PRACTICA 2

CONOCIMIENTO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO PTICO LAB. DE BIOLOGIA

INTRODUCCIN
El microscopio es el aparato ms importante para los bilogos, ya que permite hacer observaciones detalladas de la estructura de los seres vivos (Clulas y Tejidos. El microscopio (de micro-, , pequeo, y scopio, , observar) es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeos para ser vistos a simple vista. El tipo ms comn y el primero que se invent es el microscopio ptico. Se trata de un instrumento pticoque contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refraccin. La ciencia que investiga los objetos pequeos utilizando este instrumento se llama microscopa. Partes esenciales de los microscopios Los microscopios modernos pueden estar compuestos de diferentes componentes. En la imagen contigua se enumeran las partes ms importantes de los microscopios.

1. Ocular 2. Brazo / soporte del tubo 3. Platina 4. Ajuste macromtrico y micromtrico 5. Ajuste de altura de platina 6. Pie 7. Fuente de luz 8. Condensador 9. Pinzas 10.Objetivo 11.Revolver 12.Tubo

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MICROSCOPIO

Microscopio, cualquiera de los distintos tipos de instrumentos que se utilizan para obtener una imagen aumentada de objetos minsculos o detalles muy pequeos de los mismos. Microscopio ptico El tipo de microscopio ms utilizado es el microscopio ptico, que se sirve de la luz visible para crear una imagen aumentada del objeto. El microscopio ptico ms simple es la lente convexa doble con una distancia focal corta. Estas lentes pueden aumentar un objeto hasta 15 veces. Por lo general se utilizan microscopios compuestos, que disponen de varias lentes con las que se consiguen aumentos mayores. Algunos microscopios pticos pueden aumentar un objeto por encima de las 2.000 veces. El microscopio compuesto consiste en dos sistemas de lentes, el objetivo y el ocular, montados en extremos opuestos de un tubo cerrado. El objetivo est compuesto de varias lentes que crean una imagen real aumentada del objeto examinado. Las lentes de los microscopios estn dispuestas de forma que el objetivo se encuentre en el punto focal del ocular. Cuando se mira a travs del ocular se ve una imagen virtual aumentada de la imagen real. El aumento total del microscopio depende de las longitudes focales de los dos sistemas de lentes. El equipamiento adicional de un microscopio consta de un armazn con un soporte que sostiene el material examinado y de un mecanismo que permite acercar y alejar el tubo para enfocar la muestra. Los especmenes o muestras que se examinan con un microscopio son transparentes y se observan con una luz que los atraviesa, y se suelen colocar sobre un rectngulo fino de vidrio. El soporte tiene un orificio por el que pasa la luz. Bajo el soporte se encuentra un espejo que refleja la luz para que atraviese el espcimen. El microscopio puede contar con una fuente de luz elctrica que dirige la luz a travs de la muestra. La fotomicrografa, que consiste en fotografiar objetos a travs de un microscopio, utiliza una cmara montada por encima del ocular del microscopio. La cmara suele carecer de objetivo, ya que el microscopio acta como tal. El trmino microfotografa, utilizado a veces en lugar de fotomicrografa, se refiere a una tcnica de duplicacin y reduccin de fotografas y documentos a un tamao minsculo para guardarlos en un archivo.

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Los microscopios que se utilizan en entornos cientficos cuentan con varias mejoras que permiten un estudio integral del espcimen. Dado que la imagen de la muestra est ampliada muchas veces e invertida, es difcil moverla de forma manual. Por ello los soportes de los microscopios cientficos de alta potencia estn montados en una plataforma que puede moverse con tornillos micromtricos. Algunos microscopios cuentan con soportes giratorios. Todos los microscopios de investigacin cuentan con tres o ms objetivos montados en un cabezal mvil que permite variar la potencia de aumento. Microscopios pticos especiales Hay diversos microscopios pticos para funciones especiales. Uno de ellos es el microscopio estereoscpico, que no es sino un par de microscopios de baja potencia colocados de forma que convergen en el espcimen. Estos instrumentos producen una imagen tridimensional. El microscopio de luz ultravioleta utiliza el rango ultravioleta del espectro luminoso en lugar del rango visible, bien para aumentar la resolucin con una longitud de onda menor o para mejorar el detalle absorbiendo selectivamente distintas longitudes de onda de la banda ultravioleta. Dado que el vidrio no transmite las longitudes de onda ms cortas de la luz ultravioleta, los elementos pticos de estos microscopios estn hechos con cuarzo, fluorita o sistemas de espejos aluminizados. Adems, dado que la radiacin ultravioleta es invisible, la imagen se muestra con fosforescencia (vase Luminiscencia), en fotografa o con un escner electrnico. El microscopio de luz ultravioleta se utiliza en la investigacin cientfica. El microscopio petrogrfico o de polarizacin se utiliza para identificar y estimar cuantitativamente los componentes minerales de las rocas gneas y las rocas metamrficas. Cuenta con un prisma de Nicol u otro tipo de dispositivo para polarizar la luz que pasa a travs del espcimen examinado (vase ptica: Polarizacin de la luz). Otro prisma Nicol o analizador determina la polarizacin de la luz que ha pasado a travs del espcimen. El microscopio tiene un soporte giratorio que indica el cambio de polarizacin acusado por el espcimen. El microscopio en campo oscuro utiliza una luz muy intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espcimen. El campo de visin del objetivo se encuentra en la zona hueca del cono de luz y slo recoge la luz que se refleja en el objeto. Por ello las porciones claras del espcimen aparecen como un fondo oscuro y los objetos minsculos que se estn analizando aparecen como una luz brillante sobre el fondo. Esta forma de iluminacin se utiliza para analizar elementos biolgicos transparentes y sin manchas, invisibles con iluminacin normal. El microscopio de fase ilumina el espcimen con un cono hueco de luz, como en el microscopio en campo oscuro. Sin embargo en el microscopio de fase el cono de luz es ms estrecho y entra en el campo de visin del objetivo, que contiene un dispositivo en forma de anillo que reduce la intensidad de la luz y provoca un cambio de fase de un cuarto de la longitud de onda. Este tipo de iluminacin provoca variaciones minsculas en el ndice de refraccin de un espcimen

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transparente, hacindolo visible. Este tipo de microscopio es muy til a la hora de examinar tejidos vivos, por lo que se utiliza con frecuencia en biologa y medicina. Entre los microscopios avanzados se encuentran el microscopio de campo cercano, con el que pueden verse detalles algo menores a la longitud de onda de la luz. Se hace pasar un haz de luz a travs de un orificio diminuto y se proyecta a travs del espcimen a una distancia equivalente a la mitad del dimetro del orificio, formando una imagen completa.

Microscopio electrnico La potencia amplificadora de un microscopio ptico est limitada por la longitud de onda de la luz visible. El microscopio electrnico utiliza electrones para iluminar un objeto. Dado que los electrones tienen una longitud de onda mucho menor que la de la luz pueden mostrar estructuras mucho ms pequeas. La longitud de onda ms corta de la luz visible es de alrededor de 4.000 ngstroms (1 ngstrom es 0,0000000001 metros). La longitud de onda de los electrones que se utilizan en los microscopios electrnicos es de alrededor de 0,5 ngstroms. Todos los microscopios electrnicos cuentan con varios elementos bsicos. Disponen de un can de electrones que emite los electrones que chocan contra el espcimen, creando una imagen aumentada. Se utilizan lentes magnticas para crear campos que dirigen y enfocan el haz de electrones, ya que las lentes convencionales utilizadas en los microscopios pticos no funcionan con los electrones. El sistema de vaco es una parte relevante del microscopio electrnico. Los electrones pueden ser desviados por las molculas del aire, de forma que tiene que hacerse un vaco casi total en el interior de un microscopio de estas caractersticas. Por ltimo, todos los microscopios electrnicos cuentan con un sistema que registra o muestra la imagen que producen los electrones. Hay dos tipos bsicos de microscopios electrnicos: el microscopio electrnico de transmisin (Transmission Electron Microscope, TEM) y el microscopio electrnico de barrido (Scanning Electron Microscope, SEM). Un TEM dirige el haz de electrones hacia el objeto que se desea aumentar. Una parte de los electrones rebotan o son absorbidos por el objeto y otros lo atraviesan formando una imagen aumentada del espcimen. Para utilizar un TEM debe cortarse la muestra en capas finas, no mayores de un par de miles de ngstroms. Se coloca una placa fotogrfica o una pantalla fluorescente detrs del objeto para registrar la imagen aumentada. Los microscopios electrnicos de transmisin pueden aumentar un objeto hasta un milln de veces. Un microscopio electrnico de barrido crea una imagen ampliada de la superficie de un objeto. No es necesario cortar el objeto en capas para observarlo con un SEM,

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sino que puede colocarse en el microscopio con muy pocos preparativos. El SEM explora la superficie de la imagen punto por punto, al contrario que el TEM, que examina una gran parte de la muestra cada vez. Su funcionamiento se basa en recorrer la muestra con un haz muy concentrado de electrones, de forma parecida al barrido de un haz de electrones por la pantalla de una televisin. Los electrones del haz pueden dispersarse de la muestra o provocar la aparicin de electrones secundarios. Los electrones perdidos y los secundarios son recogidos y contados por un dispositivo electrnico situado a los lados del espcimen. Cada punto ledo de la muestra corresponde a un pxel en un monitor de televisin. Cuanto mayor sea el nmero de electrones contados por el dispositivo, mayor ser el brillo del pxel en la pantalla. A medida que el haz de electrones barre la muestra, se presenta toda la imagen de la misma en el monitor. Los microscopios electrnicos de barrido pueden ampliar los objetos 100.000 veces o ms. Este tipo de microscopio es muy til porque, al contrario que los TEM o los microscopios pticos, produce imgenes tridimensionales realistas de la superficie del objeto. Se han desarrollado otros tipos de microscopios electrnicos. Un microscopio electrnico de barrido y transmisin (Scanning Trasnmission Electron Microscope, STEM) combina los elementos de un SEM y un TEM, y puede mostrar los tomos individuales de un objeto. El microanalizador de sonda de electrones, un microscopio electrnico que cuenta con un analizador de espectro de rayos X, puede analizar los rayos X de alta energa que produce el objeto al ser bombardeado con electrones. Dado que la identidad de los diferentes tomos y molculas de un material se puede conocer utilizando sus emisiones de rayos X, los analizadores de sonda de electrones no slo proporcionan una imagen ampliada de la muestra, como hace un microscopio electrnico, sino que suministra tambin informacin sobre la composicin qumica del material. Microscopio de sonda de barrido En los microscopios de sonda de barrido se utiliza una sonda que recorre la superficie de una muestra, proporcionando una imagen tridimensional de la red de tomos o molculas que la componen. La sonda es una afilada punta de metal que puede tener un grosor de un solo tomo en su extremo. Un tipo importante de microscopio de sonda de barrido es el microscopio de tnel de barrido (siglas en ingls de Scanning Tunelling Microscope, STM) desarrollado en 1981. Este microscopio utiliza un fenmeno de la fsica cuntica, denominado efecto tnel, para proporcionar imgenes detalladas de sustancias conductoras de electricidad. La sonda se coloca a una distancia de pocos ngstroms de la superficie del material y se aplica un voltaje pequeo entre la superficie y la sonda. A causa de la poca distancia entre el material y la sonda algunos electrones se escapan a travs del hueco, generando una corriente. La magnitud de la corriente del efecto tnel depende de la distancia entre la superficie y la sonda. El flujo de corriente es mayor cuando la sonda se acerca al material y disminuye cuando se aleja. A medida que el mecanismo de barrido mueve la sonda por encima de la superficie, se ajusta de modo automtico la altura de la sonda para mantener constante la corriente del efecto tnel. Estos ajustes minsculos permiten dibujar las ondulaciones de la

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superficie. Despus de muchas pasadas hacia adelante y hacia atrs se utiliza una computadora para crear una representacin tridimensional del material. Otro tipo de microscopio de sonda de barrido es el microscopio de fuerza atmica (Atomic Force Microscope, AFM), que no emplea la corriente de efecto tnel y que por lo tanto puede utilizarse tambin en materiales no conductores. A medida que la sonda se mueve a lo largo de la superficie de la muestra los electrones de la sonda de metal son repelidos por las nubes electrnicas de los tomos de la misma. La altura de la sonda se ajusta de modo automtico para mantener constante la fuerza recibida. Un sensor registra el movimiento ascendente y descendente de la sonda y entrega la informacin a una computadora, que a su vez la utiliza para dibujar una imagen tridimensional de la superficies pcimenes

OBJETIVOS
Aprender la forma correcta de transportar el microscopio. Conocer las partes y sistemas que conforman el microscopio. Adquirir por medio del uso del microscopio, la destreza necesaria para manejarlo y poder realizar observaciones precisas y confiables (enfocar correctamente).

MATERIALES Y REACTIVOS
Cuaderno de notas Tijeras Microscopio ptico Papel cebolla o seda Portaobjetos

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Pao de algodn Cubreobjetos 3 muestras de Telas Colores Gotero con agua.

PROCEDIMIENTO
1. El profesor explicar cmo se debe manejar un microscopio, como sostenerlo, en qu posicin de la mesa se coloca y como debe limpiarse. 2. posteriormente describir el nombre y la funcin de las partes del Microscopio. 3. Usa la figura para sealar las partes del microscopio: oculares, revlver, objetivos, tornillos micromtrico y micromtrico, pinzas, platina, condensador, diafragma, brazo, espejo o lmpara, pie o base. 4. Las partes anteriores se deben agrupar con ayuda de un cuadro sinptico en los siguientes sistemas: ptico, mecnico y de iluminacin, explicando la funcin integrada de cada uno. El alumno ejercitara su conocimiento sobre el uso del microscopio utilizando diferentes tipos de muestras de telas: 1.- Transporta el microscopio con ambas manos poniendo una bajo la base y tomando el brazo con la otra. 2.- Coloca el microscopio aproximadamente a 20 cm del borde de la mesa, procurando que quede cerca de la toma de corriente. 3.- Conctalo a la toma de corriente. 4.- Coloca el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente. 5.- Ajusta el diafragma para tener la cantidad de luz necesaria. 6.- Coloca la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas. 7.- Acerque al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Esto debe hacerse mirando por un lado del microscopio y no a Travs del ocular. 8.- Mirando a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparacin con el macromtrico y cuando se observe la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque fino. 9.- Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente ser suficiente como mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la imagen, es preferible volver enfocar con el objetivo anterior y repetir la operacin desde el paso 7. 10.- Al terminar de observar, apaga el microscopio enrolla el cable, retira la Preparacin y limpia la platina con el pao de algodn y las lentes con el papel cebolla o seda. PREPARACIN DE LA MUESTRA: A) Con ayuda de las tijeras corta un pedazo de tela de aproximadamente 1cm2. B) Colcalo sobre un portaobjetos limpio y seco.

C) Pon unas gotas de agua con ayuda de un gotero y cuando esta se Humedezca, coloca el cubreobjetos sobre ella, evitando que se formen burbujas. D) Coloca la muestra sobre la platina y sigue los pasos descritos anteriormente desde el numero 7. E) Elabora un esquema para cada tipo de muestra, con sus respectivas observaciones.

CUESTIONARIO
1. Tu microscopio tiene una lmpara o un espejo? R= SI, para ver mejor las sustancias o bacterias 2.- Qu tipo de diafragma tiene tu microscopio? R= De vidrio 3.- La platina, Se aleja o se acerca del lente objetivo cuando giras el tornillo macromtrico hacia atrs? R= se aleja 4.- Suponiendo que el poder de resolucin del lente ocular es de 10x Cul ser el aumento con el objetivo de 40x? R= Pues las cosas se vern mas grandes 5.- A qu se refieren los trminos de seco dbil, seco fuerte e inmersin? R= a los cambios que se observan en el microscopio

RELACIONA AMBAS COLUMNAS. COLOCA LOS NMEROS CORRESPONDIENTES EN LOS ESPACIOS DE LA COLUMNA DE LA DERECHA. 1. Sirve para cambiar los lentes objetivos 2. Est cerca del objeto 3. Da un enfoque fino 4. Sirve para transportar el microscopio micromtrico 5. Regula la intensidad de la luz 6. Est cerca del ojo 7. Da estabilidad al microscopio 8. Sostiene los lentes oculares 9. Fija la preparacin 10. Sostiene la preparacin 11. Da un enfoque rpido 12. Concentra los rayos de la luz ___Platina ___Pie o base ___Revlver ___Lente objetivo ___Tubo ___Condensador ___Pinzas ___Brazo ___Diafragma ___Tornillo Micromtrico ___Lente ocular ___Tornillo

CONCLUSIONES

Con este tipo de prctica aprendimos la utilizacin del microscopio, as como sus partes fundamentales que tiene dicho instrumento, as como los puntos estratgicos que tiene este, sus orgenes y su finalidad la cual es la observacin a travs de la lente la cual permitir la observacin de cosas microscpicas las cuales se vern con los lentes en dimensiones observables. Moviendo las pinzas para la platina al igual que los tornillos macro y micromtrico hasta obtener un perfecto enfoque. Como parte de la prctica observemos muestras de vegetales: Cebollas, tomate y repollo. Fue muy interesante ver como esta constituido, ya que es algo que el ojo humano por si solo no puede captar.

BIBLIOGRAFIA

http://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio
http://www.pce-iberica.es/instrumentos-demedida/medidores/microscopios.htm http://www.definicionabc.com/ciencia/microscopio.php