Série des exercices

Exercice1 :

I) Une souche de Pseudomonas isolée à partir du sol est capable de se développer sur le milieu suivant :
Glucose: 16g/l ; (NH4)2 SO4: 1g/l ; K2HPO4: 7g/l ; KH2PO4: 3g/l ; MgSO4,7H2O: 0,1g/l .
Pour étudier la croissance bactérienne de cette souche, ce milieu a été ensemencé à
partir d'une culture de 24 h de cette souche sur gélose nutritive puis incubé dans les
conditions optimales de température et de pH.
L’évolution du nombre de bactéries en fonction du
temps est schématisée sur la figure 1.

1) Délimiter sur le graphe ci-dessus les différentes

phases de croissance ; interprétez et qualifiez chacune
d’elles.
2) Déterminez la valeur numérique de trois paramètres nécessaires et suffisants pour caractériser
cette croissance.

3) D'après les conditions expérimentales, de quoi dépend la 1 ère phase de la courbe ?

4) Expliquez la troisième phase de la courbe à partir de
la corrélation entre la croissance bactérienne et la
consommation du glucose (figure 2).

Exercice 2

On répète la même expérience de croissance avec

la même souche et sur le même milieu de culture,
mais en présence de différentes concentrations de
glucose.

Les différentes courbes de croissance sont représentées sur le même graphe

dans la figure 3.

1) Comparer la croissance totale (Ns - No) et le

taux de croissance µ max pour les concentrations
32 , 4 et 0,5 mg/ml.

A partir des mêmes données expérimentales, on trace

une courbe donnant la variation du temps de
 génération g minimum en fonction de la concentration initiale en glucose dans le
milieu (figure 4).

2) Quelle est la relation entre µ max et g min ?

3) Pour quelle valeur ‘‘seuil’’ le glucose est considéré comme facteur limitant ?

Exercice 3 :
La souche est cultivée sur milieu synthétique contenant une source d’azote
minérale, des sels minéraux et le glucose à faible concentration. On mesure la
densité optique à intervalles de temps réguliers.

1) Au temps 12 h, on ajoute du glucose et on poursuit les mesures. On obtient la courbe de

croissance ci-dessous (figure 5a). Interprétez les résultats obtenus.
2) Quelle serait l'allure de la courbe (complétez la figure 5b) si au temps 12 h on avait ajouté du
lactose à la place du glucose, sachant que la souche est capable d’utiliser le lactose ?

Exercice 4 :
Haemophilus influenzae (Chimio-organotrophe auxotrophe) est une bactérie aérobie/anaérobie
facultative, qui exige :

- Le facteur X (hémine), indispensable au fonctionnement de la chaîne respiratoire

(car il est un composant des cytochromes).
- Le facteur V (NAD+), coenzyme de la chaîne respiratoire et des réactions de fermentation.

1. Représenter à l’aide de schémas légendés, l’aspect après incubation. Justifier.

 Tube 1 : une gélose VF ensemencée avec cette bactérie

 Tube 2 : une gélose VF additionnée de facteur X, puis ensemencée avec
cette bactérie
 Tube 3 : une gélose VF additionnée de facteur V, puis ensemencée avec
 cette bactérie
 Tube 4 : une gélose VF additionnée de facteurs V et X, puis ensemencée avec cette
bactérie

Exercice 5 :
Le genre Lactobacillus est constitué de bacilles à Gram positif, non sporulants, et
chimioorganotrophes.

1. Schématiser et légender la paroi des bactéries Gram positif.

2. Donner l'aspect des Lactobacillus après coloration par la méthode de Gram.

Justifier la couleur obtenue en détaillant les différentes étapes de cette
coloration.
3. Ces bactéries sont non sporulantes. Donner une définition de la spore bactérienne.

4. Des expériences de culture des Lactobacillus sur deux milieux différents

sont réalisées. La composition des milieux est donnée dans le document
suivant :

Les résultats sont présentés ci-dessous

1.1 Définir chaque terme de l'expression : peptone trypsique de caséine. Indiquer

le principal constituant apporté par une peptone.
1.2 Indiquer le(s) rôles(s) de l'extrait de levure présent dans le milieu MRS.
1.3 Expliquer l'absence de culture sur le milieu TS glucosé.
1.4 Les Lactobacillus sont hetero-chimio-organotrophes. Donner la définition précise de ce
terme.
1.5 Indiquer le(s) rôles(s) de l'extrait de levure présent dans le milieu MRS.

Exercice 6 :
On ensemence un milieu de culture avec 0,1g de bactéries. La culture est arrêtée pendant la
phase exponentielle de croissance au bout de 5h30min. La masse bactérienne est alors égale
à 1,5g. Sachant que la phase de latence a duré 55min, calculer le temps de division cellulaire.

Exercice 7 :
On ensemence un milieu de culture contenant tous les éléments nécessaires à la croissance
avec 200mg de levures. La culture démarre immédiatement de façon exponentielle avec un
temps de génération de115 min. Au bout de combien de temps aura-t-on 100g de levures ?
Calculer le nombre de divisions cellulaires qui se sont produites et déterminer le taux horaire
de croissance.