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Ple s@nt

Hmatopose et son exploration


Praticien Hospitalier : Guillaume Nicolas
Cycle 2 DCEM1 2008/2009

Facult de mdecine dAmiens - Tous droits rservs

PHYSIOLOGIE ET EXPLORATION DE LHEMATOPOESE

LHEMATOPOIESE Ensemble des mcanismes qui conduisent la formation continue des cellules du sang.
Les cellules sanguines nont pas de capacit de prolifration et ont une dure de vie limite.

Mylopose : Erythrocytes, Polynuclaires, Monocytes, plaquettes Lymphopose : Lymphocytes

LES MOTS CLES


O se ralise lhmatopose? : Organes hmatopotiques

Quelles sont les cellules de lhmatopose? : Cellules souches hmatopotiques, Progniteurs, Prcurseurs, Cellules matures fonctionnelles

Pourquoi et Comment explore-t-on lhmatopose en mdecine? Hmopathies, cytopnies Mylogramme, biopsie osto-mdullaire, cytogntique et biologie molculaire, immunophnotypage, facteurs de croissance, vitamines et oligolments

LES ORGANES HEMATOPOIETIQUES


MOELLE OSSEUSE: Mylopose et lymphopose B Chez ladulte : os plats (sternum, os iliaque, vertbres, sacrum, os du crane, extrmits suprieures fmur et humrus). THYMUS : Lymphopose T (diffrenciation primaire) Attention : les cellules souches lymphodes sont dans la moelle osseuse ORGANES LYMPHODES SECONDAIRES ganglions, rate, amygdales, intestin, bronches, glandes salivaires, peau.

LES ORGANES HEMATOPOETIQUES

CELLULES DE LHEMATOPOIESE MEDULLAIRE

Image pyramidale avec au sommet la population de cellules souches et la base constitue par les cellules sanguines. Entre les deux extrmes, toute une srie de cellules hmatopoitiques en multiplication et diffrenciation.

Quatre compartiments cellulaires : - Cellules souches primitives - Progniteurs - Prcurseurs - Cellules matures fonctionnelles

ASPECT CYTOLOGIQUE DE LHEMATOPOESE MEDULLAIRE


Cellules souches primitives et progniteurs
Hmoblastes : 0,5 1 % (non engags ou en cours dengagement dans une ou plusieurs lignes)

Prcurseurs et cellules matures mylodes


Prcurseurs et cellules matures granuleuses : 55 75% Prcurseurs et cellules matures monocytaires : 0 5% Prcurseurs mgacaryocytaires (plaquettaires) : Prsent (non quantifis) Prcurseurs rythroblastiques : 8 25%

Cellules matures lymphodes et plasmocytaires


Lymphocytes : 3 15% Plasmocytes : 0 2%

Cellules souches primitives totipotentes (Moelle osseuse)


0,5 1% des cellules mdullaires non reconnaissable morphologiquement Cellules non engages dans une ligne Capacit dautorenouvellement Division lidentique, chaque colonie est dorigine clonale Reconstitution du systme hmatopotique Capacit de diffrenciation Diffrenciation en progniteurs engags dans une ou plusieurs lignes

Proprits des cellules souches hmatopotiques (mdullaires)

Progniteurs (Moelle osseuse)


0,5 1% des cellules mdullaires non reconnaissable morphologiquement Cellules souches engages dans une ou plusieurs voies de diffrenciation Pas dautorenouvellement mais capacit de diffrenciation Besoin de facteurs de croissance (CSF) Ligne mylode : Cellule souche myloide pluripotente (CFU-GEMM) Progniteur Neutrophile/Monocyte bipotent (CFU-GM) Progniteur unipotent Ligne lymphode : Cellule souche lymphoide

Prcurseurs (Moelle osseuse)


Cellules diffrencies Engages dans une seule ligne pour donner un seul type de cellules matures

Reconnaissables dans la moelle en cytologie optique Cellules quantitativement majoritaire dans la moelle osseuse

Division cellulaire avec augmentation du nombre et maturation Conduisent la maturation cellulaire finale pour donner les cellules matures fonctionnelles circulantes

Cellules matures fonctionnelles (Moelle osseuse et Sang)


Ne se divisent pas et ne se diffrencient pas (sauf lymphocytes et monocytes) Passage sanguin Globules rouges, Globules blancs, plaquettes Migration tissulaire

HEMATOPOESE VUE PAR LIGNEE

MYELOPOESE
Granulopose / Monocytopose / Erythropose / Mgacaryocytopose

LYMPHOPOIESE

GRANULOPOIESE NEUTROPHILE
Production et mise en circulation des polynuclaires neutrophiles Facteurs stimulants GM-CSF, G-CSF

CFU-GEMM

Progniteurs

CFU-GM CFU-G

Prcurseurs

Cellules Matures

MONOCYTOPOIESE Production et mise en circulation des monocytes. Facteur stimulant: GM-CSF

THROMBOPOIESE Production et mise en circulation des plaquettes, elles proviennent de la fragmentation du cytoplame des mgacaryocytes. Facteur stimulant : la thrombopoitine

ERYTHROPOIESE

Production et mise en circulation des globules rouges (rythrocytes) Dure de vie dun globule rouge : 120 jours Facteurs ncessaires : Epo, fer, folates, vitamine B12

CFU-GEMM

Progniteurs

BFU-E CFU-E

Prcurseurs

Cellules Matures

LYMPHOPOIESE

Production et mise en circulation des lymphocytes. Diffrenciation B dans la moelle osseuse. Diffrenciation T dans le thymus.

Moelle osseuse

Compartiment priphrique

CD34

CD19 CD20 Pr-BCR Pr-BI intracyto Pr-BII BCR

D Ig

CFU-L

Pro-B

B immature
Ig M

B mature

Ig M

Pr-BCR : CD79 + associe 2 pseudochanes lgres BCR (B-cell receptor): CD79 + IgM

Stades de diffrenciation mdullaire dans le dveloppement B humain

Moelle osseuse

Thymus

Compartiment priphrique

DN : CD4- CD8CFU-L Pro-T Pr-T

DP : CD4+ CD8+ Thymocyte commun

T CD4

T CD4 auxiliaire

T CD8 CD34 CD2 CD3

T CD8 Cytotoxique suppresseur

Stades de diffrenciation mdullaire et thymique dans le dveloppement T humain

EXPLORATIONS DE LHEMATOPOIESE

Hmogramme : Numration Formule Sanguine + Rticulocytes (cf cours) Etude Cytologique de la moelle osseuse : MYELOGRAMME Etude histologique de la moelle osseuse : BIOPSIE OSTEOMEDULLAIRE Explorations isotopiques Culture des progniteurs hmatopotiques Dosage des facteurs de lrythropose (cf cours) Explorations biologiques des hmopathies (cf cours)

MYELOGRAMME
Etude CYTOLOGIQUE du frottis mdullaire obtenu par ponction et aspiration de la moelle osseuse - Indications
Suspicion dune atteinte fonctionnelle de la Moelle osseuse (Mos) Diagnostic de pathologies mdullaires (Cytopnie dorigine centrale, LA, MM..) Prlvements de Mos pour investigations complmentaires (immunophnotypage, caryotype, biologie molculaire, myloculture..)

-Techniques
Vrifier si troubles de lhmostase (TP, TCA) Asepsie rigoureuse Trocart de Mallarm Lieu : Sternum, Epine iliaque postro-suprieure..

Les tapes du mylogramme

Rsultats (en 1 heure et +)


- A interprter conjointement la NFS.

- Coloration au May Grnwald-Giemsa, cytochimie pour examens complmentaires (coloration de Perls, Myloproxydase, estrases)

- Au faible grossissement Apprcier la richesse (notion relative) Apprcier la prsence de mgacaryocytes Rechercher la prsence damas de cellules cancreuses

- Au fort grossissement Analyses quantitatives et qualitatives des diffrentes lignes

Lieu de ponction Richesse Duret de los Hmoblastes : 0,5 1 % Granuleux : 55 75% Neutrophiles Myloblastes : 0 2 % Promylocytes : 2 8% Mylocytes : 5 20% Polynuclaires : 10 30% Eosinophiles : 0 6% Basophiles : 0 2% Erythroblastes : 8 25% Prorythroblastes : E. Basophiles : 0,5 2% 0,5 4%

E. Polychromatophiles : 2 20% E. Acidophiles : 2 10% Autres lignes : 10 15% Lymphocytes : 3 15% Plasmocytes : Monocytes : 0 2% 0 5%

Mgacaryocytes : Prsents

BIOPSIE OSTEO-MEDULLAIRE
Etude HISTOLOGIQUE de l ensemble du tissu osseux : moelle osseuse ET stroma mdullaire - Indications Pancytopnie argnrative moelle pauvre au mylogramme Suspicion de mylofibrose Suspicion datteintes mdullaires dune pathologie extramdullaire (lymphome, mtastases dun cancer solide..) - Techniques Vrifier si troubles de lhmostase (TP, TCA) et si absence de thrombopnie En EIPS sous AL aprs asepsie rigoureuse

Rsultats (48 heures)

Apprciation de la richesse relle de la Mos

Examen des fibres de soutien et des vaisseaux : coloration de la rticuline (mylofibrose) - Recherche de cellules lymphomateuses ou mtastatiques Avec description du type dinfiltration (focale, nodulaire, interstitielle, diffuse) - Ralisation dimmunomarquage CD19 et CD20 pour ligne lymphode B.

Mylogramme Cytologie Cellules Richesse Fibrose Architecture

BOM Histologie

+++ + -

+ +++ +++ +++

Mylogramme et Biopsie osto-mdullaire : 2 examens complmentaires

LA CULTURE DES PROGENITEURS HEMATOPOIETIQUES


-

Culture en milieux spciaux enrichis en facteur de croissance - Formation de colonies aprs deux semaines de culture Paramtres quantitatifs Dtermination du nombre de colonies (CFU-GM, BFU-E et CFU-E, CFUMK)

Paramtres qualitatifs Polyglobulie de Vaquez : pousse spontane des progniteurs rythrodes Thrombocytmie essentielle : pousse spontane des progniteurs mgacaryocytaires

CONCLUSION
La comprhension de lhmatopose est INDISPENSABLE pour mieux apprhender

la physiopathologie, le diagnostic, le traitement et le suivi

des hmopathies bnignes et malignes.

COPYRIGHT

Cycle 2 DCEM1

2008/2009

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