MICROBIOLOGA

PRACTICA N 1 PRINCIPIOS Y UTILIDADES DE EQUIPO Y MATERIALES DE USO FRECUENTE EN MICROBIOLOGIA: NOCIONES DE ESTERILIZACION Y DESINFECCION

INTRODUCCION Los microorganismos como otros seres vivos son susceptibles a cambios ambientales a medida que se van adaptando a estos cambios. Se han desarrollado y aplicado diversos procesos de desinfeccin y esterilizacin para limitar su presencia o eliminarlo. La esterilizacin es un mtodo de eliminacin total de todo tipo de organismo y que asegura la ausencia absoluta de cualquier forma viviente. La desinfeccin es un proceso que solamente elimina formas vegetativas de los microorganismos, adems puede eliminarlos mediante agentes que solo disminuyen el riesgo de contaminacin sin garanterizar la eliminacin de todo organismo viviente, fundamentalmente por la eliminacin de microorganismos patgenos. Es decir la desinfeccin elimina el potencial infectivo de un material. La asepsia es un mtodo de eliminacin de microorganismos patgenos, adems se opone a la sepsis o a la putrefaccin ya sea por accin letal de los microorganismo o impidiendo su desarrollo. La esterilizacin con calor seco y hmedo son los procedimientos de mayor utilidad en Microbiologa. El calor seco desnaturalizaa las enzimas y destruye a los microorganismos por oxidacin. Estos mtodos se aplican principalmente en la esterilizacin de asa de inoculacin y todo tipo de material de vidrio y quirrgico. Los procesos con calor hmedo se aplican para esterilizar medios de cultivo, soluciones y cultivos bacterianos que se desechan el ms recomendable es la autoclave en el que se utiliza vapor de agua a presin para alcanzar temperaturas a 121 c. el materiales deja por 15 minutos.

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I. OBJETIVO a. Reconocer los principales materiales ms frecuentes en el, laboratorio de microbiologa. b. Conocer y comprender los principios y utilidad de los equipos de mayor inters en microbiologa. c. Conocer los procedimientos de esterilizacin y desinfeccin de material de laboratorio por medios fsicos y qumicos. MATERIALES Y EQUIPOS Materiales Tubos de cultivo de 16 x 150 mm con tapa Tubos de ensayo de 13 x 100 mm Placas petri de vidrio Pipetas de vidrio graduadas de 1 ml Pipetas de vidrio graduadas de 10 ml Matraces de erlenmeyer de 250 ml Campanas de Durham Esptula de drigalsky Probeta Asa bacteriolgica Asa micologa Vaso Baker Pinzas quirrgicas

II.

Equipos pH metro Estufa esterilizadora. Cocina elctrica. Autoclave Contador de colonias de Quebec Vortex Bao mara Centrifuga Balanza Microscopio Estereoscopio

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Materiales por grupo: Algodn 250 g Hilo pabilo un rollo Marcador indeleble Papel creft 04 pliegos Detergente 250 g Frasco de lega 250 ml 20 cm de tela suave que no desprenda pelusa.

III. METODOLOGIA a. Preparacin del material de vidrio: 1. Lavar los materiales de vidrio con escobilla y detergente. Enjuagar con abundante corriente de agua. 2. Escurrir el exceso de agua y enjuagar el material con una piceta conteniendo agua destilada. Dejar escurrir el material sobre una toalla o papel. 3. Una vez seco el, material se proceder a envolver las placas petri y pipetas con papel craft, para los tubos, probetas, vasos, etc., se elaboran tapones de algodn y gasa, procurando que ajuste con holgura, sobre los que finalmente se les colocaran un capuchn de papel y se atara con hilo pabilo. b. Esterilizacin de materiales 1. El material de vidrio perfectamente acondicionado se colocara en el horno a 160 C por dos horas. Despus de sacarlos, dejarlas enfriar y abrir los paquetes nicamente en reaasptica. 2. Durante el ciclo de esterilizacin no deber de abrirse la puerta del Esterilizacinporque ello implicara abortar el ciclo, debiendo en este caso recomenzarlo, adems de que el cambio de temperatura rompera le cristalera.

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IV.

RESULTADOS

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V.
1.

CUESTIONARIO

Cul es la finalidad de colocar tapones de algodn y envolver con el papel los materiales de vidrio para su esterilizacin? La finalidad es solo para que no se contaminen con agentes bacteriolgicos.
zQu mtodos de esterilizacin emplean en el calor seco?

Se utiliza el flameado con mechero y el horno Pasteur. Qu temperaturas emplea la esterilizacin en horno Pasteur? Qu precauciones se deben tener en cuenta cuando se utiliza dicho equipo?.
2.

Las temperaturas en el horno Pasteur son de 160 -170c y eso se da por dos horas. Ingresar con la vestimenta de laboratorio adecuada Haber tenido un previo conocimiento del manejo del horno Al colocar los objetos siempre hay que tener en cuenta que sean de vidrio (resistente a la temperatura indicada). Al llegar a la temperatura de 160-170c esperar dos horas, apagar el horno cuidadosamente y esperar unos minutos hasta que enfri.

3.

Qu mtodos de esterilizacin se emplean en el calor hmedo?

Se utiliza la autoclave y el bao Mara.

Qu temperaturas emplea la esterilizacn en autoclave? Qu precauciones se deben tener en cuenta cuando se utiliza dicho equipo?
4.

Se utiliza una temperatura de 121c y dependiendo de la resistencia del material

Explique cules son las diferencias entre los procesos de esterilizacin, desinfeccin y asepsia.
5.

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ESTERILIZACIN Es la eliminacin completa de toda vida microbiana Se lleva acabo de procesos qumicos y fsicos Las vidas que elimina son vegetativas y esporulados Es de duracin larga

DESINFECCIN Elimina la mayora o todos los microorganismos vegetales sobre los objetos inanimados Se efecta por medio de agentes qumicos No elimina esporos bacterianos Es de duracin corta

ASEPCIA/LIMPIEZA Es el uso de limpieza a los objetos y a uno mismo Se utiliza desinfectantes antibacterianos En el ser humano elimina bacterias

6.

Mencione algunos desinfectantes de uso frecuente en laboratorio.

Detergentes catinicos: Se puede utilizar diluido al 1% para la desinfeccin de manos ,suelos, ropas, y objetos emergentes. Cloro fenoles: son muy eficaces y se suelen asociar con los detergentes catinicos para mejorar el grado de desinfeccin . Compuestos clorados: usados en la desinfeccin de superficies ,ropa, urinarios, etc.se suelen usar diluidos en agua como la leja. Acido fnico: se utiliza diluido al 5% para la limpieza de objetos y superficies. Alcoholes: se utiliza para limpiar y desinfectar la piel, las manos el filo del instrumental y algunas superficies pequeas. tenemos (metanol par superficies que no estn en contacto de la piel.

VI. CONCLUSIONES Los materiales de importancia en el laboratorio de microbiloga son el autoclave, el bao maria, horno pasteur que son los mas utilizados para evitar la contaminacin bacteriana. Los materiales de esterilizacin son de mucha importancia como los equipos que se usa para evitar la incidencia de microorganismos ya sea en caor seco o hmedo. Es de mucha importancia saber el funcionamiento de dichos materiales tanto de esterilizacin, desinfeccin y asepsia.
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VII. BIBLIOGRAFIA Microbiologa general (Hans G. Schlegel). Sptima edicin. Manual de procedimientos de laboratorio, instituto nacional de salud-editora impresora amarilis, Per diciembre del 2002. Microbiologa en prctica. Dra. Diana l. vullo. Editorial Atlante S.R.L. Buenos Aires, 2000.

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