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Mmoire de DESS Qualit et Gestion de l'Eau Prsent par Mlle Fanny Gauthier

BIOFILMS ET QUALITE BIOLOGIQUE DE L'EAU POTABLE AU COURS DE SA DISTRIBUTION

Ralis l'Universit de Picardie - Amiens Anne 2001 2002

Tuteur : M. Max Bugnicourt

REMERCIEMENTS

Je tiens remercier Mr Sylvain Fass, responsable de projet NANCIE Centre International de l'Eau, pour sa sympathie, sa disponibilit, et ses conseils. Je tiens galement remercier Mr Grard Touz, de l'Association Gnrale des Hyginistes et Techniciens Municipaux, pour son aide.

RESUME
Le maintien de la qualit des eaux potables de la sortie de l'usine de traitement jusqu'au robinet du consommateur est une proccupation majeure des traiteurs et distributeurs d'eau. D'un point de vue biologique, ce maintien doit se caractriser par une stabilit de la croissance bactrienne. Or les rseaux de distribution d'eau potable sont continuellement exposs un flux de matire organique biodgradable et de microorganismes provenant de l'usine de traitement, mais galement d'incidents (cassures, rparations) survenant sur le rseau lui-mme. Une partie de ces microorganismes (bactries htrotrophes en particulier) s'adapte cet environnement oligotrophe, et peut ainsi coloniser l'ensemble d'un rseau de distribution d'eau potable, la plus forte densit de microorganismes se rencontrant la surface des matriaux supports et s'organisant sous forme de microcolonies plus ou moins disperses et mlanges des produits de corrosion et des prcipits inorganiques. La dynamique bactrienne en rseau de distribution est complexe, car elle dpend de nombreux paramtres, notamment, le carbone organique dissous biodgradable, la prsence d'un rsiduel de dsinfectant, la nature et l'tat des parois de canalisations, la biomasse relative des cellules bactriennes libres et fixes et, enfin, les phnomnes de prdation, la fixation de biomasse bactrienne induisant la formation dune chane alimentaire. La diminution de la contamination microbienne et la limitation de la dgradation microbiologique ncessite l'emploi de techniques chimiques comme la dsinfection, notamment par ajout de chlore qui agit sur les microorganismes eux-mmes, ou bien l'emploi de techniques nouvelles permettant d'agir non plus sur les bactries elles-mmes, mais sur la cause de leur prsence et de leur croissance, c'est dire en diminuant fortement les concentrations en matire organique en entre de rseau de distribution et dans l'eau circulante. Mots cls : biofilm, eau potable, rseau de distribution, biodiversit bactrienne, stabilit biologique, dsinfection.

ABSTRACT
The maintenance of drinking water quality from the treatment plant to the consumer tap is a major concern to water distributors. From a biological point of view, this maintenance must be characterized by a stability of bacterial growth. However, drinking water distribution systems are continuously exposed to a flow of biodegradable organic water and a flow of microorganisms, coming from the water treatment plant, but also from incidents (breaks, repairs) on the distribution network itself. A part of these microorganisms (heterotrophic bacteria, particularly) can grow in this oligotrophic environment, and can thus colonize the entire drinking water distribution system, the highest density of microorganisms being found on the surface of pipewalls and organized in dispersed microcolonies, mixed with corrosion products and inorganic precipitates. Bacterial dynamic in distribution systems is complex, because it depends on different parameters, like the biodegradable fraction of organic carbon, the presence of a residual disinfectant, the nature and the state of pipewalls, the biomass of free and fixed bacteria, and the grazing activity of protozoan, the fixation of bacterial biomass resulting in the formation of a food chain. The decrease of microbiologic contamination and the limitation of the microbiologic degradation require the use of chemical disinfectants, like chlorine, which act on the microorganisms themselves, or the use of new technologies, which act on the causes of the presence of bacteria by decreasing the concentration of organic matter in the distribution network and in the bulk phase of water. Key words : biofilm, drinking water, distribution network, bacterial diversity, biological stability, disinfection.

SOMMAIRE
Introduction

Les rseaux de distribution


1 2 3 4 Les rseaux de distribution deau potable en tant que racteur complexe Racteur biphasique / biologique Evolution de la qualit de leau le long dun systme de distribution deau potable Notion de biofilm

Biodiversit des Rseaux de Distribution d'Eau Potable


1 Dveloppement dun biofilm bactrien au sein des rseaux 2 Populations microbiennes des rseaux de distribution 3 Formation de chane trophique

Facteurs contrlant la Reviviscence Bactrienne


1 2 3 4 5 Nature des matriaux de canalisations La temprature Les nutriments La dsinfection Prvention de la reviviscence bactrienne en rseau de distribution deau potable

Rglementation
1 Rglementation vis--vis des matriaux en contact avec l'eau destine la consommation humaine 2 Rglementation vis--vis de l'eau destine la consommation humaine

Conclusion Bibliographie Table des matires Table des tableaux Table des figures Annexes

Fanny Gauthier DESS QGE

Biofilm et qualit de leau potable

INTRODUCTION

Une proccupation majeure des traiteurs et distributeurs d'eau est de rpondre la demande des consommateurs et d'assurer le maintien de la qualit de l'eau potable au cours de sa distribution, dans le but d'un respect des normes nationales et europennes de potabilit, et dans un souci de prservation de la sant publique. Les analyses de contrle dont l'objectif est de s'assurer de la qualit de l'eau potable, reposent sur diffrents paramtres physiques, chimiques, mais galement microbiologiques. En effet, le but du traitement de potabilisation n'est pas de produire une eau strile, mais une eau ne prsentant pas de risque du point de vue de la sant publique. Ainsi, un flux continu de microorganismes est observable en sortie d'usine. Pour prvenir tout risque de reviviscence bactrienne, un rsiduel de dsinfectant (chlore, dioxyde de chlore, monochloramines) est maintenu dans le rseau. Malgr la prsence de ce rsiduel et le milieu oligotrophe (voire ultraoligotrophe, avec COD < 2 mg.L-1, dans de nombreux rseaux) constitu par l'eau potable, certaines bactries s'adaptent ce milieu et prolifrent. La rsistance des bactries ce milieu est due leur organisation en biofilm, c'est dire en microcolonies disperses, situes la surface des conduites d'adduction d'eau potable. La prsence de ce biofilm bactrien au sein des rseaux de distribution d'eau potable peut tre l'origine de non-conformit lors du dcrochage de ces biomasses fixes et peut constituer un abri aux bactries potentiellement pathognes.

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LES RESEAUX DE DISTRIBUTION

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LES RESEAUX DE DISTRIBUTION


1 Les rseaux de distribution deau potable en tant que racteur complexe
Il y a une trentaine dannes, les systmes de distribution deau potable taient considrs comme des ensembles inertes. Lobjectif premier de ces rseaux tait lacheminement de leau vers les consommateurs, afin de rpondre en quantit suffisante et en tout point du rseau leur demande. La gestion de ces rseaux a longtemps consist en la gestion de simples outils de transport deau et les aspects quantitatifs taient privilgis par rapport aux aspects qualitatifs, entranant ainsi des surdimensionnements de rseaux. Aujourdhui, cette notion de quantit apparat incompatible avec lobjectif de qualit, fix par la rglementation, pour quune eau soit conforme la qualit requise pour une eau destine la consommation humaine. En effet, un systme de distribution deau potable ne doit pas tre seulement considr comme un systme inerte, mais comme un racteur complexe (cf. figure 1), sige dinteractions physico-chimiques et biologiques.

Contamination (retour deau, ) Tartre, tubercules de corrosion, microorganismes, particules, dsinfectant

Microorganismes, matire organique, dsinfectant. Dpts + biomasse bactrienne fixe Permation (trs faible)

Contamination due au vieillissement et la casse des canalisations

Figure 1 : Schma dun rseau racteur (adapt daprs Levi, 1995) Remarque : les travaux de rhabilitation sur rseaux ont pour but de limiter la formation de tubercules de corrosion, et un mauvais vieillissement des canalisations.
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Ces ractions sont lies linteraction des conditions hydrauliques rgnant au sein du rseau, de la nature des matriaux utiliss et de la qualit des eaux circulantes. Ainsi, par exemple, les ractions lies la qualit de leau entrant dans le rseau, sont : - le type et la quantit doxydant utilis (gnration de sous-produits de dsinfection), - la teneur en matires organiques dissoutes biodgradables (recroissances bactriennes), - les saveurs (H2S, chlore), - la quantit de particules minrales et organiques (algues, bactries, charbon actif), - les conditions dagressivit et de corrosivit de leau (eaux rouges). Des risques daltration de la qualit de leau, par rapport celle de leau issue du traitement de potabilisation, sont alors possibles au cours de sa distribution.

2 Racteur biphasique / biologique


2.1 Racteur biphasique
Leau issue de lusine de potabilisation contient des particules en suspension, qui peuvent provenir : - de l'usine de traitement elle-mme, par relargage de fines particules de charbon actif en grain (CAG), - de leau brute utilise, - du systme de distribution deau potable lui-mme, par relargage de particules de corrosion mtalliques, ou par prcipitation dlments dissous (Fe, Ca, Mn, ), - de la croissance de micro et macroorganismes, - du rservoir, o l'eau se trouve en contact avec l'air. Laccumulation de ces particules au sein des rseaux de distribution est directement lie leur profil de sdimentation et de transportabilit (taille, densit, forme) (Gauthier et al, 1996). Les particules prsentes dans les rseaux de distribution deau potable peuvent saccumuler sous forme de dpts selon quatre voies : - sdimentation des particules contenues dans leau potable produite, - les matires dissoutes peuvent devenir particulaires dans les conditions du rseau (prcipitation, floculation, croissance biologique), - particules provenant des matriaux constitutifs de conduite (corrosion, rosion), - sdimentation des particules provenant de contamination externe. Ces dpts sont transfrables la phase aqueuse si des changements du rgime hydraulique interviennent (Gauthier et al., 2001). Les particules ainsi remises en suspension peuvent avoir des consquences importantes sur la qualit esthtique (augmentation de la turbidit, dveloppement de couleurs), chimique (consommation du dsinfectant, fortes concentrations en mtaux) et microbiologique de leau, avec une augmentation du dnombrement bactrien. Leau vhicule par les rseaux de distribution transporte alors de grandes quantits de minraux (fer, silicates, aluminium, calcium, manganse, principalement sous forme doxyde) et de la matire organique, en plus faible proportion (de 3 20% de la fraction minrale). Bien
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que constitue principalement dlments dissous, une petite fraction peut sdimenter sous forme de dpts dans le rseau de distribution. Une tude mene sur le rseau de distribution de Nancy (France) a montr les rsultats suivants (Gauthier et al., 2001) : le taux de particules en suspension dans l'eau potable varie de 51 128 g.L-1, dont 64% de matire organique. La matire organique reprsente une part importante des matires en suspension (MES), mais elle est ngligeable par rapport la matire organique dissoute, la concentration en particules organiques reprsentant environ 1% du carbone organique total (COT) : 21,3 g.L-1 contre 1670 g.L-1. Le haut contenu en matire organique dans les MES est du la prsence de matriaux biologiques tels que des bactries et d'autres microorganismes. contrairement aux particules en suspension, les dpts prsentent une fraction de matire organique minoritaire. Les dpts sont principalement composs de minraux, dont les oxydes de fer (19%), des matriaux sableux insolubles (18%), d'hydroxyde d'aluminium (15%), de carbonates de calcium (10%), d'oxyde de manganse (3%). Le ratio entre matire organique et matire minrale contenues dans les dpts sont de 1020% contre 80-90%. La meilleure sdimentation des particules minrales est due leur plus forte densit, en comparaison des particules organiques.

2.2 Racteur biologique


Le traitement de leau pour la rendre potable ne signifie que celle-ci soit strile. Lobjectif de ces traitements est de la rendre agrable au got et sans danger du point de vue sanitaire. De ce fait, plusieurs populations dorganismes vivent dans leau distribue. Ces diffrents organismes peuvent tre classs en 4 groupes (Block, 1992) : des espces indignes, composes essentiellement de microorganismes trouvs dans le sol, la nourriture, , tels que les bactries, les levures et les champignons microscopiques,

des espces non attendues au robinet du consommateur, telles que des protozoaires ou des macroinvertbrs du genre Asella. Introduites accidentellement dans le rseau, elles peuvent y survivre et sy multiplier un taux de plusieurs milliers par m3 , des espces nuisibles, qui peuvent aggraver les phnomnes de corrosion ou entraner lapparition de composs sapides. Cest le cas des bactries du genre Actinomyctes, qui scrtent des molcules appeles gosmine. Ces molcules confrent un got dsagrable leau mme faible concentration. Lautre problme associ ces espces est, si leur multiplication devient importante, la possibilit d'empcher la dtection despces potentiellement dangereuses, des espces dangereuses du point de vue sanitaire. Certaines espces pathognes pour les tres humains peuvent tre dtectes dans les rseaux de distribution. Leur prsence rsulte alors dune contamination accidentelle au cours du transport. Cette biomasse bactrienne se retrouve principalement dans les dpts, au niveau des rservoirs et des conduites d'adduction. En effet, ces derniers sont largement coloniss par des
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microorganismes, ceux-ci constituant des milieux poreux qui permettent lattachement et la croissance bactrienne, et notamment lorsque la fraction daluminium est importante (Gauthier et al, 1996). Les dpts fournissent en effet des nutriments organiques (la fraction de matire organique varie de 2 22% du poids sec du dpt) aux microorganismes. Ainsi, ceux-ci peuvent tre considrs comme des rservoirs de biomasse au sein des rseaux de distribution deau potable. La fraction minrale agit principalement comme un support pour les bactries, un plus grand nombre de bactries y tant observable. Cependant, la nature de ces lments minraux semble avoir une influence sur la survie et le dveloppement des microorganismes. Au sein des systmes de distribution deau potable, cette biomasse peut se trouver sous deux tats dans les rseaux : - un tat fix, directement sur la surface des conduites, ou au niveau de tubercules de corrosion. Le terme de biofilm est alors utilis. - un tat circulant, les bactries sont alors qualifies de planctoniques. Dune manire gnrale, les densits bactriennes sont plus leves au niveau du biofilm que dans la phase aqueuse. Ainsi, dans les canalisations dont le diamtre est infrieur 10 cm, le nombre de bactries impliques dans des biofilms est en moyenne 50 100 fois suprieur celui des bactries circulantes (Block et al., 1997). Ces deux tats sont schmatiss sur la figure 2.

Flux de microorganismes :
104 108 bactries.L-1 104 protozoaires.L-1

10 108 bactries.L-1 104 105 protozoaires.L-1 103 107 bactries.cm-2 103 protozoaires.cm-2

Eau :

Biofilm :

Figure 2 : Le rseau de distribution deau potable en tant que racteur biologique biphasique.

3 Evolution de la qualit de leau le long dun systme de distribution deau potable


Des tudes ralises sur des rseaux de distribution deau potable dassez grande tendue, ont permis lobservation de variations de la qualit microbiologique des eaux transportes le long du systme de distribution (Mathieu et al., 1998; Servais et al., 1995). Ces variations sont visualisables sur la figure 3.
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Laugmentation du temps de sjour de l'eau dans le rseau saccompagne de celle de la densit bactrienne (sauf quand prsence de postes de rechloration sur le rseau), traduisant une dynamique bactrienne. De cette dynamique rsulte linstabilit biologique de certains rseaux de distribution deau potable.
Abondance bactrienne (106 L-1)
120 100 80 60 40 20 0 Sortie de station de traitement 0 - 5 heures 5 - 10 heures 10 - 20 heures 20 - 40 heures

Temps de rsidence hydraulique

Figure 3 : Exemple de laltration de la qualit microbiologique le long dun systme de distribution deau potable (Servais et al., 1995).

4 Notion de biofilm
4.1 Dfinition
Les biofilms correspondent des associations de microorganismes inclus dans une matrice dexopolymres, qui sont gnralement attaches la surface de toutes sortes de matriaux, tels que les mtaux, les plastiques, les particules de sols, tissus, Au niveau des rseaux de distribution d'eau potable, les biofilms consistent, le plus souvent, en une association de plusieurs espces : bactries, champignons, algues, protozoaires, contenues au sein de dpts de dbris particulaires et de produits de corrosion. Les rseaux de distribution deau potable, comme tout autre environnement aqueux, peuvent tre coloniss par des biofilms, malgr les conditions qui y rgnent : absence de lumire, prsence dun agent biocide circulant, une faible concentration en lments nutritifs (milieu oligotrophe).

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4.2 Origine des microorganismes


Le niveau de contamination microbiologique des eaux dans le rseau est fonction du flux de cellules issues de lusine de traitement. L'origine des bactries dans les systmes de distribution deau potable est souvent mal cerne : - en sortie dusine de potabilisation, leau destine tre distribue nest pas strile. En effet, il existe un flux continu de microorganismes. Les bactries sont alors celles prsentes initialement dans leau brute traiter et qui ont rsist au traitement. Ce phnomne peut tre amplifi lors de relargage de particules de CAG, lorsque la dsinfection en sortie dusine est inefficace. Une cause indirecte de la prsence de ces microorganismes est la prsence, en quantit permettant leur survie, de carbone organique dissous biodgradable (CODB), - les rservoirs, o l'eau se trouve en contact avec l'air, et o les orifices, mal protgs, peuvent permettre le passage de poussires ou d'insectes apportant des contaminations, - le temps de sjour de leau dans les rservoirs ou dans les canalisations, qui peut tre plus ou moins important, - des contaminations externes par retour deau (limit par la mise en place de clapets antiretour) et lintervention sur les rseaux, tels que les travaux, la pose de nouvelles conduites ou encore des erreurs de branchement. Une fois les bactries circulant dans les canalisations, celles-ci sagrgent et se multiplient sur la surface interne des canalisations : elles forment alors un biofilm. Des phnomnes darrachage de bactries depuis le biofilm, dvelopp sur les parois internes des canalisations, peuvent alors avoir lieu et tre lorigine de remise en solution de microorganismes, et donc de la contamination microbiologique du rseau.

4.3 Consquences du dveloppement dun biofilm dans les rseaux


Diffrents problmes peuvent tre directement relis la formation et au dveloppement dun biofilm sur les parois des canalisations dadduction deau potable. Ces consquences peuvent porter sur le rseau de distribution lui-mme, ou sur la consommation de leau issue du rseau contamin. 4.3.1 Consquences de la prsence dun biofilm sur le rseau de distribution Ces consquences sont multiples et concernent aussi bien les populations bactriennes, que les caractristiques physiques du rseau : - les bactries accumules au niveau dun biofilm constituent le premier maillon dune chane alimentaire et ainsi favorisent le dveloppement de macroorganismes, - certains types bactriens peuvent induire, par leur prsence ou leur activit mtabolique, une augmentation de la turbidit, de la sapidit et de lodeur de leau, - certaines bactries peuvent acclrer le phnomne de corrosion. Le terme de biocorrosion est alors utilis, - les capacits de distribution dun rseau peuvent tre diminues par laugmentation des forces de rsistance, induites par la prsence de biofilms,
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- une augmentation du nombre de non-conformits par rapport aux critres microbiologiques de qualit de leau destine la consommation peut tre observe au sein de rseaux abritant des biofilms (problme d'arrachement des biofilms). Le dveloppement de bactries nitrifiantes dans des zones d'anoxie, peut galement entraner des non-conformits, avec dpassement de la norme pour les nitrites.

4.3.2 Consquences du dveloppement de biofilm pour les consommateurs Lentre flux constant de biomasse au sein des systmes de distribution deau potable et sa prolifration au sein des rseaux posent une problmatique du point de vue de la sant publique. En effet, le systme est constamment ensemenc par des germes dont la plupart sont inconnus (pathognes opportunistes ?). De plus, les conditions rgnant au sein des rseaux de distribution peuvent permettre le maintien ou la croissance de coliformes, et ainsi entraner le non-respect des critres de potabilit. Une fraction des microorganismes peut galement reprsenter un risque potentiel pour les consommateurs, et ainsi, augmenter la frquence de symptmes gastro-entriques (diarrhes, vomissement). Des travaux pidmiologiques ont montr que le taux moyen dincidents tropisme gastro-intestinal tait de 0,1 par personne et par an, dans le cas dune population gnrale, pour la consommation dune eau respectant les critres de potabilit (Block et al, 2001). Pour des groupes denfants, population plus sensible, des valeurs plus leves denviron 4 troubles digestifs par personne et par an et un pisode diarrhique par personne et par an, ont t mis en vidence. Toutefois, ces troubles ne sont pas identifis par le systme mdical et ne sont rvls que par la ralisation dtudes pidmiologiques spcifiques. La limitation de linstabilit biologique des systmes de distribution deau potable, et de la prolifration des microorganismes au niveau des biofilms relve dun intrt certain, aussi bien pour les utilisateurs, que pour les distributeurs, soulignant la ncessit dune matrise de la qualit microbiologique des eaux au cours de sa distribution. Cependant, il est utile de souligner que l'eau est un des produits alimentaires les plus surveills et les plus srs de France, avec des taux de conformit dans les grandes villes souvent excellents (par exemple, 99% Metz, 98,5% Nancy).

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BIODIVERSITE DES RESEAUX DE DISTRIBUTION D'EAU POTABLE

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Biodiversit des rseaux de distribution d'eau potable

BIODIVERSITE DES RESEAUX DE DISTRIBUTION D'EAU POTABLE


Les rseaux de distribution deau potable sont constamment soumis un flux entrant de microorganismes (bactries, champignons, protozoaires, algues, nmatodes,). L'eau potable qui transite dans les conduites de distribution prsente une flore microbienne extrmement diversifie, ainsi que de la matire organique dont une fraction est biodgradable. Mme si cette fraction de matire organique est faible (infrieure 0,5 mg COD.L-1), dans le cas de l'eau nanofiltre, exceptionnel en France), la multiplication et l'augmentation du nombre de microorganismes dans l'eau entranent des difficults de gestion des rseaux et de maintien de leur stabilit biologique. Ceci s'explique par trois faits : L'interface eau-matriau constitue un lieu privilgi de prolifration bactrienne, o s'accumulent cellules et matire organique. Sous les conditions hydrauliques du rseau, des dcrochements ou arrachages des dpts se produisent ; il y a alors remise en suspension des dpts dans leau circulante. Certains de ces microorganismes viables sadaptent lenvironnement oligotrophe, constitu par l'eau potable (matire organique biodgradable infrieure 2 mg COD.L-1 dans de nombreux cas). Ces populations sont donc difficiles liminer et mme lorsque le flux de nutriments vhiculs est rduit, la biomasse bactrienne n'est que faiblement diminue. Les biomasses fixes peuvent tre autochtones ou importes. Elles sont l'origine de la formation de chanes alimentaires complexes, puis d'cosystme stable.

1 Dveloppement dun biofilm bactrien au sein des rseaux


1.1 Formation du biofilm
La prolifration bactrienne sous forme de biomasse fixe dans les rseaux de distribution deau potable est le rsultat dun ensemble de processus physique, chimique et biologique. Ainsi, la formation dun biofilm se ralise en plusieurs tapes faisant intervenir ces diffrents processus : - le transport des microorganismes, - lattachement des microorganismes la surface des conduites du rseau, - la colonisation du support.

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1.1.1 Transport des microorganismes Toute adsorption de microorganismes suppose un rapprochement de ceux-ci vers le support. Quatre mcanismes peuvent alors tre impliqus : - la sdimentation, due aux seules forces de gravit, - les bactries entrent en contact avec la surface des conduites de manire alatoire (mouvements favoriss par les tournants des canalisations), - la turbulence de leau lintrieur du rseau amne les microorganismes jusquau support, - la mobilit, pour les microorganismes mobiles, avec ou non des phnomnes de chimiotactisme. 1.1.2 Attachement des microorganismes L'adsorption des bactries la surface des canalisations s'effectue le plus souvent au niveau de dpts minraux et organiques, ou la surface de tubercules de corrosion. La phase dattachement des microorganismes peut tre divise en deux tapes principales : ladhrence, qui correspond une adsorption rversible des cellules : une fraction des bactries planctoniques transportes par leau, se dpose au niveau de la surface des canalisations. Cette tape ne fait intervenir que des processus physiques (interactions lectrostatiques, lectrodynamiques), et dpend de la nature du support et de son conditionnement pralable (prsence de tubercules de corrosion, par exemple). Les bactries ne sont fixes que de manire rversible au support ; elles se dtachent facilement sous laction de contraintes hydrodynamiques imposes par le milieu. Cette phase est en gnral aspcifique et de courte dure (5 10 heures) (Gauthier et al., 1989). ladhsion ou fixation irrversible des bactries : cette tape est plus lente que la prcdente, lirrversibilit de ladhsion faisant appel au mtabolisme bactrien. En effet, la scrtion dexopolymres par les microorganismes leur permet de consolider leur adhsion au support, formant autour de la bactrie, une enveloppe, appele glycocalix. 1.1.3 Colonisation du support Dans des conditions favorables, lorsque les bactries sont fixes de manire irrversible au support, les cellules peuvent se multiplier, selon la quantit de matire organique biodgradable disponible, et le taux doxydant rsiduel. Il y a alors accroissement de la biomasse et production de mtabolites scrts par les bactries. Cette tape de croissance est divise en trois phases : - une phase dynamique de croissance, - une phase linaire de croissance, traduisant une volution taux constant et maximale du biofilm, - une phase de ralentissement, qui correspond un dbut dquilibre du biofilm entre le taux de multiplication et daccumulation des microorganismes et le taux de dtachement de matire. Ceci met en vidence linfluence des facteurs hydrodynamiques sur le dveloppement du biofilm.

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En plus de la multiplication des cellules constitutives du biofilm, la croissance de ce dernier peut galement tre attribue des cellules planctoniques venant se greffer sa surface. Les diffrentes tapes de la formation, puis de lvolution dun biofilm, sont prsentes sur la figure ci-dessous.

Figure 4 : Reprsentation schmatique de la formation et de la structure dun biofilm au sein dun rseau de distribution deau potable (Center for Biofilm Engineering, Universit du Montana).

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1.2 Organisation des biofilms au sein des systmes de distribution deau potable

1.2.1 Structure des biofilms La structure des biofilms prsents dans les rseaux de distribution deau potable est aujourdhui incertaine. En effet, les conditions daccs au biofilm, sans dtrioration de celuici, sont difficiles, dautant plus que la biomasse y est prsente en faible quantit. Cette difficult est renforce par la prsence de dbris, de produits de corrosion, de dpts minraux, de tubercules de corrosion, matriaux susceptibles doffrir de nouvelles niches ou surfaces coloniser. Les descripteurs couramment utiliss, tels que lpaisseur, la densit ou les dimensions fractales, sont obtenus partir de biofilms gnrs en laboratoire, et semblent donc plus ou moins inadapts la problmatique. Cependant, des analogies peuvent tre faites (Block et al, 2001): Le biofilm prsente une structure htrogne et discontinue, marquant une dispersion non uniforme des colonies la surface du matriau. Les agrgats qui se diffrencient au niveau des biofilms sont entours par des canaux qui peuvent occuper jusqu 50% de volume total du biofilm. Par ces canaux, circulent eau, nutriments, particules et protozoaires. Les biofilms sont constitus dun mlange de microorganismes dactivit variable en fonction de leur position dans lagrgat, et des caractristiques de celui-ci. Ainsi, lorsque les biofilms sont de faible paisseur (< 40 m), le transfert de nutriment et doxygne nest pas limit. De plus, les grandeurs traduisant lactivit de lensemble (, Ks, Y) ne semblent pas modifies par rapport aux bactries circulantes. Lorsque le biofilm est plus pais (>80 m), lactivit respiratoire est plus faible pour les couches les plus profondes. Laccumulation des biofilms la surface des matriaux se ralise dans des zones o la circulation de leau est freine par des frottements sur la paroi. Les transferts au travers de cette couche de diffrentes molcules (O2, oxydant, nutriment) sont limits par leur vitesse de diffusion, et une diffrenciation des mtabolismes peut tre observe (cf. figure 4). Ltat stationnaire des biofilms nest sans doute jamais atteint dans les rseaux de distribution rels, du fait des discontinuits frquentes dalimentation, et donc de la variation du rgime hydraulique du systme. Ceci peut galement tre attribu aux changements de la nature et des concentrations en nutriments et dsinfectants, lintroduction de nouveaux organismes. Au cours de leur vieillissement, les biofilms de rseau de distribution deau potable doivent subir une rorganisation constante, avec la formation de nouveaux microagrgats, de nouveaux canaux,

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1.2.2 Rpartition le long dun rseau de distribution La dynamique du biofilm sopre en fonction de la disponibilit en nutriments et de la capacit dadaptation des bactries. Ainsi, le long dun rseau de distribution deau potable, le degr de colonisation bactrienne nest pas uniforme et lensemble volue sous laction de deux paramtres principaux : le taux doxydant rsiduel, plus important en tte de rseau et au niveau des postes de rechloration, ne permet pas la non-implantation des biofilms, mais limite leur dveloppement. Cependant, sa consommation le long du rseau de distribution ne permet plus, par la suite, ce contrle. les lments nutritifs sont plutt consomms dans les premires parties du rseau. Aux extrmits, la mort des populations bactriennes s'accompagne d'un relargage des composs cellulaires en raison des conditions dfavorables leur survie. Ce flux de mortalit libre des composs qui servent alors de CODB aux autres organismes. Ainsi, en tte de rseau, pas ou peu de biomasses fixes sont observables, du fait dun taux de rsiduel doxydant lev (Mmento du gestionnaire de l'alimentation en eau potable, 1994). Le long du rseau, la consommation du chlore rsiduel saccompagne dune augmentation de la densit des microorganismes. Cependant, la prsence de microorganismes entrane une consommation du CODB de leau, ce qui explique une lgre diminution de labondance bactrienne lorsque les temps de rsidence augmentent ou lorsque lon atteint les fins de rseau.

1.3 Rgulation physique de la croissance des biofilms


Deux phnomnes de rgulation de lpaisseur du biofilm sont observs : - des phnomnes drosion, les pertes sont alors localises la surface du biofilm, - des phnomnes de dpouillement, marqus par des pertes entires de portion de biofilm. Des facteurs physiques tels que des facteurs hydrodynamiques (rgime turbulent sous leffet des variations rapides de vitesses deau, faces de cisaillement), mais galement sous des facteurs biologiques, telles que la lyse cellulaire, ou la formation de bulle de gaz (en condition anarobie) peuvent entraner un dsquilibre de la structure du biofilm et un dcrochement dune partie de celui-ci. Le transport des nutriments et de loxygne lintrieur du biofilm sont des facteurs importants du dcrochage du biofilm. Lexistence dun gradient de diffusion des nutriments est un facteur limitant pour la croissance du biofilm et oriente la composition du biofilm en terme de population bactrienne.

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2 Populations microbiennes des rseaux de distribution


Dans les rseaux de distribution deau potable, malgr les conditions difficiles au dveloppement bactrien (prsence dagent biocide circulant, milieu trs pauvre en nutriments), plusieurs groupes dorganismes vivants sont traditionnellement rencontrs au niveau des biofilms ou dans leau circulante : bactries htrotrophes, virus, protozoaires, levures, champignons et algues.

2.1 Bactries
Les systmes de distribution d'eau potable sont coloniss par des bactries htrotrophes, saprophytes, dont un grand nombre ne sont pas identifi. Une grande varit de ces bactries, allant des bactries potentiellement pathognes, aux coliformes et diffrents types de bactries aquatiques, a t isole partir des biofilms, dans des eaux ayant t chlores ou non. Ces types bactriens trouvent des conditions favorables et prolifrent dans ces systmes. Les densits bactriennes sont variables selon le type de biomasse considre. Ainsi, pour (Block et al., 1993 ; Servais et al., 1995 ; Sibille et al., 1997) : - biomasse circulante : de 5.103 106 cellules.ml-1 dont une fraction cultivable sur milieu glos variant de 0,0006 0,03% de la population totale, - biomasse fixe : de 3.106 2.107 cellules.cm-2, dont 6 9% cultivables sur glose aprs 15 jours, par rapport au nombre de total de cellules (comptage au microscope aprs coloration). Parmi les bactries dnombres, un grand nombre despces ont t identifies, aussi bien au niveau de la phase circulante, quau niveau du biofilm (cf. tableau I). Tableau I : Quelques espces bactriennes mises en vidence dans divers rseaux de distribution deau potable post-chlore (0,2 - 0,4 mg Cl2 libre) (LeChevallier et al., 1987 ; LeChevallier, 1990). Espces ou genres Dans leau distribue : Pseudomonas. vesicularis Pseudomonas Maltophilia Pseudomonas diminuta Pseudomonas paucimobilis - Flavobacterium sp. Acinetobacter sp. Moraxella sp. Arthrobacter sp. Micrococcus sp. Dans le biofilm : Pseudomonas vesicularis Pseudomonas cepacia Pseudomonas picketti Pseudomonas stutzeri Flavobacterium sp. Alcaligenes sp. Acinetobacter sp. Moraxella sp. Agrobacterium radiobacter Arthrobacter sp. Corynebacterium sp. Bacillus sp. Enterobacter agglomerans A ces bactries htrotrophes banales s'ajoutent des bactries d'origine fcale ou pathognes : Les coliformes Les bactries appartenant la famille des coliformes, utilises pour le contrle de la qualit de l'eau distribue, servent d'indicateur de contamination fcale. La prsence de telles
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bactries au niveau des rseaux de distribution d'eau peut entraner des risques de contamination du consommateur, par des microorganismes tropisme intestinal. Dans la plupart des eaux potables, leur frquence d'isolement est trs faible, l'objectif premier du traitement de potabilisation tant de les liminer. D'o, leur faible reprsentativit par rapport aux bactries htrotrophes banales. L'isolement sporadique de coliformes en priode chaude et en absence de tout pisode de contamination externe laisse supposer que ces germes sont capables de survivre dans les rseaux de distribution et de se multiplier au sein du biofilm. Les observations de coliformes sont gnralement associes de fortes concentrations en bactries (suprieures 5,2 log). La prsence de coliformes serait galement lie la temprature de l'eau distribue (suprieure 15C), sa teneur en matire organique biodgradable ( > 0,15 mg CODB.L-1; > 100 g COA.L-1), son pH, la prsence de tubercules de corrosion, et l'absence ou la prvalence de trs faibles concentrations en dsinfectants rsiduels tels que le chlore (LeChevallier et al.,1994 ; Martin et al., 1982 ; Volk et al., 1994). Plusieurs tudes (Fass et al., 1996) ont montr que l'introduction exprimentale d'Escherichia coli, dans le rseau de distribution se traduit par un lessivage lent des bactries introduites (cf. figure 5). Ds les premires heures, de 1 10% de la population introduite se fixent sur les surfaces des conduites. Durant cette priode initiale, la densit d'Escherichia coli est plus leve dans la phase eau que dans le biofilm. La multiplication des Escherichia coli survivants est observable, 7 8 jours aprs la contamination, sans toutefois obtenir une stabilisation de leur nombre. Aprs 10 jours, le biofilm contient environ 10 fois plus de Escherichia coli que la phase eau. Ce fait traduit une multiplication prfrentielle au niveau du biofilm. Malgr leur capacit se multiplier, la colonisation du rseau par Escherichia coli n'est que partielle et transitoire. Log UFC (eau ou biofilm)
Courbe de lessivage thorique

Eau
Biofilm

Limite de sensibilit

Temps (jours) Figure 5 : Comportement d'Escherichia coli introduit exprimentalement dans un rseau de distribution d'eau (injection unique de 1011 UFC t0; temprature : 20C). Les donnes sont exprimes comme le logarithme du nombre total d'UFC dans la phase eau (240 litres) ou la surface du biofilm (Fass et al., 1996).

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Les bactries pathognes Les germes pathognes vhiculs par l'eau sont essentiellement des bactries et virus, voire des parasites. Ils proviennent, pour la plupart, de djections humaines ou animales. Certains n'ont pas cette origine fcale et sont qualifis d'opportunistes, c'est--dire qu'ils sont naturellement prsents dans l'environnement et ne manifestent leur virulence que sur des personnes immunodprimes. L'exposition une eau du robinet contamine se produit essentiellement par ingestion. Le contact avec la peau ou l'inhalation (tout particulirement lors de douches) sont aussi des voies de pntration possibles. Dans les pays dvelopps, les progrs en matire d'hygine et de vaccinations ont considrablement fait rgresser les maladies d'origine hydrique ; la gnralisation de la distribution publique d'eau de qualit a contribu cette avance. Nanmoins, dans certaines communes (surtout de petite taille), la qualit de l'eau distribue n'est pas irrprochable et constitue encore un facteur de risque pour la sant. Parmi la flore bactrienne introduite dans les rseaux de distribution, des microorganismes pathognes ou potentiellement pathognes peuvent tre dtects sous forme de spores principalement, tels que Legionella, Yersinia enterocolitica, Staphylococcus aureus, Campylobacter jejuni, Vibrio cholera, Shigella sp., Helicobacter pylori, peuvent galement tre prsents au sein des rseaux de distribution. Les symptmes associs l'infection par ces pathognes correspondent le plus souvent des troubles gastro-intestinaux tels que des diarrhes, des crampes intestinales, des vomissements. De grandes fatigues peuvent galement tre ressenties. Cependant, la rsistance des biofilms la colonisation de bactries pathognes, non autochtones, ne permet pas leur implantation de faon durable au niveau du rseau de distribution, ces bactries pathognes se trouvant dans un environnement dfavorable, oligotrophe, et dj colonis par d'autres bactries. Remarque : Comme dans tout environnement oligotrophe, les bactries se dveloppant au sein des rseaux de distribution prsentent des adaptations morphologiques et physiologiques. Une de ces adaptations consiste en la miniaturisation des cellules, qui peut atteindre 50% du volume bactrien. Cette miniaturisation permet une augmentation du rapport surface-volume, et par consquent une augmentation de la capacit dobtention de substrat. De plus, lorsque les concentrations en nutriments sont faibles, la division cellulaire se ralise sans croissance cellulaire, entranant la formation de cellules miniatures.

2.2 Protozoaires
Des protozoaires ont t mis en vidence dans les rseaux de distribution deau potable, au niveau de la phase aqueuse, mais galement au niveau du biofilm (Amblard et al., 1996 ; Servais et al., 1995, Sibille et al., 1998) : - phase aqueuse : la concentration en protozoaires varie de 5.104 7.105 protozoaires.L-1, - dans le biofilm : 103 protozoaires.cm-2.

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Quatre groupes de protozoaires sont mis en vidence dans leau circulante : cilis, flagells, amibes nues et thcamoebiens. Au niveau du biofilm, dans un rseau aliment par une eau filtre sur CAG, seuls les thcamoebiens et les cilis ont pu tre observs. En revanche, aucun protozoaire na pu tre observ au niveau de biofilm dans des rseaux aliments par une eau nanofiltre. Cependant, le fait qu'ils n'aient pas t observs ne signifie pas leur absence. Un effort d'chantillonnage plus pouss permettrait peut-tre de les mettre en vidence. Les concentrations de protozoaires dans l'eau circulante et dans le biofilm, sont prsentes dans le tableau II, et les diffrentes espces dans le tableau III. Tableau II : Concentrations en protozoaires, observables au sein de rseau de distribution aliment par une eau filtre sur CAG (Sibille et al., 1998). Eau circulante Flagells Cilis Amibes nues Thcamoebiens 2.104 2.105 par litre 7.102 3.103 par litre 102 2.103 par litre 103 3.103 par litre Biofilm Non dtects 3.102 8.102 par cm2 Non dtects 5.102 6.102 par cm2

Tableau III : liste de genres et espces de protozoaires rencontrs dans diffrents rseaux franais de distribution deau potable (Sibille, 1998). Espces ou genres Flagells Cilis Amibes nues Thcamoebien Monas - Bodo sp. Entosiphon sulcatum, dinoflagells Chilodonella Colpidium campilum, scuticocilis Hartmanella vermiformis Vannella mira - Cochliopodium minutum Naegleria sp. - Vahlkampfia Acanthamoeba Centropyxis Trinema lineara, Euglipha

Dans les rseaux de distribution, certains protozoaires peuvent jouer le rle de rservoirs de bactries potentiellement pathognes, en dveloppant des relations endosymbiotiques ou parasitaires. Lhte protge alors involontairement les bactries et leur permet de survivre au traitement de potabilisation et de se multiplier. Ainsi, Lgionella sp. peut tre lhte de Hartmanella ou Naegleria (amibes), Mycobactrium avium et Pseudomonas Aeruginosa, de Acanthomoeba sp. (amibes nues) (Brown et al., 1999). La rsistance des protozoaires est lie la formation de kystes, qui leur permet de rsister des conditions environnementales dfavorables, telles que des milieux oligotrophes, en prsence d'un dsinfectant rsiduel.
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Ces kystes de protozoaires peuvent tre pathognes, et certains dentre eux ont t mis en vidence au sein de rseau de distribution : des kystes de Giardia lamblia, de faibles concentrations variant de 1 167 kystes par 100 litres (DeLeon et al., 1993 ; LeChevallier et al., 1991 ; Rose et al., 1991). Giardia lamblia est l'agent infectieux responsable de la giardiase ou lambliase, infection asymptomatique dans la majorit des cas, mais provoquant parfois l'apparition subite de diarrhes intermittentes, accompagnes de crampes abdominales, de ballonnements, d'une fatigue et d'une perte de poids. La giardiase peut tre contracte en avalant un nombre relativement peu lev de spores de Giardia (de 10 100). Les personnes qui boivent de leau non traite sont les plus exposes au protozoaire Giardia. des kystes de Cryptosporidium parvum, des concentrations variant de 0,5 2 kystes par 100 litres (DeLeon et al., 1993 ; LeChevallier et al., 1991 ; Rose et al., 1991). Cryptosporidium est l'agent infectieux responsable de la Cryptosporidiase, dont les symptmes, qui apparaissent de 2 10 jours aprs la consommation deau contamine, sont des diarrhes aigus, des vomissements, des crampes abdominales et de la fivre. Cette maladie peut tre mortelle pour les personnes immunodprimes, notamment les personnes atteintes du SIDA. Remarque : La situation en matire de pathologie induite par la consommation d'eau est extrmement contraste selon les pays. En effet la transmission de maladies infectieuses par la voie hydrique a t matrise dans la plupart des pays industrialiss par la mise en place d'installations de traitement et d'un contrle sanitaire s'appuyant sur une rglementation abondante. A l'oppos la situation des pays en voie de dveloppement reste souvent trs mauvaise.

2.3 Autres microorganismes


En plus des bactries et protozoaires, dautres microorganismes peuvent tre observs : les algues : observes au niveau des sdiments recueillis dans des rservoirs, ainsi que dans leau circulante, 65 espces algales ont t identifies (cf. tableau IV), avec une densit moyenne de 13,6.103 cellules.L-1 (Amblard et al., 1996). Cependant, lchelle du pilote ou du rseau rel, leur observation reste difficile (mois de 0,2 unit.mL-1). De plus, la prsence dalgues semble tre caractrise par une forte variation saisonnire dans certaines eaux superficielles, et parviennent franchir parfois les filires de traitement notamment lorsque que la charge de la ressource est trs leve (printemps et automne, lors des blooms algaux). Les champignons : caractriss par des spores abondantes et des membranes de cellules paisses, ils peuvent rsister aux traitements de potabilisation de leau. Leur concentration au sein des rseaux de distribution varie de 10 1000 units.L-1 (Kelley et al., 1997 ; Rosenzweig et al., 1986), et diffrents genres ont t observs (cf. tableau IV). Les levures : mises en vidence dans les rseaux de distribution, les levures peuvent y tre prsentes des concentrations variant de 1 50 levures.L-1 (Capellier et al., 1992). Le genre le plus reprsent est le genre Candida, avec des espces telles que C. famata, C. membranaefaciens
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Tableau IV : Liste de genres dalgues et champignons dnombrs dans diffrents rseaux de distribution deau potable (Sibille, 1998). Algues Champignons Genres Euchlorophyces, Zygophyces, Dinophyces, Euglenophyces, Chrysophyces, Diatomophyces Penicillium, Aspergillus, Acnemonium, Alternaria, Botrytis, Clasdosporidium, Fusarium, Phoma, Trichoderma, Rhizopus, Mucar

2.4 Les macroinvertbrs


Les microcrustacs : considrs comme non-dangereux, ils sont suspects de fournir une protection contre la dsinfection pour les bactries dans leur tube digestif. Ils peuvent atteindre une longueur de plusieurs centimtres. Citons Asellus aquaticus et Gammarus pulex. Une tude dorganismes planctoniques la sortie des stations de la Socit des Eaux de Marseille a galement recens les crustacs suivants Daphnia, Bosmina, Coppoda, Ostracoda. Les mollusques et les insectes : Peuvent tre prsents sous forme de larves ou dufs (cas de chironomes pour les insectes) si elles franchissent les matriaux filtrants dans les filires de traitement. Bien quelles ne trouvent pas un milieu favorable leur dveloppement dans les rseaux, il est ncessaire de les rduire au maximum pour limiter lapport de matire organique au rseau.

3 Formation de chane trophique


Le dveloppement de communauts bactriennes dans les systmes de distribution, conduit la formation de chane alimentaire qui comprend le dveloppement et la croissance de macroorganismes souvent incompatibles avec les exigences de qualit de l'eau potable.

3.1 Relation proies-prdateurs


Le mcanisme dlaboration de la chane alimentaire : leau introduite dans le rseau nest pas strile ; bactries, larves peuvent passer travers la chane de traitement ne serait-ce qu ltat larvaire, ainsi que de la matire organique. La matire organique dissoute est utilise par les bactries prsentes dans les rseaux et sert ainsi de nutriments. Dans les zones o le chlore est relativement inactif ou en trop faible dose, le CODB peut tre utilis par les bactries qui se multiplient (surtout quant la temprature est suprieure 10-15C). les bactries peuvent alors sdimenter puis se fixer sur la paroi interne des canalisations. La formation de colonies sous forme darbuscule constitue une forme de protection contre laction du chlore et la croissance.

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cette biomasse fixe constitue la base de nutrition pour les unicellulaires (protozoaires, amibes) ou crustacs (Aselles), qui broutent les dpts divers dalgues, de composs organiques, de biomasse, et contribuent ainsi la diminution du nombre de bactries. La figure ci-dessous prsente un type de chane alimentaire mis en vidence au niveau dun rseau. Les diffrents composants de la chane sont prsents : nutriments, proies, prdateurs.

Elments introduits dans le rseau avec leau distribue Fe2+ NH4+ MO dissoutes MO particulaire bactries Algues planctoniques Cadavres dalgues et danimaux

Germes bactriens correspondants

Fe2+

ferrobactries Phnomne de corrosion

Bactries nitrifiantes

Bactries htrotrophes

Microinvertbrs filtreurs et phytophages

Microinvertbrs dtritiphages

Microinvertbrs prdateurs (protocarnivores)

Microinvertbrs carnivores

Figure 6 : Schma de la chane alimentaire des rseaux de distribution, (daprs Mouchet et al., 1992). La dtection systmatique de biomasse bactrienne et de protozoaires dans les rseaux de distribution deau potable montre la maintenance dun cosystme microbien bien diversifi, qui reste stable mme quand des dsinfectants sont utiliss.

3.2 Rgulation biologique de la croissance du biofilm


La formation de chane alimentaire au sein des rseaux de distribution, prsentes cidessus, induit la consommation des biomasses bactriennes fixes ou non, dont les principaux consommateurs sont les protozoaires. En effet, ces derniers prsentent une activit bactrivore de "broutage" des bactries fixes ou circulantes. Cependant lintensit de ce broutage na pas encore t quantifie. Les preuves de cette activit sont principalement indirectes. Tout d'abord, des dnombrements sur rseau ont montr une concomitance des augmentations des bactries et des protozoaires. De plus, dans les rseaux o la concentration bactrienne est infrieure 107 cellules.L-1, les protozoaires dnombrs sont en faible quantit. Il existerait
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donc une densit bactrienne "minimale", permettant le maintien puis le dveloppement des protozoaires. Limportance des protozoaires dans la rgulation de la croissance des microorganismes au sein des systmes de distribution deau potable a galement t dmontre, de faon indirecte, par l'tude de lvolution de la quantit de bactries Escherischia coli, introduites artificiellement au sein de rseaux aliments par des eaux ayant subi des traitements de potabilisation diffrents : une eau filtre sur charbon actif, et une eau nanofiltre (Sibille et al., 1998). Les rsultats de cette tude sont prsents au niveau de la figure 7.
Eau GAC Eau nanofiltre

E. coli (UFC (eau + biofilm)

Courbe de lessivage thorique

Injection d'E. coli

Temps de sjour

Figure 7 : densit d'E. coli dans des rseaux aliments par une eau filtre sur CAG et une eau nanofiltre (Sibille et al., 1998). La courbe de lessivage reprsente le lessivage thorique de E.coli induit par la seule hydraulique du rseau. Si la courbe thorique de lessivage et la courbe exprimentale sont superposes, seul le phnomne de dilution influence la concentration en coliformes dans le rseau. Pour le rseau aliment par l'eau nanofiltre, la courbe exprimentale de lessivage des E. coli prsente une pente plus faible que la courbe thorique, ce qui indique une adaptation voire une multiplication des coliformes dans le rseau. Par contre, dans le cas du rseau aliment par une eau filtre sur CAG, la pente de la droite de lessivage exprimentale est plus importante que la droite thorique, ce qui indique qu'un phnomne, autre que l'hydraulique du rseau, entrane le lessivage des coliformes. Donc, d'aprs la figure 7, E. coli est limine plus rapidement dans le rseau aliment par l'eau filtre sur CAG que dans celui aliment par de l'eau nanofiltre. Ces rsultats peuvent tre expliqus par le fait que le procd de nanofiltration, dont la taille des pores est de l'ordre de 10 nm, ne permet pas le passage des protozoaires dans le rseau. Au contraire, l'eau filtre sur CAG, permettrait l'tablissement d'une chane trophique plus importante, d'un cosystme plus vari. Les protozoaires peuvent alors brouter les bactries, parmi lesquelles E. coli. L'activit bactrivore des protozoaires peut alors contribuer au contrle des populations bactriennes fixes.
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Les protozoaires ne doivent donc plus seulement tre considrs comme des rservoirs de pathognes potentiels (accumulation de microorganismes au niveau de leur tractus digestif), mais galement comme des prdateurs, permettant llimination de microorganismes en grande proportion, quils soient introduits ou produits dans le systme de distribution deau potable.

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FACTEURS CONTROLANT LA REVIVISCENCE B A C TERI ENNE

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Facteurs contrlant la reviviscence bactrienne

FACTEURS CONTROLANT LA REVIVISCENCE BACTERIENNE


La reviviscence bactrienne au sein des rseaux de distribution deau potable est le rsultat de l'interaction de diffrents facteurs tels que : - la nature des matriaux des conduites dadduction, - la temprature, - les nutriments, prsents au sein du rseau, - le taux doxydant rsiduel.

1 Nature des matriaux de canalisations


Dune manire gnrale, le choix dun matriau est fonction de la nature du terrain, des cots de fourniture et de mise en uvre, de la facilit raliser les raccordements, les rparations, De nombreux types de tuyaux sont disponibles pour raliser une conduite dadduction deau potable. Ils sont classs en fonction du type de matriaux avec lesquels ils sont fabriqus : - les matriaux mtalliques : fonte grise ou ductile, acier, bton, - les matriaux organiques : PVC, polythylne haute et basse densit. Cependant, dautres critres doivent tre pris en compte. En effet, les interactions entre leau et les matriaux constitutifs des systmes de distribution deau potable sont lorigine de la dgradation de la qualit de leau. Ainsi les diffrents matriaux utiliss pour les conduites deau potable, influencent le dveloppement de biofilms de diverses faons : - la rugosit du matriau, qui offre une grande surface de contact avec leau ; celle-ci favorise alors ladhsion des microorganismes sur les parois des conduites, - le matriau relargue dans leau des lments qui peuvent tre mtaboliss par les bactries htrotrophes prsentes au niveau des biofilms : matire organique dans le cas des matriaux organiques, ions mtalliques, dans le cas des matriaux corrodables, et ainsi favoriser leur dveloppement, - la stabilit du matriau : les tubercules de corrosion de certains matriaux peuvent constituer des sites prfrentiellement coloniss par les bactries.

1.1 Les matriaux mtalliques


Les matriaux mtalliques (ou inorganiques) microorganismes deux niveaux distincts : influencent le dveloppement des

La corrosion des matriaux mtalliques peut entraner, selon la qualit de l'eau (eau agressive), la formation de tubercules de corrosion. Ces derniers constituent des niches o les microorganismes peuvent se dvelopper. En effet, ces tubercules prsentent une grande
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Facteurs contrlant la reviviscence bactrienne

surface de contact avec la phase aqueuse et permettent ainsi un pigeage plus important de la matire organique circulante, tout en offrant une protection contre la diffusion du dsinfectant rsiduel. La prsence de ces tubercules conditionne l'efficacit de l'adhsion des bactries pionnires. la corrosion de ces matriaux par les eaux agressives, ou moyennement faiblement minralises, conduit l'mission dions mtalliques dans leau. Ces ions mtalliques peuvent alors tre utiliss par des bactries dont le mtabolisme est dpendant. Ces bactries se dveloppent et colonisent les parties du rseau qui se corrodent. Elles peuvent alors accentuer les phnomnes de corrosion. Les termes de biocorrosion ou de MIC (Microbially Influenced Corrosion) sont alors employs. En effet, la croissance bactrienne dans un rseau de distribution contribue la corrosion en fournissant un milieu propice aux ractions corrosives. Les mcanismes impliqus dans les phnomnes de corrosion sont souvent une combinaison complexe de procds physiques, chimiques, mais galement biologiques. Ainsi, plusieurs types bactriens peuvent tre responsables de biocorrosion : Les ferrobactries : les ferrobactries tirent lnergie ncessaire leur synthse, de l'oxydation des sels ferreux (FeII) en sels ferriques (FeIII). Or, dans les canalisations base de mtaux ferreux, la formation dun biofilm en un point non protg ou altr de la surface, entrane la formation dhydroxyde ferreux. La prsence de ferrobactries au point dattaque entrane la mobilisation des ions ferreux et leur transformation en ions ferriques. Ceci a pour consquence, la formation damas de rouille, renfermant les corps bactriens, suivie dune dissolution du mtal.

Les bactries sulfatorductrices : anarobies strictes, ces bactries sont prsentes au niveau de la sous-couche du biofilm, en contact avec le mtal. La rduction des sulfates entrane la formation dhydrogne sulfur qui se combine avec les sels ferreux pour donner du sulfure de fer.

Les sulfobactries : arobies, ces bactries mtabolisent le soufre partir de composs rduits et le rejettent dans le milieu ambiant ou lemmagasinent dans leurs cellules. Ceci entrane la formation de boues. Les sulfobactries peuvent galement oxyder le soufre et former des produits acides (H2SO4) et ainsi provoquer une acidification corrosive avec modification importante du pH du milieu.

Dans ce cas, les matriaux utiliss pour l'adduction de l'eau peuvent constituer une source de nutriments ou de facteurs de croissance. Dans le cas de ces mtaux corrodables, la prsence de produits de corrosion des matriaux ferreux amplifie l'activit et la production de biomasse. Ainsi, la production bactrienne peut tre jusqu' dix fois plus importante sur un matriau corrodable que sur un autre matriau (cf. figure 8).

1.2 Les matriaux organiques


Les matriaux organiques sont, pour certains, permables des produits organiques tels que des solvants ou des hydrocarbures, qui entranent une contamination de leau. En plus, de ce risque de contamination chimique, ces contaminants organiques peuvent constituer, selon leur biodgradabilit, des nutriments pour la flore bactrienne.
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Facteurs contrlant la reviviscence bactrienne

Des nutriments peuvent galement provenir du relargage de composs existant dans la structure mme du matriau, dadjuvants introduits au niveau du matriau (souvent de nature organique) ou provenant dimpurets prsentes dans les composants de base. Ces nutriments peuvent alors selon leur biodgradabilit constituer une source nutritive pour la biomasse fixe et favoriser le dveloppement des biofilms (cf. tableau V).
3,5 3 2,5

Cellule/ml (.106)

2 1,5 1 0,5 0

Figure 8 : Production bactrienne en millions de cellules par millilitre (TRH = 24 heures, temprature = 25C) (adapt de Appenzeller et al., 2001)

Acier inoxydable

Fonte corrode

___________________________________________________________________________ Cependant, ces relargages restent limits dans le temps. Ainsi, pour le PVC, le taux de COA relargu entre la premire semaine de mise en service et le premier mois d'utilisation, est divis par 20. D'o une influence limite des matriaux inorganiques sur la reviviscence bactrienne. Toutefois, des tudes plus pousses sur le PVC plastifi permettraient d'apprcier son comportement plus long terme. Tableau V : Relargage de carbone assimilable pour diffrents matriaux organiques et incidence sur la croissance bactrienne (Hasley et al., 1993) Matriaux PE PVC PVC plastifi Silicone 1re semaine Croissance COA bactrienne (g de C/cm2/j) (104 UFC/cm2/j) 0,045 18 ,5 0,225 92,5 0,95 360 0,465 192 Aprs 1 mois Croissance COA bactrienne (g de C/cm2/j) (104 UFC/cm2/j) 0,007 2,65 0,012 5,3 0,95 390 0,02 1,5

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Les matriaux utiliss pour le transport de l'eau potable, qu'ils soient synthtiques ou non, sont potentiellement gnrateurs d'un dveloppement bactrien du fait de leur composition complexe : composs de base (polymre organique, matire minrale), adjuvants ncessaires la stabilit des matriaux En plus de leur contribution la croissance bactrienne, ils peuvent tre l'origine de saveurs, de couleur ou de turbidit.

2 La temprature
La temprature des eaux varie de plusieurs degrs pendant le transit en rseau. Les variations saisonnires de temprature affectent les eaux, surtout quand elles sont dorigine superficielle. En plus de favoriser le dveloppement de gots et odeurs dsagrables, une temprature leve acclre la plupart des ractions physico-chimiques et biologiques dans les rseaux et influence la croissance bactrienne (Documentation technique FNDAE, n12). Sur certains rseaux, en climat tempr, le nombre de coliformes dans des rseaux de distribution varie de faon saisonnire, les plus hauts niveaux tant observs durant les mois dt. Lactivit bactrienne saccrot nettement lorsque la temprature dpasse 15C. Les services des eaux peuvent difficilement agir sur la temprature de leau. Les efforts doivent donc se porter sur dautres paramtres qui voluent en fonction de la temprature. Lajustement de la concentration de dsinfectant rsiduel se fera, par exemple, en consquence.

3 Les nutriments
Un des facteurs cls qui dtermine la reviviscence bactrienne dans les rseaux de distribution deau potable est la biodisponibilit des nutriments. En effet, la prsence de matire organique peut promouvoir la reviviscence bactrienne et ainsi conduire la dtrioration de la qualit de leau. Les substrats organiques en eau potable sont les premiers facteurs de la reviviscence des bactries htrotrophes dans les systmes de distribution.

3.1 Les nutriments carbons


Source nutritive essentielle pour la prolifration bactrienne, le contenu en lments organiques carbons est aujourdhui considr comme un facteur primordial dans la matrise de la qualit microbiologique de leau dans le rseau, une consommation de la matire organique saccompagne dun accroissement de la densit bactrienne prsente au niveau du biofilm, tout comme dans leau circulante. 3.1.1 Composition de la matire organique des eaux de distribution La matire organique prsente dans leau potable, est constitue dune fraction particulaire et dune fraction dissoute. Cette dernire est compose : - des molcules organiques provenant de la dcomposition dorganismes morts et/ou de vgtaux, - de microorganismes, comme les bactries, constitus de polymres organiques. La matire organique peut tre divise en deux groupes (Sibille, 1998) :
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les substances humiques, gnralement rfractaires la biodgradation Les substances non-humiques, reprsentes, pour la moiti, par des acides hydrophiles. Mal caractrises, elles seraient composes de sucres, dacides aromatiques simples et polymriss, et d'acides amins totaux libres ou combins. Ces derniers prsentent une forte biodgradabilit. Ils sont donc facilement assimilables, aprs hydrolyse, par les organismes.

3.1.2 Caractre de biodgradabilit de la matire organique Le terme de biodgradabilit reprsente les proprits de certaines molcules tre mtabolises en lments plus simples, notamment par les microorganismes. Les mesures de carbone organique dissous biodgradable (CODB) et de carbone organique assimilable (COA) permettent de savoir si une eau peut favoriser le dveloppement de microorganismes (Sibille, 1998) : Le carbone organique dissous biodgradable (CODB) reprsente la fraction de carbone organique dissous (COD) qui est la fois minralise et assimile par les bactries htrotrophes. Il est dtermin par diffrence entre la concentration initiale en COD et la concentration minimale en COD observe pendant une priode d'incubation de 28 jours (Joret et al., 1986 ; Servais et al., 1987). Le CDOB reprsente de 10 30% du CODB contenu dans l'eau potable (Joret et al., 1991). La stabilit biologique est associe une non-consommation du CODB au cours de la distribution.

Le COA reprsente la fraction de carbone organique total (0,1 0,9%) facilement assimilable par les bactries et convertie en biomasse cellulaire (Van der Kooij, 1990). La mthode de mesure du COA utilise Pseudomonas fluorescens et Spirillum, bactries indignes des rseaux de distribution. La concentration en COA est calcule par comparaison du nombre de cellules incubes dans un milieu contenant des composs organiques des concentrations standard (actate) et le nombre de cellules incubes dans les chantillons d'eau potable (Van der Kooij, 1982 ; Kaplan et al., 1993). Le taux moyen de CODB et de COA, dans leau potable, dpend de la source dalimentation. Ainsi, leau potable produite partir deau de surface prsente un taux de CODB et COA plus important que leau produite partir deau souterraine. Des tudes ralises sur lutilisation microbienne de la matire organique dissoute ont permis de distinguer deux pools de composs organiques : - un pool qualifi de labile (20% du COD) qui prsente une vitesse dlimination rapide, de lordre de lheure ou du jour ; il serait principalement compos de sucre, d'acides amins, de protines ou de molcules de faible masse molculaire apparente (Matsumoto, 1983 ; Meyer et al., 1987). - un pool rfractaire la biodgradation (Meyer et al., 1987), dont llimination est plus lente (de lordre de la semaine, du mois, ou plus). Les composs formant ce pool sont assimils aux substances humiques. Seule une faible fraction de ces composs influerait sur le dveloppement des microorganismes en rseau.

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3.1.3 Reviviscence microbienne La prsence de matire organique peut favoriser la reviviscence bactrienne et ainsi induire la dtrioration de la qualit de leau potable. Les substrats organiques en eau potable constituent le premier facteur de la reviviscence des bactries htrotrophes dans les rseaux de distribution. En effet, la croissance bactrienne en rseau se ralise au dtriment de la matire organique dissoute (cf. figure 9).
abondance bactrienne (106/l) 120 100 80 60 0,6 0,4 0,2 0 sortie usine 0 - 5 heures 5 - 10 heures 10 - 20 heures 20 - 40 heures 40 20 0

COD et CODB (mg/l) 1,4 1,2 1 0,8

Temps de rsidence

Figure 9 : Fluctuations des concentrations en COD et CODB (en orange sur la figure), et des abondances en bactries en suspension (dnombrement par pifluorescence), en fonction du temps de rsidence hydraulique dans un rseau de distribution deau potable de la ville de Toulouse (France) (Servais et al., 1995) Cela se traduit par une relation linaire : plus la concentration en CODB augmente, plus le nombre de bactries libres et fixes augmente (cf. figure ci-dessous).

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Figure 10 : Relation entre la teneur en CODB (mg C.L-1) et les cellules bactriennes fixes (log cellules.cm-2) ou planctoniques (log cellules.mL-1) (Mathieu et al., 1992). Cette corrlation a galement t mise en vidence entre la concentration en COA et la densit de bactries htrotrophes dans les rseaux de distribution (Van der Kooij, 1982 ; LeChevallier et al., 1987). Plusieurs mesures de potentiel nutritif carbon ont t effectues, afin de dterminer des valeurs guides indicatives pour assurer une croissance bactrienne limite dans le rseau. Les valeurs minimales thoriques de nutriments, communment admises, pour limiter le dveloppement dun biofilm sont prsentes dans le tableau VI. A titre de comparaison, les eaux traites contiennent de 1 5 mg.L-1 de COD, dont 30% sont biodgradables. Cependant, pratiquement, des concentrations aussi faible que 100 g.L-1 ou 40 g.L-1 peuvent permettre la croissance cellulaire. Tableau VI : Valeurs guides indicatives pour minimiser le potentiel nutritif (Levi, 1995) Paramtres Valeur guide estime COA CODB pour biofilm CODB pour bactries en suspension < 10 g.L-1 < 0,2 mg.L-1 < 0,16 mg.L-1

3.2 Autres nutriments


Des facteurs, autres que la biodisponibilit du carbone, affectent la croissance bactrienne dans les eaux potables, le ratio molaire du carbone, de lazote et de phosphore ncessaire pour la croissance bactrienne tant denviron 100C/10N/1P. Ainsi, laddition de phosphore leau potable augmente fortement la croissance des bactries htrotrophes pour les eaux produites partir deau superficielle ou souterraine (Chandy et
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al., 2001). Le phosphore (sous forme de phosphate) peut donc galement tre considr comme un facteur limitant. Cependant, alors que le phosphore est limitant des concentrations infrieures 2g.L-1 pour la croissance bactrienne en phase aqueuse, ce nest pas le cas pour les biofilms o un turnover du phosphore semble avoir lieu, depuis les cellules lyses ou depuis une accumulation de phosphore au sein de la matrice du biofilm. Laddition dautres nutriments tels que lazote, le potassium, le magnsium et le calcium ont des effets ngligeables sur la croissance bactrienne. La croissance bactrienne est la somme de plusieurs facteurs tels que la concentration en diffrents nutriments et en agents oxydants. Si plusieurs tudes ont montr que la matire organique contribue au maintien dans le rseau dune population bactrienne vivante et stable, mme en prsence de chlore, il reste trs dlicat de faire une prvision des numrations de bactries sur cette seule indication. Le dsinfectant rsiduel, ltat du rseau et dautres conditions environnementales sont aussi des facteurs tout aussi dterminants.

4 La dsinfection
4.1 Principe
La dsinfection est ltape ultime de la filire de traitement de leau destine la consommation humaine. Son but est llimination des germes pathognes, des virus, de la majeure partie des germes banals, dans un souci de respect des normes de potabilit de l'eau. La dsinfection des eaux comporte deux critres importants, correspondant deux effets diffrents dun dsinfectant donn : un effet bactricide, qui correspond la capacit dtruire les germes en une tape donne du traitement, un effet rmanent, qui correspond au maintien du dsinfectant dans le rseau de distribution. La rmanence dun oxydant au sein du systme de distribution permet de garantir la qualit bactriologique de leau au cours de la distribution. Il sagit la fois dun effet bactriostatique contre les reviviscences bactriennes en rseau et dun effet bactricide contre des pollutions faibles et ponctuelles survenant sur le rseau. Ces deux effets doivent tre pris en compte pour assurer la stabilit biologique le long du rseau. Leffet rmanent de loxydant slectionne les dsinfectants pouvant tre utiliss en dsinfection finale. Seuls le chlore, le dioxyde de chlore et les monochloramines prsentent un effet rmanent et permettent ainsi dassurer un rsiduel de dsinfectant en rseau, le traitement par l'ozone et l'irradiation UV ne prsentant qu'un effet bactricide.

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4.2 La demande en dsinfectant


La raction de l'oxydant au sein du rseau de distribution entrane la diminution de sa concentration rsiduelle. Cette consommation dpend de diffrents facteurs : la temprature, la concentration en dsinfectant, le temps de rsidence hydraulique, le rgime hydraulique rgnant dans le rseau, le diamtre des canalisations. Le chlore ragit galement avec la matire organique prsentes dans la phase aqueuse, avec la surface des conduites, et les dpts prsents sur les parois des conduites (Parent et al., 1996) : - raction au niveau de la phase aqueuse, avec la matire organique contenue dans l'eau ; la raction dpend alors de la concentration en dsinfectant et de celle en matire organique, - raction la surface des conduites, avec les matriaux constitutifs des conduites, qui dpend du rapport surface/volume et de la concentration en chlore, - raction avec le biofilm, qui dpend du nombre de sites actifs de celui-ci, de la consommation de chlore, de la concentration en chlore, ainsi que de sa surface spcifique. D'o un maintien de rsiduel de dsinfectant en rseau de distribution difficile assurer.

4.3 Oxydants utiliss en dsinfection de l'eau potable


Afin dvaluer la performance de la dsinfection, trois groupes dorganismes cibles sont tests. Il sagit des virus entriques, des kystes de Giardia et des oocystes de Cryptosporidium. Le choix de ces organismes repose sur les constats suivants : ils sont dtects couramment dans les eaux de surface des lacs et des rivires et parfois mme dans les eaux souterraines, ils ont t lorigine dpidmies confirmes, certaines touchant des dizaines de milliers dindividus, ils offrent une grande rsistance la dsinfection. Leur limination permet donc de supposer quil en va de mme pour tous les autres micro-organismes pathognes moins rsistants. Lvaluation de lefficacit de la dsinfection repose sur le concept de CT, lequel prcise que linactivation dun micro-organisme donn est proportionnelle au produit du temps de contact effectif et de la concentration rsiduelle de dsinfectant mesure la sortie du rservoir. Le tableau VII prsente les CT requis pour l'inactivation des organismes cits ci-dessus. Cinq choix sont possibles pour amliorer l'efficacit de la dsinfection : - augmenter la concentration de dsinfectant rsiduel la sortie des bassins de contact, - augmenter le temps de contact dans les bassins en augmentant le volume et, par consquent, le temps de contact dans les bassins, - changer de type de dsinfectant puisque certains dsinfectants, ont une efficacit relative plus importante, 31

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- changer les conditions dapplication du dsinfectant (pH et temprature de leau) afin de travailler dans les meilleures conditions possibles defficacit du dsinfectant utilis. Tableau VII : Liste des CT (mg.min.L-1) requis, selon le type d'oxydant, pour l'inactivation d'un organisme cible (Source : USEPA, 1999). Dsinfectant Chlore1 Monochloramines2 Dioxyde de chlore3
1

Virus 2 log d'inactivation 3 643 4,2

Giardia 2 log d'inactivation 69 1 230 15

Cryptosporidium 7 200 (2 log) Les monochloramines ne sont pas efficaces pour inactiver Cryptosporidium 249 (1 log)

0,95 9,9 (1 log) Ozone 0,5 Valeurs obtenues 10C, pour une gamme de pH de 6 9, et un chlore libre rsiduel de 0,2 0,5 mg.L-1. 2 Valeurs obtenues 10C, pour une gamme de pH de 8. 3 Valeurs obtenues 10C, pour une gamme de pH de 6 9.

4.3.1 Irradiation UV L'effet bactricide des rayonnements UV est provoqu par le peroxyde d'hydrogne ou les radicaux d'oxygne produits par les ractions photochimiques pendant l'irradiation des substances prsentes dans l'eau. L'avantage de l'irradiation UV est qu'elle n'entrane pas la formation de sous-produits de dsinfection ou de rsidus. Leffet germicide optimum correspond au spectre dUV allant de 245 285 nm. D'une manire gnrale, une dose comprise entre 20 et 25 mW.s.cm-2 semblerait suffisante pour obtenir une dsinfection efficace du point de vue de la potabilisation (cf. tableau VIII). Tableau VIII : Dose ncessaire pour l'inhibition d'organismes cibles par irradiation UV. Dose pour l'inactivation Organismes cibles des organismes cibles (mJ.cm-2) 2 log 3 log Cryptosporidium Giardia Virus Non dtermin 30-40 21 20-30 Non dtermin 36

(Source : Guide de conception des installations d'eau potable, 2001) Cependant les rayons UV se dissipent rapidement dans leau pour tre absorbs ou rflchis par les substances qui sy trouvent. Comme l'ozone, ils ne prsentent pas d'effet rmanent, ce qui implique un emploi rserv la dsinfection d'eau dont le rseau est court et bien entretenu. Dans d'autre cas, il est ncessaire de complter la dsinfection par injection d'un dsinfectant (chlore, dioxyde de chlore ou chloramines) ce qui rduit considrablement leurs avantages en tant que bons agents bactricides.
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De plus, la dsinfection par l'irradiation UV (galement comme l'ozone) est un procd oxydatif qui augmente la formation de carbone organique dissous facilement biodgradable dans l'eau. En effet, l'utilisation de l'ozone et des radiations UV sur des eaux contenant des molcules organiques complexes conduit la production de substances organiques de plus faibles masses molaires, donc plus facilement biodgradables et pouvant promouvoir la formation de biofilm dans les rseaux de distribution. 4.3.2 Chlore Le chlore est un dsinfectant trs efficace pour l'inactivation des bactries et notamment des bactries pathognes telles que E. coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella tiphi et Shigella dysenteriae. Cependant, il prsente une pntration limite dans le biofilm et le maintien dun rsiduel de chlore appropri un effet limit sur la croissance bactrienne. De plus, il prsente une efficacit limite pour l'inactivation des protozoaires. Ainsi, des CT de 30 3 600 mg.min.L-1 de chlore ne permet qu'une inactivation de 40% (0,2 log) des Cryptosporidium (Finch et al., 1994). L'utilisation du chlore a donc peu d'impact sur la viabilit de Cryptosporidium, aux doses habituellement appliques en traitement de dsinfection. De plus, la raction du chlore avec les composs organiques conduit la formation de sousproduits, les trihalomthanes (THM), supposs tre cancrognes. 4.3.3 Monochloramines Lutilisation de monochloramines prsente plusieurs avantages par rapport au chlore. Elles ne ragissent pas autant que le chlore avec la matire organique telle que les sucres et les polysaccharides extracellulaires, mais ragissent plus spcifiquement avec les acides nucliques, tryptophane et acides amins soufrs. Les monochloramines prsentent donc une meilleure rmanence dans les rseaux de distribution. De plus, comme les monochloramines sont moins ractives, la formation de sousproduits est amoindrie. Cependant, un inconvnient des monochloramines est quelles ncessitent des CT plus longs ou des concentrations plus importantes pour obtenir des rsultats similaires ceux obtenus avec le chlore. Ainsi, une concentration de monochloramines de 0,3 mg.L-1 ncessite 240 minutes de temps de contact pour 3 log d'inactivation d'E. coli, contre 0,14 mg.L-1 de chlore libre pendant 5 minutes pour obtenir le mme niveau d'inactivation, temprature et pH gaux (Wattie et al., 1944). La mme observation est faite pour l'inactivation des virus (Kelley et al., 1960) et des protozoaires (Stringer et al., 1970). 4.3.4 Dioxyde de chlore Le dioxyde de chlore est un oxydant et un dsinfectant puissant, efficace pour l'inactivation des bactries, virus et protozoaires pathognes. Cependant les mcanismes qui gouvernent son action dsinfectante ne sont pas encore bien connus et ils semblent diffrer selon le type de microorganisme. Le dioxyde de chlore ClO2 prsente plusieurs avantages comparativement au chlore et aux autres dsinfectants. Tout d'abord, contrairement au chlore, il demeure sous sa forme molculaire dans les limites de pH typiques des eaux naturelles.
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De plus, plusieurs tudes indiquent que le dioxyde de chlore est autant voire plus efficace que le chlore pour inactiver certaines bactries, telles que B. subtilis, B. mesentericus, et B. megatherium (Ridenour et al., 1949), et les cystes de protozoaires (Chen et al., 1985 ; Sproul et al., 1983). Cependant, le CT requis pour une inactivation de 2 log des protozoaires est suprieur ceux habituellement appliqus en dsinfection (0,07 2,0 mg.L-1). Cependant, bien que l'utilisation du dioxyde de chlore permette de rduire la formation de THM, il entrane la formation d'autres sous-produits de dsinfection, tels que les chlorites et chlorates. De plus, la dsinfection au dioxyde de chlore est gnralement plus cher et plus complique effectuer que celle du chlore, celui-ci devant tre synthtis sur place.

4.4 Phnomnes de rsistance aux dsinfectants


La rsistance des biomasses fixes aux oxydants sexplique par : - la consommation de loxydant par le biofilm lui-mme, du son pouvoir rducteur, de la matire organique fixe, - une pntration limite du chlore jusquaux couches basales du biofilm, lorigine dun gradient de concentration en dsinfectant depuis les couches superficielles vers les couches plus profondes, - la densit cellulaire du biofilm, - la nature du matriau support. En plus de la protection mcanique apporte par la structure en biofilm (faible diffusion de loxydant vers les couches basales), les bactries prsentent diffrents moyens de rsistance la dsinfection, de rponse ce stress oxydant. L'exposition des bactries du biofilm ces stress oxydants subltaux entrane une dfense cellulaire marque faisant intervenir diffrentes enzymes et systmes enzymatiques : - limination de loxydant : superoxyde dismutase, catalase, - protection vis--vis de loxydant : gluthation (GSH), - rparation des dommages : systme SOS, systme Heat Shock. Ces phnomnes de rsistance sont notamment observables avec l'utilisation de chlore comme dsinfectant. En effet, un rsiduel de chlore total de 2,3 3,4 mg.L-1 , en continu pendant 14 jours, sur un biofilm g de deux mois (106 cellules/cm2) ne permet llimination que de 1 log des cellules totales, la proportion de cellules cultivables fixes ntant pas modifie (cf. figure 11). Cette rsistance aux dsinfectants est galement observable pour les protozoaires vhiculs par leau. Ainsi, Tetrahymera pyriformis (cili) rsiste lexposition une dose de dsinfectant rsiduel allant jusqu 4 mg.L-1 (pH = 7, 25C) , pendant 30 minutes. Celui-ci reste cultivable aprs une exposition pendant 24 heures un rsiduel de chlore variant de 0,5 2 mg.L-1 (Sibille, 1998). Les amibes, pour rsister aux agressions environnementales, peuvent senkyster. Ce phnomne est observable pour des concentrations en chlore de lordre de 4 mg.L-1 (King et al., 1988). Ainsi, Acanthamoebae castellanii (amibe) survit des doses de chlore rsiduel de lordre de 10 mg.L-1.
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Figure 11 : Evolution de la densit bactrienne totale et des bactries cultivables fixes, dans un rseau exprimental de distribution aliment avec une eau CAG chlore en continu pendant 14 jours (Paquin et al., 1992)

La rsistance des microorganismes aux dsinfectants peut entraner une augmentation de la dose de dsinfectants applique. Cependant, la formation de sous-produits lie l'utilisation de ces dsinfectants (THM pour le chlore ; chlorites, chlorates pour le dioxyde de chlore) ne permet une augmentation trop importante des doses de dsinfectants, celle-ci s'accompagnant d'un risque de dpassement des normes de potabilit pour les sous-produits. Cependant, lapplication de fortes concentrations de chlore en sortie dusine est incompatible avec les normes en rsiduels et en drivs chlors (sous-produits de dsinfection). Ceci implique un contrle de la reviviscence bactrienne en rseau par d'autres moyens que l'utilisation de dsinfectants.

5 Prvention de la reviviscence bactrienne en rseau de distribution deau potable


La prvention de la prolifration des biomasses fixes au sein de rseaux de distribution deau potable peut tre ralise deux niveaux diffrents : - en amont de la distribution, au niveau du traitement de potabilisation, le but tant de faire des facteurs favorisant le dveloppement des biofilms, des facteurs limitants. - sur le rseau de distribution lui-mme, lors de son entretien, ou lors de sa conception ou des changements de conduite dadduction du rseau, par le choix adapt de matriaux de conduites.
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5.1 Prvention en amont du rseau de distribution


Hormis la dsinfection, une alternative est offerte aux traiteurs d'eau afin de matriser la stabilit biologique de l'eau : la rduction des concentrations en matire organique et en microorganismes l'entre de rseau de distribution, ce qui permettrait d'une part, de diminuer la demande en chlore de l'eau et en consquence de rduire les taux de dsinfection ainsi que la formation des sous-produits d'oxydation et, d'autre part, de limiter le dveloppement des biofilms en rseau. Ceci ncessite l'amlioration des filires de traitement actuelles. En effet, une des mthodes de contrle de la reviviscence bactrienne sans augmentation du taux de dsinfection appliqu, est llimination des nutriments pendant le traitement de potabilisation de leau. La rduction du carbone organique par lutilisation dun traitement additionnel de leau est favorable car cela permet : - laugmentation de la persistance et de la disponibilit du dsinfectant, - la limitation de la formation de biofilm, par cration dun facteur limitant. L'autre mthode de contrle du dveloppement des biofilms est de limiter le flux de microorganismes rentrant dans le rseau de distribution, afin de limiter le dveloppement des biofilms par adhsion de nouveaux microorganismes sa surface. La filire de traitement de potabilisation de l'eau s'articule autour de trois grandes tapes : - la clarification de l'eau brute (coagulation, floculation, dcantation), - un traitement d'affinage, - une post-dsinfection. Le dveloppement des traitements d'affinage constitue un moyen de prvention de la reviviscence bactrienne, par un abattement plus pouss du carbone organique et des microorganismes. Deux types de traitement d'affinage sont envisageables : un couplage ozone/CAG et/ou un traitement par des techniques membranaires.

Couplage Ozone/CAG
Ce traitement consiste en l'exploitation des proprits de la molcule d'ozone ragir avec des molcules organiques complexes pour gnrer des molcules de plus faible masse molaire, donc plus facile d'incorporation par les bactries. Seul le rapport CODB/CO rfractaire est modifi, la concentration en matire organique restant globalement inchange. L'action de l'ozone tend faire augmenter le rapport, le carbone organique rfractaire tant transform en CODB par coupure ou transformation chimique. La filtration sur charbon actif en grain (CAG) constitue un procd qui combine des phnomnes d'adsorption et de biodgradation des molcules organiques. L'orientation vers l'un ou l'autre de ces phnomnes est fonction de l'ge du CAG, de l'activit des microorganismes fixs sur le CAG, du type de molcules prsentes dans les effluents et de leur structure chimique (Servais et al., 1991 (2)). La structure des particules de CAG permet le dveloppement d'un biofilm bactrien l'intrieur des filtres de 4 7 fois plus important que celui dvelopp sur des grains de filtre sable.
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La filtration sur CAG permet la modification des concentrations en matire organique de l'eau (Ribas et al.,1997) : - diminution de 32,4 52,5% du COD, - diminution de 67 90% du CODB (ou seulement de 15 50%, selon l'eau considre et la nature du filtre CAG). L'efficacit de la filtration sur CAG dpend de la distribution du CODB dans les pools directement assimilable, rapidement biodgradable, lentement biodgradable, plus le CODB tant biodgradable, plus il sera rapidement limin. Le couplage de ces deux techniques permet tout d'abord une augmentation de la biodgradabilit des molcules organiques prsentes dans l'eau potabiliser (ozonation), puis un abattement pouss de ces molcules facilement assimilables par filtration et consommation par une flore bactrienne dveloppe sur CAG (cf. tableau VIII).

Nanofiltration
La technique de filtration membranaire est base sur le principe de rtention physique des particules ou substances dont l'encombrement strique est suprieur la taille des pores de la membrane de filtration. Diffrentes techniques de filtration sont utilisables, selon la taille des pores des membranes, donc selon l'objectif de qualit souhait pour le filtrat : - la microfiltration, qui utilise une membrane dont la taille des pores est comprise entre 0,05 m quelques m, et qui permet la rtention des bactries, des kystes de protozoaires, des substances collodales. - l'ultrafiltration, qui permet de retenir en plus les virus, dont la taille varie de 20 100 nm, et une partie des composs dissous. La taille des pores varie de quelques nm 100 nm. - la nanofiltration, dont les membranes permettent de retenir en plus une forte proportion de la matire organique dissoute et les ions multivalents (Ca2+, Mg2+, Fe2+, ). - l'osmose inverse dont les membranes prsentent en plus un haut taux d'enlvement des ions monovalents (Na+, Cl+, ) et peuvent sparer certaines molcules organiques de trs faible masse molaire. Ces techniques permettent la production d'une eau dont les caractristiques microbiologiques, organiques et chimiques sont constantes et relativement indpendantes des caractristiques de la ressource en eau brute, mais dpendantes du seuil de coupure des membranes. Pour la production d'eau potable, la nanofiltration prsente l'avantage d'enlever bactries, protozoaires, virus et matire organique sans retenir les sels dissous (reminralisation non ncessaire). Ainsi, la mise en uvre de la nanofiltration permet (Anselme et al., 1993 ; Agbekodo et al., 1994 ; Sibille, 1997) : - l'limination de la matire organique dissoute (COD + CODB), - l'limination des microorganismes, - la diminution de la saveur de moisi de l'eau d'un facteur 2
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la production d'une eau peu consommatrice de dsinfectant, pauvre en sous-produits d'oxydation. Ainsi, cette technique membranaire permet d'liminer entre 86 et 93% du COD et plus de 99% du CODB et des microorganismes, que l'eau d'entre soit une eau filtre sur sable ou une eau ayant subi un traitement O3/CAG (cf. tableau IX). Tableau IX : Efficacit d'limination des matires organiques et des cellules bactriennes par un procd de nanofiltration appliqu une eau filtre sur sable ou une eau ozone puis filtre sur CAG (Sibille, 1998). Eau ozone et filtre sur charbon Eau filtre sur sable actif Avant Aprs % Avant Aprs % d'limination d'limination nanofiltration nanofiltration 0,4 86 0,1 93 COD (mg.L-1) 2,5 1,6 -1 CODB (mg.L ) 0,6 < 0,1 > 99 0,4 < 0,1 > 99 Cellules bactriennes (bactries.mL-1) < seuil > 99 105 < seuil > 99 1,6.105 La nanofiltration est toutefois un procd trs peu utilis au niveau national (Briey, Mry-sur-Oise), sa mise en place et son entretien en faisant une technique coteuse.

5.2 Au niveau du rseau de distribution


5.2.1 Entretien des rseaux

Cas des rservoirs


Selon le dcret n89-3 modifi, les rservoirs d'eau potable doivent tre vidangs et nettoys au moins une fois par an. Ce nettoyage consiste en un brossage manuel ou mcanique des parois internes, suivi d'une dsinfection par une solution d'eau de javel concentre. Ce nettoyage permet l'arrachement et l'limination des biofilms.

Cas des conduites d'adduction d'eau potable


L'intervention pour entretien des rseaux est dtermine par la ralisation d'un diagnostique de nettoyage. Deux paramtres ont alors pris en compte : la turbidit et les MES. Si la mesure de ces paramtres dpasse une valeur seuil (prlvements raliss au niveau de bornes d'incendie, fort dbit), un nettoyage des conduites d'adduction est envisag. Pour le Syndicat des Eaux d'Ile de France (SEDIF), les valeurs seuils sont de 20 mg.L-1pour les MES et de 4 NTU pour la turbidit. Ces nettoyages sur rseaux consistent en :
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action hydraulique : le nettoyage est ralis haute pression au moyen d'eau seule ou d'un mlange eau-air, le premier permettant l'limination des dpts boueux peu incrustants, et le second permettant un dcrochage plus important des dpts par cration de phnomnes de turbulence. Cependant, la consistance lastique des biofilms leur permet de rsister ces phnomnes d'arrachement physique. action mcanique : le nettoyage permet l'limination des dpts boueux et sableux si un racleur souple est utilis, et l'limination des dpts boueux et des tubercules de corrosion, si un racleur rigide est utilis. Ces oprations n'amliorent que transitoirement la propret du rseau, les biofilms limins rapparaissant au bout de 1 2 mois/ action chimique, par une chloration ponctuelle au dessus de la norme de 0,1 mg.L-1 de chlore libre sur le tronon nettoyer. Cette action n'est rellement efficace que sur les bactries planctoniques, le biofilm n'tant que faiblement atteint par la chloration.

En cas de contamination grave du rseau de distribution, des traitements curatifs sont envisags : des traitements mcaniques, par tringlage d'un outil en acier en rotation, qui ne permet qu'une limination temporaire des biofilms, et des traitements chimiques lourds (en cas de contamination bactrienne) : - injection de chlore 0,4-0,5 mg.L-1, qui permet l'limination des bactries planctoniques et des coliformes prsents au niveau du biofilm. Cependant, cette action ne permet l'limination totale et durable des biofilms, les bactries indignes tant rsistantes au chlore. - injection d'acide paractique (APA) 30 mg.L-1, pendant 10 minutes sur 24 heures, et rpte 4 fois. La diminution de la densit du biofilm peut atteindre 87%. Cependant, le caractre hautement assimilable de ses sous-produits rend son utilisation occasionnelle. injection de pyrthrine et permthrine synthtique, 10 g.L-1, permet une limination efficace des bactries, crustacs et larves d'insecte. Leur utilisation est exceptionnelle, et est soumise l'autorisation du Conseil Suprieur d'Hygine Publique (CSHP), ces produits chimiques prsentant une toxicit pour les poissons et les personnes sensibles, et notamment les dialyss rnaux.

Aprs la dsinfection du tronon, la consommation du dsinfectant est contrle et la solution dsinfectante est vacue et remplace par l'eau du rseau. Si la teneur en dsinfectant est importante (suprieure 0,5 mg.L-1, dans le cas du chlore), la solution vidange ne doit pas tre rejete directement dans le milieu naturel, afin d'viter tout risque de pollution. Dans ce cas une neutralisation ou une dilution doit tre ralise avant rejet. La rhabilitation des rseaux par ces techniques chimiques lourdes prsente un risque potentiel pour la sant humaine. Une planification de ces oprations est donc ncessaire et doit s'accompagner d'un systme d'information des consommateurs portant sur les priodes d'interdiction de consommation, de coupure et de priode de rinage.

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5.2.2 Evaluation de l'innocuit microbiologique des matriaux Comme vu prcdemment, certains matriaux utiliss pour le transport de l'eau potable peuvent tre l'origine de dveloppements bactriens, notamment par relargage de composs organiques potentiellement biodgradables donc utilisables par la biomasse prsente. Le maintien de la stabilit biologique au sein des rseaux et donc de la qualit de l'eau distribue passe donc par un choix adquat des matriaux constitutifs des canalisations. Ainsi, afin de prjuger des matriaux susceptibles d'entraner une dgradation de la qualit microbiologique de l'eau potable distribue, deux tests ont mis en place : - un test anglais BS 6920, qui permet de prjuger de l'innocuit microbiologique des matriaux en contact avec l'eau potable, - un test hollandais, BFP-method, qui permet d'valuer le potentiel de formation du biofilm sur le matriau en contact avec l'eau potable. Ces deux tests diffrent entre autres, au niveau de leurs conditions opratoires, du paramtre de mesure de la prolifration bactrienne et du seuil de conformit maximal admissible. Les caractristiques de ces deux tests sont prsentes dans l'annexe 2. Cependant, la conformit des matriaux du point de vue de la prolifration bactrienne diffre selon le test employ (Mathieu et al, 1998). En effet, selon les rsultats obtenus pour cinq matriaux diffrents (inox 316L, plomb, PEHD, ciment et caoutchouc) (Mathieu et al, 1998), le PEHD est microbiologiquement inerte selon le test anglais ( < 2,3 mg O2.L-1), et non conforme selon le test hollandais ( > 500 pg ATP.cm-2). Ces rsultats, obtenus partir de test de laboratoire, sont contradictoires (cf. tableau X). Ceci pose le problme, avant le choix du matriau utiliser, du choix du test mettre en uvre pour prjuger de son innocuit microbiologique, ainsi que le problme de la reprsentativit de ces essais de laboratoire par rapport aux ralits de terrain, le dveloppement de biofilms ayant t observs sur ces diffrents matriaux. Tableau X : tests de conformit microbiologique pour diffrents matriaux selon les test anglais et hollandais (Mathieu et al, 1998). Matriaux tests : - inox Test anglais - plomb Conforme de 0 0,1 mg O2.L-1 BS 6920 - ciment Microbiologiquement inerte - caoutchouc - PEHD Matriaux tests : Test - inox de 10 Conforme hollandais - plomb 70 pg ATP.cm-2 Microbiologiquement inerte BFP-method - ciment - PEHD 600 pg ATP.cm-2 Non conforme

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Un protocole d'essai standard et un seuil de conformit pour l'valuation de l'innocuit microbiologique d'un matriau en contact avec l'eau potable devraient tre dfinis, pour pouvoir rpondre ces diffrents choix.

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REGLEMENTATION
1 Rglementation vis--vis des matriaux en contact avec l'eau destine la consommation humaine
1.1 Les matriaux utiliser
La circulaire DGS/94-9 du 25 janvier 1994 du Ministre dlgu la Sant, prcise que "les matriaux peuvent influencer, de manire significative, la qualit de l'eau livre aux consommateurs"; cette influence peut prendre des proportions importantes lorsque se dveloppent des phnomnes de corrosion (cas des canalisations mtalliques et en bton) ou de dgradation (cas des matriaux de type organique). Certains incidents trouvent leur origine dans des insuffisances de conception, de mise en uvre ou d'entretien des installations de distribution et de traitement : les difficults sont trs souvent la consquence d'un choix de matriau inadapt la qualit des eaux distribues ou d'une mise en uvre dfectueuse. Dans certains cas, les matriaux peuvent eux-mmes tre mis en cause (vieillissement prmatur, tenue insuffisante vis--vis des sollicitations intrieures et extrieures). L'altration des matriaux, rsultant d'une migration plus ou moins rapide des substances qui le composent, peut entraner au niveau de l'eau un certain nombre de dsordres, tels une modification des qualits organoleptiques, une dtrioration de la qualit microbiologique par une augmentation du nombre de germes et ventuellement un enrichissement progressif en substances toxiques ou indsirables, minrales ou organiques. Ces considrations gnrales ont t prises en compte dans le dcret n89-3 du 3 janvier 1989 modifi relatif la qualit des eaux destines la consommation humaine et, plus particulirement, l'article 7 ainsi rdig : " Les matriaux utiliss dans les systmes de production ou de distribution et qui sont au contact de l'eau destine la consommation humaine ne doivent pas tre susceptibles d'altrer la qualit de l'eau. Ils doivent rpondre aux conditions dfinies par un arrt pris, aprs avis du Conseil Suprieur d'Hygine Publique de France, par les ministres chargs de la sant, de l'industrie, de la consommation et de la construction." L'article 3 du rglement sanitaire dpartemental-type, diffus par la circulaire du 9 aot 1978 de Ministre Dlgu la Sant rappelle que : - "les revtements bitumeux, les enduits drivs du ptrole et tous les produits similaires, ainsi que les revtements en matire plastique ne doivent tre employs que dans la mesure ou, en contact avec l'eau, ils ne risquent pas de se dsagrger ou de communiquer celle-ci des saveurs ou odeurs dsagrables," - "les substances entrant dans la composition des matriaux utiliss pour les canalisations, les appareils ou parties d'appareils et les accessoires en matire plastique doivent satisfaire la rglementation en vigueur concernant les matriaux et objets placs en contact avec les denres alimentaires."

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Le respect des exigences rglementaires requises pour la qualit des eaux destines la consommation humaine reste tributaire des effets ventuels des matriaux placs leur contact; il s'agit tout particulirement de certains lments chimiques classs par le dcret du 3 janvier 1989, comme substances indsirables telles que le cuivre, le fer et le zinc, mais aussi comme substances toxiques telles que le plomb, le cadmium et les hydrocarbures polycycliques aromatiques.

1.2 Cas des matriaux de type organique


Pour ce type de matriaux, les travaux de normalisation des mthodes d'essai ont progress rapidement du fait de l'exprience dj acquise par les distributeurs d'eau, les fabricants de matriaux organiques et les autorits sanitaires, pour aboutir en 1996 trois normes AFNOR exprimentales dfinies dans la circulaire DGS/96-155 du 1er mars 1996 du mme ministre. Ces normes consistent raliser : - des essais de "criblage rapide", permettant notamment d'valuer les effets du matriau sur la qualit organoleptique des eaux distribues, - des essais biologiques bass sur un test de cytotoxicit, - des essais dits de "criblage fin" permettant de mesurer la migration ventuelle de micropolluants organiques et minraux. La rglementation nationale applicable aux matriaux et objets placs au contact des denres alimentaires intgre les directives europennes en vigueur dont les directives 90/128/CEE, 92/39/CEE, et 93/9/CEE, relatives aux matriaux et objets en matire plastique destins entrer en contact avec les denres alimentaires. Pour chaque matriau, les constituants (polymres de base, additifs et auxiliaires technologiques) utiliss pour la fabrication doivent avoir fait l'objet d'une autorisation auprs du Conseil Suprieur d'Hygine Publique de France. Les constituants autoriss dans le cadre de la rglementation concernant les matriaux et objets au contact de denres alimentaires rpondent cette obligation. Certains pays ont par ailleurs dfinis des "listes positives", c'est dire des listes de produits et composs autoriss pour la prparation des divers matriaux organiques. L'annexe 3 prsente les matriaux organiques concerns par les essais et quelques rsultats obtenir pour l'acceptation du matriau.

1.3 Cas des matriaux de type mtallique


Pour leur part, la situation est trs diffrente car ils sont souvent utiliss depuis fort longtemps et, l'exception du plomb, n'ont pas pos de problme sanitaire important. Nanmoins, de nouveaux alliages arrivent sur le march, et l'utilisation, pour la fabrication des ciments par exemple, de cendres et autres sous-produits a conduit les autorits sanitaires envisager des tests adapts ces matriaux. Ceux-ci sont l'tude au niveau de groupes d'experts europens, mme si des procdures de test sont dj au point en partie.

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2 Rglementation vis--vis de l'eau destine la consommation humaine


2.1 Contexte de la rglementation en matire deau destine la consommation humaine
Ds la fin du XIXme sicle, des textes ministriels voquent le rgime des eaux du point de vue de la salubrit publique. Cest ainsi que la circulaire ministrielle du 10 dcembre 1890 prcise que, pour apprcier la salubrit, lanalyse chimique dune eau destine la consommation humaine doit tre complte par une analyse microbiologique mme si les modalits ne sont pas prcises. Lvaluation du risque microbien progresse dans les deux premiers tiers du XXme sicle, notamment en ce qui concerne les maladies transmises par voie hydrique (Salmonelle, Shigella, ). Ceci conduit au premier texte rglementaire, dcret du 1er aot 1961, dfinissant avec prcision les exigences de qualit auxquelles devraient rpondre les eaux destines lalimentation. Sur le plan du risque microbiologique, risque court terme, la notion de germes test fait son apparition avec Escherichia coli et les streptocoques fcaux. Le dcret 89-3, du 3 janvier 1989, modifi le 10 avril 1990 (dcret 90330) va dans le sens dune plus grande rigueur avec une augmentation du programme danalyse lorsque la qualit de leau de consommation scarte des valeurs fixes. Il repose essentiellement sur deux bases juridiques, avec dune part, les directives europennes 75-440, 79-869 et 80-778 et dautre part, le Code de la Sant Publique : La directive europenne 75-440 vise la qualit des eaux superficielles utilises pour la production deau alimentaire et dfinit en fonction des moyens techniques de lpoque trois niveaux de qualit, auxquels sont associs trois traitements types.

La directive 79-869 complte la directive 75-440, en dfinissant les modalits de vrification de la qualit de ces mmes eaux superficielles (caractristiques, mthodes danalyses, ).

La directive 80-778 est quant elle directement relative la qualit des eaux destines la consommation humaine et dfinit travers 62 paramtres, des valeurs guides, des concentrations maximales admissibles (CMA) ou des concentrations minimales requises. Les Etats membres fixent leurs normes nationales de qualit en fonction de cette directive, mme si les Etats peuvent permettre des drogations, dans des conditions dtermines dont les Communauts Europennes doivent tre informes. Les dispositions pour le suivi de la qualit des eaux distribues, les analyses types, leurs frquences et les mthodes y sont fixes.

Le code de la Sant Publique fixe notamment les rgles gnrales dhygine et toutes autres mesures propres prserver la sant de lhomme, notamment en matire dalimentation en eau potable.

Le dcret 89-3 modifi traite ainsi des dispositions gnrales, dont les rgles de suivi de la qualit des eaux et relatives aux matriaux en contact avec leau, de la qualit de la ressource, et des dispositions relatives aux distributions collectives publiques et prives.
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La directive europenne 80-778 fait dpendre laptitude de leau sa consommation que du seul respect des exigences concernant les paramtres pris en compte, alors que le paramtre absence de pathognes est invrifiable. Dans le dcret franais, lexigence de labsence de signes de dgradation de leau ne rsout pas le problme, puisque la prsence dun pathogne, non dcel ou mme non dcelable, peut ne saccompagner daucun autre signe de dgradation.

2.2 Les analyses microbiologiques : nature, frquence


2.2.1 Paramtres microbiologiques Pour surveiller la qualit des eaux destines la consommation humaine, du point de vue du risque sanitaire, des analyses microbiologiques sont ralises sur l'eau brute alimentant la station de traitement, sur l'eau traite en sortie d'usine et sur le rseau, jusqu'aux consommateurs. Les diffrents paramtres microbiologiques recherchs sont prsents dans le tableau XI. Tableau XI : Paramtres microbiologiques. Paramtres Organismes pathognes salmonelles staphylocoques bactriophages fcaux entrovirus Coliformes totaux Units par 5 L par 100 mL par 50 mL par 10 L 37C, par 100 mL Limite de qualit pour les eaux potables 0 0 0 0 0 (95% des chantillons conformes) 0 0

Coliformes thermotolrants 44C, par 100 mL Streptocoques fcaux par 100 mL Spores de germes anarobies par 20 mL 1 sulfito-rducteurs (Source : dcret n89-3 du 3 janvier 1989, relatif aux eaux destines la consommation humaine l'exclusion des eaux minrales naturelles).

2.2.2 Nature et frquences des analyses microbiologiques de l'eau potable Compte tenu des techniques utilises pour la ralisation des analyses microbiologiques et des cots de celles-ci, diffrents types d'analyses microbiologiques sont ralises : Le contrle de routine (ou analyse sommaire B2) a pour but de fournir, de manire rgulire, des informations sur la qualit organoleptique et microbiologique des eaux destines la consommation humaine ainsi que des informations sur l'efficacit du traitement des eaux potables (notamment de la dsinfection) lorsqu'il est pratiqu, en vue de dterminer si les eaux destines la consommation humaine respectent ou non les valeurs paramtriques

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pertinentes prvues par la Directive du Conseil de l'Union europenne n 98/83/CE du 03/11/98 relative la qualit des eaux destines la consommation humaine. Le contrle complet (ou analyse complte B3) a pour but de fournir les informations ncessaires pour dterminer si toutes les valeurs paramtriques prvues par la directive mentionne ci-dessus, sont ou non respectes. Tous les paramtres fixs font l'objet d'un contrle complet moins que les autorits comptentes puissent tablir que, pendant une priode qu'il leur appartient de dterminer, un paramtre n'est pas susceptible d'tre prsent dans une distribution donne des concentrations qui pourraient compromettre le respect des valeurs paramtriques pertinentes. Ces types d'analyses diffrent par le nombre de microorganismes recherchs et le lieu de prlvement de l'chantillon d'eau ncessaire aux analyses (cf. tableau XII). Tableau XII : Les diffrents types danalyses bactriologiques Rduite (B1) Coliformes thermotolrants Streptocoques fcaux Analyses bactriologiques Sommaire (B2) Coliformes thermotolrants Streptocoques fcaux Complte (B3) Coliformes thermotolrants Streptocoques fcaux

Dnombrements des bactries Dnombrements des bactries arobies revivifiables 22C et arobies revivifiables 22C 37C et 37C Coliformes totaux Spores de bactries anarobie sulfito-rductrices (Source : dcret n89-3 du 3 janvier 1989, relatif aux eaux destines la consommation humaine l'exclusion des eaux minrales naturelles). Les analyses type B1 sont ralises directement sur les ressources, au point de puisage, avant traitement, quil sagisse deau souterraine ou deau superficielle. Les analyses type B2 sont ralises au cours de la distribution, que le rseau soit aliment par une eau souterraine ou une eau superficielle. Les analyses type B3 sont ralises au niveau de la production, aprs le traitement, avant le refoulement ou au point de puisage si il ny a pas de traitement. En ce qui concerne les eaux superficielles, outre les analyses bactriologiques de type B1, il est procd : une recherche annuelle de salmonelles (dans cinq litres d'eau), une recherche de coliformes dans les conditions suivantes : - une fois par an pour un dbit infrieur 6 000 m3 /jour, - deux fois par an pour un dbit compris entre 6 000 m3 /jour et 20 000 m3 /jour, - quatre fois par an pour un dbit suprieur 20 000 m3 /jour.

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Pour chaque type d'analyse (B2 et B3), la Directive Europenne n98/83/CE prcise, en fonction du volume d'eau distribue par jour, le nombre de contrle devant tre effectu en sortie d'usine ou au niveau du rseau de distribution. La frquence de ces contrles est prsente dans le tableau XIII.

Tableau XIII : Frquence minimale des chantillonnages et des analyses pour les eaux destines la consommation humaine. Volume deau distribu ou Contrle de routine produit chaque jour, Contrle complet Nombre de prlvements lintrieur dune zone de Nombre de prlvements par an (B3) par an (B2) distribution (m3) fix par lEtat membre * fix par lEtat membre * 100 4 1 > 100 et 1000 1 +1 pour chaque tranche entame de >1000 et 10 000 3 300 m3/j du volume total 4 +3 pour chaque tranche 3 + 1 pour chaque tranche entame >10 000 et 100 000 entame de 1 000 m3/j du de 10 000 m3/j du volume total volume total 10 +1 pour chaque tranche entame > 100 000 de 25 000 m3/j du volume total * les frquences annuelles d'analyses microbiologiques, fixes par le dcret n91-527, sont prsentes en annexe 4. (Source : Directive du Conseil de l'Union europenne n 98/83/CE du 03/11/98 relative la qualit des eaux destines la consommation humaine).

2.2.3 les indicateurs utiliss en microbiologie de production d'eau potable Plusieurs indicateurs peuvent tre utiliss en microbiologie de production deau potable :

Recherche des coliformes totaux


Lanalyse des bactries coliformes totales est la plus frquente pour le contrle de leau potable, et ce, depuis plus de 100 ans. Son faible cot danalyse, sa reproductibilit et l'omniprsence des coliformes dans les eaux de surface en font un indicateur universel pour juger de la qualit dune eau. Ce groupe htrogne appartient la famille des entrobactries et comprend plusieurs genres bactriens se retrouvant dans la flore normale intestinale. Cependant, la plupart des espces se retrouvent aussi naturellement dans le sol et la vgtation. De ce fait, cette analyse nest pas considre comme un indicateur de contamination fcale ou de risque sanitaire. Une eau potable contenant des coliformes totaux indique une insuffisance du traitement et/ou une incapacit maintenir un rsiduel de chlore suffisant dans le systme de distribution. Il faut cependant porter une attention particulire la prsence rcurrente de coliformes totaux dans un rseau ou un secteur du rseau. Ceci peut signaler la prsence dune pollution de surface cause dune dficience de lintgrit du rseau, de lefficacit du traitement ou dune contamination de leau brute non traite. Ces situations doivent tre corriges pour prvenir un risque sanitaire ventuel.
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La survie dans leau et la rsistance au chlore des bactries coliformes totales est plus faible que celles des virus et des parasites. Ce ne sont donc pas de bons indicateurs de la prsence ou de lefficacit du traitement.

Recherche des coliformes thermotolrants et Escherichia coli


Les coliformes thermotolrants (ou fcaux) sont un sous-groupe de bactries faisant partie des coliformes totaux. La mthode danalyse est optimise pour slectionner la croissance des bactries dorigine fcale. Lincubation se fait donc 44,5C durant 24 heures dans un milieu spcifique favorisant la croissance de colonies typiques bleutes. Cette temprature leve de croissance confre ce groupe le terme plus judicieux de coliformes thermotolrants. Toutefois, daprs la mthode habituelle, la confirmation de la prsence de E. coli peut prendre jusqu 48 heures supplmentaires. Si en plus des bactries coliformes totales, des bactries coliformes fcales sont prsentes, une contamination dorigine fcale est fortement souponne et un avis dbullition doit tre mis immdiatement pour protger la population. Lanalyse des bactries Escherichia coli, qui reprsentent environ 90% des bactries coliformes fcales, confirme sans aucun doute que cette contamination est dorigine fcale. En effet, E. coli est la seule espce bactrienne faisant partie du groupe des coliformes totaux (et des coliformes fcaux) qui est toujours dorigine fcale humaine ou animale. Cest une bactrie qui est particulirement sensible la dsinfection et qui a la particularit de se dvelopper difficilement lintrieur dun rseau. Sa prsence indique habituellement un traitement inefficace ou une intrusion par un rseau non tanche.

Recherche des Streptocoques fcaux (ou entrocoques)


Les entrocoques appartiennent au mme groupe de bactries, appeles auparavant streptocoques fcaux. linstar des E. coli, les bactries entrocoques se retrouvent en quantit considrable dans les matires fcales humaines et animales. Toutefois, certaines varits ne sont pas dorigine fcale et peuvent se retrouver dans les vgtaux et le sol. Ces bactries sont plus rsistantes la chloration que les coliformes et survivent gnralement plus longtemps dans lenvironnement. En outre, contrairement aux coliformes, elles recroissent trs mal dans le rseau. Leur haute rsistance la scheresse permet dutiliser aussi les entrocoques comme contrle de routine lors de linstallation ou de la rparation de conduites dun rseau de distribution. Lanalyse des bactries entrocoques est souvent ralise pour valuer la contamination fcale des eaux de baignade. Lanalyse se fait habituellement par membrane filtrante sur un milieu spcifique. Ils peuvent tre utiliss comme indicateur de contamination dans une eau souterraine non dsinfecte.

Recherche des indicateurs viraux


Des virus entriques humains sont susceptibles de se retrouver dans presque toutes les eaux de surface et dans les eaux souterraines vulnrables. Bien que la rsistance des virus la dsinfection soit variable, elle est gnralement plus grande que la rsistance des bactries. En consquence, les indicateurs bactriens ne sont pas trs valables pour relever la prsence de virus. Dans la moiti des cas dpidmies dorigine hydrique, les causes sont inconnues, mme si lon souponne les virus dtre trs souvent responsables.
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Les indicateurs viraux mesurent les coliphages somatiques et les coliphages mles spcifiques. Les coliphages sont une varit de bactriophages qui infecte spcifiquement une espce bactrienne, soit E. coli. Les coliphages sont prsents en plus grande quantit que les virus entriques dans les matires fcales. Lanalyse est base sur la proprit des coliphages infecter et dtruire E. coli. Le rsultat est exprim en units formant des plages de lyse (ufp) par 100 ml dchantillon. Il existe aussi une mthode qualitative de type prsence/absence. Les coliphages servent dabord dindicateurs de contamination fcale dans leau souterraine, mais aussi de la prsence possible de virus entriques, compte tenu de leurs caractristiques similaires.

Les indicateurs parasitaires


Cryptosporidium est un parasite plutt petit et compte parmi les plus rsistants la chloration. On estime quun traitement efficace pour liminer de faon scuritaire ce parasite sera suffisamment efficace contre les autres parasites. Par contre, ils sont plus gros que les bactries et cest pourquoi ils ne peuvent contaminer une eau souterraine bien protge. Trs souvent, les pidmies rpertories pour Cryptosporidium surviennent dans des systmes traitement complet ayant dmontr une dficience dans le systme de filtration. En raison de contraintes analytiques, il ny a toutefois aucun contrle direct de ces microorganismes. Ces analyses sont longues, coteuses et exigent la filtration dun grand volume deau (jusqu 1000 litres). Des recherches sont prsentement en cours et il est prvoir quune mthode adquate sera disponible prochainement. Lanalyse des bactries sporulantes arobies (BSA) est un indicateur intressant pour valuer la performance dune filire de traitement denlvement des parasites. Les BSA ne reprsentent aucun risque sanitaire et sont prsentes en abondance dans le sol et toutes les eaux de surface. Elles se cultivent facilement et faible cot. Aprs une filtration conventionnelle, le taux dabattement des spores bactriennes est comparable celui des oocystes de Cryptosporidium ou est un peu moindre. Le suivi des particules de petites dimensions (quelques microns) est aussi un outil intressant pour valuer la performance de chaque tape du systme de filtration en regard de lenlvement des kystes et oocystes de Giardia et Cryptosporidium. Le maintien de la plus faible et stable turbidit est un objectif atteindre. Les contraintes de traitement exprimes en termes de degr denlvement des parasites Giardia et Cryptosporidium sont respectes par le biais dquivalence selon les technologies de traitement en place. Ces indicateurs sont compars, les uns aux autres, sur la base de quatre usages diffrents (cf. tableau XIV) : le risque sanitaire, la contamination fcale, lefficacit de traitement et la qualit du rseau.

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Tableau XIV : Description et usage des principaux indicateurs utiliss en microbiologie de leau potable Indicateurs Escherichia coli Coliformes fcaux Coliformes totaux BHAA Colonies atypiques Entrocoques Coliphages Bactries sporulantes arobies (BSA) Turbidit Dsinfectant rsiduel Risque sanitaire +++ ++ ++ ++ +++ Contamination fcale ++++ +++ + + + +++ +++ Efficacit du traitement +++ +++ ++++ ++++ ++++ +++ +++ (virus) +++ (parasites) ++++ + Qualit du rseau + + ++ ++++ +++ + ++++ ++++ Commentaires Contamination fcale certaine et rcente Risque sanitaire (prsence souponne de pathognes) Contamination fcale probable Indicateur standard de la qualit de leau distribue et du traitement (rcurrence surveiller) Qualit gnrale de leau distribue incluant le traitement et la dgradation dans le rseau Qualit gnrale de leau distribue incluant le traitement et la dgradation dans le rseau Contamination fcale probable (doit tre utilis avec E. coli.) Contamination fcale probable; prsence de virus potentiellement pathognes. Bon indicateur de lefficacit du traitement enlever (filtration) et inactiver (chloration) les parasites Associ au risque sanitaire global (parasites, virus et bactries) pour une eau contamine. Avec BHAA, qualit gnrale de leau distribue (diffrent de la chloration comme traitement).

(Source : Guide de conception des installations de production deau potable, ministre de lEnvironnement du Qubec, RSEAU environnement juin 2001, Version prliminaire)

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2.3 Les bactries VBNC


2.3.1 Notion de bactries viables mais non cultivable Le traitement de l'eau a pour but l'limination de germes pathognes prsents dans la ressource d'eau brute. La recherche systmatique des pathognes lors des analyses de contrle tant trop coteuse, on recherche des germes tests, aussi sensibles au traitement que les germes pathognes, et tmoins de la prsence possible de germes pathognes. Cependant, un certain nombre de microorganismes sont introduits dans le rseau, les procds de traitements physico-chimiques classiques ne permettant pas d'assurer avec fiabilit une limination totale des microorganismes. Cependant, certaines bactries entrant dans les rseaux de distribution ont rsist au traitement, mais sont plus ou moins affectes par celui-ci. Ces bactries prsentent alors diffrents tats physiologiques allant des bactries vivantes aux bactries mortes (cf. figure 12). bactries dormantes

lyses

mortes

activits enzymatiques rsiduelles

blesses

respirant activement

se multipliant sur glose

Bactries VBNC Bactries viables Bactries reconnaissables par leurs antignes de structure Reconnaissance de squences nucliques Figure 12 : Classification physiologique schmatique des bactries (Block, 1992) Ces bactries, selon leur tat physiologique, peuvent avoir perdu : - leur activit de synthse protique, - leur activit respiratoire, - leur intgrit membranaire, - lintgrit de leur gnome. Les bactries qualifies de bactries viables mais non cultivables ("viable, but not culturable", VBNC) sont dfinies comme des cellules ayant une activit mtabolique mais tant incapables de se diviser. Or la division cellulaire et donc la formation de colonies est la capacit requise pour un dnombrement bactrien sur milieu de culture. En appliquant cette

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dfinition, plus de 65% des populations bactriennes pourraient tre considres comme des cellules VBNC (Kalmbach et al, 1997). 2.3.2 Consquences sur le contrle de la qualit de l'eau potable Au sein des rseaux, les bactries, affectes par le traitement de potabilisation, prsentent un mtabolisme actif, communment utiliss pour les analyses de routine. Or, lors de ces analyses, seule la capacit de reproduction des cellules est considre comme un indicateur de dtermination de la viabilit des microorganismes. Cependant, moins de 1% des populations bactriennes des milieux oligotrophes, constitus par les rseaux de distribution deau potable, peuvent tre cultives sur les milieux de culture couramment utiliss pour les analyses de routine. Ces bactries sont donc incapables de se dvelopper et de former des colonies sur les milieux nutritifs, bien qu'elles prsentant un mtabolisme actif. La technique dvaluation de la qualit des eaux potables distribues, base sur la culture sur milieu glos enrichi, des bactries prsentes dans lchantillon deau permet alors de distinguer : - les bactries cultivables, qui peuvent former des colonies sur milieu de culture, et qui sont donc considres comme viables, - les bactries non cultivables, cest dire les bactries non dtectables par les mthodes de recherche classiquement mises en oeuvre par les pouvoirs publics ou les industriels. Or, comme nous l'avons vu prcdemment, non cultivabilit nest pas synonyme de non viabilit. Ainsi, des dnombrements bactriens raliss partir dchantillons deau de rseaux de distribution deau potable ont t effectus sur diffrents milieux de culture : - test normalis, utilisant une glose AFNOR, avec une incubation 22C, pendant 72 heures, - test normalis, utilisant une glose AFNOR, avec une incubation 37C, pendant 24 heures, - test utilisant une glose R2A, avec une incubation 22C, pendant 7 jours. Cette glose est moins slective, car constitue de molcules organiques plus simples, donc plus accessible. Paralllement ces cultures, un dnombrement bactrien total par pifluorescence au microscope est ralis. Les rsultats obtenus sont prsents sur la figure 13. Ces rsultats indiquent que, selon le milieu de culture utilis, le nombre de microorganismes mis en vidence est diffrent. Ces milieux nutritifs sont donc plus ou moins slectifs vis--vis des microorganismes prsents. Une slection par le temps d'incubation peut galement tre observable (augmentation du nombre de microorganismes mis en vidence avec le temps d'incubation). Ceci montre la ncessit d'un temps d'adaptation des bactries lors du transfert d'un milieu oligotrophe (eau potable) un milieu de culture enrichi. Ceci peut tre expliqu de la manire suivante : - la majorit des populations bactriennes prsentes, ne sont pas viables, les espces bactriennes ne sont alors pas cultivables sur de tels milieux, - la majorit des cellules sont viables et actives, mais sont entres dans un stade mtabolique "viable mais non cultivable" (Viable But Non Cultivable VBNC), qui reprsente une adaptation au milieu oligotrophe.
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cellules/ml
1000000 100000 10000 1000 100 10 1

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denombrement total

R2A

Glose Glose AFNOR 22C AFNOR 37C

Figure 13 : Comparaison des dnombrements bactriens deau de rseau en utilisant les mthodes normalises (glose AFNOR 22C, 72 heures et glose AFNOR 37C, 24 heures), des mthodes moins slectives (glose R2A 22C, 7 jours) et le dnombrement total (pifluorescence au microscope). Or la viabilit des microorganismes est cruciale pour valuer l'efficacit des traitements d'inactivation. La flore bactrienne identifie par des techniques classiques de comptage de flore sur glose n'est pas reprsentative des bactries effectivement prsentes dans l'eau produite, et notamment les bactries blesses et stresses par le traitement.

Cela souligne la non-adaptation des milieux de cultures aux bactries, ce qui se traduit par un cart entre le nombre de bactries totales et le nombre de bactries cultivables. Or la prsence de bactries VBNC dans l'eau issue de l'usine de traitement induit un risque de reviviscence bactrienne dans le rseau de distribution et par la suite la formation de biofilms. De plus, ces bactries gardent leur ventuel pouvoir pathogne, ce qui peut avoir pour consquence une contamination microbiologique des consommateurs.

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Biofilm et qualit de leau potable

CONCLUSION
Les rseaux de distribution d'eau potable ne peuvent plus aujourd'hui tre considrs comme de simples outils de transport de l'eau jusqu'aux consommateurs. Ils constituent un vritable racteur biologique, l'intrieur duquel se met en place une dynamique bactrienne, et o une croissance des microorganismes est observable, au dtriment de la matire organique biodgradable, ou au dtriment d'autres microorganismes. En effet, ces milieux sont coloniss par plusieurs groupes principaux : les bactries, les protozoaires, les algues, les champignons et les levures. Pour chacun de ces groupes, de nombreuses espces ont pu tre identifies. L'ide d'une eau potable, distribue dans les rseaux, biologiquement stable, c'est dire pour laquelle la croissance bactrienne, la consommation de matire organique biodgradable et la prdation ne sont pas significatives, est donc remettre en question. En effet, l'utilisation de dsinfectants, aux concentrations habituellement rencontres, ne permet en aucun cas l'inhibition totale de la prolifration bactrienne. La croissance bactrienne en rseau n'est donc que faiblement limite par l'action d'oxydants, ces derniers ragissant avec les composs organiques et la paroi interne des canalisations. Une proposition serait l'augmentation des doses de dsinfectant appliques. Cependant, cette augmentation entranerait celle de la formation de sous-produits avec dpassement possible des normes de potabilit de l'eau, et avec l'apparition de saveurs ("got de chlore" de l'eau) conduisant des plaintes des consommateurs. Pour limiter la reviviscence bactrienne en rseau de distribution, l'action doit tre mene sur la cause de la prsence de ces microorganismes et de leur multiplication, soit la matire organique biodgradable et l'apport de microorganismes. Ceci suppose une optimisation des filires de traitement, avec notamment l'intgration de techniques membranaires.

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TABLE DES MATIERES


Introduction ......................................................................................................... 1 Les rseaux de distribution ................................................................................ 2
1 Les rseaux de distribution deau potable en tant que racteur complexe ........................ 2 2 Racteur biphasique / biologique ...................................................................................... 3 2.1 Racteur biphasique .................................................................................................... 3 2.2 Racteur biologique..................................................................................................... 4 3 Evolution de la qualit de leau le long dun systme de distribution deau potable........ 5 4 Notion de biofilm .............................................................................................................. 6 4.1 Dfinition .................................................................................................................... 6 4.2 Origine des microorganismes...................................................................................... 7 4.3 Consquences du dveloppement dun biofilm dans les rseaux ............................... 7 4.3.1 Consquences de la prsence dun biofilm sur le rseau de distribution ........... 7 4.3.2 Consquences du dveloppement de biofilm pour les consommateurs ............. 8

Biodiversit des Rseaux de Distribution d'Eau Potable ................................ 9


1 Dveloppement dun biofilm bactrien au sein des rseaux ............................................. 9 1.1 Formation du biofilm .................................................................................................. 9 1.1.1 Transport des microorganismes ....................................................................... 10 1.1.2 Attachement des microorganismes................................................................... 10 1.1.3 Colonisation du support ................................................................................... 10 1.2 Organisation des biofilms au sein des systmes de distribution deau potable......... 12 1.2.1 Structure des biofilms....................................................................................... 12 1.2.2 Rpartition le long dun rseau de distribution ................................................ 13 1.3 Rgulation physique de la croissance des biofilms ................................................... 13 2 Populations microbiennes des rseaux de distribution.................................................... 14 2.1 Bactries .................................................................................................................... 14 2.2 Protozoaires............................................................................................................... 16 2.3 Autres microorganismes............................................................................................ 18 2.4 Les macroinvertbrs ................................................................................................ 19 3 Formation de chane trophique........................................................................................ 19 3.1 Relation proies-prdateurs......................................................................................... 19 3.2 Rgulation biologique de la croissance du biofilm ................................................... 20

Facteurs contrlant la Reviviscence Bactrienne........................................... 23


1 Nature des matriaux de canalisations ............................................................................ 23 60

2 3

1.1 Les matriaux mtalliques......................................................................................... 23 1.2 Les matriaux organiques.......................................................................................... 24 La temprature................................................................................................................. 26 Les nutriments ................................................................................................................. 26 3.1 Les nutriments carbons............................................................................................ 26 3.1.1 Composition de la matire organique des eaux de distribution ....................... 26 3.1.2 Caractre de biodgradabilit de la matire organique .................................... 27 3.1.3 Reviviscence microbienne................................................................................ 28 3.2 Autres nutriments ...................................................................................................... 29 La dsinfection ................................................................................................................ 30 4.1 Principe...................................................................................................................... 30 4.2 La demande en dsinfectant ...................................................................................... 31 4.3 Oxydants utiliss en dsinfection de l'eau potable .................................................... 31 4.3.1 Irradiation UV .................................................................................................. 32 4.3.2 Chlore ............................................................................................................... 33 4.3.3 Monochloramines............................................................................................. 33 4.3.4 Dioxyde de chlore ............................................................................................ 33 4.4 Phnomnes de rsistance aux dsinfectants ............................................................ 34 Prvention de la reviviscence bactrienne en rseau de distribution deau potable........ 35 5.1 Prvention en amont du rseau de distribution ......................................................... 36 5.2 Au niveau du rseau de distribution.......................................................................... 38 5.2.1 Entretien des rseaux........................................................................................ 38 5.2.2 Evaluation de l'innocuit microbiologique des matriaux ............................... 40

Rglementation .................................................................................................. 42
1 Rglementation vis--vis des matriaux en contact avec l'eau destine la consommation humaine................................................................................................... 42 1.1 Les matriaux utiliser ............................................................................................. 42 1.2 Cas des matriaux de type organique ........................................................................ 43 1.3 Cas des matriaux de type mtallique ....................................................................... 43 2 Rglementation vis--vis de l'eau destine la consommation humaine........................ 44 2.1 Contexte de la rglementation en matire deau destine la consommation humaine ................................................................................................................................... 44 2.2 Les analyses microbiologiques : nature, frquence................................................... 45 2.2.1 Paramtres microbiologiques ........................................................................... 45 bactriophages fcaux .................................................................................................. 45 2.2.2 Nature et frquences des analyses microbiologiques de l'eau potable ............. 45 2.2.3 les indicateurs utiliss en microbiologie de production d'eau potable ............. 47 2.3 Les bactries VBNC.................................................................................................. 51 2.3.1 Notion de bactries viables mais non cultivable .............................................. 51 2.3.2 Consquences sur le contrle de la qualit de l'eau potable............................. 52

61

Conclusion.......................................................................................................... 54 Table des Matires ............................................................................................ 60 Table des Figures............................................................................................... 62 Table des Tableaux............................................................................................ 63 Annexes............................................................................................................... 64

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TABLE DES FIGURES

Figure 1 : Schma dun rseau racteur ...................................................................................2 Figure 2 : Le rseau de distribution deau potable en tant que racteur biologique biphasique ...................................................................................................................................5 Figure 3 : Exemple de laltration de la qualit microbiologique le long dun systme de distribution deau potable..........................................................................................6 Figure 4 : Reprsentation schmatique de la formation et de la structure dun biofilm au sein dun rseau de distribution deau potable .................................................................11 Figure 5 : Comportement d'Escherichia coli introduit exprimentalement dans un rseau de distribution d'eau .......................................................................................................15 Figure 6 : Schma de la chane alimentaire des rseaux de distribution..................................20 Figure 7 : Densit d'E. coli dans des rseaux aliments par un eau filtre sur CAG et une eau nanofiltre..................................................................................................................21 Figure 8 : Production bactrienne en millions de cellules par millilitre ..................................25 Figure 9 : Fluctuations des concentrations en COD et COA, et des abondances en bactries en suspension (dnombrement par pifluorescence), en fonction du temps de rsidence hydraulique dans un rseau de distribution deau potable ........................................28 Figure 10 : Relation entre la teneur en CODB et les cellules bactriennes fixes ou planctoniques.............................................................................................................29 Figure 11 : Evolution de la densit bactrienne totale et des bactries cultivables fixes, dans un rseau exprimental de distribution aliment avec une eau CAG chlore en continu pendant 14 jours ...........................................................................................35 Figure 12 : Classification physiologique schmatique des bactries .......................................51 Figure 13 : Comparaison des dnombrements bactriens deau de rseau en utilisant les mthodes normalises, des mthodes moins slectives et le dnombrement total....53

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TABLE DES TABLEAUX

Tableau I : Quelques espces bactriennes mises en vidence dans divers rseaux de distribution deau potable post-chlore...............................................................14 Tableau II : Concentrations en protozoaires, observables au sein de rseau de distribution aliment par un eau filtre sur CAG....................................................................17 Tableau III : Liste de genres et espces de protozoaires rencontrs dans diffrents rseaux franais de distribution deau potable .................................................................17 Tableau IV : Liste de genres dalgues et champignons dnombrs dans diffrents rseaux de distribution deau potable....................................................................................19 Tableau V : Relargage de carbone organique assimilable pour diffrents matriaux organiques et incidence sur la croissance bactrienne...........................................................25 Tableau VI : Valeurs guides indicatives pour minimiser le potentiel nutritif..........................29 Tableau VII : Liste des CT requis, selon le type d'oxydant, pour l'inactivation de 90% d'un organisme cible ...................................................................................................32 Tableau VIII : Dose ncessaire pour l'inhibition d'organismes cibles par irradiation UV.......32 Tableau IX : Efficacit d'limination des matires organiques et des cellules bactriennes par un procd de nanofiltration appliqu une eau filtre sur sable ou une eau ozone puis filtre sur CAG ................................................................................38 Tableau X : Tests de conformit microbiologique pour diffrents matriaux selon les test anglais et hollandais ............................................................................................40 Tableau XI : Paramtres microbiologiques..............................................................................45 Tableau XII : Les diffrents types danalyses bactriologiques ..............................................46 Tableau XIII : Frquence minimale des chantillonnage et des analyses pour les eaux destines la consommation humaine .........................................................47 Tableau XIV : Description et usage des principaux indicateurs utiliss en microbiologie de leau potable ........................................................................................................50

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ANNEXES

Annexe 1 : Schma des phnomnes intervenant dans la biocorrosion bactrienne. Annexe 2 : Principales caractristiques des tests anglais BS6920 et Hollandais BFP-method. Annexe 3 : Mesure des effets des matriaux organiques sur la qualit des eaux destines la consommation humaine. Annexe 4 : Frquences annuelles d'analyses microbiologiques.

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Annexe 1

Schma des phnomnes intervenant dans la biocorrosion bactrienne (d'aprs Chantereau)


Fe2O3 + 3H2O

2Fe(OH)2 + O2 + H2O

2Fe(OH)3 M(OH)3
ANAEROBIOSE

Ferrobactrie H2S Fe

Chimio lithotrophisme

CO2

Chimio organotrophisme

Sulfatorducteur 3Fe(OH)2

4H2O

CH2COOH

FeS

4Fe = 4Fe2+ + 8e-

8 eSulfobactrie S

8H+ + 8e- = 8H

SO4

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Annexe 2

Principales caractristiques des tests anglais BS6920 et Hollandais BFP-method, de dtermination de l'innocuit microbiologique des matriaux vis--vis de l'eau transporte (Mathieu et al, 1998). Caractristiques Test Anglais BS 6920 O2 dissous consomm par la biomasse bactrienne prsente dans l'eau en contact avec le matriau + paramtre supplmentaire : dnombrement bactrien par pifluorescence Test Hollandais BFP-method Dosage de l'ATP des bactries du biofilm dvelopp sur les matriaux + estimation du potentiel de formation du biofilm (BFP) + paramtre supplmentaire : dnombrement bactrien par pifluorescence

Paramtres Mesures

Seuil de 2,3 mg O2.L-1 500 pg ATP.cm-2 conformit Nombre 3 (1 prouvette par rcipient de 30 (15 prouvettes rparties en deux d'prouvettes trempage) rcipients de trempage) par matriau Rapport 0,16 cm2.ml-1 0,013 cm2.ml-1 Surface/Volume Prparation des Rinage pendant 10 minutes avec l'eau Rinage pendant 1 heure, sous courant d'eau prouvettes utilise pour le test froide du robinet - dopage en azote et phosphore, - 600 ml d'eau d'Evian, Prparation de - dchloration partielle de l'eau, - 5 ml d'eau de rivire (inoculum), l'chantillon - ajout de 100 ml d'inoculum, filtre sur 5 m pour liminer la d'eau - ajout de 900 ml d'eau. majorit des protozoaires. - incubation de 7 semaines, - incubation de 16 semaines, 25C et Conditions 30C et l'obscurit, l'obscurit, exprimentales - changement d'eau pendant - pas de renouvellement de l'eau. l'incubation Tmoin positif paraffine caoutchouc Tmoin ngatif verre verre

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Annexe 3

Mesure des effets des matriaux organiques sur la qualit des eaux destines la consommation humaine Mthodes d'essai et critres d'acceptation
(Source : circulaire DGS/VS4/N94/9 du 25 janvier 1994) Sont concerns par ces essais les matriaux organiques utiliss pour la fabrication, la rparation et la rhabilitation des lments suivants : - les canalisations (tubes et raccords) des rseaux de distribution extrieurs aux btiments ainsi que les joints utiliss pour leur assemblage, - les tubes et raccords des installations intrieures de distribution d'eau froide quipant les immeubles, - les rservoirs de stockage et de mise sous pression, les surpresseurs, les bches de rupture et les cuves d'adoucisseurs mis en place dans les installations de distribution, publiques ou prives. Ces essais concernent les matriaux fabriqus en usine et ceux fabriqus et mis en uvre in situ et notamment les matriaux plastiques y compris les peintures et revtements intrieurs, les matriaux bitumeux, les matriaux base de liants hydrauliques au sein desquels ont t introduits des ajouts ou des adjuvants organiques, des caoutchouc et des lastomres. La vrification de la conformit des rsultats des essais est ralise : - en calculant, pour chaque paramtre dfini ci-aprs, la diffrence entre les rsultats des analyses effectues sur les immersions et ceux obtenus sur les eaux tmoins, - en comparant cette diffrence avec l'augmentation maximale admissible.

Rsultats de l'essai de criblage rapide


L'augmentation du seuil de got doit tre infrieure ou gale 2. L'augmentation de l'oxydabilit au KmnO4 (mesure en milieu acide) doit tre infrieure ou gale : - ammonium 0,1 mg NH4.L-1 - nitrite 0,02 mg NO2.L-1 - carbone organique total 1 mg C.L-1

Rsultats de l'essai de criblage analytique


Pour les substances suivantes, gale : - carbone organique total - mercure - cadmium - slnium l'augmentation de la concentration doit tre infrieure ou 1 mg C.L-1 0,2 g Hg.L-1 1 g Cd.L-1 2 g Se.L-1 67

antimoine chrome arsenic plomb nickel PCB Ttrachlorure de carbone Trichlorothylne Ttrachlorothylne Chloroforme

2 g Sb.L-1 10 g Cr.L-1 10 g As.L-1 10 g Pb.L-1 10 g Ni.L-1 0,1 g.L-1 3 g.L-1 30 g.L-1 10 g.L-1 30 g.L-1

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Annexe 4

Frquences annuelles d'analyses microbiologiques (chantillons prlevs la ressource et en usine)


Frquences annuelles d'chantillonnage RP RS P1 Infrieur 100 1 De 100 399 1/2 2 2,5 De 400 999 1/2 2 2,5 De 1 000 1 999 1/2 2 3,5 De 2 000 5 999 1 3 7 De 6 000 9 999 2 6 8 De 10 000 19 999 2 6 14 De 20 000 29 999 4 12 22 De 30 000 59 999 4 12 42 De 60 000 99 999 4 12 70 Suprieur ou gal 100 000 4 12 140 (Source : Dcret n91-527 du 7 mars 1991) R : chantillonnage ralis au point de puisage, avant traitement : - RP : eaux souterraines - RS : eaux superficielles P : chantillonnage ralis aprs traitement et avant refoulement ou au point de puisage en l'absence de traitement. Dbit journalier (m3/jour)

Frquences annuelles d'analyse microbiologique (chantillons prlevs en distribution)


Distribution (D) Eau non dsinfecte Eau dsinfecte 500 habitants 2 4 2 000 habitants 6 5 000 habitants 12 10 000 habitants 24 24 30 000 habitants 60 50 000 habitants 90 100 000 habitants 150 240 150 000 habitants 210 300 000 habitants 390 720 Pour les populations infrieures 500 habitants, le nombre d'analyses en distribution est gal 2 dans le cas d'eaux non dsinfectes et 4 dans le cas d'eaux dsinfectes. Pour les populations suprieures 500 habitants, le nombre d'analyses effectuer est obtenu par interpolation linaire entre les chiffres fixs dans la colonne D, le chiffre tant arrondi la valeur entire la plus proche. Pour les populations suprieures 300 000 habitants, le nombre d'analyses effectuer est obtenu par extrapolation linaire, le chiffre tant arrondi la valeur entire la plus proche. (Source : Dcret n91-527 du 7 mars 1991). Population desservie

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