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QUATRIEME PARTIE

PATH 0 LO-GI E

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techniques tropical,
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CHAPITRE I

GBnBralitBs

Chaque appareil de I'organisme a une fonction, un r61e B remplir.


Toutes les fonctions sont likes entre elles, s'associent, dependent les unes
des autres. De leur ktroite dkpendance rksulte une fonction unique, qui
en s'accomplissant normalement sert B maintenir I'individu en vie et en
bonne santb.
Si, 2 un moment donn6, sous I'influence de causes diverses cette
fonction unique ne s'accomplit pas normalement, I'individu est malade.
La maladie est un trouble dans le bon fonctionnement d'un organisme
vivant. II y a une multitude de troubles qui peuvent fausser le fonctionne-
ment des organes ;iI y a donc une multitude de maladies.

Cause des maladies (Etiologie)

Toute maladie est due B une ou plusieurs causes.


L'etiologie est I'btude des causes des maladies. Certaines causes
sont dkterminantes, car sans elles la maladie ne serait pas : ce sont gene-
ralement des microbes, des virus, des parasites. D'autres sont favorisantes
et adjuvantes, elles aident I'action des premieres.
Exemple : le refroidissement (cause adjuvante) aide I'action du
virus pkripneumonique qui determine la maladie connue sous le nom de
pbripneumonie chez les bovins.
Mais iI y a aussi d'autres causes qui tiennent B I'individu l u i - m h e ,
et que I'on appelle des causes prbdisposantes : pour des raisons d'hkredite,
ou 3 cause de leur constitution, certains individus sont plus predisposes
que d'autres B contracter certaines maladies. On dit que leur terrain est
favorable B I'kclosion de telle ou telle maladie.

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Reconnaissance des maladies

L'examen c l i n i q u e a pour but d'examiner les malades et d'en


apprecier 1'6tat. Les animaux n'ayant pas la facultk de parler, iI est indispen-
sable de les soumettre 3 une observation rigoureuse et approfondie afin
de dkcouvrir les symptemes qui sont les signes de la maladie (encore
appelBs signes cliniques).
Le diagnostic est I'art de connaitre les maladies et de les diffkrencier
entre elles. I1 est bask sur I'ensemble des symptames observes.
L'importance du diagnostic est considerable : le pronostic (prBvision
de 1'6volution de la maladie et du sort des malades), le t r a i t e r n e n t et la
prophylaxie (mesures hygieniques et sanitaires) en dBcoulent.
Un diagnostic inexact peut avoir des conskquences trGs graves :
consommation de viandes charbonneuses, introduction et genkralisation
de la peste bovine dans un troupeau ou dans un pays indemne, etc.

g16ments du diagnostic

La s6miologie est I'btude des signes des maladies.


L'examen g6nBral du sujet, suivi d'un examen mkthodique, region
par region, appareil par appareil, permettent de dBcouvrir les signes qui
mettront sur la voie du diagnostic.

Attitude
L'attitude de I'animal au repos peut litre anormale et traduire un etat
pathologique. La somnolence, la tristesse, I'abattement, la prostration
indiquent en general 1'6closion d'une maladie infectieuse. L'agitation,
I'excitation marquent au contraire le debut de la congestion cerebrale.
La raideur d'une partie du corps doit faire penser au tetanos. L'animal qui
souffre d'un mernbre cesse d'appuyer sur ce membre et le porte en avant.
L'attitude de I'animal en marche revhle Bgalement son etat. Le malade
hesite 2 se deplacer. Son allure est molle, chancelante, trbbuchante, ou
Bbrieuse. La marche met en Bvidence les boiteries, les paralysies, I'essouf-
flement.

Temperature
La temperature donne de prBcieuses indications. Le tableau ci-dessous
indique la temperature rectale moyenne des animaux sains :
cheval et h e , , . . , . . . , , , , . , . 37,5 - 38 "C
bovides adultes. . , . . . . . . . . , . . 38 - 39 OC
veaux . . . . . . , . . . , . . . . . . . . . . 39 - 4 O O C
dromadaires . , , . . . . , . . , , . . . . 37 o C

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moutons et chevres . . . . . . . . . . . 39 - 40 OC
porcs . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39 - 39,5 OC
chiens . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 8 3 - 39 OC
lapins . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39,5 OC
volailles . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40,5 - 42,5 OC
La temperature peut subir des oscillations normales : le travail et les
variations atmospheriques (tornades, nuits froides, etc.) provoquent des
differences de plus d'un degr6; chez toutes les esphces, la temperature
est au moins un demi-degr6 plus Blevee le soir que le matin.
Les variations anormales en moins (hypothermie) ou en plus
(hyperthermie) sont des indications importantes pour le diagnostic et le
pronostic. C'est ainsi qu'une hypothermie accusee traduit le plus souvent
un etat grave et se constate surtout durant I'agonie. Quant 8 I'hyper-
thermie, elle est le principal element de la fievre.
Prise d e temperature : on prend la temperature au moyen d u n
thermometre medical que I'on introduit dans I'anus de I'animal.
Secouer auparavant le thermometre pour faire descendre le mercure
au-dessous de 37 OC, le mouiller ou le graisser et I'introduire doucement
surtout chez les petits animaux. Tout mouvement brutal risquerait de
blesser la muqueuse du rectum.
On laisse le thermometre en place pendant deux minutes. Puis on le
retire et on lit la temperature.
I1 faut chaque fois, apres usage et avant de remettre le thermometre
dans son etui, I'essuyer avec un coton sec, puis le desinfecter avec un
coton imbibe d'alcool. Sans cette precaution on risque de transmettre les
maladies infectieuses d'un animal 9 un autre.

Frequence du pouls et acceleration d e la respiration


La frequence du pouls et I'acceleration de la respiration caracterisent
aussi la fievre. Le tableau ci-dessous indique pour chaque espece le
nombre moyen normal des pulsations et des respirations par minute.
Pulsations Respirations
cheval . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36 9 40 9810
bceuf . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 0 a 60 15 9 18
mouton et,ch&vre . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 75 A 85 1 2 9 15
porc . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6 0 8 80 13 9 15
chien . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 909100 16 8 18
volailles . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 130 8 165 1 4 8 26
D'une faCon
. genbrale
- ces nombres sont plus Bleves chez les jeunes
sujets et moins Bleves chez les vieux.
Exemple :
poulain . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 0 9 60 0812
veau . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 708100 a 8 20
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Ils peuvent Bgalernent varier normalement sous des influences
diverses : travail, chaleur, etc. Mais en outre, ils subissent des modifications
dans un grand nombre de maladies.
Le pouls s'observe : 9 I'artere faciale et 6 I'arthre sous-maxillaire chez
le cheval et le charneau, I'artere faciale e t aux arteres coccygiennes chez
le bceuf, i I'artere fernorale chez le chien.

App6tit
L'app6tit est un facteur important du diagnostic. I I est plus ou moins
modifi6 dans un grand nombre de maladies aigues w chroniques. II peut
etre augment6 (boulirnie), dirninu6 ou supprime (anorexie), deprave
(pica)..

h a t des muqueuses
L'Btat des rnuqueuses (conjonctive, pituitaire, rnuqueuse buccale,
rnuqueuse vulvaire), normalement rosbes, est influence par de nornbreuses
maladies g6nkrales. Elles sont psles dans I'ankrnie, rouges dans les
congestions, jaunes dans I'ictere. On peut observer, sur la conjonctive
notarnrnent, de petites taches rouges appelees p6t6chies, qui souvent
sont un indice de trypanosornose. La congestion de la vulve est I'une des
premieres manifestations de la peste bovine. Dans cette rnaladie, 9 la
congestion font suite des ulc6rations, et les rngmes lesions sont Bgalernent
observees, mais plus tardivement, sur les rnuqueuses des cavites nasales
et de la bouche.
L'un des principaux signes de la fievre aphteuse est la constitution
d'aphtes, petites vesicules qui siegent de preference sur la rnuqueuse
buccale.

Jetage e t ecoulement de la salive


Norrnalement, aucune secr6tion provenant des yeux, des cavitBs
nasales et de la bouche ne doit s'ecouler 2 I'exterieur. On donne le nom
de jetage aux rnatihres rejetees par les naseaux. Le jetage traduit toujours
un Btat pathologique (coryza, angine, bronchite, rnorve, gourme, etc.)
et ses caracteres : muqueux, sanguinolent, alirnentaire, etc. permettent de
diff6rencier certains 6tats rnorbides.
L'ecoulement de la salive peut traduire une inflammation banale de
la bouche (stornatite) ou une rnaladie grave : peste bovine, fievre aphteuse.
Cet Bcoulernent peut &re cause non seulement par une salivation trop
abondante (ptyalisme), rnais aussi par une paralysie du pharynx qui
ernpeche la dbglutition, ou par la paralysie de la mschoire inferieure
rendant impossible la ferrneture de la bouche (rage).

Toux
L'anirnal sain ne tousse pas. La toux traduit un 6tat pathologique
(laryngite, bronchite, pneurnonie, pleurksie, peripneurnonie, etc.). Elle est

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plus ou rnoins frbquente, plus ou rnoins forte ou grasse. Pour faire tousser
un animal iI faut lui presser assez fortement le larynx ou la trachee.

Flexibilite des reins


La region des reins doit 6tre souple. On juge le degre de flexibilite
des reins en exerGant des pressions avec I'extr6mit6 des doigts sur les
muscles lombaires de chaque cBt6 de la colonne vertebrale, au niveau
des lombes.

M i c t i o n e t defecation
Les e x c r h e n t s liquides et solides fournissent de nombreux rensei-
gnements.
Les rnictions (action d'uriner) sont plus ou moins frequentes, plus
ou moins abondantes (diabete). I I peut y avoir incontinence ou retention
d'urine. L'urine peut &re trouble, sanguinolente (polypes de la verge),
hematurique (charbon bacteridien), hernoglobinurique (piroplasrnose).
Dans I'hematurie, I'urine est teintBe en rouge par du sang normal ; dans
I'hbmoglobinurie, elle est de la couleur du the, plus ou moins foncee,
colorBe par I'hbmoglobine du sang dejs decompose.
Les conditions de la defecation caracterisent partiellement certains
Btats morbides. La diarrhee, qui est caracterisee par des dbfecations
frequentes de f6ces liquides, prend une importance variable suivant sa
forme et son intensite : alimentaire, sereuse, sanguinolente, etc. Dans la
peste bovine, la diarrhee est intense et sanguinolente. La defecation peut
litre ralentie : iI y a dans ce cas constipation. Celle-ci presente des
degres variables. Lors d'obstruction intestinale, la defecation n'est plus
possible.

Examen d e l a s u r f a c e du c o r p s
L'exarnen de l a surface du corps permet de caracteriser en premier
lieu les maladies de la peau (eczema, gales, teignes, etc.) ; de plus,
de nombreuses maladies generales peuvent se manifester par des lesions
c ut a nBes.
Voici quelques exernples : les aphtes de la fievre aphteuse &gent
non seulement dans l a bouche, mais encore sur les rnamelles et les
trayons; la clavel6e, qui est une maladie du rnouton, se caracterise surtout
par des pustules qui se forment dans les regions 2 peau fine; le porc,
atteint de rouget, prbsente des plaques rouges sur la peau ; les principales
lesions de la lymphangite Bpizootique du cheval : abces, ulcerations,
cordons, sont visibles 2 la surface du corps.

Examen des appareils profonds


L'examen'des appareils profonds necessite la mise en ceuvre de
procedes speciaux, et parrni ceux-ci nous citerons : la percussion et
I'auscultation. La percussion se fait soit directement avec les doigts, soit

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indirectement b I'aide d'une sorte de petit marteau caoutchoute appeld
plessim6tre; elle met en evidence la sonorite de la region examinde
(matit6 de la poitrine dans la pneurnonie). Par I'auscultation o n distingue
'les bruits provenant de I'inthrieur de I'organisme (pournon, ceur). Elle
se fait avec I'oreille directement appliquee sur la poitrine ou avec un
instrument : le st6toscope.
En possession des diffhrents elements recueillis, il est alors possible
de formuler un diagnostic, c'est-A-dire de reconnaltre la maladie, soit
immediatement, soit par etapes successives.
Souvent, le diagnostic clinique doit etre precise par I'autopsie des
animaux du meme troupeau dejb morts ou sacrifies B cet effet e t par divers
examens de laboratoire (exarnen microscopique du pus, du jetage, du
sang, des excrements, analyse chimique de I'urine) ou par des inoculations
revdlatrices (dans les cas de maladies infectieuses).

holution des maladies

Dans I'dvolution d'une rnaladie infectieuse, on distingue :

L'incubation
C'est le temps qui s'dcoule entre.'le moment d e la contagion e t
I'apparition des premiers sympt6mes. La duree de cette periode varie
suivant la maladie : la phripneumonie bovine n'dvolue qu'aprhs une
longue periode d'incubation. Au contraire, la peste bovine a une periode
d'incubation trhs courte. La durde d'incubation pour une maladie ddter-
minde peut varier suivant I'esphce atteinte et Bgalement selon la rdsistance
de I'individu atteint.

Les prodromes
Les premiers troubles qui se manifestent b la suite de la pdriode
d'incubation sont les prodromes. Ce sont des signes vagues (616vation
de temperature, changement d'hurneur de I'animal, inquietude, etc.)
Ils sont A peu prhs les m6mes pour toutes les maladies : ils n'ont pas de
valeur precise pour le diagnostic, sauf en periode d'dpizootie : dans un
troupeau de bovins 00 sevit la peste bovine, une simple elevation de
tempkrature chez un veau non encore atteint permet de soupqonner trhs
fortement la rnaladie.

Les sympt6mes
Ce sont des signes rdvklateurs de la maladie. On distingue des
sympt6mes generaux (exemple : fikvre), des sympt6mes locaux (exemple :
toux) ; des sympt6mes principaux qui permettent 2 eux seuls d'etablir un

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diagnostic (par exemple les lesions buccales dans la peste bovine ou la
tumeur crepitante du charbon syrnptornatique) et des s y r n p t h e s
accessoires.
Une maladie Bvolue plus ou moins rapidernent.
L'Bvolution est suraigue, aigue ou lente. Elle peut se terminer par
la mort ou par la gukrison ou encore par 1'6tat chronique.
Les maladies sont sporadiques quand elles atteignent un animal
isolBment (exemple : abces, eczBma).
Les Bpizooties sont des maladies caracterisees par leur apparition
sur un grand nombre d'anirnaux et leur extension rapide (exernple :
la peste bovine).
Les panzooties sont des maladies communes 5 un continent.
Les enzooties sont des maladies qui frappent un petit nombre
d'animaux dans une rBgion, soit d'une facon perrnanente, soit 5 certaines
epoques dkterrnin6e.s (exernple : le charbon bactbridien).
Les zoonoses sont des maladies communes h I'homme et aux animaux,
et intertransmissibles.

Autopsie

L'autopsie est I'ouverture et I'examen d'un cadavre pour aboutir au


diagnostic des causes de la mort par les mkthodes suivantes :
- la recherche et la mise en Bvidence des 16sions,
- le prkl6vement de tout ou partie des regions atteintes en vue
d'examens ult6rieurs au laboratoire.
Elle doit &re pratiquke autant que possible immediaternent aprhs la
mort.
On utilise cornrne materiel : couteau dautopsie, scie, costotome,
sorte de skcateur pour couper les cetes, ciseaux droits et ciseaux courbes,
bistouris droits et bistouris convexes, pinces mousses et h dents de souris.
Pour 6viter la transmission de certaines maladies h I'homme, cornme
le charbon bactkridien, I'ophrateur devra porter des gants de caoutchouc.

Technique

Placer et fixer le cadavre en position dorsale.


DBpouiller largement la face ventrale et thoracique, apres avoir fait
une incision cutanke du cou au pubis, deux incisions transversales au

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niveau du thorax, et deux incisions transversales au niveau de la partie
posterieure de I'abdomen, de maniere B pouvoir acceder commodement
aux cavitks thoraciques e t abdominales.
''
Pratiquer deux volets decouvrant largement les organes :
a ) v o l e t thoracique, par section de la partie terminale du sternum,
au niveau de la soudure sterno-abdominale, et section des c6tes : aux
ciseaux pour les petits animaux (volailles) ;au costotome pour les animaux
de taille moyenne (lapins, porcelets, moutons, chevres) ; B la scie pour
les animaux de grande taille (chameau, cheval, bceuf, b e ) . Ce volet sera
B charniere anterieure par section des c6tes des deux c6tBs pour les
petits animaux; B charniere laterale par section des c6tes d'un seul c6tB
pour les grandes especes.
6 ) v o l e t abdominal, pratique avec le bistouri ou les ciseaux
(petites especes), avec le couteau d'autopsie (grandes especes) ;
- explorer les diverses parties du corps; examiner dans I'ordre :
la peau (c6t6 chair), le tissu conjonctif sous-cutanb, la chair
musculaire, le phritoine et les organes de la cavite abdominale
(foie, rate, pancrhas, reins, capsules surrknales, estomac, intestin,
vessie, organes ghitaux, ganglions), la plevre et les organes de
la cavit6 thoracique (poumons, cceur, pericarde, ganglions) ;
- I'autopsie terminke, on dbtruira les cadavres et on sterilisera le
mathriel d'autopsie en le plongeant pendant une heure dans une
solution cresylee B 5 p. 100.

Pr6lBvements

Chaque fois qu'on ne pourra poser un diagnostic avec certitude, il


faudra envoyer des prelevements appropries au laboratoire.
Les prelevements se font sur I'animal vivant ou sur le cadavre.
Tout prelhement doit 6tre rapide e t effectue de faqon aseptique.
On prendra pour l e maniement des produits suspects les precautions
qui s'imposent, la contamination de I'op6rateur etant toujours possible.
Le matbriel de prblevernent comprend : seringues, pipettes, bistouris
droit et convexe, ciseaux droit et courbe, lames de verre et lamelles, flacons,
bocaux etanches, tubes B essai, lampe .B alcool.
Le materiel de prelevement est sterilish par Bbullition pendant dix
minutes dans I'eau sake.
Prevoir I'emploi de bouteilles ou emballages isothermes pour certains
prelbvements qui sont a conserver au froid.

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PrWvements sur I'animal vivant

Etalement de sang
Une goutte de sang, etalee en couche mince sur une lame de verre,
permet de faire un examen microscopique.
Le sang est prdeve au niveau des capillaires superficiels, en un point
du corps variable suivant les especes :
- Chameau, cheval, bceuf, mouton, chevre : section du bord libre
de I'oreille, ou piqiire avec la pointe d'un bistouri droit du bord
libre de I'oreille, du bout du nez, ou de la face interne des 18vres;
- Lapin : piqQre de la veine marginale de I'oreille, dilatee par pression
B la base ;
- Poulet : section de la crste, ou piqQre de la veine externe de
I'aile ;
- Pigeons : piqQredes doigts ;
- Chien : piqOre du bord libre de I'oreille.
On coupe les poils au niveau du lieu d'election ; on fait affluer le sang
par frictions ou chiquenaudes; on pratique la section ou la piqiire avec des
instruments flamb6s. Au cours du prelevement on bvite toute compression
tendant 8 activer la sortie du sang, ce qui aurait pour resultat le melange
de la lymphe et du sang. On pr6lBve toujours les premieres gouttes.
, La lame de verre qui sert B I'etalement (lame porte-objet) doit Gtre
tres propre et surtout tres soigneusement degraisske avec de I'alcool
ou de I'Bther.
On la saisit par ses grands bords, entre le pouce et I'index, et on la
pose delicatement sur la goutte de sang qui sort du point de ponction ou
de section.
La goutte, recueillie 2 deux centimetres environ de I'extremite de la
lame, ne doit pas &re plus grosse qu'une t&te d'6pingle pour obtenir un
Btalement mince et qui n'atteigne en aucun point les bords e t les extremites
de la lame. On retourne celle-ci, la goutte en dessus. L'Btalement se fait
8 I'aide d'une lamelle ou d'une lame B bords rod& dont le bord est plonge
dans la goutte et qu'on fait glisser sur la lame d'un mouvement regulier
et en I'inclinant B 45"
On agite rapidement pour h%ter la dessiccation du sang Btal6. I I
faut faire toujours plusieurs frottis en prenant une goutte fraiche pour
chaque nouvel etalement.
Les frottis ne doivent &re ni fixes ni 6tiquet6s. Les lames sont expediees
dos B dos et enveloppees dans une feuille de papier blanc sur laquelle
on notera la nature du prelevement, la date et tous les renseignements
concernant le malade (sympt6mes).

Preldvement de sang
I I est parfois necessaire de recueillir une quantite plus importante de
sang pour des inoculations, des ensemencernents ou des s6ro-diagnostics.

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Frottis correct : Btalement rBgulier et ne debordant pas la lame

zones creuses

Frottis dkfectueux : trop Bpais debordant la lame, avec des zones creuses

Fig 69,Pratique d'un frottis de sang.

On utilise alors une seringue sterilisee. Le lieu d'dlection du pr618vement


varie suivant I'esp8ce animale.
- Chameau, cheval, beuf, mouton, ch8vre : veine jugulaire ou toute
autre veine bien apparente (mammaire, caudale, etc.) ;
- Lapin : veine marginale de I'oreille;
- Chien : veine saphene externe.
Le sang recueilli doit 6tre employ6 de suite ou, s'il est destine au
laboratoire, rejet4 dans un flacon sterile contenant une solution de citrate
de sodium 2 10 p. 100. Cette solution est prBvue pour empecher la coagu-
lation de 20 fois son volume de sang : si on desire recolter 200 ml de
sang, on introduira dans le flacon 200 : 20 = 10 ml de la solution. L'orifice
du flacon est flambe avant ouverture et apr8.s fermeture.
II existe des tubes ou des petits sacs de plastique munis d'aiguilles
(veinules) qui Bvitent I'emploi d'une seringue pour le prbl&vement.

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Pr6ldvement de pus
On prelkve le pus soit 5 I'intkrieur d'un abcks mirr ou d'un bouton
pret B percer, soit a la surface d'une lesion suppurante.
- en abcds clos : couper les poils ou mieux, raser la surface de
I'abcks; badigeonner 2I la teinture d'iode; ponctionner avec une
aiguille adapthe B une seringue; aspirer le pus qui est ensuite
etale sur lame (en operant comme pour un Btalement de sang),
ou rejete dans un flacon sterile pour envoi au laboratoire (mgmes
precautions que pour le prelkvement de sang).
- 3 la surface de l&sions suppurantes : (plaies, fistules, etc.),
nettoyer la surface de la lesion avec un tampon de coton imbibe
d'eau bouillie ou de serum physiologique :prelever le pus dans une
anfractuosite de la lesion avec une pipette sterile (par aspiration
lente).

Prelhement de poils
Les poils sont arraches avec une pince 2I mors plats, sur les lesions
et de preference en bordure des lesions. Les saisir au ras de la peau et
tirer d'un coup sec pour arracher le bulbe. Les poils arraches sont presses
entre deux lames, lesquelles sont ensuite enveloppees dans un papier fort.

Pr6lhvement de squames e t croQtes


Les squames et croCltes sont recueillies sur les lesions (B la peripherie
des lesions de preference) avec la pointe d'un bistouri et, si I'gn soupqonne
la gale, par raclage profond (gratter jusqu'au sang).
Les croGtes sont placees dans un tube 21 essai ou expediees entre
deux lames enveloppees de papier fort.

Pr6lbvernent d'excrements
Doivent Qtre faits d8s 1'6mission des matihres fecales, et mieux encore
dans le rectum. On preldve de preference (quand iI y en a) les parties san-
guinolentes, les parcelles contenant du mucus, des grains riziformes. On
recueille environ 500 grammes de matikres chez les bovins et les Bquidks,
50 B 100 grammes chez les ovins,caprins et porcins, 20 B 50 grammes chez
les volailles. On additionne le prelkvement de formol du commerce 2I
10 p. 100 pour assurer sa conservation, quand iI s'agit d'un pr6lkvement
destine B des recherches parasitologiques.
L'expedition se fait en flacon sterile 2 large ouverture. Eviter de souiller
les bords du goulot. Le bouchon est bien fix6 (attach6 au goulot, paraffinh).

Pr6lhement de parasites intestinaux


On prel&ve les parasites dans les excrkments. Les parasites sont
plonges dans I'alcool B 700, chauff6 B 50 ou 60 O C (apparition de bulles
au fond de la capsule dans laquelle on fait chauffer I'alcool). Ainsi fixes,
ils peuvent Qtre expedies dans un flacon contenant de I'alcool ou une solu-
tion physiologique formolee B 3 p. 100. Le bouchon est bien fix6 (attach6
au goulot, paraffin6).

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Prbldvement de parasites externes
Les larves et les nymphes sont placees dans un tube 8 insecte conte-
nant de I'alcool B 700 et soigneusement bouche (bouchon paraffine).
Les tiques adultes sont detachees avec precaution : une goutte
ou deux de xylol qu'on laisse tomber sur le dos de la tique permet de la
detacher plus facilement avec une pince. Sinon on procede de la faqon
suivante : saisir le corps de la tique entre le pouce et I'index et abaisser ce
dernier jusqu'8 ce que I'ongle se trouve au niveau du capitulum. Exercer
une legere traction pour extraire la tique. Les tiques recueillies sont plac6es
entre deux lames de verre pressees I'une contre I'autre (pour obliger les
tiques B etendre leurs pattes) et maintenues en place par de la ficelle.
On plonge le tout dans I'eau bouillante, qui tue les tiques instan-
tanbment, puis pendant vingt-quatre heures dans un flacon d'alcool
B 70". La tique ainsi fixee est alors enlevee et expedi6e dans un tube B
insecte rempli d'alcool 8 70°.
Les mouches et les moustiques sont recueillis dans un tube B
essai ou B insecte dont I'ouverture est fermee par un tampon de coton,
jamais par un bouchon, afin d'eviter la mort et la moisissure rapide des
insectes captures. On peut aussi les expedier morts, dans une boTte
d'allurnettes dont le tiroir est garni d'une couche mince d'ouate et renfer-
mant quelques cristaux de naphtaline ou une pincbe de D.D.T.

Pr6lhements sur le cadavre


Ces prelevements doivent se faire le plus t6t possible apres la mort.

Prkl&vement de sang
On preleve le sang par ponction du coeur avec une pipette sterile;
au niveau du point de ponction la surface du cceur est prbalablement
cautbrisee par application de la lame chaude d'un vieux bistouri flambe
ou d'un objet mktallique quelconque tr&s chaud.

Pr616vement de pulpe d'organe


On peut, avec la pulpefraiche d'organe (foie, rate, rein, ganglions, etc.)
effectuer des frottis par etalement pour examiner le sang ou les serosites
qui s'hcoulent de la coupe de cet organe; mais iI est preferable d'opkrer
par impression :
- pratiquer une section nette du fragment preleve ; le saisir avec une
pince; appliquer la surface de section sur une lame, sans frotter.
Comme la premiere impression est generalement trop epaisse,
on fait plusieurs impressions successives sur la meme lame.
Secher en agitant rapidement B l'air. Expedier ces frottis comme
les frottis de sang.

Prkl&vement d'un fragment d'organe


Les fragments pr6leve.s doivent etre d'un volume suffisant. Ils sont
places dans un flacon B large ouverture contenant de I'eau bouillie gly-

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c6rinBe 3 50 p. 100 ou tout autre liquide conservateur mieux adapt6 B
certains cas particuliers. On 6vite d'introduire des pieces trop grosses dans
des flacons trop petits ou B Btroite ouverture.

Prelevements pour l e d i a g n o s t i c d e l a rage


E x t r a c t i o n du cerveau d e I'animal. - Toutes les precautions
doivent etre prises pour Bviter ['infection de I'operateur par le virus rabique :
protection des mains par le port de gants de caoutchouc epais.
- decapiter I'animal au niveau de I'articulation entre la t6te et
la premi2re vertebre cervicale (articulation occipito-atloidienne) ;
- fixer, si possible, la tGte dans un Btau, depouiller le crane et le
debarrasser des muscles qui le recouvrent ;
- faire sauter la calotte cranienne en utilisant la scie ainsi que le
marteau et le burin. Travailler avec precaution pour ne pas endom-
mager I'encephale ;
- extraire I'encephale en utilisant un bistouri et des ciseaux sterilises;
- isoler les deux hemispheres cerebraux. En introduire un (le droit)
dans une solution B 10 p. 100 de formol, et mettre I'autre (le gau-
che) dans un melange 5 parties Bgales de glycerine neutre et d'eau
distillee. Ce melange devant 6tre rigoureusement prepare, le mieux
est de se le procurer en flacons pr6ts B I'emploi.
Expedition des prblc?vements. - Chacun des deux hemispheres
ckrebraux est place dans un recipient en verre fermant de facon parfai-
tement hermetique. Pour plus de securite, le couvercle est entoure de
sparadrap.
Sur chaque flacon, mettre une etiquette en sparadrap indiquant le
num6ro du pr618vement, son origine, et le liquide conservateur.
Les deux flacons sont emballes soigneusement dans une caissette
en bois contenant de la sciure qui remplit tous les interstices, B la fois
pour assurer une bonne protection et pour absorber les liquides en cas de
casse. L'etiquette du colis doit mentionner, outre I'adresse du laboratoire,
a PRELEVEMENT BIOLOGIQUE P O U R DIAGNOSTIC D E RAGE D.
Quand le travail est termine, il faut dhtruire les restes du cadavre,
laver la table d'operation avec une solution de cresyl 5 10 p. 100, rincer les
gants avec cette m6me solution avant de les retirer des mains, puis les ste-
riliser en les faisant bouillir en m6me temps que les instruments qui ont
servi au prelhement.
Faire I'expedition sans d6lai en y joignant une fiche de prelevement
detaillee du modhle ci-apres.

Prelevement d'un OS long


Dans le cas de maladie infectieuse, iI est recommand6 de prelever
un metacarpien ou un metatarsien en le desarticulant B ses deux extr6-
mites. On le debarrase soigneusement des tissus mous. On paraffine
I'ouverture des trous nourriciers.

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Fiches de pr6ldvement pour diagnostic de la rage

$1. NOdes prBl6vements suspects de rage : .................. Date d'expbdition : ....

2. Espbce animale :.......................................... Sexe :.................. Age :............... Animal errant


familier (*)

3. Origine des prblbvements. Pays : ........................ Province : ........................ Ville : ........................

4. CornmBrnoratifs - morsure anterieure connue :.................................................................................


- il y a combien de temps : ......................................................................................
-
norn du proprietaire Bventuel de I'anirnal : ................................................
- espbce du mordeur : ................................................................................................
5. Signes cliniques - agitation (*) ..................................................................................................................
- paralysie des masseters (*) .................................................................................
- paralysie du train postkrieur (*) .....................................................................
- agressivite (") sa durBe approximative : ...................................................
- crises Bpileptiformes (*) .......................................................................................
- gastrite (*) ........................................................................................................................
- autres signes : ................. ........................................................................................
6. Mort naturelle ou mBthode d'abattage : ...................................................................................................

7. Date et heure de l a mort : .......................................... ...........................................................................

8 . Etat de conservation du cadavre : _._.. ...........................................................................

9. Vaccination (s) antbrieure(s) Date : ............................................................................................................


........................................................................
v6 ou avianid) (*) ........................
Origine du vaccin : .......... :...................................................................
NOdu lot de vaccin : ........................................................................

10. Nature des prelbvements et de I'agent de conservation utilise (pH 6,4 B 7 recom-
mand6)
1 ) Tissu cBr6bral
(demi-hBmisphbre droit) :form01 a 10 p. 100: oui-non (*) ................................................
(demi-hemisphbregauche) : glycerine B 50 p. 100 (pH 6,4 B 7) oui-non ..................
2 ) Glandes salivaires :glycerine h 50 p. 100 ......................................................
11. Date desprelbvements effectuks : .................................................................................................................

12. Nombre d'heures sBparant la mort de I'animal de I'application de I'agent de


conservation : ...............................................................................................................................................................

13. Nom de I'expBditeur : ...................................................................................................... :.......

1 4. Titre de I'expbditeur : ..............................................................................................................................................

Formulaire B expbdier en triple exemplaire au laboratoire.

(*) Barrer la ou les mentions inutiles.

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Paris,
Recommandations pour les expeditions de p r d h e m e n t s
au laboratoire

Les expeditions se font par la poste chaque fois que le volume et le


poids du colis le permettent.
L'emballage doit 6tre Btanche et tr6s resistant B 1'6crasement et au
choc. Les timbres sont colles sur une etiquette volante pour Bviter les
chocs des tampons d'obliteration des postes.
L'indication soulignee : Pr6lGvement biologique urgent, doit
figurer sur les colis.
Tout envoi est accompagne de cornmemoratifs : espece animale sou-
mise au prelevement, date et lieu du pr616vement, sympthmes pr6sentes
ou observes, evolution de la maladie dans le troupeau, etc.

Le microscope et son usage

L'usage du microscope est trhs utile pour le diagnostic de nombreuses


maladies, particulierement en parasitologie. Son emploi n'offre aucune
difficult6 particulihre B condition de s'initier B la manipulation correcte
de I'instrument et de ses accessoires.

Description du microscope

Le microscope est un instrument d'optique qui permet d'examiner


des objets trop petits pour Btre visibles B I'czil nu. II est constitue par une
association de lentilles, de nombre variable, mais toujours reparties en
deux groupes formant I'objectif et I'oculaire.
L'objectif est le groupe de lentilles qui est dispose B proximite de
I'objet B examiner.
L'oculaire est le groupe de lentilles qui est dispose de manihre i
pouvoir y appliquer I ' d , et par lequel I'observateur regarde.
L'objectif et I'oculaire sont supportes par un b2ti qui s'appelle le
statif D. Une partie de ce statif, qui porte I'assemblage optique, peut 6tre
((

deplace dans le sens vertical par rapport aux objets i examiner par un
groupe de deux vis :
- I'un est un gros bouton mollet6, parfois appele cr6maillere,
qui permet les deplacements rapides mais peu precis de I'assem-
blage optique,
- I'autre est la vis micrometrique qui permet des deplacements
lents, mais tres precis, de I'assemblage optique.

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d'lncllnoiton \ Mirair

Fig 70. Le microscope et son usage.

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Paris,
II y a en general plusieurs objectifs de grossissements diffkrents,
supportes par un disque pivotant appele revolver. Cette disposition permet
de passer rapidement d’un grossissement 8 un autre.
II existe d‘autres perfectionnements du systeme optique des micros-
copes, dont les deux principaux sont :
- le prisme, incorpore entre I‘objectif et I’oculaire, et qui permet de
regarder par un oculaire dispose obliquement, ce qui evite la
fatigue du cou de I’observateur,
- le systeme binoculaire, qui permet I’observation avec les deux yeux
2 la fois.
Sous I’objectif se trouve la platine du microscope, qui est destinee
2 recevoir des lames de verre qui supportent les objets B examiner.
Cette platine peut recevoir un accessoire tres utile et trhs commode,
la surplatine mobile, qui permet de deplacer commodement en tous
sens la lame sous I‘objectif du microscope.
La platine est percee d’un trou destine laisser passer les rayons
lumineux qui viennent eclairer I’objet. Sous la platine se trouvent le
condensateur et la source lumineuse constituee soit par une petite lampe
electrique, soit par un miroir reflechissant.
Le condensateur est pourvu d h n diaphragme a iris qui permet de
doser la quantite de lumiere t~envoyer sur I‘objet a eclairer.
En outre, un dispositif permet de faire monter ou descendre le conden-
sateur, ce qui joue a la fois sur I‘intensite et le contraste de I‘eclairage.
Enfin, le condensateur est souvent muni d’un porte-filtre, destine a recevoir
des disques de verre colore ou depoli dont I’usage peut se reveler avan-
tageux surtout dans les examens 21 faible grossissement.

Grossissement du microscope

On dit qu’un microscope grossit 100 fois quand iI donne d’un objet
une image lineairement 100 fois plus grande. En fait, le grossissement en
surface est de 100 x 100 = 10 000 fois.
Les microscopes ordinaires grossissent couramment 1 000 fois (soit
1 million de fois en surface).
Pour connaitre le grossissement d‘un microscope, encore appele
((puissance du microscope D, on multiplie le grossissement de I’objectif
par le grossissement de I’oculaire. Par exemple, un microscope utilisant
un oculaire grossissant 10 fois et un objectif grossissant 40 fois aura
un grossissement total de 10 x 40 = 400 fois. On exprime par la lettre X
le grossissement d’un objectif ou d‘un oculaire. Ainsi, un objectif marque
X 5 a un grossissement lineaire de 5 fois.

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Tableau des grossissements
les p l u s employes du m i c r o s c o p e o p t i q u e

c OCULAIRES
OBJECTIFS
x 5 I x10 1 X 15

4
10
20
2o
50
100
I 40
100
200
I 60
150
300
40 200 400 600
60 300 600 900) peu
100 500 peu utilise 1000 1 500 ) utilises
(2 immersion)

Remarques s u r les o b j e c t i f s :
a ) O b j e c t i f s a sec : les objectifs B sec ont un grossissement qui va
en general de 4 B 60 fois. On les designe sous le nom d'objectifs 6 sec
car leur emploi se fait sans precaution spbciale, contrairement aux objec-
tifs i immersion.
6 ) O b j e c t i f s a i m m e r s i o n : I'objectif B immersion le plus couram-
ment utilise est le X 100. II existe cependant des objectifs B immersion
encore plus puissants (X 115 par exemple). Ces objectifs sont appeles
B immersion parce qu'on doit interposer entre I'objet B examiner et I'objectif
une goutte d'huile de cedre, sans laquelle I'image microscopique serait
floue. L'huile de c6dre est un liquide huileux ayant le meme indice de
refraction que le verre, ce qui Bvite la refraction des rayons lumineux
entre I'objet B examiner et I'objectif.
Le c h a m p du m i c r o s c o p e est determine par la lentille frontale
de I'objectif. La lentille frontale de I'objectif est celle situee 2 proximite
de I'objet B examiner.
Le champ du microscope se presente ordinairement sous forme d'un
disque du fait de la forme circulaire des lentilles. II existe cependant des
(( caches )) de forme carree qui delimitent des carres plus commodes pour
les numerations microscopiques.
N o t a : reperage d'objets dans le champ du microscope. On assimile
le champ du microscope 2 un cadran d'horloge et on dit par exemple
(voir croquis) :
- A est i 5 h au bord du champ,
- B est B 8 h 15 entre centre et bord,
- C est B 1 0 h 30 pr6s du bord.

Fig 71. Reperage d'objets dans le champ


d u microscope.
7
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Profondeur de champ du miscroscope

On appelle profondeur de champ la zone limite de nettet6 entre deux


plans differentS.
Si par exemple nous placons notre main droite B 25 cm en avant de
nos yeux et notre main gauche B bout de bras tendu, I'ceil n'apercevra
avec nettet6 que I'une des deux mains, au choix de I'observateur. Mais
iI sera toujours impossible de voir nettement les deux mains B la fois dans
cette position BloignBe.
Par contre, si I'on rapproche la main droite de la main gauche,
iI arrivera un moment oh les deux mains seront vues avec nettet6, bien
que situees dans deux plans diffkrents par rapport B I'ceil. On appelle
profondeur de champ la distance qui &pare ces deux plans.
Cette notion de profondeur de champ est tr6s importante en micros-
copie. EA effet, particulierement aux forts grossissements, I'objectif ne
permet pas une vue nette des objets examines B travers toute leur Bpaisseur,
et I'on est oblige de monter ou de descendre I'objectif par rapport B I'objet
pour apercevoir avec nettet6 tous les plans qui le composent. Cette mani-
pulation s'effectue B I'aide de la vis microm6trique qui devra etre manipul6e
avec d'autant plus de finesse et de precision que le grossissement utilise
pour I'examen microscopique est plus important. C'est ce que I'on appelle
N fouiller la profondeur de champ D.

Entretien du microscope

Le microscope est un appareil de precision coQteux et fragile.


Voiei donc les soins que I'on devra h i consacrer :
1" I I faut placer le microscope dans un local propre et sain, aussi
sec que possible, et B un emplacement fixe.
Un microscope risque en effet d'etre abime et deregle si on le deplace
constamment. I I existe cependant des microscopes de construction parti-
culierement robuste et specialement Btudies pour etre transport& en
tournbe.
2 O Placer le microscope sur une plaque de feutre, de lihge, ou de
caoutchouc et non pas directement sur le carrelage d'une paillasse.
30 Le microscope doit toujours Stre abrit6 sous une housse (en plas-
tique par exemple) pour etre B I'abri de la poussiere. L'humiditk est le
pire ennemi des lentilies du microscope qui s'alterent gravement B son
contact. Pour lutter contre I'humidit6, le mieux est de placer le microscope
dans un local climatis6. Si la chose est impossible, on placera le microscope
sous une cloche de verre parfaitement Btanche, c'est-;-dire dont les bords
reposeront hermetiquement sur une plaque de caoutchouc. On disposera
sous la cloche et B cat6 du microscope un petit recipient contenant un
produit dessiccateur. Le produit le plus commode B employer est I'Actigel

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colore. En effet, ce produit est de couleur bleue quand iI est sec et devient
rose quand iI a perdu son pouvoir dessiccateur. Pour le regenerer, iI suffit
de le chauffer dans un recipient jusqu'B ce qu'il redevienne bleu f o n d .
0

Le microscope ne doit jamais Btre d6mont6. I I faut egalement Bviter


le dernontage des oculaires sous pretexte de les nettoyer.
40 Le nettoyage des lentilles se fait avec u n vieux chiffon, doux,
propre, non pelucheux (mouchoir usage par exemple), o u encore avec u n
pinceau special B poils tres doux generalement livre avec le microscope.
50 Le nettoyage des objectifs h immersion se fait avec u n chiffon
doux imbibe de xylol. Attention B ne jamais oublier d'enlever I'huile
de cedre apres u n examen B immersion, car d l e s'epaissit B la longue
et forme u n vernis tres difficile B enlever.
Nota : iI ne faut jamais plonger les objectifs A immersion (ni les autres
d'ailleurs) dans du xylol sous pretexte de les nettoyer. Ceci decollerait
les lentilles qui sont collees B I'huile de cedre.
60 Veiller B avoir une platine toujours bien propre. h i t e r d'y placer
des lames mouillees ou sur lesquelles les prelevements B examiner ont
deborde et souill6 les c8tes de la lame.

Les lames e t lamelles

On appelle lames porte-objet des plaques de verre mesurant 76 m m


de longueur sur 26 m m de largeur et environ 1 m m d'epaisseur, sur les-
quelles o n depose les objets B examiner au microscope.
On appelle lamelles couvre-objet des minces plaques de verre o u de
cristal qui sont utilisees pour &re deposees sur les objets places sur les
lames porte-objet.
Les plus courantes sont de forme carree et mesurent 22 m m de c8t6.
Leur Bpaisseur est de 2/10 de mm, ce qui les rend fragiles et delicates B
manipuler.
Certaines lames sont dites (t rodees )) parce que leurs bords ont
6t6 polis. Elles sont preferables aux lames ordinaires parce qu'elles ne
rayent pas la platine d u microscope e t facilitent la confection de frottis
de sang. Ces lames rodees c o i t e n t malheureusement beaucoup plus
cher que les lames ordinaires.
Les lames, sous I'action d u gaz carbonique et de I'humidite de l'air,
finissent par s'althrer et perdent leur transparence. On dit qu'elles se
(( carbonatent D. Pour Bviter cette alteration, o n les conserve dans des
bocaux remplis d'alcool B 90°, ou mieux, dans u n melange B parties Bgales
d'alcool, d'6ther et d'acetone.
Les lames rodees seront recuperees apres usage et pourront resservir
tant qu'elles ne seront pas rayees. Les lames qui viennent d'gtre employees

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pour un examen seront jetees dans un bocal contenant de I'acide chlorhy-
drique B 10 p. 100 oC elles se nettoieront par simple trempage. On les rince
ensuite B I'eau claire et on les conserve dans I'alcool B 90° ou dans un
melange alcool-6ther-ac6tone 2 parties Bgales.
Les lames tr&s sales (frottis anciens seches et fixes, lames recouvertes
de graisse ou d'exsudats organiques) seront immergees pendant plusieurs
heures dans le melange sulfochromique (80 B 100 g de bichromate
de potassium dissous dans un litre d'acide sulfurique) ; ce melange est 2
manipuler avec les plus grandes precautions.
Les lamelles couvre-objet servent surtout 2 &re disposees sur les
preparations liquides ou psteuses (par exemple pour un examen de sang
frais ou une preparation coprologique).
Les lamelles ne s'utilisent qu'une seule fois et sont jetees apr6s usage.
On ne pratique pas n'importe comment I'examen d'une preparation
microscopique.
Une fois que la preparation est placee sous le microscope et que la
mise au point est faite, on procede comme suit :
- d'une main, on fait parcourir B la lamelle des bandes longitudi-
nales pour explorer 2 fond la preparation. Ceci s'effectue par la
manceuvre des vis de commande de la surplatine.
- de I'autre main, on manipule la vis micrometrique de maniere B
fouiller toute la profondeur de champ du microscope.
On part par exemple du point A et I'on d6place la lame 2 I'aide de la
surplatine mobile par bandes paralldes de la largeur du champ du micros-
cope jusqu'8 parvenir au point B.

Fig 72. Methode de prospection d'une preparation microscopique.

Utilisation du microscope

Technique d e I'examen A sec


On dispose le microscope sur une table bien stable, et autant que
possible en intercalant une plaque de feutre ou de caoutchouc entre la
table et le microscope.

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,I *

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Cette table doit etre installBe pr2.s d'une fenetre si on s'6claire avec
la IumiBre du jour, ou au contraire dans un endroit sombre si on s'kclaire
&ZI la IumiBre artificielle (lampe Blectrique ou lampe temp6te).
On s'assure ensuite de la propretB des lentilles, du miroir, et Bgalement
du condensateur. Puis on dispose la lame ZI examiner sur la platine. On
I'essuie si besoin est, et on la coince dans la griffe de la surplatine. Puis
on oriente la face plane du miroir vers le condensateur. Le condensateur
est remontB contre la lame porte-objet, avec le diaphragme ouvert au
maximum.
A ce moment-li on a m h e I'objectif le plus faible aussi pr&s que
possible de la fame porte-objet. On vdrifie cette operation en regardant
de cBt6 pour Bviter que I'objectif ne vienne percuter dans la lame.
Puis on met I'ceil B I'oculaire tout en manceuvrant le gros bouton
mollet6 jusqu'i ce que I'image apparaisse.
DBs que I'image apparait, on passe i la manceuvre de la vis micro-
mBtrique pour parfaire la mise au point.
GBnBralement, I'Bclairage n'est pas satisfaisant. Pour obtenir un
bon Bclairage, on descend le condensateur, ou on manceuvre le diaphragme.
GBnBralement, ces deux manipulations doivent etre conjuguBes pour
obtenir une image B la fois claire et brillante sans Bblouir, et bien contrastee
pour mettre en relief tous les details de la prkparation.
Le plus souvent, on doit descendre le condensateur pour les examens
i faible grossissement, et le remonter pour les examens i un grossisse-
ment plus fort. On rBgle Bgalement I'intensite de 1'6clairage avec le dia-
phragme, ce qui permet souvent de faire apparaitre des details invisibles
avec un Bclairage excessif.
II faut toujours commencer par examiner une preparation avec le
grossissement le plus faible, ce qui permet, gr5ce i un examen rapide
de I'ensemble de la lame, de choisir les endroits les plus interessants ou
les plus faciles i observer.
Pour passer aux grossissements plus forts, il suffit gBnBralement de
tourner le rBvolver, de parfaire la mise au point avec la vis micromBtrique
et I'Bclairage en remontant le condensateur.

Technique d e I'examen B i m m e r s i o n
Ce sont surtout les frottis colorBs qui sont justiciables de I'examen i
immersion.
Remarque i m p o r t a n t e : avant de placer la lame sur la platine, iI
faut soigneusement reperer le cBt6 de la lame oir se trouve le frottis pour
la poser face en dessus sur la platine du microscope.
Les objectifs i immersion ont un pouvoir grossissant considBrable,
gBnBralement de 100 fois ou de 115 fois. L'usage de tels objectifs, qui,
combinBs avec des oculaires X 10 ou X 15, permettent des grossissements
de 1 000 i 1 500 fois, nBcessite un puissant Bclairage, sans diffraction
des rayons lumineux.

I70

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Paris, 1971
Ceci s'obtient en interposant entre la lentille frontale de I'objectif
i immersion e t la surface de I'objet B examiner une goutte d'huile de
chdre. L'huile de cedre ayant pratiquement le rneme indice de refraction
que le verre, sa presence Bvite la refraction des rayons lumineux entre
I'objet et I'objectif, et I'image apparait claire et nette.

MBthode & suivre pour I'examen microscopique A immersion :


10 S'assurer au prhalable de la proprete de la lentille frontale de
I'objectif B immersion, et au besoin la nettoyer avec un chiffon doux
imbibe de xylol.
2" Mettre au point comme d'habitude avec les objectifs sec et
reperer les parties interessantes de la preparation.
30 Pour passer B I'examen B immersion, rernonter I'objectif et deposer
sur la lame une goutte d'huile de cedre. Mettre I'objectif B immersion en
position de service. Puis en regardant de c6tB pour Bviter de percuter
I'objectif dans la lame, descendre doucernent celui-ci jusqu'i ce qu'il
plonge dans I'huile de cedre presque jusqu'B toucher la preparation.
Mettre alors I'ceil B I'oculaire et remonter I'objectif avec une extreme
lenteur en agissant sur le gros bouton mollet6, jusqu'B ce que I'irnage
apparaisse.
Parfaire la mise au point en agissant sur la vis micrornetrique.
L'examen 3 immersion exige que le condensateur soit remonth au
maximum contre la lame portant I'objet B examiner.
Remarque importante : I'huile de ckdre est un liquide qui s'epaissit
et finit par durcir au contact de l'air. C'est d'ailleurs I'huile de ckdre qui
sert 2 coller les lentilles entre elles dans les appareils d'optique.
II faut donc I'enlever tout de suite aprks examen de la lentille frontale
des objectifs B immersion, faute de quoi elle serait tr6s difficile B enlever.
On emploie pour cela un chiffon doux imbibe de xylol ou de toluol
(= Xylene ou Toluene).

Diagnostic coproscopique (ou coprologique)


Le diagnostic coproscopique des maladies parasitaires se fait par
I'examen des excrements selon la technique suivante :
- delayer gros comme une noix de kola de matieres fecales dans
une quantite d'eau suffisante pour les arnener B une consistance
semi-liquide, et bien melanger le tout;
- prendre une goutte de cette preparation au bout d'un agitateur
en verre et la deposer sur une lame et y ajouter une goutte d'acide
lactique ou de lacto-ph6nol pour obtenir un liquide homoghe.
Remuer sur la lame, et, en s'aidant d'une pointe d'aiguille, enlever
les particules solides volumineuses qui pourraient gener I'examen.
Recouvrir d'une lamelle et examiner au grossissement X 100 en
procedant par bandes paralldes. "examiner que des excrements
frais ayant moins de trois jours.

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In:
In: Manuel
Manuelveterinaire
veterinairedes
desagents
agentstechniques de l'elevage
techniques tropical,
de l'elevage Paris,Paris,
tropical, 1971 1971
Cet examen suff it amplement pour les recherches courantes, et il
permet dapercevoir les ceufs ou les larves de parasites. En cas de doute,
on peut examiner B u n grossissement X 200 o u X 400, ce qui est souvent
utile pour differencier les ceufs de parasites des spores vegetales frequem-
ment presentes dans les excrbrnents.
I I existe d'autres mbthodes plus perfectionnees dans le cas oh
I'exarnen serait nkgatif, mais I'infestation parasitaire est gen6ralement
assez importante pour que I'on apeyoive les e u f s de parasites par le
simple examen qui vient d'6tre decrit.

Diagnostic dermatoscopique
Ce diagnostic est plus difficile que le diagnostic coprologique, et si
u n premier examen s'av8re nkgatif, iI ne faut pas hesiter A en faire u n second
ou un troisikme pour decouvrir les parasites.
En presence d'une maladie de la peau que I'on suspecte d'6tre d'ori-
gine parasitaire, iI faut proceder comme suit :
- arracher, s'il y a lieu, les poils sur la surface d'un timbre-poste.
Deposer sur cette surface depilee une goutte d'acide lactique. Racler
ensuite la peau avec u n bistouri jusqu'h I'apparition d u sang. Dbposer le
produit de raclage sur une lame et recouvrir d'une lamelle aprks avoir
enlevh les fragments volumineux avec une kpingle. Examiner par bandes
parallhles au grossissement X 100.
Si la prhparation est trop opaque, ce qui arrive frbquemment dans les
preparations dermatoscopiques, o n la chauffera doucement sur 1a
flamme d'une lampe B alcool en Bvitant toutefois I'Bbullition. Ce procede
rend les preparations plus transparentes et permet u n examen plus
commode de la lame.

Diagnostic hematoscopique
On dit aussi d i a g n o s t i c h e m a t o l o g i q u e D.
On emploie le diagnostic hernatoscopique chaque fois que I'on
suspecte une maladie parasitaire d u sang.
On utilise deux procedes : I'examen direct et la mbthode panoptique.
L'examen d i r e c t est commode, rapide, et permet t r h souvent u n
diagnostic extemporan6 des trypanosomoses.
On preldve une goutte de sang frais (3 I'oreille chez les mammiferes,
h la cr6te chez les oiseaux) que I'on depose sur une lame. On recouvre
d'une lamelle et on examine B un grossissement X 600. Les parasites,
quand ils existent, encore vivants et mobiles, s'aperGoivent tout de suite
surtolrt par les deplacements qu'ils impriment aux globules rouges.
Si I'examen direct est nkgatif, on devra recourir B I'examen apr8s
coloration, dont le meilleur et le plus commode est celui de la mbthode
panoptique.

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In:
In: Manuel
Manuel veterinaire
veterinairedes
desagents
agentstechniques de de
techniques l'elevage tropical,
l'elevage Paris,
tropical, 19711971
Paris,
La m6thode panoptique la plus utilisee met en ceuvre le colorant
de May-Grunwald et le colorant de Giemsa, deposes sur des frottis de
sang.
Sur la lame sechee non fixee et placee dans une boite de Laveran,
verser 20 gouttes de colorant de May-Grunwald. Couvrir la lame pour Bviter
1'6vaporation d u solvant (alcool). Laisser agir trois minutes, ajouter
20 gouttes d'eau distillee tamponnee a p H 7, laisser en contact une minute.
On enleve I'exces de colorant avec quelques centimetres cubes
d'eau que ['on fait couler goutte a goutte sur la lame legerement inclinee.
A p r h avoir secoue celle-ci quelques fois, pour enlever I'eau, o n la place
face en-dessous dans une boite de PBtri contenant une solution fraiche-
ment preparee de 1 centimetre cube (40 gouttes) de Giemsa dans 20 cen-
timetres cubes d'eau distillee neutre.
Laisser colorer pendant 10 minutes, laver 5 I'eau, secher avec precau-
tion 2 I'aide de papier filtre par pression et sans frottement, deposer sur
la lame une goutte d'huile de cedre, examiner au microscope.
L'examen se fait d'abord 2 faible grossissement pour reperer les
zones les plus interessantes de la preparation, puis a I'examen I'immersion
au grossissement X 1 000.
Remarque importante : seul un examen positif est significatif
d u point de vue du diagnostic. Quand u n examen est negatif, o n ne peut
conclure d'emblbe ZI I'absence de la maladie recherchee et iI faut, dans
ce cas, recourir 3 de nouveaux examens, au besoin a plusieurs jours
d'intervalle, pour &re dkfinitivement fixb.

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In: Manuel
Manuel veterinaire
veterinairedes
desagents
agentstechniques de de
techniques l'elevage tropical,
l'elevage Paris,
tropical, 19711971
Paris,

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