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QUATRIEME PARTIE
PATH 0 LO-GI E
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agentstechniques de l'elevage
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CHAPITRE I
GBnBralitBs
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Reconnaissance des maladies
g16ments du diagnostic
Attitude
L'attitude de I'animal au repos peut litre anormale et traduire un etat
pathologique. La somnolence, la tristesse, I'abattement, la prostration
indiquent en general 1'6closion d'une maladie infectieuse. L'agitation,
I'excitation marquent au contraire le debut de la congestion cerebrale.
La raideur d'une partie du corps doit faire penser au tetanos. L'animal qui
souffre d'un mernbre cesse d'appuyer sur ce membre et le porte en avant.
L'attitude de I'animal en marche revhle Bgalement son etat. Le malade
hesite 2 se deplacer. Son allure est molle, chancelante, trbbuchante, ou
Bbrieuse. La marche met en Bvidence les boiteries, les paralysies, I'essouf-
flement.
Temperature
La temperature donne de prBcieuses indications. Le tableau ci-dessous
indique la temperature rectale moyenne des animaux sains :
cheval et h e , , . . , . . . , , , , . , . 37,5 - 38 "C
bovides adultes. . , . . . . . . . . , . . 38 - 39 OC
veaux . . . . . . , . . . , . . . . . . . . . . 39 - 4 O O C
dromadaires . , , . . . . , . . , , . . . . 37 o C
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moutons et chevres . . . . . . . . . . . 39 - 40 OC
porcs . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39 - 39,5 OC
chiens . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 8 3 - 39 OC
lapins . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39,5 OC
volailles . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40,5 - 42,5 OC
La temperature peut subir des oscillations normales : le travail et les
variations atmospheriques (tornades, nuits froides, etc.) provoquent des
differences de plus d'un degr6; chez toutes les esphces, la temperature
est au moins un demi-degr6 plus Blevee le soir que le matin.
Les variations anormales en moins (hypothermie) ou en plus
(hyperthermie) sont des indications importantes pour le diagnostic et le
pronostic. C'est ainsi qu'une hypothermie accusee traduit le plus souvent
un etat grave et se constate surtout durant I'agonie. Quant 8 I'hyper-
thermie, elle est le principal element de la fievre.
Prise d e temperature : on prend la temperature au moyen d u n
thermometre medical que I'on introduit dans I'anus de I'animal.
Secouer auparavant le thermometre pour faire descendre le mercure
au-dessous de 37 OC, le mouiller ou le graisser et I'introduire doucement
surtout chez les petits animaux. Tout mouvement brutal risquerait de
blesser la muqueuse du rectum.
On laisse le thermometre en place pendant deux minutes. Puis on le
retire et on lit la temperature.
I1 faut chaque fois, apres usage et avant de remettre le thermometre
dans son etui, I'essuyer avec un coton sec, puis le desinfecter avec un
coton imbibe d'alcool. Sans cette precaution on risque de transmettre les
maladies infectieuses d'un animal 9 un autre.
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Ils peuvent Bgalernent varier normalement sous des influences
diverses : travail, chaleur, etc. Mais en outre, ils subissent des modifications
dans un grand nombre de maladies.
Le pouls s'observe : 9 I'artere faciale et 6 I'arthre sous-maxillaire chez
le cheval et le charneau, I'artere faciale e t aux arteres coccygiennes chez
le bceuf, i I'artere fernorale chez le chien.
App6tit
L'app6tit est un facteur important du diagnostic. I I est plus ou moins
modifi6 dans un grand nombre de maladies aigues w chroniques. II peut
etre augment6 (boulirnie), dirninu6 ou supprime (anorexie), deprave
(pica)..
h a t des muqueuses
L'Btat des rnuqueuses (conjonctive, pituitaire, rnuqueuse buccale,
rnuqueuse vulvaire), normalement rosbes, est influence par de nornbreuses
maladies g6nkrales. Elles sont psles dans I'ankrnie, rouges dans les
congestions, jaunes dans I'ictere. On peut observer, sur la conjonctive
notarnrnent, de petites taches rouges appelees p6t6chies, qui souvent
sont un indice de trypanosornose. La congestion de la vulve est I'une des
premieres manifestations de la peste bovine. Dans cette rnaladie, 9 la
congestion font suite des ulc6rations, et les rngmes lesions sont Bgalernent
observees, mais plus tardivement, sur les rnuqueuses des cavites nasales
et de la bouche.
L'un des principaux signes de la fievre aphteuse est la constitution
d'aphtes, petites vesicules qui siegent de preference sur la rnuqueuse
buccale.
Toux
L'anirnal sain ne tousse pas. La toux traduit un 6tat pathologique
(laryngite, bronchite, pneurnonie, pleurksie, peripneurnonie, etc.). Elle est
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plus ou rnoins frbquente, plus ou rnoins forte ou grasse. Pour faire tousser
un animal iI faut lui presser assez fortement le larynx ou la trachee.
M i c t i o n e t defecation
Les e x c r h e n t s liquides et solides fournissent de nombreux rensei-
gnements.
Les rnictions (action d'uriner) sont plus ou moins frequentes, plus
ou moins abondantes (diabete). I I peut y avoir incontinence ou retention
d'urine. L'urine peut &re trouble, sanguinolente (polypes de la verge),
hematurique (charbon bacteridien), hernoglobinurique (piroplasrnose).
Dans I'hematurie, I'urine est teintBe en rouge par du sang normal ; dans
I'hbmoglobinurie, elle est de la couleur du the, plus ou moins foncee,
colorBe par I'hbmoglobine du sang dejs decompose.
Les conditions de la defecation caracterisent partiellement certains
Btats morbides. La diarrhee, qui est caracterisee par des dbfecations
frequentes de f6ces liquides, prend une importance variable suivant sa
forme et son intensite : alimentaire, sereuse, sanguinolente, etc. Dans la
peste bovine, la diarrhee est intense et sanguinolente. La defecation peut
litre ralentie : iI y a dans ce cas constipation. Celle-ci presente des
degres variables. Lors d'obstruction intestinale, la defecation n'est plus
possible.
Examen d e l a s u r f a c e du c o r p s
L'exarnen de l a surface du corps permet de caracteriser en premier
lieu les maladies de la peau (eczema, gales, teignes, etc.) ; de plus,
de nombreuses maladies generales peuvent se manifester par des lesions
c ut a nBes.
Voici quelques exernples : les aphtes de la fievre aphteuse &gent
non seulement dans l a bouche, mais encore sur les rnamelles et les
trayons; la clavel6e, qui est une maladie du rnouton, se caracterise surtout
par des pustules qui se forment dans les regions 2 peau fine; le porc,
atteint de rouget, prbsente des plaques rouges sur la peau ; les principales
lesions de la lymphangite Bpizootique du cheval : abces, ulcerations,
cordons, sont visibles 2 la surface du corps.
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indirectement b I'aide d'une sorte de petit marteau caoutchoute appeld
plessim6tre; elle met en evidence la sonorite de la region examinde
(matit6 de la poitrine dans la pneurnonie). Par I'auscultation o n distingue
'les bruits provenant de I'inthrieur de I'organisme (pournon, ceur). Elle
se fait avec I'oreille directement appliquee sur la poitrine ou avec un
instrument : le st6toscope.
En possession des diffhrents elements recueillis, il est alors possible
de formuler un diagnostic, c'est-A-dire de reconnaltre la maladie, soit
immediatement, soit par etapes successives.
Souvent, le diagnostic clinique doit etre precise par I'autopsie des
animaux du meme troupeau dejb morts ou sacrifies B cet effet e t par divers
examens de laboratoire (exarnen microscopique du pus, du jetage, du
sang, des excrements, analyse chimique de I'urine) ou par des inoculations
revdlatrices (dans les cas de maladies infectieuses).
L'incubation
C'est le temps qui s'dcoule entre.'le moment d e la contagion e t
I'apparition des premiers sympt6mes. La duree de cette periode varie
suivant la maladie : la phripneumonie bovine n'dvolue qu'aprhs une
longue periode d'incubation. Au contraire, la peste bovine a une periode
d'incubation trhs courte. La durde d'incubation pour une maladie ddter-
minde peut varier suivant I'esphce atteinte et Bgalement selon la rdsistance
de I'individu atteint.
Les prodromes
Les premiers troubles qui se manifestent b la suite de la pdriode
d'incubation sont les prodromes. Ce sont des signes vagues (616vation
de temperature, changement d'hurneur de I'animal, inquietude, etc.)
Ils sont A peu prhs les m6mes pour toutes les maladies : ils n'ont pas de
valeur precise pour le diagnostic, sauf en periode d'dpizootie : dans un
troupeau de bovins 00 sevit la peste bovine, une simple elevation de
tempkrature chez un veau non encore atteint permet de soupqonner trhs
fortement la rnaladie.
Les sympt6mes
Ce sont des signes rdvklateurs de la maladie. On distingue des
sympt6mes generaux (exemple : fikvre), des sympt6mes locaux (exemple :
toux) ; des sympt6mes principaux qui permettent 2 eux seuls d'etablir un
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diagnostic (par exemple les lesions buccales dans la peste bovine ou la
tumeur crepitante du charbon syrnptornatique) et des s y r n p t h e s
accessoires.
Une maladie Bvolue plus ou moins rapidernent.
L'Bvolution est suraigue, aigue ou lente. Elle peut se terminer par
la mort ou par la gukrison ou encore par 1'6tat chronique.
Les maladies sont sporadiques quand elles atteignent un animal
isolBment (exemple : abces, eczBma).
Les Bpizooties sont des maladies caracterisees par leur apparition
sur un grand nombre d'anirnaux et leur extension rapide (exernple :
la peste bovine).
Les panzooties sont des maladies communes 5 un continent.
Les enzooties sont des maladies qui frappent un petit nombre
d'animaux dans une rBgion, soit d'une facon perrnanente, soit 5 certaines
epoques dkterrnin6e.s (exernple : le charbon bactbridien).
Les zoonoses sont des maladies communes h I'homme et aux animaux,
et intertransmissibles.
Autopsie
Technique
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niveau du thorax, et deux incisions transversales au niveau de la partie
posterieure de I'abdomen, de maniere B pouvoir acceder commodement
aux cavitks thoraciques e t abdominales.
''
Pratiquer deux volets decouvrant largement les organes :
a ) v o l e t thoracique, par section de la partie terminale du sternum,
au niveau de la soudure sterno-abdominale, et section des c6tes : aux
ciseaux pour les petits animaux (volailles) ;au costotome pour les animaux
de taille moyenne (lapins, porcelets, moutons, chevres) ; B la scie pour
les animaux de grande taille (chameau, cheval, bceuf, b e ) . Ce volet sera
B charniere anterieure par section des c6tes des deux c6tBs pour les
petits animaux; B charniere laterale par section des c6tes d'un seul c6tB
pour les grandes especes.
6 ) v o l e t abdominal, pratique avec le bistouri ou les ciseaux
(petites especes), avec le couteau d'autopsie (grandes especes) ;
- explorer les diverses parties du corps; examiner dans I'ordre :
la peau (c6t6 chair), le tissu conjonctif sous-cutanb, la chair
musculaire, le phritoine et les organes de la cavite abdominale
(foie, rate, pancrhas, reins, capsules surrknales, estomac, intestin,
vessie, organes ghitaux, ganglions), la plevre et les organes de
la cavit6 thoracique (poumons, cceur, pericarde, ganglions) ;
- I'autopsie terminke, on dbtruira les cadavres et on sterilisera le
mathriel d'autopsie en le plongeant pendant une heure dans une
solution cresylee B 5 p. 100.
Pr6lBvements
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PrWvements sur I'animal vivant
Etalement de sang
Une goutte de sang, etalee en couche mince sur une lame de verre,
permet de faire un examen microscopique.
Le sang est prdeve au niveau des capillaires superficiels, en un point
du corps variable suivant les especes :
- Chameau, cheval, bceuf, mouton, chevre : section du bord libre
de I'oreille, ou piqiire avec la pointe d'un bistouri droit du bord
libre de I'oreille, du bout du nez, ou de la face interne des 18vres;
- Lapin : piqQre de la veine marginale de I'oreille, dilatee par pression
B la base ;
- Poulet : section de la crste, ou piqQre de la veine externe de
I'aile ;
- Pigeons : piqQredes doigts ;
- Chien : piqOre du bord libre de I'oreille.
On coupe les poils au niveau du lieu d'election ; on fait affluer le sang
par frictions ou chiquenaudes; on pratique la section ou la piqiire avec des
instruments flamb6s. Au cours du prelevement on bvite toute compression
tendant 8 activer la sortie du sang, ce qui aurait pour resultat le melange
de la lymphe et du sang. On pr6lBve toujours les premieres gouttes.
, La lame de verre qui sert B I'etalement (lame porte-objet) doit Gtre
tres propre et surtout tres soigneusement degraisske avec de I'alcool
ou de I'Bther.
On la saisit par ses grands bords, entre le pouce et I'index, et on la
pose delicatement sur la goutte de sang qui sort du point de ponction ou
de section.
La goutte, recueillie 2 deux centimetres environ de I'extremite de la
lame, ne doit pas &re plus grosse qu'une t&te d'6pingle pour obtenir un
Btalement mince et qui n'atteigne en aucun point les bords e t les extremites
de la lame. On retourne celle-ci, la goutte en dessus. L'Btalement se fait
8 I'aide d'une lamelle ou d'une lame B bords rod& dont le bord est plonge
dans la goutte et qu'on fait glisser sur la lame d'un mouvement regulier
et en I'inclinant B 45"
On agite rapidement pour h%ter la dessiccation du sang Btal6. I I
faut faire toujours plusieurs frottis en prenant une goutte fraiche pour
chaque nouvel etalement.
Les frottis ne doivent &re ni fixes ni 6tiquet6s. Les lames sont expediees
dos B dos et enveloppees dans une feuille de papier blanc sur laquelle
on notera la nature du prelevement, la date et tous les renseignements
concernant le malade (sympt6mes).
Preldvement de sang
I I est parfois necessaire de recueillir une quantite plus importante de
sang pour des inoculations, des ensemencernents ou des s6ro-diagnostics.
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Frottis correct : Btalement rBgulier et ne debordant pas la lame
zones creuses
Frottis dkfectueux : trop Bpais debordant la lame, avec des zones creuses
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Pr6ldvement de pus
On prelkve le pus soit 5 I'intkrieur d'un abcks mirr ou d'un bouton
pret B percer, soit a la surface d'une lesion suppurante.
- en abcds clos : couper les poils ou mieux, raser la surface de
I'abcks; badigeonner 2I la teinture d'iode; ponctionner avec une
aiguille adapthe B une seringue; aspirer le pus qui est ensuite
etale sur lame (en operant comme pour un Btalement de sang),
ou rejete dans un flacon sterile pour envoi au laboratoire (mgmes
precautions que pour le prelkvement de sang).
- 3 la surface de l&sions suppurantes : (plaies, fistules, etc.),
nettoyer la surface de la lesion avec un tampon de coton imbibe
d'eau bouillie ou de serum physiologique :prelever le pus dans une
anfractuosite de la lesion avec une pipette sterile (par aspiration
lente).
Prelhement de poils
Les poils sont arraches avec une pince 2I mors plats, sur les lesions
et de preference en bordure des lesions. Les saisir au ras de la peau et
tirer d'un coup sec pour arracher le bulbe. Les poils arraches sont presses
entre deux lames, lesquelles sont ensuite enveloppees dans un papier fort.
Pr6lbvernent d'excrements
Doivent Qtre faits d8s 1'6mission des matihres fecales, et mieux encore
dans le rectum. On preldve de preference (quand iI y en a) les parties san-
guinolentes, les parcelles contenant du mucus, des grains riziformes. On
recueille environ 500 grammes de matikres chez les bovins et les Bquidks,
50 B 100 grammes chez les ovins,caprins et porcins, 20 B 50 grammes chez
les volailles. On additionne le prelkvement de formol du commerce 2I
10 p. 100 pour assurer sa conservation, quand iI s'agit d'un pr6lkvement
destine B des recherches parasitologiques.
L'expedition se fait en flacon sterile 2 large ouverture. Eviter de souiller
les bords du goulot. Le bouchon est bien fix6 (attach6 au goulot, paraffinh).
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Prbldvement de parasites externes
Les larves et les nymphes sont placees dans un tube 8 insecte conte-
nant de I'alcool B 700 et soigneusement bouche (bouchon paraffine).
Les tiques adultes sont detachees avec precaution : une goutte
ou deux de xylol qu'on laisse tomber sur le dos de la tique permet de la
detacher plus facilement avec une pince. Sinon on procede de la faqon
suivante : saisir le corps de la tique entre le pouce et I'index et abaisser ce
dernier jusqu'8 ce que I'ongle se trouve au niveau du capitulum. Exercer
une legere traction pour extraire la tique. Les tiques recueillies sont plac6es
entre deux lames de verre pressees I'une contre I'autre (pour obliger les
tiques B etendre leurs pattes) et maintenues en place par de la ficelle.
On plonge le tout dans I'eau bouillante, qui tue les tiques instan-
tanbment, puis pendant vingt-quatre heures dans un flacon d'alcool
B 70". La tique ainsi fixee est alors enlevee et expedi6e dans un tube B
insecte rempli d'alcool 8 70°.
Les mouches et les moustiques sont recueillis dans un tube B
essai ou B insecte dont I'ouverture est fermee par un tampon de coton,
jamais par un bouchon, afin d'eviter la mort et la moisissure rapide des
insectes captures. On peut aussi les expedier morts, dans une boTte
d'allurnettes dont le tiroir est garni d'une couche mince d'ouate et renfer-
mant quelques cristaux de naphtaline ou une pincbe de D.D.T.
Prkl&vement de sang
On preleve le sang par ponction du coeur avec une pipette sterile;
au niveau du point de ponction la surface du cceur est prbalablement
cautbrisee par application de la lame chaude d'un vieux bistouri flambe
ou d'un objet mktallique quelconque tr&s chaud.
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c6rinBe 3 50 p. 100 ou tout autre liquide conservateur mieux adapt6 B
certains cas particuliers. On 6vite d'introduire des pieces trop grosses dans
des flacons trop petits ou B Btroite ouverture.
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Fiches de pr6ldvement pour diagnostic de la rage
10. Nature des prelbvements et de I'agent de conservation utilise (pH 6,4 B 7 recom-
mand6)
1 ) Tissu cBr6bral
(demi-hBmisphbre droit) :form01 a 10 p. 100: oui-non (*) ................................................
(demi-hemisphbregauche) : glycerine B 50 p. 100 (pH 6,4 B 7) oui-non ..................
2 ) Glandes salivaires :glycerine h 50 p. 100 ......................................................
11. Date desprelbvements effectuks : .................................................................................................................
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Recommandations pour les expeditions de p r d h e m e n t s
au laboratoire
Description du microscope
deplace dans le sens vertical par rapport aux objets i examiner par un
groupe de deux vis :
- I'un est un gros bouton mollet6, parfois appele cr6maillere,
qui permet les deplacements rapides mais peu precis de I'assem-
blage optique,
- I'autre est la vis micrometrique qui permet des deplacements
lents, mais tres precis, de I'assemblage optique.
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d'lncllnoiton \ Mirair
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II y a en general plusieurs objectifs de grossissements diffkrents,
supportes par un disque pivotant appele revolver. Cette disposition permet
de passer rapidement d’un grossissement 8 un autre.
II existe d‘autres perfectionnements du systeme optique des micros-
copes, dont les deux principaux sont :
- le prisme, incorpore entre I‘objectif et I’oculaire, et qui permet de
regarder par un oculaire dispose obliquement, ce qui evite la
fatigue du cou de I’observateur,
- le systeme binoculaire, qui permet I’observation avec les deux yeux
2 la fois.
Sous I’objectif se trouve la platine du microscope, qui est destinee
2 recevoir des lames de verre qui supportent les objets B examiner.
Cette platine peut recevoir un accessoire tres utile et trhs commode,
la surplatine mobile, qui permet de deplacer commodement en tous
sens la lame sous I‘objectif du microscope.
La platine est percee d’un trou destine laisser passer les rayons
lumineux qui viennent eclairer I’objet. Sous la platine se trouvent le
condensateur et la source lumineuse constituee soit par une petite lampe
electrique, soit par un miroir reflechissant.
Le condensateur est pourvu d h n diaphragme a iris qui permet de
doser la quantite de lumiere t~envoyer sur I‘objet a eclairer.
En outre, un dispositif permet de faire monter ou descendre le conden-
sateur, ce qui joue a la fois sur I‘intensite et le contraste de I‘eclairage.
Enfin, le condensateur est souvent muni d’un porte-filtre, destine a recevoir
des disques de verre colore ou depoli dont I’usage peut se reveler avan-
tageux surtout dans les examens 21 faible grossissement.
Grossissement du microscope
On dit qu’un microscope grossit 100 fois quand iI donne d’un objet
une image lineairement 100 fois plus grande. En fait, le grossissement en
surface est de 100 x 100 = 10 000 fois.
Les microscopes ordinaires grossissent couramment 1 000 fois (soit
1 million de fois en surface).
Pour connaitre le grossissement d‘un microscope, encore appele
((puissance du microscope D, on multiplie le grossissement de I’objectif
par le grossissement de I’oculaire. Par exemple, un microscope utilisant
un oculaire grossissant 10 fois et un objectif grossissant 40 fois aura
un grossissement total de 10 x 40 = 400 fois. On exprime par la lettre X
le grossissement d’un objectif ou d‘un oculaire. Ainsi, un objectif marque
X 5 a un grossissement lineaire de 5 fois.
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Tableau des grossissements
les p l u s employes du m i c r o s c o p e o p t i q u e
c OCULAIRES
OBJECTIFS
x 5 I x10 1 X 15
4
10
20
2o
50
100
I 40
100
200
I 60
150
300
40 200 400 600
60 300 600 900) peu
100 500 peu utilise 1000 1 500 ) utilises
(2 immersion)
Remarques s u r les o b j e c t i f s :
a ) O b j e c t i f s a sec : les objectifs B sec ont un grossissement qui va
en general de 4 B 60 fois. On les designe sous le nom d'objectifs 6 sec
car leur emploi se fait sans precaution spbciale, contrairement aux objec-
tifs i immersion.
6 ) O b j e c t i f s a i m m e r s i o n : I'objectif B immersion le plus couram-
ment utilise est le X 100. II existe cependant des objectifs B immersion
encore plus puissants (X 115 par exemple). Ces objectifs sont appeles
B immersion parce qu'on doit interposer entre I'objet B examiner et I'objectif
une goutte d'huile de cedre, sans laquelle I'image microscopique serait
floue. L'huile de c6dre est un liquide huileux ayant le meme indice de
refraction que le verre, ce qui Bvite la refraction des rayons lumineux
entre I'objet B examiner et I'objectif.
Le c h a m p du m i c r o s c o p e est determine par la lentille frontale
de I'objectif. La lentille frontale de I'objectif est celle situee 2 proximite
de I'objet B examiner.
Le champ du microscope se presente ordinairement sous forme d'un
disque du fait de la forme circulaire des lentilles. II existe cependant des
(( caches )) de forme carree qui delimitent des carres plus commodes pour
les numerations microscopiques.
N o t a : reperage d'objets dans le champ du microscope. On assimile
le champ du microscope 2 un cadran d'horloge et on dit par exemple
(voir croquis) :
- A est i 5 h au bord du champ,
- B est B 8 h 15 entre centre et bord,
- C est B 1 0 h 30 pr6s du bord.
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Manuel veterinaire
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Profondeur de champ du miscroscope
Entretien du microscope
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colore. En effet, ce produit est de couleur bleue quand iI est sec et devient
rose quand iI a perdu son pouvoir dessiccateur. Pour le regenerer, iI suffit
de le chauffer dans un recipient jusqu'B ce qu'il redevienne bleu f o n d .
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pour un examen seront jetees dans un bocal contenant de I'acide chlorhy-
drique B 10 p. 100 oC elles se nettoieront par simple trempage. On les rince
ensuite B I'eau claire et on les conserve dans I'alcool B 90° ou dans un
melange alcool-6ther-ac6tone 2 parties Bgales.
Les lames tr&s sales (frottis anciens seches et fixes, lames recouvertes
de graisse ou d'exsudats organiques) seront immergees pendant plusieurs
heures dans le melange sulfochromique (80 B 100 g de bichromate
de potassium dissous dans un litre d'acide sulfurique) ; ce melange est 2
manipuler avec les plus grandes precautions.
Les lamelles couvre-objet servent surtout 2 &re disposees sur les
preparations liquides ou psteuses (par exemple pour un examen de sang
frais ou une preparation coprologique).
Les lamelles ne s'utilisent qu'une seule fois et sont jetees apr6s usage.
On ne pratique pas n'importe comment I'examen d'une preparation
microscopique.
Une fois que la preparation est placee sous le microscope et que la
mise au point est faite, on procede comme suit :
- d'une main, on fait parcourir B la lamelle des bandes longitudi-
nales pour explorer 2 fond la preparation. Ceci s'effectue par la
manceuvre des vis de commande de la surplatine.
- de I'autre main, on manipule la vis micrometrique de maniere B
fouiller toute la profondeur de champ du microscope.
On part par exemple du point A et I'on d6place la lame 2 I'aide de la
surplatine mobile par bandes paralldes de la largeur du champ du micros-
cope jusqu'8 parvenir au point B.
Utilisation du microscope
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Cette table doit etre installBe pr2.s d'une fenetre si on s'6claire avec
la IumiBre du jour, ou au contraire dans un endroit sombre si on s'kclaire
&ZI la IumiBre artificielle (lampe Blectrique ou lampe temp6te).
On s'assure ensuite de la propretB des lentilles, du miroir, et Bgalement
du condensateur. Puis on dispose la lame ZI examiner sur la platine. On
I'essuie si besoin est, et on la coince dans la griffe de la surplatine. Puis
on oriente la face plane du miroir vers le condensateur. Le condensateur
est remontB contre la lame porte-objet, avec le diaphragme ouvert au
maximum.
A ce moment-li on a m h e I'objectif le plus faible aussi pr&s que
possible de la fame porte-objet. On vdrifie cette operation en regardant
de cBt6 pour Bviter que I'objectif ne vienne percuter dans la lame.
Puis on met I'ceil B I'oculaire tout en manceuvrant le gros bouton
mollet6 jusqu'i ce que I'image apparaisse.
DBs que I'image apparait, on passe i la manceuvre de la vis micro-
mBtrique pour parfaire la mise au point.
GBnBralement, I'Bclairage n'est pas satisfaisant. Pour obtenir un
bon Bclairage, on descend le condensateur, ou on manceuvre le diaphragme.
GBnBralement, ces deux manipulations doivent etre conjuguBes pour
obtenir une image B la fois claire et brillante sans Bblouir, et bien contrastee
pour mettre en relief tous les details de la prkparation.
Le plus souvent, on doit descendre le condensateur pour les examens
i faible grossissement, et le remonter pour les examens i un grossisse-
ment plus fort. On rBgle Bgalement I'intensite de 1'6clairage avec le dia-
phragme, ce qui permet souvent de faire apparaitre des details invisibles
avec un Bclairage excessif.
II faut toujours commencer par examiner une preparation avec le
grossissement le plus faible, ce qui permet, gr5ce i un examen rapide
de I'ensemble de la lame, de choisir les endroits les plus interessants ou
les plus faciles i observer.
Pour passer aux grossissements plus forts, il suffit gBnBralement de
tourner le rBvolver, de parfaire la mise au point avec la vis micromBtrique
et I'Bclairage en remontant le condensateur.
Technique d e I'examen B i m m e r s i o n
Ce sont surtout les frottis colorBs qui sont justiciables de I'examen i
immersion.
Remarque i m p o r t a n t e : avant de placer la lame sur la platine, iI
faut soigneusement reperer le cBt6 de la lame oir se trouve le frottis pour
la poser face en dessus sur la platine du microscope.
Les objectifs i immersion ont un pouvoir grossissant considBrable,
gBnBralement de 100 fois ou de 115 fois. L'usage de tels objectifs, qui,
combinBs avec des oculaires X 10 ou X 15, permettent des grossissements
de 1 000 i 1 500 fois, nBcessite un puissant Bclairage, sans diffraction
des rayons lumineux.
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Ceci s'obtient en interposant entre la lentille frontale de I'objectif
i immersion e t la surface de I'objet B examiner une goutte d'huile de
chdre. L'huile de cedre ayant pratiquement le rneme indice de refraction
que le verre, sa presence Bvite la refraction des rayons lumineux entre
I'objet et I'objectif, et I'image apparait claire et nette.
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Cet examen suff it amplement pour les recherches courantes, et il
permet dapercevoir les ceufs ou les larves de parasites. En cas de doute,
on peut examiner B u n grossissement X 200 o u X 400, ce qui est souvent
utile pour differencier les ceufs de parasites des spores vegetales frequem-
ment presentes dans les excrbrnents.
I I existe d'autres mbthodes plus perfectionnees dans le cas oh
I'exarnen serait nkgatif, mais I'infestation parasitaire est gen6ralement
assez importante pour que I'on apeyoive les e u f s de parasites par le
simple examen qui vient d'6tre decrit.
Diagnostic dermatoscopique
Ce diagnostic est plus difficile que le diagnostic coprologique, et si
u n premier examen s'av8re nkgatif, iI ne faut pas hesiter A en faire u n second
ou un troisikme pour decouvrir les parasites.
En presence d'une maladie de la peau que I'on suspecte d'6tre d'ori-
gine parasitaire, iI faut proceder comme suit :
- arracher, s'il y a lieu, les poils sur la surface d'un timbre-poste.
Deposer sur cette surface depilee une goutte d'acide lactique. Racler
ensuite la peau avec u n bistouri jusqu'h I'apparition d u sang. Dbposer le
produit de raclage sur une lame et recouvrir d'une lamelle aprks avoir
enlevh les fragments volumineux avec une kpingle. Examiner par bandes
parallhles au grossissement X 100.
Si la prhparation est trop opaque, ce qui arrive frbquemment dans les
preparations dermatoscopiques, o n la chauffera doucement sur 1a
flamme d'une lampe B alcool en Bvitant toutefois I'Bbullition. Ce procede
rend les preparations plus transparentes et permet u n examen plus
commode de la lame.
Diagnostic hematoscopique
On dit aussi d i a g n o s t i c h e m a t o l o g i q u e D.
On emploie le diagnostic hernatoscopique chaque fois que I'on
suspecte une maladie parasitaire d u sang.
On utilise deux procedes : I'examen direct et la mbthode panoptique.
L'examen d i r e c t est commode, rapide, et permet t r h souvent u n
diagnostic extemporan6 des trypanosomoses.
On preldve une goutte de sang frais (3 I'oreille chez les mammiferes,
h la cr6te chez les oiseaux) que I'on depose sur une lame. On recouvre
d'une lamelle et on examine B un grossissement X 600. Les parasites,
quand ils existent, encore vivants et mobiles, s'aperGoivent tout de suite
surtolrt par les deplacements qu'ils impriment aux globules rouges.
Si I'examen direct est nkgatif, on devra recourir B I'examen apr8s
coloration, dont le meilleur et le plus commode est celui de la mbthode
panoptique.
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La m6thode panoptique la plus utilisee met en ceuvre le colorant
de May-Grunwald et le colorant de Giemsa, deposes sur des frottis de
sang.
Sur la lame sechee non fixee et placee dans une boite de Laveran,
verser 20 gouttes de colorant de May-Grunwald. Couvrir la lame pour Bviter
1'6vaporation d u solvant (alcool). Laisser agir trois minutes, ajouter
20 gouttes d'eau distillee tamponnee a p H 7, laisser en contact une minute.
On enleve I'exces de colorant avec quelques centimetres cubes
d'eau que ['on fait couler goutte a goutte sur la lame legerement inclinee.
A p r h avoir secoue celle-ci quelques fois, pour enlever I'eau, o n la place
face en-dessous dans une boite de PBtri contenant une solution fraiche-
ment preparee de 1 centimetre cube (40 gouttes) de Giemsa dans 20 cen-
timetres cubes d'eau distillee neutre.
Laisser colorer pendant 10 minutes, laver 5 I'eau, secher avec precau-
tion 2 I'aide de papier filtre par pression et sans frottement, deposer sur
la lame une goutte d'huile de cedre, examiner au microscope.
L'examen se fait d'abord 2 faible grossissement pour reperer les
zones les plus interessantes de la preparation, puis a I'examen I'immersion
au grossissement X 1 000.
Remarque importante : seul un examen positif est significatif
d u point de vue du diagnostic. Quand u n examen est negatif, o n ne peut
conclure d'emblbe ZI I'absence de la maladie recherchee et iI faut, dans
ce cas, recourir 3 de nouveaux examens, au besoin a plusieurs jours
d'intervalle, pour &re dkfinitivement fixb.
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