1.

COLETA DE MATERIAL BIOLGICO

1.1 SANGUE: NOES BSICAS O sangue a massa lquida contida no aparelho circulatrio, que o mantm em movimento regular e unidirecional, devido essencialmente s contraes rtmicas do corao. O volume total de sangue num homem de aproximadamente 70 Kg de cerca 5,5 litros. O sangue formado por duas fases: elementos, figurados (os glbulos brancos, vermelhos e plaquetas) e o plasma que corresponde fase lquida na qual os primeiros em suspenso. Este, sendo removido da circulao coagula, e, do cogulo separa-se um lquido amarelo-claro: o soro sangneo. Os elementos figurados so os eritrcitos ou hemcias, as plaquetas e diversos tipos de leuccitos: neutrfilos, eosinfilos, basfilos, linfcitos e os moncitos. As plaquetas so anucleadas, sendo constitudas por fragmentos do citoplasma de clulas gigantes da medula ssea, os megacaricitos. O sangue principalmente um meio de transporte. Por seu intermdio, os leuccitos representam uma das primeiras barreiras contra a infeco, percorrem todo o corpo e podem concentrar-se rapidamente nos tecidos atingidos por infeco. O sangue transporta oxignio, gs carbnico, nutrientes e metablitos, distribuindo-os pelo organismo. Transporta ainda, escrias do metabolismo que so dele removidas pelos rgos de excreo. Distribui dos hormnios, permitindo a troca de mensagens qumicas entre rgos distantes. Alm disso, tem papel regulador na distribuio de calor, do equilbrio cido-bsico e do equilbrio osmtico. Dependendo da anlise o exame poder ser realizado no sangue total (exemplo: Hemograma); no plasma (exemplo: glicose, provas de coagulao) no soro (exemplo: bioqumicos e sorolgicos). Quando a anlise for realizada no soro, este ser obtido atravs da coleta em tubo sem anticoagulante (=seco), para que ocorra o processo de coagulao. Quando se pretende fazer a anlise no plasma, a amostra dever ser colhida em tubo de ensaio contendo anticoagulante especfico. Neste caso no ocorre a coagulao, pois o anticoagulante ir inibir um dos fatores da coagulao (geralmente clcio) impedindo assim a formao do cogulo.

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QUADRO 1 Sangue Total / Soro / Plasma = Diferenas a serem consideradas

Fonte: disponibilizado por: BD

1.1.1 Anticoagulantes utilizados pelas unidades da rede bsica municipal: EDTA (Tampa Roxa): atua em nvel do on clcio (seqestrador) Principal uso: Hematologia. CITRATO DE SDIO (Tampa Azul): captao dos ons clcio Principal uso: estudos da coagulao FLUORETO DE SDIO com EDTA (Tampa Cinza): captao dos ons clcio, e inibio da glicose principal uso: glicemia. EDTA COM GEL: principal uso Carga viral para HIV

Sangue colhido com anticoagulante deve ser cuidadosamente homogeneizado por inverso, 5 a 8 vezes para evitar hemlise e a coagulao do sangue.

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QUADRO 2 Cor / Tubos / Setor Aplicvel

Tampa

Anticoagulante

Setor

Material Vidro ou plstico Vidro ou plstico Vidro Vidro ou plstico Vidro ou plstico

EDTA Gel separador com ativador de cogulo Citrato de Sdio Siliconizado sem anti-coagulante Fluoreto de sdio + EDTA

Hematologia Sorologia e bioqumica Hematologia (Coagulao) Sorologia e bioqumica Bioqumica

OBS: Verificar sempre o volume correto de material para cada tubo.

Fonte: google capturado 2005

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1.1. 2 OBTENO DE SORO E PLASMA:

SORO - tubo sem gel separador: tampa vermelha

Aguardar a completa coagulao temperatura ambiente seguida de centrifugao a 3.000 rpm, por um perodo de 10 minutos. Os tubos com as amostras devem ser centrifugados com tampa para evitar evaporao, formao de aerossis bem como evitar o risco de contaminao tanto da amostra como do tcnico. SORO - tubo com gel separador: tampa amarela. Contm ativador de cogulo. Deve-se imediatamente aps a coleta homogeneizar, o tubo por inverso de 5 a 8 vezes, manter em repouso, verticalmente, por 30 minutos para retrair o cogulo e seguir a centrifugao a 3.000 rpm por 10 minutos. PLASMA: amostras colhidas com anticoagulantes especficos para evitar a coagulao.

1.1.3 COLETA DE AMOSTRAS DE SANGUE:

Condies Necessrias para a Coleta:
- Sala bem iluminada e ventilada - Lavatrio - Cadeira reta com braadeira regulvel ou maca - Garrote - Algodo hidrfilo - lcool etlico a 70% - Agulha descartvel - Seringa descartvel - Sistema a vcuo: suporte, tubo e agulha descartvel. - Tubos com e sem anticoagulante - Etiquetas para identificao de amostras - Recipiente rgido e prprio para desprezar material prfurocortante - Avental e mscara - Luvas descartveis - Estantes para os tubos

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1.1.3a VENOPUNO Coleta com seringa e agulha descartvel:

1) Coloque a agulha na seringa; 2) Movimente o mbulo e pressione-o para retirar o ar; 3) Oriente o paciente quanto ao procedimento; 4) Ajuste o garrote e escolha a veia; 5) Faa a antissepsia do local da coleta com algodo umedecido em lcool 70%; 6) Faa a puno e aps; 7) Solte o garrote assim que o sangue comear a fluir na seringa; 8) Colete o sangue de acordo com o nmero de exames solicitados (aproximadamente de 05 a 10 ml); 9) Separe a agulha da seringa com a ajuda do suporte de desconectar ou com uma pina e descarte-a no recipiente adequado para material prfurocortante; 10) Oriente o paciente a pressionar com algodo parte puncionada, mantendo o brao estendido, sem dobr-lo. 11) Transfira o sangue para um tubo de ensaio, com ou sem anticoagulante, de acordo com o exame solicitado. Escorra delicadamente o sangue pela parede do tubo. Este procedimento evita a hemlise da amostra. 12) Descarte a seringa no recipiente especfico para perfurocortante, no ultrapassando 2/3 do limite da capacidade.

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1.1.3b Passos para a coleta com sistema a vcuo e coleta mltipla:

1) Rosqueie a agulha no adaptador (canho). No remova a capa protetora de plstico da agulha; 2) Oriente o paciente quanto ao procedimento; 3) Ajuste o garrote e escolha a veia; 4) Faa a antissepsia do local da coleta com algodo umedecido em lcool 70%; 5) Faa a puno e aps introduza o tubo no suporte, pressionando-o at o limite; 6) Solte o garrote assim que o sangue comear a fluir no tubo; 7) Separe a agulha do suporte com a ajuda do frasco desconectador ou com uma pina e descarte-a no recipiente adequado para material prfurocortante; 8) Oriente o paciente a pressionar com algodo parte puncionada, mantendo o brao estendido, sem dobr-lo.

Fonte: AE DST/AIDS/Ipiranga - SMS -2003

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1.1.3c Coleta com sistema a vcuo e coleta mltipla

1) Rosqueie a agulha no adaptador (canho). No remova a capa protetora de plstico da agulha; 2) Oriente o paciente quanto ao procedimento; 3) Ajuste o garrote e escolha a veia; 4) Faa a antissepsia do local da coleta com algodo umedecido em lcool 70%; 5) Faa a puno e aps introduza o tubo no suporte, pressionando-o at o limite; 6) Solte o garrote assim que o sangue comear a fluir no tubo; 7) Separe a agulha do suporte com a ajuda do frasco desconectador ou com uma pina e descarte-a no recipiente adequado para material prfurocortante; 8) Oriente o paciente a pressionar com algodo parte puncionada, mantendo o brao estendido, sem dobr-lo.
O volume de sangue aspirado varia de acordo com a altitude, a temperatura ambiente, a presso baromtrica, a validade do tubo, a puno venosa e a tcnica de enchimento do tubo. Tubos com um volume de aspirao menor do que as dimenses indicadas (tubos de aspirao parcial) podem encher-se mais lentamente do que os tubos de igual tamanho com um volume maior de aspirao.

Fonte: disponibilizado por: BD. ATENO:

Tubos com volume insuficiente ou com excesso de sangue, alteram a proporo correta de sangue/aditivo e podem gerar resultados incorretos ou desempenho precrio do produto. 25

1.1.3d Agulhas para coleta a vcuo: As agulhas para coletas mltiplas possuem uma manga de borracha que recobre a outra extremidade (que no usada para puncionar o paciente) e que evita vazamento de sangue para dentro do adaptador durante a puno. As agulhas de coleta nica no possuem a manga de borracha recobrindo a poro final da agulha, devendo ser usadas para coletar apenas um nico tubo por paciente. Devido ao fato do sangue continuar fluindo atravs da agulha, ocorrer exposio do sangue se mais do que um tubo for coletado durante a venopuno. 1.1.3e Armazenamento dos tubos de coleta de sangue Armazenar os tubos a uma temperatura entre 4 e 25 C, a menos que haja outro tipo de indicao na etiqueta da embalagem. Os preservantes lquidos e anticoagulantes so claros e incolores. No utilizar se eles estiverem com a cor alterada ou precipitada. Os aditivos em p e desidratados, tais como EDTA, heparina, so brancos, o fluoreto e fluoreto/oxalato podem ser rosa claro. No utilizar se for observada alterao na cor. No utilizar tubos com prazo de validade vencido. OBSERVAES IMPORTANTES: I - Seqncia de coleta recomendada: a) - Tubos para amostras estreis b) - Tubos para provas de coagulao (exemplo: Citrato) c) - Tubos sem aditivos d) - Tubos com outros aditivos (exemplo: EDTA, fluoreto e gel) II - Como evitar refluxos:
Considerando que alguns tubos para coleta de sangue a vcuo contm aditivos qumicos, importante evitar um possvel refluxo do tubo, com possibilidade de reaes adversas nos pacientes. Para isso, as seguintes precaues devem ser observadas:

a) - Colocar o brao do paciente voltado para baixo; b) - Manter o tubo com a rolha na posio mais alta possvel; c) - Liberar o garrote assim que o sangue comear a fluir para dentro do tubo; d) - Certificar-se de que, durante a venopuno, o aditivo no entre em contato com a rolha ou com a poro final da agulha;

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