Multiplication

La multiplication vgtative des ligneux en agroforesterie
Manuel de formation et bibliographie
Edit par Hannah Jaenicke et Jan Beniest
Dni de responsabilit
La mention dun produit ou dun nom commercial dans le prsent ouvrage ne signifie pas que lauteur ou le World Agroforestry Centre les endossent, ni quils excluent dautres produits tout aussi acceptables.
Le prsent ouvrage fait rfrence aux pesticides. Les pesticides peuvent avoir des effets nocifs sur les tres humains, les animaux, les plantes, les poissons et dautres espces appartenant la faune et la flore sauvages, si on en fait un mauvais usage. Les instructions figurant sur les conteneurs de pesticides doivent toujours tre scrupuleusement suivies.
Lauteur et le World Agroforestry Centre naccepteront aucune responsabilit pour les dommages matriels ou corporels, ou pour les dpenses qui pourraient rsulter de lemploi des substances chimiques mentionnes dans le prsent ouvrage.
ISBN 92 9059 1501 Photos de couverture : Jan Beniest Traduction: Eloy Molinero
World Agroforestry Centre (ICRAF), 2003 PO Box 30677 Nairobi (Kenya) Tl : +254 2 524000, via les USA +1 650 833 6645 Tlcopie: +254 2 524001, via USA +1 650 833 6646 Ml : icraf@cgiar.org Internet : www.cgiar.org/icraf
Imprim par : KUL GRAPHICS Ltd, Nairobi (Kenya)
Table des matires
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Remerciements Introduction Aperu du stage de formation
Unit 1
1 3 3 5 7 8 9 11 12 12 12 15 16 17
Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Axes de formation Concepts et principes
Introduction Avantages de la multiplication vgtative Hormones vgtales et rgulateurs de croissance Maturit des tissus Domestication des ligneux et multiplication vgtative Bibliographie
iii
Slection et collecte des clones

Introduction Principes de la collecte Conseils pour la collecte Exemple Bibliographie
Unit 2
19 21 21 22 32 33 33 35 35 35 41
Ppinires dessences agroforestires

Axes de formation Gestion des ppinires et production de plants
Introduction Comment grer une ppinire Essais en ppinire Solution des problmes nvralgiques Bibliographie
La lutte phytosanitaire
Introduction Problmes phytosanitaires Mesures phytosanitaires
43 45 46 46 46 46
Mesures curatives Bibliographie
Gestion de la ppinire - Travaux pratiques

Objectifs Matriel ncessaire Travaux pratiques
Unit 3
49 51 51 51 52 54 55 56 57 58 iv 58 58 58
Le bouturage
Axes de formation Le bouturage : principes et techniques
Introduction Lenracinement Les facteurs qui influent sur lenracinement La prparation des boutures Les bacs de bouturage Les soins dispenser aprs la propagation Bibliographie
Le bouturage - Travaux pratiques

Unit 4
63 65 65 65 66 68 73 77 78 78 78 79
Le greffage
Axes de formation Le greffage : principes et techniques
Introduction Dfinitions Lintrt du greffage et de lcussonnage Physiologie Les diffrents types de greffe Bibliographie
Le greffage - Travaux pratiques

Unite 5
83 85 85 85 87 87 88 89 89 89 90
Le marcottage
Axes de formation Le marcottage : principes et techniques
Introduction Le marcottage arien Le marcottage par couchage Le marcottage par buttage Bibliographie
Le marcottage - Travaux pratiques

Unit 6
91 93 93 93 95 95 95 96 101 101
La micropropagation
Axes de formation La micropropagation : principes et techniques
Introduction Terminologie Physiologie Lintrt de la micropropagation Conditions requises Les techniques de micropropagation Conclusions Bibliographie
Unit 7
103 105 105 106 107 113 114 115
Essais de multiplication
Axes de formation Conception et gestion des essais
Introduction La conception des essais principes de base Application aux essais de multiplication Problmes courants Comment grer les essais pour obtenir de bons rsultats Bibliographie
117 119 123 125 139
Annexe 1 Annonce de stage de formation Annexe 2 - Formulaire dinscription Annexe 3 - Programme du stage Annexe 4 Evaluation Index
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Remerciements
Le stage de formation intensif sur la multiplication vgtative des essences agroforestires dans les terres arides et semi-arides a t organis et dirig par le World Agroforestry Centre et le Programme international de promotion des cultures en zones arides (IPALAC). LOrganisation des Nations Unies pour lducation, la science et la culture (UNESCO) en a assur le financement. Dautres donateurs, notamment le ministre allemand pour la Coopration conomique (BMZ) et lAgence sudoise pour le dveloppement international (ASDI), par lintermdiaire de son Rseau africain pour lducation en agroforesterie (ANAFE), ont facilit la participation de spcialistes et de stagiaires. Les modules de formation mis au point pour ce stage ont t labors avec lassistance du Programme dappui direct aux tablissements denseignement, du ministre nerlandais des Affaires trangres. Outre lexpertise des spcialistes et des auteurs des modules de formation, ce stage a bnfici du concours des personnalits suivantes : M. Arne Schlissel (IPALAC), M. Zeev Carmi (Kibwezi Irrigation Project), M. Paul Mackenzie (Rosslyn River Garden Centre), M. Phanuel Obala et M. David Odee (Kenya Forestry Research Institute, KEFRI).
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Introduction
Lun des plus gros problmes lis aux techniques agroforestires est la multiplication grande chelle des arbres et des arbustes utiliss en agroforesterie. Les plantes se rgnrent naturellement par propagation des semences. Toutefois, pour la recherche et pour lamlioration rapide des espces non domestiques, la multiplication vgtative offre de multiples avantages. Cest ainsi que dans les populations sauvages un large ventail de proprits importantes du produit peut sexprimer (qualit du fruit, raideur du ft, biomasse, etc.). De plus, il est possible de reconnatre, lintrieur dune population, des individus qui donnent des produits ou des services voulus de meilleure qualit. Il serait alors avantageux de multiplier ces individus par voie vgtative pour capturer la variation gntique exprime, qui risquerait autrement de se perdre ou de saffaiblir dans le cas dune reproduction sexue. La multiplication vgtative sest dveloppe au fil des sicles. Dans les rgions tempres, elle a jou un rle important dans la domestication des arbres fruitiers. Des mthodes particulires ont t mises au point pour chaque espce. Dans les rgions tropicales, la multiplication vgtative a parfois t applique avec succs aux arbres fruitiers, offrant des dbouchs lucratifs aux marchs dexportation (agrumes, mangues, avocats, noix de macadamia, etc.). Plusieurs essences tropicales de haute futaie ont aussi t clones, principalement pour les plantations o lon veut
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des arbres de taille uniforme. De nombreuses essences indignes qui pourraient avoir une grande valeur montaire ou nutritive ne sont reproduites jusqu prsent qu partir de plantes naturelles. Dans les rgions tropicales, les petits exploitants agricoles auraient tout gagner intgrer ces essences aux systmes agroforestiers, vu lintrt quelles prsentent. La multiplication vgtative permet de slectionner un germoplasme de qualit suprieure susceptible denrichir lexploitation agricole. Dans le cadre de son programme domestication des essences agroforestires, le World Agroforestry Centre mne un projet sur les mthodes de multiplication des essences agroforestires qui vise mettre au point, en collaboration avec les utilisateurs, de bonnes pratiques de multiplication et de gestion des essences agroforestires, de manire amliorer lefficacit, le niveau et la stabilit de la production arboricole. Ce projet permettra dtablir des directives sur la multiplication des ligneux et la gestion des ppinires, qui pourront tre appliques directement ou qui pourront tre adaptes en fonction du contexte. Cest dans le cadre de ce projet que le World Agroforestry Centre a organis un stage de formation intensif sur la multiplication vgtative des essences agroforestires, en collaboration avec le Programme international de promotion des cultures en zones arides, qui mne aussi des activits de recherche-dveloppement dans ce domaine. Ce stage de formation a t organis, dans un premier temps, lintention de participants dAfrique de lEst et dAfrique australe, mais il est fort probable qu lavenir des stages de formation identiques seront organiss dans dautres zones agrocologiques o le World Agroforestry Centre effectue des recherches agroforestires en collaboration avec les institutions nationales. Le prsent Manuel de formation, qui a concouru au succs du premier stage, devrait faciliter la planification, lorganisation et la ralisation de futurs stages du mme type.
Le stage de formation
Le prsent manuel de formation a t mis au point pour appuyer un stage de formation pratique dune semaine sur la multiplication vgtative des ligneux utiliss en agroforesterie. Dans les paragraphes qui suivent, on abordera brivement certains aspects de cette activit : audience vise, objectifs de la formation, programme, mthodes denseignement, personnel spcialis et supports de formation. Ceci aidera les futurs organisateurs de stages ainsi que les spcialistes mieux planifier, prparer et mener bien cette activit de formation. Les supports de formation prsents dans le prsent manuel peuvent tre adapts pour rpondre aux besoins de chaque stage. Une brochure prsentant des informations gnrales sur le stage de formation, accompagne dune lettre dinvitation, peut savrer utile pour recruter des stagiaires. Un modle de brochure figure lannexe 1.
Audience vise
Ce stage de formation sadresse aux techniciens travaillant sur le terrain et aux grants de ppinires qui sintressent activement la recherche-dveloppement concernant la multiplication des ligneux. Ils doivent possder un minimum de connaissances, attestes par un diplme, dans une discipline pertinente de la phytotechnie (foresterie, horticulture, phytobiologie, sciences agronomiques). Dautres critres de slection peuvent tre appliqus pour recruter des stagiaires : recrutement de femmes pour assurer une reprsentation quitable des deux sexes, connaissance de langlais, engagement pris par linstitution qui emploie le stagiaire ce que celui-ci participe activement aux travaux et applique ultrieurement les connaissances et les comptences quil aura acquises dans le cadre du stage. Un modle de formulaire de demande dinscription figure lannexe 2.
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Objectifs de la formation
Lobjectif global du stage est damliorer les comptences techniques des techniciens sur le terrain et des grants de ppinires dans le domaine de la multiplication vgtative et de leur fournir les connaissances thoriques ncessaires sur le sujet, pour leur permettre dappliquer ces connaissances nouvellement acquises dans leurs futurs travaux. Le stage a t divis en plusieurs units, visant chacune un objectif particulier contribuant la ralisation de lobjectif global. Les objectifs viss par chaque unit sont indiqus dans un encadr figurant au dbut du texte.
Programme
Le stage de formation comprend cinq units, scindes pour la plupart en plusieurs exposs thoriques succincts, dmonstrations et travaux pratiques.
Unit 1 Introduction
Cette unit rappelle brivement aux stagiaires le rle de la multiplication vgtative en foresterie et en agriculture, en mettant laccent sur son importance pour la recherche-dveloppement dans le domaine de la domestication des essences agroforestires. Les techniques de multiplication vgtative les plus communes sont numres et dcrites. Cette description est accompagne de quelques renseignements gnraux sur les principes physiologiques qui sous-tendent ces techniques, en particulier le rle des phytohormones. Cette unit indique galement quelles sont les considrations essentielles quil faut prendre en compte lors de la slection et de la collecte de matriel gntique pour la multiplication.
Unit 2 Les ppinires

La multiplication vgtative exige presque toujours la prsence dune ppinire. Cette unit dcrit linfrastructure gnrale de la ppinire (substrat, quipement et matriel, irrigation, etc.) et explique les concepts et principes essentiels dune gestion des ppinires. La lutte phytosanitaire tant un souci majeur pour tout grant de ppinire, la premire partie de cette unit aborde la question de la lutte contre les ravageurs et les maladies dans les ppinires, dans le contexte de la multiplication vgtative.
Unit 3 Le bouturage
La multiplication par enracinement de boutures est probablement la technique la plus communment employe pour multiplier vgtativement les ligneux. Cette unit dcrit les diffrentes phases du processus denracinement en expliquant son droulement physiologique. Les conditions environnementales jouent un rle important dans ce processus ; cest pourquoi cette unit propose des structures simples utilisables pour amliorer le taux de succs de cette technique de multiplication.
Unit 4 Le greffage
Le greffage et lcussonnage sont des techniques de multiplication vgtative plus complexes. Cette unit souligne lintrt de cette technique dans diffrentes applications en exposant les principes physiologiques qui la sous-tendent et en indiquant les conditions respecter pour en assurer le succs.
Unit 5 Le marcottage
Dans certains cas, les essences agroforestires peuvent tre multiplies par des techniques de marcottage. Cette unit dcrit les diffrentes mthodes possibles de marcottage, en expliquant quelques-uns des principes qui sous-tendent ces techniques et en expliquant les conditions respecter pour en assurer le succs.
Unit 6 La micropropagation
La micropropagation couvre un large ventail de mthodes et de techniques qui permettent de multiplier par voie vgtative de petites parties de matriel vgtal dans un milieu extrmement contrl. Bien que cette technique soit rarement employe, les stagiaires devraient se familiariser avec les concepts et principes gnraux de cette technique, pour comprendre pourquoi cette mthode peut tre envisage dans le contexte plus vaste de la multiplication vgtative et de la domestication des ligneux.
Unit 7 Essais de multiplication

La multiplication des essences agroforestires sinscrit en partie dans le contexte des recherches en cours dans ce domaine. Cest pourquoi cette dernire unit aborde, tout dabord en termes gnraux puis en termes particuliers, la question du dispositif exprimental, ses concepts et ses principes, appliqus aux essais de multiplication de ligneux. A titre dillustration, une tude de cas est prsente. Les sept units portent sur une semaine. Normalement, ces sept units devraient se suivre par ordre chronologique, le programme ayant t conu cet effet ; toutefois, elles peuvent tre agences autrement pour des raisons de commodit. Un modle de programme et de calendrier figure lannexe 3.
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Mthodes denseignement
Le stage de formation revt un caractre pratique. Par consquent, lenseignement est dispens essentiellement laide dexercices et de dmonstrations. Ces travaux pratiques et
Diffrentes mthodes denseignement : formation sur le tas, dmonstrations, visites sur le terrain, exposs en classe.
dmonstrations doivent tre bien prpars lavance. Des instructions cet effet sont donnes dans chaque unit. Dans le courant du stage il faudra revenir sur un certain nombre dexercices pratiques raliss antrieurement ; il faudra donc consacrer chaque jour une matine ou une aprsmidi entire aux exercices et dmonstrations. Le meilleur moment sera choisi en fonction des conditions mtorologiques locales. Diffrentes mthodes denseignement : formation sur le tas, dmonstrations, visites sur le terrain, exposs en classe. Les exposs thoriques, gnralement prvus, ont pour but de passer en revue les concepts et principes fondamentaux et de fournir les renseignements ncessaires pour comprendre les travaux pratiques et les dmonstrations. Ces exposs ne devraient pas prendre plus de 40 % du temps disponible et ne devraient expliquer que ce qui est strictement indispensable pour mieux comprendre les applications pratiques des diverses techniques de multiplication. Des visites sur le terrain peuvent tre organises, sil reste du temps, pour voir les ppinires ou les laboratoires de micro-propagation, afin de mettre en lumire certains aspects de la recherche-dveloppement sur la multiplication vgtative, enseigns ou pratiqus durant le stage. Diffrentes mthodes denseignement sont proposes, pour chaque unit, dans lencadr qui figure en dbut de texte.
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Les spcialistes
Le contenu technique et pratique du stage est enseign par de spcialistes, qui sont gnralement des scientifiques ou du personnel dinstituts de formation ou denseignement participant activement des travaux sur la multiplication des ligneux. Des techniciens expriments et des grants de ppinires peuvent aussi y apporter leur concours. Les techniciens et la mainduvre employs sur les ppinires peuvent prter assistance pour les travaux pratiques et les dmonstrations. Le personnel charg de dispenser la formation aide laborer le programme du stage et prparer les supports de formation. Ils aident aussi organiser, raliser, suivre et valuer le stage. Les stagiaires, qui sont dj des praticiens dans le domaine qui fait lobjet du stage, sont aussi considrs comme des spcialistes dans tel ou tel domaine abord dans le cadre du stage.
Le matriel de formation
Le prsent manuel a t labor pour les raisons suivantes : Fournir un support de formation aux diverses activits et exposs prvus dans le cadre du stage. Fournir des matriaux de rfrence aux stagiaires engags dans la multiplication des essences agroforestires. Fournir des lignes directrices ou des matriaux de base aux stagiaires ou spcialistes dsireux dorganiser, lavenir, un stage de formation analogue.
Pour chacune des sept units qui composent le stage de formation, on a prsent sous la rubrique gnrale Axes de formation, un certain nombre de rubriques plus prcises que le lecteur pourra consulter rapidement. Ces rubriques sont les suivantes : objectifs de lenseignement dispens, mthodes denseignement, supports pdagogiques et lectures recommandes, rsum des exposs thoriques.
Objectifs de lenseignement dispens

Les objectifs de lenseignement dispens refltent le gain de connaissances ou de comptences que les stagiaires sont censs avoir acquis la fin de chaque unit. Les spcialistes chargs de la formation peuvent sen servir de guide pour prparer lunit et diriger les travaux, et pour indiquer aux participants ce qui est attendu deux pendant ou aprs le droulement de lunit.
Les mthodes denseignement proposent diffrentes mthodes et activits pour achever au mieux lunit considre. Une unit commence gnralement par un bref expos thorique tay par des notes de cours ou des polycopis prpars par la personne qui prsente lexpos.
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Le stage de formation tant ax sur la participation active des stagiaires, une grande partie du temps est consacre aux travaux pratiques et aux dmonstrations. Des directives claires concernant lexcution de ces activits et les rsultats qui en sont attendus doivent tre tablies au bnfice des participants. Les visites sur le terrain devraient tre tayes par des informations gnrales sur les essais faisant lobjet de la visite. Un protocole dexprimentation dtaill et des panneaux contenant le minimum dinformations ncessaire pour comprendre en quoi consiste lexprimentation suffiront (titre, traitement, dispositif exprimental, etc.). Pour que la visite sur le terrain soit plus vivante, les formateurs pourront dresser une liste de questions sur certains aspects du sujet et laisser les participants dcouvrir eux-mmes les rponses ces questions durant la visite. Des directives claires devront galement tre tablies pour les exercices en groupe ou individuels pour que les stagiaires sachent quels sont les rsultats attendus de ces exercices.
Supports pdagogiques et lectures recommandes

On mentionnera ici les divers documents et publications qui serviront durant le stage (chapitres de manuels scolaires, articles publis, notes de cours ou polycopis). Les notes de cours ou polycopis sont rdigs spcialement pour tayer les exposs prsents en dbut dunit. Les notes de cours ont un caractre plus formel et reflteront dune manire plus dtaille lexpos qui aura t fait. Les polycopis pourront tre plus succincts, ne prsentant que les grandes lignes de lexpos ou reproduisant les transparents utiliss par la personne qui fait lexpos.
Rsum de lunit
Ce rsum est un sommaire des exposs thoriques prsents lappui de lunit. Il peut sagir dune fiche de lecture ou dune liste des principaux points abords durant lexpos. Ce sommaire a pour but de mette en lumire les informations importantes qui doivent figurer dans lexpos. Les units pourront tre labores de diffrentes manires par diffrents spcialistes de la formation ; toutefois, il faudra assurer la cohrence du contenu dun stage lautre.
Evaluation et suivi
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Tout stage de formation intensif, comme celui-ci, exige, pour que lon puisse en mesurer limpact, une surveillance constante du droulement des activits, une valuation du stage par les participants, des tests et des activits de suivi visant aider les stagiaires appliquer les connaissances, les comptences et les comportements quils ont acquis durant le stage. Un modle de formulaire dvaluation et de plan daction individuel figure lannexe 4.
Evaluation du stage
Des formulaires dvaluation sont distribus au dbut du stage pour que les participants puissent les remplir au fur et mesure. Les formulaires ainsi remplis sont analyss par les organisateurs du stage, qui peuvent en faire la synthse pour linclure dans un rapport de stage. Lvaluation quotidienne des sessions thoriques, des visites sur le terrain, des dmonstrations et des exercices a pour but de dterminer si : les participants ont acquis de nouvelles connaissances la session est importante pour les travaux quotidiens des stagiaires la dure dune session est approprie ou non le moment o a lieu la session est bien choisi ou non la session est bien prsente la session est bien taye par les supports pdagogiques les participants ont des observations faire sur la session
Les rsultats de cette valuation quotidienne sont examins avec chacun des spcialistes. Cette valuation a pour but damliorer leurs comptences pdagogiques. Une valuation finale est effectue pour valuer lensemble du stage, tant du point de vue de son contenu que du point de vue de la logistique. Cette valuation porte sur les points suivants : dispositions prendre avant le stage dure et dates du stage qualit et utilit des units qui composent le stage bien-fond et efficacit des objectifs du stage matriel de formation, logistique, interactions entre les participants et les spcialistes chargs de la formation valuation globale : points forts et points faibles du stage Un rapport de stage doit tre tabli lintention des participants et des formateurs. Ce rapport peut aussi servir de base lorganisation dun prochain stage.
Tests de connaissances et de comptences

Les organisateurs du stage et les formateurs voudront naturellement vrifier que le contenu du stage a t bien compris par les stagiaires. Le meilleur moyen de le savoir est de faire passer un test aux stagiaires au commencement et la fin de chaque session, ou au commencement ou la fin du stage. Ce test pourra avoir lieu oralement sous la forme de questions poses aux stagiaires, ou il pourra tre administr par crit. Ces tests pourront donner lieu ventuellement la dlivrance dun certificat de fin de stage servant dattestation de prsence et confirmant que le stagiaire a acquis certaines qualifications dans un ou plusieurs des domaines couverts par le stage.
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Suivi
Pour valuer limpact du stage, ses organisateurs doivent prvoir des activits de suivi. Ils peuvent, par exemple, tablir un plan daction individuel sur lequel les participants indiqueront comment ils entendent utiliser, dans leur travail quotidien, les connaissances et les comptentes quils auront acquises dans le cadre du stage. Les organisateurs du stage pourront sy reporter aprs un certain temps pour vrifier que ces plans daction ont bien t appliqus et quels en ont t les rsultats. Si possible, les plans daction peuvent tre appuys par loctroi de petites subventions pour viter autant que possible que le manque de ressources ne devienne la cause de labsence de mise en uvre des plans daction.
Les organisateurs du stage peuvent aussi assurer le suivi en adressant aux stagiaires un bref questionnaire dvaluation dimpact, entre six et douze mois aprs la fin du stage. Ce questionnaire pourra tre complt, le cas chant, par une visite sur le lieu de travail des stagiaires pour confirmer sur place que ces derniers appliquent effectivement les connaissances et les comptences quils ont acquises et quils ont modifi leur comportement la fin du stage.
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Axes de formation
A la fin de cette unit, les stagiaires pourront : Enumrer les avantages et expliquer lintrt de la multiplication vgtative en agroforesterie et donner quelques exemples de ligneux qui peuvent tre multiplis avec succs de cette manire Enumrer et dcrire les techniques de multiplication vgtative les plus communment employes Expliquer quelques-uns des principes physiologiques qui sous-tendent les techniques de multiplication vgtative, notamment le rle des phytohormones Principes rgissant la slection et la collecte de matriel vgtal pour la multiplication vgtative
Lunit comportera deux exposs thoriques de 60 minutes chacun, suivis dun dbat. Lun de ces exposs portera sur les principes et concepts fondamentaux de la multiplication vgtative, lautre sur la slection et la collecte de matriel vgtal pour la multiplication. Ces exposs pourront tre tays par les moyens audio-visuels habituels, tels que diapositives et transparents. Si possible, des visites sur le terrain pourront tre organises pour renforcer certains concepts ou principes.
Supports pdagogiques
Les exposs thoriques seront tays par des notes de cours et des polycopis.
Rsum de lunit
La premire partie de lunit donnera un aperu des techniques de multiplication vgtative les plus communment employes pour multiplier les essences
it Un1
agroforestires. On expliquera pour quelles raisons privilgier la multiplication vgtative par rapport la reproduction sexue par ensemencement. On dcrira les diffrentes phases du dveloppement du matriel multipli par voie vgtative, ainsi que le rle des phytohormones et des rgulateurs de croissance dans ce processus. Enfin, on replacera la multiplication vgtative dans le contexte global de la multiplication des essences agroforestires. La deuxime partie de lunit explique les principes du prlvement de matriel vgtatif dans le contexte de la prospection de matriel gntique. Les avantages et inconvnients relatifs de la multiplication vgtative sont examins. Certains aspects essentiels de la prospection, notamment la participation des communauts locales et la ncessit dune bonne documentation, sont galement mis en relief. La prospection vgtative cible de matriel gntique de ligneux dans leur milieu naturel pourrait permettre de procurer plus rapidement aux exploitants agricoles des arbres de qualit suprieure, leur assurant lobtention prcoce des produits dsirs et luniformit des formes de croissance. Cependant, cette approche pourrait aussi avoir pour effet de rduire la base gntique du matriel cultiv et savrer la fois coteuse et laborieuse. Les mrites relatifs du prlvement dchantillons vgtatifs de clones
sur le terrain dpendent de la biologie du taxon et du contexte. Ces derniers doivent tre valus au cas par cas pour toute activit de prospection.
Lectures recommandes
Les publications suivantes permettront de mieux comprendre cette unit : Dawson I and Were J. 1997. Collecting germplasm from trees some guidelines. Agroforestry Today, 9(2): 6-9. Hartmann HT, Kester DE, Davies FT and Geneve RL. 1997. Plant propagation : Principles and practices. 6me dition. New Jersey : Prentice Hall.
Zeev Wiesman IPALAC et Hannah Jaenicke World Agroforestry Centre
Introduction
La multiplication vgtative consiste faire une copie exacte du gnome de la plantemre pour la perptuer dans de nouveaux individus. Si cest faisable, cest parce que les vgtaux, contrairement aux animaux et aux tre humains, possdent au dpart des cellules mristmatiques indiffrencies qui peuvent se diffrencier par la suite pour constituer les divers organes ncessaires pour former une nouvelle plante. Ainsi donc, un morceau de pousse, de racine ou de feuille peut se dvelopper pour former une nouvelle plante contenant exactement les mmes informations gntiques que la plante initiale.
Tandis que la reproduction sexue par voie semencire laisse le champ libre aux variations et au progrs de lvolution, la multiplication vgtative a pour but la reproduction identique de plantes possdant des caractres dsirables (productivit leve, qualit suprieure, bonne tolrance au stress biotique ou abiotique) et, de ce fait, elle est inestimable si lon veut perptuer un caractre privilgi dune gnration lautre. Cette mthode, pratique sur les arbres fruitiers sur le pourtour de la Mditerrane depuis les temps bibliques, conserve aujourdhui toute sa valeur pour la domestication des ligneux.
Les principales mthodes de multiplication vgtative des ligneux sont la multiplication par bouturage de tiges ou de racines, le greffage et lcussonnage, ainsi que diverses mthodes et techniques de marcottage et de micropropagation.
multiplication vgtative
sexue
asexue/vgtative
graines
boutures
greffes
marcottes/drageons
micropropagation
Le bouturage
Les boutures sont des morceaux de plantes coups possdant au moins un nud. Diverses parties de la plante peuvent servir de bouture : tiges, racines, feuilles. Les boutures sont places dans un milieu denracinement appropri, forte humidit, jusqu lapparition de racines et de pousses. La multiplication vgtative par bouturage peut donner un taux de multiplication lev et produit des plantes dotes de leur propre systme racinaire.
Concepts et principes
Le greffage
Le greffage permet de combiner plusieurs plantes. Cest la technique idale lorsquun seul gnotype ne permet pas de runir tous les caractres recherchs, tels que la rsistance aux nmatodes du systme racinaire ou un rendement lev des parties ariennes (bois, feuilles, fruits).
Le marcottage
Cette technique de multiplication, analogue au bouturage, prsente sur cette dernire lavantage que les rameaux ne sont dtachs de la plante-mre quaprs lapparition de racines. Le marcottage permet donc de faciliter lenracinement des espces qui senracinent difficilement. Son taux de multiplication est infrieur celui du bouturage, mais en revanche il peut produire des plants de plus grande taille.
La micropropagation
Ce concept recouvre toutes les formes de culture de tissus et de micropropagation. Ce qui singularise cette technique, cest le fait que les plantes sont dveloppes partir de cellules uniques ou de tissus cultivs en milieu strile. Elle donne un taux de multiplication trs lev, de sorte qu partir dune seule plante on peut produire des milliers de nouvelles plantes filles. Toutefois, elle exige au dpart de lourds investissements en termes de matriel et de formation. Cest pourquoi on
ny recourt gnralement que pour la multiplication darbres prsentant un intrt particulier en raison de leur valeur commerciale.
Autres techniques
Les arbres et arbustes peuvent aussi tre multiplis partir de stolons courts ou par apomixie.
Les stolons courts sont des pousses latrales qui se dveloppent la base de la tige chez certaines plantes. Ils sont importants en agroforesterie parce quils assurent la multiplication des monocotyldones tels que les palmiers. Ils sont dtachs de la plante-mre avec les racines et peuvent tre mis en pot immdiatement ou, si les racines sont insuffisantes, ils peuvent tre traits comme une bouture de tige place dans un propagateur. On peut provoquer lapparition de stolons courts en raccourcissant la tige principale, ce qui a pour effet de briser la dominance apicale de la plante-mre, qui est habituellement trs forte.
Lapomixie est un processus commun certaines plantes, do le processus sexuel normal qui mne la formation de zygotes est absent. Lembryon se dveloppe partir dune cellule haplode ou diplode au sein des structures reproductives (nucelle, sac embryonnaire ou uf produit sans avoir subi de division rductionnelle). La forme la plus connue dapomixie est lembryonie adventive, processus par lequel des embryons se diffrencient partir de cellules du
mre. Les graines ainsi obtenues possdent souvent plusieurs embryons (polyembryonie), lun deux stant dvelopp par reproduction sexue, les autres tant dorigine apomictique. Cette forme dapomixie se manifeste chez certaines espces darbres fruitiers (agrumes et mangues). Il est possible quelle survienne assez frquemment chez les espces non domestiques, mais ceci reste prouver.
Lintrt de lapomixie est quelle produit des graines clones. Les plantes qui germent partir de graines apomictiques passent par les mmes stades de dveloppement que les plantules obtenues par reproduction sexue. Cest donc lespce qui dterminera lutilit de cette forme de multiplication en horticulture. Si par exemple on a besoin de jeunes plants vigoureux, pour la production de bois doeuvre notamment, cette forme de multiplication clonale savrera souhaitable. La production de propagules apomictiques est galement intressante si lon considre les cots de production de plantes clonales; en effet, dans la plupart des cas la production de propagules par ce biais est meilleur march que la production de propagules vgtatives.
Avantages de la multiplication vgtative

La multiplication vgtative a essentiellement pour avantages : De maintenir des gnotypes suprieurs De surmonter les problmes poss par la germination et le stockage des semences De provoquer une floraison et une fructification plus prcoces De combiner en une seule plante les caractres convoits de plusieurs gnotypes De contrler certaines phases du dveloppement Dassurer luniformit des plantations
Maintenir des gnotypes suprieurs

La plupart des essences tropicales sont exognes, ce qui signifie que lors de la recombinaison des gnes durant la reproduction sexue de nombreux caractres importants peuvent disparatre. La multiplication vgtative permet, ds quun arbre exceptionnel a t repr par des exploitants agricoles ou des chercheurs, den fixer linformation gntique, ce qui permet de reproduire ce mme spcimen au cours de la gnration suivante.
Surmonter les problmes poss par la germination et le stockage

Certaines essences donnent des fruits sans graines, notamment certains cultivars dagrumes, et doivent donc tre multiplies vgtativement, tandis que dautres portent peu de fruits ou en portent de manire imprvisible. De nombreuses espces tropicales produisent des graines rcalcitrantes qui exigent des traitements spciaux souvent pnibles. En pareil cas, la multiplication vgtative peut remplacer avantageusement la production de plantules, tout en savrant moins onreuse.
nucelle ou du sac embryonnaire. Ces embryons sont diplodes et sont une rplique exacte de la plante-
Provoquer une floraison et une fructification plus prcoces

Lun des intrts essentiels de la multiplication vgtative est le raccourcissement du cycle reproductif de larbre. Ceci revt une importance particulire lorsque les fleurs, les fruits ou les graines sont les produits dsirs. La multiplication vgtative seffectue gnralement partir de scions ou de boutures darbres parvenus maturit, qui conserveront les caractres qui accompagnent cette maturit aprs greffage ou enracinement, comme on lexpliquera plus loin en dtail.
Combiner plusieurs gnotypes dans une seule plante

Le greffage est une manire indite de combiner dans une seule plante les caractres de plusieurs. Des scions possdant des caractristiques particulires, par exemple en ce qui concerne la fructification, peuvent tre greffs sur des sujets possdant dautres proprits dsirables, comme par exemple la rsistance aux nmatodes. Il est galement possible de greffer plusieurs cultivars sur une mme tige, notamment pour allonger ou taler leur priode de fructification en greffant sur un mme arbre des varits prcoces et des varits tardives. Lintroduction dune branche pollinisatrice sur larbre femelle est une possibilit pour les espces dioques.
Contrler certaines phases du dveloppement

Une plante passe par plusieurs phases successives que lon peut distinguer par la vigueur de la croissance et la floraison. Les jeunes plantes sont vigoureuses, ont une forte dominance apicale et se rgnrent aisment par multiplication vgtative. Les plantes matures manquent
de vigueur, se ramifient beaucoup et donnent des fleurs. Elles ne se rgnrent pas facilement par multiplication vgtative. On peut aussi dfinir des degrs de maturit intermdiaires. La multiplication vgtative perptue la phase de maturit de la plante-mre. La fixation de ce stade de dveloppement de larbre peut prsenter des avantages conomiques, notamment dans le cas des arbres fruitiers qui fleurissent rapidement aprs le greffage, si le greffon a t prlev sur un arbre mature, ou darbres de haute futaie qui conservent leur vigueur juvnile sils sont enracins ltat de bouture prleve sur une jeune plante. On notera toutefois que certaines formes de multiplication vgtative, notamment les boutures racinaires, donnent toujours des plantes jeunes. Ceci pourrait savrer indsirable dans certaines cas.
Uniformit des plantations

Pour de nombreuses espces exploites des fins commerciales, luniformit de la croissance ou de la priode de fructification est importante sur le plan conomique. Luniformit peut aussi avoir son importance dans les essais dagroforesterie.
Les hormones vgtales ou phytohormones jouent un rle important dans la formation des cals et la diffrentiation en nouvelles racines ou tissus vasculaires. Les hormones vgtales sont des substances chimiques que lon trouve chez les plantes ltat naturel de trs faibles concentrations. Outre les hormones naturelles endognes, il existe plusieurs substances synthtiques ou naturelles qui produisent des effets analogues. Ces substances, ainsi que les hormones vgtales, sont gnralement regroupes sous le terme gnrique rgulateurs de croissance. Il existe cinq grands groupes dhormones vgtales et de rgulateurs de croissance que lon peut distinguer par leurs effets dominants. Ce sont les auxines, les gibbrellines, les cytokinines, lacide abscissique, et un rgulateur de croissance gazeux, lthylne.
Les auxines
Les auxines sont des substances chimiques, naturelles ou synthtiques, drive du Ltryptophane. Lauxine endogne est lacide indole-actique (A.I.A). Cet acide est produit par le primordium foliaire, les jeunes feuilles et les graines en dveloppement, selon un processus basipte (du sommet la base). Il influence de nombreuses activits de la plante, notamment linclinaison vers la lumire, la dominance apicale (inhibition des bourgeons latraux par une forte croissance terminale), la formation de couches dabscission dans les fruits et les feuilles et la stimulation de la formation des cambiums. Cette activit est la plus importante du point de vue de la multiplication vgtative car elle a un effet direct sur la formation de racines dans les boutures et sur la cicatrisation des plaies lors de la formation de points de greffe. Certaines auxines synthtiques sont plus efficaces que lacide indole-actique et sont commercialises pour la multiplication des vgtaux, notamment lacide indole-butyrique (A.I.B), lacide naphtyl-actique (A.N.A.) et le 2,4-D, qui est un herbicide bien connu.
Les gibbrellines
Les gibbrellines se trouvent chez la plante ltat naturel. Elles rgulent llongation des pousses en contrlant la croissance des cellules (par opposition la division cellulaire). Il est prouv quelles entravent la formation des racines. Des expriences ont montr que lusage dantigibbrellines, substances qui bloquent la synthse des gibbrellines dans les plantes, amliorent lenracinement si lon applique en mme temps des auxines exognes. Le paclobutrazol (cultar) est une substance antigibbrelline bien connue.
Hormones vgtales et rgulateurs de croissance
Les cytokinines
Les cytokinines sont prsentes ltat naturel dans lendosperme des plantes. Elles rgulent la division cellulaire et induisent la noformation des bourgeons et des pousses. Les cytokinines naturelles comprennent la kintine et la zatine. Il existe aussi un grand nombre de cytokinines synthtiques. Lquilibre entre les auxines et les cytokinines est crucial pour la multiplication des vgtaux. Un coefficient lev auxines/cytokinines favorise la formation de racines adventives, tandis quun faible coefficient auxines/cytokinines favorise la formation de bourgeons adventifs. Les boutures despces contenant de fortes concentrations de cytokinines ltat naturel sont plus difficiles enraciner que les espces faible concentration.
Lacide abscissique
Lacide abscissique est un inhibiteur de croissance. Il est responsable de la formation de couches dabcission dans les bourgeons et les feuilles. Il rgule galement la fermeture des stomates et contrle labsorption de leau et des ions par les racines. Cest un antagoniste naturel des cytokinines. Lacide abcissique pourrait jouer un rle dans la multiplication des vgtaux; toutefois, ce rle nest pas encore clair.
Lthylne
Lthylne est un gaz produit par les fruits qui mrissent et les plantes snescentes. Les recherches menes jusquici ont mis en vidence les effets contradictoires de lthylne sur la
formation de racines adventives. Il semblerait que lthylne endogne ne participe pas directement lenracinement des boutures.
Maturit des tissus

Les plantes, tout comme les animaux, traversent diffrentes phases (embryonnaire, juvnile, adolescente et adulte). Toutefois, il existe une diffrence marque dans la manire dont les plantes et les animaux croissent et vieillissent. Cette diffrence rside dans le fait que les cellules animales sont plus ou moins dfinies. Toutes les cellules dun mme organe arrivent maturit et vieillissent peu prs ensemble. Les plantes, en revanche, produisent des couches successives au niveau du mristme des pousses apicales ou latrales. Ainsi donc, le passage de la jeunesse la maturit sopre dans le mristme mesure que croissent les pousses. Paradoxalement, la base de larbre, qui est chronologiquement la plus ancienne, est la moins mature en termes dontogense. La couronne, qui est la partie la plus jeune de larbre sur le plan chronologique, est cependant la plus mature sur le plan ontogntique. Les bourgeons latraux sont souvent dormants du fait de la forte dominance apicale du principal point vgtatif, mais ils conservent cependant le degr de maturit ontogntique quils possdaient lorigine. Ds quils commencent crotre, ils se dveloppent en franchissant les tapes normales du dveloppement ontogntique. Cest pourquoi
les bourgeons ou pousses picormiques prleves la base de larbre donnent des plantes jeunes tandis que les bourgeons ou boutures provenant des pousses de la cime de larbre donnent rapidement des plantes qui fleurissent.
Pour la multiplication par bouturage, il faut disposer de plantes jeunes car la formation de racines adventives dcrot mesure que la plante avance en maturit. Les rejets de souche darbres abattus possdent les proprits de jeunes plants, notamment la vigueur et la facilit denracinement et on peut sen servir pour prlever des boutures de tiges. Les plantes obtenues par bouturage ont les mmes caractres que la jeune plante; cette technique de multiplication est donc idale pour les arbres de haute futaie, o lon recherche la vigueur et la formation de branches basses.
Inversement, le dveloppement de la cime est souhaitable chez les arbres fruitiers, puisque lon veut que les nouvelles plantes parviennent maturit plus rapidement. Lenracinement des boutures se fait difficilement si ces dernires sont prleves sur des plantes adultes. Cest pourquoi, pour la multiplication vgtative des arbres fruitiers, on prfrera dautres techniques, telles que le marcottage ou le greffage. La multiplication vgtative des arbres ainsi obtenus permet de fixer lge ontogntique lge adulte, o les proprits juvniles ont compltement disparu de la plante.
Domestication des ligneux et multiplication vgtative

La multiplication vgtative peut tre utile aux chercheurs qui travaillent sur la domestication pour valuer le potentiel de certains arbres de populations slectionnes (Tchoundjeu et al., 1997). Elle peut servir, entres autres, dterminer si la qualit suprieure des fruits dun arbre est dordre gntique ou si elle rsulte dune raction de larbre son environnement ou sa gestion. En plantant diffrents spcimens du mme clone dans diffrents sites, on peut tester ses caractres gntiques ainsi que la capacit dadaptation climatique et environnementale du clone. La slection des plantes par les mthodes traditionnelles a pour but de consigner aux fins dvaluation la performance moyenne dune provenance ou dune famille. Par contraste, on peut trouver au sein de populations infrieures des clones exceptionnels. Ds lors que lon a repr un individu suprieur, on peut produire des cultivars par multiplication vgtative continue. Le choix de la technique damlioration (multiplication vgtative ou slection traditionnelle) dpendra largement de lespce considre et des produits quelle fournit (Weber et al., 1997). Les espces darbres qui donnent des produits de grande valeur, comme par exemple les fruits, qui peuvent tre des espces exogames, justifient gnralement les investissements plus levs quexige un programme de multiplication vgtative.
Conserver la diversit gntique

On croit gnralement quun programme de multiplication vgtative associ la prospection de matriel gntique sur toute la gamme permet de prserver la diversit gntique des populations sauvages. Ceci est vrai pour les populations par ailleurs menaces dextinction ou chez lesquelles une slection antrieure a provoqu la domination dun petit nombre de familles ou de provenances au dtriment des autres. Nanmoins, la multiplication vgtative peut aussi constituer un danger pour la diversit gntique dune population si la slection opre partir de la diversit naturelle, qui est trs vaste, a t extrmement restreinte. Si, par exemple, on impose des critres de slection trs rigoureux auxquels trs peu de clones peuvent satisfaire, lexclusion de tous les autres critres, la plantation des populations monoclonales ou oligoclonales qui en rsulteraient seraient hautement prjudiciable la capacit dadaptation environnementale et socitale de lespce. De mme, sil est vrai que lon a pu dans le pass introduire plusieurs espces partir dune poigne de semences, on sait aussi que cette pratique pourrait prsenter des dangers dans la mesure o la population ainsi obtenue est plus vulnrable aux flaux biotiques ou abiotiques, tels que les insectes nuisibles ou les scheresses prolonges.
Quant aux collections semencires, elles devraient provenir dau moins trente arbres dune population donne (Dawson and Were, 1997). On veillera conserver la riche diversit gntique prsente dans tout programme de multiplication vgtative. Si la slection porte sur un trait
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particulier, on peut choisir plusieurs clones ayant la mme performance pour ce trait. Par exemple, si la maturit en dbut de saison est lobjectif recherch pour la domestication dune espce donne, on sapercevra que ce trait est prsent chez plusieurs individus, tout en tant li divers autres traits plus ou moins importants tels que la taille de larbre ou la couleur des feuilles. Ainsi donc, on pourra tablir une population possdant un trait commun, savoir une maturit prcoce, mais divergeant sur dautres points, comme par exemple la taille de larbre ou la couleur des feuilles. De tels mlanges de clones sont communs en foresterie. Dans certains pays, le nombre de clones qui doivent tre prsents dans un mlange donn est rglement par la loi; par exemple, au Canada, il doit tre de plus de 50 (Zsuffa et al., 1993). Sagissant des arbres fruitiers exploits des fins commerciales, les consommateurs ont des gots suffisamment varis pour garantir une bonne prservation de la diversit gntique. On notera que dans les centres dorigine de la plupart des fruits exotiques il reste des populations naturelles qui permettent de prserver le patrimoine gntique et de fournir de nouveaux gnes pour de nouveaux cultivars.
Les maladies
Un problme quil ne faut pas sous-estimer dans le contexte de la multiplication vgtative est celui de la propagation des maladies, en particulier des infections virales. En effet, ds quune plante est infecte par un virus ou un organisme apparent, souvent par lintermdiaire dinsectes
de greffe et devenir une source dinfection par le biais des greffons et des points de greffe. La virescence, ou greening, des agrumes est un exemple bien connu. Cette maladie a fait chouer bon nombre de plans de production ambitieux. Le virus est transmis naturellement par le psylle des agrumes (Trioza erythreae), mais il est aussi largement propag par le greffage dune plante malade sur une plante saine. Cest pourquoi il existe, au Kenya par exemple, des rglements trs stricts restreignant les rgions o lon peut implanter des ppinires dagrumes. Ces ppinires doivent tre agres. Elles sont dotes dun personnel qualifi qui exerce une troite surveillance sur les plants pour viter toute diffusion de matriel vgtal contamin (Will et al., 1997). Plusieurs mthodes perfectionnes ont t mises au point pour liminer les agents pathognes des plantes, notamment la thermothrapie, les traitements thermiques et le micro-greffage, ou une combinaison de ces diverses techniques. Ces traitements ne sont gnralement offerts que par des laboratoires spcialiss.
Lhistoire montre que les maladies peuvent se propager chez les plantes produites par multiplication vgtative avec des effets dvastateurs. On citera en exemple lpidmie de Phytophtora infestans qui a dtruit, en 1845-1846, la rcolte de pommes de terre en Irlande, causant une famine de telle ampleur que des vagues dmigrants irlandais ont dferl sur les EtatsUnis. La multiplication vgtative peut, inversement, servir amliorer la rsistance dune espce aux agents pathognes, soit en multipliant les individus rsistants, soit en greffant des greffons intressants mais sensibles sur des souches rsistantes.
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Bibliographie
Dawson I. and Were J. 1997. Collecting germplasm from trees some guidelines. Agroforestry Today. 9(2): 6-9. Tchoundjeu Z, De Wolf J and Jaenicke H. 1997. Vegetative propagation for domestication of agroforestry trees. Agroforestry Today. 9(2) : 10-12. Weber J, Sotelo-Montes C and Labarta-Chvarri R. 1997. Tree Domestication in the Peruvian Amazon Basin working with farmers for community development. Agroforestry Today. 9(4): 4-8. Will M., Oduol PA, Ouko JO, and Alumira J. 1997. Tree Crops Germplasm and Distribution Systems in Kenya. GTZ-Integration of Tree Crops into Farming Systems Project. Internal Paper No 14. Nairobi : GTZ. Zsuffa L, Sennerby-Forsse L, Weissgerber H and Hall R.B. 1993. Strategies for Clonal Forestry with Poplars, Aspens and Willows. In: Ahuja, MR and Libby WJ eds. Clonal Forestry II. Conservation and Application. Heidelberg : Springer.
suceurs de sve tels que les aphides, la maladie peut stendre toute la plante, franchir les points
Slection et collecte des clones

Ian DawsonWorld Agroforestry Centre
Introduction
Le prsent expos dcrit quelques-uns des principes de lchantillonnage vgtatif durant la prospection de matriel gntique. Les avantages et les inconvnients relatifs de cette mthode sont compars dautres mthodes de prospection semencire. Certains aspects gnraux de la collecte, y compris la participation des communauts locales et la ncessit dune bonne documentation, sont galement mis en lumire.
La collecte cible dchantillons vgtatifs de matriel gntique de ligneux permet de mettre rapidement la disposition des exploitants des varits darbres suprieures qui donnent plus prcocment les produits dsirs tout en assurant luniformit de la croissance. Toutefois, cette collecte risque de rtrcir la base gntique du matriel cultiv et peut savrer la fois coteuse et laborieuse. Les mrites relatifs de lchantillonnage vgtatif de clones sur le terrain dpendront de la biologie du taxon et du contexte, quil faudra valuer au cas par cas pour toute activit de prospection de matriel gntique.
12 Principes de la collecte

Le matriel gntique peut tre prospect pour diverses raisons, notamment :
Pour tre distribu immdiatement aux exploitants agricoles ou affect dautres usages Pour tre conserv Pour slectionner du matriel gntique suprieur pour des programmes de domestication des ligneux Le matriel gntique est gnralement recueilli sous la forme de semences, bien quil soit aussi possible de le recueillir sous la forme dchantillons vgtatifs. Le prlvement dchantillons vgtatifs offre, par rapport la collecte de semences, les avantages suivants : Le prlvement de matriel vgtatif permet dobtenir une rplique gntique exacte de larbre sur lequel a t prlev lchantillon. Par consquent, si on slectionne des arbres suprieurs durant lopration on peut en mme temps conserver les gnes favorables et les complexes gntiques adaptatifs de ces individus. Une collecte bien cible de matriel vgtatif peut savrer plus efficace que la collecte de semences pour la slection de matriel de qualit suprieure. Ceci est d au fait que la plupart des arbres sont des espces
par la plante-mre. La collecte de semences peut donc saccompagner de la perte de gnes favorables et de gnes adaptatifs possds par la plante-mre. Lexpression acclre dimportants caractres peut parfois tre obtenue par chantillonnage de matriel vgtatif, si lon choisit bien la mthode de collecte et lge des arbres. Cest ainsi que les arbres fruitiers reproduits par marcottage produisent plus prcocment que ceux issus dchantillons de semences. Ceci prsente des avantages tant pour lvaluation du matriel gntique dans le cadre des programmes damlioration des ligneux que pour la distribution directe de matriel gntique aux usagers. Dans ce dernier cas, les exploitants agricoles sont probablement avantags parce quils peuvent tirer parti plus rapidement du matriel collect. La prospection de matriel vgtatif peut se faire tout moment, contrairement la collecte de semences. Pour certaines espces, il est difficile de prvoir le meilleur moment pour effectuer la collecte des semences, et ce moment peut varier considrablement dune anne sur lautre. Certaines espces ne fructifient pas certaines annes ou, sil sagit despces exogames, sont incapables de produire aucun fruit en raison de leur isolement gntique, par suite dune fragmentation de la population. En pareil cas, la possibilit de prlever du matriel vgtatif est le seul moyen de se procurer du matriel gntique.
Un certain nombre dinconvnients (aucun arbre voisin pour se charger de la pollinisation) sont cependant associs lchantillonnage de matriel gntique sous forme vgtative. Ces inconvnients sont les suivants : La slection de phnotypes durant la prospection de matriel gntique peut savrer inefficace. En effet, les caractres ne peuvent tre slectionns sur le terrain que sils possdent un degr de transmissibilit lev, en raison de linfluence quexerce un environnement non uniforme sur lexpression des caractres. Si certains caractres intressants se transmettent facilement (par exemple la taille des fruits et leur suavit), dautres par contre ne se transmettent pas aussi aisment (par exemple la forme des arbres). Peu de travaux ont t effectus jusqu prsent pour dterminer lefficacit de la slection de phnotypes sur le terrain. La collecte de matriel vgtatif souffre parfois de difficults pratiques. Les mthodes de collecte peuvent tre ardues et exiger des recherches considrables avant que dtre optimises et savrer de surcrot laborieuses. Le matriel vgtatif est prissable. Il doit donc tre manipul avec soin sur le terrain (Leon et Withers, 1986) et ne peut gnralement pas tre entrepos pendant de longues priodes. Ce matriel est parfois volumineux et difficile manipuler. Les rglements applicables en matire de quarantaine sont parfois plus stricts en raison du risque plus grand de transmission de virus ou dautres maladies avec du matriel vgtatif quavec des semences.
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exogames, ce qui signifie que 50% seulement du gnome nuclaire de la graine est apport
Pour des raisons de commodit, le matriel vgtatif est gnralement prlev sur un petit
nombre darbres dune provenance donne. Ceci rtrcit invitablement la base gntique du matriel prlev par rapport celle de la population sur laquelle il est prlev. Ceci est particulirement vrai pour les arbres chez lesquels on constate des variations non ngligeables au sein dune mme population. Bien quune variation gntique rduite puisse tre un avantage dans certains cas (par exemple lorsque les marchs exigent un produit de dimensions et de caractristiques uniformes), elle peut aussi avoir pour effet damoindrir laptitude du matriel gntique sadapter des conditions environnementales diverses (comme par exemple la prsence de ravageurs et de maladies et les changements climatiques) ou aux besoins de lusager (comme par exemple une modification des prfrences de lusager entre les diffrents produits fournis par larbre (Simons et al., 1994). Si lon procde par la suite une multiplication par voie de semences, il peut sensuivre une dpression, ou perte de performance, due la consanguinit. Un moyen dviter de rtrcir la base gntique consiste rassembler, valuer et distribuer un plus grand nombre de clones de diffrentes provenances. Toutefois, cette pratique est rarement suivie. Par suite du risque de rtrcissement de la base gntique du matriel collect, la collecte de matriel vgtatif est rarement employe des fins de conservation, moins que lon ne puisse se procurer des semences ou que le matriel gntique vis ne se reproduise normalement par procd vgtatif.
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On dcidera si la collecte de matriel vgtatif est approprie, dans une situation donne, en fonction de la biologie de lespce considre, de lusage auquel on la destine et de lamlioration dsire. Tous ces facteurs devront tre soigneusement valus avant la collecte. La collecte cible de matriel vgtatif est approprie pour les espces darbres qui : donnent des produits de haute valeur (certains fruits) sont exogames passent par une longue priode de maturation avant de fructifier produisent des graines rcalcitrantes possdent des caractristiques importantes places sous strict contrle gntique (voir lexemple ci-dessous) Les espces sans grande valeur utilises pour les services quelles rendent (par exemple pour amliorer la fertilit des sols ou produire du fourrage), qui ont un temps de gnration court et une production prolifique de graines orthodoxes se prtent mieux gnralement une prospection sous forme de semences.
Quelle que soit la mthode employe pour collecter du matriel gntique, on constate que de nombreuses essences darbres font apparatre des variations phnotypiques considrables dans toute leur aire de rpartition. Il importe donc, lorsque lon collecte du matriel valuer pour
provenances dans toute la zone gographique de lespce, en considrant lensemble des gradients cologiques (tels que laltitude ou le clines de pluviomtrie) prsent dans laire de rpartition du taxon.
Conseils pour la collecte

La slection et la collecte de matriel gntique gagnent tre menes avec la participation des usagers potentiels. Dans un premier temps, il faut choisir les espces intressant les usagers. En deuxime lieu, des mthodes de collecte appropries pour ces espces doivent tre mises au point par lexprience ou lapprentissage ou au moyen dessais raliss par les usagers. En troisime lieu, il faut dterminer les caractristiques de lespce qui sont importantes pour les usagers et que lon souhaiterait donc amliorer. La prospection de matriel gntique doit ensuite tre effectue directement avec les communauts locales. Lchantillonnage cibl doit tenir compte des caractristiques importantes recherches par les usagers. Cette collecte, effectue avec la participation de tous les intresss, permet de mieux faire connatre aux exploitants agricoles les utilisations et les bnfices possibles de telle ou telle espce. Elle leur permet dapprendre les techniques ncessaires pour reproduire lespce par multiplication vgtative. On peut ainsi augmenter considrablement les chances dobtenir un impact rapidement et dacclrer ladoption de nouvelles technologies et de certains matriels gntiques.
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Plusieurs points sont importants pour la collecte :
Il faut disposer, avant de commencer, dun plan de travail bien tabli dcrivant la mthode suivre et le but recherch. Ce plan peut tre utilement prsent sous la forme dun tableau rcapitulatif et devrait tre rdig sous la forme dun protocole avant le commencement de la collecte. Il faut disposer dune bonne documentation, pendant et aprs la collecte, pour pouvoir sy rfrer ultrieurement. Il faudra noter tout spcialement les caractristiques particulires que lon aura slectionnes chez les arbres faisant lobjet de la collecte, ainsi que les noms des membres de la communaut qui auront pris part la slection. Le matriel vgtatif tant prissable, il faudra prendre des dispositions, avant le commencement de la collecte, pour que le matriel vgtatif soit receptionn et pris en charge ds le retour la station. Une fois la collecte acheve, un rapport dcrivant en dtail les travaux effectus devrait tre rdig. Des renseignements complmentaires sur la mthodologie de prospection de matriel gntique figurent dans divers ouvrages spcialiss (Dawson et Were, 1997) et la FAO (1995).
les programmes damlioration gntique, de prlever des chantillons sur toute une gamme de
Exemple
Irvingia gabonensis et I. Wombolu (mangue sauvage) sont dimportantes espces darbres fruitiers dans les rgions humides dAfrique de lOuest. Le fruit se consomme cru et ses graines sches sont utilises comme paississant pour les soupes. La mangue sauvage contribue pour beaucoup au dveloppement de lconomie locale. De plus, lors de ltablissement de la liste des priorits, elle a t identifie comme un taxon cl pour la recherche, y compris des activits telles que la prospection de matriel gntique et lvaluation gntique. Ces deux espces de mangue peuvent tre multiplies vgtativement par marcottage ou marcottage arien. Les graines sont rcalcitrantes et ne restent viables que pendant les quatre semaines qui suivent leur ramassage.
Avant que ne commence la prospection de matriel gntique, une enqute a t mene auprs des communauts pour savoir quels caractres importants les usagers recherchaient dans ces arbres. La dimension des fruits et leur saveur faisaient partie des lments recherchs. On a procd deux collectes successives. Au cours de la premire collecte, des fruits ont t prlevs sur des arbres qui, selon les consommateurs, possdaient des proprits suprieures, au Nigria, au Gabon et au Cameroun. Les graines ramasses ont t rapidement transfres dans plusieurs sites en milieu rel, en vue de leur installation dans des essais de provenance en station et dans des peuplements de conservation.
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Aprs la premire collecte, on a valu plusieurs arbres en recourant la gntique molculaire. On a ainsi pu mettre en vidence, chez les deux espces, certains types de variations qui devraient permettre doptimiser la stratgie de gestion des gnes. Lvaluation a montr notamment quil existe des variations gntiques considrables entre les graines recueillies sur un mme arbre, ce qui est souvent le cas chez les espces exogames. Les graines ne sont donc pas conformes loriginal. Il sensuit que la slection clonale serait une mthode plus efficace pour cibler la prospection de matriel gntique de ligneux.
Durant la deuxime collecte, un prlvement cibl de matriel vgtatif a eu lieu au Nigria et au Cameroun. Les usagers ont t invits slectionner des arbres suprieurs dans divers endroits, aprs quoi des marcottes ont t installes avec laide des communauts. Pour chaque arbre, on a tabli entre 5 et 10 marcottes. Aprs quelques mois, les marcottes ont t recueillies. Une partie a t affecte des essais en plein champ mens en station visant comparer les variations gntiques entre clones et rgions. Lautre partie a t donne aux usagers pour quils puissent tablir des ppinires communautaires.
La collecte de matriel vgtatif dIrvingia prsente, en plus de la slection clonale, deux autres avantages. Le premier de ces avantages est que la fructification se trouve acclre, puisquelle est ramene de 7 ans minimum pour les arbres issus de semences 2 3 ans. Par consquent, on peut valuer plus rapidement le matriel gntique et donc fournir plus vite aux usagers du matriel suprieur. Le deuxime avantage est que, en impliquant les communauts directement dans le prlvement et la collecte des marcottes, on stimule leur intrt pour la gestion et la plantation des espces choisies. Le marcottage est une technique relativement simple laquelle les usagers pourront ensuite recourir pour slectionner et multiplier leurs arbres favoris sans lintervention des chercheurs. Le seul inconvnient du marcottage est le taux relativement lev dchecs lors de la phase dtablissement. Des recherches plus pousses seront donc ncessaires avant que lon puisse utiliser le marcottage comme mthode courante pour la collecte de matriel gntique dIrvingia.
Bibliographie
Dawson IK and Were J. 1997. Collecting germplasm from trees some guidelines. Agroforestry Today. 9(2): 6-9. FAO, Forestry Resources Division, Forestry Department. 1995. Collecting woody perennials. In: Guarino, L., Ramanatha Rao, V., Reid, R: (eds). Collecting plant genetic diversity : t echnical guidelines. Wallingford: CAB International pp. 485-489. Simons, AJ, MacQueen DJ and Stewart JL. 1994. Strategic concepts in the domestrication of non-industrial trees. In: Leakey, R.R.B., Newton, A.C. (eds). Tropical trees : the potential for domestication and the rebuilding of forest resources. London : HMSO. Leon J and Withers LA (eds). 1986. Guidelines for Seed Exchange and Plant Introductions in Tropical Crops. FAO Plant Production and Protection Paper, 76. Rome : FAO.
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it Un 2
Axes de formation
A la fin de cette unit, les participants pourront : numrer et expliquer les problmes les plus courants qui affectent la gestion des ppinires et proposer des solutions pour y remdier numrer et dcrire les outils ncessaires pour exploiter une ppinire dcrire les caractristiques dun bon substrat de ppinire organiser et planifier les activits de la ppinire de manire produire des essences agroforestires de trs bonne qualit numrer et dcrire quelques problmes courants poss par la prsence de ravageurs et de maladies susceptibles de sattaquer aux ppinires et proposer des moyens de lutte
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Lunit comprend deux exposs thoriques de 60 minutes chacun, lun sur la gestion des ppinires et lautre sur la lutte phytosanitaire. Ces exposs sont tays par des supports audiovisuels. Lexpos sur la gestion des ppinires est suivi par une srie de travaux pratiques et de dmonstrations mettant en relief les aspects les plus importants de la gestion dune ppinire, plus spcifiquement dans le contexte des techniques de multiplication vgtative. Lexpos sur la lutte phytosanitaire pourra tre illustr par des dmonstrations ou des exercices pratiques sur lusage des pesticides en ppinire.

Les deux exposs thoriques seront tays par des notes de cours. Le matriel ncessaire pour les travaux pratiques et les dmonstrations sur la gestion dune ppinire est indiqu dans la section consacre aux travaux pratiques et aux dmonstrations.
Rsum de lunit
Pour produire des essences agroforestires de trs bonne qualit, la mise en place dune ppinire bien gre est indispensable. Tout bon grant de ppinire doit
se fixer pour but la production rapide et rentable de plantes saines et uniformes possdant un systme racinaire vigoureux et fibreux. Les problmes les plus courants affectant la production de plantules sont les suivants : absence dune source fiable dalimentation en eau, retards de livraison,
quipement de mauvaise qualit, approvisionnement en semences auprs de divers fournisseurs, mlanges utiliss pour la mise en pot, hygine de la ppinire et conditions phytosanitaires, comptentes du personnel et planification. Certains de ces problmes sont lis la gestion de la ppinire, dautres tiennent la qualit de linfrastructure. Le substrat joue un rle important dans le succs de la production arboricole. Un bon substrat de multiplication est la fois ferme et lger, peut maintenir les plantules bien en place, retenir lhumidit tout en tant bien ar et bien drain, tre exempt dagents pathognes et contenir les lments nutritifs ncessaires la croissance de la plante sans tre salin. Il existe plusieurs mthodes pour obtenir un compost de bonne qualit. Un certain nombre doutils rudimentaires sont indispensables dans toute ppinire : pioche, houe, pelle etc... et doivent tre utiliss correctement et bien entretenus. Une bonne planification est un pralable la gestion et lorganisation de la
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ppinire. Les aspects les plus importants de la planification sont, dune part, ltablissement dun planning, et, dautre part, lestimation de la quantit de substrat requise et du nombre de plantules ncessaire pour produire le nombre darbres prvu. Les grants de ppinires devraient tre plus troitement en contact avec la clientle de manire amliorer leurs comptences ainsi que la qualit des plantes quils fournissent. Les ravageurs et maladies usuels des plantes peuvent endommager les semences et les plantules dans les ppinires. Lexpos mettra en lumire certains de ces problmes et proposera des mesures prventives et curatives pour les attnuer.
Pour mieux comprendre lunit, on consultera avec profit les ouvrages suivants : Hartmann HT, Kester DE, Davies FT et Geneve RLL. 1997. Plant propagation : Principles and practices, 6th ed. New Jersey: Prentice Hall. Jaenicke H. 1999. Good tree nursery practices. Research nurseries. Nairobi: ICRAF . 83 p. OIT. 1989. Tree nurseries. An illustrated technical guide and training manual. Special Public Works Programmes Booklet No. 6. Genve. OIT. Miller JH. and Jones N. 1995. Organic and compost-based growing media for tree seedling nurseries. Washington D.C.: The World Bank.
Gestion des ppinires et production de plants

Hannah JaenickeWorld Agroforestry Centre
On examinera, dans les pages qui suivent, divers modes de gestion possibles des ppinires dans le contexte de la recherche et des projets pilotes.1 On notera tout dabord que, si pour toutes les ppinires, en milieu rel ou en milieu contrl, la qualit, lhygine et la planification revtent une importance cruciale, les ppinires rattaches aux projets sont privilgies cet gard, en ce sens quelles disposent gnralement des ressources ncessaires pour investir dans plus dintrants que le strict minimum. On nenvisagera donc ici que des modes de gestion susceptibles dtre adapts par la suite au contexte local sans pour autant compromettre la qualit des plantules. Des suggestions dessais en ppinire sont prsentes dans lUnit 7 (essais de multiplication).
Sil est vrai que certaines essences peuvent aisment tre tablies par semis direct sur le terrain, la plupart des essences doivent tre soigneusement cultives dans une ppinire, o les jeunes plantes peuvent tre protges et endurcies pour pouvoir survivre ensuite dans les conditions difficiles du milieu rel. Une ppinire doit toujours tre implante prs dune source deau fiable et dans un endroit offrant la protection ncessaire. Le terrain doit tre plat et en pente douce, pour que leau de drainage puisse scouler facilement. Le sol devrait si possible tre recouvert dune couche de gravier pour touffer les mauvaises herbes et aussi par souci de propret.
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La qualit des plantules sera dtermine en fonction des conditions qui prvaudront sur le site dimplantation projet. Ainsi, les plantules destines aux zones arides devront possder un systme racinaire profond et bien dvelopp, capable de crotre rapidement pour atteindre la nappe phratique. En revanche, les plantules destines aux zones humides, o la concurrence exerce par les mauvaises herbes est intense, devront avoir une croissance arienne vigoureuse pour pouvoir supplanter ces mauvaises herbes et leur faire concurrence pour la lumire et autres ressources. Toute plantule doit, sa sortie de la ppinire, tre suffisamment forte pour pouvoir pousser rapidement ds quelle est repique.
Les plantules de qualit : possdent un systme racinaire bien dvelopp et produisent vite de nouvelles racines peuvent sancrer dans le sol rapidement et assimiler et crotre ds quelles sont repiques
1 La note de cours qui suit est tire de: Simons AJ and Beniest J (eds.) Introduction to Tree Domestication. World Agroforestry Centre, Nairobi (en cours de prparation)
Introduction
ont un feuillage adapt lensoleillement ont un rapport quilibr pousses/racines possdent de bonnes rserves de glucides sont renforces par des inoculations adquates de mycorhizes ou de rhizobium si ncessaire
Comment grer une ppinire

La production de plantules de qualit dans les ppinires est soumise linfluence dun certain nombre de facteurs : manipulation, conteneurs, substrat, engrais, hygine, milieu environnant, gestion du temps, tiquetage et enregistrement des donnes.
Germination des graines et manipulation des plantules

La plupart des graines orthodoxes sont dormantes jusqu ce quelles entrent en contact avec une humidit suffisamment leve pour que commence le processus de germination. Certaines graines doivent subir un traitement particulier pour lever la dormance ou pour acclrer et synchroniser la germination. Il suffit gnralement de faire tremper les graines une nuit dans de leau tide ou frache pour dclencher le processus de germination. Un traitement spcial, tel que la pratique dune entaille ou le refroidissement peut savrer ncessaire. Des instructions ce sujet figurent gnralement sur les sachets de graines. Des expriences sont parfois ncessaires pour les
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espces inconnues. Les plantules doivent tre manipules le moins possible durant leur sjour en ppinire. La pratique communment suivie, qui consiste faire germer les graines dans un lit de semences pour les dpiquer ensuite ne doit pas tre encourage parce quelle peut entraner des dformations considrables des racines. Il vaut mieux placer directement les graines dans des conteneurs. Si lon
La premire photographie montre deux plantes aux racines dformes ( gauche) par suite dune mauvaise croissance dans la ppinire. Lautre plante ( droite) possde un systme racinaire bien dvelopp. La deuxime photographie montre plusieurs exemples de dformations des racines de jeunes plantules cultives en pots en ppinire.
sattend une germination difficile, on peut placer deux ou trois graines par conteneur. Si le dpiquage est invitable, par exemple si lon na en sa possession quune poigne de graines extrmement prcieuses ou si la graine est trs petite et doit tre plante dans un lit de semences fin (par exemple, Eucalyptus Alnus), il faut que le dpiquage ait lieu le plus tt possible et quil soit effectu soigneusement pour ne pas endommager la jeune plantule et pour viter de malmener ou de surexposer les racines. De mme, sil faut transfrer de jeunes plantules dans de plus grands conteneurs, il faut prendre grand soin dviter dendommager ou de plier les racines.
Il est galement dconseill de dplacer des plantules de lombre au soleil. Mieux vaut rduire graduellement lombrage, pour que les plantules puissent rester la mme place. Le cernage des racines est indispensable si les plantules sont dposes mme le sol. La mthode recommande consiste sectionner les racines laide dun fil de fer que lon tire transversalement le long de la plate-bande de la ppinire. Comme il y a souvent beaucoup de travail dans une ppinire, le cernage des racines est parfois nglig et lon aboutit alors des plantes trop profondment enracines dans le sol. Ces plantes souffrent gravement lorsquelles sont arraches et il est frquent quelles ne parviennent pas survivre une fois repiques au champ.
Pour viter ce problme, on utilisera si possible des lits de semis ou des chssis surlevs, sur lesquels on placera les conteneurs. Lutilisation de lits surlevs a en outre pour avantage damliorer le drainage et la circulation de lair entre les plantules et de rduire lincidence des maladies et des ravageurs en milieu humide. En milieu sec, il est bon dexprimenter pour voir si le recours des lits surlevs est avantageux ou non pour lespce considre ou si, au contraire, il vaut mieux utiliser des lits surbaisss ou placer une feuille de plastique sous les plantes pour conserver leau et empcher les racines de senfoncer dans le sol.
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Le transport des plantules est une tche dlicate trop souvent bcle et donc source de pertes. Si les racines sont nu, il convient de les envelopper soigneusement dans du papier, des chiffons ou des feuilles humides. Si les plantules sont transportes dans des conteneurs, il faut veiller ne pas serrer les pots au point de les craser. Les cageaux utiliss pour le transport du pain ou des boissons non alcoolises conviennent parfaitement et, si les plantules sont toutes petites, on peut les empiler sans dommage. Il convient de maintenir les plantules en position verticale et sous une bche humide pour les empcher de scher. Si le repiquage ne peut se faire immdiatement, il faut garder les plantules lombre et les planter dans les jours qui suivent.
Conteneurs
Les arbres sont souvent produits sous la forme de plantules en pots. Il existe diffrents types de conteneurs, de diverses formes, dimensions et matriaux (polystyrne, polythylne, fibre ou papier). De nouvelles formes et de nouveaux matriaux sont sans cesse mis au point et tests. On
choisira le conteneur en fonction de la plante, de sa destination finale et de sa taille. Les dimensions du conteneur devront aussi tenir compte de la nature du substrat utilis et du calendrier de fertilisation. Les espces long cycle de croissance sont gnralement cultives dans de grands pots, moins quon ne puisse leur apporter de lengrais frquemment.
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Diffrents types de dispositifs antivrilles pour prvenir les dformations des racines des plantules
Curieusement, malgr des dizaines dannes de recherches sur les espces tempres, on ne sait toujours pas de manire dcisive quels sont les effets long terme des conteneurs utiliss ; on ignore toujours, par exemple, quels sont les conteneurs idals pour les espces forte racine pivotante (Landis et al., 1993). Dans les rgions tropicales, les conteneurs les plus communment employs sont les sacs de polythne, qui existent dans diffrentes dimensions. Ces sacs sont gnralement fabriqus sur
place et on peut se les procurer facilement et bas prix. Lun des inconvnients majeurs est que les racines risquent de se dvelopper en spirale ds quelles atteignent la surface lisse des pots. Les consquences pour les plantes ne sont pas ngligeables : croissance entrave, faible rsistance au stress, sensibilit aux coups de vent et, lextrme, ncrose apicale due lenchevtrement des racines. Une solution moderne pour les programmes de domestication des ligneux est lemploi de dispositifs antivrilles, qui sont des conteneurs rigides recouverts sur leur face intrieure de rainures verticales qui dirigent les racines vers le bas, les empchant ainsi de se dvelopper en spirale. Les dispositifs antivrilles sont percs au fond dun large orifice qui permet de cerner les racines exposes si les conteneurs sont placs sur des chssis surlevs. Les conteneurs de fabrication locale (botes de lait usages en carton, morceaux de bambou, feuilles de bananier enroules) conviennent la production de ligneux en plein champ. Toutefois, ils ne sont pas assez rsistants pour les plantules qui doivent sjourner plus longtemps dans la ppinire, en particulier les arbres fruitiers qui ont t greffs.
Substrats
Le substrat est un intrant essentiel dans la multiplication des plantules. Son importance ne doit pas tre sous-estime. Le substrat apporte la plantule les lments nutritifs, leau et lair qui sont indispensables son dveloppement. Il contient aussi des microorganismes utiles la plantule. Un substrat mdiocre peut tre lorigine de dformations des racines, dattaques par les agents pathognes et de retards de croissance. Les proprits des substrats qui influent sur la croissance des plantules sont les suivantes : Proprits physiques - capacit de rtention en eau - porosit - plasticit - densit apparente Proprits chimiques - fertilit - acidit (pH) - pouvoir tampon ou capacit dchange cationique (CEC) Proprits biologiques - prsence de souches de rhizobiums ou de mycorhizes
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La porosit et la capacit de rtention en eau sont lies. Un substrat doit pouvoir retenir assez deau, mais pas trop, pour assurer le bon dveloppement de la plantule et une bonne croissance des racines. Il doit aussi tre suffisamment poreux pour permettre un bonne circulation des gaz dans la rhizosphre. La hauteur du conteneur influe sur la capacit de rtention en eau du substrat. Les conteneurs peu profonds favorisent lengorgement par leau, parce quils ont une capacit de
rtention suprieure.
Encadr 1 : Dmonstrations en classe
La hauteur du conteneur influe sur la capacit de rtention deau. Ceci peut tre dmontr laide dune ponge ordinaire. On saturera une ponge que lon tiendra horizontalement au-dessus dun plateau. Lorsque lponge cesse de goutter, on la retournera sur le ct, et elle recommencera goutter. Lorsque lponge cesse nouveau de goutter, on la retournera sur le petit ct, et elle recommencera goutter. Ainsi donc, chaque fois que la colonne deau augmente dans lponge, la quantit deau que lponge peut retenir dcrot. En dautres termes, un substrat plac dans un conteneur plus profond retient proportionnellement moins deau que le mme substrat plac dans un conteneur peu profond. Ceci explique pourquoi les sols locaux, lorsquils sont mis en conteneur, sont souvent engorgs : leur paisseur est passe de quelques mtres quelques centimtres.
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Dans certains endroits, les sols locaux ne sont pas bons pour la production de plantules, surtout sils contiennent de grandes quantits dargile, ce qui facilite leur engorgement et les alourdit au point de les rendre trop difficiles transporter. Dautre part, les sols locaux sont souvent carencs en lments nutritifs. Pour allger le substrat, on peut y ajouter soit de la matire organique (fumier, compost, balles de riz, rsidus vgtaux) soit de la matire minrale (sable ou vermiculite). On choisira les matires utiliser, et en quelle quantit, en fonction des conditions locales, de la disponibilit de ces matires et des besoins de lespce que lon cultive. De simples essais suffiront dterminer ces paramtres.
La fertilisation
Si lon utilise un substrat riche en matires organiques, par exemple un sol forestier vierge ou un compost, la fertilisation nest gnralement pas ncessaire durant le sjour de la plantule en ppinire. La fertilisation ne devient ncessaire que si lon utilise un substrat sans sol ou pauvre, ou si lon cultive des espces ayant de plus grandes exigences nutritives ou qui doivent sjourner plus longtemps dans la ppinire. Il faut savoir reconnatre les symptmes les plus courants des carences nutritionnelles. Outre les macrolments dont la plante a besoin en grandes quantits (N, P, K, Ca, Mg, S), il existe des oligolments dont la plante a aussi besoin, en moindres quantits,
parce quils jouent un rle important dans son mtabolisme (Fe, Mn, B, Cu, Cl, Zn, Mo). Le tableau qui suit dcrit quelques-uns des symptmes les plus courants associs aux carences en macrolments. Les carences en oligolments sont plus rares, car les substrats les plus communs en contiennent gnralement en concentrations suffisantes.
En milieu rural, il est assez facile de se procurer de la matire organique pour la fertilisation des sols. Toutefois, la qualit et les lments nutritifs de cette matire organique dpendent largement de sa provenance, savoir lalimentation animale dans le cas du fumier et les plantes utilises dans le cas du compost. Les engrais organiques ne fournissent pas seulement des lments nutritifs. Ils conditionnent en outre le sol et amliorent laration et la capacit de rtention en eau du substrat.
Tableau 1 : Elments nutritifs des plantes et symptmes de carences nutritionnelles

Elment nutritif Symptmes de carences les plus communs Azote (N) Les vieilles feuilles jaunissent, la croissance de la plante est retarde, les feuilles sont petites. Attention : trop dazote entrane une croissance excessive des plantes, qui sont alors particulirement exposes aux maladies. La plante est petite et port rig, les tiges sont minces et la croissance est lente. Les feuilles sont dun gris-vert sale ou rougesviolaces. Fonction Composante essentielle des aminoacides et des protines.
Phosphore (P)
Fournit de lnergie (ATP). Facilite le transport des assimilats pendant la photosynthse. Joue un rle important dans le mrissement des fruits.
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Potassium (K)
Calcium (Ca)
La carence nest souvent visible que parce quelle se manifeste par un retard de croissance.
Stabilise les membranes et les parois cellulaires. Interagit avec les hormones vgtales. Le calcium nest pas du tout mobile et ne peut tre absorb que par des racines jeunes et non lignifies.
Magnsium(Mg)
Les vieilles feuilles sont chlorotiques partir du milieu ou entre les nervures. Elles sont rarement ncroses. Les feuilles, dune couleur jaune-orange, tombent prmaturment.
Composante de la chlorophylle. Une carence en magnsium entrave la photosynthse. Lie lATP aux enzymes. Joue un rle important dans la synthse des protines.
Soufre (S)
Les symptmes sont analogues ceux dune carence en azote, mais ils napparaissent tout dabord que sur les jeunes feuilles.
Composant des huiles thres, de la vitamine B, de la vitamine H et des aminoacides. Joue un rle important dans la synthse des protines.
Les vieilles feuilles prsentent des bords chloross puis ncross. Les jeunes feuilles restent petites.
Contribue entretenir la turgescence des cellules, la circulation de la sve dans le phlome, la croissance des cellules et le dveloppement de leurs parois (une carence en potassium expose la plante aux ravageurs du fait de laffaiblissement des parois cellulaires).
Les engrais minraux sont moins disponibles et plus coteux que les engrais organiques. Cependant, ils prsentent des avantages. Dune part, ils agissent rapidement et, dautre part, leur contenu en lments nutritifs est normalis. Ils sont donc recommands pour les travaux de recherche. Les engrais minraux les plus communment employs pour la production de plantules sont base dazote, de phosphore et de potassium. Les valeurs numriques indiques (par exemple, NPK
17-17-17) correspondent la quantit d lments nutritifs en %. Sil faut intervenir rapidement, en cas de carence en oligolments par exemple, on peut appliquer un engrais foliaire directement sur les feuilles des plantules. Les engrais foliaires sont spcialement conus pour permettre la cuticule dabsorber les lments nutritifs. Les engrais NPK de type courant ne peuvent pas tre employs comme engrais foliaires. Toutefois, ils peuvent tre dissous et ajouts leau dirrigation.
Hygine de la ppinire
Toute ppinire rencontre, tt ou tard, des problmes phytosanitaires. Plutt que de compter sur les pesticides pour rsoudre ces problmes, mieux vaut prendre des mesures prventives pour minimiser les dgts. Deux types de facteurs influent sur la sant des plantes : Les facteurs abiotiques - des tempratures trop basses ou trop leves - la scheresse ou lexcs deau
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- les dommages causs par les substances chimiques - les dommages causs par les phnomnes physiques (vents forts, pluies, etc.)
Les facteurs biotiques - tous les organismes biologiques qui entravent la croissance de la plante (bactries, virus, virodes, phytoplasmes, champignons, insectes, acariens, nmatodes, mauvaises herbes, phanrogames parasites, oiseaux et mammifres)
Les dommages rsultant de facteurs abiotiques peuvent aisment tre rduits par une bonne manipulation des plantules, une conception rationnelle de la ppinire et de bonnes infrastructures. Un ombrage et un arrosage appropris, ainsi quune protection adquate contre la scheresse et le gel, sont importants et font partie dune bonne gestion de la ppinire. Les facteurs biotiques peuvent tre matriss par la lutte phytosanitaire. De bonnes conditions dhygine permettent de faire chec aux ravageurs et aux maladies : Dsherber les alentours de la ppinire. En effet, bon nombre despces vgtales peuvent devenir htes de ravageurs susceptibles dattaquer la ppinire. Par mesure de prcaution, on choisira avec soin les plantes ornementales, les plantes dombrage, les haies et les brisevent dans la ppinire et sur son pourtour, car elles aussi peuvent devenir htes de ravageurs tels que les nmatodes.
Striliser le substrat la vapeur, si ncessaire, parce quil peut abriter des agents pathognes. On pourra fabriquer un strilisateur vapeur sans grande difficult partir dun vieux baril dhuile bien nettoy.
Striliser les conteneurs et les graines superficiellement en les plongeant pendant 12 24 heures dans une solution deau de javel 10 %. Ce nest que si ces mesures de prvention savrent insuffisantes quil convient denvisager lusage de pesticides. On ne comptera jamais sur un seul produit chimique car son usage pourrait, la longue, entraner une rsistance. On alternera entre deux ou trois produits. Au lieu de pesticides synthtiques, on pourra soit ter les parties malades de la plante et enlever les ravageurs, soit utiliser des pesticides de fabrication locale (tabac, piments rouges, margousier ou extraits de pyrthre). Si lon nest pas sr de la nature dune maladie ou dun ravageur, il convient de prlever des chantillons et de prendre des photos en vue de consulter les experts de la localit ou les services de vulgarisation agricole et horticole. Les plantes malades doivent tre brles en mme temps que leur substrat et ne doivent jamais tre incorpores au compost.
Le milieu environnant
La croissance des plantules est affecte par les conditions ambiantes tant au-dessus du sol (humidit, dioxyde de carbone, temprature et lumire) quau-dessous du sol (eau et nutriments minraux). La croissance de la plante peut aussi tre influence par des organismes bnfiques ou prjudiciables. Les jeunes plantules ont besoin dun environnement protg. Un ombrage suffisant, sans tre excessif, est ncessaire pour assurer le dveloppement dune plante saine. Si possible, on installera un filet pour que lombre soit uniforme. On pourra aussi utiliser des matriaux locaux, comme par exemple du chaume provenant dherbes ou de feuilles de bananier. Toutefois, le chaume peut abriter des ravageurs et des maladies ; il faudra donc le remplacer frquemment. A mesure que les plantules grandissent, il leur faut davantage de lumire. On installera donc le filet de manire quon puisse lenlever facilement et progressivement, plutt que de dplacer les plantules vers la lumire. Dans les pays tropicaux, il importe de placer les lits et les filets dans le sens Nord-Sud pour que les plantules puissent tre ensoleilles le matin et le soir tout en tant protges du soleil au milieu de la journe. Larrosage doit tre adapt aux besoins de la plante. Leau fait souvent dfaut, do la tendance trop arroser lorsque de leau est disponible. Or trop deau peut tre tout aussi nuisible pour la plante que pas assez, provoquant lengorgement et suffocant les racines. Vers la fin de leur sjour en ppinire, les plantules doivent tre endurcies ; on rduira donc larrosage. A ce stade, un lger fltrissement nest pas prjudiciable la plante mais est au contraire ncessaire son futur dveloppement.
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Les boutures et les plantes greffes ont besoin que lair soit trs humide pour empcher quelles ne se desschent pendant que les racines se forment et que la greffe prend. On peut construire, sans trop de complications, des abris en matire plastique ou des serres. Ces structures doivent toujours tre bien ombrages et ventiles pour viter que les plantes ne soient endommages par la chaleur.
Gestion du temps et planification

Il faut planifier le travail dans la ppinire pour viter de mauvaises surprises. Les semences et les fournitures doivent tre porte de la main en temps voulu pour que les plantules puissent tre apprtes en respectant les dlais fixs. Il faut aussi prvoir du temps supplmentaire pour le cas o il faudrait rpter le processus de germination, en cas dchec. Le temps allou lendurcissement des plantules ne doit pas tre trop court pour viter les pertes superflues sur le terrain. Les plantules ne doivent jamais rester dans la ppinire durant plus dune saison. En effet, les plantules trop dveloppes perdent de leur vigueur et ne pousseront pas bien sur le terrain. Si lon pressent quil ne sera pas possible de planter la date prvue en raison de mauvaises conditions mtorologiques ou pour dautres raisons, on envisagera de ressemer plutt que de conserver les plantules trop dveloppes pour la saison suivante. La croissance de la plantule ne peut tre manipule que dans une trs faible mesure, en diminuant larrosage pour la ralentir ou en ajoutant de lengrais pour lacclrer. Une planification lucide est donc essentielle pour le succs de la
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campagne en ppinire. La tenue dun calendrier des travaux et dun inventaire est un bon outil de gestion.
Encadr 2 : Exemple de calendrier des travaux dans la ppinire A Muguga (Kenya), la meilleure saison pour planter se situe entre le 1er avril et le 15 mai. Le chercheur veut installer des essais de Leucaena en utilisant des plantules denviron 20 cm, vers le 15 avril. Le grant de la ppinire a calcul comme suit les besoins du chercheur (Jaenicke, 1999) : Leucaena leucocephala Nombre de jours de la germination au repiquage Nombre de jours de lensemencement la germination Marge de scurit en cas de mauvaise 15 germination ou de fonte des semis Nombre total de jours ncessaires 135 145 123 15 15 8 8 8 112 Leucaena diversifolia 122 Leucaena trichandra 100
Date de lensemencement
1er dcembre
21 novembre
13 dcembre
Encadr 3 : Exemple de calcul
Pour 10 000 plantules en conteneurs de 10 cm x 15 cm, il faut :
slective des plantules pour variation (C), et des pertes (L). On suppose que G = 75 %, C = 10 % et L = 15 %. Pour 10 000 plantules (S), il faut ajouter : pour chec de germination (GF) : Sx100/G 10 000x100/75 = 13 333
pour limination slective lors du repiquage (CT) : GFx(100+C)/100 13 333x(100+10)/100 = 14 666 pour les remplacements lors de la plantation au champ (RO) : CTx(100+L)/100 14 666x(100+15)/100 = 16 866 Le nombre total de semences ncessaire pour chaque espce est de 16 866. Il faut donc prvoir 0,85 kg dune espce ayant 20 000 semences/kg (par ex ., Leucaena leucocephala), 0,65 kg dune espce ayant 26 000 semences/kg (par ex., L. diversifolia) et 0,5 kg dune espce ayant 34 000 semences/kg (par ex., L. trichandra).
Espace : Chaque conteneur, lorsquil est plein, occupe environ 7 cm x 7 cm, soit approximativement 50 cm. Or 10 000 x 50 cm = 500 000 cm ou 50 m. Si le lit a une largeur de 1,5 m, il sensuit quil doit avoir une longueur de 33 m. A supposer que lon spare les plantules en lots pour pouvoir les manipuler plus facilement, alors il faut que la longueur du lit soit denviron 35 m.
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Substrat : Chaque conteneur peut contenir environ 0,4 litre de substrat. 0,4 l x 10 000 = 4 000 l (soit 200 seaux dune capacit de 20 litres chacun ou encore 80 brouettes). Une camionnette peut transporter environ une tonne de substrat. Il faudra donc prvoir quatre chargements.
Eau : La quantit deau ncessaire dpend de la taille des plantules. En gros, pour 1 000 plantules en conteneurs de 0,4 0,5 litre, il faut prvoir entre 75 et 95 litres deau par semaine (Landis et al., 1994). Donc, pour 10 000 plantules il faudra prvoir entre 750 et 950 litres deau par semaine. On notera toutefois que ces calculs sappliquent des cultures en serre. Pour des cultures lair libre en rgion tropicale il faudra prvoir environ 20 % de plus. Dans ce cas, il faudra donc entre 900 et 1 050 litres deau, ce qui reprsente entre 60 et 70 arrosoirs de 15 litres par semaine.
Semences : Cette variable dpend du pourcentage de germination (G), de llimination
Etiquetage et archivage
Un bon tiquetage et la tenue darchives sont ncessaires pour pouvoir suivre les diffrentes espces cultives et le nombre de lots de plantules produits. Ceci est particulirement important lorsque plusieurs provenances ou cultivars de la mme espce sont prsents dans la ppinire. Le
minimum de renseignements consigner est le suivant :
Nom et provenance de lespce, et source des semences (collection personnelle ou nom du fournisseur) Date densemencement Nombre ou quantit (en g) de semences Milieu et conditions de germination (lit de semences, enceinte chauffe, sable, etc.) Pourcentage de germination (ou nombre de plantules produites) Date du dpiquage (si celui-ci est invitable) Type et taille des conteneurs Nature du substrat Tout traitement appliqu durant le sjour en ppinire engrais (quand, quel type, quelle quantit), ombrage (densit), lutte contre les ravageurs et les maladies (quand, contre quel ravageur ou contre quelle maladie, mthode employe, nom du produit, concentration) Date et nombre de plantules arraches et motif (maladie, dgts, dfaut, etc.)
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Date et nombre de plantules prleves ( des fins exprimentales ou pour tre vendues, plantes ou donnes)
La tenue dun registre de ppinire peut suffire. Toutefois, on notera que divers systmes informatiss ont t mis au point et quils sont plus commodes si lon produit un grand nombre de lots. Un numro de srie doit tre assign chaque lot de plantules lors de lensemencement et doit rester en vigueur jusqu ce que la dernire plantule du lot ait quitt la ppinire (Wightman, 1999).
Essais en ppinire
Dans tout programme de domestication de ligneux, une partie des activits vise mettre au point des protocoles dexprimentation pour la multiplication des nouvelles espces. Cest pourquoi il importe de mener systmatiquement un petit nombre dexpriences courantes pour comprendre les principaux besoins de lespce considre. Il faudra surveiller en particulier :
les besoins en matire de germination (traitements pralables) les besoins de temps (temps prvoir jusqu la germination, puis jusqu la plantation) la ncessit ventuelle dune inoculation de mycorhizes ou de rhizobiums les spcifications du substrat et les besoins en engrais
le besoin dombre le recours ventuel des dispositifs antivrilles lincidence des ravageurs et des maladies
De simples essais factoriels ou en split-plot peuvent tre conus pour tester diffrentes hypothses. Il ne faudra jamais oublier de noter les conditions dont ont bnfici, dans la ppinire, les plantules destines faire lobjet dessais sur le terrain.
Dautres suggestions sont prsentes dans lUnit 7 Essais de multiplication.
Solution des problmes nvralgiques

On vient de voir quelle tait la conception optimale dune ppinire et sa gestion idale pour assurer la production de plantules de qualit. Il est cependant invitable que surgissent des problmes. Le tableau 2 la page suivante contient une liste de problmes courants susceptibles de pervertir le dveloppement de la plante et propose des moyens dy remdier. Certains des remdes proposs sembleront peut-tre hors de porte des petits exploitants agricoles ; nanmoins, aucun effort ne doit tre pargn pour donner aux jeunes plantules les meilleures chances de survie possibles.
Bibliographie
Jaenicke H. 1999. Good tree nursery practices. Research nurseries. Nairobi: ICRAF, 83 pp. Landis TD, Tinus RW, McDonald SE and Barnett JP. 1993. Nursery planning, Development, and Management, Vol. 1, The Container Tree Nursery Manual. Agric. Handbook. 674. Washington DC: Department of Agriculture, Forest Service. Wightman KE. 1999. Good tree nursery practices practical guidelines for cummunity nurseries. Nairobi: ICRAF, 85 pp.
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Tableau 2 : Causes dun mauvais dveloppement de la plante et solutions possibles
Causes dun mauvais dveloppement de la plante Variabilit gntique du matriel vgtal
Remdes proposs
- prlever le matriel gntique sur des arbres slectionns prsentant une expression trs marque des caractres recherchs - sur le matriel clon, aucune variation gntique nest cense apparatre, sauf en cas de mutation
Mauvaise qualit du matriel gntique
- se procurer les semences auprs dun fournisseur fiable - assurer un stockage appropri - sur le matriel clon, les diffrences dun clone lautre peuvent tre suprieures 100 % en matire de potentiel denracinement et vigueur
Dformations des racines (croissance en spirale et racines tordues) rsultant du dpiquage ou du conteneur utilis
- faire un trou assez grand pour dpiquer la plantule sans difficult - semer directement pour ne pas avoir dpiquer la plante - utiliser des dispositifs antivrille
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Mauvais clairage
- protger les jeunes plantes de la lumire solaire directe en prvoyant une ombre lgre - ramener progressivement lombre de 40-50 % 30 % avant de mettre les plantes lair libre pour les endurcir - planter faible densit pour que la lumire puisse pntrer dans les lits de semences
Manque deau
- arroser tt le matin ou tard le soir pour ne pas brler les plantes - arroser le substrat dans les pots et ne pas arroser les feuilles - utiliser un jet deau ou veiller ce que la pression soit suffisamment basse pour ne pas rejeter la terre hors du pot - veiller au bon drainage des conteneurs
Plantes surdveloppes
- classer les plantes de la ppinire en trois catgories : 1re qualit, 2me qualit et rebuts - ne planter et ne distribuer que les plantes de 1re ou 2me qualit et veiller ce que les rebuts soient dment limins
La lutte phytosanitaire
Johan DesaegerWorld Agroforestry Centre
Introduction
Toute leur vie durant, les arbres peuvent souffrir dun grand nombre de maladies et dattaques de ravageurs. Dans les tous premiers stades de la croissance, il est vital de les tenir lcart. Une plantule maladive natteindra que rarement le stade de croissance et le potentiel de ses homologues en bonne sant. La prsence de ravageurs et de maladies dans la ppinire peut aussi conduire liminer en masse les plantules affectes, ce qui constitue une perte de temps, dnergie et dargent. La gestion des ravageurs et des maladies doit donc tre considre, tant du point de vue exprimental que du point de vue conomique, comme faisant partie intgrante dune bonne gestion de la ppinire.
Lidentification des troubles de la plante est un domaine trs spcialis exigeant une grande exprience. Diffrents agents pathognes peuvent tre lorigine de symptmes analogues. Il est donc parfois ncessaire de prlever des chantillons de plantes et de sol et, si possible, de lagent responsable et de les envoyer des spcialistes dans le domaine de lentomologie, la nmatologie ou la phytopathologie. Souvent, le problme est facile identifier, auquel cas lintervention dun
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spcialiste nest pas ncessaire. Le tableau qui suit aidera les grants de ppinires identifier quelques-uns des problmes phytosanitaires courants au niveau de la ppinire et les attnuer laide des remdes proposs.
Problmes phytosanitaires
Les champignons
Tableau 3 : Problmes phytosanitaires causs par les champignons Type de problme Fonte des semis (Pythium spp., Rhizoctonia solani, Fusarium spp. et autres) Symptmes Symptmes gnraux : chlorose, fltrissement, constriction de la tige et pourriture des racines. Pr-leve : les semences ou les plantules sont tues avant la leve. Le problme est difficile diagnostiquer ce stade. Un taux de germination faible peut tre une indication. Lutte Culturale : on crera des conditions qui ne sont pas favorables au dveloppement de la maladie (bon drainage, mlanges terreux appropris, moins de matire organique, densit rduite, ensemencement peu profond).
Type de problme
Symptmes Post-leve : peu de temps aprs la germination, les jeunes plantules sont infectes la base de la tige ou juste audessous, ce qui provoque la constriction, laffaissement et enfin la mort de la
Lutte Chimique : on dsinfectera le sol de la ppinire avec des produits chimiques homologus cet effet. On laissera le sol couvert pendant 24 heures pour viter la volatilisation de gaz toxiques et on laissera les sols sarer pendant 48 heures avant de semer.
plantule. Dans le lit de la ppinire, les plantules malades seffondrent si lon passe la main dessus, tandis que les plantules saines se redressent.
Fonte des semis tardive : ce phnomne peut se produire des semaines, voire des mois, aprs la leve. La chlorose des feuilles et le fltrissement du bourgeon terminal rsultent de la mort des racines. Le diagnostique est difficile tablir dans la mesure o dautres agents pathognes ou dautres conditions environnementales peuvent induire des symptmes analogues.
Thermique : on chauffera le sol pendant deux heures 60C avant de semer. Biologique : la lutte biologique nest gure pratique. Certains organismes prsents dans le sol (par exemple, les nmatodes) peuvent viter la fonte des semis.
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Pourriture des racines de la plantule ou de la bouture dans la ppinire. Odium (Erisyphe spp. et autres) Maladie cryptogamique transporte par lair qui recouvre les feuilles dune fine poudre blanche.
Tremper les boutures dans une solution fongicide. Enlever et brler les plantules affectes ainsi que les feuilles des plantes plus ges pour empcher que la maladie ne se propage.
Commune chez les arbres fruitiers (par exemple, Prunus africana) Cloques foliaires (Taphrina spp.) Maladie cryptogamique transporte par lair qui se traduit par des feuilles boucles et lapparition de cloques leur surface. Fumagine Champignon qui crot sur les excrments des aphides (miellat) dposant une moisissure noire sur les feuilles qui prennent un aspect boucl. Ce champignon est associ aux aphides ou dautres insectes suceurs. Les fourmis sucent ces insectes pour le miellat quils produisent.
Appliquer des fongicides.
Procder comme pour lodium.
Lutter contre les aphides et autres insectes suceurs de feuilles.
Nmatodes
Les nmatodes sont des vers microscopiques. Ils sont parmi les organismes les plus abondants dans le sol. Ils sont pour la plupart inoffensifs mais certains sont des phytoparasites et peuvent occasionner de lourdes pertes de rendement et une baisse de la qualit.
Les nmatodes sont bien connus en tant que flau des cultures. Leurs effets sur les arbres sont moins bien connus, lexception de quelques essences forestires ou arbres fruitiers ayant une valeur commerciale. Le sol est un milieu privilgi pour la propagation des nmatodes ; si le substrat utilis pour la multiplication vgtative (bouturage, marcottage, etc.) est infest, les nmatodes seront transfrs dans les champs lors de la plantation. Certaines essences ou provenances sont rsistantes certains types de nmatodes. On pourra donc sen servir comme souche pour celles qui y sont sensibles.
Les nmatodes galles (Meloidogyne spp.) forment le groupe de nmatodes le plus important. Leur aire de rpartition est trs vaste, spcialement dans les rgions tropicales. La gamme de leurs htes est trs large. Dans les rgions tropicales et subtropicales les nmatodes endoparasites des racines sont les plus rpandus et comptent parmi les principaux agents pathognes qui affectent les cultures.
Les symptmes dune infestation par les nmatodes sont souvent atypiques (chlorose, fltrissement, croissance rduite, pourriture des racines) et sont souvent confondus avec les symptmes provoqus par dautres agents pathognes ou non pathognes (champignons, bactries, virus, scheresse, niveau de fertilit du sol). Seuls les dgts causs par le nmatode galles (Meloidogyne sp.) peuvent tre facilement identifis. Les symptmes se manifestent par lapparition dintumescences ou de galles sur les racines des plantes, qui ont une apparence facilement reconnaissable.
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Racines de Sesbania spp. dformes par le nmatode galles Meloidogyne spp. prsent dans le sol
Les nmatodes peuvent tre combattus par diffrentes mthodes (chimiques, culturales, physiques, biologiques).
La lutte chimique
Diffrents produits chimiques appels nmaticides existent sur le march. Trois prsentations sont disponibles: gazeuse (fumigation), liquide ou solide (granuls).
La lutte physique et culturale

La strilisation du sol de la ppinire par la chaleur, sous forme de vapeur ou dnergie solaire, est une mthode efficace pour lutter contre la plupart des nmatodes parasites et pour lutter, par la mme occasion, contre une foule dautres micro-organismes indsirables prsents dans le sol. Le sol humide de la ppinire est plac dans un ft et chauff directement la flamme. Un chauffage 60 C pendant deux heures environ suffit.
La pratique de lassolement, ou rotation des cultures, permet de matriser laccroissement des populations de nmatodes. On alternera avec les espces sensibles des espces moins sensibles voire des espces ayant des proprits nmaticides bien connues (telles que le souci ou le neem, aussi appel margousier, Azadirachta indica). On trouvera dans le tableau 4 ci-aprs une liste
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dessences agroforestires2 bien connues pour leur comportement lgard des nmatodes galles. Certaines de ces espces sensibles sont des htes favorables, tandis que dautres, qui sont seulement tolrantes voire rsistantes, sont de mauvais htes.
Tableau 4 : Sensibilit des plantes-htes aux nmatodes galles
Sensible Acacia spp. Albizia spp. Carica papaya Cassia angustifolia Desmodium distortum Dodonaea viscosa Euphorbia balsamifera Mimosa scabrella Prosopis juliflora Samanea saman Sesbania spp. Tectona grandis Tephrosia spp.
Tolrant ou rsistant Anacardium occidentale Azadirachta indica Calliandra calothyrsus Senna siamea Crotalaria spp. Eucalyptus camaldulensis Grevillea robusta Leucaena leucocephala
On notera que, au sein mme dune espce, diffrentes provenances peuvent prsenter diffrentes sensibilits.
Plusieurs amendements organiques permettent de lutter efficacement contre les populations de nmatodes : mlasses de canne, caf, coques darachide, cendre de bois, fumier et poudre dos. Les tourteaux dolagineux rsultant de la transformation dun certain nombre de produits (moutarde, neem, arachides, ssame, ricin) ont aussi un effet nmaticide.
La lutte biologique
Un grand nombre de prdateurs qui vivent dans le sol (acariens, protozoaires, bactries, champignons et autres nmatodes) peuvent attaquer les nmatodes phytoparasites. Les amendements organiques peuvent favoriser ces prdateurs ; toutefois, on ne saurait, pour le moment, conseiller le recours ces prdateurs comme une mthode efficace de lutte biologique.
Les virus
Les virus sont des agents pathognes composs dun noyau de matriel gntique envelopp dans une substance protique. Ils ont besoin de cellules vivantes pour se reproduire et peuvent tre transmis par les insectes suceurs ou broyeurs (aphides, aleurodes, cicadelles, etc.), les nmatodes, les mauvaises herbes et certaines mthodes de multiplication (bouturage, greffage). Certains virus des cultures sattaquent aussi aux arbres.
Les plantes malades prsentent divers symptmes : mosaque ou marbrure sur les feuilles, chlorose, rabougrissement, troubles de la croissance, lsions ncrotiques.
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Les virus sont insensibles aux produits chimiques et pesticides. Les plantes infectes doivent donc tre dtruites pour empcher la maladie de se propager. Il faut veiller, lorsque lon multiplie des plantes par voie vgtative, nutiliser que du matriel certifi sans virus pour les souches, boutures ou greffes. Il faut en outre vrifier priodiquement que les souches-mres sont dpourvues dinfections virales en les testant par rapport des plantes indicatrices connues. Pour viter certaines maladies virales, on dtruira leurs vecteurs (aphides, nmatodes) au moyen de pesticides et lon immergera la plante rapidement dans de leau chaude (environ 50C). La micropropagation est une mthode idale pour multiplier du matriel vgtal sain.
Insectes et aphides
Divers insectes et aphides attaquent les ligneux en ppinire et au champ. Les dgts quils causent rsultent de leurs habitudes alimentaires, qui peuvent consister mordre et broyer (criquets, sauterelles, locustes, coloptres, chenilles, mouches scie, etc.), percer et sucer (aphides, psylles, cicadelles, acariens, punaises, etc.) ou gratter et sucer (thrips, larves, mouches des fruits, etc.).
Le tableau 5 dcrit les principaux types de dgts causs par diffrents types dinsectes ou dacariens.
Tableau 5 : Dgts causs par les insectes et les acariens
Type dinsecte ou dacarien Insectes qui se nourrissent de racines
Dgts Les dgts dans la ppinire peuvent tre considrables. Les vers blancs (Phyllophaga spp.) prdominent. Ils mangent les racines secondaires et corcent la racine principale. Les plantules jaunissent, perdent leurs feuilles et meurent. Les espces prdominantes sont Agrotis spp. et Spodoptera spp. Elles coupent les tiges des jeunes plantules et se nourrissent des feuilles et des racines. Les feuilles des plantules peuvent tre endommages par un grand nombre dinsectes et dacariens. Les grands insectes tels que les sauterelles, les criquets et les fourmis coupe-feuilles coupent de larges morceaux de feuille. Les chenilles et autres larves se nourrissent du limbe de la feuille et laissent les nervures intactes. Les larves noires du coloptre du Sesbania (Mesoplatys ochroptera) sont de grands dfoliateurs qui peuvent empcher ltablissement des plantules. Les chenilles enrouleuses et tisseuses enroulent une partie de la feuille ou joignent plusieurs feuilles par une toile, pour se protger tandis quelles salimentent. Des plantules de Sesbania sesban dans lOuest du Kenya sont parfois infestes par des pyrales (Pyralidae) ravageuses du ssame (Sesamum indicum). Les thrips et les acariens grattent les feuilles, qui se dforment, fltrissent et tombent.
Vers gris et criquets
Dfoliateurs
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Mineurs des feuilles
Les mineurs des feuilles sont des insectes broyeurs qui pntrent le tissu intrieur de la feuille et sen nourrissent. Les dgts apparaissent sous la forme de cloques transparentes ou de tunnels. Ces insectes appartiennent surtout la famille des diptres (Agromyzidae), mais ils comptent aussi des coloptres, des lpidoptres et des gupes.
Insectes ccidognes
Insectes qui produisent des tumeurs chez la plante, surtout sur les feuilles, qui se tordent et finissent par tomber. Ces insectes appartiennent une famille dacariens (Eriophyidae) et un petit nombre de familles dinsectes (ccidomyies, gupes, mouches scie et psylles).
Suceurs
Les suceurs comprennent diverses espces de punaises, cigales, cicadelles, aphides, psylles et cochenilles. Ils sattaquent au feuillage et aux jeunes tiges. Outre les dgts quils causent directement, notamment en entranant la chute des feuilles, ils peuvent aussi transmettre des virus et provoquer linfection des feuilles par la fumagine.
On peut, bien entendu, enlever les grands insectes la main et dtruire les plantes malades. Toutefois, la lutte chimique laide de pesticides reste la principale mthode de lutte contre les insectes et les acariens. En cas de doute, on contactera un spcialiste comptent pour appliquer le traitement qui convient.
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Larve et dgts causs par le coloptre Mesoplatys de jeunes feuilles de Sesbania spp.

Autres causes de dgts infligs aux plantules

Les limaces peuvent causer des dgts semblables ceux qui sont infligs par les insectes broyeurs et peuvent dtruire des plates-bandes entires de la ppinire en un rien de temps.
Les jeunes plantules peuvent aussi tre la proie danimaux domestiques errants, de lapins, de lzards, voire dantilopes. Entourer les parcelles dune clture est une bonne ide.
Mesures phytosanitaires
Mesures prventives
Lidal serait de prvenir les problmes phytosanitaires avant mme quils ne se manifestent. Trop souvent, cependant, peu de ressources sont alloues la prvention, et ce nest qu lapparition des premiers dgts que lon se dcide engager des dpenses et mettre en uvre des mesures de lutte. La prvention exige, dune part, des connaissances sur la biologie des ravageurs et des maladies et, dautre part, des valuations priodiques.
Une bonne gestion de la ppinire doit tenir compte de tous les lments ci-aprs. Le sol utilis pour les lits de semences et pour la mise en pots ne doit pas seulement contenir les lments nutritifs ncessaires et avoir une bonne structure. Il doit aussi tre totalement exempt de ravageurs et de maladies telluriques. Le sol contient presque toujours des agents pathognes (nmatodes, champignons, bactries, virus). La strilisation du sol avant
lensemencement est le meilleur moyen de prvenir le dclenchement de maladies vhicules par le sol. La strilisation par la chaleur (par exemple, la strilisation en ft la vapeur) est gnralement plus efficace que la strilisation chimique, bien que cette dernire nexige pas un matriel coteux, surtout si lon utilise des matires ltat solide (granuls). Une strilisation plus pousse est gnralement requise pour la lutte contre les cryptogames, plus que pour la lutte contre les nmatodes. Un simple chauffage du sol en ft pendant plusieurs heures permet gnralement de venir bout des nmatodes phytoparasites. Les maladies cryptogamiques sont en grande partie causes par les conditions du milieu et sont donc difficilement prvisibles. Les nmatodes sont beaucoup plus influencs par la sensibilit de lhte. Si lon souponne que le sol dune ppinire est infest de nmatodes, on installera des plantes-htes bien connues de ces nmatodes pour valuer la possibilit dun ventuel problme et dcider, en connaissance de cause, deffectuer un traitement prventif.
Pour viter une forte concentration de parasites, en particulier de nmatodes, on pourra
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pratiquer la rotation des lits de semences, tout comme on pratique la rotation des cultures. Cette pratique bon march pourra savrer utile pour remplacer ou complter la strilisation du sol. Un plan de rotation devrait tre tabli pour tous les lits de semences, compte tenu de la sensibilit de la plante-hte aux nmatodes : sensible non-hte ou rsistant mauvais hte mauvais hte
sensible. Il faut pour cela connatre la sensibilit ou la rsistance
des ligneux aux nmatodes, ce qui nest pas toujours le cas.
Pour protger les lits de semences, ou plates-bandes, on peut mlanger des plantes et plantules ayant des proprits pesticides. Par exemple, on pourra mlanger des soucis (Tagetes spp.) et du ssame (Sesamum indicum) avec des plantes sensibles aux nmatodes galles pour rduire linfestation de ces dernires, probablement grce des exsudats racinaires nmaticides. Les soucis repoussent en outre de nombreux insectes, tels que les fourmis et les termites.
Pour protger le matriel vgtal des maladies transmises par le sol, on peut aussi faire tremper les semences, et plonger les boutures et les plantules dont les racines sont nu, dans une solution fongicide ou nmaticide, comme par exemple de leau de javel 10 %. Le traitement des semences exige en gnral un matriel spcial, bien que dans certains cas un simple trempage du matriel vgtal suffise.
Pour loigner les insectes et les mammifres du matriel de plantation, on peut utiliser des appts et des piges, empoisonns au besoin. Les vers gris sont attirs par la mlasse, les aleurodes par les surfaces jaunes. Pour piger les chenilles lgionnaires et autres chenilles processionnaires, il suffit de creuser une tranche denviron 60 cm de large et 45 cm de profondeur le long des plates-bandes. Pour tuer les chenilles qui savancent, il suffit de rouler dessus une bille de bois ou de remplir la tranche de paille et dy mettre le feu.
Il est bon denlever et de brler la matire vgtale infeste, notamment les racines infestes de nmatodes ainsi que les plantes et les feuilles malades, pour dtruire autant que possible leur potentiel dinoculation et rduire les chances que le problme ne se reprsente. Mme les plantes qui taient infestes mais qui ont rcupr depuis devraient tre enleves. Les populations dagents pathognes, bien que dcimes, seront toujours prsentes et attendront le moment propice pour revenir en force. Dune manire gnrale, il est recommand denlever toute la matire vgtale et toutes les feuilles qui jonchent la surface du sol ainsi que les feuilles les plus vieilles situes la base de la tige des plantes et ceci exige une vigilance de tous les instants dans la ppinire.
Bien grer les plates-bandes est lun des aspects les plus importants de la lutte phytosanitaire par les faons culturales. Puisque les plantules sont plus particulirement exposes au agents pathognes pendant et aprs la leve, toute mesure qui tend rduire cette priode dangereuse ou qui influe sur lenvironnement au dtriment des agents pathognes est bnfique pour la plante. Cest ainsi quon peut ajuster la profondeur de semis, en fonction de la nature du sol et de lhumidit, de manire raccourcir la priode de leve et rduire ainsi les risques de fonte des semis. La frquence et le dbit de larrosage, le drainage et la ventilation peuvent tre ajusts de faon rduire les risques de ravageurs et de maladies. Un bon emplacement du site, une densit de peuplement optimale et un dsherbage rgulier contribuent aussi crer des conditions idales pour la croissance de la plante, rduisant ainsi les risques de voir apparatre quantit de ravageurs et de maladies.
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Mesures curatives
Dans la ppinire, la lutte contre les ravageurs et les maladies est toujours largement tributaire des pesticides, que lon peut se procurer facilement et qui ont un effet immdiat.
La lutte biologique est donc de peu dutilit dans la pratique, malgr limportance des recherches dans ce domaine, et na gure t commercialise jusqu prsent. Cela dit, il faut se rappeler que bien des insectes ne sont pas des ravageurs mais sont en fait bnfiques et quils peuvent contribuer la lutte contre les insectes rellement nuisibles (par exemple, les coccinelles
sont des prdateurs des aphides). Lorsque lon choisit un produit chimique pour lutter contre un ravageur bien particulier, il faut accorder la prfrence aux produits les plus cibls. Il existe, par exemple, des pesticides qui sattaquent aux aphides et qui sont nanmoins sans danger pour les insectes bnfiques tels que les coccinelles.
Bon nombre des effets ngatifs des pesticides, notamment leur contribution la pollution de lenvironnement, sont moins perceptibles dans les ppinires o lon nopre qu petite chelle. Nanmoins, pour pouvoir se servir correctement dun pesticide, il faut en connatre la composition, la dose recommande, le mode demploi et les prcautions dusage. Tous ces renseignements doivent figurer sur ltiquette appose sur le conteneur. Quoi quil en soit, il faut toujours porter des vtements de protection : bottes de caoutchouc, gants et masque anti-poussire.
Les pesticides sont appliqus soit dans le sol soit sur les parties ariennes de la plante et ils agissent soit en entrant directement en contact avec le parasite soit en tant absorb par la plante pour la protger de lintrieur (systmiques).
Les pesticides destins au traitement du sol se prsentent sous forme de granuls, liquides ou fumigants. Les fumigants ne peuvent tre appliqus quavec du matriel spcialis qui ne se justifie que pour les ppinires commerciales grande chelle. Les liquides peuvent tre dverss
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dans le systme dirrigation. Les granuls sont dun emploi plus facile, car ils peuvent tre incorpors directement au sol. Tous les pesticides dsinfectent et strilisent le sol. Dans le milieu clos de la
ppinire, o le sol est contenu dans des plates-bandes ou des pots, les pesticides offrent presque toujours une protection maximale. Certains de ces pesticides agissent la fois sur les nmatodes et sur les insectes. Certains fumigants usages multiples sont des biocides demploi gnral qui contrlent aussi bien les maladies vhicules par le sol et les mauvaises herbes que les nmatodes et les insectes telluriques. Il faut toujours consulter un spcialiste de la lutte chimique contre les ravageurs, car lusage des pesticides est soumis une rglementation et des recommandations trs strictes.
Sil est assez facile de prvenir dans une large mesure les maladies vhicules par le sol, grce la strilisation, il est en revanche plus difficile de contrler les ravageurs et les maladies vhiculs par lair, car ils surgissent souvent inopinment, notamment la faveur dune modification des conditions mtorologiques. On procde gnralement par pulvrisation, bien que lon puisse aussi utiliser des matires pulvrulentes si lon na pas assez deau pour pulvriser. On sabstiendra dappliquer des pesticides directement sur les feuilles si lon prvoit de la pluie. Il existe toute une gamme de pesticides, depuis les plus gnraux jusquaux plus spcifiques. Les fongicides, moins nombreux sur le march, sont gnralement large spectre daction. Ils sont dapplication plus
polyvalente que les pesticides et peuvent sutiliser sur les sols, les feuilles et les semences. Ils sont pour la plupart sans effet sur les autres organismes.
Beaucoup de plantes renferment des substances chimiques ayant des proprits pesticides (insecticides et/ou nmaticides), et ont reu le nom de pesticides naturels. Des solutions aqueuses de feuilles, graines ou fruits peuvent remplacer ventuellement les pesticides chimiques appliqus par pulvrisation. Les pesticides naturels les plus connus sont les fleurs de pyrthre, les graines de neem, les soucis, le piment rouge (contre les aphides), les racines de derris ou rotnone, lal et le tabac.
Bibliographie
Desaeger J. 2000. Implications of plant-parasitic nematodes for improved fallows in Africa. PhD thesis Nr 463, Louvain (Belgique): K.U. Leuven.
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Gestion de la ppinire - Travaux pratiques

Objectifs
Les travaux pratiques ont pour but de permettre aux participants dobserver et de commenter
les problmes poss par la gestion des ppinires en visitant une ppinire. Cette visite donnera aussi aux participants loccasion de mettre en pratique quelques-unes des activits courantes dans la ppinire (dpiquage, compostage, arrosage, etc.).
Matriel ncessaire
Les conditions, les outils et le matriel ci-aprs sont ncessaires pour ces travaux pratiques : Une ppinire dessences agroforestires bien quipe et bien tenue Des plantes mises en pot dans diffrents substrats (sol forestier, sable, compost, sciure de bois, fumier, vermiculite, tourbe de noix de coco) Des plantes prsentant des dformations des racines, cultives dans des conteneurs en ppinire, que les stagiaires pourront ouvrir pour inspecter le dveloppement du systme racinaire Des plantes leves dans des dispositifs antivrilles pour que les stagiaires puissent constater les bienfaits de cette technique Un nombre suffisant de plantules dessences agroforestires prtes tre dpiques Des sacs de polythne et des dispositifs antivrilles remplis dun substrat appropri pour la mise en pot Un coin rserv au compostage pour faire une dmonstration de cette pratique
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Travaux pratiques
1) Les participants et les spcialistes visitent une ppinire dessences agroforestires et sefforcent de rpondre aux questions suivantes : a) Aprs avoir compar les pratiques et les procdures de gestion observes dans la ppinire avec les vtres, rpondez aux questions suivantes : En quoi vos pratiques sont-elles diffrentes ? Pourquoi ? b) Avez-vous observ des pratiques de gestion que vous rprouvez ? Pourquoi ? Suggrez des changements ou des amliorations. c) Identifiez les pratiques et les procdures qui sont nouvelles pour vous. Expliquez leurs avantages par rapport dautres pratiques et procdures connues des stagiaires. d) Discutez le rapport cot-bnfice de certaines pratiques de gestion et de certains investissements.
2)
Les participants et les spcialistes valuent diffrents mlanges ou substrats utiliss pour la mise en pot. Comparez et dcrivez le dveloppement des plantules leves dans diffrents substrats. Ouvrez ensuite les conteneurs et dcrivez le dveloppement du systme racinaire. Essayez de trouver les raisons de ces diffrences de dveloppement.
3)
Dformations des racines. Ouvrez cinq conteneurs et inspectez le systme racinaire. Dessinez les racines et essayez de deviner pour quelles raisons elles sont dformes. Comment viter les dformations racinaires ?
4)
Dpiquage : a) humidifier soigneusement le sol de la caissette ou de la plate-bande autour de la plantule pour pouvoir larracher facilement ; b) soulever les plantules laide dune petite pelle ou dun morceau de bois plat. Ne choisir que des plantules saines et vigoureuses ; c) toujours tenir les plantules par leurs feuilles, jamais par leur tige, qui pourrait ne pas sen remettre si elle tait crase ; d) e) cerner (couper) les racines avec un couteau bien aiguis, si elles sont trop longues ; placer les plantules dans un rcipient plat avec de leau et recouvrir dun chiffon humide ou de paille ; f) laide dun bton pointu ou dun plantoir, faire dans le conteneur un trou suffisamment large pour que les racines puissent y tenir sans tre recourbes ; g) placer la plantule avec soin dans ce trou et la soulever lgrement pour que les racines puissent se dtendre ; h) boucher le trou en pressant le sol doucement contre les racines pour que la plantule puisse tenir fermement dans le conteneur ; i) arroser les conteneurs et les placer lombre.
Vraies feuilles Feuilles de germination Vrifier la taille de la plantule Arroser
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Soulever la plantule Humidifier la couverture
Tenir la plantule par les feuilles du haut
Faire un trou laide dun plantoir
Cerner les raciness
Couvrir les plantules
Arroser et mettre lombre Insrer la plantule Faire un trou assez grand ! Boucher le trou
Figure 2-1. Le dpiquage (OIT, 1992).
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Le compostage. Les participants observent une opration de compostage et discutent des bienfaits de la matire organique dans les mlanges en pots : a) b) mettez votre main dans le tas de compost et dcrivez la temprature ; placez un thermomtre dans le tas de compost et notez la temprature aprs cinq minutes ;
c)
prlevez une poigne de matire composte, sentez-la et dcrivez-la.
Arroser frquemment pour que la terre soit humide, pas dtrempe !
Couche de terre
Couche de feuilles et de dchets vgtaux
Couche de terre
30 cm
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Figure 2-2. Fosse compost (OIT, 1992).

Figure 2-3. Tas de compost. Lorsque le compost se tasse aprs stre rchauff, le retourner et refaire un tas.
it Un 3
Le bouturage
Axes de formation
A la fin de lunit sur les boutures, les stagiaires pourront : Enumrer et dcrire les diffrentes phases du processus denracinement des boutures Expliquer les processus physiologiques de lenracinement Dcrire et construire un bac de bouturage sans nbulisateur utilis pour lenracinement des boutures Multiplier des essences agroforestires partir de boutures de tiges ou de racines
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Lunit comporte un expos thorique tay par des notes de cours. Le matriel ncessaire pour les travaux pratiques et les dmonstrations est indiqu dans la section consacre aux travaux pratiques.

Rsum de lunit
Lexpos thorique dcrit comment et pourquoi les essences agroforestires peuvent tre multiplies partir de boutures de racines ou de tiges. Lenracinement comporte les tapes suivantes : multiplication, induction, rarrangement des tissus, apparition des racines, longation et dveloppement des racines et croissance de la nouvelle plante dans son intgralit.
Plusieurs facteurs interviennent dans ce processus : quilibre hormonal et induction, eau, minraux, bilan nergtique, nombre de feuilles et tat phytopathologique de la plante. Certains de ces facteurs peuvent tre modifis de lextrieur pour favoriser lenracinement et le dveloppement de la nouvelle plante.
Le bouturage
Lun des facteurs dcisifs pour le succs de lenracinement des boutures dans les rgions tropicales est le bilan hydrique de la plante et de son environnement. Si les boutures et les plantes sont trop sches, elles fltrissent et si elles sont trop humides elles attirent les champignons et les maladies. Il importe donc de contrler lhumidit de lair ambiant. On y parviendra en recourant des bacs de bouturage, avec ou sans nbulisateur. Lexpos thorique a pour but de dcrire un bac de bouturage sans nbulisateur. Les stagiaires pourront construire eux-mmes un bac de bouturage dans le cadre des travaux pratiques. A dfaut, on pourra leur montrer un bac de bouturage dans le cadre de dmonstrations. Il est crucial de prendre grand soin de la plante-mre ou plante-souche sur laquelle on prvoit de prlever des boutures. Lexpos dcrit les diffrentes tapes menant au
Le bouturage
prlvement des boutures. Les soins apporter aux boutures sont les suivants : rduction de la surface des feuilles, utilisation dhormones favorisant le dveloppement des racines, emploi dengrais et de pesticides si ncessaire pour assurer un bon dveloppement des boutures. Ds que les boutures prennent, on peut les mette en pot et les endurcir en vue
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de leur plantation en plein champ.
Pour mieux comprendre cette unit, on consultera utilement louvrage suivant : Longman KA. 1993. Rooting Cuttings of Tropical Trees. Tropical Trees. Propagation and Planting Materials Vol. 1. Londres : Commonwealth Science Council.
Le bouturage : principes et techniques

Zeev WiesmanUniversit Ben Gurion et Zac TchoundjeuWorld Agroforestry Centre
Introduction
Le bouturage est peut-tre la mthode la plus communment employe pour multiplier par voie vgtative les arbres et les arbustes. Le procd est relativement simple, nexigeant quun minimum despace pour la reproduction. Dautre part, une seule plante-mre ou plante-souche peut donner de nombreuses boutures. Un grand nombre de plantes ornementales sont multiplies de cette manire. Toutefois, lutilisation de cette mthode est moins bien connue pour la plupart des essences agroforestires. Dans les paragraphes qui suivent, on dcrit brivement quelquesuns des principes qui sous-tendent le bouturage et lenracinement, en mettant en relief les diffrents facteurs qui influent sur ces processus et on examinera les diffrentes tapes qui mnent une multiplication russie des arbres et des arbustes au moyen de cette technique.
Lenracinement
Le diagramme suivant rcapitule les diffrentes tapes de lenracinement des boutures, en indiquant quels sont les facteurs, endognes ou exognes, qui influent sur ce processus.
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Dveloppement

Elongation Initiation Induction Multiplication Rarrangement
plante- prlve- cicatrisation de mre ment de la plaie la bouture bilan hydrique nombre de feuilles traitements exognes quilibre hormonal bilan nergtique bilan minral bilan phytopathologique
diffren- bauche de systme tiation racines vasculaire
initiation des racines
longation des endurcis- croissance racines sement intgrale de la plante effet des engrais contrle hormonal
bilan hydrique induction hormonale contrle phytopathologique
bilan hydrique induction hormonale contrle phytopathologique contrle minral bilan hydrique induction hormonale contrle phytopathologique
bilan hydrique induction hormonale contrle phytopathologique
effet des engrais contrle hormonal contrle phytopathologique
Figure 3-1. Les diffrentes tapes de lenracinement et les facteurs qui interviennent
Lenracinement des boutures de tiges est un processus complexe qui est la rsultante de multiples facteurs. Le succs de lopration dpend, ds le dpart, de plusieurs facteurs endognes
Le bouturage
et exognes. Ds que les boutures ont t prleves sur la plante-mre, des prcautions doivent tre prises pour que lenracinement puisse se faire dans les meilleures conditions possibles. Plusieurs tapes doivent tre franchies : cicatrisation, formation de nouvelles cellules, induction de la formation des racines, rattachement des racines aux tissus vasculaires de la tige de la bouture, longation des nouvelles racines, et dveloppement dune nouvelle plante autonome partir des tiges boutures. L encore, divers facteurs endognes et exognes interviennent.
Les facteurs qui influent sur lenracinement

Dans les paragraphes qui suivent, les facteurs les plus dcisifs pour le succs de lenracinement des boutures seront dcrits brivement. Ce sont : le substrat, lhumidit, les hormones vgtales, la surface foliaire, la lumire et la temprature, et lhygine de la plante.
Le substrat
Le bouturage
Le choix du substrat est crucial pour lenracinement des boutures de tiges. Les essences tropicales prfrent pour la plupart un milieu lger et bien drain. Ceci permet dviter un excs deau qui ferait pourrir les boutures. Les substrats suivants rpondent ces conditions : Sciure de bois pourrie Sable de rivire fin Mlange de sable de rivire et de sciure de bois (50/50 en volume) Gravier Mlange de gravier et de sciure de bois (50/50 en volume) Vermiculite Le substrat devrait tre bien lav et si possible strilis avant usage, pour viter les ravageurs et les maladies. Il doit tre renouvel au moins une fois par an.
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Lhumidit
Ds que la bouture est prleve de la plante-mre, elle ne peut plus absorber leau ncessaire sa survie et son dveloppement. Cest pourquoi il est vital de maintenir lhumidit ambiante un degr optimal, qui ne sera ni trop faible, ce qui provoquerait le fltrissement et le desschement des boutures, ni trop lev, ce qui favoriserait lapparition de maladies. Leau est donc un facteur externe crucial pour le succs de lenracinement des boutures.
Les hormones
Comme on la mentionn dans lintroduction, les hormones vgtales jouent un rle primordial dans le processus de multiplication. Certaines hormones, notamment les auxines (AIB, AIA, ANA) influent sur le dveloppement des racines, tandis que dautres, comme les gibberellines, influent sur llongation des tiges et le dveloppement des bourgeons. Lquilibre hormonal de
la plante-mre et des boutures affecte lenracinement, dans le sens positif ou dans le sens ngatif. Cest pourquoi il est parfois ncessaire daugmenter lapport en hormones de bouturage. Il existe des hormones de synthse qui agissent soit directement en favorisant le dveloppement des racines, soit indirectement en neutralisant les hormones qui inhibent leur croissance. Lquilibre hormonal de la bouture affecte la cicatrisation, lbauche et linitiation des racines, llongation des racines, lendurcissement et le dveloppement futur de la bouture enracine. Lquilibre hormonal de la plante-mre se transmet aux boutures; il importe donc de bien choisir le moment o doit seffectuer le prlvement des boutures. Il faudra gnralement procder une srie dexpriences pour dterminer la concentration approprie dauxines pour les essences dont on ne connat pas bien le comportement en matire denracinement. Pour commencer, on pourra utiliser un mlange contenant 50 g dAIB, dANA et dAIA ou un mlange dAIB et dANA. On notera toutefois que certaines essences nont pas besoin dauxines pour produire des racines.
Les plantes ont besoin de nutriments (azote, phosphore, potassium, etc.) et de mtabolites (protnes, lipides, glucides) pour crotre et spanouir. Cest pourquoi il importe que la plantemre et les boutures aient un bilan nutritif et nergtique optimal. Dans les boutures, lactivit mtabolique se concentre sur les feuilles. Linitiation des racines de la bouture dpend de la photosynthse qui sopre au niveau des feuilles. Les feuilles de la bouture doivent donc avoir, au total, une surface suffisante pour pouvoir continuer de produire les mtabolites ncessaires pour assurer linitiation des racines par la photosynthse. Cependant, dans le mme temps les feuilles perdront de leau par transpiration. Il faudra donc que la surface foliaire totale de la bouture assure un juste quilibre entre ces deux paramtres. Cet quilibre varie selon les essences. Ainsi, pour Khaya ivorensis, lenracinement optimal avec nbulisation intermittente est obtenu lorsque la surface foliaire totale est ramene 50-100 cm2 par bouture. Par contre, pour Lovoa trichilioides, la surface foliaire totale doit tre plus importante, 200 cm2 environ, pour que lon obtienne le meilleur enracinement possible dans un bac de bouturage sans nbulisateur. Si lon ne possde pas les informations pertinentes en matire de surface foliaire optimale pour lessence sur laquelle on travaille, on commencera par une surface de 50 cm2. On procdera ensuite des essais avec diffrentes surfaces foliaires et, en comparant les rsultats obtenus, on pourra dterminer la surface foliaire optimale pour lessence considre.
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La lumire et la temprature
La lumire et la temprature ambiantes influent galement sur lenracinement. Pour contrler ces facteurs, il faut disposer dquipements et dinfrastructures dont toutes les ppinires ne sont pas pourvues (lectricit, rglage de lintensit lumineuse pour obtenir la luminosit maximale ou au contraire lobscurit totale, cbles chauffants circulant dans le substrat). Des
Le bouturage
La surface foliaire
recherches plus pousses simposent pour dterminer leffet exact de ces facteurs sur lenracinement de diverses essences agroforestires, et aussi pour trouver les moyens de circonvenir les difficults techniques. Il est probable que lintensit lumineuse affecte directement lenracinement par ses effets sur la photosynthse. En revanche, on ne sait pas encore bien comment la qualit de la lumire agit sur lenracinement. Chez Triplochiton scleroxylon, des mesures de la photosynthse nette de plantes-mres cultives sous diffrentes intensits lumineuses ont montr une corrlation vidente entre laptitude lenracinement et la photosynthse (Leakey et Storeton-West, 1992).
Les aspects phytosanitaires

La sant des plantes-mres et des boutures est videmment importante. On veillera ne pas prlever de boutures sur des plantes-mres en mauvaise sant, en particulier si leur tat
Le bouturage
rsulte de la prsence de champignons, de bactries ou de virus. En effet, une telle pratique risquerait non seulement dtre prjudiciable lenracinement des boutures mais aussi de propager la maladie lors du repiquage au champ des boutures infectes. Dans certains cas, les boutures peuvent tre traites laide dun pesticide ou plonges dans un strilisant de surface, comme par exemple de leau de javel dilue (voir Unit 2).
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La prparation des boutures

Gestion des plantes-mres
Il convient dobserver les rgles suivantes : Installer les plantes-mres aussi prs que possible de la zone de multiplication Elaguer les plantes-mres rgulirement, trois fois par an, pour encourager la production de bonnes pousses et maintenir la jeunesse du matriel vgtatif. On conservera toujours une paire de feuilles nourricires sur chaque plante. Utiliser de lengrais pour acclrer la croissance dans les sols carencs en lments nutritifs. Espacer les plantes comme suit (pour la plupart des espces) : 1 2 mtres entre les rangs, 0,5 1 mtre dans chaque rang. Sparer les clones et les tiqueter clairement. Laisser certains clones grandir de manire ce quils expriment les traits des arbres matures. Faire pousser les plantes-mres sous une ombre lgre, par exemple en les intercalant avec Caliandra ou Leucaena.
Prlvement des boutures

Les boutures doivent tre prleves tt le matin avant que le soleil ne chauffe, pour rduire au minimum la transpiration et donc le desschement. Les feuilles doivent tre tailles avant que les pousses ne soient dtaches de la plantemre pour rduire la surface vaporante et donc les dperditions deau. La surface foliaire permettant un enracinement optimal varie selon les espces. Toutefois, on prconisera une surface foliaire de 50 cm2 jusqu ce que des recherches plus approfondies permettent de dterminer limpact de ce facteur, pour diffrentes essences agroforestires. La surface foliaire retenue devra garantir un juste quilibre entre la photosynthse et la transpiration si les boutures sont places dans un bac de bouturage sans nbulisateur. Les pousses seront transportes dans un sac de polythylne humide lintrieur. Les pousses ainsi recueillies seront places lombre. On vitera de lancer ou dcraser les sacs.
glacire. On veillera ce que les pousses ne soient pas au contact direct du systme de refroidissement. Dans la ppinire, tous les outils et le matriel doivent tre prts et bien arrangs davance pour que les boutures ne perdent pas leur humidit et pour quon puisse les transfrer sans dlai dans les bacs de bouturage. Tout retard desscherait les boutures. Ceci est souvent la cause des problmes denracinement des boutures dans les zones arides et semi-arides.
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Les bacs de bouturage nbulisateur

Le maintien dun environnement humide pour rduire les pertes deau par transpiration est vital pour le succs de lenracinement des boutures. Les bacs de bouturage nbulisateur sont des quipements modernes conus cet effet. Ils comprennent un systme dirrigation sous haute pression qui dirige leau vers des jets spciaux, placs au-dessus des boutures, sur lesquelles ils dversent un brouillard. Un minuteur et un dispositif automatique de rglage de lhumidit permettent dajuster la frquence et la dure de la nbulisation. Ce systme, qui est onreux et qui de surcrot exige une source fiable dalimentation en eau et en lectricit, nest gure recommand pour des endroits o ces services ne sont pas disponibles ou ne sont pas assurs rgulirement.
Les bacs de bouturage
Le bouturage
Les pousses qui doivent tre transportes sur une longue distance seront places dans une
Les bacs de bouturage sans nbulisateur

Un bac de bouturage, mme dpourvu de nbulisateur, peut tre utilis pour maintenir le niveau dhumidit requis. Cet quipement se prsente sous la forme dun chssis en bois ferm hermtiquement par des feuilles de polythylne transparentes ou blanches. Le fond est tapiss dun substrat humide et contient une rserve deau (voir la photo ci-dessous). Pour viter un clairage trop intense ou de mauvaise qualit, qui pourrait tre prjudiciable lenracinement, on placera les bacs de bouturage sous un ombrage uniforme. On utilisera de prfrence une toile ombrer offrant 60 % dombre.
Comme on la signal prcdemment, la temprature du milieu est galement importante pour lenracinement. Dans les bacs de bouturage sans nbulisateur, elle devrait tre maintenue entre 28 et 30 C. Dans les rgions chaudes et sches, un arrosage frquent du bac lui-mme peut contribuer abaisser des tempratures anormalement leves.
Le bouturage
Lhumidit lintrieur du bac nest pas constante. Le degr hygromtrique aprs arrosage se situe entre 90 et 100 %, mais si lon ouvre le bac on constate que lhumidit tombe rapidement jusqu 40 %. Pour maintenir lhumidit, il faut pulvriser de leau une fois par jour, laide dun vaporisateur lintrieur du bac et sur les boutures. La temprature et lhumidit sont les deux principaux paramtres quil faut constamment contrler lintrieur du bac de bouturage.
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Un bac de bouturage sans nbulisateur
Les soins dispenser aprs la propagation

Mise en pots
La mise en pots est une opration dlicate dans le contexte de la multiplication vgtative et on peut facilement perdre tout le matriel enracin. On prendra les mmes prcautions que pour le dpiquage des plantules (Unit 2). On tera dlicatement la bouture racine du substrat laide dun morceau de bois plat, on la secouera pour faire tomber les dbris de substrat et on la placera dans un conteneur dj partiellement rempli dun substrat lger mais cependant riche en
lments nutritifs. On recouvrira de substrat les racines qui sont nu; on pressera le substrat fermement autour de la bouture et on arrosera. Les boutures qui viennent dtre mises en pots doivent rester dans un milieu humide et bien ombrag jusqu lapparition de nouvelles pousses. A ce stade, larrosage doit tre fait dlicatement, de prfrence laide dun pulvrisateur ou dun tuyau darrosage jet fin.
Lendurcissement
Lendurcissement a pour but dacclimater progressivement les boutures, dabord en ppinire puis au champ. On procde en rduisant lhumidit par paliers, puisque celle-ci nest plus ncessaire lenracinement. En milieu sahlien, o les conditions sont rudes, les boutures en pots de Prosopis africana sont conserves pendant trois semaines dans le bac de bouturage, celles de Bauhinia rufescens pendant deux semaines (Tchoundjeu, 1996). Ensuite, les bacs de bouturage restent ouverts la nuit pendant une semaine, puis nuit et jour, sauf durant les journes exceptionnellement chaudes. Enfin, les plantes sont transportes dans la ppinire o elles restent encore lombre. Les espces ne se comportent pas toutes de la mme manire. Prunus africana senracine facilement mais sendurcit difficilement, tandis que Pterocarpus erinaceus, Bauhinia rufescens et Tamarindus indica senracinent facilement et sendurcissent relativement bien.
Bibliographie
Leakey RRB and Storeton-West R. 1992. The rooting ability of Triplochiton scleroxylon cuttings : the interaction between stock plant irradiance, light quality and nutrients. Forest Ecology and Management 49:133-150 Longman KA. 1993. Rooting Cuttings of Tropical Trees. Tropical Trees : Propagation and Planting Materials Vol. 1. Londres : Commonwealth Science Council. Tchoundjeu Z. 1996. Vegetative propagation of Sahelian agroforestry tree species : Prosopis africana and Bauhinia rufescens. In : Dieters MJ, Nikles DG, Harwood CE and Walker SM (eds) Tree Improvement for Sustainable Tropical Forestry. Proceedings QFRI-IUFRO Conference, Caloundra, Queensland, Australia : 27 October-1 November 1996.
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Le bouturage
Le bouturage - Travaux pratiques

Objectifs
Les travaux pratiques ont un double objectif : permettre aux stagiaires de constater les effets des auxines sur lenracinement des boutures et leur apprendre utiliser un bac de bouturage sans nbulisateur pour faire prendre les boutures.
Les stagiaires devraient travailler en groupes de trois ou quatre. Chaque groupe devrait avoir loccasion daider construire un bac de bouturage en matire plastique et dappliquer diffrentes hormones radicignes aux boutures.
Matriel ncessaire
Le bouturage
Pour ces travaux pratiques, on aura besoin des outils et du matriel suivants :
Des bacs de bouturage contenant diffrents types de substrat : sable, gravillon, sciure de bois, etc. Des petits conteneurs renfermant des poudres radicignes diverses concentrations. Par exemple : AIB 0,1 %, 0,3 %, 0,8 %. Dautres produits, si disponibles (AIA, par exemple). De grands sacs plastique pour la collecte des boutures. Une glacire et des blocs de glace pour conserver les boutures si on ne sen sert pas tout de
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suite. Une petite bouteille dalcool thylique ou dalcool brler 80 % pour dsinfecter les outils. Un vaporisateur pour chaque groupe. Un compas et une rgle pour mesurer les boutures avant de les planter. Des tiquettes et des fiches dvaluation. Un choix de plantes-mres dessences agroforestires. Des plantules ou des plantes recpes prsentant des pousses de 30 cm environ feront laffaire.
Travaux pratiques
Construire un bac de bouturage en matire plastique
On ne cherchera pas construire un bac de bouturage perfectionn. Le but recherch est de permettre aux stagiaires de placer le substrat dans le bac pour quils puissent comprendre le fonctionnement du systme et aussi pour quils puissent se rendre compte par eux-mmes des ventuelles difficults. La construction du bac de bouturage se droulera comme indiqu ci-aprs.
50 cm
100 cm
25 cm
100
cm
25 cm
eau
milieu denracinement niveau de gravillon leau cailloux sable polythne
Figure 3-2. Reprsentation schmatique dun bac de bouturage sans nbulisateur (Longman, 1993)
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Pour construire un bac de bouturage ayant pour dimensions 1 m x 3 m x 1 m, il faudra comme matriel : 1. Un chssis en bois, de prfrence dune essence durable et rsistante aux termites, surtout pour ce qui concerne les parties qui reposeront sur le sol. A dfaut, on traitera le bois laide dun vernis protecteur. Il faudra veiller, toutefois, ce que ce vernis nempoisonne pas les boutures. Il faudra environ 8 mtres de section 250 x 25 mm, 10 mtres de section 50 x 50 mm et 32 mtres de section 50 x 25 mm. 2. 3. Une feuille de polythylne de bonne qualit, de 10 mtres de long sur 2 mtres de large. 0,5 m3 de blocs de ciment ou de pierres concasss (30-120 mm), 0,25 m3 de gravillon (5-10 mm), 0,25 m3 de sable grossier. 4. Matriaux dassemblage : clous, agrafeuse et punaises pour joindre et fixer les feuilles de polythylne; charnires, vis et pinces de fixation pour assurer la fermeture du couvercle. 5. Une double feuille de polythylne parfaitement tanche servira couvrir le fond du bac. Cette feuille ne devra pas tre trop tendue, pour pouvoir supporter sans stress le poids des matriaux de remplissage et de leau de drainage. 6. Laxe longitudinal du bac sera orient Est-Ouest. Il faut absolument niveler le sol et rpandre du sable sur le fond pour empcher que la feuille de polythylne ne soit perce ou distendue
Le bouturage
par les cailloux. On sassurera laide dun niveau que le bac est bien horizontal, parce quil ne faudrait pas quun compartiment reoive davantage deau que les autres. 7. Dans un coin du bac, on placera la verticale un morceau de tuyau en plastique ou, dfaut, un morceau de bambou (de 25 30 cm de long et de 5 cm de diamtre environ) pour pouvoir vrifier facilement le niveau de leau et en rajouter si ncessaire sans pour autant noyer le milieu denracinement. 8. Tous les matriaux inertes utiliss pour le drainage devront tre soigneusement lavs avant usage. Par ailleurs, on joindra les feuilles de polythylne par un double joint chevauchant pour maintenir une humidit leve lintrieur du bac de bouturage. 9. On ajoutera les diffrentes couches de substrat avec soin pour ne pas endommager la feuille de polythylne : une mince couche de sable de rivire, une paisse couche de cailloux, une paisse couche de gravillon, une mince couche de sable (reprsentant une paisseur totale de 15 25 cm). On ajoutera ensuite de leau jusqu ce que la couche de drainage soit
Le bouturage
sature. 10. On ajoutera enfin le milieu denracinement sur le dessus (environ 10 cm dpaisseur). Il devra tre humide sans tre dtremp, pour que les boutures puissent prosprer.
Lentretien consistera vrifier priodiquement le niveau deau (une fois par semaine). On ajoutera de leau, si ncessaire, laide dun tuyau en plastique. On nettoiera rgulirement
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lextrieur du bac pour que la lumire puisse pntrer lintrieur. Toute brche dans la feuille de polythylne devra tre colmate laide de ruban adhsif pour que lhumidit ne schappe pas.
La collecte et la prparation des boutures

1. Tailler les feuilles des pousses choisies avant de couper celles-ci de la plante-mre, et enlever les bougeons et les feuilles terminales sils sont trop mous. 2. Placer les pousses sans tarder dans des sacs de polythylne dment tiquets, indiquant le nom de lespce et le numro du clone, et contenant du papier ou un autre matriau humide. Faute de matriau humide, on humidifiera lintrieur du sac laide dun vaporisateur. Le sac doit toujours tre clos. 3. Pour viter que les boutures ne se rchauffent durant le transport, on les mettra dans une glacire, en vitant cependant tout contact direct avec les lments du systme de refroidissement. 4. Dans la ppinire, on placera les pousses dans un seau deau ou on les aspergera deau frquemment jusqu ce quelles soient plantes. 5. A laide dun couteau bien aiguis ou dun scateur on prlvera des boutures un ou deux nuds. On coupera la base angle droit. On vitera de couper la base en biais pour que les racines ne poussent pas que dun seul ct.
6.
On plongera la base de la bouture (0,5-1 cm) dans une poudre denracinement approprie. Chaque stagiaire devra pouvoir planter 3 4 boutures pour chaque traitement, par exemple : bouture tmoin (aucun traitement), 0,1 % AIB, 0,3 % AIB, 0,8 % AIB.
7.
On placera la bouture dans un trou qui aura t prpar cet effet dans le substrat, jusqu 2 3 cm de profondeur, pas plus. On veillera ce que les feuilles soient bien dgages et on tassera le substrat autour de la bouture avec deux doigts.
8.
On mentionnera sur ltiquette : le nom de lespce, le numro du clone, la date de plantation et les traitements. Ces renseignements seront ports sur la fiche dvaluation.
9.
On pulvrisera les boutures avant de refermer hermtiquement le couvercle du bac de bouturage.
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Le bouturage
Modle de feuille dvaluation

Espce Date de plantation Substrat Enracinement Numro du clone Numro de la bouture Traitement Oui/Non Date 2
Date 1
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Le bouturage
it Un4 Le greffage
Axes de formation
A la fin de lunit sur le greffage, les participants pourront : Enumrer et expliquer les principales raisons de greffer des essences agroforestires Expliquer quelques-uns des processus physiologiques du greffage et indiquer dans quelles conditions le greffage peut russir
Pratiquer le greffage sur quelques essences agroforestires
Lunit comporte un expos thorique de 60 90 minutes, tay par du matriel audio-visuel. Cet expos sera suivi par des travaux pratiques dune dure de 4 heures,
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comprenant des dmonstrations.
Lexpos thorique sera tay par des notes de cours. Les supports de formation ncessaires pour les travaux pratiques et les dmonstrations sont indiqus dans la section consacre aux travaux pratiques.
Rsum de lunit
Le greffage est lune des mthodes de multiplication vgtative les plus complexes et les plus laborieuses. Il consiste unir la tige dune plante avec les racines dune autre pour former une nouvelle plante. Si la tige de la plante est rduite un seul bourgeon, on parle alors dcussonnage.
Comme toute autre mthode de multiplication vgtative, le greffage et lcussonnage se justifient par de multiples raisons. Les principales raisons sont les
Le greffage
Enumrer et dcrire les techniques de greffage les plus courantes
suivantes : pour multiplier des essences qui ne peuvent pas facilement ltre par la reproduction sexue ou par dautres mthodes de reproduction asexue, pour remplacer le systme racinaire dun arbre par un meilleur systme, pour raccourcir le temps ncessaire un arbre pour parvenir maturit (floraison, fructification), pour rparer les dommages causs des arbres gs ou pour les rajeunir par du matriel jeune et amlior. Au cours de la greffe, le matriel vgtal prlev sur la tige et les racines prleves par ailleurs sont joints de telle manire que les nouvelles cellules rsultant de la cicatrisation de la plaie finissent par sunir pour produire de nouveaux tissus qui permettront la plante greffe de crotre et de se dvelopper normalement. Avant le greffage ou lcussonnage, il faudra sassurer que les matriels vgtaux que lon veut unir sont compatibles et il faudra aussi prendre en considration leur
Le greffage
ge physiologique. Le succs de lopration dpendra en outre dun certain nombre dautres facteurs (humidit, temprature, surface de contact entre porte-greffe et greffon, mesures dhygine, etc.). Les techniques de greffage les plus couramment employes pour les essences agroforestires sont : la greffe terminale en fente, la greffe langlaise simple, la
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greffe langlaise double et la greffe par approche. Les techniques dcussonnage les plus courantes sont lcussonnage en T, ou greffe en cusson, et lcussonnage en plaque.
Pour mieux comprendre cette unit, on consultera avec profit les ouvrages suivants : Edmond JB, Senn TL, Andrews FS and Halfacre RG. 1975. Fundamentals of horticulture. USA: McGraw-Hill, Inc. Hartmann HT, Kester DE, Davies FT and Geneve RL. 1997. Plant propagation : Principles and practices. 6th ed. New Jersey, USA: Prentice Hall. Macdonald B.1986. Practical woody plant propagation for nursery growers. Oregon: Timber Press. Mudge KW, Mwaka A, Isutsa D, Musoke R, Foster D and Ngoda BJM. 1992. Plant propagation a teaching resource packet. USA: Cornell University.
Le greffage : principes et techniques

Hannah JaenickeWorld Agroforestry Centre
Introduction
La pratique de la greffe, qui consiste combiner plusieurs plantes, remonte lantiquit. La littrature ancienne, chinoise et grco-romaine, en fait mention, ainsi que la Bible. Au dbut du XIXe sicle, plus dune centaine de mthodes avaient dj t rpertories (Thouin, 1821). Au dpart, la greffe ne se pratiquait que sur les espces darbres importantes pour des raisons conomiques ou culturelles, notamment lolivier et les agrumes sur le pourtour de la Mditerrane, du temps des Grecs et des Romains. Par la suite, cette pratique sest tendue aux plantes ornementales, comme les rosiers, puis aux nombreuses espces exotiques ramenes des contres lointaines pour embellir les jardins dEurope. Dans les rgions tropicales, la greffe ne se
Or le greffage est aussi une option viable pour domestiquer certaines essences agroforestires jusqu prsent sous-exploites. Rappelons que le greffage est une mthode de multiplication vgtative ardue exigeant un personnel non seulement qualifi mais galement expriment, si lon veut obtenir des rsultats probants et satisfaisants.
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Dfinitions
Pour bien comprendre les techniques de greffage et dcussonnage, leur fonctionnement et leurs principes, il faut tout dabord assimiler les dfinitions qui suivent. Greffage : technique consistant rapprocher deux morceaux de matriel vgtal vivant pour quils puissent sunir et former une plante bien constitue. Greffon : partie arienne de larbre, qui formera la couronne de la nouvelle plante. Cette partie de larbre renferme les bourgeons dormants dont on veut multiplier les caractres convoits. Ecussonnage, ou greffe dyeux : technique de greffage particulire o le greffon peut tre constitu de plusieurs bourgeons. Cest une technique plus rentable puisquelle permet de produire davantage de greffons partir dune seule plante-mre. Porte-greffe : la partie souterraine de la plante ou sa partie infrieure, y compris, dans certains cas, une partie de la tige et quelques branches, qui fournira le systme racinaire de la nouvelle plante. Il se peut que cette partie de la plante contienne aussi des bourgeons dormants, mais il faudra les empcher de se dvelopper sur la nouvelle plante car ils formeraient des drageons ne possdant pas les caractres dsirs que lon souhaite multiplier.
Le greffage
pratique que sur un petit nombre despces commerciales (manguier, citrus, hva, avocatier).
Cambium vasculaire : mince couche de cellules mristmatiques comprise entre lcorce (phlome) et le bois (xylme). Les cellules mristmatiques produisent, par division cellulaire, de nouvelles cellules susceptibles de se diffrencier pour former de nouveaux tissus et de nouveaux organes. Cal : bourrelet de cellules indiffrencies qui se forme autour dune plaie. En cas de greffe, le cal se forme la soudure entre le greffon et le porte-greffe. A partir des cellules du cal de nouveaux tissus vasculaires se constitueront pour permettre au greffon et au porte-greffe de fonctionner comme une seule plante.
Lintrt du greffage et de lcussonnage

Les raisons suivantes peuvent inciter greffer des essences agroforestires : Multiplier un ligneux qui ne peut ltre par la reproduction sexue ou par dautres mthodes de reproduction asexue
Le greffage
Obtenir un ligneux combinant les caractres dsirables dun ligneux donn et le systme racinaire dun autre Rduire le temps ncessaire au ligneux pour parvenir maturit (floraison, fructification, production de graines) Rgnrer de vieux arbres laide de matriel vgtal jeune et amlior provenant dautres arbres Rparer les dommages causs certaines parties de larbre Dtecter les maladies virales
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La multiplication
Bon nombre dessences tropicales sont difficiles multiplier partir de boutures de tiges ou de racines. Les programmes de domestication des ligneux, qui visent sapproprier la supriorit gntique qui sexprime chez les arbres matures, se rabattent alors sur le greffage pour rajeunir ou revigorer le matriel vgtal dsir. Un greffon prlev sur larbre choisi est greff sur un porte-greffe vigoureux. Les pousses de cette nouvelle plante peuvent raciner ou, en cas dinhibition de lenracinement, tre greffes sur un nouveau porte-greffe. Comme le montre la figure 4-1, il faut parfois rpter lopration plusieurs reprises avant dobtenir un rsultat satisfaisant (Siniscalco and Pavolettoni, 1988).
Le porte-greffe
Il arrive souvent quun cultivar intressant soit dpourvu, dans sa partie souterraine, des qualits souhaitables, que lon peut par ailleurs trouver sur un autre cultivar ou sur une autre provenance. Par exemple, certains clones sont tolrants voire rsistants la scheresse, la salinit ou aux agents pathognes prsents dans le sol. Ces clones peuvent servir de porte-greffe dautres individus possdant, dans leur partie arienne, les proprits voulues, comme par exemple la qualit de leurs fruits.
Chez certaines espces, notamment les citrus, le porte-greffe joue parfois un rle dans la qualit du fruit. Il peut aussi influer sur la vigueur de la nouvelle plante. Ces facteurs comptent sur le plan commercial. Pour de nombreux arbres fruitiers, on a mis au point des porte-greffes nanisants.
Collecte arbre choisi
Mobilisation greffe
Mobilisation croissance de la greffe et prlvement du greffon
Premire greffe
Deuxime greffe Deuxime greffe croissance de la greffe Enracinement manqu Enracinement manqu
Premire greffe
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Clonage Sixime greffe plante-mre Enracinement russi
Figure 4-1. Rajeunissement par greffage rpt dun Eucalyptus x trabutii g de dix ans sur un jeune sujet. Six greffes successives ont t ncessaires pour obtenir des greffons matures utilisables comme boutures et pouvant raciner (Siniscalco and Pavolettoni, 1988).
La maturation
La multiplication vgtative acclre gnralement la maturation des plantes. Il en va ainsi des boutures provenant darbres matures ou encore du marcottage arien. Le greffage dun greffon mature sur un porte-greffe jeune et vigoureux produit le mme effet, avec souvent plus de succs. Le greffage prsente un avantage supplmentaire, savoir que la maturation des jeunes plantules, provenant dun programme de slection par exemple, peut tre considrablement acclre si on les greffe sur un porte-greffe mature et bien install.
Le greffage
Le rajeunissement
Un ligneux mature dune espce non amliore peut tre bonifi par le greffage de greffons dune varit amliore. On citera en exemple les manguiers et les citrus, qui, parce quils proviennent le plus souvent de semences, nont pas la qualit dsire. Le greffage, par greffe terminale, de greffons de matriel amlior sur des ligneux biens installs peut ainsi savrer bnfique sur le plan conomique. Chez les plantes dioques, cest--dire celles dont les gamtes mles et femelles se trouvent sur des plantes diffrentes, un problme bien connu des producteurs est le rapport parfois dfavorable entre le nombre darbres mles et le nombre darbres femelles. Un arbre mle improductif peut tre chang en arbre femelle par greffage de greffons dune plante-mre femelle sur la tige mle. Au cas o lon viendrait manquer de pollinisateurs (par exemple aprs labattage des arbres mles improductifs), on pourra toujours insrer dans la couronne dun arbre femelle un greffon dun arbre mle. Une autre possibilit, particulirement intressante pour les exploitants agricoles qui
Le greffage
doivent travailler sur de trs petites parcelles, est le greffage de plusieurs varits distinctes de la mme espce sur le mme porte-greffe. On peut ainsi cueillir sur le mme arbre des varits prcoces et des varits tardives.
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Rparation des dgts

Il arrive que les racines ou le tronc dun arbre soient gravement endommags par des animaux vagabonds ou par la scheresse. Si lon estime que larbre mrite dtre sauv, on peut rparer les dgts en pratiquant une greffe en pont.
Dpistage des maladies virales

Chez certaines espces importantes sur le plan commercial, comme par exemple les citrus, les maladies virales constituent un grave problme. Si lon souponne que la plante-mre est infecte, on peut prlever sur elle un bourgeon que lon insrera dans une plante indicatrice saine hautement sensible la maladie. Si cette plante indicatrice montre les symptmes de la maladie, on saura alors comment viter que le virus ne se propage.
Physiologie
La greffe peut se concevoir comme la cicatrisation dune plaie dans laquelle on insre un morceau dune autre plante. Sur le plan physiologique, le processus est identique : division rapide des cellules mristmatiques, suivie dune diffrenciation de ces cellules, qui reconstituent les organes endommags. Une plante bien greffe possde non seulement la stabilit physique dune plante intgre mais aussi la mme autonomie de fonctionnement ds lors que les cellules du phlome et les cellules du xylme sunissent.
La cicatrisation
La greffe se cicatrise comme suit : Alignement des cambiums vasculaires. La personne qui pratique la greffe place le greffon rcemment sectionn en contact direct avec le porte-greffe, qui aura aussi t frachement coup. Il est impratif que les cambiums des deux plantes se touchent. Cicatrisation de la plaie. Les cellules endommages par la coupure exsudent une matire ncrotique noire. Formation du cal. La couche suivante de cellules cambiales, qui na pas t endommage, produit un grand nombre de cellules parenchymateuses (tissulaires) qui forment un cal, lequel assure le lien mcanique entre le greffon et le porte-greffe. Formation du cambium. Certaines cellules du cal salignent sur le cambium du greffon et du porte-greffe et se transforment en cellules cambiales. Formation du tissu vasculaire. Les nouvelles cellules cambiales forment des cellules secondaires de phlome et de xylme, tablissant ainsi une liaison vasculaire ferme entre les deux plantes.
Priderme (corce botanique vraie) Cortex Phlome
Terminologie de la greffe Ecorce = priderme, cortex, phlome et cambium vasculaire Bois = xylme secondaire et moelle (ventuellement)
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Cambium vasculaire Xylme secondaire Moelle Xylme et phlome de cicatrisation et formation dun nouveau cambium vasculaire
Greffon
Cal
Phlome
Cambium vasculaire
{
Porte-greffe Xylme
Stades 1 & 2
Stade 3
Stade 4
Stade 5
Figure 4-2. En haut : terminologie de la greffe (corce, bois, tissu) et coupe transversale schmatique dune tige dune jeune plante ligneuse. En bas : coupe longitudinale schmatique de la greffe diffrents stades.
nouvelles cellules. Les cellules existantes du greffon et du porte-greffe ne changent pas de position et ne sunissent pas.
Le greffage
Conditions ncessaires la cicatrisation

Pour que la greffe puisse prendre, plusieurs conditions doivent tre runies. Les cambiums du greffon et du porte-greffe doivent tre troitement en contact pour que les nouvelles cellules puissent former un systme vasculaire secondaire. Les nouvelles cellules ont une paroi assez mince et ne sont gure protges contre la dessiccation. Il faudra donc veiller ce que la greffe soit suffisamment humidifie. On y parviendra gnralement en appliquant sur la greffe un pansement ou de la cire greffer. Dans le mme temps, il faudra assurer la plante un apport suffisant en oxygne car les nouvelles cellules, en plein dveloppement, ont un mtabolisme trs lev. Dans certains cas (par exemple les ceps de vigne), lapplication de cire greffer empche la greffe de bien prendre, peut-tre parce que les tissus de la plante sont suffoqus. La temprature ambiante affecte aussi la cicatrisation. Pour la plupart des plantes, la temprature idale se situe entre 15 et 30 C ; pour certaines espces tropicales, elle doit parfois tre plus leve. Au-dessous de cette temprature, lactivit mtabolique est trop faible pour
Le greffage
garantir une croissance cellulaire suffisante ; au-dessus, les cellules dprissent et la greffe choue. Lhumidit et la temprature leves requises pour assurer le succs de la greffe peuvent favoriser lapparition de bactries et de champignons. Il est donc indispensable de pratiquer la greffe avec le plus grand soin et dans des conditions dhygine irrprochables. Lactivit physiologique du greffon et du porte-greffe peut influer sur la cicatrisation. Dans
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les rgions tempres, la plupart des arbres feuilles caduques doivent tre greffs au moment o leur activit mtabolique est son point culminant, alors que le transfert des assimilats est intense. Cest gnralement le cas juste avant ou juste aprs lclatement des bourgeons. Pour beaucoup despces tropicales sempervirentes, dont bon nombre fleurissent et fructifient simultanment, il est impossible de discerner un comportement aussi net. Si une scheresse prolonge a induit la dormance, la priode qui prcde le dbut des pluies est sans doute le meilleur moment pour pratiquer la greffe. Outre ces facteurs exognes susceptibles dinfluer sur le succs de la greffe, il existe des facteurs endognes propres chaque espce et chaque clone. Certaines espces se greffent plus facilement que dautres. On pense que le succs de la greffe est li la rapidit avec laquelle se forme le cal et la vigueur de ce dernier, ou encore la capacit du cal aligner exactement les formations cellulaires qui doivent correspondre, en particulier le rticulum endoplasmique des deux partenaires de la greffe (Kollmann, 1992). Chez les espces qui cicatrisent vite, les nouvelles cellules sont protges contre la dessiccation et ont donc de meilleures chances de survie que les cellules des plantes chez lesquelles la formation du cal se fait lentement et mal. Une incompatibilit entre les tissus peut aussi tre cause dchec. On reviendra plus tard sur ce dernier point.
Relations entre le porte-greffe et le greffon

Le greffage a notamment pour but de tirer parti de linfluence dun porte-greffe sur un greffon en termes de rsistance aux ravageurs et aux maladies, de croissance ou de dveloppement. Certains porte-greffes sont tolrants ou rsistants aux nmatodes, aux champignons, aux bactries, aux virus, la scheresse ou la salinit. Le porte-greffe peut aussi affecter la croissance et le dveloppement de larbre, sa maturation, la qualit de ses fruits et sa productivit. La rsistance aux facteurs qui touchent directement le systme racinaire est assez facile comprendre. La constitution gntique de certains cultivars et de certaines varits ou provenances permet la plante de survivre et de crotre, mme dans des conditions dfavorables. Ceci peut rsulter de certaines proprits des tissus racinaires : rsistance mcanique, inhibiteurs chimiques, grande vigueur, meilleure capacit dassimilation des lments nutritifs. Ces proprits ne disparaissent pas lorsquun greffon dune plante diffrente est greff sur le porte-greffe, puisque linformation gntique ne sen trouve pas modifie. Il existe cependant des influences plus complexes qui ne peuvent sexpliquer par de simples phnomnes mcaniques, notamment linfluence du systme racinaire sur la croissance, la productivit et la qualit. Diverses explications ont t proposes, mais elles ne sont pas cohrentes et semblent varier selon les espces. Une explication couramment avance est que le systme vasculaire transporte aussi bien vers le haut que vers le bas les assimilats et les substances de rserve, ainsi que les rgulateurs de croissance endognes et autres substances influant sur la croissance, la floraison ou la fructification. Les cytokinines, qui favorisent la division cellulaire, sont le plus souvent produites par la pointe des racines puis sont achemines vers le haut. Une influence du systme racinaire sur la division cellulaire nest donc pas inattendue. Par ailleurs, il se peut que la greffe gne le flux vasculaire et donc la quantit deau et de rgulateurs de croissance transporte, provoquant une situation de stress lger qui induirait une floraison prolifique. Des expriences lappui de cette thorie ont montr quune autogreffe, cest--dire le greffage dun greffon sur son propre systme racinaire, augmentait la production de fruits (Hodgson et Cameron, 1935). On notera que, inversement, le greffon peut avoir une influence sur le porte-greffe. Ces effets sont souvent indsirables, comme par exemple linfection dun porte-greffe sensible par un virus transmis par le greffon.
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Incompatibilits
Les incompatibilits sont souvent cites comme principaux obstacles la prise de la greffe. Elles peuvent effectivement se produire et il convient den tenir compte (Feucht, 1987). En rgle gnrale, plus les plantes greffes sont proches sur le plan botanique, mieux la greffe devrait prendre. Le greffage au sein dun clone consiste greffer un greffon sur la plante dont il est issu ou sur une autre plante provenant du mme clone ; ce type de greffe donne gnralement de bons rsultats.
Le greffage
Le greffage entre clones dune mme espce, par exemple Mangifera indica varit cultive Kent sur Mangifera indica race indigne, est aussi considr comme une pratique normale ; ce type de greffe russit dans la plupart des cas. Nanmoins, des ractions dincompatibilit ont parfois t observes au sein de certaines espces. Le greffage entre espces dun mme genre russit loccasion, mais se solde souvent par un chec. Dans les rgions tempres, on pratique couramment la greffe damandiers, dabricotiers et de pruniers (Prunus amygdalyna, P. armeniaca et P. domestica, respectivement) sur des pchers (P. persica). On ne peut pas, en revanche, pratiquer de greffes entre amandiers et abricotiers. Toute espce appartenant au genre Citrus peut tre greffe sur une autre espce du mme genre. Le greffage entre genres dune mme famille russit rarement. On citera, parmi les russites, le greffage de loranger feuille trifoli (Poncirus trifoliata) utilis commercialement comme portegreffe nanisant pour loranger (Citrus sinensis). Le greffage entre familles na abouti jusquici que dans certaines expriences isoles et surtout avec des plantes annuelles sur lesquelles les incompatibilits napparaissent que
Le greffage
tardivement. Un exemple qui mrite dtre cit, et qui nous a beaucoup aid comprendre la manire dont une greffe prend, est le greffage de Vicia Faba sur Helianthus annuus utilis comme porte-greffe (Hollmann, 1992). Les symptmes dincompatibilit napparaissent pas forcment tout de suite ; ils ne se manifestent parfois que des annes aprs la greffe. Cest ainsi que, sous leffet dune tempte, un
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tronc darbre se brisera lendroit prcis o il t greff. Les symptmes dincompatibilit les plus courants sont les suivants :
Echec total de la greffe, qui ne prend pas. Dfoliation prcoce des plantes feuilles caduques, dclin de la croissance vgtative, dprissement des pousses et mauvais tat de sant gnral. Mort prmature des arbres aprs quelques annes ou mort dans la ppinire. Diffrences de croissance ou de vigueur marques entre le greffon et le porte-greffe, avec surcroissance de la partie situe au-dessus ou au-dessous de la greffe, ou au point de jonction. Diffrences de comportement entre le greffon et le porte-greffe lors du redmarrage de la croissance aprs une priode de dormance due la scheresse ou des tempratures anormalement basses. Rupture nette entre les deux partenaires de la greffe au point de jonction.
Sauf rupture totale, les symptmes dcrits ci-dessus, sils ne concernent que des cas isols, ne sont pas ncessairement le signe dune incompatibilit. On peut parfois contourner la difficult en recourant un troisime cultivar mutuellement compatible, appel sujet intermdiaire, que
lon insre entre le porte-greffe et le greffon. Ce sujet intermdiaire relie les deux partenaires de la greffe sans les empcher dexprimer leurs caractres respectifs.
Les diffrents types de greffe

La greffe terminale
La greffe terminale est la mthode de greffage la plus rpandue parce quelle est simple et quelle donne de bons rsultats tant avec les jeunes plantes quavec les arbres matures. On emploie souvent la greffe terminal en couronne sur de vieux arbres, car cette technique fonctionne avec des greffons beaucoup plus fins que le porte-greffe. Pour greffer de vieux arbres, on procde gnralement en insrant deux greffons de petite taille de chaque ct de la fente. Il importe alors que les greffons soient coups de telle manire que la partie en forme de coin soit lgrement plus large que la fente du porte-greffe dont la circonfrence extrieure est plus grande.
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La greffe langlaise simple et la greffe langlaise double

La greffe langlaise simple consiste lier ensemble un greffon et un porte-greffe coups obliquement. Cest une mthode simple mais qui exige une certaine pratique car il faut que les deux faces, celle du greffon et celle du porte-greffe, aient la mme inclinaison et correspondent exactement. Lorsquon ligature les deux morceaux, il faut veiller ce quils restent bien en place. Cette mthode est idale pour les plantes dont la tige renferme beaucoup de moelle. La greffe langlaise double est une version plus sre de la greffe langlaise simple. Elle consiste pratiquer une seconde entaille verticale peu profonde aux deux tiers de la premire coupure en partant de la pointe, sur le greffon et sur le porte-greffe. Les languettes du greffon et
Figure 4-3. Greffe terminale en fente (Mudge et al., 1992)
Le greffage
du porte-greffe sont ensuite imbriques et la greffe ligature. Ce type de greffe prsente un double avantage : dune part, il permet de mettre en regard un plus grand nombre de cellules cambiales et, dautre part, il permet dattacher le greffon plus fermement sur le porte-greffe. Cette mthode nest praticable que sur du matriel vgtal encore malable, cest pourquoi elle est souvent employe sur de jeunes plantes encore peu lignifies.
Le greffage
Figure 4-4. Greffe langlaise simple (MacDonald, 1996)

Prparation du porte-greffe
Une longue coupure oblique de 2,5 6 cm de long est pratique au sommet du porte-greffe Une deuxime entaille est pratique aux deux tiers de la premire coupure en partant de la pointe
Prparation du greffon
Une coupure oblique est pratique la base du greffon, dune longueur gale celle de la coupure pratique sur le porte-greffe
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Le porte-greffe prpar
Une deuxime entaille est pratique sous la premire, comme pour le porte-greffe La greffe est ligature et enduite de cire greffer
Le porte-greffe et le greffon sont imbriqus
Figure 4-5. Greffe langlaise double (Hartmann et al., 1997)
Greffe par approche

Ce type de greffe convient aux combinaisons difficiles. Le greffon comme le porte-greffe restent intacts jusqu ce que la greffe ait bien pris. Ceci leur permet de se servir de leur propre systme vasculaire pour assimiler et absorber leau.
Figure 4-6. Greffe par approche (Mudge et al., 1992)
Ecussonnage en T ou greffe en cusson

Lcussonnage doit en gnral se faire lorsque lcorce se dtache facilement du greffon et du porte-greffe, en priode dactivit mtabolique intense. Lcussonnage en T est surtout pratiqu pour la multiplication des arbres fruitiers (citrus). Il se pratique gnralement sur de petits plants de ppinire denviron 6 25 mm de diamtre, en priode de croissance active, de sorte que lcorce se dtache facilement du bois.
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Bourgeon
Figure 4-7. Ecussonnage en T (MacDonald, 1986)
Le greffage
Ecussonnage en plaque
Cette mthode est largement employe pour les essences tropicales corce paisse, comme lhva. Elle peut tre pratique sur des plantes-mres ayant jusqu 10 cm de diamtre. Un rectangle dcorce est dcoup sur le porte-greffe, le plus souvent laide dun couteau spcial deux lames. Un rectangle dcorce dgales dimensions portant un bourgeon est prlev sur le donneur et fix sur le porte-greffe lendroit prpar cet effet.
Prparation du porte-greffe
A laide dun couteau deux lames, on pratique horizontalement deux incisions parallles sur le tiers de la circonfrence.
Prparation du bourgeon
A laide dun couteau deux lames, on pratique horizontalement deux incisions parallles de chaque ct du bourgeon.
Le greffage
On pratique ensuite deux incisions verticales sur les cts pour former un rectangle.
On pratique ensuite deux incisions verticales sur les cts. Lcusson portant le bourgeon est ensuite enlev.
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Insertion du bourgeon dans le porte-greffe
Lorsque le greffon est prt, le rectangle dcorce est t du porte-greffe et le greffon est insr sa place. On pourra recouper lgrement lcusson, au besoin, pour quil sinsre parfaitement dans le rectangle prpar cet effet. On veillera ce que les bords soient bien aligns.
La plaquette doit tre troitement ajuste dans le rectangle sur les quatre cts. Elle est alors prte pour le bandage.
La greffe est bande laide de ruban greffer ou de bandelettes en polythylne. On veillera bien couvrir toutes les coupures mais on laissera le bourgeon bien dgag.
Figure 4-8. Ecussonnage en plaque (Hartmann et al., 1997)
Bibliographie
Feucht W. 1987. Graft incompatibility of tree crops : An overview of the present scientific status. Acta Horticulturae. 227:33-41. Hartmann HT, Kester DE, Davies FT and Geneve RL. 1997. Plant Propagation. Principles and Practices. 6th ed. New Jersey: Prentice Hall. Hodgson RW and Cameron SH. 1935. On bud union effect in citrus. California Citrogenesia 20(12):370. (cit in Hartmann et al., 1997). Kollmann R. 1992. Zellkommunikation bei Transplantationen an Pflanzen. Biologie in unserer Zeit. 22 (5). 264-273. Siniscalco C. and Pavolettoni L. 1988. Rejuvenation of Eucalyptus X trabutii by successive grafting. Acta Horticulturae 227:98-100. Thouin A. 1821. Monographie des greffes, ou description technique. Royal Horticultural Society Library (cit in Hartmann et al., 1997).
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Le greffage
Le greffage - Travaux pratiques

Objectifs
Les travaux pratiques permettront aux stagiaires dessayer diffrents modes de greffage sur diverses essences agroforestires ou plantes ornementales.
Les stagiaires devraient travailler par deux et chaque groupe devrait pratiquer quatre greffes pour chaque mode de greffage dcrit dans ce manuel. Il est conseill davoir proximit des spcimens de greffes russies, des fins de comparaison, en particulier si les travaux pratiques ne durent quune aprs-midi, auquel cas les stagiaires ne pourront observer les rsultats de leur travail.
Le greffage
Matriel ncessaire
Le matriel et les outils ci-aprs sont ncessaires :
1.
Un couteau greffer ou cussonner (greffoir/cussonnoir) de bonne qualit et bien afft. Sil est vrai que nimporte quel couteau bien aiguis peut faire laffaire, long terme, lachat dun greffoir savrera rentable par sa durabilit et par la qualit uniforme des entailles. Il existe des greffoirs pour droitiers et pour gauchers. Les cussonnoirs possdent une lame
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recourbe et un bec qui permet de soulever la languette dcorce pour la greffe en T. Il existe aussi des couteaux deux lames pour la greffe en cusson. Des outils encore plus perfectionns ont t mis au point pour faciliter lembotement des deux parties de la greffe ; ils permettent de pratiquer sur le porte-greffe une encoche absolument identique celle pratique sur le greffon. Toutefois, ces outils ne fonctionnent bien que si le greffon et le portegreffe ont peu prs le mme diamtre. Sur le matriel ligneux plus tendre, on pourra se servir de scalpels ou de lames de rasoir, quil faudra toutefois manier avec une grande prudence.
2.
Une pierre aiguiser de texture fine, pour affter les greffoirs et les cussonnoirs mousss au contact de la matire ligneuse.
3.
De lalcool 90 pour dsinfecter les outils.
4.
Des scateurs, des pulvrisateurs et des sacs en plastique pour collecter les greffons.
5.
Des glacires et des poches de glace pour conserver les greffons au frais pendant quelque temps.
6.
Diffrents types de pansements pour greffage ou cussonnage (bandelettes de polythylne, raphia, bandes de caoutchouc, rubans adhsifs, rubans biodgradables), de 1 cm de large environ.
7.
De la cire greffer ou de la peinture latex blanche pour couvrir la greffe et empcher la dessiccation des tissus.
8.
De petits sacs de polythylne transparents (10 x 20 cm) pour couvrir la partie suprieure des greffes pratiques sur les petites plantules et de la ficelle fine.
9.
Un choix de plantules en pots dessences agroforestires ou de plantes ornementales destines fournir les porte-greffe, les greffons et les bourgeons.
Aiguiser les greffoirs et les cussonnoirs

On utilisera une pierre aiguiser plate et texture fine. On humectera la pierre avec de leau ou, pour obtenir de meilleurs rsultats, avec de lhuile dilue dans de la paraffine. La lame du couteau doit former un angle de 30 avec la pierre aiguiser. On afftera la lame jusqu obtenir un bon tranchant. Si lon doit aiguiser un couteau dj trs mouss, on se servira dabord dune pierre texture moyenne puis dune pierre texture fine pour parachever. On promnera la lame sur toute la largeur de la pierre pour que la surface de cette dernire reste plate.
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Collecter les greffons et le bois de greffe

On collectera, sur un arbre mature, des pousses jeunes et vigoureuses denviron 20cm de long, dont on tera toutes les feuilles et la pointe. On rassemblera toutes ces pousses dans un sachet en plastique dont lintrieur aura t asperg deau. On apposera sur le sachet une tiquette indiquant clairement le nom de lespce et le numro du cultivar ou du clone et on placera immdiatement le sachet dans une glacire. On pourra aussi, dans le cadre de ces travaux pratiques, prlever du bois de greffe sur des plantules.
La greffe terminale (voir Figure 4-3, page 73)

a) A laide dun greffoir bien aiguis, tter la plantule porte-greffe lendroit o son paisseur est celle dun crayon, 20-30 cm du sol ; b) Pratiquer une fente de 2,5 cm de profondeur sur le sommet de la tige avec un couteau lame plate et mince en prenant soin de ne pas fendre la souche en dessous de lincision ; c) Prendre un greffon de la mme paisseur dont on taillera la base en forme de coin effil, en
Le greffage
Travaux pratiques
veillant ce que la partie ainsi taille soit lgrement plus longue que la fente pratique sur le porte-greffe. Enfoncer le coin fermement dans la fente, en faisant correspondre les cambiums vasculaires du porte-greffe et du greffon. Pour faciliter la formation du cal, il est important quune partie de lentaille du greffon en demi-lune soit visible au-dessus du porte-greffe. d) Ligaturer la greffe fermement avec du ruban greffer ou des bandelettes de polythylne, en veillant ce que le greffon reste bien en place durant lopration ; e) Recouvrir le greffon ainsi quune partie du porte-greffe sous la greffe (plusieurs centimtres) dun sac de polythylne transparent dont lintrieur aura t asperg deau. Serrer fermement autour de la tige. Couper un coin du sac et souffler comme dans un ballon. Faire un noeud et serrer avec de la ficelle. Ce faisant, on augmentera lhumidit et la teneur en CO2 lintrieur du sac et on empchera quil ne se colle au greffon, ce qui pourrait provoquer des infections ; f) Placer la plante greffe lombre et bien larroser. Enlever priodiquement toutes les pousses latrales qui apparaissent sous la greffe ;
Le greffage
g)
Lorsque le greffon commence produire des pousses, ventiler graduellement en pratiquant des ouvertures dans le sac, puis ter le sac.
La greffe langlaise double (voir Figure 4-5, page 74)

a) A laide dun greffoir bien aiguis, tter la plantule porte-greffe lendroit o elle a lpaisseur dun crayon et 20-30 cm du sol ; b) c) d) Couper obliquement le porte-greffe sur 2,5 6 cm ; Pratiquer sur le greffon une coupure identique ; Sur le porte-greffe et sur le greffon, pratiquer, au tiers de la coupure partir du sommet, une entaille parallle la premire et longue de moiti ; e) Imbriquer le porte-greffe et le greffon en veillant ce que les couches cambiales affleurent bien ; f) Ligaturer la greffe fermement avec du ruban greffer ou des bandelettes de polythylne, en veillant ce que le greffon reste bien en place durant lopration ; g) Recouvrir le greffon ainsi quune partie du porte-greffe sous la greffe (plusieurs centimtres) dun sac de polythylne transparent dont lintrieur aura t asperg deau. Serrer fermement autour de la tige. Couper un coin du sac et souffler comme dans un ballon. Faire un noeud et serrer avec de la ficelle. Ce faisant, on augmentera lhumidit et la teneur en CO2 lintrieur du sac et on empchera quil ne se colle au greffon, ce qui pourrait provoquer des infections ; h) Placer la plante greffe lombre et bien larroser. Enlever priodiquement toutes les pousses latrales qui apparaissent sous la greffe ; i) Lorsque le greffon commence produire des pousses, ventiler graduellement en pratiquant des ouvertures dans le sac, puis ter le sac.
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La greffe par approche (voir Figure 4-6, page 75)

a) b) Choisir deux plantules de taille identique ; Enlever une tranche dcorce et de bois de 2,5 5 cm de long sur les deux tiges, lendroit o lon prvoit de pratiquer la greffe. La coupure doit avoir la mme dimension et la mme forme sur les deux tiges pour que les couches cambiales puissent affleurer parfaitement. La coupure doit tre aussi lisse et plate que possible ; c) d) e) Ligaturer la greffe, puis appliquer de la cire greffer ou bander avec du parafilm; Protger les deux plantes et bien les arroser jusqu ce que la greffe ait pris ; Lorsque la greffe a bien pris, ce qui peut prendre plusieurs mois, couper le porte-greffe audessus de la greffe et le greffon au-dessous.
La greffe en cusson ou cussonnage en T (voir Figure 4-7, page 75)

a) Choisir une plantule saine avec une corce lisse. La greffe en cusson prend mieux si lcorce se dtache facilement du bois ; b) Faire une fente verticale sur une partie lisse du porte-greffe, puis une coupure horizontale juste au-dessus pour former un T ; c) d) Soulever lcorce aux deux coins ; Effeuiller un petit rameau qui servira de bois bourgeons en conservant 1cm du ptiole pour pouvoir manipuler plus aisment les bourgeons ; e) Dcouper un bourgeon sur le bois bourgeons en commenant 1 cm au-dessous du bourgeon et en finissant 2,5 cm au-dessus. Faire une coupure horizontale au bout et faire glisser lcusson pour le dtacher du bois. Lcusson devrait tre aussi mince que possible tout en tant ferme ; f) g) Insrer lcusson dans le T en le poussant vers le bas sous les bords de lcorce ; Assujettir le bourgeon laide de ruban greffer ou de parafilm, en veillant ce que le bourgeon demeure apparent ; h) i) Aprs cicatrisation, couper le porte-greffe au-dessus du bourgeon ; Enlever toute pousse qui pourrait apparatre au-dessous du bourgeon.

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La greffe en cusson ou cussonnage en plaque (voir Figure 4-8, page 76)

a) b) Choisir un porte-greffe ayant jusqu 10 cm de diamtre dont lcorce se dtache facilement ; A laide dun couteau deux lames, pratiquer deux coupures horizontales parallles denviron 2,5 cm de longueur ; c) Raccorder ces deux coupures par deux autres coupures verticales que lon fera laide dun couteau ordinaire et enlever le morceau dcorce ainsi dcoup ; d) Prlever sur le bois de greffe un morceau dcorce identique ;
Le greffage
e)
Faire glisser le bourgeon de ct pour le dtacher avec prcaution afin que la partie ligneuse du bourgeon ne se casse pas ;
f)
Insrer lcusson sous forme de plaquette dans le porte-greffe. Il est indispensable que lcusson tienne exactement dans lchancrure pratique, surtout en haut et en bas, pour que le tissu vasculaire puisse se constituer ;
g)
Ligaturer fermement pour ne pas laisser sous lcusson des poches dair qui pourraient le desscher, en laissant le bourgeon expos ;
h) i)
Aprs cicatrisation, couper le porte-greffe au-dessus du bourgeon ; Enlever toute pousse qui pourrait apparatre au-dessous du bourgeon.
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Le greffage
it Un5
Le marcottage
Axes de formation
A la fin de lunit sur le marcottage, les participants pourront : Enumrer et expliquer diffrentes techniques de marcottage Expliquer les principes du marcottage et indiquer dans quelles conditions cette technique peut russir
agroforestires
Lunit comporte un expos thorique de 30 45 minutes. Cet expos sera complt, si possible, par des travaux pratiques ou des dmonstrations, dune dure de 4 heures.
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Lexpos thorique sera tay par des notes de cours. Le matriel ncessaire pour les travaux pratiques et les dmonstrations est indiqu dans la section consacre aux travaux pratiques.
Rsum de lunit
Le terme marcottage recouvre toutes les mthodes de multiplication qui consistent laisser des racines se former tandis que la tige est encore attache la plante-mre. Ce nest quaprs la formation des racines que lon dtache la marcotte et quon la met en terre. En horticulture, les techniques de marcottage les plus rpandues sont le marcottage arien, le marcottage par couchage et le marcottage par buttage. Le marcottage arien joue un rle important dans la multiplication des arbres fruitiers tropicaux. Le marcottage est souvent utilis pour les espces qui senracinent difficilement, car la tige intacte assure une alimentation continue en eau, en lments nutritifs et en
Le marcottage
Pratiquer efficacement le marcottage pour multiplier certaines essences
hormones vgtales de lendroit o se formeront les racines. La dshydratation, problme courant du bouturage, est ainsi vite, tout comme le lessivage des nutriments, qui se produit souvent dans les bacs de bouturage nbulisateur. Les marcottires servent pendant des annes ; cest pourquoi il faut observer des conditions dhygine rigoureuses pour empcher la propagation des ravageurs et des maladies, en particulier les nmatodes et les virus (voir Unit 2). Le marcottage par couchage se pratique en gnral sur des arbustes trs ramifis qui produisent des rameaux longs et flexibles. Les jeunes rameaux sont flchis et fichs en terre, en formant un U, environ 15 20 cm de la pointe. En saison, les tiges forment des racines sous terre. Pour favoriser lenracinement, on peut soit inciser les rameaux, soit appliquer des auxines, ou les deux. On laisse gnralement les rameaux
Le marcottage
grandir pendant une ou deux saisons avant de sectionner la partie racine et de la planter lombre. Le marcottage arien peut se pratiquer sur presque toutes les plantes ligneuses. Cest une excellente mthode pour multiplier en petit nombre des arbres de diverses espces. On opre en pratiquant sur lcorce des pousses de la saison prcdente une incision en anneau sur laquelle on applique deux poignes dun substrat lger et humide,
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comme par exemple de la mousse, de la sciure de bois ou de la tourbe de noix de coco. On recouvre lincision dun film de matire plastique pour viter la dshydratation puis dune feuille daluminium pour viter la surchauffe. On peut aussi appliquer des auxines pour favoriser lenracinement. Les espces suivantes sont communment multiplies par marcottage arien : Mangifera indica, Ficus spp., Citrus auriculiformis et Persea americana. Le marcottage par buttage est pratiqu sur des plantes qui ont t svrement rabattues. Les nouvelles pousses doivent tre continuellement recouvertes de sol humide, de sciure de bois ou de tout autre substrat lger jusqu la moiti de leur hauteur environ. A la fin de la saison, des racines se seront formes la base des pousses. On pourra alors sectionner ces pousses et les planter.
Pour mieux comprendre cette unit, on consultera avec profit les ouvrages suivants : Hartmann HT, Kester DE, Davies FT and Geneve RL. 1997. Plant propagation : Principles and practices. 6th ed. New Jersey, USA: Prentice Hall. MacDonald B. 1986. Practical woody plant propagation for nursery growers. Oregon, USA: Timber Press. Mudge KW, Mwaka A, Isutsa D, Musoke R, Foster D and Ngoda BJM. 1992. Plant propagation a teaching resource packet. USA: Cornell University.
Le marcottage : principes et techniques

Zac Tchoundjeu et Hannah Jaenicke World Agroforestry Centre
Introduction
Le terme marcottage recouvre toutes les mthodes de multiplication qui consistent laisser des racines se former tandis que la tige est encore attache la plante-mre. Ce nest quaprs la formation des racines que lon dtache la marcotte et quon la met en terre. Le marcottage est souvent utilis pour les espces qui senracinent difficilement, car la tige intacte assure lalimentation continue en eau, en lments nutritifs et en hormones vgtales de lendroit o se formeront les racines. La dshydratation, problme courant du bouturage, est ainsi vite, tout comme le lessivage des nutriments, qui se produit souvent dans les bacs de
observer des conditions dhygine rigoureuses pour empcher la propagation des ravageurs et des maladies, en particulier les nmatodes et les virus (voir Unit 2). Dans la mesure o le marcottage est souvent pratiqu sur des espces qui forment difficilement des racines, on peut sattendre ce quil faille plusieurs mois pour voir apparatre des racines sur la branche marcotte. En agroforesterie, les techniques de marcottage les plus rpandues sont le marcottage arien, le marcottage par couchage et le marcottage par buttage. Pour les arbres fruitiers tropicaux, le marcottage arien est la principale technique employe. Les techniques de marcottage ont t mises au point dans les rgions tempres, o le froid induit une periode de dormance. Elles peuvent cependant tre adaptes aux rgions tropicales, o ce sont les pluies qui sont dcisives pour la croissance.
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Le marcottage arien
Le marcottage arien peut se pratiquer sur presque toutes les plantes ligneuses. Cest une excellente mthode pour multiplier en petit nombre des arbres de diverses espces. Lincision, pratique sur une pousse relativement jeune, conduit laccumulation dhormones vgtales radicignes lendroit o elle a t pratique, sans gner pour autant lalimentation en eau et en nutriments de la pointe de la pousse. On choisira des pousses jeunes et vigoureuses, mais en mme temps suffisamment ligneuses pour pouvoir supporter le traitement. Les meilleures pousses sont celles de la saison prcdente. Il semble que le dveloppement individuel de la pousse soit plus important que la periode de lanne pendant laquelle se pratique le marcottage (Garner et al. 1976). On choisira soigneusement lendroit o pratiquer lincision. La longueur idale de la pousse au-dessus de lincision se situe entre 20 et 60 cm. On vitera ainsi de se trouver face de grosses pousses racines qui pourraient prouver ensuite des difficults dinstallation au champ. On tera de la pousse un anneau dcorce de 1 5 cm de large en pratiquant deux incisions circulaires et en
Le marcottage
bouturage nbulisateur. Les marcottires servent pendant des annes ; cest pourquoi il faut
enlevant lcorce entre ces deux incisions. Il est indispensable denlever un anneau suffisamment large pour empcher la formation dun cal qui fermerait la plaie ; on prendra garde de ne pas endommager la pousse pendant lopration. On vitera galement de couper dans le bois pour ne pas interrompre lalimentation en eau et augmenter les risques de cassure. Des substances radicignes, comme par exemple un pralin de poudre dauxines, peut tre appliqu et mlang, le cas chant, avec un fongicide. Deux poignes dun substrat appropri sont ensuite appliques tout autour de la plaie. Puis la plaie est enserre dans du plastique et enveloppe dune feuille daluminium pour prserver lhumidit et empcher la surchauffe. Un bon substrat doit tre lger et suffisamment poreux pour que loxygne puisse circuler autour de la plaie, tout en possdant une capacit leve de rtention deau. La mousse, la fibre de noix de coco (coir), la sciure de bois, la vermiculite ou un mlange de sol additionn de lun quelconque de ces substrats fera laffaire. On pourra ajouter au substrat un peu de sol prlev sous un arbre dj bien install pour faciliter lenracinement, en
Le marcottage
particulier pour les espces qui ont besoin de microsymbiotes. Pour amliorer le taux de survie des marcottes racines, on taillera les feuilles ou on les enlvera carrment et on raccourcira la pousse quelques jours avant de la sparer de la plantemre. Ds quon prlve la marcotte, on doit la placer dans un conteneur avec de leau et la mettre en pot sans tarder. On utilisera pour la mise en pot un mlange lger mais nutritif et on placera la marcotte lombre, de prfrence dans de bonnes conditions dhumidit, par exemple
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dans un bac de bouturage.
Figure 5-1. Marcottage arien (MacDonald, 1986)
Les espces suivantes sont communment multiplies par marcottage arien : manguier, Ficus spp., Citrus auriculiformis et Persea americana. Cette mthode convient particulirement bien pour les rgions humides. Elle peut aussi russir dans des climats plus secs, condition de prendre bien soin de la marcotte. Comme pour nimporte quelle autre mthode de multiplication vgtative, une humidit suffisante est la clef de la russite. Les marcottes devraient donc tre inspectes rgulirement et humidifies si ncessaire.
Le marcottage par couchage

Le marcottage par couchage se pratique en gnral sur des arbustes trs ramifis qui produisent des rameaux longs et flexibles aprs recpage. Les plantes sont recpes la fin de la priode de dormance. Les jeunes rameaux sont ploys pour tre fichs en terre environ 15-20 cm de la pointe de la pousse, formant ainsi un U. Durant la campagne culturale, les rameaux grandiront et formeront des racines lendroit o ils auront t enterrs. Pour favoriser lenracinement on pourra inciser les rameaux et y appliquer des auxines. On laisse gnralement les tiges grandir pendant une ou deux saisons avant de sectionner la tige racine et de la planter lombre. Pour que lopration russisse, il importe que le substrat utilis pour le marcottage reste humide en permanence, sans pour autant tre engorg, et dviter les maladies vhicules par le sol.
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Au dbut du printemps ou de lautomne, on plie les jeunes rameaux jusquau sol. On recourbe ensuite la pointe du rameau pour former un coude. On recouvre cette partie de sol et on la maintient en place laide dun arceau en fer ou dun piquet en bois. On incise parfois le rameau lendroit o il est enterr pour stimuler lenracinement. Le processus est donc le suivant : incision, coudage, fixation en terre, et annelage le cas chant.
Des racines apparaissent sur la partie souterraine du rameau prs de la courbure
La marcotte racine est spare de la plante-mre
Figure 5-2. Marcottage par couchage (Hartmann et al., 1997)
Le marcottage par buttage

Le marcottage par buttage est pratiqu sur des plantes qui ont t fortement rabattues (jusqu 2,5-5 cm au-dessus du sol) et qui ont la vigueur ncessaire pour produire beaucoup de pousses vigoureuses. Les nouvelles pousses doivent continuellement tre recouvertes de terre humide, de sciure de bois ou de tout autre substrat lger jusqu la moiti de leur hauteur environ. Si le buttage est trop haut, on risque denterrer les feuilles, ce qui aurait pour consquence daffaiblir la plante. A la fin de la saison, des racines seront apparues la base des pousses. On pourra alors sectionner
Le marcottage
ces racines et les planter. Avec cette mthode aussi, le substrat doit tre humidifi en permanence et dpourvu dagents pathognes. Dans la marcottire, on veillera ce que les ranges de plantules soient suffisamment espaces pour permettre un buttage adquat. Un espacement de 1 1,5 m est suffisant (Garner et al., 1976). On laissera les plantes crotre pendant une saison, aprs quoi on les rabattra jusqu 2 5 cm au-dessus du sol de manire stimuler le dveloppement de pousses vigoureuses prtes raciner. Lexprience montre quen contraignant les jeunes pousses grandir travers un treillis mtallique on peut amliorer le succs de lenracinement. Ce processus est appel annlation. Un treillis mailles carres de 0,5 cm sera plac sur la souche avant lapparition des pousses. Les pousses ne pourront se dvelopper quen traversant le treillis et seront ainsi anneles mesure quelles spaissiront. Cette technique de marcottage peut aussi se faire en conteneur avec une plante la fois (Munson, 1982, in Hartmann et al., 1997).
Le marcottage
C
marcottes racines conteneur sans fond
surface du sol
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milieu denracinement
(ii) (ii) (i)
Figure 5-3. Marcottage par buttage MacDonald, 1982)
plante-mre
Figure 5-4. Marcottage en conteneur (Hartmann et al., 1997)
Bibliographie
Garner RJ, Chaudri SA and staff of the Commonwealth Bureau of Horticulture and Plantation Crops. 1976. The propagation of tropical fruit trees. Horticultural Review No. 4. FAO and CAB. Hartmann HT, Kester DE, Davies FT and Geneve RL. Plant propagation : Principles and practices. 6th ed. New Jersey, USA: Prentice Hall. MacDonald B. 1986. Practical woody plant propagation for nursery growers. Oregon USA: Timber Press. Mudge KW, Mwaka A, Isutsa D, Musoke R, Foster D and Ngoda BJM 1992. Plant propagation a teaching resource packet. USA: Cornell University. Munson RH. 1982. Containerised layering of Malus rootstocks. Plant Propagator 28(2): 12-14.
Le marcottage - Travaux pratiques

Objectifs
Lobjectif des travaux pratiques est de permettre aux stagiaires de pratiquer la technique du marcottage arien sur certaines essences agroforestires ou certaines plantes ornementales. Les stagiaires travailleront par deux. Chaque groupe devra pratiquer au moins deux marcottages ariens, comme indiqu ci-dessous. Il est conseill davoir proximit, des fins de dmonstration, plusieurs exemples de marcottage russis pratiqus laide de diffrentes techniques. En effet, si les travaux pratiques ne durent quune aprs-midi, les stagiaires ne seront pas en mesure dobserver le rsultat de leurs travaux avant la fin.
Les outils et le matriel ci-aprs sont ncessaires pour ces travaux pratiques :
Des couteaux de bonne qualit bien aiguiss ou des scalpels, pour couper sans bavure ;
Une pierre aiguiser de texture fine, pour affter les lames des couteaux mousses au contact de la matire ligneuse ;
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De lalcool 90 pour dsinfecter les couteaux ;
De la mousse de tourbe, des fibres de noix de coco, de la sciure de bois humides, ou un mlange de terre et de lune quelconque de ces substances, en vue de former un milieu denracinement lger mais capable de retenir suffisamment dhumidit ;
Des feuilles de plastique de 15 x 22 cm que lon pourra dcouper dans les sacs plastique pour envelopper la marcotte arienne ;
De la petite ficelle et du ruban isolant pour procurer aux marcottes ariennes ltanchit voulue ;
Des feuilles daluminium pour recouvrir les marcottes ariennes ;
Une prparation hormonale (AIB et talc mlangs dans un peu deau pour former un pralin), avec ou sans fongicide, selon lespce considre et les conditions environnementales sur le site ;
Un assortiment dessences agroforestires ou de plantes ornementales pour les travaux pratiques.
Le marcottage
Matriel ncessaire
Travaux pratiques
Marcottage arien
1. A laide dun couteau bien aiguis, pratiquer une incision annulaire sur lcorce dune pousse de la saison prcdente, 20 cm de la pointe environ. 2. Pratiquer une deuxime incision, 3 cm environ sous la premire, et joindre les deux incisions par une coupure. Oter lcorce de la branche. Vrifier quil ne reste aucune connexion vasculaire sur la partie dont on a t lcorce. 3. Appliquer, si on le souhaite, une petite quantit de prparation hormonale la partie suprieure de la coupure. 4. Si la pousse est en position verticale, il est conseill de prparer une petite poche avec la feuille de plastique avant dy placer le substrat denracinement. Positionner la feuille de plastique sous la coupure. La serrer fermement la base laide dune ficelle, puis la rabattre
Le marcottage
sur la coupure de manire former une sorte de poche. Veiller ce que la feuille de plastique puisse tre ouverte par le haut pour quon puisse la remplir facilement. 5. Prendre une ou deux poignes du substrat denracinement humide et couvrir la coupure de telle manire quun tiers du substrat recouvre lcorce au-dessus de la coupure. Le substrat doit tre mouill comme le serait une ponge que lon aurait presse, mais il ne doit pas tre dtremp.
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6.
Tirer la feuille de plastique vers la haut pour bien enserrer la marcotte et refermer le haut par une ficelle. Fixer les deux extrmits de la feuille ainsi que louverture du milieu laide de ruban adhsif isolant.
7. 8.
Couvrir la marcotte laide dune feuille daluminium. Apposer sur la marcotte une tiquette portant la date du jour. Ouvrir priodiquement la feuille de plastique pour vrifier si lhumidit est toujours suffisante.
(voir Figure 5-1)
it Un6
La micropropagation
Axes de formation
A la fin de lunit, les participants pourront : Discuter du potentiel de la micropropagation pour les essences agroforestires
et indiquer dans quelles conditions elle peut russir Enumrer et dcrire quelques-unes des techniques utilises pour la micropropagation
Lunit comporte un expos thorique interactif de 60 minutes tay par les moyens audiovisuels habituels.
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Les stagiaires visiteront, si possible, un laboratoire de micropropagation pour assister une dmonstration de quelques-unes des techniques qui auront t expliques au cours de lexpos.
Lexpos thorique sera tay par des notes de cours et des polycopis (schma du laboratoire, composition des substrats, etc.).
Rsum de lunit
La micropropagation, aussi appele culture de tissus ou culture in vitro, est une technique relativement rcente. Elle exploite la proprit quont les plantes de pouvoir reconstituer une nouvelle plante complte partir de cellules uniques ou de petites quantits de tissu vivant, dans certaines conditions. Dans la mesure o cette technique exige de gros investissements en termes dinfrastructure, dquipement et de matriel, son application ne se justifie que pour des plantes de grande valeur auxquelles on ne
La micropropagation
Expliquer les principes physiologiques qui sous-tendent la micropropagation
peut appliquer avec succs les mthodes traditionnelles de multiplication vgtative. Cette mthode permet de produire des plantes exemptes de virus et elle permet aussi de produire un trs grand nombre de plantes partir dune petite quantit de matriel vgtal.
Toutefois, le matriel vgtal reproduit in vitro en laboratoire, dans des conditions contrles, est trs vulnrable aux attaques de certains micro-organismes (notamment les bactries et les champignons). Il est donc extrmement important de travailler dans un milieu propre, aseptis, voire strile.
La micropropagation
Les plantes ne peuvent pas toutes tre multiplies par micropropagation et, mme pour celles qui peuvent ltre, il importe de prendre en considration certains critres tels que lge de la plante, la saison la plus favorable et la partie de la plante sur laquelle on veut travailler.
Les techniques de micropropagation les plus communes sont : la culture dembryons, la formation de pousses axillaires ou de pousses adventives, les
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microgreffes et lembryogense somatique. Les notes de cours dcriront la procdure suivre.
Pour mieux comprendre cette unit, on consultera avec profit les ouvrages suivants :
Hartmann HT, Kester DE, Davies FT and Geneve RL. 1997. Plant Propagation. Principles and Practices. 6th ed. New Jersey: Prentice Hall. Skoog F and Miller CO. 1957. Chemical regulation of growth and organ formation in plant tissues cultured in vitro. Symposium of the Society for Experimental Biology 11:118-131. Vasil IK and Thorpe TA (eds.) 1994. Plant cell and tissue culture. Dordrecht: Kluwer Academic Publishers, 593 pp.
La micropropagation : principes et techniques

Moses KwapataBunda College, Malawi
Introduction
La micropropagation, ou multiplication in vitro, sentend de toute technique visant multiplier des plantes partir de cellules, tissus ou organes vgtaux dans un milieu artificiel, aseptis et contrl. Lexpression culture de tissus sapplique un ensemble plus vaste de techniques qui visent raliser des cultures de cellules, vgtales ou animales, pour la recherche notamment et pas forcment pour produire un organisme fonctionnel. Ces techniques sont
La micropropagation sest dveloppe au dbut du XXe sicle. A cette poque, des chercheurs se sont aperus que les cellules vgtales possdaient la facult biologique de reproduire une plante complte in vitro, dans de bonnes conditions dquilibre entre phytohormones, minraux, vitamines et sucres. Au dpart, la culture de tissus nintressait que la recherche fondamentale et avait pour but dlucider les mystres entourant la croissance et le dveloppement des plantes. Aujourdhui, elle est exploite des fins commerciales pour produire de larges quantits de propagules saines de cultures horticoles (bananier, ananas, citrus et plantes ornementales) et darbres valeur commerciale (eucalyptus, hva, palmier huile, etc.). Les ppinires commerciales qui utilisent la culture de tissus pour produire des propagules de ligneux et de cultures vivrires se trouvent pour la plupart dans les pays dvelopps, trs peu dans les pays en dveloppement. Ceci rsulte du manque de personnel qualifi, de lignorance des avantages quoffre la micropropagation et de labsence de capitaux pour mettre en place les installations ncessaires. Or la micropropagation est une option parfaitement viable pour obtenir rapidement les quantits de propagules ncessaires pour rpondre la demande trs leve des exploitants agricoles.
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Terminologie
Les dfinitions suivantes, mentionnes au cours de lexpos, sont ncessaires pour bien comprendre en quoi consiste la micropropagation et sur quels principes elle repose. Bourgeons axillaires : Bourgeons dormants dans les aisselles des feuilles. Ces bourgeons peuvent tre rveills par un afflux dhormones conscutif, par exemple, un rabattage de la tige principale. BA/AIB : hormones vgtales. La benzyladnine (BA) est une cytokinine et lacide indole3-butyrique (AIB) est une auxine.
La micropropagation
regroupes sous le terme gnral de biotechnologie.
Cal : cellules indiffrencies qui se forment autour dune plaie. Sous linfluence de certaines hormones et enzymes, les cellules du cal peuvent se diffrencier pour reconstituer certains organes de la plante.
Explant : toute partie dune plante prleve pour la culture de tissus.
Haplode : qui ne possde que lune des deux sries de chromosomes habituelles.
Incuber : crotre dans certaines conditions de temprature, dclairage, de nutrition, etc.
Micropropagation : multiplication de plantes dans des conditions artificielles et contrles,
La micropropagation
dans un substrat contenant des rgulateurs de croissance et un mlange quilibr dlments nutritifs.
Organogense : initiation dun organe partir dexplants in vitro.
Plantule : trs jeune plante se dveloppant partir de cultures incubes.
Polyembryonie : dveloppement de plusieurs embryons aprs reproduction sexue.
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Culture primaire : culture initiale dun explant partir de matriel vgtal parental.

Pro-embryon : produit de la premire division cellulaire (transversale) aprs fertilisation. La cellule apicale se dveloppe ensuite pour former lembryon, tandis que la cellule basale devient le suspenseur, ayant pour fonction dabsorber et de transmettre les nutriments au pro-embryon.
Propagule : plante pleinement dveloppe issue de matriel vgtatif de morceaux de plante, prte tre repique au champ.
Rgnration : production de pousses ou de racines partir dexplants.
Plantule : jeune plante issue dune graine.
Subculture : culture de matriel vgtatif provenant de cultures primaires ou de cultures subsquentes.
Physiologie
La culture de tissus repose sur le principe de lomnipotence ou totipotence, ce qui signifie que, dans des conditions idales, on peut mettre en culture indfiniment les cellules vgtales. Depuis tout rcemment, la culture de tissus peut aussi se pratiquer sur les cellules animales. Pour que les cellules puissent survivre hors de lorganisme, le milieu environnant doit reproduire les conditions optimales en termes de lumire, temprature, humidit et approvisionnement en lments nutritifs, vitamines et hormones. Lquilibre entre les auxines et les cytokinines permet de manipuler la formation de pousses ou de racines in vitro. Les auxines sont ncessaires pour favoriser la formation des racines ; en revanche, un substrat dpourvu dauxines est ncessaire la maturation des tissus. Un substrat contenant des cytokinines et des gibbrellines est
subculture sur ou dans un substrat contenant ces hormones dans diffrentes proportions et en augmentant la quantit dlments nutritifs, on peut contrler des diffrentes tapes du dveloppement. Pour endurcir les jeunes plantules, on procde comme pour les plantules leves en ppinire, lombre et dans des conditions dhumidit leve jusqu ce que ces plantules soient suffisamment forte pour rsister aux conditions sur le terrain.
Lintrt de la micropropagation
Les principales raisons qui permettent denvisager la micropropagation sont : Pour multiplier un arbre qui ne peut pas ltre facilement partir de graines ou de mthodes de multiplication vgtative de type classique. Pour multiplier rapidement de grandes quantits de propagules de provenances dessences suprieures. Pour dbarrasser le matriel vgtal clon de tout agent pathogne. Pour rajeunir de vieux arbres par microgreffage rpt in vitro. Pour multiplier des propagules dpourvues dagents pathognes pour les exploitants agricoles.
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Conditions requises
Pour pratiquer la micropropagation il faut avoir sa disposition une petite quipe de techniciens qualifis et bien forms ainsi quun laboratoire, et disposer du temps ncessaire pour produire de grandes quantits de propagules.
Contrairement aux mthodes classiques de multiplication vgtative dessences agroforestires en ppinire, la micropropagation exige un espace de laboratoire organis :
La micropropagation
indispensable pour amorcer la diffrentiation du tissu des pousses. En pratiquant avec soin la
Salle de prparation : une salle ou un coin de laboratoire propre o lon prparera et strilisera les milieux de culture. On y nettoiera galement les explants, que lon strilisera avant leur transfert dans les rcipients contenant le milieu de culture (tubes essais, bocaux, bouteilles). Chambre de transfert ou dinoculation : un coin de laboratoire propre quip dune hotte flux laminaire, strile ou dpourvu dagents pathognes, qui servira de paillasse ou de poste de travail. Chambre dincubation ou de croissance : un espace de laboratoire propre quip dtagres et de dispositifs de contrle de lclairage et de la temprature, o les plantes (propagules) rgnres pourront crotre et se dvelopper. Serre : une salle propre quipe de paillasses, dune chambre dhumidit, dun ventilateur ou autre mcanisme de contrle de la ventilation, o les plantes (propagules) rgnres
La micropropagation
pourront sacclimater avant leur transfert sur le terrain.
Les conditions indispensables au succs de la multiplication in vitro sont : le maintien dun milieu aseptis ainsi que le contrle de la temprature et de lhumidit tout au long du processus.
Tout explant (cellule, tissu, organe) a besoin, pour donner une nouvelle plante, dun apport quilibr en hormones, lments nutritifs et sucres, soit en suspension dans une solution inerte, soit mlangs de la matire solide, comme par exemple de la glose. Les hormones dterminantes
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pour induire le dveloppement des pousses sont les cytokinines ; les auxines sont importantes pour le dveloppement des racines. Ladministration de ces hormones doit saccompagner dun supplment de sels basiques drivs des minraux essentiels et de glucides drivs du sucre, comme par exemple le sucrose. Certaines plantes ont besoin, en outre, de supplments additionnels pour pouvoir crotre et se dvelopper in vitro, notamment dautres hormones (acide gibbrellique) et de vitamines. Le milieu sels basiques le plus couramment utilis pour la culture de tissus est celui mis au point par Murashige et Skoog (1962). Il existe dautres milieux modifis, comme par exemple le milieu pour espces ligneuses propos par McCown et Lloyd (1981).
Les techniques de micropropagation

Les tapes suivantes sont communes toutes les techniques de micropropagation dcrites plus loin : Dfinir le but recherch. Choisir la technique approprie. Prparer le milieu de culture et le striliser en autoclave ou en autocuiseur. Prlever du matriel vgtal (feuilles, tiges, racines, fleurs, fruits) sur des plantes ou des arbres poussant au champ ou en ppinire. Prparer les explants prlevs sur le terrain pour les inoculer dans le milieu de culture : les
laver, les dcouper en petits morceaux et les striliser laide dun strilisant (de lhypochlorite de sodium, par exemple). Prparer la hotte flux laminaire pour linoculation : nettoyer la table de dissection, les parois de la hotte et les filtres air avec un dsinfectant (de lalcool, par exemple) et dsinfecter les outils chirurgicaux la flamme. Le tableau suivant (adapt de Hartmann et al., 1997) propose plusieurs techniques de culture de tissus, sur lesquelles on reviendra plus en dtail par la suite.
Tableau 6 : quelques-unes des techniques utilises pour la culture de tissus de ligneux
rgnration Culture dembryons (rcupration dembryons) Embryons du fruit dpouills de leur enveloppe On a recours cette technique lorsque dautres mthodes de multiplication vgtative et de micropropagation dorganes ou de tissus vgtaux ont chou. On lutilise pour liminer les virus.
Plantules
Jeunes plantes
Pointes de pousses de Formation de pousses axillaires moins de 1 mm (culture de mristmes, culture dapex de pousses) Formation de pousses adventives (par organogense ou androgense) Morceaux de feuilles, ptioles, cellules mres du pollen
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On emploie cette mthode pour multiplier les monocotyldones (palmiers). Cest lune des principales tapes dans la production de plantes gntiquement modifies. Landrogense permet dobtenir des plantes haplodes destines surtout la recherche.
Microgreffage
Pointe de la pousse dun petit greffon gnralement greffe sur une plantule servant de porte-greffe
On recourt cette technique pour liminer les virus ou encore pour remplacer exceptionnellement la greffe de type classique.
Embryons somatiques
Embryogense somatique
Embryons ou parties dembryons dans leur phase de dveloppement (nucelle ou ovule)
On se sert de cette technique pour reproduire des clones de la plantemre. On sen sert aussi des fins de slection et de manipulation gntique.
La micropropagation
Structures formes
Mode de
Source de lexplant
Utilisations
Rcupration des embryons

Cette technique est utilise lorsque lembryon zygote ne survit pas aprs stre initialement dvelopp dans le tissu maternel. On procde en excisant lembryon ds le premier stade de son dveloppement, avant quil ne meure. On met lembryon en culture dans un milieu appropri constitu dun mlange dauxines et de cytokinines, auquel on ajoute des gibbrellines pour permettre lembryon de se dvelopper hors du tissu maternel ou du sac embryonnaire.
Cette technique est une bonne alternative pour les cas o la multiplication vgtative ou la micropropagation dautres organes ou dautres tissus de la plante se solde par un chec. Elle est aussi utile pour produire des descendants la suite de croisements entre espces, si les embryons
La micropropagation
ne peuvent se dvelopper par suite dincompatibilits, ou encore pour raccourcir le cycle de propagation dans les programmes de slection.
Formation de pousses axillaires

Culture de mristmes apicaux de pousses
Cette technique sert notamment assainir le matriel vgtal contamin par la maladie. A laide dinstruments chirurgicaux et en saidant dun microscope, on prlve le dme du mristme apical et on le place dans un milieu appropri. Le mristme est dpourvu dagents pathognes
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systmiques parce que les faisceaux vasculaires ne sont pas encore diffrencis et parce que la sve de la plante contamine qui circule dans les tissus du phlome ne parvient pas jusquaux cellules mristmatiques. Ainsi donc, les plantes issues de la culture de mristmes sont propres et saines. On veillera toutefois tester les plantes rgnres pour sassurer quelles sont bien exemptes des agents pathognes qui affectaient les arbres parentaux. Sil savre que les plantes testes ne sont pas affectes, elles peuvent alors servir de plantes-mres pour de nouvelles multiplications, que lon pourra effectuer en recourant dautres techniques de propagation convenant lespce considre.
Culture de pousses axillaires

La culture de pousses axillaires a pour but la rgnration in vitro de plantes partir de fragments de racines, de tiges ou de feuilles. Les explants sont prlevs sur des parents choisis cet effet. Aprs strilisation, ils sont inoculs dans une culture primaire constitue dun milieu de sels basiques enrichi de cytokinines. On choisira le milieu mis au point par Murashige et Skoog (MS). On laisse les cultures produire un grand nombre de jeunes pousses. Ces pousses sont ensuite elles-mmes mises en subculture dans un nouveau milieu MS enrichi de cytokinines pour favoriser la prolifration des pousses. On rpte la subculture 3 5 fois pour augmenter le nombre des pousses provenant de la culture primaire.
Les plantes ainsi reconstitues sont ensuite spares et places dans un milieu denracinement. Pour beaucoup de plantes, un simple milieu de sels basiques MS suffit pour que les pousses prennent racine ; pour certaines autres, il faudra ajouter un supplment dauxines pour provoquer la formation de racines.
Les plantes racines sont ensuite endurcies sous un clairage vif avant dtre transfres en serre, o elles sacclimateront avant dtre repiques au champ.
La prolifration et lenracinement des pousses axillaires se font plus facilement avec des pousses de plantules quavec des pousses darbres adultes. Ces dernires doivent tre rajeunies par microgreffage rpt avant de pouvoir tre utilises avec succs pour la prolifration de pousses axillaires. Un autre problme li la culture de matires vgtales prleves sur le terrain est la contamination ventuelle des tissus. Pour surmonter ce problme, il suffit de manipuler soigneusement les tissus pendant le lavage et la strilisation et demployer une bonne mthode de strilisation avec une concentration adquate de strilisant. Les besoins en hormones et en sels minraux varient selon les essences agroforestires. Il faudra donc modifier la composition du milieu en fonction des besoins, surtout si lon prouve des difficults rgnrer les pousses et leur faire prendre racine, ce qui se produit chez certaines espces.
Formation de pousses adventives

Cette technique consiste mettre les explants en culture dans un milieu favorable la formation de cals. On utilise habituellement un milieu de sels basiques MS complt par de fortes concentrations dauxines. Les cultures sont incubes dans lobscurit pour former un amas de cellules indiffrencies appel cal.
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Les cultures primaires du cal sont ensuite mises en subculture dans un nouveau milieu contenant des cytokinines pour les induire former des embryons. Ces embryons sont ensuite mis en culture dans un milieu enrichi de petites quantits dauxines, de gibbrellines et de cytokinines pour favoriser lallongement des pousses et lenracinement des pousses allonges. Les plantes normalement constitues sont endurcies et acclimates comme des plants normaux.
Cette technique produit de multiples variants qui ne possdent pas tous les traits du matriel parental. Le processus est lent et il ne russit que difficilement avec la plupart des plantes ligneuses prennes.
Androgense
Landrogense est une technique spciale apparente la formation de pousses adventives, mais pour laquelle on choisit comme explants des anthres ou des grains de pollen immatures.
La micropropagation
Les explants sont mis en culture dans un milieu de culture pour anthres et incubs dans des conditions dclairage adaptes aux anthres ou aux grains de pollen, pour rgnrer de multiples plantules. Les plantules sont ensuite mises en subculture dans un milieu denracinement (MS simple). Aprs lapparition de racines, les plantes sont endurcies et acclimates comme indiqu cidessus. Les plantes rgnres laide de cette technique sont haplodes. Elles sont donc utiles pour les travaux de slection de ligneux. On notera toutefois que la composition du milieu doit tre adapte chaque espce et que le taux de russite est faible pour beaucoup dentre elles.
Microgreffage
Cette technique sert rajeunir de vieux arbres et leur donner la capacit de se rgnrer
La micropropagation
aisment par multiplication. On commencera par cultiver, en milieu aseptis, des plantules destines servir de porte-greffes. On prlvera ensuite sur de vieux arbres supres de petit greffons (pousses terminales) que lon greffera sur les porte-greffes, par la technique du microgreffage, dans un milieu aseptique. Les cultures microgreffes sont incubes et on les laisse se dvelopper. La pousse de greffon qui en rsulte est excise pour tre de nouveau microgreffe sur un jeune porte-greffe puis incube. Le microgreffage est rpt plusieurs fois de suite. Aprs 5 8 essais, les pousses du greffon sont excises et, pour dterminer leur aptitude raciner, on les place dans un milieu MS simple. Les pousses du greffon rajeunies forment tout de suite des racines. On peut ensuite les multiplier en recourant une technique approprie, par exemple la prolifration de pousses axillaires, puisque la capacit de se rgnrer aura t restaure aprs microgreffage in vitro.
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Embryogense somatique
Cette technique est utilise pour la multiplication en masse. Elle est aussi employe dans les programmes damlioration gntique. Elle exploite la proprit quont les cellules calleuses de pouvoir se diffrencier pour former des embryons et des plantes compltes, dans certaines conditions. Les embryons somatiques se dveloppent de la mme manire que les embryons zygotes, mais sans endosperme ni enveloppe sminale. Diffrents types dembryogense somatique ont t dfinis, en fonction de lexplant. Pour induire des cellules dtermines par embryogense, des protocoles devront tre mis au point pour chaque gnotype.
Cependant, tout processus passera par les tapes suivantes : 1. Choix et culture dexplants appropris. Cest ltape essentielle avant la production dune culture de cal. 2. On stimule le potentiel embryognique des explants cellulaires en transfrant les cellules dans un milieu basique contenant une forte concentration dauxines (par exemple, du lait de noix de coco). Aprs une ou deux semaines, on voit apparatre de petits pro-embryons. 3. La diffrentiation et la maturation des embryons somatiques se font lorsquon transfert les
pro-embryons dans un milieu de base sans auxines contenant une forte concentration dazote ammoniacal. A ce stade, une intervention est parfois ncessaire pour stimuler la maturation des embryons, par exemple laddition dacide abscissique, ou encore la dshydration pour simuler les conditions in vivo. 4. La formation des plantules peut tre induite en transfrant les embryons dans un milieu contenant une faible concentration de cytokinines. 5. Ds lapparition des premires feuilles et des racines, les plantules peuvent tre repiques dans un substrat de ppinire et manipules comme toute autre plantule.
Conclusions
et ses problmes. Certains problmes techniques peuvent surgir par suite dune prolifration rapide dagents pathognes, du dprissement des pointes des pousses ou de laffaiblissement du potentiel de diffrentiation aprs une mise en culture prolonge. Comme pour toute autre mthode de multiplication vgtative, la maladie peut se propager rapidement ; il faudra donc examiner les explants de trs prs. La micropropagation est trs utile en agroforesterie dans certains cas bien prcis, par exemple si lon veut multiplier des spcimens rares ou trs chers sur lesquels les mthodes de multiplication classiques ont chou. Le rendement conomique de certains produits justifie aussi parfois la mise en place dinstallations coteuses et des protocoles connexes. Cest le cas,

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notamment, pour le palmier huile, le bananier, le cafier et lhva.
Bibliographie
Hartmann HT, Kester DE, Davies FT and Geneve RL. 1997. Plant Propagation. Principles and Practices. 6th ed. New Jersey : Prentice Hall. McCown BH and Lloyd G. 1981. Woody plant medium (WPM). A mineral nutrient formulation for microculture of woody plant species. HortScience 16: 453. Murashige T and Skoog F. 1962. A revised medium for rapid growth and bioessays with tobacco tissue cultures. Physiologia Plantarum 15: 473-497.
La micropropagation
Comme toute autre mthode de multiplication, la micropropagation comporte ses risques
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La micropropagation
it Un7
Axes de formation
A la fin de lunit, les participants pourront :
Appliquer ces concepts et principes des exprimentations de multiplication vgtative types Enumrer et expliquer quelques-uns des problmes et des obstacles couramment rencontrs dans le cadre de la multiplication vgtative Indiquer comment une bonne gestion peut permettre damliorer la prcision dun essai Illustrer les concepts et principes des dispositifs exprimentaux dans le cadre de la multiplication vgtative par une tude de cas portant sur une exprimentation particulire
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Lunit comporte un expos de 90 minutes, ponctu par les interventions des stagiaires qui soulveront et tudieront les problmes au sein du groupe. Il sera ventuellement suivi par la prsentation dune tude de cas sur la multiplication vgtative prsent par un scientifique ou un technicien dot dune exprience pratique dans ce domaine. Les travaux pratiques en laboratoire et en ppinire raliss au cours des prcdentes units du stage serviront aussi illustrer les dispositifs exprimentaux utiliss pour la recherche sur la multiplication.
Lexpos thorique sera tay par des notes de cours, qui porteront notamment sur les problmes examins en groupe, et par une tude de cas.
Rsum de lunit
Les principes des dispositifs exprimentaux (randomisation, rptition, contrle de la variation) sont examins dans le contexte dessais-types damlioration des
Rcapituler les principaux concepts et principes des dispositifs exprimentaux
ligneux. Lapplication de ces principes aux essais de multiplication vgtative est ensuite examine de plus prs. Dans le contexte des essais de multiplication vgtative, lexprimentation portera non pas sur des parcelles mais sur des propagules de divers types, par exemple des boutures. Les essais pourront avoir lieu dans une ppinire, dans un bac de bouturage ou en laboratoire. Chaque type de propagule possdera ses propres modes de variation, dont il faudra tenir compte dans le dispositif exprimental. Dans le cas dessais sur des boutures racines, les rsultats seront influencs par les facteurs suivants : le choix du clone, la position de la bouture sur la pousse, les conditions densoleillement
dont a bnfici la plante-mre, la saison, le milieu denracinement, la temprature et lhumidit. Il faudra tenir compte de tous ces facteurs lors de la conception des essais. Pour dterminer la taille des essais, on recourra aux mthodes habituelles. Si le rsultat attendu est du type Oui/Non (par exemple, est-ce que la bouture a pris racine ?), le nombre dessais requis est souvent plus important que prvu. Labsence dinstallations suffisantes pour la rptition des essais, lorsquon travaille en milieu contrl, est chose commune. Le fait dexprimenter en laboratoire ou en ppinire nexclut pas la ncessit de procder la randomisation. Le personnel qui choisit le
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matriel vgtal pour les essais peut introduire des distorsions par inadvertence ; quelques prcautions suffiront les viter. Comme les sujets de lexprimentation sont souvent petits, nombreux et difficiles distinguer, il faudra tenir un compte rendu dtaill du dispositif exprimental pour pouvoir tablir un lien avec les donnes recueillies.
Il nexiste pas, notre connaissance, douvrages spcifiquement consacrs la conception des essais de multiplication. Cela dit, bon nombre daspects importants pour dautres types dessais sont aussi importants pour la recherche sur la multiplication vgtative. Les ouvrages de caractre gnral que nous recommandons ci-aprs pourront donc savrer utiles.
Coe R, Stern and Nelson L. 1997. Design of agroforestry experiments guidelines for training workshop resource persons. Nairobi: ICRAF. Mead, R., Curnow, R.N. and Hasted, A. 1983. Statistical Methods in Agriculture and Experimental Biology. Chapman and Hall. Williams ER and Matheson AC. 1994. Experimental design and analysis for use in tree improvement. Australia: CSIRO. Dyke GV. 1988. Comparative experiments with field crops. London: Griffin.
Conception et gestion des essais

Richard CoeWorld Agroforestry Centre
Introduction
Le dispositif exprimental comprend lensemble des instructions suivre pour mener bien les essais. Dans beaucoup de manuels, lexpression dispositif exprimental ne sapplique quaux aspects statistiques du processus, par exemple le nombre de parcelles. Or on ne saurait, dans la pratique, dissocier la dimension statistique des autres aspects. La conception des essais incombe au chercheur principal en charge des essais, qui consultera pour cela des experts comptents en la matire. Il est bon que tous les intresss comprennent non seulement le dispositif proprement dit mais aussi les raisons pour lesquelles les essais ont t conus comme ils lont t. Ainsi, on pourra tre sr que tous suivront le protocole dexprimentation la lettre et que des mesures correctives appropries seront prises si des ajustements doivent tre faits. Exemple : un essai damlioration des ligneux simple est tabli pour comparer la performance de cinq provenances diffrentes de Sesbania sesban (A E). On plantera sur chaque parcelle 25 arbres dune mme provenance, 1 mtre despacement. Pour chaque provenance, on utilisera 6 parcelles. Les parcelles seront disposes comme indiqu ci-dessous. Lvaluation portera sur les neuf arbres situs au centre de chaque parcelle.
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B E E A
Pente
C B D C D B
E D C B A D
A C A E C E
D A B D E A
B C
La conception des essais principes de base

Objectifs
Les objectifs dun essai sinscrivent dans la stratgie globale en matire de recherche. Ils dterminent le reste du dispositif exprimental et doivent donc tre noncs avec clart et concision. Dans lexemple que nous avons retenu, les objectifs sont les suivants : 1) dterminer sil existe des diffrences pertinentes entre les diverses provenances choisies, 2) dterminer quelles sont les provenances qui ont le plus fort taux de croissance tout en offrant une rsistance aux ravageurs.
Traitements
On appelle traitements les conditions que les essais visent comparer. Les traitements devraient tre les seules diffrences systmatiques entre les parcelles. Dans lexemple que lon a retenu, les traitements sont les provenances. Il ne devrait donc y avoir, entre les parcelles, aucune diffrence entre dautres facteurs (tels que lespacement, lpandage dengrais ou le mode de plantation) qui pourrait tre confondue avec une diffrence relle entre les provenances, ou qui pourrait sy superposer.
Parcelles (units exprimentales)
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Les parcelles sont les entits auxquelles les traitements sont appliqus. Dans notre exemple, ce sont les parcelles portant 25 arbres.
Rptition des essais

Malgr tous les efforts, il existera une variation entre les diffrentes parcelles du mme traitement. Pour dterminer le degr de prcision des comparaisons entre les traitements, il faudra mesurer cette variation. Il faudra donc rpter les traitements. Un jeu complet dune parcelle de chaque traitement est appel rptition de traitements. Dans notre exemple, il existe 6 rptitions.
Randomisation
Le traitement appliqu une parcelle doit tre dtermin au hasard. Chaque parcelle doit avoir les mmes chances que les autres de recevoir un traitement particulier. La randomisation a pour but de veiller ce quil ny ait pas de biais dans lallocation des traitements, qui consisterait par exemple appliquer le mme traitement aux meilleures parcelles. Dans lexemple que nous avons choisi, il serait mauvais de planter tous les arbres de la provenance A sur un seul ct du champ (qui pourrait, par exemple, se trouver expos au vent ou aux ravageurs) ou dans toute autre position prdtermine. La randomisation est aussi ncessaire pour pouvoir procder une analyse statistique valable. La randomisation nest pas synonyme de mlange ou absence
de mthode. La randomisation doit se faire laide de nombres alatoires prlevs sur un tableau ou sur un programme informatique cet effet.
Disposition en blocs et contrle de la variation

Il importe de rduire et contrler lampleur de la variation alatoire, cest--dire la variation qui na rien voir avec le traitement. On y parvient par la mthode de la disposition en blocs. Avant de commencer les essais, les parcelles sont regroupes en ensembles jugs identiques, chaque ensemble constituant un bloc. En rpartissant soigneusement les traitements entre les blocs, tout en randomisant la rpartition des traitements au sein de chaque bloc, on gagne
perpendiculairement la pente, pour tenir compte des variations de la fertilit et de lhumidit en haut et en bas de la pente. Les traitements sont attribus chaque bloc de sorte quune rptition complte corresponde chaque bloc.
Mesures
On ne prlvera que les mesures ncessaires pour les objectifs que lon sest fixs. Il sera inutile de recueillir des donnes superflues ; en revanche, il faudra veiller bien consigner toutes les donnes indispensables. Dans notre exemple, il faudra mesurer le taux de croissance et lincidence des ravageurs, mais non pas la floraison ou langle des branches.
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Application aux essais de multiplication

Traitements
Dans le cadre des essais de multiplication, les traitements peuvent tre trs varis. Toutefois, ils sont le plus souvent lis des paramtres gntiques (diffrences entre clones, varits ou espces) ou de gestion (effets dune modification des techniques de multiplication). Problme : On sait que lhormone AIB augmente les chances de succs de lenracinement des boutures chez de nombreuses espces. En gnral, 20 g par bouture est une dose suffisante. Au-del de 300 g, leffet sinverse, rduisant la capacit denracinement. On travaillera sur Melia volkensii, aucun essai nayant t fait jusqu prsent sur cette espce. Vous choisirez les traitements inclure dans les essais pour dterminer les doses optimales dAIB pour ce ligneux. Trs souvent, on observera des interactions entre les paramtres gntiques et les paramtres de gestion. On constatera, par exemple, que tel clone ragit mieux quun autre aux hormones denracinement. Pour les essais de gestion, dont la finalit est de mettre au point de meilleures mthodes de multiplication, il faudra disposer de rsultats sappliquant nimporte quel clone. Par consquent, il faudra inclure plusieurs clones dans les essais.
considrablement en prcision. Dans notre exemple, les blocs seront constitus
Les informations dont on dispose indiquent quune dose de 20 g dhormones est probablement prfrable labsence dhormones, mais quune dose de 300 g est trop forte. On peut en dduire que la raction aux hormones suit une courbe du type suivant :
Succs de lenracinement
Hormones
Le problme revient alors vrifier cette hypothse en confirmant le trac de la courbe et en obtenant une bonne estimation des coordonnes de son sommet. Les concentrations dhormones devront tre choisies de manire obtenir une bonne estimation de la courbe. Au moins 3 concentrations dhormones sont ncessaires pour tracer la courbe. Avec 3 variables seulement, il sera impossible de percevoir lasymtrie de la courbe. Il est donc conseill de travailler sur 4 ou 5 variables. La concentration minimale doit tre gale zro, concentration tmoin ncessaire pour confirmer leffet de lapport dhormones. La concentration maximale
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doit tre nettement suprieure la concentration optimale, pour que lon puisse confirmer que la rponse aux hormones diminue effectivement au-del dun certain seuil. On retiendra, par exemple, une concentration de 300 g. La concentration optimale tant prsume stablir 20 g, on retiendra cette valeur. Deux autres variables devraient encadrer la valeur optimale pour que lon puisse se faire une ide juste du trac de la courbe, mme si la valeur optimale est sensiblement diffrente de ce que lon attendait. On aura donc 5 traitements : 0, 10, 20, 150 et 300 g
Ce dispositif permettra dviter les deux problmes les plus frquemment rencontrs avec ce type dessai. Le premier problme rsulte de lemploi de concentrations trop nombreuses (par exemple, 0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100 g). Il vaut toujours mieux rpter les essais de nombreuses fois avec un petit nombre de variables que peu de fois avec un grand nombre de variables. Le second problme rsulte de lemploi de concentrations nallant pas au-del de la concentration optimale prsume. En effet, il est indispensable dexprimenter au-del de la concentration optimale pour bien situer le point culminant de la courbe.
Parcelles ou units exprimentales

Supposons un essai visant comparer la capacit denracinement de boutures de trois clones diffrents (A, B, C). On utilisera 50 boutures de chaque clone. La disposition de lessai pourrait obir diffrents schmas :
1. Groupes de 50
2. Groupes de 25
A C B
3. Groupes de 10
A B B
C A C B
B C
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A A

4. Boutures individuelles
A B C B A C A B C A
Les mmes ressources sont ncessaires dans chaque cas (nombre de boutures, surface du bac de bouturage) ; seule la procdure suivre est diffrente. Le 1er dispositif nest pas rpt et ne sera donc pas concluant. La thorie statistique montre que le 4e dispositif donne les meilleures rponses aux questions poses, cest--dire les rponses les plus prcises, mais il est plus difficile grer. En effet, on perd plus facilement la trace de certaines boutures. Le 3e dispositif reprsente probablement le meilleur compromis.
Problme : on veut mettre en place un essai pour comparer la rponse aux hormones denracinement de 5 clones diffrents de Prunus africana. On dispose de 50 boutures de chaque clone. Quelle serait la meilleure manire de disposer les boutures et les traitements dans des bacs de bouturage sans nbulisateur ? On suppose que lon utilise 2 concentrations dhormones : une concentration nulle et une concentration dont on sait quelle entrane une rponse, reprsentes par les symboles et +. On aura donc 10 traitements (2 hormones x 5 clones).
Une option possible consiste utiliser plusieurs units de la mme bouture, en
randomisant les traitements de clones et dhormones et en introduisant 50 rptitions. Les difficults sont les suivantes :
Le dispositif est complexe mettre en place et la collecte des donnes est complique. Une partie des hormones pourrait se diffuser dans le substrat denracinement, migrant dune bouture + une bouture . Pour surmonter la deuxime de ces difficults, il faudra isoler les boutures des traitements + et , soit en les espaant soit en les sparant par des barrires physiques. La plupart du temps, on utilise des pots en plastique pour crer une barrire. Si lon choisit despacer les boutures, il faudra veiller ce que lespace disponible soit suffisant. Toutefois, lutilisation de pots nest pas pratique si chacune des 250 boutures doit avoir son propre pot.
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On peut surmonter ces deux problmes simultanment en groupant les boutures et en plaant chaque groupe dans un pot. Par exemple, on pourrait placer dans chaque pot une bouture de chaque clone, puis administrer des hormones la moiti des pots et laisser lautre moiti telle quelle. Il faudrait au total 50 pots. Ce modle est du type split-plot (parcelles divises). Les clones seront compars au sein de chaque pot et les hormones entre les pots. Lanalyse de la variance se prsente comme suit :
Source Hormone Erreur (parcelle principale) Clone Clone x hormone Erreur (split-plot) Total dl 1 48 4 4 192 249 (degrs de libert)
Un dispositif exigeant moins de pots consisterait placer 5 boutures de chaque clone dans chaque pot. Dans ce cas, lanalyse de variance se prsenterait comme suit :
Source Hormone Erreur (parcelle principale) Clone Clone x hormone Erreur (split-plot) Total
dl 1 8 4 4 32 49
Ce dispositif parat raisonnable. Toutefois, un dispositif intermdiaire comportant, par exemple, 3 boutures par clone et par pot, donnerait plus de libert sagissant de lerreur imputable la parcelle principale. Une telle dmarche serait indispensable en cas de disposition en blocs.
Rptition
Dans certains essais, lessentiel des donnes recueillies sont du type Oui/Non (par exemple, La bouture a-t-elle pris racine ?). Chacune des units exprimentales fournit alors beaucoup moins dinformations que si lon effectuait des mesures quantitatives (par exemple, Quelle est la quantit de biomasse racinaire aprs 4 semaines ? ou Quelle est la teneur en amidon ?). On saperoit quun nombre considrable dunits est ncessaire pour obtenir une rponse prcise ce type de question.
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Le tableau ci-aprs illustre notre propos. Supposons que le traitement A donne 20 % denracinement. Le traitement B devrait, selon notre hypothse, constituer une amlioration. Combien de boutures pour chaque traitement sont-elles ncessaires pour tester cette hypothse ? La rponse dpend de lampleur de lamlioration recherche.
% denracinement pour A % denracinement pour B Nombre de boutures requises pour chaque traitement
20% 30% 390 50% 52 70% 19 90% 10
Randomisation
Par suite du grand nombre dunits (telles que pots ou boutures) sur lesquelles portent les essais de multiplication, on a souvent tendance viter la randomisation. La raison invoque est quil est plus facile dorganiser un essai si tous les pots dun mme traitement sont conservs ensemble. Le problme est que, en labsence de randomisation, il est tout simplement impossible de conclure que les traitements appliqus sont bien la cause des effets constats. Ceux-ci pourraient ntre que la consquence de la position occupe au sein du laboratoire ou dans la ppinire.
Disposition en blocs
Une exprimentation en laboratoire, en ppinire ou en bac de bouturage doit tre dispose en blocs au mme titre quune exprimentation sur le terrain. Tout dispositif exprimental est entach de variation systmatique. Il suffit, pour sen convaincre, dobserver ce qui se passe dans une ppinire, o tous les plants sont soumis au mme traitement et o la variation est cependant vidente. Cette variation est imputable quantit de facteurs (exposition directe au soleil et au vent, proximit dune source deau, etc.). Il en va de mme des paillasses de laboratoire, des bacs de bouturage hermtiques et des serres, voire des phytotrons. Les diffrents types de variation sont connus par exprience, mais ils peuvent aussi faire lobjet de projections. On sait, par exemple, que les conditions en bordure du bac de bouturage sans nbulisateur diffrent des conditions au centre du bac. Il faut tenir compte de ces types de variation pour dfinir les blocs.
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1m Ombre Porte
4m
Les blocs sont indiqus en gris. Chaque bloc est une rptition de 10 x 5 sacs plastique. Dans chaque unit, les 5 sacs plastique sont aligns de lavant larrire de la paillasse.
Aprs analyse de lessai, le rle jou par les blocs peut tre valu et servir amliorer la conception des essais futurs . Problme : une exprimentation doit avoir lieu en ppinire, comme indiqu ci-dessous. Les plants seront placs dans des sacs en matire plastique standard, espacs de 10 cm. Les essais porteront sur des units de 5 sacs plastique. On appliquera 10 traitements avec 12 rptitions. Il faudra donc 5 x 10 x 12 = 600 sacs plastique au total. On sait que les plantes situes prs des portes sont dsavantages. Celles qui sont lavant des paillasses croissent mieux que celles qui sont places larrire. Un arbre proximit de la serre jette de lombre sur le coin situ au NordEst. Comment disposeriez-vous les blocs de cet essai ?
par la prsence de la porte de lautre ct. Lespace au centre de la serre, de 3 m de long, est suffisant pour y installer des paillasses. Les blocs sont disposs comme indiqu sur la figure, de sorte que les diffrences entre lavant et larrire des paillasses sont bien claires, de mme que toute diffrence entre le ct droit et le ct gauche des paillasses. Dans chaque bloc, les 5 sacs plastique qui constituent une unit sont aligns de lavant larrire de la paillasse. Ainsi, toute diffrente ventuelle entre lavant et larrire est identique pour toutes les units, minimisant les variations entre les diverses units.
Problmes courants
Insuffisances des installations de recherche
Les exprimentations effectues en serre, dans un bac de bouturage ou dans un phytotron considrent gnralement les conditions du milieu (lumire, eau, temprature) comme faisant partie des traitements appliqus. Supposons que lon ne dispose que dun seul bac de bouturage pourvu dun cble chauffant. Le problme est incontournable. En consquence, toute conclusion concernant les effets des paramtres considrs ne pourra tre que provisoire. La rptition dans le temps est parfois employe. Toutefois, cela ne rsout pas le problme. En effet, un bac de bouturage, par exemple, peut fonctionner bien ou mal certaines heures, quel que soit le traitement.
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Manque de matriel vgtal

Supposons un essai portant sur des boutures racines exigeant 4 traitements raison de 50 boutures par traitement. Nous savons que des boutures de diffrents clones peuvent ragir de manire diffrente. On sefforcera donc dquilibrer les clones entre les traitements. Lidal serait davoir 4 boutures (ou un multiple de 4 boutures) de chaque clone, rparties galement entre les traitements. Si lon ne dispose pas de 4 boutures pour certains clones, on sefforcera de rpartir les boutures disponibles de manire aussi quilibre que possible. On vitera tout prix dutiliser un clone pour un traitement donn et un autre clone pour un autre traitement, car, en ce cas, les effets
On nutilisera pas les extrmits de la serre, qui sont ombrages dun ct et perturbes
des clones et des traitements seraient mlangs, voire confondus. Le problme pourrait savrer plus complexe encore si lon saperoit quil existe non seulement un effet d au clone mais, de surcrot, un effet d lendroit o la bouture est prleve (sommet ou base de la plante).
Comment grer les essais pour obtenir de bons rsultats

La manire dont un essai est gr et suivi peut avoir une influence non ngligeable sur la qualit des rsultats obtenus.
Uniformit de la gestion
Le principe le plus essentiel est celui de luniformit de la gestion. La seule diffrence dans la gestion des units devrait tre celle qui est imputable aux traitements. On vitera, par exemple, douvrir un seul bac de bouturage la fois pour linspecter tout en laissant les autres ferms ou darroser davantage une des deux extrmits de la paillasse.
Slection du matriel vgtal

Il est bien connu que lorsquon choisit du matriel vgtal pour une exprimentation (par exemple, des plantules leves en ppinire ou des boutures rassembles dans un seau), on a tendance choisir dabord le meilleur matriel. De surcrot, on a souvent tendance mettre en place des essais portant sur des traitements, en commenant par le traitement 1, puis en passant au
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traitement 2, et ainsi de suite. Il peut en rsulter dimportantes distorsions si le meilleur matriel vgtal se retrouve dans un seul traitement. Pour viter cet cueil, on commencera par sparer le matriel vgtal en plusieurs lots, puis on veillera ce que lensemble des traitements soit appliqu chaque lot. La mthode la plus simple consiste disposer chaque lot de matriel de plantation dans un bloc du champ ou de la serre. Les diffrences au sein du matriel de plantation ne feront alors que contribuer aux diffrences entre les blocs et ne pourront tre confondues avec les traitements. On procdera de mme si, par exemple, on doit utiliser plusieurs lots de substrat denracinement.
Organisation des travaux

La manire dont les travaux sont organiss peut galement affecter les rsultats. Supposons, par exemple, que deux techniciens pratiquent des greffes, lun tant affect aux traitements A et B, lautre aux traitements C et D. Il pourrait en rsulter une confusion entre les effets dus aux techniciens, qui sont parfois importants, et les diffrences entre les traitements (A et B) et (C et D).
Le mieux serait que lun des techniciens se charge de la moiti des traitements (A, B, C, D) et que lautre se charge de lautre moiti. Mieux encore, un technicien pourrait travailler sur une srie de blocs tandis que lautre travaillerait sur lautre srie de blocs. Les mmes considrations sappliquent lorsquon planifie lordre dans lequel les essais seront mis en place. Si, par exemple, on laisse le traitement D pour la fin, on risque de provoquer des distorsions puisque les boutures destines recevoir ce traitement auront attendu plus longtemps que les boutures destines aux autres traitements. L encore, la solution consiste disposer un bloc, puis le suivant.
Dans la plupart des essais en milieu rel, le traitement appliqu aux diffrentes parcelles apparat clairement. Il nen va pas de mme des essais de multiplication. Ainsi, des boutures peuvent paratre identiques alors mme quelles proviennent de diffrents clones. Il sensuit quil importe dtiqueter et denregistrer les donnes soigneusement. Un plan fidle du dispositif exprimental devra tre trac. Il devra indiquer lemplacement exact de chaque parcelle ainsi que le traitement appliqu. On veillera ce que le plan indique clairement lorientation des parcelles, soit en indiquant le Nord soit en ajoutant des points de repre (porte dentre de la serre, prise deau de la ppinire, etc.). Le plan devrait tre suffisamment prcis pour que, mme si les tiquettes sont dplaces ou perdues par mgarde, on puisse quand mme identifier chaque parcelle.
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Risques derreur
Lorsquon met en place un essai comportant des centaines de boutures, les risques derreur sont possibles. Cest pourquoi il importe de consigner trs exactement ce qui a t fait plutt que ce qui aurait d ltre. En effet, lorsquon procdera lanalyse, il sera toujours possible de tenir compte des erreurs commises, tandis que lon ne pourra pas tenir compte des erreurs caches.
Bibliographie
Coe R, Stern R and Nelson L. 1997. Design for agroforestry experiments guidelines for training workshop resource persons. Nairobi: ICRAF. Mead R, Curnow RN and Hasted A. 1983. Statistical Methods in Agriculture and Experimental Biology. Chapman and Hall. Williams ER and Matheson AC. 1994. Experimental design and analysis for use in tree improvement. Australia: CSIRO. Dyke GV. 1998. Comparative experiments with field crops. London: Griffin.
Etiquetage et enregistrement des donnes
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Annexe 1 Annonce de stage de formation

Stage de formation intensif sur la multiplication vgtative des ligneux dans les terres arides et semi-arides
16-20 fvrier 1998, Nairobi (Kenya)
Gnralits
Le World Agroforestry Centre et le Programme international de promotion des cultures en zones arides (IPALAC) organisent conjointement, grce une subvention de lUNESCO, un stage de formation sur la multiplication vgtative dans les terres arides et semi-arides. La multiplication des arbres et des arbustes utiliss en agroforesterie est actuellement lun des principaux obstacles qui sopposent la gnralisation des techniques agroforestires. Les plantes se rgnrent naturellement par voie de semences. Toutefois, pour la recherche et pour lamlioration rapide des espces non domestiques, la multiplication vgtative offre de multiples avantages. Cest ainsi que dans les populations sauvages un large ventail de proprits importantes du produit peut sexprimer (qualit du fruit, raideur du ft, biomasse, etc.). De plus, il est possible de reconnatre, au sein dune population, des individus qui donnent des produits de meilleure qualit. Il serait alors avantageux de multiplier ces individus par voie vgtative pour capturer, ou saisir, la variation gntique exprime, qui risquerait autrement de se perdre ou de saffaiblir dans le cas dune reproduction sexue. La multiplication vgtative sest dveloppe au fil des sicles. Dans les rgions tempres, elle a jou un rle important dans la domestication des arbres fruitiers. Des mthodes particulires ont t mises au point pour chaque espce. Dans les rgions tropicales, la multiplication vgtative a parfois t applique avec succs aux arbres fruitiers, offrant des dbouchs lucratifs aux marchs dexportation (agrumes, mangues, avocats, noix de macadamia, etc.). Plusieurs essences tropicales de haute futaie ont aussi t clones, principalement pour les plantations o lon veut des arbres de taille uniforme. De nombreuses essences indignes qui pourraient avoir une grande valeur montaire ou nutritive ne sont reproduites jusqu prsent qu partir de plantes naturelles. Dans les rgions tropicales, les petits exploitants agricoles auraient tout gagner intgrer ces essences aux systmes agroforestiers, vu lintrt quelles prsentent. La multiplication vgtative permet de slectionner un matriel gntique de qualit suprieure susceptible denrichir lexploitation agricole.
117
Objectifs
Lobjectif global du stage est damliorer les connaissances et les comptences techniques des techniciens responsables de la multiplication vgtative des ligneux dans les projets de recherche-dveloppement agroforestiers.
Le stage
Le stage se droulera du 16 au 20 fvrier 1997 au sige du World Agroforestry Centre Nairobi (Kenya). Le stage comportera sept volets : 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Concepts et principes Les ppinires dessences agroforestires Le bouturage Le greffage Le marcottage La micropropagation Les essais de multiplication Lenseignement sera dispens essentiellement laide de travaux pratiques et de dmonstrations prcds de brefs exposs thoriques. Les spcialistes qui se chargeront de la formation seront des reprsentants du Programme international de promotion des cultures en zones arides (IPALAC) en Isral, du Bureau rgional du World Agroforestry Centre en Afrique de lOuest et du sige du World Agroforestry Centre.
Les stagiaires
118
Les stagiaires seront slectionns auprs dinstitutions nationales et dorganisations non gouvernementales dAfrique de lEst et dAfrique australe. Les critres de slection seront les suivants : Les stagiaires devront possder un minimum de connaissances, attestes par un diplme, dans une discipline pertinente (foresterie, agriculture, ou discipline connexe). Ils devront travailler dans le domaine des techniques de multiplication vgtative en ppinire. Leur candidature devra tre endosse par linstitution qui les emploie et celle-ci devra veiller ce que les stagiaires appliquent ultrieurement les connaissances et les comptences quils auront acquises dans le cadre du stage. Une considration particulire sera accorde la candidature de femmes qualifies pour assurer une reprsentation quitable des deux sexes.
Parrainage
Des bourses seront accordes aux candidats retenus. Les organisateurs du stage se rservent le droit de prendre en considration la candidature dun petit nombre de candidats qualifis bnficiant dune bourse individuelle.
Date limite de dpt des candidatures

Les demandes devront parvenir au World Agroforestry Centre avant le 15 dcembre 1997.
Annexe 2 Formulaire dinscription

WORLD AGROFORESTRY CENTRE ORGANISATION DES NATIONS UNIES POUR LALIMENTATION ET LAGRICULTURE PROGRAMME INTERNATIONAL DE PROMOTION DES CULTURES EN ZONES ARIDES
Stage de formation intensif sur la multiplication vgtative des ligneux dans les terres arides et semi-arides 16-20 fvrier 1998, Nairobi (Kenya) FORMULAIRE DINSCRIPTION
I . PARTIE A REMPLIR PAR LE POSTULANT A. RENSEIGNEMENTS PERSONNELS 1. Nom : Mme/Mlle/M 2. Prnom(s) :
3. Titre : 4. Nom de lorganisme qui vous emploie : Adresse et case postale :
119
(Ville) : (Tlphone) : (Tlex) : (Ml) : 5. Adresse personnelle :
(Pays) : (Tlcopie) : (Tlgramme) :
(Ville) : (Tlphone) : 6. Date de naissance : 8. Numro de passeport : 10.Date de dlivrance : 12.Langue maternelle :
(Pays) :
7. Nationalit : 9. Lieu de dlivrance : 11.Date dexpiration : 13.Langue(s) de travail :
B. NIVEAU DINSTRUCTION 14. Diplme de fin dtudes (doctorat, matrise de sciences, licence de sciences, autre diplme) : 15. Date dobtention : 16. Etablissement denseignement :
17. Discipline(s) tudi(e)s :
18. Formation en cours demploi suivie aprs lobtention du diplme :
C. EXPERIENCE PROFESSIONNELLE 19. Nombre dannes dexprience professionnelle :
20. Nombre dannes dans le dernier emploi occup :
21. Nom et titre de votre superviseur actuel :
120
22. Dcrivez succinctement vos attributions prsentes :
23. Dcrivez brivement lexprience professionnelle que vous avez acquise avant doccuper votre emploi actuel :
24. Enumrez, le cas chant, les ouvrages que vous avez publis (travaux de recherche, manuels de formation ou de vulgarisation, etc.) :
25.Expliquez brivement ce que vous attendez du stage de formation et quelle contribution vous pouvez y apporter. Vous pourrez, au besoin, en crivant au verso de ce formulaire, prsenter dautres informations pertinentes lappui de votre demande. Il en sera tenu compte lors de lexamen de votre candidature.
Je, soussign(e), certifie que les renseignements ci-dessus sont exacts et complets et que le World Agroforestry Centre ne sera pas tenu pour responsable en cas daccident, de maladie, de vol ou de dcs survenu pendant le voyage ou pendant la dure du sjour au Kenya pour participer au stage de formation.
121
Date :
Signature : II. PARTIE A REMPLIR PAR LEMPLOYEUR
Je, soussign(e), Mme/Mlle/M : Titre : Nom et adresse de lorganisme employeur :
Appuie la demande du candidat/de la candidate susmentionn(e) et de la personne qui le/la parraine.
Date :
Signature :
Cachet officiel :
III. RENSEIGNEMENTS SUPPLEMENTAIRES PRESENTES A LAPPUI DE LA DEMANDE Indiquez brivement, en utilisant au besoin des feuillets supplmentaires, ce que vous attendez de ce stage et quelle contribution vous pourrez y apporter. Les renseignements que vous fournirez permettront aux organisateurs dexaminer votre candidature en connaissance de cause et de slectionner les meilleurs candidats.
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Annexe 3 Programme du stage

Stage de formation sur la multiplication vgtative des ligneux dans les terres arides et semi-arides
16-20 fvrier 1998, World Agroforestry Centre PROGRAMME DU STAGE Lundi 16 fvrier
09.00 - 09.30 09.30 - 10.00 10.00 - 10.30 10.30 - 11.00 11.00 - 12.00 12.00 - 13.00 13.00 - 14.00 14.00 - 18.00 Ouverture du stage P. Sanchez et T. Lehmberg Introduction la multiplication vgtative Z. Wiesmann Avantages et risques de la multiplication vgtative en agroforesterie H. Jaenicke Pause caf Installations de multiplication et bacs de bouturage sans nbulisateur Z. Tchoundjeu Physiologie et rgulateurs de croissance Z. Wiesmann Djeuner Travaux pratiques en ppinire I (boutures de tiges et de racines)
Mardi 17 fvrier
09.00 - 10.30 10.30 - 11.00 11.00 - 12.00 12.00 - 13.00 13.00 - 14.00 14.00 - 18.00 Dispositif exprimental pour la recherche sur la multiplication des ligneux R. Coe Pause caf Etude de cas sur le Sahel Z. Tchoundjeu Gestion des ppinires H. Jaenicke Djeuner Travaux pratiques en ppinire II (gestion des ppinires)
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Mercredi 18 fvrier
09.00 - 10.30 10.30 - 11.00 11.00 - 12.30 12.30 - 14.00 14.00 - 18.00 Les techniques de greffage H. Jaenicke Pause caf Autres techniques de multiplication Z. Tchoundjeu et H. Jaenicke Djeuner Travaux pratiques en ppinire III (greffage et marcottage)
Jeudi 19 fvrier
09.00 - 10.30 10.00 - 10.30 10.30 - 12.30 12.30 - 13.30 13.30 - 18.00 Le projet dirrigation de Kibwezi Z. Carmi Pause caf Utilisation de substrats artificiels pour la multiplication vgtative Z. Carmi Djeuner Visite sur le terrain Rosslyn River Garden Centre et Kenya Forestry Research Institute)
Vendredi 20 fvrier
09.30 - 10.30 10.30 - 11.00 11.00 - 12.00 12.00 - 13.00 13.00 - 14.00 14.00 - 15.00 15.00 - 16.30 16.30 - 17.00 Sminaire du vendredi Z. Wiesmann Pause caf La micropropagation M. Kwapata La lutte phytosanitaire dans les ppinires J. Desaeger Djeuner Lanalyse molculaire applique la multiplication vgtative I. Dawson Travaux pratiques en ppinire IV (valuations) Evaluation et clture du stage J. Beniest, H. Jaenicke et Z. Wiesmann
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ANNEXE 4 A EVALUATION DES SESSIONS THEORIQUES
Annexe 4 Evaluation
INSTRUCTIONS:
Ce formulaire vous permettra dvaluer chacun des exposs thoriques qui auront t faits dans le courant du stage. Vous indiquerez, pour chaque expos, sa date de prsentation, le sujet abord et le nom de lenseignant. Vous noterez chaque expos laide du systme de notation figurant ci-dessous. Nvaluez pas les exposs auxquels vous navez pas assist. Veillez utiliser les formulaires appropris pour valuer les visites sur le terrain et les travaux pratiques. Remettez les formulaires dvaluation dment remplis aux organisateurs du stage, la fin du stage. Nous vous remercions de votre coopration.
NOTA BENE : Les formulaires dvaluation sont anonymes et ont pour seul but daider les enseignants mieux prparer et prsenter leurs exposs dans le futur. Les autres valuations (valuation finale, visites sur le terrain, travaux pratiques) seront rsumes dans le rapport de stage.
SYSTEME DE NOTATION POUR LEVALUATION DES EXPOSES THEORIQUES

Acquisition de nouvelles connaissances : 1 = trs peu 2 = connaissances renforces 3 = beaucoup Qualit de la prsentation : 1 = mdiocre 2 = moyenne 3 = excellente
125
126
Dure : dure des sessions par rapport la dure du stage 1 = trop longue 2 = adquate 3 = trop courte
Supports pdagogiques : qualit des documents fournis 1 = mdiocre 2 = moyenne 3 = excellente - = aucun support pdagogique na t utilis
Importance : importance du sujet abord dans votre travail quotidien 1 = peu important 2 = important 3 = trs important
Supports audiovisuels : qualit des diapositives et des transparents 1 = mdiocre 2 = moyenne 3 = excellente - = aucun support audiovisuel na t utilis
OBSERVATIONS : Vous pouvez formuler des observations et des suggestions sur un expos particulier. Vous utiliserez, au besoin, des feuillets supplmentaires en noubliant pas dindiquer quel expos ils se rapportent.
Date
Sujet
Nom de lenseignant
Nouvelles Dure de Importance connaissances la acquises session
Qualit de la prsentation
Supports audiovisuels
Observations
VOUS VOUDREZ BIEN RETOURNER CE QUESTIONNAIRE, DUMENT REMPLI, AUX ORGANISATEURS DU STAGE. NOUS VOUS REMERCIONS DE VOTRE COOPERATION.
127
ANNEXE 4 b - EVALUATION DES VISITES SUR LE TERRAIN
Date : Site visit :
Enseignant accompagnant la visite :

Cochez la case approprie et formulez, au besoin, vos observations et suggestions dans lespace prvu cet effet.
a) Avez-vous acquis de nouvelles connaissances ? o o o oui un peu non
b) La dure de la visite tait :
o o o o
trop longue adquate trop courte la visite pourrait tre annule
c) Quelle tait lutilit de la visite dans le contexte du stage ?
d) La date de la visite dans le contexte du stage ? o o bien choisie plus ou moins bien choisie
128
o o
trs utile
quelque peu utile
inutile
mal choisie
e) La documentation prsente l appui de la visite tait : o o o o excellente moyenne mdiocre pas disponible
f)
La visite tait :
o o o
bien organise assez bien organise mal organise
g) Observations et suggestions :
ANNEXE 4 c - EVALUATION DES EXERCICES SUR LE TERRAIN Numro assign votre groupe : Enseignant accompagnant votre groupe : Cochez la case approprie et formulez, au besoin, vos observations et suggestions dans lespace prvu cet effet. a) Lexercice a-t-il amlior votre connaissance de lunit correspondante ? o oui o un peu o non c) Les exposs thoriques sur cette unit vous ont-ils prpar cet exercice ? : o oui o un peu o non e) Les informations fournies pour effectuer cet exercice taient : o o o o excellentes moyennes mdiocres non existantes b) La dure totale de lexercice tait : o o o o trop longue adquate trop courte lexercice pourrait tre annul
d) La date de lexercice dans le contexte du stage tait : o bien choisie o assez bien choisie o mal choisie f) Lorganisation de lexercice tait :
129
o excellente o moyenne o mdiocre h) Le choix du site pour les exercices sur le terrain tait : o bon o moyen o mauvais
g) Avez-vous reu de lenseignant affect votre groupe les conseils et les instructions ncessaires ? : o oui o pas vraiment o non i) Observations et suggestions :
ANNEXE 4 d EVALUATION DU STAGE PLAN DACTION PERSONNEL NOM : INSTITUTION :
ACTIVITE 1 (Vous utiliserez un tableau identique pour 3 activits maximum)
130
Titre de lactivit : Personne(s) responsable(s) : Ressources ncessaires :
Rsultats escompts :
Moyens de vrification :
Calendrier dexcution :
ANNEXE 4 e - EVALUATION FINALE
Veuillez cocher la ou les case(s) approprie(s) et rpondre aux questions poses. Lvaluation revt un caractre anonyme. Elle a pour but de nous aider amliorer encore les stages de formation dans le domaine considr. Vous utiliserez, au besoin, des feuillets supplmentaires.
Nous vous remercions de votre coopration.
1. DISPOSITIONS PRECEDANT LE STAGE
1.1. Quand avez-vous t inform(e) de la possibilit de suivre ce stage (date) :
1.2. Comment avez-vous t slectionn(e) pour participer ce stage ?
Je me suis prsent(e) titre personnel

Jai t prsent(e) par mon employeur Jai t prsent(e) par le Correspondant national Jai t prsent(e) par un reprsentant du World Agroforestry Centre Autre mthode de slection (prcisez laquelle) :
131
1.3. Quels sont, parmi les documents ci-aprs, ceux que vous avez reus : Brochure
Formulaire dinscription
Lettre de candidature spcifiant les conditions de participation Renseignements sur le voyage jusqu Nairobi (Kenya) Autres documents (prcisez lesquels) :
1.4. Ces informations vous ont-elles permis de vous prparer au stage ? Oui Non
1.5. Formulez ici toute observation ou suggestion susceptible de nous aider amliorer les dispositions prcdant le stage :
EVALUATION FINALE
2. STRUCTURE DU STAGE 2.1. Les dates du stage taient-elles bien choisies (fvrier) ? Oui Non. Si vous avez rpondu Non, expliquez pourquoi vous pensez que les dates retenues taient mal choisies et indiquez quelles dates, selon vous, le stage devrait se tenir :
2.2.Evaluez les aspects gnraux du stage : Aspects valuer a) Dure totale du stage (1 semaine) b) Exposs thoriques c) Travaux en groupe d) Visites sur le terrain e) Travaux pratiques TROP LONG ACCEPTABLE TROP COURT
132
2.3 Considrez le programme du stage et notez les diffrentes units en fonction de votre opinion personnelle quant la qualit globale des sujets abords et quant leur utilit dans le contexte de votre travail quotidien. Vous noterez de 1 (excellent/trs utile) 5 (mdiocre/inutile). Vous veillerez ne pas utiliser la mme note plus dune seule fois !
Unit 1 Concepts et principes 2 Ppinires dessences agroforestires 3 Le bouturage 4 Le greffage 5 Le marcottage 6 La micropropagation 7 Essais de multiplication
Qualit
Utilit
2.4 Autres commentaires et suggestions sur la structure du stage de formation :
Page 2 de 7 pages
EVALUATION FINALE
3. OBJECTIFS DU STAGE 3.1 Considrez les objectifs du stage et cochez la note qui, selon vous, indique dans quelle mesure ces objectifs taient appropris et efficaces. Ces deux termes ont la signification suivante : Appropri : Efficace : caractrise lopportunit et lutilit des objectifs du stage dans le contexte de votre travail quotidien caractrise la manire dont les objectifs, appropris ou non, ont t atteints
(1 = PAS appropri et pas efficace, 5 = TRES appropri et trs efficace)
OBJECTIFS DU STAGE 1 Lobjectif global du stage est damliorer les connaissances et les comptences pratiques des techniciens responsables de la multiplication vgtative des ligneux dans le contexte des projets de recherchedveloppement en agroforesterie
APPROPRIES 2 3 4 5 1
EFFICACES 2 3 4 5
3.2. Le programme du stage a-t-il atteint ses objectifs ? Oui Plus ou moins Non 3.3. Lenseignement dispens au cours du stage vous permettra-t-il de mener bien votre Plan daction personnel ? Oui Plus ou moins Non 3.4. Autres commentaires et suggestions sur les objectifs et le programme du stage :
133
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EVALUATION FINALE
4. LE MATERIEL DE FORMATION 4.1. Avez-vous reu (en quantit) suffisamment de matriel de formation lappui des diffrents sujets abords au cours du stage ? Oui Plus ou moins Non 4.2. Quelle tait, dans lensemble, la qualit de ce matriel de formation ? Excellente Bonne Moyenne Mdiocre (expliquez pourquoi) : 4.3. Le matriel de formation qui vous a t fourni dans le courant du stage vous permettra-t-il de mieux enseigner lagroforesterie ? Oui
134
Plus ou moins Non 4.4. Autres commentaires et suggestions concernant le matriel de formation ncessaire pour ce type de stage :
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EVALUATION FINALE
5. ASPECTS LOGISTIQUES 5.1. Evaluez les dispositions logistiques prises en vue du stage. Les notes vont de 1 5 (1 = trs mauvaises, 2 = mauvaises, 3 = moyennes, 4 = bonnes, 5 = excellentes).
Aspect valuer Dispositions prises en vue du voyage sur les lignes internationales (le cas chant) Accueil larrive au Kenya (le cas chant) Formalits dinscription au World Agroforestry Centre Hbergement lhtel Nairobi (le cas chant) Repas (djeuners et pauses caf) Indemnit journalire de subsistance et rglement des frais divers Infrastructure de formation au World Agroforestry Centre (salles, matriel audiovisuel, etc.) Secrtariat Transport (navette entre le World Agroforestry Centre et lhtel, transport vers les sites visits et les lieux des travaux pratiques) Autres aspects (prcisez) : -
135
5.2. Autres suggestions et commentaires concernant les dispositions logistiques prendre pour ce type de stage :
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EVALUATION FINALE
6. INTERACTIONS ENTRE LES PARTICIPANTS ET LES ENSEIGNANTS 6.1. Evaluez les aspects ci-aprs en cochant la case approprie (1 = trs mauvais, 2 = mauvais, 3 = mdiocre, 4 = bon, 5 = excellent)
Aspect valuer Nombre total de participants ( 20) Diversit des milieux culturels et des expriences des participants Rapports entre les participants Rapports entre les participants et les enseignants
6.2. Commentaires et suggestions sur les rapports interpersonnels :
136
7. EVALUATION GLOBALE 7.1. En considrant tous les aspects (techniques et logistiques), comment valuezvous globalement le stage de formation : Excellent Trs bon Bon Mdiocre Mauvais (expliquez) :
7.2. Votre participation au stage vous permettra-t-elle de mieux enseigner lagroforesterie ? Oui Plus ou moins Non (expliquez pourquoi) :
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EVALUATION FINALE
7.3. Quels sont, votre avis, les trois principaux points forts du stage (par ordre dimportance) :
1.
2.
3.
7.4. Quels sont, votre avis, les trois principaux points faibles du stage (par ordre dimportance) et comment pourrait-on les amliorer :
1.
137
2.
3.
7.5. Suggrez quelques amliorations qui pourraient tre apportes ce type de stage :
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138
Index
A
Abiotiques 10 Acacia spp. 38 Acariens 28, 39, 40 Acide abscissique 7, 8, 101 Age physiologique 64 Agents pathognes 66, 88, 96, 98 Agromyzidae 40 Agrotis spp. 40 Al 45 Albizia spp. 38 Allongement des pousses 7, 99 Alnus 23 Anacardium occidentale 38 Analyse de variance 110 Ananas 93 Androgense 99 Annlation 88 Anti-gibberellines 7 Aphides 11, 39 Apomixie 4 Archivage 32 Auxines 7, 84, 86, 96, 100 Auxines synthtiques 7 Azadirachta indica 38 Azote 28, 53
C
Caf 39 Cafier 101 Cal 66 Calcium 27 Calliandra calothyrsus 38 Cambium vasculaire 66, 69 Capacit de rtention en eau 25 Capacit dchange cationique 25 Carences nutritionnelles 27 Carica papaya 38 Cassia angustifolia 38 Cellules mristmatiques 66, 68 Cernage des racines 23 Chambre de transfert 96 Chambre dincubation 96 Chambre dinoculation 96 Chssis surlevs 23 Chenilles 40 Cicadelles 40 Cicatrisation 64, 69, 70 Cicatrisation des plaies 7 Citrus 65, 67 Citrus auriculiformis 84 Citrus sinensis 72 Cloques 36 Coloptres 39, 40 Compatibles (matriels) 64 Conditions ncessaires la cicatrisation 70 Conteneurs 22, 23, 24 Contrle de la variation 103, 107 Couches dabscission 7 Criquets 39, 40 Croissance cellulaire du cambium 7 Crotalaria spp. 38 Culture dembryons 98 Culture de mristmes apicaux de pousses 98 Culture de pousses axillaires 98 Culture in vitro 91 Culture primaire 94 Cytokinines 8, 71
139

B
BA/AIB 93 Bac de bouturage 55 Bac de bouturage nbulisateur 55 Bac de bouturage en matire plastique 58 Bac de bouturage sans nbulisateur 56 Bananier 93 Bauhinia rufescens 57 Biotechnologie 93 Biotiques 10 Bourgeons axillaires 93 Bouturage 51 Boutures de tiges 51
index
D
Dformations des racines 24, 25, 47 Densit apparente 25 Dpiquage 47 Dpiquer 22, 34 Dpistage des maladies virales 68 Dpression due lendogamie 14 Desmodium distortum 38 Dveloppement des bourgeons 53 Dispositif exprimental 104, 105, 112 Dispositifs antivrilles 24, 25 Disposition en blocs 107 Diversit gntique 10 Documentation 2 Dodonaea viscosa 38 Dominance apicale 4, 6 Dormance 22 Drageons 3, 65 Durcissement 30, 57
F
Facteurs abiotiques 28 Facteurs biotiques 28 Fertilit 14, 25 Ficus spp. 84 Fonte des semis 35, 36 Formation de pousses adventives 97, 99 Formation de pousses axillaires 97, 98 Formation du cal 69, 80 Formation du cambium 69 Formation du tissu vasculaire 69
G
Gnotypes 5, 6 Germination 5, 22, 31, 32 Gestion des ravageurs et des maladies 35 Gibbrellines 7 Graines orthodoxes 14, 22 Greffage 3, 4 Greffe langlaise double 64, 73, 74, 80 Greffe langlaise simple 73, 74 Greffe en pont 68 Greffe terminale 73, 79 Greffe par approche 75, 81 Greffon 65 Grevillea robusta 38
index
E
Ebauche des racines 53 Ecussonnage 65, 75 Ecussonnage en plaque 76 Ecussonnage en T 75 Elongation des racines 51 Elongation des tiges 53 Embryogense somatique 100 Embryons somatiques 97, 100, 101 Endosperme 8, 100 Endurcies 21, 99 Engorgement 29 Enracinement 49, 51 Entaille 22 Eriophyidae 40 Erisyphe spp. 36 Espces exogames 12, 13, 16 Essais de multiplication 105 Essais factoriels ou en split-plot 33 Ethylne 8 Etiquetage 22 Eucalyptus 23, 38, 93 Eucalyptus camaldulensis 38 Eucalyptus x trabutii 67 Euphorbia balsamifera 38 Explant 94, 96, 100
140

H
Haplode 4, 97 Helianthus annuus 72 Hva 65, 76, 101 Hormones vgtales 7, 93 Hygine de la ppinire 20
I
I. Wombolu 16 Incompatibilits 71 Incuber 94 inhibiteur de croissance 8 Insectes 10, 28, 36, 39, 40, 42, 43, 44 Irvingia gabonensis 16
K
Khaya ivorensis 53 Kintine 8
L
L. diversifolia 31 L. trichandra 31 Leucaena 30 Leucaena leucocephala 31, 38 Lits surlevs 23 Locustes 39 Lovoa trichilioide 53 Lutte biologique 39 Lutte phytosanitaire 35, 43
N
Neem 39 Nmatode galles 37 Nmatodes 28, 37
O
Objectifs (des essais) 106 Odium 36 Oligolments 27, 28 Ombrage 28, 29 Ontogntique 8 Organogense 94
M
Macrolments 26 Magnsium 27 Maladies 10 Mangifera indica 72, 84 Marcottage 83 Marcottage arien 67, 83, 84, 85 Marcottage par buttage 83, 84, 87 Marcottage par couchage 84, 87 Margousier 29, 45 Maturit des tissus 8 McCown et Lloyd 96 Melia volkensii 107 Meloidogyne spp. 37 Mristme 97, 98 Mesoplatys ochroptera 40 Mesures 107 Mesures curatives 43 Mesures phytosanitaires 41 Mesures prventives 20, 41 Micro-greffage 92 Micropropagation 39, 91, 95 Microorganismes 25 Milieu environnant 29 Mimosa scabrella 38 Mise en pots 42, 56 Monocotyldones 4, 97 Mouches scie 39, 40 Mouches des fruits 39 Murashige et Skoog 96 Mycorhizes 25
P
P. armeniaca 72 P. domestica 72 P. persica 72 Palmier huile 93, 101 Parcelles 105 Ppinire 19 Ppinires dessences agroforestires 19 Persea americana 84, 86 Pesticides 19, 28, 29, 41, 43 Pesticides naturels 45 Phlome 27, 66, 69 Phosphore 27, 28, 53 Phyllophaga spp. 40 Physiologie 68 Phytohormones 1, 2, 93 Phytotron 113 Piment rouge 45 Plante-mre 50, 51, 52, 54, 55 Plante-souche 50, 51 Plantes dioques 68 Plantes exemptes de virus 92 Plantule 94, 100 Plantules de qualit 21 Plasticit 25 Polyembryonie 5, 94 Poncirus trifoliata 72 Populations monoclonales ou oligoclonales 10 Porosit 25 Porte-greffe 65 Potassium 27 Pousses adventives 99
141

index
index
Pousses apicales 8 Pousses picormiques 9 Pousses latrales 4, 80 Pro-embryon 94 Propagule 94 Proprits biologiques 25 Proprits chimiques 25 Proprits physiques 25 Prosopis africana 57 Prosopis juliflora 38 Prospection de matriel gntique 2, 16 Protocole 32 Protocoles dexprimentation 32 Prunus africana 36, 57, 110 Prunus amygdalyna 72 Psylles 39, 40 Pterocarpus erinaceus 57 Punaises 39 Pyralidae 40 Pyrthre 29, 45
Senna siamea 38 Sesamum indicum 40, 42 Sesbania sesban 40, 105 Sesbania spp. 37, 38, 41 Soucis 38, 42, 45 Soufre 27 Split-plot 33, 110 Spodoptera spp. 40 Strilisation chimique 42 Strilisation par la chaleur 42 Striliser la vapeur 29 Stolons 4 Subculture 94 Substrat 20 Substrat d'enracinement 52 Sujet intermdiaire 73 Surface foliaire 52, 53
T
Tabac 29, 45 Tagetes spp. 42 Tamarindus indica 57 Taphrina spp. 36 Tectona grandis 38 Tephrosia spp 38 Thrips 39 Tissus 93 Trait 10 Traitements 106 Triplochiton scleroxylon 54
R
Racines 22, 23, 29 Racines adventives 8 Racines nu 23 Racines de derris 45 Rajeunissement 67 Randomisation 106 Rcalcitrantes 6 Rcupration des embryons 98 Refroidissement 55 Rgnration 94, 97 Registre de ppinire 32 Rgulateurs de croissance 2, 7, 71 Rejets de souche 9 Rparation des dgts 68 Rptition des essais 106 Rticulum endoplasmique 70 Rhizobium 22, 33
142

V
Vicia Faba 72 Virus 39
Z
Zatine 8
S
Salle de prparation 96 Samanea saman 38 Sauterelles 39, 40 Slection de phnotypes 13

Multiplication

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La multiplication vgtative des ligneux en agroforesterie

Manuel de formation et bibliographie

Edit par Hannah Jaenicke et Jan Beniest

Imprim par : KUL GRAPHICS Ltd, Nairobi (Kenya)

Table des matires

Remerciements Introduction Aperu du stage de formation

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Slection et collecte des clones

Ppinires dessences agroforestires

Mesures curatives Bibliographie

Gestion de la ppinire - Travaux pratiques

Le bouturage - Travaux pratiques

Le greffage - Travaux pratiques

Le marcottage - Travaux pratiques

117 119 123 125 139

Unit 2 Les ppinires

Unit 7 Essais de multiplication

Objectifs de lenseignement dispens

Supports pdagogiques et lectures recommandes

Tests de connaissances et de comptences

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Zeev Wiesman IPALAC et Hannah Jaenicke World Agroforestry Centre

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Avantages de la multiplication vgtative

Maintenir des gnotypes suprieurs

Surmonter les problmes poss par la germination et le stockage

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Provoquer une floraison et une fructification plus prcoces

Combiner plusieurs gnotypes dans une seule plante

Contrler certaines phases du dveloppement

Uniformit des plantations

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Hormones vgtales et rgulateurs de croissance

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Maturit des tissus

Domestication des ligneux et multiplication vgtative

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Conserver la diversit gntique

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Slection et collecte des clones

Le matriel gntique peut tre prospect pour diverses raisons, notamment :

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Conseils pour la collecte

Plusieurs points sont importants pour la collecte :

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Introduction la multiplication vgtative des ligneux

Ppinires dessences agroforestires

Ppinires dessences agroforestires

Ppinires dessences agroforestires

Gestion des ppinires et production de plants

Ppinires dessences agroforestires

Ppinires dessences agroforestires

Comment grer une ppinire

Germination des graines et manipulation des plantules

Ppinires dessences agroforestires

Ppinires dessences agroforestires