com o O2 . Entretanto, as halobactrias no produzem O2 , nem realizam a fotorreduo do NADP+; a sua maquinria fototransdutora mais simples que a das cianobactrias de plantas superiores. CAP. 18 11. Cite as principais diferentes e as principais semelhanas entre o processo de fosforilao oxidativa e a fotofosforilao . a) Diferenas: FOSFORILAO OXIDATIVA : sntese de ATP direcionada pela transferncia de eltrons ao oxignio ; a culminao do metabolismo produtor de energia nos organismos aerbicos ; nos eucariotos , ela ocorre nas mitocndrias ; envolve a REDUO do oxignio a gua com eltrons doados pelo NADH e FADH2 , e ocorre igualmente bem na presena ou na ausncia de luz . FOTOFOSFORILAO : sntese de ATP direcionada pela luz ; maneira pela qual os organismos fotossintetizantes captam a energia da luz solar , fonte fundamental de energia na biosfera FOTOSSNTESE ; ocorre nos cloroplastos ; envolve a OXIDAO da gua a oxignio , com o NADP+ como receptor de eltrons , e absolutamente dependente da luz ; b) Semelhanas : - so processos que envolvem fluxo de eltrons atravs de uma cadeia de intermedirios redox, transportadores ligados a membrana , que incluem as quinonas , citocromos e protenas Fe-S ; a energia livre , disponvel por este fluxo de eltrons atravs de uma membrana impermevel ao prton , conservando parte da energia livre de oxidao dos combustveis metablicos como um potencial eletroqumico transmembrana ; o fluxo transmembrana de prtons atravs do gradiente de concentrao por canais proticos especficos fornece a energia livre para sntese de ATP . Ambos so processos conservadores de energia e ocorrem atravs de mecanismos fundamentalmente semelhantes 12. D a composio dos quatro complexos transportadores de eltrons , a parte da cadeia que cada um catalisa e o grupo prosttico correspondente a cada um . COMPLEXO I : complexo de NADH desidrogenase . Transfere eltrons do NADH at a ubiquinona . Grupos prostticos : FMN e Fe-S . COMPLEXO II : complexo succinato desidrogenase . Transfere eltrons do succinato at a ubiquinona . Grupos prostticos : FAD e Fe-S . COMPLEXO III : complexo dos citocromos bc1 ou ubiquinona-citocromo c oxidoredutase . Transfere eltrons da ubiquinona at o citocromo c . Grupos prostticos : Hemes e Fe-S . - COMPLEXO IV : complexo citocromo oxidase . Transfere eltrons do citocromo c at o oxignio . Grupos prostticos : Hemes , Cua e Cub .

13. Como a oxidao dos substratos, via transferncia de eltrons atravs da cadeia

respiratria, coopera com a ATP sntase para realizar a fosforilao do ADP ATP? Atravs da teoria quimiosmtica aplicada mitocndria, os eltrons do NADH e outros substratos oxidtivos passam atravs uma cadeia transportadores, os complexos I, II, III e IV ligados membrana interna da mitocndria, arranjados assimetricamente nesta. A transferncia de eltrons ao longo da cadeia respiratria acompanhada pelo bombeamento de prtons para fora da membrana mitocondrial interna ,realizada apenas pelos complexos I,III e IV , o que leva a uma diferena na concentrao de prtons transmembrana, um gradiente tanto qumico quanto eltrico, e portanto, de prtons (pH). A energia eletroqumica inerte nesta diferena de concentro de prtons e separao de cargas, a fora proto- mo tora representa uma conservao de parte da energia da oxidao. A membrana mitocondrial interna impermevel aos prtons, a fora proto- motora subsequentemente usadapara impulsionar a sntese do ATP. catalisada pelo complexo F1 associado com F0 (partes constituinte da ATPsntetase que liga a matriz ao meio externo ), medida que os prtonsfuem passivamente passivamente de volta para a matriz, atravs dos poros formados pelo em F0. 14. A sntese de ATP , atravs da fosforilao do ADP acoplada transferncia de eltrons ao O2, cite de que forma este acoplamento pode ser explicado. .Este acoplmento obrigatrio pode ser demonstrado na mitocndria atrvs de desacopladores qumicos incluem o 2,4 dinitrofenol (DNP) e um grupo de compostos relacionadosao carbonilcianeto fenilidrazona, a inibidores como, barbituratos, malanatos, antimicina,cianeto e outros e a ruptura mecnica da membrana mitocondrial. Os desacopladores soidos hidrofobcos fracos. Sua hidrofobicidade permite-lhes difundir facilmente atrvs dasmembranas mitocondriais de forma protonada, eles podem liberar um prton se dissociar)dissipando a transferncia de eltrons da fosforilao oxidativa, criando um curto-circuitoeltrico atravs da membrana mitocondrial, permitindo que a respirao continue sem a sntese de ATP. As substncias inbidoras, como o cianeto, que bloqueia a transferncia de eltrons entre acitocromo oxidase e o O2, inibe tanto a respirao quanto a sntese deATP, estes inbidores atuam na cadeia de transporte de eltrons, nos complexos ligados a membrana interna das mitocdrias. A teoria quimiosmtica tambm explica um terceira condio que desacopla a oxidao da fosforilao, a ruptura da membrana miticondrial.Semuma membrana intacta no pode haver nenhum gradiente de prtons e, portanto, conservao de energia nem sntese de ATP. 15. Como as mitocndrias desacopladas no tecido adiposo marrom produzem calor? Na maioria dos mamferos, incluindo o homem, os recm-nascidos possuem um tipo de tecido chamado de tecido adiposo marrom, no qual a oxidao dos combustveis no funciona para produzir ATP, mas sim gerar calor para manter o recm nascido aquecido. As mitocndrias do tecido adiposo marrom oxidam combustveis ( particularmente cidos graxos ) normalmente, passando os eltrons atravs da cadeia respiratria at o O2. Esta transferncia de eltrons acompanhada pelo bombeamento de prtons para fora da matriz, da mesma forma que em outra mitocndria. Entretanto, a mitocndria do tecido adiposo marrom, possui a penas uma protena na sua membrana interna: a termogenina, tambm chamada de protena desacopladora (UCP). Esta protena, uma protena integral da membrana, fornece uma via para os prtons retornarem matriz sem passarem atravs do complexo F0F1. Em conseqncia deste curto-circuito dos prtons, a energia da oxidao no conservada pela formao do ATP, mas dissipada como calor, o que contribui para manter a temperatura corporal. Para os recm-nascidos sem cabelos, a manuteno do calor corporal um importante uso da energia metablica. Animais hibernantes dependem das mitocndrias desacopladas do tecido adiposo marrom para gerar o calor durante o longo perodo de dormncia do inverno. 16 .De que forma as molculas dos pigmentos das membranas dos tilacides transduzem a luz absorvida em energia qumica? Nos cloroplastos os eltrons fluem da H2O para o NADP+, induzidos pela luz que a provedora de energia (subida da montanha). A habilidade de uma molcula em absorver luz depende do arranjo dos eltrons em volta do ncleo atmico na sua estrutura. Quando um fton absorvido, um eltron deslocado para um nvel de energia mais alto. Uma molcula que tenha absorvido um fton est num estado excitado, que geralmente instvel. Os eltrons deslocados para orbitais de energia superiores, usualmente retornam rapidamente aos seus orbitais normais de energia inferiores, fornecendo o quantum absorvido como luz ou calor ou usando-o para o trabalho qumico. A clorofila e os pigmentos acessrios absorvem a energia luminosa para a fotossntese. 17. Como a clorofila canaliza a luz absorvida para os centros de reao?

Os pigmentos que absorvem a luz nas membranas tilacides esto arranjados em conjuntos funcionais chamados fotossistemas. Os agregados podem absorver luz em todo o espectro visvel, mas especialmente entre 400 e 500nm e entre 600 e 700nm. Todas as molculas num fotossistema podem absorver ftons, mas apenas umas poucas podem transduzir a energia luminosa em energia qumica. Um pigmento transdutor consiste de vrias molculas de clorofila combinadas com um complexo protico que tambm contm quinonas fortemente ligadas; este complexo tambm chamado de centro de reao fotoqumica. As outras molculas do pigmento num fotossistema so tambm chamadas de molculas antenas ou captadoras de luz. Elas funciona na absoro e transmisso da energia luminosa, em velocidade muito alta para o centro de reao, onde ocorrem as reaes fotoqumicas . As molculas de clorofila nas membranas tilacides esto ligadas a protenas integrais da membrana (protenas ligadoras das clorofilas a e b, ou CAB) que orientam a clorofila em relao ao plano da membrana e conferem propriedades de absoro de luz que so ligeiramente diferentes daquelas da clorofila livre. Quando as molculas de clorofila isoladas so excitadas pela luz a energia absorvida rapidamente liberada como fluorescncia e calor. Porm podem ser observadas 5 etapas: 1) transferncia direta de energia da clorofila excitada (uma clorofila antena) para uma molcula de clorofila vizinha, excitando esta segunda molcula e permitindo que a primeira retorne ao seu estado basal 2). Esta transferncia ressonante de energia repetida para uma terceira, quarta, ou subsequente vizinha, at que a clorofila do centro de reao fotoqumica torne-se excitada 3). Nesta molcula de clorofila especial, um eltron promovido pela excitao a um orbital de energia superior. Este eltron ento passa a um receptor de eltron vizinho que parte da cadeia de transferncia de eltrons do cloroplasto, deixando a molcula de clorofila excitada com um orbital vazio 4). O receptor de eltrons, desta forma, adquire uma carga negativa. O eltron perdido pela clorofila do centro de reao substitudo por um eltron de ma molcula doadora de eltrons vizinha 5), que se torna positivamente carregada. Desta forma, a excitao pela luz provoca a separao de carga e inicia uma cadeia de oxidao-reduo. Acoplados ao fluxo de eltrons dependente de luz esto os processos que geram ATP e NADPH. 18. Na fotossntese que ocorre nas clulas autotrficas sabe-se que, nas fosforilaes que correspondem a fase clara, forma-se as substncias ATP e NADPH que so utilizadas na fase escura, constituda pelas reaes de reduo do CO2 para produo de glicose. Explique resumidamente o que ocorre na fase clara e escura da fotossntese. Fase clara: Nesta etapa esto envolvidos pigmentos denominados PSI, (possui centro de reao designado P 700 e uma lata relao clorofila a/clorofila b)e PSII ( centro de reao P 680 , quantidade aproximadamente equivalente de clorofila a e b e tambm pode conter clorofila c). Pela ao da luz, eltrons do sistema PSI ficam capacitados a reduzir uma substncia que transfere por sua vez a ferredoxina (Fd) e NADP para formar NADPH. O sistema PSI fica deficiente de eltrons que suprida pelos eltrons do SPII (atravs da energia luminosa). Por sua vez o SPII fica deficiente de eltrons. A reposio dos eltrons se d pela degradao da gua e no qual ocorre a formao de O2. Os eltrons ao percorrerem a cadeia de transportadores com potenciais crescentes ocasionam a liberao de energia livre que utilizada no processo de fosforilao do ADP e consequente formao do ATP. Fase escura: O ATP e NADPH formados na fase clara so utilizados na reduo de CO2 para produo de glicose. Conhecida tambm como reduo do carbono ,esta sequncia apresenta como substncia chave a 1.5difosforribulose. Este fixa o CO2 , originando um cetocido que se hidrolisa com produo de 3-fosfoglicerato ( a enzima que catalisa estas reaes a carbonildismutase). O 3-fosfoglicerato ento fosforilado, numa reao que consome ATP formando-se 1,3difosfoglicerato. O CO2 fixado agora sob a forma de carboxila de cido sofre reduo pelo NADPH, numa reao catalizada pela 3-fosfogliceraldedo-desidrogenase. Segue-se uma srie de reaes que leva a regenerao do 1,5 difosforibulose completando-se assim o ciclo. A formao da glicose d-se a partir da 6fosfofrutose. 19. Para cada mol de CO2 incorporado na fase escura da fotossntese quantos mols de ATP e NADPH so consumidos? Faa um balano final da sequncia, considerando que cada tomo de carbono da glicose seja proveniente de 1 mol de CO2. a. b. c. 2 moles de ATP na transformao 3-fosfoglicerato = 1,3 difosfoglicerato 2 moles de NADPH na reao 1,3 difosfoglicerato = 3-fosfogliceraldedo 1 mol ATP na fosforilao de 5-fosforribulose = 1,5 difosforribulose

Para a formao de glicose provenientes do CO2 so necessrias 6 voltas no ciclo ( 6 mols de CO2) tornando-se a equao final: 6CO2 + 12 NADPH + 12 H+ + 18 ATP + 12 H2O C6H12O6 + 18 ADP + 18 HPO42- + 12 NADP+

20. Responda falso (F) ou verdadeiro (V) para as sentenas fazendo as correes das falsas. a) Na fotofosforilao cclica, a luz ultravioleta excita o sistema de pigmentos PSII que provoca a decomposio da gua (F) O sistema PSI.

a. b. c.

Na fotofosforilao cclica no atua o sistema de pigmentos PSII. (V) A energia para a sntese de ATP, fornecida pelo fluxo de eltrons no cloroplasto. (V) A reduo do CO2 s pode ser feita na presena de luz (F) Na fase escura que ocorre a reduo do CO2. e) ATP e NADPH gerados na fase clara so consumidos na fase escura onde se forma a glicose. (V)

CAPTULO 19: BIOSSNTESE DOS CARBOIDRATOS 1- Sete das dez reaes enzimticas da gliconeognese so na realidade inverses de reaes da gliclise. Entretanto, trs passos na gliclise so essencialmente irreversveis. Sendo um deles a converso de fosfoenolpiruvato em piruvato. Explique como no metabolismo esta reao contornada para que ocorra esse processo biossinttico celular: a gliconeognese. Primeiramente, o piruvato transportado do citosol para a mitocndria ou gerado no interior da mitocndria por desaminao da alanina. Logo aps, a piruvato carboxilase, uma enzima que requer a coenzima biotina, converte o piruvato em oxaloacetato. Piruvato + HCO3- Oxaloacetato + ADP + Pi + H+ Em outro passo o oxaloacetato formado do piruvato na mitocndria reduzido reversivelmente a malato pela malato desidrogenase mitocondrial e com consumo de NADH. Oxaloacetato + NAD+ Oxaloacetato + NADH + H+ Depois o malato abandona a mitocndria atravs do transportador malato-a-cetoglutarato presente na membrana mitocondrial interna. No citosol, o malato reoxidado em oxalatoacetato com a produo de NADH citosslico. Malato + NAD+ Oxaloacetato + NADH + H+ O oxaloacetato ento convertido em fosfoenolpiruvato pela fosfoenolpiruvato carboxiquinase, atravs de uma reao dependente de Mg+2 na qual o GTP funciona como fosfato doador: Oxaloacetato + GTP Fosfoenolpiruvato + CO2 + GTP Sendo esta ltima uma reao reversvel nas condies intracelulares. 2 - Explique as etapas da gliconeognese quando o precursor glicognico o lactato, citando as diferenas com relao via em que o piruvato o precursor glicognico: O lactato converte-se em piruvato no citosol do hepatcito liberando NADH. Aqui no necessria a exportao do malato da mitocndria para o citosol como na via em que o piruvato o precursor. Depois que o piruvato produzido pela reao da lactato desidrogenase transportado para o interior da mitocndria, este convertido em oxaloacetato pela piruvato carboxilase. Este oxaloacetato convertido diretamente em fosfoenolpiruvato por uma forma mitocondrial da fosfoenolpiruvato carboxiquinase. O fosfoenolpiruvato ento transportado para fora da

mitocndria e continua na via glicognica. 3- Mostre a razo da gliconeognese ser um processo dito custoso, e comprove a irreversibilidade deste mesmo processo biossinttico e da gliclise. A soma das reaes biossintticas que levam do piruvato at a glicose sangnea livre : 2 Piruvato + 4 ATP + 2 GTP + 2 NADH + 4 H2O Glicose + 4 ADP + 2 GDP + 6Pi + 2 NAD+ + 2H+. Para cada molcula de glicose formada a partir do piruvato, seis grupos fosfato de alta energia so consumidos, vendo claramente que esta equao no representa a simples reverso da equao para a converso da glicose em piruvato pela gliclise, uma vez que esta libera apenas duas molculas de ATP: Glicose + 2 ADP + 2 Pi + 2 NAD+ 2 Piruvato + 2 ATP + 2NADH + 2 H+ + 2 H2O Por isso, diz-se ser a sntese da glicose a partir do piruvato um processo relativamente custoso. A gliconeognese e a gliclise so processos essencialmente irreversveis dentro das condies intracelulares por apresentarem uma variao global de energia livre altamente negativa ( a gliclise apresenta variao de energia livre de 63 KJ/mol ). 4- a) Como feita a regulao hormonal da gliclise e da gliconeognese no fgado de forma a manter constante o nvel de glicose no sangue? Essa regulao mediada pela frutose-2,6-bifosfato, efetor alostrico para as enzimas fosfofrutoquinase-1 e frutose-1,6-bifosfatase. Quando a frutose-2,6-bifosfato une-se ao stio alostrico na fosfofrutoquinase-1, ela aumenta a afinidade desta enzima pelo seu substrato frutose-6-fosfato e reduz sua afinidade pelos seus inibidores alostricos, o ATP e o citrato. Portanto, a frutose-2,6-bifosfato ativa a fosfofrutoquinase-1 e estimula a gliclise no fgado. A frutose-2,6-bifosfato tambm inibe a frutose-1,6-bifosfato e desta forma desacelera a gliconeognese. De modo geral, pode-se dizer que um aumento da concentrao de frutose-2,6-bifosfato estimula a gliclise e inibe a gliconeognese, e uma diminuio da frutose-2,6-bifosfato inibe a gliclise e estimula a gliconeognese. b)O que e como mantida a concentrao da frutose-2,6-bifosfato? A frutose-2,6-bifosfato um regulador e no um intermedirio na gliconeognese ou gliclise, cujo nvel celular reflete o nvel do hormnio glucagon no sangue, que por sua vez varia com o nvel de glicose sangnea. A concentrao celular da frutose-2,6-bifosfato mantida pelas velocidades relativas de sua formao e destruio. A frutose-2,6-bifosfato formada pela fosforilao da frutose-6-fosfato, catalisada pela fosfofrutoquinase-2, e sua hidrlise pela frutose-2,6-fosfatase. O equilbrio destas duas atividades no fgado e, portanto, o nvel celular de frutose-2,6-bifosfato, regulado pelo glucagon. O glucagon estimula a adenilato ciclase, uma enzima que sintetiza 3'5'-AMP cclico (AMPc) a partir do ATP. O AMP cclico, por sua vez, estimula a protena quinase, que transfere um grupo fosfato de ATP para a protena bifuncional fosfofrutoquinase-2/frutose-2,6-bifosfatase-2. A fosforilao desta protena aumenta a atividade da frutose-2,6-bifosfatase-2 e inibe a fosfofrutoquinase-2. O glucagon, portanto, diminui o nvel celular de frutose-2,6-bifosfato, inibindo a gliclise e estimulando a gliconeognese.

5- a) De forma comparativa, como utilizado o glicognio no fgado e no msculo? No fgado, o glicognio funciona como um reservatrio de glicose fcil de ser convertido em glicose sangnea para a distribuio para os outros tecidos, enquanto no msculo o glicognio quebrado atravs da gliclise para fornecer energia na forma de ATP para a contrao muscular. b) Explique as etapas para a sntese do glicognio. O ponto de incio da sntese do glicognio a glicose-6-fosfato. Esta pode ser derivada da glicose livre pela ao da hexoquinase, entretanto a maior parte da glicose ingerida convertida em lactato que aps captado pelo fgado convertido em glicose-6-fosfato pelo processo gliconeognico. D-glicose + ATP D-glicose-6-fosfato + ADP 6-Uma vez que o glicognio sintase no pode fazer as ligaes (a1 6) nos pontos de ramificao do glicognio, que enzimas permitem que isso ocorra e qual o efeito biolgico desta ramificao? Os pontos de ramificao do glicognio so formados por uma enzima ramificadora do glicognio, a amilo(1 4) a (1 6) transglicosilase ou glicosil-(4 6)-transferase. Esta enzima, glicosil-(4 6)-transferase, catalisa a transferncia de um fragmento terminal de 6 ou 7 resduos de glicosil da extremidade no-redutora de uma ramificao do glicognio que tem pelo menos 11 resduos para o grupo hidroxila do C-6 de um resduo de glicose nesta mesma cadeia, ou em outra cadeia da molcula do glicognio e em um ponto mais para o interior, criando uma nova ramificao. O efeito biolgico da ramificao deixar a molcula do glicognio mais solvel e aumentar o nmero de extremidades no-redutoras, o que torna o glicognio mais reativo s enzimas glicognio fosforilase e glicognio sintase. 7- a) Faa uma comparao entre a glicognio sintase e a glicognio fosforilase em relao ao ciclo de fosforilao e desfosforilao das formas ativas e inativas dessas enzimas. A quebra de glicognio regulada atravs da modulao alostrica e da modulao covalente da fosforilase do glicognio. A fosforilase a, a forma ativa que contm resduos de serina fosforilados, desfosforilada pela fosforilase a fosfatase para liberar fosforilase b, a forma relativamente inativa, que pode ser estimulada por AMP, seu modulador alostrico. A fosforilase b quinase pode converter a fosforilase b em fosforilase a por fosforilao dos resduos de serina. A forma ativa da glicognio sintase a glicognio sintase a, e ao contrrio da fosforilase do glicognio, a forma desfosforilada. Quando ela fosforilada em dois grupos hidroxila de resduos especficos de serina por uma protena quinase, a glicognio sintase a convertida em sua forma menos ativa, a glicognio sintase b. A reconverso da forma menos ativa, glicognio sintase b, em sua forma ativa promovida pela fosfoprotena fosfatase que remove o grupo fosfato dos grupos de serina. b) De que forma os hormnios glucagon e insulina determinam a relao entre as formas ativa e menos ativa da fosforilase do glicognio e da glicognio sintase no fgado? No fgado, o equilbrio entre a sntese do glicognio e a quebra do mesmo controlado pelos hormnios glucagon e insulina. Esses hormnios, pela regulao do nvel de AMPc em seu tecido alvo, determinam a relao entre as formas ativas e menos ativa da fosforilase do glicognio e da glicognio sintase. Esses hormnios tambm regulam a concentrao de

frutose-2,6-bifosfato e, consequentemente, o equilbrio entre gliconeognese e gliclise. 8- Quais os trs destinos possveis do tomo de carbono fixado no gliceraldedo-3-fosfato, o produto do segundo estgio da fixao do CO2. Qual desses destinos o mais importante? O carbono fixado no gliceraldedo-3-fosfato na fixao do CO2 pode ser reciclado para formar a ribulose-1,5-bifosfato e os que sobram, ou seja, o restante, podem ser empregados como fonte de energia na via da gliclise e ciclo do cido ctrico, ou ainda pode ser convertido em sacarose para transporte ou amido para armazenamento. O destino mais importante desse carbono a reciclagem para formar a ribulose-1,5-bifosfato, substrato importante no ciclo de Calvin. 9- A membrana interna do cloroplasto impermevel para a maioria dos compostos fosforilados (frutose-6-fosfato, glicose-6-fosfato e frutose-1,6-bifosfato, por exemplo). a)Como esta organela transporta (exporta) seus produtos fosforilados? Qual a importncia desse sistema de transporte? O cloroplasto transporta os compostos fosforilados atravs de um sistema especfico que catalisa a troca de um Pi por uma triose-fosfato(tanto a diidroxiacetona quanto o 3-fosfoglicerato). Esse contra-transporte move uma triose-fosfato para fora do cloroplasto (citosol) simultaneamente entrada de Pi (interior do citoplasma) que ser empregado na fotofosforilao. Esse mecanismo importante pois os produtos da fixao fotossinttica do carbono, as trioses-fosfatos, so enviadas para o citosol, onde funcionam como ponto de partida da biossntese da sacarose, e por outro lado o Pi que entra no cloroplasto necessrio para a fixao de CO2. Sem essa troca o Pi disponvel no cloroplasto ser depletado impedindo a posterior fixao de CO2. b)Qual a funo do sistema de contra-transporte Pi-triose fosfato, alm da troca de Pi e triose-fosfato na membrana interna do cloroplasto? Como o ATP e o NADPH no cruzam a membrana do cloroplasto, esse sistema de contra-transporte possui a capacidade de mov-los indiretamente para o citosol, onde sero empregados. A diidroxiacetona fosfato sintetizada no estroma transportada para o citosol onde convertida enzimaticamente em 3-fosfoglicerato, gerando ATP e NADPH. O 3-fosfoglicerato volta ao cloroplasto e o efeito lquido final a produo de NADPH/NADH e ATP no citosol. 10- Como se d a regulao do metabolismo dos carboidratos em vegetais? Exemplifique. A regulao do metabolismo dos carboidratos em clulas vegetais dependente da luz, uma vez que certas enzimas so ativadas pela iluminao da clula. Outras enzimas vegetais que regulam esse metabolismo so, ainda, dependentes do pH e das concentraes de certos substratos. As enzimas fixadoras de CO2, por exemplo, so reguladas pela luz e requer ATP e NADPH que tm as suas concentraes aumentadas no estroma do cloroplasto quando estes so iluminados. Vrias enzimas do estroma, por sua vez, so reguladas pelo pH e pela concentrao de Mg2+, como a enzima rubisco que mais rpida em pH alcalino e em altas concentraes de Mg2+. A frutose-1,6-bifosfatase tambm requer Mg2+ e muito dependente do pH. CAPTULO 20: BIOSSNTESE DE LIPDIOS 1- Por que as clulas se do ao trabalho de adicionar CO2 para sintetizar um grupo malonil a partir de um grupo acetila, se logo aps, durante a formao do acetoacetato, perdem o mesmo CO2 ?

Na oxidao dos cidos graxos, o rompimento da ligao entre dois grupos acila ( a clivagem de uma unidade de acetila da cadeia acila) altamente exergnica. A condensao de dois grupos acila endergnica. O envolvimento de grupos malonil ativados, em lugar de grupos acetila, tornam a reao de condensao termodinamicamente favorvel. No passo de condensao, a descarboxilao do grupo malonil facilita o ataque nucleoflico do carbono metileno ao tioster que liga o grupo acetila ao -cetoacil-ACP sintase, deslocando o grupo SH da enzima. O acoplamento da condensao descarboxilao do grupo malonil torna o processo global altamente exergnico. 2- Explique os passos da formao do palmitato. O grupo acetila da acetil CoA transferido para o grupo Cys-SH da cetoacil-ACP sintase; reao catalisada pela acetil-CoA-ACP transacetilase. A segunda reao transfere o grupo malonil do malonil CoA para o grupo SH da ACP, reao catalisada pela malonil-CoA-ACP transferase. No complexo da sintase carregada, os grupos acetila e malonil esto muito prximos um do outro e so ativados para o processo de alongamento da cadeia. Condensao: A condensao dos grupos ativados acetila e malonil formam um grupo acetoacetil ligado ACP atravs do grupo SH da fosfopantetena, sendo produzida uma molcula de CO2. Nesta reao, catalisada pela cetoacil-ACP sintase, o grupo acetila transferido do grupo Cys-SH desta enzima para o grupo malonil no SH da ACP, tornado-se a unidade de dois carbonos metil-terminal do novo grupo acetoacil. O tomo de carbono presente no CO2 que se forma nesta reao o mesmo tomo de carbono que foi originalmente introduzido no malonil-CoA a partir de HCO3- pela reao da acetil CoA carboxilase. Assim, a ligao covalente do CO2 durante a biossntese dos cidos graxos apenas transiente sendo removida logo aps cada unidade de dois carbonos ser inserida na cadeia. A energia extra necessria para conduzir a sntese dos cidos graxos de maneira favorvel fornecida pelo ATP empregado na sntese de malonil-CoA a partir de acetil-CoA e HCO3-. Reduo do grupo carbonila: O acetoacetil-ACP formado no passo de condensao sofre reduo do grupo carbonila para formar D- -hidroxibutiril-ACP, reao catalisada pela -cetoacil ACP redutase e o doador de eltrons o NADPH Desidratao: No primeiro passo, os elementos da gua so removidos do D- -hidroxibutiril-ACP para liberar uma dupla ligao no produto, trans-delta 2-butenoil-ACP. A enzima que catalisa esta desidratao a -hidroxiacil-ACP desidratase. Reduo da dupla ligao: A dupla ligao do trans-delta 2-butanoil ACP reduzida( saturada) para formar butiril-ACP pela ao da enoil-ACP-redutase e o NADPH o doador de eltrons. As reaes da cido graxo sintase so repetidas para formar o palmitato. Sete ciclos de condensao e reduo produzem o grupo palmitoil com 16 carbonos. A alongao da cadeia geralmente pra neste ponto e liberado o palmitato livre da molcula de ACP pela ao de uma atividade hidroltica existente no complexo da sintase. 8AcetilCoA+7ATP+14NADPH+14H+ Palmitato+8CoA+6H2O+7ADP+7Pi+14NADP+ 3- Como o acetato transportado para fora da mitocndria ? Como a membrana mitocondrial interna impermevel ao acetil-CoA, um transportador indireto transfere os equivalentes do grupo acetila atravs da membrana interna. O acetil CoA intramitocondrial reage primeiro com o oxaloacetato para formar citrato, na reao do cido ctrico catalizada pela citrato sintase. O citrato ento passa para o citosol pela membrana mitocondrial interna atravs do transportador de tricarboxilato. No citosol a clivagem do citrato pela citrato liase regenera o acetil-CoA; esta reao conduzida pelo investimento de energia oriunda do ATP. Como o oxaloacetato no pode voltar matriz mitocondrial completamente pois no existe um transportador para ele, este reduzido pela malato desidrogenase citosslica em malato,este volta matriz mitocondrial atravs da malato alfa cetoglutarato que troca por citrato e reoxidado em oxaloacetato para completar o transporte. 4- Como feita a regulao da biossntese de cidos graxos ? A reao catalizada pela acetil-CoA carboxilase o passo limitante da velocidade na biossntese dos cidos graxos e esta enzima um stio importante de regulao. Nos vertebrados, o palmitoil-CoA, o principal produto da sntese de cidos graxos, age como um inibidor por retroalimentao da enzima, e o citrato um ativador alostrico. Quando h um aumento nas concentraes mitocondriais de acetil-CoA e de ATP, o citrato transportado para fora da mitocndria e transforma-se tanto no precursor do acetil-Coa citosslico como em um sinal alostrico para a ativao da acetil-CoA carboxilase.

A acetil-CoaA carboxilase tambm regulada por alterao covalente. A fosforilao disparada pelos hormnios glucagon e epinefrina, a inativa, desta forma, desacelera a sntese de cidos graxos . Na sua forma (desfosforilada) a aceil-CoA carboxilase polimeriza-se em longos filamentos; a fosforilao acompanhada por dissociao em subunidades monomricas e perda de atividade. 5-Cite os passos para a biossntese de triacilgliceris explicando o processo. O glicerol 3- fosfato o precursor dos triacilgliceris e pode ser obtido na gliclise, pela ao da Glicerol 3- fosfato desidrogenase citosslica ligada ao NAD. J no fgado e no rim ele tambm formado do glicerol pela ao da glicerol quinase. Primeiro estgio: Acilao dos grupos hidroxila livres do glicerol 3- fosfato por duas molculas de acil graxo CoA liberando o diacilglicerol 3- fosfato ( fosfatidato). A via, agora, pode seguir para a formao de triacilglicerol ou glicerofosfolipdio. Via do triacilglicerol: 1) O fosfatidato hidrolisado pela fosfatidato fosfatase para formar um 1,2- diacilglicerol. 2) Os diacilgliceris, so, ento, convertidos em triacilgliceris por transesterificao com um terceiro acil graxo CoA. ( Esquema: vide Lehninger pgs 490 e 491 ). 6- Cite os passos da biossntese de glicerofosfolipdeos, explicando o processo. A mesma via que leva aos triacilgliceris at fosfatidato acontece aqui tambm. Frequentemente, mas no invariavelmente, o cido graxo em C-1 saturado e em C-2 insaturado. Em geral, a montagem dos fosfolipdeos, a partir de precursores simples, requer: 1) sntese de uma molcula esqueleto (o glicerol ou a esfingosina): 2) ligao de cidos graxos ao esqueleto, atravs de ligaes ster ou amida: 3) adio de um grupo cabea hidroflico, unido ao esqueleto atravs de uma ligao fosfodister: e, finalmente, em alguns casos, 4) alterao ou mudana do grupo cabea para liberar o produto fosfolipdico final. O grupo cabea polar dos glicerofosfolipdeos ligado atravs de uma ligao fosfodister, na qual cada uma das hidroxilas alcolicas (uma no grupo cabea polar e uma no C-3 do glicerol) forma um ster com um cido fosfrico. No processo biossinttico uma das hidroxilas ativada primeiro pela ligao de um nucleotdeo, a citidina difosfato (CDP). A citidina monofosfato (CMP) ento deslocada em um ataque nucleoflico pela outra hidroxila. A CDP ligada tanto ao diacilglicerol, formando de fato um fosfatidato ativado, CDP- diacilglicerol. (Estratgia 1), como ao grupo hidroxila do grupo cabea (Estratgia 2). Esquema: vide Lehninger pg 492). 7- Como ocorre a biossntese do esfingolipidios? A biossntese deste lipdios compartilham precursores e alguns mecanismos, ocorrendo em 4 estgios. No 1 estgio ocorre a sntese de uma amina com 18 C (esfinganina) a partir do palmitoil-CoA e da serina. O NADPH entra na via para reduzir a -cetoesfinganina em esfinganina. No 2 estgio h a ligao de um cido graxo esfinganina atravs de uma ligao amida para formar ceramida. No 3 estgio h uma dessaturao da poro esfiganina da ceramida formando assim a esfingosina. No 4 e ltimo estgio h a ligao de um grupo cabea para produzir um esfingolipdio (cerebrosdio ou esfingomielina). Na formao da esfingomielina, a fosfatidilcolina que doa o grupo cabea (fosfocolina) para a esfingosina . No cerebrosdio, o grupo cabea um acar doado por UDP-glicose que se liga diretamente ao C1 hidroxila da esfingosina. 8-Como realizado a biossntese do colesterol a partir da acetil-CoA? Essa sntese ocorre em quatro estgios. No primeiro estgio da biossntese do colesterol, leva ao intermedirio mevalonato. Duas molculas de acetil-CoA, que se condensam formando acetil-CoA, que se condensa com uma terceira molcula de acetil-CoA, liberando um composto de 6 carbonos, o -hidroxi- -metilglutaril-CoA (HMGCoA).Estas duas reaes so catalisada por tiolase e HMG-CoA sintase, respectivamente, so reversveis e sua ocorrncia no implica no comprometimento definitivo da clula com a sntese do colesterol . Portanto, a terceira reao representa esse comprometimento e o passo decisivo, irreversvel; a reduo do AMG-CoA em mevalonanato ,so gastas 4 eltrons doados por 2 NADPH, liberando 1 CoA-SH, esta reduo catalisada pela HMG-CoA redutase. No segundo estgio envolve a converso do mevalonato em duas unidades de isopreno ativado. Neste estgio trs grupos fosfato so transferidos de 3 molculas de ATP para mevalonato formando assim o 3-fosfato-5-

pirofosfamelanato, sendo que um da trs fosfato se liga ao grupo -HO do mevalonato e se torna um bom grupo abandonador; No prximo passo este grupo fosfato e o grupo carboxila prximo saem deixando uma dupla ligao no produto de 5 tomos de carbonos, -isopentil pirofosfato (primeiro isopreno ativado) que se isomeriza formando o dimetil pirofosfato (segundo isopreno ativado). No terceiro estgio h a condensao de seis unidades de isoprenos ativado para formar a estrutura do esqualeno com 30 tomos de carbonos. O 2 e o 1 isopreno ativado se condensam" cabea (extremidade na qual o fosfato esta ligado) com cauda" respectivamente, na qual formado uma cadeia de 10 carbonos (geranil pirofosfato) e liberado um grupo PPi. O geranil pirofosfato sofre outra condensao "cabea com cauda" com o 1 isopreno ativado liberando o fornesil pirofosfato (15 C) . Por fim duas molculas de fornesil pirofosfato ligam-se cabea com cabea para formar o esqualeno (30 C). No estagio seguinte 4 ocorre a ciclizao do esqualeno formando os quatros anis do ncleo esteride e em seguida uma serie de mudanas (oxidaes remoo ou adio de grupos metilas) leva a produo do colesterol .A principal causa da ciclizao a grande aparncia da estrutura linear do esqualeno com a cclica dos esturdies. A ao da esqualeno monooxigenase acrescenta um tomo do O2 extremidade da cadeia do esqualeno , formando um epxido (esqualeno-2,3-epxido). O NADPH reduz o outro tomo de oxignio do O2 at H2O. As duplas ligaes do epxido formado esto posicionado de tal forma que uma estrutura cclica, lanoesterol, que contem 4 anis caractersticos do ncleo esteride e uma OH no C3. Finalmente o lonoesterol convertido em colesterol por uma srie de aproximadamente 20 reaes. 9-De que forma o colesterol transportado do tecido de origem para outros tecidos? E como o mecanismo de penetrao dessa molcula nas clulas? O colesterol , essencialmente, insolvel em gua. Com isso, ele transportadora forma de lipoprotenas plasmticas, que so agregados moleculares de protenas transportadoras especficas chamadas apolipoprotenas com combinaes variadas de fosfolipdios, colesterol, steres do colesterol e triacilgliceris. As apolipoprotenas ("apo"designaa protena na sua forma livre de lipdios) combinam com os lipdios para formar vrias classes de partculas compostas de lipoprotenas e que so agregados esfricos com os lipdios hidrofbicos na centro e as cadeias laterais hidroflicas dos aminocidos das protenasna superfcie. A penetrao do colesterol nas clulas atravs da endocitose mediada por receptores que foi estudada, mais especificamente para as partculas de LDL ( lipoprotenas de baixa densidade). Consiste no reconhecimento das molculas de LDL por receptores de superfcie especfico e de natureza protica (receptores da LDL) que estavam presentes nas clulas que precisam captar o colesterol. A ligao de LDL em um recptor de LDL inicia o processo de endocitose o que traz a LDL e seu receptor associado para o interior da clula dentro de um endossomo. Este endossomo eventualmente contm enzimas que hidrolisamos steres de colesterol, liberando o colesterol e cidos graxos no interior do citosol. O receptor da LDL escapa da degradao e retorna para a superfcie celular, onde ele pode funcionar novamente na captao de nova LDL. 10-Quais so os fatores que regulam a biossntese de colesterol nos mamferos? A produo de colesterol regulada pela concentrao de colesterol intracelular e pelos hormnios glucagon e insulina. O passo limitante na via para o colesterol a converso em mevanolato do beta-hidroxi-beta-metilglutanilCoA. A HMG-CoA redutase, a enzima que catalisa esta reao, inibida alostericamente por derivados do colesterol, ainda no identificados, e do intermedirio-chave mevalonato. A HMG-CoA redutase tambm regulada por hormnios. Esta enzima existe nas formas fosforilada (inativa) e desfosforilada (ativa). O glucagon estimula a fosforilao (inativa) e a insulina promove a desforilao, ativando a enzima e favorecendo a sntese de colesterol. Em adio a esta inibio imediata da HMG-CoA redutase j existente, concentraes altas de colesterol intracelular tambm diminuem a sntese de novas molculas da enzima. Finalmente, altas concentraes de colesterol intracelular provocam uma reduo na produo da LDL, diminuindo a captao do colesterol, a partir do sangue. CAPTULO 20 1) - Como a gliclise pode regular a sntese de cidos graxos ? O Piruvato um produto da via glicoltica .Uma vez dentro da matriz mitocondrial ,ele d origem a ACETIL CoA ou Oxalacetato (reao anaplertica ),que condensam-se formando o Citrato ,regulador a curto prazo da sntese dede cidos graxos . O alto nvel de Citrato exportado da mitocndria para o citosol estimulando a biossntese de cidos graxos. 2) - De onde vem o NADPH responsvel pela energia do processo de sntese de cidos graxos?

Uma vez fora da mitocndria o Citrato convertido a ACETIL CoA e Oxaloacetato. O Oxaloacetato reduzido a Malato pelo NADH proveniente da giclise .O Malato ento sofre uma descarboxilao oxidativa transformando-se em Piruvato com a liberao de NADPH,fonte de energia para a sntese de cidos graxos. Outra fonte de NADPH a via oxidativa da via das pentoses. 3) - Porque os triglicrides so utilizados pelo organismo como reserva de energia ? So molculas que concentram muita energia ,pois so muitos reduzidos, e ocupam menor volume no organismo que glicdios e protenas ,por serem armazenados na forma anidra. 4) - Quais hormnios e como eles regulam a biossntese de cidos graxos? Quando h grande ingesto de protenas e carboidratos estes devem ser armazenados na forma de gordura .Esta converso promovida pela Insulina (estmulo da via glicoltica).Por oposia trs outros hormnios inibem esta converso (Glucagon ,hormnio de crescimento e hormnio da adrenal-cortical). 5) - Qual a importncia funcional de um complexo enzimtico responsvel pela sntese de cidos graxos ao invs da ao de enzimas individualizadas (no ligadas covalentemente )? O arranjo espacial do complexo enzimtico aumenta a probabilidade de ligao entreo substrato e as enzimas e ao mesmo tempo limita o local de reao , evitando a entrada de substratos competitivos. 6) - fale sobre os estgios da biossntese do colesterol a partir do acetil-CoA. No estgio 1 as trs unidades de acetato se condensam para formar um intermedirio com seis carbonos, o mevalonato. O estgio 2 envolve a converso do mevalonato em unidades de isopreno ativado e o estgio 3 consiste na polimerizao das seis unidades com cinco tomos de carbono do isopreno para formar a estrutura linear de esqualeno, com 30 tomos de carbono. No estgio 4, a ciclizao de esqualeno forma os quatro anis do ncleo esteride e uma posterior srie de mudanas ( oxidaes, remoo ou migrao de grupos metila) levam ao produto final, o colesterol. 7) - Quais as duas estratgias para ligao dos grupos cabea na biossntese dos glicerofosfolipdios? O grupo cabea polar dos glicerofosfolipdios ligado atravs de uma ligao fosfodister, na qual cada uma das hidroxilas alcolicas ( uma no grupo cabea polar e uma no C-3 do glicerol ) forma um ster com um cido fosfrico. No processo biossinttico uma das hidroxilas ativada primeiro pela ligao de um nucleotdio, a citidina difosfato ( CDP ). A citidina monofosfato ( CMP ) ento deslocada em um ataque nucleoflico pela outra hidroxila. A CDP ligada tanto ao diacilglicerol, formando de fato um fosfatidato ativado, CDP-diacilglicerol ( estratgia 1 ), como ao grupo hidroxila do grupo cabea (estratgia 2 ). 8) - Quais os estgios da biossntese dos esfingolipdios ? _ sntese de uma amina com 18 carbonos a esfinganina a partir do palmitoil-CoA e da serina _ ligao de um cido graxo atravs de ligao amida para formar um ceramida _dessaturao da poro esfinganina para formar esfingosina _ligao de um grupo cabea para produzir um esfingolipdio, tal como um cerebrosdio ou esfingomielina. 9) - Na via do colesterol o passo limitante a converso do beta-hidroxi-beta-metil-glutaril-CoA em mevalonato, que catalisada por uma enzima reguladora complexa. Como se d a inibio e a regulao dessa enzima? A HMG-CoA redutase inibida alostericamente por derivados do colesterol, ainda no identificados, e do intermedirio-chave mevalonato. A HMG-CoA redutase tambm regulada por hormnios. Esta enzima existe na forma fosforilada ( inativa ) e desforilada ( ativa ). O glucagon estimula a fosforilao ( inativao ) e a insulina promove a desforilao, ativando a enzima e favorecendo a sntese de colesterol.

10) - Na espcie humana os hormnios esterides so derivados do colesterol. Explique como ocorre a clivagem da cadeia e a oxidao no processo de sntese desses hormnios. A sntese desses hormnios requer a remoo de parte ou de todos os carbonos presentes na "cadeia lateral" que progeta C-17 no anel D do colesterol. A remoo da cadeia lateral toma lugar na mitocndria de tecidos que fazem hormnios esterides. Ela envolve primeiro a hidroxilao de dois carbonos adjacentes na cadeia lateral ( C-20 e C-22 ) seguida da clivagem de uma ligao entre elas. A formao dos hormnios individuais tambm envolve a introduo de tomos de oxignio. Todas as reaes de hidroxilao e oxigenao na biossntese dos esterides so catalisadas por oxidases de funo mista que empregam NADPH, oxignio e o citocromo mitocondrial P-450.