Ii JOBITU (Universidade Federal de Alfenas)

Partio da Albumina do Soro Bovino em Sistemas Aquosos Bifsicos

Heloisa H. C. Couto (DP)1, Mariana A. Medeiros (DB)1, Amanda A. de Souza (DP)1, Luciano S. Virtuoso1* (OR), Leonardo R.P.Lima (CO)2, Karla A.S.F. Vello (CO)2, Jerusa S. Garcia (CO)1 e Jos Maurcio S. F.Silva (CO)1.
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Fsico-Qumica/Cincias Exatas/Unifal-MG, Alfenas-MG; Fsico-Qumica/Qumica/UNEC, Caratinga-MG. * lsvirtuoso@unifal-mg.edu.br Palavras-chave: albumina do soro bovino, sistemas aquosos bifsicos, coeficiente de partio e efeito do pH.

Introduo
Existe um grande interesse na extrao e purificao de materiais biolgicos o que justifica o aumento das pesquisas no desenvolvimento de novos mtodos de extrao mais eficientes e ambientalmente seguros. Neste contexto, surgem os Sistemas Aquosos Bifsicos (SABs), os quais correspondem a sistemas de extrao lquidolquido para separao, purificao e pr1 concentrao de materiais biolgicos diversos . No presente trabalho a partio da Albumina do Soro Bovino (do ingls BSA) tem sido conduzida em SABs A BSA uma protena com estrutura e propriedades fsico-qumicas similares a da albumina humana. Esta protena ocupa um proeminente espao como reagente em muitos testes diagnsticos alm de ser utilizada para enriquecer meios de culturas de uma grande variedade de microorganismos e culturas de clulas.

em valores de pH abaixo e acima do ponto isoeltrico da BSA (PI=4,8). A mudana no coeficiente de partio pode ser explicada considerando a carga superficial da protena em relao ao seu PI. A BSA contm um excesso de carga negativa em pH > 4,8, enquanto que, abaixo do PI o residual de carga na superfcie da protena 3 positivo. Segundo o modelo de Johansson protenas carregadas negativamente tendem a se distribuir para a fase superior e quando com excesso de cargas positivas tendem a migrar preferencialmente para a fase inferior. A fora diretora no processo de transferncia a mudana de entalpia atribuda s interaes especficas entre a BSA e os componentes da fase inferior e segue o modelo de Johansson .

Objetivo
O trabalho teve por objetivo avaliar o comportamento de partio da BSA em SABs -1 formados por copolmero L35 1900 g mol , citrato de sdio e gua em diferentes condies de pH.

Metodologia
O estudo foi conduzido em quatro valores de pH e em composio fixa determinada pelo comprimento 2 da linha de amarrao (CLA) de 48,18% m/m . Os SABs foram preparados em tubos tipo Falcom, deixados em repouso 25,0C em banho termostatizado (TECNAL, BR) por 24 h. Alquotas de cada fase foram coletadas e um total de 3,5 g de cada fase foram misturadas com 30 L de uma soluo de BSA 9,4% m/m em um tubo de ensaio. Aps o novo equilbrio ser alcanado as fases foram coletadas e a quantificao da BSA realizada pelo mtodo de Bradford, usando um espectrofotmetro UV/Vis 2550 (SHIMADZU). Todo o experimento foi conduzido em duplicata. O coeficiente de partio da BSA (KBSA) foi determinado pela razo entre as concentraes verificadas para a BSA na fase superior e inferior. Figura 1. Efeito do pH no coeficiente de partio da -1 BSA (KBSA) em SABs formados por L35 1900 gmol + citrato de sdio + gua; o comprimento da Linha de amarrao (CLA) igual a 48,18 % (m/m).

Concluses
SABs tem se mostrado uma ponderosa e atrativa alternativa para a extrao e purificao da BSA.

Agradecimentos
PROBIC-Unifal-MG, FAPEMIG ________________
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Resultados e Discusso
A figura 1 apresenta os dados obtidos. Os resultados revelam um acentuado efeito do pH considerando a diferena nos valores KBSA obtidos

Albertsson P A. Partition of cell particles and macromolecules. 3 a ed. New York, Wiley, 1986. 2 Martins, J.P; Mageste, A.M.; da Silva, M.C. H.; da Silva, L.H.M, Patrcio, P. R., Coimbra, J. S. R.; Minim, L. A.;. J. Chem. Eng. Data 2009, 54, 28912894. 3 Johansson H O, Karlstrm G, Tjerneld F. et al. Driving forces for phase separation and partitioning in aqueous two-phase systems. J Chromatogr B. 1998; 3: 711.