Rapport d’analyse Chimie Analytique

SOMMAIRE 

Introduction.........................................................................................................................................................4
1. Contexte......................................................................................................................................................5
1.1. Complexes de coordination...............................................................................................................5
1.2. Objectifs / Sujet..................................................................................................................................5
2. Stratégie analytique...................................................................................................................................6
2.1. Matériel utilisé....................................................................................................................................6
Loi
2.2.de Beer-Lambert :
Détermination de la cuve...................................................................................................................6
2.3. Détermination de la longueur d’onde
de travail..........................................................................................................................................................6
2.4. Calculs préliminaires et réalisation de la
gamme d’étalonnage......................................................................................................................................7
2.5. Détermination de la concentration en Cu2+ de la solution de CuSO4.5H2O.......................................7
3. Résultats expérimentaux...........................................................................................................................8
4. Analyse des résultats..................................................................................................................................9
Conclusion..........................................................................................................................................................10
Bibliographie.......................................................................................................................................................11
Annexe................................................................................................................................................................12
Détermination par spectrophotométrie de la quantité de cuivre dans
une solution de CuSO4.5H2O de concentration inconnue.

IUT Castres – Semestre 2 BUT – 2021/2022 | Tuteur : Arthur Hourugou | N.BARRERE – L.ALLANOU – M.BEAUDONNET
SAE BC5 : Communiquer
Illustrations

Figure 1 : Chlorure d'hexaammine cobalt (III)....................................................................................................5

Figure 2 : Schéma formation d'un complexe......................................................................................................5
Figure 3 : Formation du complexe [Co (NH3)6]3+.................................................................................................5
Figure 4 : Sulfate de cuivre (II) pentahydraté.....................................................................................................5
Figure 5 : Schéma fonctionnement du spectrophotomètre HP8452................................................................6
Figure 6 : Spectre d'absorbance de CuSO4.5H2O en fonction de la longueur d'onde.......................................6
Figure 7 : Graphique n°1 représentant l’absorbance (à 800 nm) en fonction de la concentration des
solutions de CuSO4.5H2O de concentration connue..........................................................................................8
Figure 8 : Graphique n°2 représentant l'absorbance (à 800 nm) en fonction de la concentration des
solutions de CuSO4.5H2O de concentration connue.........................................................................................12

Tableaux

Tableau 1 : Concentration des différents tubes à essais avec les volumes de solution mère et d'eau distillée
correspondant.....................................................................................................................................................7
Tableau 2 : Absorbance à 800 nm (max) des solutions de CuSO 4.5H2O en fonction de leur concentration
connue................................................................................................................................................................. 8

Équations

Équation 1 : Loi de Beer-Lambert........................................................................................................................7

Index de mots-clés

cuve en plastique................................................................................................................................................6
dosage par étalonnage.......................................................................................................................................4
dosage spectrophotométrique...........................................................................................................................4
relation de Beer-Lambert....................................................................................................................................4
spectrophotométrie............................................................................................................................................4
Sulfate de cuivre pentahydraté...........................................................................................................................5

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 - Introduction -

Introduction

À l’occasion de la Situation d’apprentissage et d’évaluation (SAE), une technique de dosage par

étalonnage sera étudiée. Il s’agit du dosage par spectrophotométrie, un dosage très utilisé dans le
domaine pharmaceutique par exemple afin de doser les principes actifs des médicaments présentant dans
leur structure des groupements chimiques qui absorbent dans l’ultra-violet.
La spectroscopie UV-Visible permet d’accéder qualitativement à des renseignements sur la nature des
liaisons présentes au sein de l’échantillon mais également de déterminer quantitativement la
concentration des espèces absorbant dans ce domaine spectral qui s’étend de 200 à 400 nm pour le
domaine de l’UV et de 400 à 800 nm pour le domaine du visible. Cette méthode est rapide et précise,
basée sur l’exploitation de la relation de Beer-Lambert qui relie l’absorption à la concentration des
molécules en solution, pour une longueur d’onde  donnée.
L’objectif de cette manipulation est de mesurer par méthode de dosage spectrophotométrique la
concentration en Cu2+ dans une solution de CuSO4.5H2O mise à disposition. Dans un premier temps, les
complexes de coordination seront définis, ensuite la stratégie analytique sera détaillée et pour finir les
résultats ainsi que leur analyse seront présentés.

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 - Contexte -

1. Contexte

1.1. Complexes de coordination

Les complexes de coordination sont découverts par Tassaert en 1798. Il
observa que les solutions ammoniacales de chlorure de cobalt laissent
déposer des cristaux orange CoCl 3,6NH3. Ce complexe se nomme chlorure
d’hexaammine cobalt (III) (Figure 1). En 1893, Alfred Werner proposa la
théorie de coordination ce qui lui permit de recevoir le prix Nobel de chimie
en 1913 (1). Un complexe de coordination est l’association d’un ou plusieurs Figure 1 : Chlorure
centres métalliques (métal de transition) avec des ligands. Ceux-ci peuvent d'hexaammine cobalt (III)
être un atome, un ion ou bien une molécule comportant des fonctions
chimiques lui permettant de se lier à un ou plusieurs atomes ou ions centraux (2). Le complexe est en fait
obtenu en effectuant une réaction acide-base de Lewis (Figure 2) entre :
case vacante doublet d’électrons
 Un métal (acide de Lewis)
 Un ligand (base de Lewis)

Figure 2 : Schéma formation d'un complexe

En résumé, les complexes peuvent être schématisés de la façon suivante : [M (X) X (L)m] n (+/-).
Avec : M : métal de transition (acide de Lewis)
X, L : ligands (bases de Lewis).
x : nombre de Ligand X
l : nombre de Ligand L
n : charge du complexe

Figure 3 : Formation du complexe [Co (NH3)6]3+.

Dans cet exemple une réaction a lieu entre l’acide Co 3+ et la base NH3 ce qui forme un complexe. Sa formule
sera [Co (NH3)6]3+. Le métal central est le Cobalt et les ligands sont NH 3. Le cobalt est au degré d’oxydation
+III. Les composés NH3 amènent chacun une paire d’électrons et représentent les ligands de type L. Le
complexe possède une charge n = +3.
1.2. Objectifs / Sujet
Notre sujet d’étude s’axera sur le Sulfate de cuivre pentahydraté. Il s’agit d’un
complexe ionique formé par le cation Cu 2+, l’anion SO42- et 5H2O lorsqu’il est en
solution. Il est ainsi caractérisé par la formule chimique CuSO 4.5H20. Il est
commercialisé sous forme anhydre blanc (CuSO 4) ou bien sous formes
hydratées, soit le plus souvent le sulfate de cuivre pentahydraté de formule
CuSO4.5H2O. C’est cette forme pentahydraté de couleur bleue qui sera
analysée par la suite.
Dans le cadre de la SAE dont le sujet était de déterminer par
spectrophotométrie la quantité d’ions Cu2+ dans une solution de CuSO4.5H2O
de concentration inconnue, ce complexe a pu être analysé. Afin de répondre Figure 4 : Sulfate de cuivre (II)
à la problématique, un mode opératoire a été élaboré dans la limite du pentahydraté
matériel mis à disposition. Plusieurs compétences sont entrées en jeu telles
que l’utilisation du spectrophotomètre, la mise en place d’un protocole et la réalisation d’une gamme
d’étalonnage durant un temps imparti.

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 - Stratégie analytique -

2. Stratégie analytique

2.1. Matériel utilisé

Matériel à disposition :

 Solution de CuSO4.5H2O à 0.17 mol.L-1

 Solution de concentration inconnue de CuSO 4.5H2O
 2 burettes graduées de 25mL
 10 tubes à essais
 Support de tube à essais
 Cuves en plastiques, quartz et verres
 Béchers
 Spectrophotomètre HP8452.

Le spectrophotomètre utilisé sera le modèle HP8452. Ce spectrophotomètre est constitué de la réunion de

trois parties distinctes : la source, le système dispersif et le détecteur. Dans ce cas, il s’agit d’un
spectrophotomètre à barrettes de diode. Celui-ci est capable d’analyser en simultanée une large gamme
de longueur d’onde.

Système
détecteur à
Source Système dispersif barrettes de
diodes
Solution échantillon

Figure 5 : Schéma fonctionnement du spectrophotomètre HP8452

Les différentes solutions seront dans une cuve dans le compartiment de l’échantillon qui leur est réservé
au niveau du spectrophotomètre. La mesure est prise avec le logiciel dédié. Lors de l’analyse, le détecteur
« voit » toutes les longueurs d’onde simultanément. Ainsi, le spectre d’absorbance est obtenu.
2.2. Détermination de la cuve
La première étape de ce dosage consiste à déterminer la cuve à utiliser. Pour cela, le blanc sur l’appareil
est réalisé (sans cuve). Ensuite les courbes d’absorbance de chaque cuves mises à disposition (verre,
quartz et plastique) sont tracées. Dans le domaine [200-800 nm] seules les cuves en plastique et en verre
absorbent entre [200-300 nm]. La cuve en quartz n’absorbe pas. La cuve qui n’absorbe pas à la longueur
d’onde de travail est choisie. Dans ce cas-là, toutes les cuves peuvent être utilisées puisque le domaine de
travail est le domaine du visible [400-800 nm], en effet la solution de CuSO 4.5H2O étant de couleur bleue,
on peut supposer qu’elle absorbe vers 800nm. La cuve en plastique sera utilisée car c’est la moins chère et
la solution ne contient aucun produit risquant de l’abimer tel que l’acétonitrile.
2.3. Détermination de la longueur d’onde de travail
La deuxième étape consiste à déterminer la longueur d’onde de
travail. Pour ce faire, le blanc du spectrophotomètre est réalisé avec
la cuve contenant de l’eau distillée. Le spectre A=f () pour la
solution de la concentration inconnue est tracé. La valeur de max
est prise pour pic d’absorption. Par recherches bibliographiques il a
été déterminé que les analyses se feront à 800 nm (max) (Figure
6) (3). Figure 6 : Spectre d'absorbance de
CuSO4.5H2O en fonction de la longueur
d'onde

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 - Stratégie analytique -

2.4. Calculs préliminaires et réalisation de la gamme d’étalonnage

Une gamme étalon doit être effectuée afin de réaliser le dosage spectrophotométrique des ions Cu 2+ dans
la solution de concentration inconnue. 10 échantillons de concentration connue vont être réalisés. Pour
cela, des recherches bibliographiques ont permis de déterminer le coefficient d’extinction molaire 800 = 12
L.mol-1.cm-1 (4). A partir de cela, il est possible de déterminer la concentration de la solution mère.
L’absorbance ne doit pas dépasser 2 pour rester dans une zone de linéarité. D’après la loi de Beer-
Lambert :

A=.l . C A : Absorbance (sans unité).

ε : Coefficient d’extinction molaire ou massique (mol -1.L.cm-1 ou g-1.L.cm-1).
Équation 1 : Loi de Beer-Lambert
l : Longueur de la cuve (cm).
C : Concentration molaire ou massique (mol.L-1 ou g.L-1).

A 2
La valeur de la concentration de la solution mère vaut : C= = ≃0 , 17 mol . L -1.
.l 12 . 1
A partir de cette solution mère, la gamme d’étalonnage suivante sera réalisée avec de l’eau
distillée comme solvant (CuSO4.5H2O est soluble dans ce solvant et ne réagit pas avec celui-ci) :

Tube n° 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Solution mère
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
(mL)
Eau distillée
9 8 7 6 5 4 3 2 1 0
(mL)
Concentratio
0,017 0,034 0,051 0,068 0,085 0,102 0,119 0,136 0,153 0,17
n (mol. L-1)
Tableau 1 : Concentration des différents tubes à essais avec les volumes de solution mère et d'eau distillée correspondant

Exemple du calcul de la concentration pour le tube n°5 :

−3
0.17 . 5.10
c= −3
=0,085 mol.L-1.
10. 10

La gamme étalon sera préparée de la manière suivante : Deux burettes graduées de 25 mL sont
préparées : une avec de l’eau distillée et l’autre avec la solution mère de concentration connue. Les tubes
à essais sont remplis avec les volumes d’eau et de solution mère listés précédemment dans le tableau 1.
2.5. Détermination de la concentration en Cu2+ de la solution de CuSO4.5H2O.
La mesure de l’absorbance de chaque tube à essais doit être réalisée à l’aide du spectrophotomètre.
La courbe de l’absorbance en fonction de la concentration (A = f(c)) des différentes solutions est tracée
sur Excel. Les derniers points devront certainement être supprimés afin que le coefficient de corrélation
(R2) soit le plus proche de 1. Grâce à l’équation de la droite, il est possible de déterminer , qui correspond
au coefficient directeur de la droite (la longueur de la cuve vaut 1 cm).
Pour finir, il est possible de remonter à la concentration de la solution de CuSO 4.5H2O de concentration
inconnue. La mesure de l’absorbance de la solution de concentration inconnue est réalisée. La
A
concentration est trouvée grâce à la loi de Beer-Lambert : C= .
ε .l

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 - Résultats expérimentaux -

3. Résultats expérimentaux

Concentration Absorbance A = f(c)

mol.L-1 2.5
0,017 0,16852

Absorbance
2
0,034 0,38565 f(x) = 12.0137076648841 x − 0.0438326666666669
0,051 0,56517 R² = 0.998848383412438
1.5
0,068 0,78416
0,085 0,93179 1
0,102 1,1748
0.5
0,119 1,3681
0,136 1,5885 0
0,153 1,8235 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16 0.18
0,17 2,0043 Concentration (mol.L-1)
Tableau 2 : Absorbance à 800 nm (max) des Figure 7 : Graphique n°1 représentant l’absorbance (à 800 nm) en fonction de la
solutions de CuSO4.5H2O en fonction de leur concentration des solutions de CuSO4.5H2O de concentration connue
concentration connue

Les résultats contenus dans ce tableau sont utilisés pour établir la droite d’étalonnage : le graphique
permettant de déterminer la concentration en Cu 2+ de la solution inconnue. (Voir les autres résultats en
ANNEXE).

Il s’agit d’une droite d’équation de type y = a x + b où a correspond au coefficient d’extinction molaire (.l)
en L.mol-1.cm-1. La longueur de la cuve était de 1 cm. Le coefficient de corrélation (R 2) de la droite est très
proche de 1 (il est de 0,9988), aucun point de la courbe n’a été enlevé. La courbe est exploitable. Ici
800=12,014 L.mol-1.cm-1 proche de la valeur théorique. Il est possible de prendre la moyenne des deux 
obtenus qui vaut 11,8390 L.mol-1.cm-1.

Pour finir, la mesure de l’absorbance de la solution de concentration inconnue en Cu 2+ a été réalisée. Elle
est de 2,3112. Il est possible de remonter jusqu’à la concentration en Cu 2+ de la solution inconnue grâce à la
loi de Beer-Lambert :

A=ε . l. C

A
C=
e.l

2,3112
[Cu2+] = [SO42-] = =0,1924 mol . L-1 .
12,014
La concentration expérimentale en cuivre dans la solution est de 0,1924 mol.L -1.

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 - Analyse des résulats -

4. Analyse des résultats

Les résultats obtenus donnent une concentration finale de la solution inconnue qui peut sembler
cohérente. L’absorbance correspondant à cette concentration est de 2,3112. Celle-ci étant supérieur à 2, la
loi de Beer-Lambert ne peut ici être appliquée car elle n’est plus dans la zone de linéarité. Le
spectrophotomètre HP8452 ne peut pas donner d’absorbance fiable supérieure à 2. Afin d’avoir un
résultat fiable à cette absorbance, il aurait fallu diluer la solution de concentration inconnue. De plus, un
appareillage plus précis aurait pu être utilisé, comme le spectrophotomètre CARY 60 qui peut lui aller
jusqu’à une absorbance de 3. Par manque de temps, cela n’a pas pu être réalisé. Le coefficient d’extinction
molaire moyen trouvé vaut 11,8390 L.mol -1.cm-1. La valeur théorique étant de 12,00 L.mol -1.cm-1, nous
pouvons en déduire un écart relatif de 1,3 %. Cela peut provenir d’erreurs de mesure et de manipulation
telles que le séchage des tubes à essai avant leur utilisation (s’il reste de l’eau cela peut changer la
concentration souhaitée de la solution), la lecture de la burette graduée lors de la réalisation de la gamme
étalon. La valeur trouvée pour le coefficient d’extinction molaire reste acceptable (écart relatif < 5%).

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 - Conclusion -

Conclusion

Cette méthode a donc permis de doser une solution de CuSO 4.5H2O à la longueur d’onde de 800 nm tout
en respectant un choix de la cuve (cuve plastique) et du solvant utiliser (eau) lors de la gamme étalon afin
que ceux-ci n’affectent pas dans le domaine d’application. Grâce à la loi de Beer-Lambert, la valeur de la
concentration de la solution inconnue a pu être déterminée avec la réalisation de la gamme étalon et de la
détermination du coefficient d’extinction molaire. Parmi les deux manipulations réalisées, les  trouvés
sont acceptables donc la méthode, le choix des paramètres et les manipulations ont été efficaces. Un
appareillage plus précis aurait pu être utilisé ou une dilution aurait dû être faite afin d’avoir une valeur de
concentration fiable.

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Bibliographie

1. PARIS, René-Antoine et SCHARFF, Jean-Pierre. COMPLEXES, chimie. Encyclopaedia Universalis. [En ligne]
https://www.universalis.fr/encyclopedie/complexes-chimie/.
2. DEYDIER, Eric . Cours Chimie Inorganique. pp. Chapitre V - page 1.
3. ANNABAC. Absorbance et loi de Beer-Lambert - Doc 1 : Spectre d'absorption d'une solution de sulfate de
cuivre. annabac.com. [En ligne] https://www.annabac.com/revision-bac/absorbance-et-loi-de-beer-lambert.
4. MONTPELLIER, ACADEMIE. Exercices Séquence 5 CH9 Dosage par étalonnage. EXERCICE 4 : Absorbance
d’une solution. [En ligne] https://spcl.ac-montpellier.fr/moodle/pluginfile.php/3425/mod_resource/
content/6/CH%209%20Dosage%20par%20etalonnage_exercices.pdf.
5. INRS. Fiche toxicologique synthétique n° 294, Cuivre et composés. [En ligne] 2013.
https://www.inrs.fr/publications/bdd/fichetox/fiche.html?refINRS=FICHETOX_294.

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Annexe

A = f(c)
2
1.8
1.6 f(x) = 11.6643386809269 x − 0.0125829090909091
R² = 0.998113036932199
1.4
Absorbance

1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16 0.18

Concentration (mol.L-1)
Figure 8 : Graphique n°2 représentant l'absorbance (à 800 nm) en fonction de la concentration des
solutions de CuSO4.5H2O de concentration connue

Sécurité :

Produit Mention de danger Sécurité

Nocif en cas d’ingestion,
Provoque une sévère irritation
des yeux,
Provoque une irritation
Sulfate de cuivre pentahydraté H302 ; H319 ; H315 ; H410 cutanée,
Très toxique pour les
organismes aquatiques,
Entraîne des effets néfastes à
long terme.
Source : (5)

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