Recherche sur les plantes médicinales

Dr Souleymane FOFANA
Pharmacologie
CHUSS / INSSA
 Objectifs du cours
1. Citer les principales sources des médicaments

2. Décrire les étapes de la recherche et développement de

médicament à partir de végétaux

3. Citer 5 médicaments d’origine végétale en précisant leurs

indications thérapeutiques
 Plan du cours
Introduction
I. Rappel sur les sources de médicaments

II. Plantes comme source de médicament: Pourquoi?

III. Etapes de la recherche / développement

IV. Quelques médicaments d’origine végétale

 Introduction
❑ La nature pour l’homme: source de nourriture, de remède,
mais également de poison

❑ L’utilisation des sources naturelles comme les plantes, à des

fins thérapeutiques est très ancienne:
✓ Corpus Hippocraticum: utilisation de 230 plantes médicinales
(Hippocrate)

✓ De Materia medica: description de 600 plantes médicinales

(Dioscoride)

✓ Avant la colonisation de l’Afrique, les peuples se soignaient

presqu’intégralement par les plantes
 Introduction
❑ Actuellement, l’usage des plantes médicinales est encore très
importante (80% la population mondiale se soigne exclusivement
avec des plantes)

❑ Le règne végétal a fourni à la médecine moderne plus de 60%

des agents thérapeutiques
 Introduction
❑ Une plante : résultat de la géologie et du climat
(géographie)

❑ Autant de plante que de zones géographiques

❑ Chaque ethnie a sa pratique médicinale

❑ Une plante « médicinale »: si les extraits de la plante

entière ou une partie sont utilisés dans le traitement de
maladie par un peuple
 Introduction
❑ Recherche sur les plantes médicinales : plusieurs domaines
Botanique:
✓ définir son identité, son habitat
✓ décrire sa morphologie et son anatomie,
✓ connaître son origine et son mode de reproduction
Ethnobotanique / ethnomédecine
✓ Décrire les différents usages
✓ Plantes et sociétés
Chimie
✓ Analyser sa composition chimique
Pharmacologie / Pharmacognosie
✓ Connaître les relations structure – activité (RSA)
pharmacologique des principes actifs
 Introduction
❑ Il est donc nécessaire de faire appel aux progrès de
plusieurs sciences et disciplines :
✓ écologie, sociologie, ethnologie, ethnobotanique,
✓ biologie, phytochimie, biochimie, pharmacologie, médecine
clinique, médecine préventive, etc
Pour une contribution plus efficiente.

❑ Recherche scientifique aura pour but:

✓ Trouver des cohérences pharmacologiques à l’usage des
plantes médicinales
✓ Déceler les risques de toxicité à l’usage des plantes
médicinales
✓ Standardiser l’usage
Rappel sur les sources de médicament
 Rappel sur les sources de médicament
Approches
Observations / observations cliniques
❖ Louis Pasteur et la pénicilline
❖ Guissou et. al & le FACA®

Criblages systématiques de substances

Passage « à l'aveugle » de produits sur un modèle expérimental d'étude

Conception orientée
Supports biologiques de la maladie (dysfonctionnement des systèmes
biologiques)
Substances endogènes bioactives
Chimiothèque
 Rappel sur les sources de médicament
Origines: Naturelle

❑ Végétale (Phytothérapie)
Médicament: Morphine, Quinine, Vincristine, Atropine

❑ Animale (Opothérapie)
Médicament: Insuline, héparine

❑ Minérales (Minéralothérapie)
Médicament: oligoéléments, argiles; pansements gastriques

❑ Micro-organismes
- Champignons: Penicillium notatum / Penicillium chrysogenum; P.
griseofuloum
- Bacilles : bacillus: colimycine, bacitracine
 Rappel sur les sources de médicament
Origine: Semi synthétiques ou synthèses partielles
A partir des substances naturelles
A partir de la Morphine: Codéine, codéthyline, héroïne
A partir l’hydrocortisone: Prednisone, Betamethasone

Origine: Synthèses totales

La plupart des médicaments d'aujourd'hui y dérivent. Elle peut être
faite au hasard ou dirigée.
 Recherche sur les plantes?
➢ Ethnobotanique / Ethnomédecine
➢ Botanique
➢ Chimie / Phytochimie
➢ Pharmacologie / Pharmacognosie
➢ Relation structure – activité (RSA)
➢ Formulation (Galénique) des phytomédicaments
➢ Phytovigilance
➢ Recherche et développement des médicaments à partir des
végétaux
Etapes de la recherche et développement
Etapes de la recherche et développement

Cycle de vie d’un médicament

 Etapes de la recherche et développement

Etapes pré cliniques

✓ Pharmacologie
✓ Toxicologie
✓ Chimie
✓ Galénique / Biopharmacie

Etapes cliniques
✓ Phase I: tolérance
✓ Phase II: Efficacité pharmacologique
✓ Phase III: Efficacité thérapeutique, étude de comparaison
✓ Homologation / octroi d’AMM
✓ Phase IV: Pharmacovigilance
 Etapes de la recherche et développement
❑ Ces étapes sont allégées pour les phytomédicaments ou
médicament traditionnel amélioré (MTA) Catégorie 1, 2

❑ Efficacité et l’innocuité: Evidence ethno médicale d’une

longue expérience d’utilisation
 Etapes pré cliniques
1. Point de départ
❖Enquête : ethnobotanique et ethnomédicale
❖Observation de la nature / environnement
❖Criblage systématique
❖Conception orientée
 Etapes pré cliniques
2. Préparation de la drogue végétale
✓ Collecte de la drogue végétale et authentification
❖Herbier
❖Géolocalisation (GPS)
❖Drogues végétales: feuille, fleur, écorce, racine, fruit, galle,
tige
❖Considération éthique: récolte des racines

✓ Séchage et pulvérisation
❖Abri du soleil, humidité
❖Poudre grossière
Etapes pré cliniques
3. Tests biologiques (in vitro ou in vivo
ou ex vivo):

➢ Pharmacologie
❖ Cellules, organes, tissus ou
organisme isolés (en culture)
❖ Diverses espèces animales : Souris
NMRI, Rat WISTAR, Cobaye
 Etapes pré cliniques
3. Tests biologiques (in vitro ou in vivo ou ex vivo):

➢ Pharmacologie

❖ Déterminer:
o les effets espérés des médicaments
o les effets sur les différents systèmes (cardiovasculaire,
nerveux …)
o la mise en évidence des mécanismes d'action et l'étude des
récepteurs
o Pharmacocinétique animale.
 Etapes pré cliniques
3. Tests biologiques (in vitro ou in vivo ou ex vivo):
➢ Toxicologie
❖ Toxicité aigue (DL50) et chronique
❖ Tératogénicité, embryotoxicité et foetotoxicité
❖ Toxicité sur la fertilité
❖ Risque péri et postnatal
❖ Risque cancérigène
❖ Risque mutagène
 Axe 3 : Matériels et méthodes (1)

Animaux de laboratoire et considérations éthiques

➢Souris NMRI femelles moins de 12 semaines

➢Rats Wistar males et femelles moins de 9 semaines.

➢Ligne directrice OCDE pour les essais des produits

chimiques (OCDE, 2001, 2008).

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 Axe 3: Matériels et méthodes (2)
Méthode d’évaluation de la toxicité générale aiguë

➢ Mise en condition des souris NMRI

- Pesé et mise à jeun de 14-16 heures avant test
- Six groupes de 10 souris : 5 M + 5 F (cages
différentes)

➢ Préparation des doses d’extrait

mg/kg pc + SGI 5% (à 2% Tween 80 si extrait apolaire)

➢ Mode d’administration: gavage oral

➢ Mise en observation: 14 jours, noter les

changements de comportement (agressivité,
somnolence, refus de s’alimenter) et la mortalité
éventuels.

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 Axe 3: Matériels et méthodes (3)
Méthode d’évaluation de la toxicité subaiguë ou
chronique
➢ Mise en condition des rats WISTAR
- Pesé et mise à jeun de 14 heures avant test
- Trois groupes de 10 rats : 5 M + 5 F (cages différentes)

➢ Préparation des doses d’extrait

mg/kg pc + SSI 0,9% ou SGI (à 2% Tween 80)

➢ Mode d’administration: gavage oral

➢ Mise en observation: ≥ 28 jours, changements de

comportement et mortalité éventuels, prélèvement de
sang et cœur, foie, poumons, rate, rein pour analyse
biologique

25
 Etapes pré cliniques

3. Phytochimie / chimie
✓ Extraction
❖ Solvants:
polaires (eau, méthanol, éthanol),
apolaires (n-hexane, chloroforme, dichlorométhane, acétate
d’éthyle)
Etapes pré cliniques
3. Phytochimie / chimie
✓ Extraction
❖ Techniques / matériel:
o Macération (soxhlet, percolation,
sous agitation magnétique)
o Décoction (plaque chauffante)
o Infusion
o Entrainement à la vapeur (huile
essentielle)
o Evaporateur rotatif
ROTAVAPOR
 Etapes pré cliniques
3. Phytochimie / chimie

➢ Caractérisation des groupes phytochimiques

Tests colorés de caractérisation:
❖ Réaction de Shibata: → flavonoïdes

❖ Réaction de Borntragër: → anthracénosides ;

❖ Liebermann-Burchard: → aglycones triterpéniques et

stéroïdiques ;

❖Réactions de Dragendorff et Mayer: → Alcaloïdes;

 Etapes pré cliniques
3. Phytochimie / chimie

✓ Caractérisation des groupes phytochimiques

Tests colorés de caractérisation :
❖Réaction de Carr et Price: → Caroténoïdes

❖Réaction de Keedee: → Hétérosides cardiotoniques ;

❖Réaction de Feigl-Frehden-Ange: → Coumarines et

dérivés

❖Autres tests : glucides, anthocyanosides, saponosides et

tanins.
3. Phytochimie / chimie
✓ Purification, isolement et
identification des structures
chimiques
❖ Chromatographie (CCM, colonne
classique)
❖ Liquide – liquide (ampoule à
décanter)
❖ Chromatographie couplée à la
spectroscopie (LC-MS, HPLC-
UV/Vis)
 Etapes pré cliniques
3. Phytochimie / chimie
➢ Caractérisation des propriétés physicochimiques du PA
❖Coefficient de partage, solubilité, pKa
❖Rayon et poids moléculaire,
❖Cristallin ou amorphe
➢ Relation Structure – Activités: Pharmacophore
❖Le « Hit »
❖Le « lead » = Hit + pharmacomodulations (éventuelles)
❖Brevet
 Etapes pré cliniques
3. Tests biologiques (in vitro ou in vivo ou ex vivo):

➢ Galénique / Biopharmacie
❖ Procédés de fabrication industrielle du principe actif
❖ Formes galéniques
 Etapes cliniques
❑ Phase I: étude de la tolérance (6 -18 mois)
✓ Chez le volontaire sain éclairé (50 – 100 volontaires).
✓ Vise à vérifier l'éventail des doses utilisables chez l'homme (DMT)
✓ Pharmacocinétique
✓ Voie et type d’administration (unique ou répétée)
✓ Formes galénique et étude des interactions
✓ En résumé, cette phase permet de déterminer :
❖ l'éventail des doses utilisables chez l'homme
❖ les voies d'administration favorables
 REFLEXIONS
Le prélèvement de dose par pincée est plus précis et
plus individualisé

Les médicaments « modernes » n’ont pas de dose

précise

Les remèdes traditionnels africains ont belle et bien

des doses; ce sont les médicaments « modernes » qui
n’ont pas de doses
 Etapes cliniques
❑ Phase II: conditions d’efficacité pharmacologique (1 – 2 ans)
✓ Chez les sujets souffrant de la maladie (au mieux)

✓ Vise à déterminer l’activité pharmacologique du médicament:

posologie, effets, dose efficace, rythme d'administrations.

✓ Comparaison de l'effet de différents dosages ou modalité

d'administration à celui d'un placebo et, au mieux, à celui d'un
produit de référence.

✓ On évalue l'existence d'une relation entre la dose administrée et

l'efficacité (courbe dose-réponse).

Voies et modalités thérapeutiques optimales, pharmacocinétique.

 Etapes cliniques
❑ Phase III: Conditions d'efficacité thérapeutique et
comparaison.
✓ Patients atteints de la maladie à traiter

✓ Etablir l'efficacité thérapeutique et la sécurité d’utilisation du

produit dans l'indication revendiquée (selon phase II).

✓ Durant cette phase III, seront réalisées :

❖ les formes galéniques définitives
❖ les études montrant les équivalences des différents lots
thérapeutiques
❖ les études nécessaires à la qualité pharmaceutique.
 Etapes cliniques
❑ Phase III: Conditions d'efficacité thérapeutique et
comparaison.
✓ Etudes de stratégie thérapeutique et de marketing.

✓ Sur une longue période et avec un grand nombre de patients:

comparaisons efficacité/tolérance par rapport à un médicament de
référence ou à un placebo.

✓ Etudes multicentriques avec validité statistique.

✓ Pharmacocinétique et pathologie particulière (IR, IH, IC).

✓ Tirage au hasard, en double insu des traitements à administrer.

 Procédure AMM des médicaments modernes
❑ Confection du dossier

❑ Le dossier comporte :
❖ Les données chimiques
❖ Les données pharmacologiques
❖ Les données biologiques et toxicologiques
❖ Les données cliniques

❑ Evaluation en vue d'AMM. 3 critères :

❖ Qualité pharmaceutique
❖ Efficacité
❖ Sécurité
 Médicaments issus de la PT au Burkina Faso
Critères Catégories

1 2 3 4

Mode de Méthode TPS Semi industrielle Semi industrie Semi industrie

préparation Extemporanée À l’avance; ou industrie ou industrie
BPF + N° lot À l’avance; À l’avance;
BPF + N° lot BPF + N° lot

Composition PA= mat. I sèches PA = mat. I à PA = extrait PA = molécules

ou fraiches bien groupes standardisé purifiées
connues du TPS chimiques connus d’activité d’activité
biologique biologique
connue connue
Form. + dosage Form. + dosage
 Médicaments issus de la PT au Burkina Faso

Critères Catégories
1 2 3 4
Conservation Courte durée Fixée par les essais Fixée par les essais Fixée par les
/ validité de stabilité de stabilité essais de stabilité

Longue Évidence ethno Essais pré Essais pré

expérience médicale d’une cliniques et cliniques et
Efficacité / d’utilisation longue expérience cliniques cliniques
innocuité d’utilisation ou
essai clinique (au
besoin)
 Etape clinique post AMM
✓ Phase 4 de pharmacovigilance

✓ Surveillance du médicament dans l’environnement réel d’utilisation

✓ But : identifier, analyser et prévenir le risque d'effets indésirables

pouvant résulter de l'utilisation d'un médicament
Développement / Procédure d’AMM du médicament
Quelques médicaments d’origine végétale
 Atropine

✓ Atropine: alcaloïde tropanique de diverses plantes Solanaceae, la

belladone (Atropa belladonna), le datura (Datura innoxia), la jusquiame
et la mandragore
 Atropine

✓ Atropine: racémique, mélange équimolaire d'énantiomères lévogyre et

dextrogyre
✓ Isomère lévogyre S-(–): Hyoscyamine.
✓ Antagoniste cholinergique direct anti-M dans le SNC et périphérique
NB: Cocaïne: alcaloïde tropanique (Erythroxylon coca Lmk)
 Ephédrine

Ephédrine: alcaloïde dérivé de diverses plantes, Ephedra sinica

Ephédrine: isolée en 1885 par un pharmacien japonais Nagai Nagayoshi.

Il la synthétise avec Kanao en 1920

Anesthésiologie, ORL
 Morphine et dérivés
La morphine est un alcaloïde du pavot, Papaver somniferum, de la
famille du coquelicot mais à fleurs blanches
 R1

R1 = R2 = OH Morphine
O R1 = OCH3 ; R2 =OH Codéine
N CH3 R1 = R2 = OCH3 Thébaïne

R2 (Argemone mexicana)

• 1806 isolement de la morphine du latex

du pavot (Morphée, divinité grecque des
rêves) par Serturner

• opiacés: dérivés de l’opium,

• opioïdes: agonistes/antagonistes
activité type morphine
• endorphines: endogènes
 Digitaliques: digoxine, digitoxine
La digitale, qui doit son nom à la forme en doigt de gant de ses
fleurs, est une plante commune des régions tempérées,
C’est Withering, un médecin anglais, qui le premier à reconnu
l’activité de cette plante sur l’ « hydropisie », ce tableau décrit par
cet auteur qui correspond à l’insuffisance cardiaque congestive
décompensée
 Digitaliques: digoxine, digitaline
digitaline, digoxine inhibent la pompe Na+/K+ ATPase des
cellules cardiaques provoquant une élévation intracytoplasmique
de calcium et un renforcement consécutif de la force des
contractions myocardiques.

Ces substances ont été jusqu’à très récemment les médicaments de

base de l’insuffisance cardiaque.
 Quinine

Plusieurs variétés de quinquina plus ou moins riches en quinine se

différenciant par la couleur de l’écorce (jaune, rouge ou grise) :
Cinchona officinalis
C. ledgeriana,
C. succirubra
C. Lancifolia

Plante: éliminer le paludisme dans plusieurs régions d’Europe.

 Quinine
« Quinquina » ou « écorce » en langue inca.

Nom scientifique, Cinchona, donné en hommage à la Comtesse El

Cinchon, épouse du vice-roi du Pérou, guérie en 1635 d’une fièvre
rebelle grâce au quinquina.

Jésuites ont répandu l’usage de la « poudre de la comtesse » ou «

poudre des Jésuites ».
 Quinine

Quinine identifiée et isolée: Pelletier et Caventou (2 pharmaciens

parisiens) en 1820

Chimie industrielle, la quinine extraite du quinquina a remplacé la

poudre d’écorce dans la fabrication des antipaludiques et des
fébrifuges.
 Artémissinin

Artemisia annua (armoise annuelle) est utilisée par les herboristes

chinois depuis longtemps dans le traitement de nombreuses maladies,
telles que des dermatites ou bien encore contre la malaria depuis
l'antiquité.
Plante: artemissinin
Dérivés hémi synthétiques: dihydroartemissinin, artésunate,
artémether,
Artémissinin
 Vinca alcaloïdes

La Pervenche de Madagascar ou Catharanthus roseus (Apocynaceae)

est une plante herbacée pérenne originaire et endémique de
Madagascar
Alcaloïdes anticancéreux
✓ Vinca alcaloïdes naturels: vincristine et vinblastine
✓ Alcaloïdes hémi synthèse: vinorelbine and vindesine
 Vinca alcaloïdes

Vincristine
 Taxanes: Paclitaxel et dérivés

Les Ifs
Taxus brevifolia
Taxus baccata: déacetylbaccatine – III (précurseur)
Taxoïdes, diterpènes cycliques estérifiés par des acides banals et
par des acides aminés ou des composés voisins eux-mêmes
amidifiés : taxine A, B, C, paclitaxel, 10-désacétylbaccatine III,
taxiphilline, cephalomannine, etc.
 Paclitaxel et dérivés

Taxanes anticancéreux: paclitaxel, docétaxel

Poison du fuseau mitotique et inhibe la dépolymérisation des
microtubules, bloquant le mécanisme de la mitose.
FIN