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Curso Formao Geral da Sade Professor(a): Patrcia Silvestre Limeira Disciplina: Bioqumica Turma: VAD

Relatrio n1

Titulao e determinao de pKa

Guilherme Medeiros de Souza Letcia Barreto Feres Joo Pedro Abraho Nicoletti Walter Naves Borges Neto

Introduo
o mtodo pelo qual se determina uma quantidade desconhecida de uma substncia particular, mediante a adio de um reativo-padro que reage com ela em proporo definida e conhecida. A adio de um reativo-padro (um reativo de concentrao conhecida e freqentemente designado como reativo-titulado) se regula e se mede de alguma maneira, requerendo-se um mtodo de indicao para saber quando a quantidade do reativo normal juntado precisamente a suficiente para reagir quantitativamente com a substncia que se determina. Por conseguinte,conhecendo a proporo em que reagem as substncias e tendo determinado a quantidade de uma substncia (o reativo titulado)necessria para reagir nesta proporo, pode-se calcular facilmente a quantidade desconhecida de substncia presente no frasco da reao. Titulaes cido-base so talvez mais comuns. Neste caso, um dos reagentes uma soluo aquosa acida, o outro uma soluo aquosa bsica. A reao cido-base que ocorre pode ser de qualquer um dos trs tipos: acido forte com base forte, acido fraco com base forte ou acido forte com base fraca. Mais freqentemente uma titulao cido-base usada para determinar a concentrao de uma espcie em soluo. Se a espcie uma base, titulamos com uma soluo padro de uma acido forte, geralmente HCl. Isto , determinamos o volume de uma soluo de HCl de concentrao conhecida que necessrio para reagir completamente com uma amostra da soluo bsica. Por outro lado, para determinamos a concentrao de uma espcie acida, titulamos com uma soluo de uma base forte, geralmente o NaOH. Titulaes cido-base podem ser usadas para diversos fins, podem ser usadas para o clculo da porcentagem de um componente cido ou bsico de uma mistura slida. Em uma titulao, devemos saber quando parar de adicionar reagente. Em outras, palavras, devemos ser capazes de dizer em que ponto a reao esta completa. Isto conseguido adicionando-se um indicador cido-base. O indicador deve mudar de cor quando a reao estiver completa - isto , quando quantidade equivalente de acido e base tiverem sido usadas. O ponto na titulao na qual isto ocorre denomina-se ponto de equivalncia. Se o indicador muda de cor antes de atingir este ponto, muito pouco o reagente ser adicionado e a reao no ser completada. Se o indicador muda de cor muito tarde, depois de passado o ponto de equivalncia, muito reagente ser adicionado. Para escolher o indicador adequado para uma titulao, importante que seja consultada a curva de titulao. Os dados para esta curva so obtidos determinado-se o pH da soluo em funo do volume de titulante adicionado. A observao de que as solues parcialmente neutralizadas de cidos fracos ou bases fracas so resistentes a mudanas de pH sobre a adio de pequenas quantidades de cido forte ou base forte leva ao conceito de "buffering". Buffers consistem de um cido e sua base conjugada, como o carbonato e o bicarbonato, ou acetato e cido actico. O qualidade de um buffer dependente da sua capacidade de tamponamento (resistncia mudana no pH pela adio de fortes cido ou base) e capacidade de manter um pH estvel aps diluio ou adio de sais neutros. Por causa da equilbrios seguintes, a adio de pequenas quantidades de cido forte e base forte resultado na remoo de apenas pequena quantidades das espcies fracamente cidas ou bsicas, por conseguinte h pouca alterao no pH: HA (cido) H+ + A- (Base conjugada) B (base) + H+ BH+ (cido conjugado)

A manuteno do pH ideal celular, ou plasmtico, mantida pelos seres vivos graas existncia dos sistemas-tampes. Para se definir sistema-tampo e compreender suas propriedades necessrio recorrer a teoria cido-base de Brnsted-Lowry. Bnsted definiu cidos como substncias capazes de doar prtons e bases como substancias capazes de receb-los. HA A + H+ O on ou molcula resultante da dissociao denominado base conjugada da cido, j que pode receber um prton, convertendo-se novamente no acido conjugado respectivo. Alguns cidos chamados fortes, dissociam-se totalmente quando em solues diludas, outros, os chamados cidos fracos, ionizam-se muito pouco. Os cidos fracos so caracterizados por sua constante de dissociao, (Marzocco, A. Bioqumica Bsica. 2003) Keq = [A][H+] [HA] O pH, ou potencial hidrogeninico, refere-se concentrao relativa de ons de hidrognio numa soluo, indicando acidez ou alcalinidade da mesma, sendo calculado como logaritmo negativo de base 10 da concentrao de ons de hidrognio em mols por litro. Um valor de pH = 7 indica soluo neutra, o pH > 7 indica soluo bsica, e pH < 7 indica soluo cida. O pH calculado como sendo o logaritmo negativo da concentrao de prtons no meio. pH = - log[H+] Dentro da faixa de pH onde a ao tamponante exercida haver, obrigatoriamente, um valor de pH em que exatamente 50% do total inicial do acido esto associados, e os 50% restantes estando na forma de base conjugada. nesta situao que o sistematampo tem sua eficincia mxima, pois quando existem, simultaneamente, as maiores concentraes possveis de acido e base conjugada. Ao redor deste valor de pH, uma unidade a mais, uma unidade a menos, o tampo ainda eficaz. O valor de pH em que um acido apresenta-se 50% dissociado equivale ao seu pKa e constitui uma medida da sua fora cida: quanto maior for o valor do pKa mais fraco ser o cido. Alm disso pKa corresponde ao co-logaritmo da constante de dissociao do acido( -log Ka) e caracterstico para cada acido. A equao de HendersonHasselbach relaciona pH, constante de dissociao do acido e as concentraes de acido e base conjugada, (Marzocco, A. Bioqumica Bsica. 2003) . pH = pKa + log[A][H+]
[HA]

A equao Henderson-Hasselbach permite calcular prontamente a relao entre as concentraes das espcies doadoras e aceptoras de prtons em qualquer pH, para um cido de pKa conhecido. Atualmente o pH de uma soluo calculada com a ajuda de um pHmetro, constitudo basicamente por um eletrodo e um circuito potencimetro. O aparelho calibrado (ajustado) de acordo com os valores referenciado em cada solues de calibrao. A leitura do aparelho feita em funo da leitura da tenso (usualmente em

milivolts) que o eletrodo gera quando submerso na amostra. A intensidade da tenso medida convertida para uma escala de pH. O aparelho faz essa converso, tendo como uma escala usual de 0 a 14 pH.

Figura1: pHmetro convencional

Uma das consequncias do mau funcionamento dos sistemas-tamponantes a desnaturao protica. Em tal processo, o pH, ao estar fora dos nveis comuns para aquele meio, provoca a mudana conformacional das protenas e outras biomolculas. Essa mudana causa a perca da funcionalidade da molcula, j que a estrutura espacial de tais substncias fundamental para realizao do seu papel no organismo. A desnaturao pode ou no ser reversvel, dependendo do nvel de adversidade ao qual a biomolcula foi submetida.

Figura 2: desnaturao proteica.

Objetivos
Titular solues de cido actico em NaOH, determinando seu pH Titular solues de cido clordrico em NaOH, determinando seu pH Construir curvas de titulao atravs dos resultados, determinando o pKa de cada cido e sua faixa de tamponamento

Materiais e mtodos
Material Utilizado no Experimento bureta graduada; pHmetro beckers papel toalha pisseta com gua destilada funil (opcional) haste de ferro Material especfico 50 mL de cido actico e/ou do cido clordrico 0,2 M 50 mL NaOH 0,4 M
1.

METODOLOGIA O experimento se inicia derramando em um Becker a soluo de cido actico, ou acido clordrico. Adiciona-se na bureta graduada o hidrxido de sdio (NaOH) a 0,4M. Mede-se inicialmente o pH dos cidos, levando-o ao pHmetro em seguida e anotando o resultado. Aps isso deve-se ir colocando de 2 em 2 ml de base (NaOH), e vendo o resultado no pHmetro a cada adio. O procedimento deve ser repetido at que se atinja um valor de pH de no mnimo 12. preciso estar atento ao manuseio do pHmetro, no o encostando no fundo do Becker, lavando-o a cada medio, e no o deixando fora da gua destilada enquanto se faz o uso do Becker com a bureta. Ao fim das medies traa-se um grfico, determinado o pK a dos cidos e suas regies tamponantes.

Resultados

Referncias Bibliograficas
STANITSKI, M. S., Princpios de qumica. 6 Edio. Editora LTC. 1985. www.grupoescolar.com/materia/titulacao.html LEHNINGER. Princpios de bioqumica. 3 Edio. Editora Sarvier. 2002. MARZZOCO, A. Bioqumica bsica. 3 Edio, Editora Guanabara Koogan. 2007