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Odontologa
REGULACION EN BACTERIAS
Por qu la regulacin es importante? Es necesaria para una Competencia exitosa con otras bacterias. 1.- Maximizar su eficiencia metablica 2.- Responder rpidamente a nuevos ambientes 3.- Permitira generar cepas transgnicas para usos biotecnolgicos.
Catabolismo. Enzimas se requieren para crecer sobre sustratos que sirven de Fuente de Energa y Carbono a la clula (Ej. lactosa). Se sintetizan cuando el sustrato est presente como nica fuente de Carbono. Ej. -galactosidasa Anabolismo. Enzimas que se requieren para la sntesis de unidades bsicas de macromolculas (aminacidos y nucleotdos). Estas enzimas se sintetizan cuando la bacteria crece en medio mnimo. Sin embargo, su sntesis se detiene cuando al compuesto final de la va metablica en la cual participan est presente en el medio.
Figure 7.18
Medio de cultivo
M. Mnimo +glucosa sntesis de enzimas para M. Mnimo glucosa + trp M.Mnimo +lactosa
SI NO
NO NO
SI SI
LacZ
Tiene sentido inducir la expresin del operon lac en medio sin lactosa?
IPTG
controla la sntesis de un molcula citoplasmtica difusible que reprime la expresin de los genes ligados lacZ, lacY y lacA LacI (represor) se inactiva con la unin del inductor
Mecanismo de induccin del operon lactosa que utiliza una protena represora. En este caso la presencia de lactosa inactiva el represor y se induce la transcripcin.
Este tipo de dispositivo regulador es propio de rutas catablicas, donde el principio de economa debe garantizar que las enzimas de la ruta slo se induzcan en presencia del sustrato adecuado.
1962: F. Jacob y J. Monod proponen el modelo del Operon de control de la expresin gnica. A partir de sus trabajos con la bacteria E. coli
LacI= Expresin constitutiva de lac ZYA. Las mutaciones son identificadas con el indicador X-gal. X-gal es un sustrato de la B-galactosidasa, cuando se hidroliza forma un compuesto de color azul, indicando que las clulas tienen la enzima.
Para encontrar el gen regulatorio, se aislaron numerosas mutantes que exhibian alteraciones en la expresin del operon lac. Estas mutantes son de dos tipos: Mutantes en los genes estructurales - Afectan slo a lacZ, lacY y lacA - Las mutaciones mapean muy ligadas Mutantes en los genes regulatorios - Afectan la sntesis de las tres enzimas - la mayora de las mutaciones afectan al gen lacI (lacI-)
Operon trp de E. coli: -Cinco genes estructurales en la secuencia trpEDCBA. Codifican cinco polipptidos que a su vez constituyen tres enzimas implicadas en el paso de Ac. corsmico a triptfano. -Promotor -Operador (superpuesto al promotor).
MM
MM+TRP
Dr. Patricio Retamales Molina Laboratorio de Bioqumica y Biologa Oral Facultad de odontologa Universidad de Chile patricio_edgardo@yahoo.com
Antecedentes preliminares: La regulacin gentica de los Eucariotas, especialmente en los multicelulares se complica por el proceso de diferenciacin celular que ocurre en los organismos multicelulares. Cada organismo multicelular comienza como una sola clula llamada cigoto que se divide por mitosis. Las clulas se diferencian en variados tipos funcionales utilizando algunos genes e ignorando otros. Los genes hometicos (Homeobox genes) dirigen la organizacin general del cuerpo y la posicin de los rganos en respuesta a un gradiente de molculas regulatorias. El momento ("timing") en que se expresa un determinado gen parece seguir una secuencia, tal como la produccin de hemoglobina fetal en los glbulos rojos de los mamferos, que cambia a hemoglobina adulta poco antes del nacimiento. Claramente la inactivacin de ciertos genes ocurre en cada adulto y ello esta relacionado con el cancer, y la prolongacin de la vida
Una vez que se ha transcrito, el mRNA en Eucariontes debe ser procesado: -5CAP -3Poli A (colita de A) -Remocin de Intrones
Enhancer: Secuencias que actan en CIS incrementando la tasa de transcripcin desde promotores ubicados sobre la misma molcula de DNA, con la habilidad de ejercer su efecto a distancias de miles de pb. upstream o downstream del promotor que regulan, que pueden funcionar en una u otra orientacin y que suelen tener propiedades tejido especficas.
Elementos de control transcripcional de SV40 requeridos para alcanzar una tasa de transcripcin MAXIMA.
A partir de una secuencia de DNA, se pueden obtener dos protenas diferentes, dependiendo de la va de procesamiento que toma el transcrito primario de mRNA.
Hormonas esteroidales actan como efectores alostricos de protenas activadorasde unin a enhancers
http://www.genciencia.com/2006/06/17-menos-caries-gracias-a-bacterias-manipuladasgeneticamente