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PRACTICA DE LABORATORIO DIAGNOSTICO Y RECONOCIMIENTO DE ENFERMEDADES K. Arteaga, K. Hernndez, W. Martnez.

UNIVERSIDAD DE CORDOBA FACULTAD DE CIENCIAS AGRCOLAS INGENIERA AGRONMICA

1. Introduccin El diagnstico de enfermedades de las plantas es uno de los aspectos ms importantes en el proceso de la Proteccin Vegetal. En l se integran conocimientos de Fitopatologa, Gentica, Fisiologa Vegetal, Edafologa, Climatologa, Manejo agronmico y Estadstica, con la finalidad de tomar decisiones acertadas en el momento en que se requieran. Este se pude definir como el arte cientfico de reconocer por observaciones, estudio o experimentacin, la naturaleza de la causa de un problema y los factores que inciden en su desarrollo. El diagnostico a nivel de laboratorio, nos permite identificar cuales son los signos, sntomas y agente causal que pueden estar causando la enfermedad. Las tcnicas en el laboratorio mas usadas para la identificacin de signos o agentes causales son muy diversas, estas tcnicas van desde tinciones, marcadores moleculares, hasta simples rapados a las

muestras, y realizar las previas observaciones en el estereoscopio y microscopio. 2. Objetivos 2.1 General: Crear o generar las herramientas necesarias para diagnosticar, mediante sntomas, signos y anlisis sencillo de laboratorio los agentes causales de las enfermedades. 2.2 Especficos: Detectar los factores ms importantes en el diagnstico de una enfermedad para su identificacin.

Establecer procedimientos de diagnstico apropiado para cada uno de los agentes patgenos. Reconocer las diferentes estructuras reproductivas de los sntomas.

3. Materiales y Mtodos o o o o o o o o o o o o o Materiales Estereoscopio Microscopio Cubre objetos Porta objetos Aguas de insercin Cuchilla Azul de tripan-metileno Cinta adhesiva Mecheros Alcohol Becker Muestras vegetales Caja de petri

factor ambiental, sino tambin por cul de ellos. para hacer un diagnstico acertado, es necesario hacer un examen detallado de los sntomas, as como un estudio de otras caractersticas aun cuando no estn relacionadas con los sntomas propios de esa enfermedad. (Cabezas O, 2004). Enfermedades infecciosas Las enfermedades ocasionadas por patgenos, hongos, bacterias, plantas superiores parsitas, nematodos, virus, micoplasmas y protozoarios), se caracterizan por la presencia de esos patgenos en la superficie de sus plantas hospedantes (algunos hongos, bacterias, plantas superiores parsitas y nematodos) o dentro de ellas (la mayora de los patgenos). La presencia activa de esos patgenos en la superficie de una planta, podra indicar que probablemente son la causa de la enfermedad. En algunos casos, su deteccin e identificacin puede lograrse a simple vista (teniendo cierta experiencia) o mediante el uso de lentes de aumento (en el caso de algunos hongos, todas las plantas superiores parsitas y algunos nematodos) o, con mayor frecuencia, mediante el examen microscpico (en el caso de los hongos, bacterias y nematodos) Enfermedades no infecciosas En caso de que no se pueda localizar, cultivar o transmitir el patgeno de una planta enferma

Mtodos o Para la preparacin de las lminas los mtodos empleados fueron: o Cinta adhesiva o Raspado o Corte de tejido 4. MARCO TEORICO Diagnosis de las enfermedades de las plantas Para diagnosticar la enfermedad de una planta es conveniente determinar primero si esa enfermedad es ocasionada por un patgeno o por algn factor ambiental. En los casos en que manifiestan los sntomas caractersticos de una enfermedad, los signos del patgeno, resulta prcticamente fcil para una persona un tanto experimentada pueda determinar no slo si la enfermedad es ocasionada por un patgeno o un

podra suponerse entonces que la enfermedad es ocasionada por un factor abitico del medio. El nmero de factores ambientales que ocasionan enfermedades en las plantas es casi ilimitado, pero la mayora de ellos afectan a las plantas es casi ilimitado, pero la mayora de ellos afectan a las plantas al obstaculizar sus procesos fisiolgicos normales, ya sea que provoquen un exceso de una sustancia txica en el suelo o en el aire o la falta de una sustancia esencial como el agua, el oxgeno o los nutrientes minerales, o al ocasionar un valor extremo en las condiciones que permiten la vida de las plantas, tales como la temperatura, la humedad, el oxgeno, C02 o la luz. En ocasiones, resulta fcil hacer el diagnstico de un factor especfico del ambiente que ocasiona o ha ocasionado una enfermedad, mediante un cambio evidente en el ambiente, come es el caso de una inundacin, de una helada temprana o de una helada tarda. Algunos factores que permiten diagnosticar la causa de la enfermedad, pero la mayora de ellos ocasionan sntomas no especficos que dificultan el diagnstico preciso de la causa de la enfermedad, a no ser que se tenga conocimiento de las condiciones ambientales previas, los tratamientos aplicados con anterioridad, y otros datos de factores que hayan influido en el rea. DIAGNOSTICO POR TRADICIONALES METODOS

I. Conocimientos preliminares: - Tener conocimiento actualizado sobre la sintomatologa, ciclo patognico y epidemiologa de los principales fitopatogenos (Hongos, Bacterias, Virus, Nematodos, etc.) presentes en su zona de influencia. - Fenologa del los cultivos - Principales factores edafoclimaticos imperantes en su zona de accin. II. Pasos generales Observacin de sntomas Observacin de signos del patgeno: El signo en una enfermedad lo constituye el patgeno causante de la misma, el que puede estar presente en una de las diversas formas: Micelio, Exudaciones, Esporas y conidios, Recoleccin de datos del cultivo: la informacin recolectada en campo ser anotada en la ficha de diagnstico de plantas enfermas el cual tiene los siguientes componentes: Reporte clnico del diagnstico, proporciona el nombre comn de la enfermedad y el nombre cientfico del agente causal. De ser una enfermedad no infecciosa se reporta como negativo a la presencia de fitopatgenos (hongos, bacterias, virus o nematodos) segn sea el caso. Correlacin de lo observado con la bibliografa pertinente: Los resultados obtenidos del proceso de diagnostico deben ser corroborados con la bibliografa existente para cada tipo de enfermedad y agente causal.

5. METODOLOGIA Se nos fueron suministradas cinco muestras vegetales por el laboratorio, las cuales presentaban sntomas de enfermedad, estas se encontraban en diferentes cajas de petri, para su previa descripcin de signos y sntomas. Primero se realizaron las observaciones macroscpicas, para describir las muestras vegetales, despus se observo en el estereoscopio la muestra con el fin de identificar las zonas de la muestra donde se podran encontrar las estructuras reproductivas, que estaban afectando al tejido vegetal. Posterior a esto se utilizaron los diferentes mtodos para extraer las estructuras presentes en la muestra, dentro de los mtodos que se utilizaron se encontraba, raspado, corte de tejido, cinta adhesiva y agujas de diseccin. Se montaron las muestras al microscopio para realizar la previa identificacin de los signos y el agente causal de la enfermedad. 6. RESULTADOS Muestra #1: Pastos Johnson

Sntomas: la muestras presento manchas necrticas alargadas de color caf oscuro, rodeado por un halo de color amarillo, la necrosis va de los bordes hacia la parte central de la hoja, presenta muerte del tejido. Signos: conidiforos y conidios de Curvularia al igual que Conidios de saprofitos y Helmintosporium.

Muestra #2: lengua de suegra Sntomas: presenta necrosis en la parte apical de color caf oscuro, con unas pustulas de color blanco en el haz de la hoja.

Signos: presenta caros los cuales forman unas telaraas.

Muestra #3: malezas aljinoa.

Sntomas: presenta manchas necrticas circulares de color caf con un halo amarillo, el necrosamiento se inicia desde la parte apical hasta cubrir toda la hoja terminando en una muerte descendente del tejido. Signos: para observar los signos se utilizo el mtodo de raspado, la muestra presento estructuras de picnidios. Muestra #5 maracuy

Sntomas: presenta pstulas de roya de color amarillo cremoso y blanco. Signos: uredos. presenta estructuras de

Sntomas: presenta un amarillamiento en las hojas, ciertas lesiones hmedas, y hay presencia de bacterias. Signos: para observar los signos de la muestra se hizo un corte de tejido posteriormente se someti esta con el tinte azul de metileno y se observo gran cantidad de bacterias que estaban en movimiento.

Muestra #4: planta ornamental

7. ANLISIS DE REULTADOS Muestra #1 pasto Johnson: en algunas gramneas se ha reportado el ataque de Curvularia sp. Ocasionando diversas manchas y lesiones foliares. (De chaluat, 1994). Frecuentemente se observa un amarillamiento en el pasto, y el csped se pone ralo. Cuando se observa detalladamente, se puede ver unas manchas cafs a negras con centros grises en las hojas o en la lgula. Cuando las hojas ms viejas se infectan se ponen arrugadas y se marchitan. Los sntomas tpicos del hongo Helminthosporrium son lesiones necrticas, elpticas y largas de color caf claro en el centro con mrgenes oscuros (Fig. 9). Las lesiones pueden ser de varias manchas, al juntarse, dan a la hoja una apariencia de quemado. (Subero, 2007) La enfermedad que puede estar presentando esta planta es conocida como Decaimiento O Mancha Foliar Por Curvularia. Muestra #2 Lengua de suegra: los caros son pequeos insectos similares a las araas son casi invisibles para el ojo humano, pero puede perfectamente ver el dao que causan. Los caros araa succionan los jugos de las hojas de las plantas de interiores que causa que se tornen amarillentas con un brillo plateado y con frecuencia se caen. Generalmente se congregan en la cara inferior de las hojas, y si la plaga

es muy grande, ver las telaraas all. (BAYER, 2008) Las pstulas de estos insectos son de color blanco o cremas dependiendo la especie del acaro, frecuentemente ponen sus huevos en el envs de las hojas. Estos pueden encontrarse en cualquier planta desde cultivos como algodn hasta plantas ornamentales o malezas las cuales presentan sntomas similares. Muestra 3# malezas aljinoa: Muchas especies de royas son patgenos altamente especficos de plantas vasculares. Las royas, llamados as por sus uredinosporas rojas, dispersadas por el aire, son parsitos obligados. (Bayer crop Science, 2007) Algunas gramneas son hospederas de las royas aparece primeramente en las hojas basales. Se presentan como pequeas pstulas de color amarillo, dispuestas ordenadamente a lo largo de las venas de las hojas, a lo largo de los. Cuando el ataque es muy severo, la lamina foliar se necrosa y se desprende longitudinalmente. Muestra #4 planta ornamental: con la informacin que nos fue suministrados, y las observaciones hechas en el laboratorio no se pudo reconocer el agente causal o el nombre de la enfermedad, debido a que no se encuentra una revisin bibliogrfica que nos oriente a unas descripciones de la enfermedad que presentaba la muestra numero 4. Muestra #5 Maracuy: La enfermedad mas registrada causadas por bacterias en la zonas foliar de la

plantas de maracuy es pos Xanthomonas campestri PV. Pasiflora tambin conocida como mancha aceitosa. Que tambin puede causar marchitamiento en la parte foliar de la planta causando la muerte total del tejido. 8. CONCLUSION o Para realizar un diagnostico en el laboratorio es necesario describir detalladamente los sntomas y los signos de la enfermedad. o En la descripcin de un sntoma muchas muestras presentan similitudes y no es fcil el diferenciar los sntomas causados por ataques de patgenos y el de insectos, por lo que hay que recurrir al diagnostico de laboratorio y revisin de literatura. o Dependiendo el agente causal as se dar el sntoma en la plantas o Algunas malezas sirven de hospederos de patgenos o En el diagnostico de enfermedades se debe conocer los tipos de factores que estn afectado el cultivo para poder diagnosticar. 9. BIBLIOGRAFIA o Cabezas, O. 2004, Diagnostico y evaluacin de plagas, http://www.senasa.gob.pe/servicio s/intranet/capacitacion/cursos/curs o_tingo_maria/diagnostico_evalua cion_plagas_1.pdf. (accedido 2503-2010) o Madia, M. Perris, S. Hongos patgenos en semillas de especies forrajeras tropicales, http://ciat-

library.ciat.cgiar.org/Articulos_Ciat /Vol16_rev1_ao94_art9.pdf (Accedido 24-03-2010) o http://www.nacom.es/Saludalia/we b_saludalia/vivir_sano/doc/nutricio n/doc/cereales.htm#Indice o http://canales.laverdad.es/canalag ro/datos/herbaceos/cereales/cerea les.htm o http://www.terra.es/alimentacion/ar ticulo/html/ali22.htm

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