RECOMBINACION HOMOLOGA

-- Aumenta
Aumenta la
la diversidad
diversidad genética
genética
-- Mecanismo
Mecanismo asociado
asociado aa la
la reparación
reparación del
del ADN
ADN lesionado:
lesionado:
•Permite
•Permite la
la recuperación
recuperación dede secuencias
secuencias dañas
dañas del
del ADN
ADN
•Provee
•Provee un
un mecanismo
mecanismo para
para reiniciar
reiniciar horquillas
horquillas de
de replicación
replicación dañadas
dañadas
-- Necesaria
Necesaria para
para el
el apareamiento
apareamiento cromosómico
cromosómico durante
durante la
la meiosis
meiosis
-- Permite
Permite regular
regular la
la expresión
expresión de
de algunos
algunos genes
genes
-- Genera
Genera las
las bases
bases moleculares
moleculares para
para la
la generación
generación de
de organismos
organismos con
con
variaciones
variaciones genéticas
genéticas
-- Permite
Permite estudiar
estudiar la
la distribución
distribución yy función
función de
de los
los genes
genes
Eventos moleculares en la recombinación homóloga

1.-
1.- Alineación
Alineación de
de dos
dos moléculas
moléculas de
de ADN
ADN homólogas
homólogas
2.-
2.- Introduccion
Introduccion de
de escisiones
escisiones en
en el
el ADN
ADN
3.-
3.- Apareamiento
Apareamiento de
de pequeñas
pequeñas zonas
zonas entre
entre los
los moléculas
moléculas
recombinantes
recombinantes
4.-
4.- Desplazamiento
Desplazamiento de
de la
la unión
unión Holliday
Holliday (aumenta
(aumenta la
la longitud
longitud del
del
ADN
ADN intercambiado)
intercambiado)
5.-
5.- Escisión
Escisión de
de la
la unión
unión Holliday
Holliday (resolución)
(resolución)
 1.- Modelo de Holliday

1) Alineamiento de cromosomas homólogos

2) Formación de escisiones en una de las cadenas de cada doble hebra

 1.- Modelo de Holliday

3) Invasión de las cadenas con

formación de una unión Holliday

4) Migración de la unión
Holliday a lo largo de las ramas
 1.- Modelo de Holliday

5) Escisión de la unión Holliday

Resolución de la recombinación

Resultado: productos recombinados Resultado: productos no recombinados

(reordenamiento de los genes que flanquean el (No hay reordenamiento de los genes que
segmento recombinado (a y c)) flanquean el sitio de recombinación)
 2.- Modelo de reparación de roturas bicatenarias

1) Alineamiento de los cromosomas

2) Formación de una rotura bicatenaria

en uno de los cromosomas

3)Procesamiento del ADN: degradación de

una de las hebras (5’→3’)para dar origen
a una hebra monocatenaria con un
extremo 3’OH libre

4) Invasión en el dúplex indemne: por las

hebras monocatenarias con un extremo 3’
libre
 2.- Modelo de reparación de roturas bicatenarias

5) Asociación cruzada de cadenas por

complementariedad de bases

6) Elongación del extremo 3’OH libre

utilizando como molde la nueva hebra
asociada y posterior ligación

7) Formación de un intermediario de
Holliday doble
2.- Modelo de reparación de roturas bicatenarias
8) Escisión de las cadenas y resolución

- El corte de ambas uniones en el sitio 2 da origen a productos no recombinados

- El corte de ambas uniones en el sitio 1 entrega productos no recombinados
- El corte de una unión en el sitio 1 y la otra unión en el sitio 2 genera productos recombinados
Formación de roturas bicatenarias durante la replicación

Lesiones del ADN que causan la escisión

de una de las hebras o la detención de la
horquilla replicativa pueden derivar en la
formación de extremos rotos disponibles
para la recombinación.
Maquinaria de la recombinación
homóloga en E.coli
Mecanismo de escisiones bicatenarias:

Complejo Rec BCD

-Procesa hebras de ADN rotas
- Complejo multimérico con actividad helicasa (Rec B
y Rec C) y nucleasa (Rec D)
- Permite el ingreso de la proteína Rec A necesaria
para la invasión de cadenas

χ):
Elementos Chi (χ
- Cross-over hotspot instigator
- Estimulan la frecuencia de recombinación homóloga
-Controlan la actividad de Rec BCD
- Altera el complejo Rec BCD inhibiendo la actividad
nucleasa 3´→5’
 Maquinaria de la recombinación homóloga en E.coli

Rec A
-Proteína que se asocian al ADN
monohebra
-Forman filamentos en torno al ADN
-Desarrolla el evento de invasión de las
cadenas

Los filamentos de Rec A modifican la estructura del ADN alargando la doble hélice
Maquinaria de la recombinación homóloga en E.coli
 Maquinaria de la recombinación homóloga en E.coli

Complejo Ruv AB
-Reconoce específicamente
las uniones Holliday
-Promueve la migración de las
ramas

RuvC
- Escinde las cadenas de ADN
dando término a la
recombinación
 Factores que catalizan las diferentes etapas de la
recombinación homóloga

La recombinación en bacterias proporciona mecanismos para: reparar dobles hebras rotas,

reiniciar horquillas de replicación colapsadas, recombinar el ADN cromosómico con ADN
externo obtenido mediante la infección por un virus, o la conjugación entre bacterias.
Maquinaria de la
recombinación homóloga en
eucariontes

Utilidad en eucariontes:
Anafase I
- Reparación doble hélice de ADN
fragmentada
-Reiniciación de horquillas de replicación
colapsadas
Metafase II
-Apareamiento cromosómico durante la
meiosis (recombinación meiótica)
-Regulación de la expresión génica
(conversión génica)
Anafase II

Gametos
Recombinación homóloga
durante la meiosis
Fábricas de recombinación:
Spo11:
- Se induce su expresión durante la meiosis
- Realiza escisiones bicatenarias con escasa
selectividad de secuencia

MRX:
- Nucleasa multimérica (Mre, Rad50,
Xrs)Degrada ADN desde el extremo 5’
- Produce una hebra de ADN de aprox.1 Kb
con extremo 3’OH libre

Dmc1 y Rad51:
- Homólogos de Rec A
- Dmc1 es específica de la meiosis

Rad52: promueve el armado de filamentos

por Rad51
Mus81: resolvasa de uniones Holliday
 La
La recombinación
recombinación homóloga
homóloga puede
puede dar
dar origen
origen aa un
un fenómeno
fenómeno de
de
conversión
conversión génica
génica

Ninguno de los pasos de la recombinación homóloga necesita el reconocimiento de una

secuencia de ADN específica (sólo deben existir semejanzas de secuencia para permitir el
apareamiento entre las monohebras intercambiadas)

Conversión génica: pérdida de un alelo de un gen reemplazado por uno alternativo

Incluso la formación de productos no recombinados puede dar origen a la conversión génica

? ?

Genotipo de los gametos

Reparación
Reparación de
de apareamientos
apareamientos incorrectos
incorrectos dentro
dentro de
de los
los intermediarios
intermediarios de
de la
la
recombinación
recombinación puede
puede originar
originar una
una conversión
conversión génica
génica