Tle Biologie Moléculaire

Biologie moléculaire & Diagnostic prénatal/ Terminales
Collection l’Excellence 67845279 / 60477544 / 97281799

Les auteurs
DJESSOU Aimé
GBEGODO Paterne
67845279 / 60477544 / 97281799

Avant-propos
La rédaction du présent ouvrage est une initiative datant de 2015 suite à l’introduction de
l’initiation de la médecine prédictive (évaluation du risque en conseil génétique, analyse de
l’ADN par les techniques de la biologie moléculaire) dans le programme d’étude. En effet, La
première Situation d’Apprentissage (SA) de la classe de terminale porte sur la génétique, et
constitue un casse-tête pour bon nombre d’élève. L’introduction de l’initiation à la médecine
prédictive dans le programme d’étude a rendu encore plus complexe cette Situation
d’Apprentissage aussi bien pour les enseignants que pour les apprenants. Nous avions donc
conçu ce document en vue d’apporter notre contribution à une facile compréhension de cette SA
et surtout des notions de Biologie moléculaire par les apprenants. Le document est disponible en
version numérique afin de permettre aux professeurs d’extraire facilement des exercices et de
les modifier pour en faire usage. Les exercices figurant dans cet ouvrage sont extraits des livres
et annales européens et ont été modifiés afin de répondre au format en vigueur en République du
Bénin.
L’ouvrage comporte
• Des résumés sur quelques techniques et outils de la biologie moléculaire
• Des exercices guidés constitué de plusieurs consignes pour permettre aux apprenants de
maitriser les notions de base de la biologie moléculaire
• Des évaluation formative similaires aux exercices d’application mais avec une tache
unique pour évaluer les connaissances notionnelles et procédurales
• Des résolutions de problèmes pour se mettre en condition pour le BAC
Les Auteurs
2
CHRONOLOGIE DES GRANDES DECOUVERTES SUR LA GENETIQUE ET LES BIOTECHNOLOGIES
1866 Gregor Mendel : Les lois de l’hérédité
1900 Reprise des travaux de Mendel : les termes « homozygote » et « hétérozygotes » sont créés
1902 Garrod : Transmission de l’alcaptonurie (lien fondamental entre biochimie et génétique)
1911 T.H. Morgan : les gènes sont répartis linéairement sur les chromosomes
1928 L’expérience de Griffith : le "principe transformant"
1939 L’expérience de Comandon et De Fontbrune: information génétique et noyau
1941-44 L’expérience de Beadle & Tatum: la relation gène-enzyme => gène - protéine
1944 L’expérience de Avery, Mc Leod & Mc Carthy: " principe transformant" =ADN
1950 La composition chimique de l'ADN, par E. Chargaff
1952 L’expérience de Herschey et Chase
1953 La structure 3D de l'ADN, par J. Watson et Crick
1955 Garniture chromosomique de l’espèce humaine
1958 Meselson et Stahl : mécanisme de réplication de l’ADN
1960-1961 L'ARN messager, par F. Jacob, J. Monod et Lwoff
1960 Le dogme central de la biologie moléculaire, par F. Crick
1961-1966: le décryptage du code génétique par Marshall Nirenberg et Johann Matthaei
1962 La découverte des enzymes de restriction par Werner Arber
1973 Electrophorèse de l'ADN sur gel d'agarose
1976 Première synthèse d’un gène artificiel et premier diagnostic prénatal d’une maladie
1977 Séquençage de l'ADN (méthode de Sanger)
1977 Premier génome séquencé (virus bactériophage φX174)
1981 Première réalisation de la transgénèse
1983: Amplification de l'ADN par PCR
1983 Mise au point de la technique des marqueurs génétiques permettant le dépistage des
anomalies
1990 Premier essai de la thérapie génique
1995 Premier génome bactérien (Haemophilus influenzae) séquencé (1,83Mb)
1998 Pyroséquencage par séquençage par synthèse (1985)
1999 Séquençage entier du chromosome humain No 22
2001-2003 Séquençage complet du génome humain (3 Gb)
2000 Publications des génomes d'A. thaliana (125 Mb) et de D. melanogaster (180 Mb)
2000 Premier succès de la thérapie génique pour soigner une maladie immunitaire
3
Les enzymes de restriction :

des ciseaux moléculaires
Références bibliographiques
- Exercice et problème de génétique 4e éd. Flammarion
- SVT Term S Spécialité. BELIN 2002
- Encyclopaedia Universalis, article de Nicolas CHEVASSUS-au-LOUIS
-SVT Term S 2002. Spécialité. Collection Raymond TAVERNIER et Claude LIZEAUX. Bordas
Werner Aber est un microbiologiste et généticien suisse né le 3 juin 1929

à Gränichen an Argovie. Il a obtenu en 1978 le Prix Nobel de
Physiologie ou médecine avec Hamilton Smith et Daniel Nathans pour la
découverte des enzymes de restriction.
La découverte des enzymes

de restriction
Comment les bactéries, dépourvues de système immunitaire, se défendent-elles contre les
virus (appelés aussi phages) qui les infectent ? C'est le Suisse Werner Arber (né en 1929), qui
apporte le premier la réponse à cette question. En 1962, il découvre que des enzymes
bactériennes sont capables de couper l'ADN du phage au niveau de zones bien déterminées
(différentes en fonction des enzymes), appelées sites de restriction, qui correspondent à de
courtes séquences de 4 à 8 nucléotides. En 1970, l'Américain Hamilton O. Smith (né en
1931) purifie la première enzyme de restriction à partir de la bactérie Haemophilus
influenzae. L'année suivante, son compatriote Daniel Nathans (1928-1999) l'utilise pour
découper l'ADN du virus SV40. En faisant des différentes enzymes de restriction de
véritables ciseaux moléculaires, qui permettent de couper l'ADN à volonté, ces trois
chercheurs ont doté la biologie moléculaire d'un de ses outils les plus indispensables. Pour
cette véritable invention du génie génétique, ils recevront, en 1978, le prix Nobel de
physiologie ou médecine.
Source : Encyclopaedia Universalis, article de Nicolas CHEVASSUS-au-LOUIS
Collection l’Excellence 67845279 / 60477544 / 97281799 4

▪ Les différents types d’enzymes de restriction

Il existe 3 types d'enzymes de restriction qui diffèrent les unes des autres, par la localisation
de leur activité catalytique :
- Les enzymes de type I: Ayant reconnu la séquence cible, l'enzyme se déplace sur l'ADN et
coupe de manière aléatoire mille à quatre mille bases plus loin
- Les enzymes de type II: L'enzyme coupe l'ADN au niveau de la séquence reconnue.
- Les enzymes de type III: L'enzyme reconnaît la séquence cible et coupe la molécule d'ADN 20 à
25 bases plus loin.
Seules les enzymes de type II qui coupent au niveau du site de reconnaissance sont utilisés en
génie génétique parce qu’on peut contrôler parfaitement le site de coupure et donc les
extrémités engendrées. En 1990, on avait recensé plus de mille endonucléases isolées à partir
de 867 espèces bactériennes différentes.
▪ Nomenclature des enzymes de restriction
En 1973, Smith et Nathan ont proposé une nomenclature qui est définitivement adoptée.
Chaque endonucléases a un nom de code déterminé selon les principes suivants :
· La première lettre en majuscule est l'initiale du genre de la bactérie.
· Les deux lettres suivantes, en minuscule désignent l’espèce de la bactérie.
· La 4ème lettre en majuscule, (pas toujours présente) désigne la souche bactérienne.
· Un chiffre romain distingue les enzymes d'une même souche dans l'ordre de leur découverte.
Exemple : EcoRI: E=Escherichia; Co= Coli; R= Souche RY13; I = 1ère endonucléases
isolée de
cette souche
▪ Les différents types de coupure

Les enzymes de restriction ne coupent pas l’ADN au hasard mais sur des séquences bien
précises. Ces séquences sont des palindromes à 6 ou 4 paires de bases
Le tableau ci-dessous donne la liste de quelques enzymes de restriction et leurs sites de
coupure au sein du palindrome reconnue.

Les enzymes de restriction de type II peuvent donner deux types de coupures :
Les coupures à bouts francs et les coupures décalées
▪ Les coupures franches
L’enzyme coupe exactement l’ADN au même niveau sur les deux brins de la séquence
reconnue soit au niveau de l’axe ou du centre de symétrie.
Exemple : Séquence palindromique reconnue GATATC

CTATAG
Après digestion
GAT ATC GAT ATC
CTA TAG CTA TAG
▪ Les coupures décalées
Les sites de coupures sur les deux brins sont décalés ce qui donne après coupure, des
extrémités dites cohésives ou collantes. Les extrémités débordantes résultent d'une coupure
décalée et les extrémités obtenues sont auto-complémentaires entre elles. Elles peuvent donc se
réapparier spontanément si les conditions sont favorables. On parle alors d'extrémités
cohésives ou de bouts collants
Exemple : Séquence palindromique reconnue CGGCCG

GCCGGC
En résumé
6
Ci-dessous, les sites de restriction de 3 endonucléases (= enzymes de restriction) : HpaI génère

des "bouts francs" et EcoRI ou NspII génèrent des "bouts collants"
Remarque : les bouts collants offrent une nouvelle perspective : l'hybridation de molécule
d'ADN d'espèces différentes qui ouvre la voie de la transgénèse
7
L’ELECTROPHORESE ET LA VISUALISATION
DES FRAGMENTS D’ADN
e
-Exercice et problème de génétique 4 éd. Flammarion
-Module : Techniques d’analyses Biochimiques et Moléculaire M2/Université Hassiba Benbouali de Chlef | SNV | Département de
Biologie
-Module : les techniques de base de la biologie moléculaire Mr. BENSLAMA A de l’Université Mohamed Khider-
Biskra/Faculté des sciences exactes et des sciences de la nature et de la vie/Département des sciences de la nature et de la vie
2016-2017
Arne Wilhelm Kaurin Tiselius né le 10 Août 1902 à Stockholm et décédé

le 29 octobre 1971 est un biochimiste suédois, lauréat du Prix Nobel de
Chimie en 1948. Il isola par électrophorèse plusieurs protéines du sang et
du lait et obtint par absorption la séparation de divers acides aminés.
Mise au point par Arne Wilhelm Kaurin Tiselius en 1937, l’électrophorèse est utilisée en
biologie moléculaire pour la séparation et la caractérisation des acides nucléiques ou des
protéines préalablement extraits et purifiés. Cette technique repose sur le principe des charges
électriques et des déplacements des ions. Selon leurs caractéristiques propres ces ions auront des
vitesses de migration différentes.
8
Principe
L’électrophorèse est basée sur le déplacement de molécules ioniques sous l'effet d'un
champ électrique. Les molécules anioniques (chargées négativement) migrent vers
l'anode et les molécules cationiques (chargées positivement) se déplacent vers la
cathode. La molécule d’ADN est un polynucléotide. Chaque nucléotide est composé de
3 types de résidus : le désoxyribose, la base azotée, le groupement phosphate H2PO4 qui
peut s’ioniser en PO42-. En milieu basique, la molécule d’ADN se charge négativement
(H2PO4→ 2 H+ + PO42-). Sur les acides nucléiques, les charges sont portées par les
groupements phosphate du squelette. La molécule d’ADN placée dans le tampon (TBE
1X, pH 8) et dans le champ électrique créé dans la cuve à électrophorèse va migrer vers
l’anode (+). On va donc effectuer les dépôts coté cathode(-).
La dilution et la densification de l’ADN par une solution colorée de bleu de
bromophénol (BBP) va permettre de suivre l’avancement de. Chaque fragment de
restriction est déposé dans le gel et la cuve mise sous tension (250 V) pendant une heure
environ. La migration de l’ADN sous l’effet du champ électrique va se réaliser dans
l’épaisseur du gel poreux d’agarose dans lequel l’ADN a été déposé. Les pores de ce gel
vont se comporter comme un tamis qui freine le déplacement des fragments d’ADN.
La vitesse de migration des fragments sera principalement déterminée par :
- la résistance du gel à la migration des fragments proportionnelle à leur taille;
- la concentration du gel en agarose ;
- l’intensité du courant traversant la cuve électrophorétique.
Les fragments d’ADN vont donc se séparer en fonction de leur taille. Si le facteur le
plus important est la résistance du gel à la migration de l’ADN, ce sont les plus petits
fragments qui migreront le plus loin. Quand le front de migration atteint l’extrémité du
gel, on arrête la manipulation. Le gel est introduit dans une cage connectée à un écran
d’ordinateur. La projection de la lumière UV permet d’observer les migrations de
différentes bandes.
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LA CENTRIFUGATION
-Exercice et problème de génétique 4e éd. Flammarion
-Technique d’analyse de laboratoire/ L3 Gnétique moléculaire/ Dr SEMMEME O.
-TP Centrifugation/ Univ.Paris XII val de MARNE
En 1878 le suédois Gustaf de Laval invente une écrémeuse centrifuge, ou écrémeuse-

centrifugeuse, sur un procédé de l’allemand Wilhelm Lefeldt. En 1889, AB Séparator, la
société de Laval, rachète le brevet des disques coniques du baron allemand Clemens von
Bechtolseim, qu’il nomme disque Alfa, et commercialise l’année suivante une nouvelle
écrémeuse utilisant ces disques qui améliorent grandement la séparation des composants. En
1894, Laval, produit sa première Colibri.
En 1888, le belge Jules Mélotte dépose un brevet d’écrémeuse, et en 1893 est commercialisée
celle des allemands Franz Ramesoshi et Franz Schmidt. Dès lors, le procédé de séparation
centrifuge est appliqué à l’industrie.
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Définition
La centrifugation est un procédé de séparation mécanique des composés

d’une différence de densité en les soumettant à une force centrifuge
entrainée dans un mouvement de rotation. Le mélange à séparer peut être
constitué soit de deux phases liquides, soit de particules solides en
suspension dans un fluide. L’appareil utilisé est une machine appelée
centrifugeuse.
Exemple : la centrifugation du sang (voir schéma ci-contre)
▪ Le matériel
La centrifugation est réalisée dans un appareil appelé centrifugeuse
Une centrifugeuse est constituée d’une chambre de centrifugation dans
laquelle sort l’axe de rotation, qui est relié au moteur. Sur l’axe on fixe le
rotor et dans les emplacements du rotor on met les éprouvettes ou tube
contenants l’échantillon à centrifuger.
Disposition de tubes dans Une centrifugeuse Principe de fonctionnement

centrifugeuse d’une centrifugeuse
▪ Principe de la centrifugation
En broyant des cellules, on obtient un homogénat, suspension comprenant les différents
organites de la cellule. Ces organites se distinguent par leur taille, leur forme, leur densité.
Spontanément, sous l'effet de la gravité, ils sédimentent, à des vitesses différentes parce que
leurs tailles, forme et densité sont différentes. Mais cette sédimentation se fait très lentement.
On l'accélère en centrifugeant, ce qui va revenir à augmenter la gravité. En fait c'est la force
centrifuge liée à la rotation qui l'emporte sur la gravité. Dans la centrifugeuse des vitesses de
plusieurs dizaines à plusieurs centaines de milliers de tours par seconde sont atteintes,
produisant des accélérations sur la molécule à purifier. La sédimentation se produit alors en
quelques heures au lieu de plusieurs années.
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Biologie
Tableau récapitulatif & Diagnostic
moléculaire de prénatal/ Terminales
quelques maladies héréditaires
Maladies récessives autosomiques
N0 Maladies Caractéristiques
1 Albinisme Absence de pigmentation de la peau
2 Galactosémie Intolérance au galactose, dommage au cerveau, au foie et aux
yeux
3 Mucoviscidose Difficulté respiratoires
4 Phénylcétonurie Déficience intellectuelle
5 Drépanocytose (sicklémie ou Douleur dans les os, effets pleiotropiques négatifs sur de
anémie falciforme) nombreux organes
7 Hémochromatose Douleur articulaire, brunissement de la peau, raréfaction des

cheveux et des poils pubiens
8 Surdité-mutité Sourd et muet
Xéroderma pigmentosum Apparition de taches brunes sur la peau
Amyotrophie spinale infantile Faiblesse musculaire dès la naissance, incapacité de s’asseoir
Anémie de Fanconi Déficience de la moelle osseuse
Dysplasie chondro- Doigts et orteils surnuméraires, membres courts
ectodermique
Méthémoglobinémie Coloration bleue de la peau
Fibrose kystique Sécrétion glandulaire excessive causant des dommages aux tissus
et aux organes
NB : Le groupage sanguin et le facteur rhésus sont codés par des gènes autosomaux
Maladies récessives gonosomal X
1 Insensibilité aux androgènes Individu de sexe masculin ayant certains traits féminin
2 Déficience en G6PD Pâleur ou urine foncée, fatigue ou anémie
3 Myopathie de Duchenne Faiblesse musculaires, perte musculaire
4 Anodontie Dents plus petites, défaut de l’émail
5 Hémophilie Défaut de coagulation sanguine
6 Syndrome de LOWE Cataracte des yeux, glaucome
7 Daltonisme Incapacité de distinguer certaine couleur ou toutes
8 Dystrophie musculaire Perte graduelle des fonctions musculaires
9 Dysplasie ectodermique Peau en mosaïque (région avec ou sans glandes
anhidrotique lié au gonosome X subdoripare)
10 Syndrome du X fragile Déficience intellectuelle

Maladies dominantes autosomales
1 Hypercholestérolémie Taux élevé de cholestérol sanguin ; obstruction

possible des artères
2 Chorée de Huntington ou danse de Dégénérescence progressive et irréversible du
Saint-Guy système nerveux, mouvement épileptoïde
3 Ostéo-anychodysplasie Malformation des os
4 Brachydactylie Malformation des doigts
5 polydactylie Doigts et orteils surnuméraires

6 Camptodactylie Doigts recourbés et rigides
7 Syndrome de Marfan Tissus conjonctif anormal
8 Maladie de Rendu-Osler Hémorragie nasale
9 Hémérapie congénitale Cécité crépusculaire ou nocturne
10 Achondroplasie Nanisme
11 Progérie Vieillissement extrêmement prématuré
12 Neurofibromatose Tumeur du système nerveux ou de la peau
13 Polykytose rénale Kyste rénaux provoquant insuffisance rénal
Maladies dominantes gonosomale X
2 Syndrome d’Aicardi (agénésie du corps Nez retroussé, angle diminué de l’arête du nez.
calleux + choréorétinite)
3 Incontinentia pigmenti Apparition précoce de vésicule et de pustules
comparables à celle de la varicelle sur la peau du
nouveau-né
4 Syndrome de Rett Incapacité à combiner les mouvements
musculaires, muscles flasques
Hérédité liée au chromosome Y: hérédité holandrique

Le chromosome Y est pauvre en gènes, à l’exception de ceux intervenant dans les processus de
masculinisation ou de la spermatogenèse. Un caractère dû à un gène sur le chromosome Y ne se
manifesterait que chez le garçon et répondra à une transmission père-fils
Exemple : L’hypertrichose des oreilles
www.passportsante.net
www.orpha-net
www.msdmanuals.com
www.filiereokid.com
www.clikandcare.fr
www.santelejournaldesfemmes.fr
www.afi-telethon.fr
SVT Term S Spécialité. BELIN 2002
SVT 1ère S / Collection A. DUCCO. Programme 2011. Belin
SVT 1ère S / Collection A. DUCCO. Nouvelle édition. Belin 2005.
13
EXERCICES GUIDES
L’objectif des exercices guidés est d’amener les apprenants à maitriser les notions de base en
Biologie moléculaire et en génie génétique indispensables à la résolution des problèmes. Ces
exercices comportent donc plusieurs consignes visant à guider l’apprenant dans l’application
des savoirs construits lors du cours et sont proposés dans un ordre de difficulté croissante.
14
Exercice guidé 1 Objectif : appliquer les connaissances relatives au mode d’action des enzymes de
restriction
On dispose de 3 enzymes de restriction. Ces enzymes découpent l’ADN en des endroits précis,
appelés sites de restriction, ce qui permet à la bactérie qui les produit dans son cytoplasme de
digérer l’ADN de bactériophages qui tendent de l’infecter.
Document : Action de quelques enzymes de restriction et séquence d’ADN test.
Consigne : détermine quelle (s) enzyme(s) de restriction peuvent agir sur la séquence test
proposée. Justifie ta réponse
Exercice guidé 2 Objectif : appliquer les connaissances relatives au mode d’action des enzymes de
restriction et à l’électrophorèse des fragments de restriction
On étudie deux allèles du même gène dont les séquences sont décrites dans le document 1 :
l’allèle « M » correspond à l’allèle normal, l’allèle « m » correspond à l’allèle morbide. On
dispose des enzymes de restriction indiqué dans le document 2.
Document 1 : les deux allèles du gène étudié.
Allèle M CTAGGCCACTGTCAACATCGGTCACGCTCGTTAACCTGCATCGA
GATCCGGTGACAGTTGTAGCCAGTGCGAGCAATTGGACGTAGCT
Allèle m CTAGGCCACTGTTAACATCGGTCACGCTCGTTAACCTGCATCGA
GATCCGGTGACAATTGTAGCCAGTGCGAGCAATTGGACGTAGCT
Document 2 : les enzymes de restriction
Consigne
a-Identifie le (s) les enzymes de restriction pouvant digérer ces allèles
b-Evalue la taille (en nucléotides) des fragments obtenus après digestion des allèles ‘’M’’ et
‘’m’’ par le(s) enzymes.
c-Schématise pour chaque génotype (M//M, M//m, m//m) le résultat de l’électrophorèse des
fragments obtenus après digestion par cette (ces) enzyme(s). On rappelle que la migration dans
un champ électrique est d’autant plus rapide que les fragments sont de petite taille. Les tailles
des fragments seront indiquées en Pb

Exercice guidé 3 Objectif : appliquer les connaissances relatives à l’évaluation du risque et

l’interprétation des résultats d’électrophorèse
L’arbre généalogique ci-dessous (document 1) est celui d’une famille dont les deux parents
sains ont donné naissance à un enfant atteint d’une maladie génétique récessive autosomique et
à un enfant sain. Lors d’une troisième grossesse, le couple désire savoir si l’enfant à naitre sera
sains. Tous les membres de la famille sont testés par la méthode de Southern (digestion du gène
en cause de la maladie par une enzyme de restriction + électrophorèse + transfert sur
nitrocellulose + mise en contact avec une sonde radioactive + autoradiographie). Les résultats
du test de Southern figurent dans le document 2.
Document 1: Arbre généalogique de la famille diagnostiquée
Document 2: Résultat de l’analyse de l’ADN par la méthode de Southern
Consigne :
a-Evalue le risque pour l’enfant à naitre II3 d’être atteint de la maladie
b-Etablis le diagnostic prénatal de l’enfant II3 (c’est-à-dire analyse les résultats du test de
Southern effectué pour les membres de la famille puis tire une conclusion par rapport à
l’état de santé de l’enfant à naitre)
.
Exercice guidé 4 Objectif : 1-appliquer les connaissances relatives à l’interprétation des résultats
d’électrophorèse. 2- mettre en relation des informations dans un but explicatif
L’hémochromatose se traduit par une surcharge en fer, qui s’accumule progressivement dans
les tissus notamment le foie, et conduit à long terme à une cirrhose. La maladie est récessive.
Elle est la conséquence de la mutation C282Y affectant le gène HFE localisé sur le
chromosome 6. La fréquence des hétérozygotes dans la population est de 1 sur 10. Les
symptômes apparaissent vers l’âge de 40 ans. Lorsque la maladie est dépistée suffisamment
tôt, des saignées sont pratiquées régulièrement, ce qui limite la surcharge en fer. Un couple se
rend en consultation médicale afin de savoir si leur enfant développera plus tard la maladie. Le
document ci-dessous présente les résultats d’une analyse de l’ADN par la technique de PCR-
restriction, réalisée chez les membres de la famille : le père (1), la mère (3) et l’enfant à naître
(2). Ces documents sont mis à ta disposition pour éclairer le couple sur l’état de santé de leur
enfant.

Document 1
a-Digestion du gène HFE par Rsal I
L’enzyme de restriction Rsal I digère l’allèle normal du gène HFE, libérant deux fragments de,
respectivement, 247 et 140 paires de bases. La mutation fait apparaître un nouveau site de
coupure dans le fragment comportant 140 paires de bases : l’une des bandes contient 111
paires de bases, et l’autre, très petite, migre très vite et n’apparaît généralement pas sur les
profils).
b-Résultat d’électrophorèse
L’analyse de l’ADN a réalisé par la technique de Southern Blot à permit d’obtenir le profil de
bandes des membres de la famille.
Tu es invité à poser le diagnostic de l’hémochromatose pour l’enfant à naître. Pour cela :

- Relève la taille de chaque fragment pour chaque allèle après digestion de l’ADN par l’enzyme
Rsal I
-Précise les fragments qui seront observés sur l’électrophorégramme pour chaque génotype
(homozygote malade, homozygote sain, hétérozygote)
-Schématise le profil électrophorétique pour chaque génotype
-Ecrit la longueur de chaque fragment figurant sur les résultats indiqués dans le document 1b
-Ecrit le génotype de chaque membre de la famille
-Explique si l’enfant à naître pourrait développer plus tard cette maladie.

Exercice guidé 5
Objectif : 1-appliquer les acquis relatifs à l’évaluation du risque, l’interprétation des résultats
L’hémophilie B se caractérise par un retard ou une absence de coagulation pouvant entraîner

une hémorragie importante. Elle est liée à l’absence d’un facteur de coagulation, le facteur IX,
dont la synthèse est gouvernée par un gène situé sur le chromosome X. Elle affecte un garçon
sur 50000. Mr et Mme Z attendent un enfant et désire savoir l’état de santé de cet enfant car le
père de Madame Z est hémophile. Les documents ci-dessous sont mis à ta disposition pour
expliquer au couple les résultats issus des examens médicaux.
Document 1 : Arbre généalogique d’une famille dont certains membres sont atteints d’hémophilie
B
Document 2
Document 2a : Profil de bandes en Southern blot des membres de la famille.
D’après une échographie, l’enfant III3 est un garçon. Une analyse de l’ADN a été pratiquée par
la méthode du Southern blot (doc. 2). La sonde utilisée permet de différencier les formes
mutées ou normales du gène impliqué.
Le diagnostic a ensuite été complété par un caryotype dont le résultat figure dans le document
2b

Document 2b : Caryotype de l’enfant III3
Exploite les documents pour expliquer les

résultats observés chez le fœtus lors des
examens médicaux. Pour cela :
- Evalue le risque pour l’enfant III3 d’être

hémophile.
- Détermine les génotypes des membres de la
famille.
- Explique pourquoi l’analyse de l’ADN a été
suivie d’un caryotype.
- Explique les résultats des analyses effectuées, à la fois en ce qui concerne l’absence
d’hémophilie et l’existence de l’anomalie chromosomique.
Exercice guidé 6 objectif : 1-appliquer les acquis relatifs à, l’interprétation des résultats
Un couple en bonne santé et dont la femme est enceinte demande un avis médical par rapport à
l’état de santé de leur fœtus car dans la famille de cette dernière certains sujets sont atteints
d’hémophilie B. A la suite de la consultation, le médecin a effectué une recherche
généalogique suivie de l’élaboration du caryotype de l’enfant à naître puis une étude d’ADN
de quelques membres de la famille. Les documents ci-dessous sont mis à ta disposition
Document 1 : Phénotypes rencontrés dans une famille atteinte
L’hémophilie B est une maladie génétique rare liée à un déficit d’une protéine nécessaire à la
coagulation sanguine. Le gène codant pour la synthèse de cette protéine est situé sur le
chromosome X. On en connait deux allèles dont l’un entrainant la coagulation normale du sang
et l’autre muté responsable de l’hémophilie. Un homme portant un allèle muté du gène est
malade. Une femme n’est atteinte que si elle possède deux allèles mutés.

Document 2 : Caryotype du fœtus
Document 3 : Analyse de l’ADN

L’ADN du gonosome X est isolé à partir d’un échantillon de sang puis digéré en multiples
fragment par une enzyme de restriction qui reconnait une séquence précise. Les fragments
obtenus sont séparés par électrophorèse sur gel d’agarose ; ceci permet d’isoler le gène en
étude. Les fragments d’ADN sont dénaturés par immersion du gel dans une solution
alcaline puis transférés sur une membrane de nylon. Les fragments de la membrane sont
ensuite hybridés avec une sonde radioactive. Le film est ensuite développé et on obtient le
résultat suivant.
NB : kb = kilobase ; 1kb =1000 paires de nucléotides

A partir de l’exploitation des documents, explique à ce couple la transmission de
l’hémophilie B puis établis le diagnostic pour l’enfant à naître.

Evaluation formative

Evaluation formative 1 Objectif : évaluer les acquis relatifs à l’évaluation du risque en

conseil génétique et la mise en relation des informations dans un but explicatif
La phénylcétonurie est une maladie héréditaire due à un déficiite d’une activité enzymatique
provoquant des troublres nerveux graves. Cette maladie s’évit depuis plusieurs génération au
sein d’une famille ou deux couples en attente d’un enfant s’inquiètent de leur état de santé
Document 1: Cause de la phénylcétonurie

Le gène code pour une enzyme, la PAH qui transforme la phénylalanine en tyrosine. La
phénylalanine est un acide aminé apporté par l’alimentation. L’allèle “morbide” code pour une
variante non fonctionnelle de l’enzyme PAH qui transforme la phénylalanine en tyrosine ce
qui provoque l’accumulation de phénylalanine dans le sang d’où le nom de la maladie. Le taux
é levé de phénylalanine entrave le développement normal du cerveau et provoque des troubles
neurologiques variés mais peuvent aller jusqu’à une arriération mentale grave. Bien que la
maladie se déclare rarement(1 cas sur 1600), on estime que dans la population européeene, un
individu sur 63 est porteur de la mutation.
Document 2: Arbre généalogique de la famille
Homme sain femme saine enfant à naitre

Homme malade femme malade
Exploite les documents fournis pour expliquer le mode de transmission de la maladie puis
évaluer le risque pour les enfants des couples III 3-4 et III 6-7 d’etre atteint de la maladie
Evaluation formative 2 Objectif : évaluer les acquis relatifs à l’évaluation du risque en

conseil génétique
Le daltonisme est une anomalie de la vision des couleurs, le sujet étant, dans la plupart des cas,
incapable de distinguer le rouge et le vert. Des données statistiques montrent que, dans la
population, il y a environ dix fois plus d’hommes que de femmes daltoniennes. Elsa (III3) et
Bill (III7) tous daltoniens ont épousé des personnes à vision normale. Izi (III12) ayant la vision
normale a épousé un daltonien. Ces derniers attendent tous un enfant et s’inquiètent par rapport
à l’état de santé de leur fœtus. Pour les aider à évaluer le risque pour l’enfant à naitre d’être
daltonien, on te fournit la documentation ci-dessous.
Document: arbre généalogique de la famille des individus concernés

Le document suivant représente l’arbre généalogique d’une famille dans laquelle des cas de
daltonisme ont été observés.
22
NB : On précise qu’aucun cas de daltonisme n’a été signalé dans la famille de la femme III6.
Exploite les informations relevées de cet arbre généalogique pour expliquer la transmission
du daltonisme puis évaluer le risque pour chacune des familles concernées d’avoir un
enfant atteint du daltonisme.
Evaluation formative 3 Objectif : évaluer les acquis relatifs au mode d’action des enzymes
de restriction, à l’interprétation des résultats d’électrophorèse et à la mise en relation des
informations dans un but explicatif
L'hémochromatose est une maladie génétique qui ne se manifeste qu'à l'âge adulte. Grâce aux
biotechnologies, un diagnostic moléculaire précoce permet la mise en place d'un traitement qui
normalise l'espérance de vie des individus atteints. Des parents sains vivant dans le nord de
l’Europe souhaitent savoir si parmi leurs trois enfants certains risquent de développer cette
maladie.
Document 1: caractéristiques d'une maladie génétique, l'hémochromatose
L'hémochromatose est une maladie génétique récessive gui se manifeste par une accumulation
anormale de fer dans les cellules pouvant provoquer des décès par cancer du foie ou
défaillance cardiaque.
Cette maladie est liée à la mutation du gène HFE situé sur le chromosome 6. Ce gène code une
protéine membranaire dont la fonction normale est de limiter l'accumulation de fer dans les
cellules. Dans la population du nord de l'Europe, 1 personne sur 10 est porteuse d'un allèle
muté ce qui fait de l'hémochromatose une maladie héréditaire très fréquente.
Document 2: principe du diagnostic moléculaire effectué pour les enfants de la famille étudiée
Les allèles du gène HFE des trois enfants de la famille étudiée ont été isolés. Le diagnostic
moléculaire porte sur une séquence d'ADN de 387 paires de nucléotides susceptible de
contenir la mutation recherchée.
Pour établir le diagnostic, celte séquence d'ADN est dénaturée : les deux brins de la double
hélice sont séparés, puis multipliés. On obtient alors de nombreux simples brins d'ADN
correspondant à cette séquence de 387 nucléotides. On les soumet ensuite à une digestion par
une enzyme de restriction, l'enzyme Rsal. Les fragments obtenus sont soumis à une
électrophorèse.
Document 2a : site de restriction de l'enzyme Rsal
GT AC Brin non transcrit
CA TG Brin transcrit
Emplacement de la coupure 23
Document 2b : extraits de la séquence d'ADN de 387 nucléotides utilisée pour le diagnostic

moléculaire
Le reste de la séquence est identique pour les deux allèles et ne présente pas de site reconnu
par l'enzyme de restriction utilisée. Pour chaque séquence, seul le brin non transcrit est
présenté. Les tirets représentent les nucléotides identiques à l'allèle HFE sain pris comme
référence.
Document 2c : résultats de l'électrophorèse

La photographie montre un fragment du gel
d'électrophorèse après migration et mise en évidence
des fragments d'ADN. Ceux-ci apparaissent sous forme
de bandes sombres. Dans les conditions de cette
électrophorèse, les fragments dont la taille est inférieure
à 50 nucléotides ne sont pas visibles.
E1, E2 et E3 correspondent aux trois enfants dans l'ordre de naissance.
A l'aide des documents et de vos connaissances, vous déterminerez, pour le gène étudié, les
allèles portés par chacun des trois enfants de cette famille afin de répondre aux
interrogations des parents.
Vos réponses seront argumentées et vous préciserez la longueur des fragments d'ADN obtenus
dans le document 2c.
Evaluation formative 4 Objectif : évaluer les acquis relatifs au mode d’action des enzymes de
restriction, à l’interprétation des résultats d’électrophorèse et à la mise en relation des
informations dans un but explicatif
Dans le cadre d’une recherche de parenté, des généticiens réalisent la carte génétique d’un
enfant. Une carte génétique est le résultat d’une électrophorèse de fragments d’ADN après
dégradation partielle de cet ADN à l’aide d’enzymes de restriction ; elle est caractéristique de
l’individu (celui-ci l’héritant de ses parents). On cherche à savoir si deux individus A et B
peuvent ou non être les parents testés à partir des documents qui suivent :
Document 1 : site de restriction de l’enzyme Alu I

Les enzymes de restriction sont des enzymes bactériennes capables d’hydrolyser l’ADN en
coupant les doubles brins au niveau de séquences spécifiques. AluI est une enzyme de
restriction extraite de la bactérie Arthrobacter luteus

Document 2 : représentation simplifiée de la séquence en bases de l’ADN des individus A et B

Individu A :
GAGATCTGAGCTTTGAGAGAGGCTTAATAGCTGAGGGGT
CTCTAGACTCGAAACTCTCTCCGAATTATCGACTCCCCA
Individu B :
AGATCTGAGCTTTGAGGAGCTTAATAGCTGAGGGG
TCTAGACTCGAAACTCCTCGAATTATCGACTCCCC
Document 3 : Carte génétique de l’enfant
Après digestion de l’ADN de l’enfant par l’enzyme AluI, les fragments de

restriction obtenus sont séparés par électrophorèse et révélés par une
coloration spécifique. La distance de migration des fragments de restriction
est inversement proportionnelle au nombre de nucléotides de sa séquence (le
nombre de nucléotides est indiqué en paires de bases : PB à côté de chaque
fragment révélé. La flèche indique le sens de migration des fragments de
restriction
Exploite les informations collectées des documents pour expliquer si les individus A et B
peuvent ou non être les parents de l’enfant testé.

RESOLUTION DE PROBLEMES
A PARTIR DE DOCUMENTS
26
Résolution de problème 1
Madame Y (la femme III-9) est issus d’une famille où sévit la drépanocytose. Durant ses
fiançailles, une amie médecin lui avait conseillé d’effectuer avec son fiancée les analyses
d’électrophorèse de l’hémoglobine avant leur union, mais par négligence Ils n’ont pas effectué
cette analyse. Ils ont eu par la suite trois enfants dont deux atteints de la drépanocytose. Ils
attendent un quatrième enfant et souhaitent savoir si cet enfant sera malade. Les documents ci-
dessous sont mis à ta disposition pour éclairer le couple Y sur l’état de santé de leur fœtus.
Document 1 : Arbre généalogique de la famille de Mme Y
Document 2
Document 2a : Technique de Southern blot.
La technique de Southern blot est une technique de séparation de différents ADN :
- L'ADN est préparé à partir d'un échantillon de sang ou de villosités choriales.
- L'ADN est découpé en multiples fragments par une enzyme de restriction qui reconnaît une
séquence précise.
- Les fragments obtenus sont séparés par électrophorèse sur gel d'agarose.
- L'ADN est dénaturé par immersion du gel dans une solution alcaline ; les deux brins de la
double hélice se séparent.
- L'ADN est transféré sur une membrane de nylon.
- L'ADN de la membrane est hybridé avec une sonde radioactive spécifique du gène recherché.
- Les sites de fixation de la sonde radioactive sont révélés par autoradiographie.
Document 2b : Application de cette technique à l'étude des gènes de la drépanocytose
La drépanocytose ou anémie falciforme est une maladie génique due à la présence d'une
hémoglobine anormale HbS dans les hématies. L'allèle béta A gouverne la synthèse d'une
hémoglobine normale HbA, l'allèle béta S, celle d'une hémoglobine anormale HbS. La
mutation qui conduit à l'allèle muté béta S fait que l'enzyme qui coupe l'ADN en un site
particulier ne reconnaît plus ce site ; le fragment d'ADN produit est de 1.4 kb (1 kb = 1 000
nucléotides) alors qu'il est de 1.2 kb pour le gène béta A non muté. Ci-dessous figurent les
fragments d'allèles du gène de l'hémoglobine (brin non transcrit)
Allèle beta A ... ATG GTG CAC CTG ACT GAT GAG GAG ...
Allèle beta S ... ATG GTG CAC CTG ACT GAT AAG GAG...
Document 3 : Résultats de l’analyse de l’ADN par la technique de Southern blot

Une recherche sur les molécules d’ADN du père, de la mère et du fœtus donne le résultat ci-
dessous.
-exploite les informations collectées des documents pour expliquer au couple Y si l’enfant à
naitre sera drépanocytaire.
-Conseille les couples qui se marient sans effectuer certains examens médicaux tel que
l’électrophorèse de l’hémoglobine.
L’hémophilie A est une maladie héréditaire due à une anomalie du facteur VIII de coagulation.
Madame III8 issue d’une famille ou plusieurs personnes sont décédés de cette maladie est
enceinte et s’inquiète de l’état de santé de son enfant.
Document 1 : Arbre généalogique d’une famille ou certains individus sont décédés de
l’hémophilie
Document 2 : Diagnostic prénatal

Après six semaines de grossesse, la femme III8 demande un diagnostic prénatal. Le diagnostic
proposé par le médecin porte sur le caryotypage et l’analyse de l’ADN de l’embryon puis
l’analyse de l’ADN du père et de la mère.
A- caryotype de l’embryon
La figure 1 indique le résultat de l’analyse du caryotype de l’embryon

B- Région de l’ADN analysée par chacune des sondes A, B et C

Trois sondes radiomarquées A, B et C ont été utilisées pour ce diagnostic. Les sondes A et B
reconnaissent chacune une région en amont et proche du gène codant pour le facteur de
coagulation VIII : la région reconnue par la sonde B est plus proche du gène. La sonde C est
intragénique.
L’ADN obtenu dans chaque cas est réparti en trois fractions puis hydrolysé par une enzyme de
restriction : La fraction 1 par l’enzyme Taq 1, la fraction 2 par l’enzyme Bgl II, la fraction 3
par l’enzyme Bcl I. Trois électrophorèses en gel d’agarose sont ensuite réalisées : la première
sépare les fragments obtenus après digestion par l’enzyme Taq 1 ; la deuxième sépare les
fragments engendrés par l’enzyme Bgl II ; et la troisième par ceux engendrés par l’enzyme Bcl
I. Dans chaque gel, l’ADN dénaturé est transféré sur une membrane de nylon qui est ensuite
hybridé avec une sonde : la membrane 1 avec la sonde A, la membrane 2 avec la sonde B et la
membrane 3 avec la sonde C. Chaque membrane est autoradiographiée. Les résultats sont
présentés ci-dessous :
C-Résultats d’autoradiographie
- Exploite les informations des différents documents pour évaluer le risque pour l’enfant
à naitre d’être atteint et montrer en quoi les résultats apportés par les tests génétiques
permettent de lever le doute sur l’état de santé de l’enfant à naitre.
29
Le Xéroderma pigmentosum de type B est une maladie rare caractérisée par l'apparition de
taches brunes sur la peau. Cette pigmentation anormale est due à une mortalité cellulaire
importante. Mr et madame Z ayant leurs deux premiers enfants atteints de cette maladie,
s’inquiète pour leur troisième enfant et se rendent à l’hôpital pour une consultation. Les
documents ci-dessous sont mis à ra disposition pour éclairer le couple Z sur le mécanisme
d’apparition de la maladie et l’état de santé de l’enfant à naitre
Document 1
Document 1-a : Arbre généalogique de la famille de madame D
La probabilité pour qu'un individu quelconque, pris dans la population, soit hétérozygote pour
le gène codant l’enzyme ERCC3 est de 1 %.
Document 1-b : Résultat d’électrophorèse

A l’issus de la consultation, le médecin demande l’électrophorèse des enzymes ERCC3 des
membres de la famille dont le résultat figure ci-dessous.
Document 2 : Conséquence d’une irradiation aux rayons ultra-violet

Document 2a
Les rayons ultraviolets (UV) peuvent
affecter l’ADN des cellules en entrainant,
par exemple, la formation d’une liaison
entre deux thymines successives. Ces
deux thymines liées par une liaison
covalente forment alors un dimère de
thymine (voir document 2a). La présence de ces dimères perturbe le fonctionnement cellulaire
et provoque la mort des cellules.
30
Document 2b
Des cellules qui n’ont jamais été exposées aux UV, sont
prélevées chez un individu sain et chez un individu atteint
de Xéroderma pigmentosum. Ces cellules sont soumises à
des doses croissantes de radiation UV. On mesure,
l’intensité 24 heures plus tard, le nombre de dimère de
thymine en fonction de l’intensité du rayonnement. Les
résultats sont présentés ci-dessous
Document 3
a-Réparation des dimères de thymine
Des cellules qui n’ont jamais été exposées aux UV, sont prélevées chez un individu sain et
chez un individu atteint de Xéroderma pigmentosum. Ces cellules sont mises en culture puis
soumises à un rayonnement UV de 25 erg.mm-2. On mesure alors l’évolution du pourcentage
de dimère de thymine dans l’ADN des cellules de ces deux cultures. Les résultats obtenus sont
présentés ci-dessous
b-allèles du gène ERCC3

L’enzyme ERCC3 permet la réparation des dimères de thymine dans l’ADN. La séquence du
gène codant pour l’ERCC3 a été déterminée. Elle est identique chez tous les individus atteints
de Xéroderma pigmentosum de type B. On compare une portion (brin non transcrit) de la
séquence des allèles de ce gène chez un individu sain homozygote et chez un individu malade.
Individu sain homozygote : AAAGAAGAGCAACAG
Individu atteint de Xéroderma pigmentosum : AAAGAAGAGAAACAG
Exploite les documents fournis pour préciser les conditions et les mécanismes qui peuvent
conduire à l'apparition de cette maladie dans la famille de madame Z puis expliquer si
l’enfant à naître sera atteint de cette maladie.
31
La Polykytose rénale (PKD) est la maladie génétique du rein la plus commune, touchant 1
personne sur 500 à travers le monde. Elle se caractérise principalement par la formation de
kystes rénaux, normalement évités par l’action d’une protéine nommée PC-2. Les kystes
provoquent l’insuffisance rénale. Les signes de la maladie peuvent apparaître tardivement.
Dans certains cas, une délétion d’une partie du gène PKD2, entraîne la maladie. Mme X ayant
des membres de sa famille atteint de la PKD, désire savoir si elle développera plus tard la
maladie. Les documents ci-dessous te sont proposés pour apporter une réponse à l’inquiétude
me Mme X.
Document 1 : arbre généalogique d'une famille touchée par la PKD
Document 2 : Analyse génétique du gène PKD2
a) La séquence du gène PKD2 comprend 15 fragments ou exons dont la traduction permet la

synthèse de la protéine PC-2. Les fragments insérés entre les exons ne sont pas codants.
b) La PCR (polymérisation chain reaction) quantitative est une méthode qui permet d’évaluer
la quantité d’ADN des exons 2, 3, 8 et 15 du gène PKD2 dans les cellules de Mme X, de son
père et d’un sujet non atteint de PKD
A partir de l’exploitation des documents, explique si Madame X développera plus tard la

maladie.
32
Après un premier geste, deux copines Madame DT et Madame KT, vivent désormais leur
deuxième grossesse avec beaucoup de stress et pour cause. Elles sont mariées à deux hommes
qui sont frères d’un troisième atteint d’une maladie héréditaire à l’origine du développement
anormal du cerveau et qui s’est déjà manifesté chez l’enfant KT. Le spécialiste consulté,
procède à des investigations dont les résultats sont présentés dans les documents ci-après.
Document 1 Arbre généalogique de la famille T
L’anomalie génétique ‘’M’’ provoque un déficit enzymatique. Lorsqu’elle est diagnostiquée

très tôt, à l’étape fœtale ou à la naissance, l’adoption d’un régime alimentaire comportant un
taux très faible d’un certain acide aminé permet d’éviter ses manifestations. En effet,
l’élévation du taux de cet acide aminé dans le sang de l’individu atteint, est responsable du
développement anormal du cerveau. La figure ci-dessous présente l’arbre généalogique de la
famille de Madame T.
Document 2 Allèles du gène de la maladie M.
Le gène responsable de ma maladie M possède trois allèles : l’allèle normal et les deux allèles
mutés. Ces allèles ont été clonés, isolé et séquencé. Les ARNm correspondants sont connus.
Le tableau ci-après présente une partie des codons correspondant à l’allèle normal et une partie
de ces deux allèles mutés dans deux régions différentes a et b du gène.
Tableau : séquence de l’ARNm chez un individu homozygote pour l’allèle normal et chez deux
personnes homozygotes pour l’un des deux allèles à l’origine de la maladie.
33
Séquences du codon 277 Séquences du codon 405 Phénotype individus

au codon 283 (région au codon 411 (région homozygote
‘’a’’ du gène) ‘’b’’ du gène)
UAU ACC CCC GAA ACA AUA CCU CGG Normal

CCU GAC AUC CCC UUC UCA
UAU ACC CCC AAA ACA AUA CCU CGG Malade

UAU ACC CCC GAA ACA AUA CCU UGG Malade

Document 3 Analyse de l’ADN des parents et des fœtus.

Deux tests ont été réalisés
Test 1 portant sur la région ‘’a’’ du gène
L’ADN a été extrait des cellules des parents du fœtus de chaque couple. Après amplification, il
a été soumis à l’action d’une enzyme de restriction spécifique de sites de la région ‘’a’’. Les
fragments obtenus ont ensuite été séparé par électrophorèse, dénaturé, transférés sur filtre, puis
révélés à l’aide de deux sondes spécifiques, l’une correspondante à la séquence normale,
l’autre correspondant à la séquence mutante.
NB : Séquence de la sonde normale : TAT ACC CCC GAA CCT GAC ATC
Séquence de la sonde normale : TAT ACC CCC AAA CCT GAC ATC
Les résultats obtenus sont les suivants :
Mme DT Fœtus M.DT Mme KT Fœtus M.KT
Sonde normale
Sonde mutante
Résultats du test 1
Test 2 portant sur la région ‘’b’’ du gène
L’ADN extrait des cellules des parents et du fœtus de chaque couple a été soumis à un second
test utilisant une enzyme de restriction spécifique de sites de la région ‘’n’’. les fragments
obtenus ont ensuite été séparés par électrophorèse, dénaturés, transféréq sur filtre, puis révélés
à l’aide de deux sondes spécifiques, l’une correspondante à la séquence normale, l’autre
correspondante à la séquence mutante.

NB : Séquence de la sonde normale : ACA ATA CCT CGG CCC TTC TCA
Séquence de la sonde normale : ACA ATA CCT TGG CCC TTC TCA
Les résultats obtenus sont les suivants :
Mme DT Fœtus M.DT Mme KT Fœtus M.KT
Sonde normale
Sonde mutante
-Exploite les informations collectées des documents pour préciser l’état de santé de l’enfant
à naître dans chaque famille.
-Donne ton avis argumenté sur la nécessité des examens prénuptiaux
BAC série C/Remplacement 2021

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Biologie moléculaire & Diagnostic prénatal/ Terminales

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• Des résumés sur quelques techniques et outils de la biologie moléculaire

• Des résolutions de problèmes pour se mettre en condition pour le BAC

Les enzymes de restriction :

Werner Aber est un microbiologiste et généticien suisse né le 3 juin 1929

La découverte des enzymes

Source : Encyclopaedia Universalis, article de Nicolas CHEVASSUS-au-LOUIS

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▪ Les différents types d’enzymes de restriction

▪ Les différents types de coupure

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Les enzymes de restriction de type II peuvent donner deux types de coupures :

Les coupures à bouts francs et les coupures décalées

▪ Les coupures franches

Exemple : Séquence palindromique reconnue GATATC

▪ Les coupures décalées

Exemple : Séquence palindromique reconnue CGGCCG

Ci-dessous, les sites de restriction de 3 endonucléases (= enzymes de restriction) : HpaI génère

Arne Wilhelm Kaurin Tiselius né le 10 Août 1902 à Stockholm et décédé

En 1878 le suédois Gustaf de Laval invente une écrémeuse centrifuge, ou écrémeuse-

La centrifugation est un procédé de séparation mécanique des composés

Disposition de tubes dans Une centrifugeuse Principe de fonctionnement

Maladies récessives autosomiques

7 Hémochromatose Douleur articulaire, brunissement de la peau, raréfaction des

Maladies récessives gonosomal X

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Maladies dominantes autosomales

1 Hypercholestérolémie Taux élevé de cholestérol sanguin ; obstruction

5 polydactylie Doigts et orteils surnuméraires

Maladies dominantes gonosomale X

Hérédité liée au chromosome Y: hérédité holandrique

Document : Action de quelques enzymes de restriction et séquence d’ADN test.

Document 2 : les enzymes de restriction

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Exercice guidé 3 Objectif : appliquer les connaissances relatives à l’évaluation du risque et

Document 2: Résultat de l’analyse de l’ADN par la méthode de Southern

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Tu es invité à poser le diagnostic de l’hémochromatose pour l’enfant à naître. Pour cela :

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L’hémophilie B se caractérise par un retard ou une absence de coagulation pouvant entraîner

Document 2a : Profil de bandes en Southern blot des membres de la famille.

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Exploite les documents pour expliquer les

- Evalue le risque pour l’enfant III3 d’être

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Document 2 : Caryotype du fœtus

Document 3 : Analyse de l’ADN

NB : kb = kilobase ; 1kb =1000 paires de nucléotides

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Evaluation formative 1 Objectif : évaluer les acquis relatifs à l’évaluation du risque en

Document 1: Cause de la phénylcétonurie

Homme sain femme saine enfant à naitre

Evaluation formative 2 Objectif : évaluer les acquis relatifs à l’évaluation du risque en

Document: arbre généalogique de la famille des individus concernés

Document 2b : extraits de la séquence d'ADN de 387 nucléotides utilisée pour le diagnostic

Document 2c : résultats de l'électrophorèse

Document 1 : site de restriction de l’enzyme Alu I

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Document 2 : représentation simplifiée de la séquence en bases de l’ADN des individus A et B