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substituda por ter de petrleo ou hexano). Separe a soluo verde obtida por filtrao ou simplesmente transfiraa lentamente para um recipiente de vidro, separando-a das folhas de espinafre.
Este artigo descreve um experimento simples envolvendo a extrao de carotenos e clorofilas do espinafre e a separao desses constituintes atravs de tcnicas cromatogrficas utilizando giz. cromatografia, extrao, isolamento clorofila facilmente identificada nas plantas, pois a responsvel pela colorao verde das mesmas. A clorofila a a mais abundante no reino vegetal, sendo encontrada, juntamente com a clorofila b , numa proporo de 3:1, respectivamente. O mais conhecido dos carotenos o -caroteno, com ampla ocorrncia no reino animal e vegetal, sendo normalmente encontrado nas plantas, junto com a clorofila. o mais importante dos precursores da vitamina A e utilizado como corante na indstria alimentcia. As estruturas das clorofilas a e b e a do -caroteno so ilustradas abaixo.
O experimento envolve a extrao das clorofilas e carotenos presentes no espinafre com o auxlio de solventes e posterior emprego de tcnicas cromatogrficas para a visualizao e separao desses componentes. Giz triturado far o papel da slica ou alumina, normalmente empregados como fase estacionria de uma coluna cromatogrfica, para efetuar a separao dos carotenos e das clorofilas.
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Materiais e reagentes
Cuba cromatogrfica ou vidro de maionese de 250 g com tampa 2 giz inteiros Acetona (etanol) e benzina (hexano ou ter de petrleo) Folhas de espinafre fresco Algodo Tubo de vidro ou seringa descartvel Frascos de vidro para coletar as fraes 1 conta gotas ou pipeta de Pasteur
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tcnica de cromatografia em coluna. Triture de um giz e adicione a um bquer ou qualquer outro recipiente de vidro, contendo 10 mL de benzina. Agite a mistura obtida e transfiraa, com o auxlio de um funil, para o interior da coluna contendo um pedao de algodo em uma das extremidades. A coluna de vidro utilizada tinha dimetro interno de 0,5 cm. Uma seringa plstica descartvel pode substituir a coluna de vidro. Espere at a benzina atingir o nvel do recheio da coluna, deixando o solvente escorrer por ao da gravidade, evitando dessa forma uma compactao maior do giz triturado, o que tornaria a cromatografia bastante lenta. Adicione, com o auxlio de um conta-gotas ou de uma pipeta de Pasteur, aproximadamente 3 mL do extrato de espinafre. Deixe todo o extrato penetrar pela fase estacionria da coluna e adicione, lentamente, a benzina. Colete toda a banda amarela, mude o solvente para acetona e colete a banda verde. O lcool
etlico pode substituir a acetona, apesar de se obter melhor resultado com a acetona.
Comentrios
O experimento descrito facilmente executado em sala de aula ou laboratrio e, utilizando materiais de fcil acesso, permite ao aluno entrar em contato com vrios conceitos envolvidos, desde a extrao de compostos de plantas com o auxlio de solventes at a cromatografia do extrato obtido. Conceitos como solubilidade, polaridade, coeficiente de partio, adsoro e fator de reteno (Rf) podem ser abordados durante a execuo do experimento, que tambm proporciona ao aluno o conhecimento de uma poderosa tcnica de anlise empregada cotidianamente em laboratrios de pesquisa e em algumas indstrias, como a farmacutica.
trato de espinafre? O mesmo extrato poderia ser preparado somente com a benzina? Teste. 2) Depois de separado o extrato das folhas, observa-se a presena de duas fases. Qual o solvente da fase inferior? Por que essa fase apresenta colorao verde mais intensa que a da fase superior? 3) Explique o resultado obtido na cromatografia utilizando o giz inteiro e a benzina em funo da polaridade dos compostos cujas estruturas so representadas na Fig. 1. 4) Por que a clorofila eluda da coluna com acetona ou etanol e no com benzina? Para responder s questes 3 e 4, recomenda-se uma discusso com os alunos sobre as interaes entre o caroteno e as clorofilas com a fase estacionria (giz) e com a fase mvel (benzina ou acetona).
Alfredo Ricardo M. de Oliveira, Fabio Simonelli e Francisco de Assis Marques, doutores em cincias (qumica orgnica), so professores adjuntos do Departamento de Qumica da Universidade Federal do Paran. E-mail: tic@quimica. ufpr.br.
Questes propostas
1) Por que se utiliza uma mistura de benzina e acetona no preparo do ex-
Figura 4: Representao da coluna cromatogrfica e solues dos componentes do extrato aps cromatografia em coluna.