CONSERVACIN DE BACTERIAS PRODUCTORAS DE AMILASAS

RESULTADOS Halo neto de bacteria productora de amilasa antes de la conservacin: 18,4 mm Recuento de esporas antes de la conservacin: 2,6 x 109 UFC/mL

Tabla 01. Evaluacin de los mtodos de conservacin del cultivo de la bacteria amiloltica a 30 das de iniciado el proceso.

Medio de conservacin 1. AA - EL 2. Agua destilada 3. Papel de filtro 4. Arena 5. Arena - almidn *Clulas viables

Halo neto (mm) 11,3 10,1 7,75 12,0 15,0

Pureza No No No No No

Porcentaje de viabilidad (%) * 9,23 0,005

DISCUSIN

Los objetivos de la conservacin de los cultivos se podran resumir en los siguientes aspectos: Preservar la pureza gentica del cultivo sin prdida de ninguna de sus propiedades bioqumicas. Preservar los niveles de su productividad inicial. Lograr que el cultivo pueda ser transportado y manejado con facilidad. Esto ltimo puede ser un factor esencial en la seleccin de un mtodo de preservacin. Para analizar adecuadamente las cepas microbianas en el laboratorio se deben alcanzar tres objetivos: Que el cultivo a conservar sea puro, evitando que se produzcan contaminaciones durante el proceso de conservacin; que durante el tiempo de conservacin sobrevivan al menos el 70 80% de las clulas y que estas clulas permanezcan genticamente estables. El mejor anlisis que se puede hacer para un mtodo de conservacin, es ver si el microorganismo conserva an sus caractersticas iniciales, es decir, que no haya mutado. Segn esto, podemos decir que el mejor mtodo de conservacin en nuestro grupo de prctica, fue el mtodo de conservacin en Arena - almidn. Esto segn el halo de hidrlisis de la bacteria conservada y su porcentaje de viabilidad despus de 30 das de conservacin. El mtodo de conservacin en tierra estril ha sido utilizado ampliamente con hongos y actinomycetes, los cuales han sido mantenidos en estas condiciones varios aos, tambin se puede utilizar tierra para la conservacin directa de suspensiones de esporas. Este mtodo nos dio una buena viabilidad en comparacin con los otros mtodos, y mayor an cuando se le adiciona almidn, que el microorganismo puede utilizarlo como fuente de energa. Los subcultivos, como el que se hizo en agar almidn extracto de levadura, es un mtodo de conservacin que consiste en el repique peridico del cultivo en un medio nutritivo fresco; el intervalo de transferencia vara con el microorganismo, debiendo considerarse el medio adecuado para cada especie. Los inconvenientes que se presentan son varios: a) incremento de la posibilidad de mutacin con cada transferencia, con prdida de las caractersticas del organismo, b) riesgo de contaminacin, c) alteraciones en el medio de cultivo. En el mtodo de conservacin en papel filtro en ausencia de agua es un procedimiento adecuado y sencillo, para conservar cepas. De esta forma se han logrado conservar

cepas de Streptomyces y Salmonella por perodos de hasta 2 aos a temperatura ambiente. El mtodo de conservacin en agua destilada es muy utilizado y da altos porcentajes de viabilidad en diversos tipos de microorganismos, tanto hongos filamentosos como levaduras y algunas bacterias. La estabilidad para caracteres morfolgicos y fisiolgicos es buena, pero no se ha comprobado para caracteres especficos como la virulencia, el poder fermentativo, etc. En la prctica, este mtodo no mostr la mayor viabilidad, porque presento un menor recuento as como su actividad metablica en la produccin de amilasas. Dentro de los factores que pudieron influir en nuestros resultados, el ms importante podra ser la transferencia, puesto que la mutacin se produce cuando al microorganismo se lo transfiere a un nuevo medio de cultivo; las condiciones de esterilidad con lo que se trabaj, ya que tienen que ser apropiados y as evitar la contaminacin que se present en algunos cultivos del microorganismos al momento de su anlisis respectivo.