Patrick McCrystal

Respirasi Seluler: Dari O 2 menjadi CO 2

Tujuan:
Laboratorium ini memberikan wawasan tentang proses respirasi sel dan bagaimana hal
itu dipengaruhi oleh suhu pada biji kacang polong yang berkecambah dan tidak aktif. Respirasi
seluler adalah proses katabolik penghasil ATP di mana penerima elektron adalah molekul
anorganik. Ini adalah pelepasan energi dari senyawa organik melalui oksidasi kimia dalam
mitokondria di dalam setiap sel. Karbohidrat, protein, dan lemak semuanya dapat dimetabolisme,
tetapi respirasi seluler biasanya melibatkan glukosa: C 6 H 12 O 6 + 6O 2 → 6CO 2 + 6H 2 O + 686
Kkal energi/mol glukosa teroksidasi. Respirasi seluler melibatkan glikolisis, siklus Krebs, dan
rantai transpor elektron. Glikolisis adalah jalur katabolik yang terjadi di sitosol dan mengoksidasi
sebagian glukosa menjadi dua piruvat (3-C). Siklus Krebs terjadi di mitokondria dan memecah
piruvat (Asetil-KoA) menjadi karbon dioksida. Kedua siklus ini menghasilkan sejumlah kecil
ATP melalui fosforilasi tingkat substrat dan NADH dengan mentransfer elektron dari substrat ke
NAD+. Siklus Krebs juga menghasilkan FADH 2 dengan mentransfer elektron ke FAD. Rantai
transpor elektron terletak di membran dalam mitokondria dan menerima elektron berenergi dari
enzim yang dikumpulkan selama glikolisis dan siklus Krebs, dan memasangkan elektron
eksergonik ini dengan sintesis ATP atau fosforilasi oksidatif. Proses ini menghasilkan sebagian
besar ATP. Respirasi seluler dapat diukur dengan dua cara: konsumsi O 2 (berapa mol O 2 yang
dikonsumsi dalam respirasi seluler) dan produksi CO 2 (berapa mol CO 2 yang diproduksi dalam
respirasi seluler). PV = nRT adalah rumus hukum gas inert, dimana P adalah tekanan gas, V
adalah volume gas, n adalah jumlah molekul gas, R adalah konstanta gas, dan T adalah suhu gas
dalam derajat K. Hukum ini menunjukkan beberapa hal penting tentang gas. Jika suhu dan
tekanan dijaga konstan maka volume gas berbanding lurus dengan jumlah molekul gas. Jika suhu
dan volume tetap konstan, maka tekanan gas berubah berbanding lurus dengan jumlah molekul
gas. Jika jumlah molekul gas dan suhu tetap, maka tekanan berbanding terbalik dengan volume.
Jika suhu berubah dan jumlah molekul gas dijaga konstan, maka tekanan atau volume atau
keduanya akan berubah berbanding lurus dengan suhu.

Metode:
Selama lab, kami menyiapkan suhu kamar dan penangas air 10 o C. Kemudian, kami
mengisi setengah gelas ukur 50 mL dengan air. Kami menambahkan 25 kacang polong yang
berkecambah dan menentukan jumlah air yang dipindahkan. Kemudian kami mengeluarkan
kacang polong, meletakkannya di atas tisu, mengisi ulang gelas ukur, dan menambahkan manik-
manik kaca ke gelas ukur sampai volumenya setara dengan volume kacang polong yang
berkecambah. Kami melepas manik-manik, mengisi ulang gelas ukur, menambahkan 25 kacang
polong yang tidak berkecambah, dan kemudian menambahkan lebih banyak manik-manik kaca
sampai volumenya sekali lagi sama dengan volume kacang polong yang berkecambah. Setelah
semua itu selesai, kami menyiapkan satu set kacang polong dan manik-manik lagi untuk 3
respirometer terakhir. Perakitan respirometer adalah langkah selanjutnya. Kami memperoleh 6
vial, sumbat, dan pipet ukur. Kemudian kami menempatkan segumpal kapas penyerap di bagian
bawah setiap vial dan, dengan menggunakan pipet, kapas dijenuhkan dengan sekitar 2-3 mL
KOH 15%. Kami kemudian menempatkan lapisan kapas non-penyerap di atas kapas yang
direndam KOH untuk melindungi kacang polong dari KOH. Kami menempatkan set pertama
kacang polong yang berkecambah, kacang polong kering dan manik-manik, dan manik-manik
saja di vial 1, 2, dan 3, dan set kedua di vial 4, 5, dan 6, kemudian menempatkan sumbat di setiap
 vial. Kami membuat selotip dari selotip untuk menahan pipet keluar dari air selama periode
kesetimbangan 10 menit dan meletakkan vial di atasnya (1, 2, dan 3 di bak mandi suhu kamar, 4,
5, dan 6 di bak mandi suhu kamar). mandi 10 o C). Periode 10 menit diperlukan untuk
memastikan bahwa perbedaan suhu antara udara dalam vial dan air tidak akan merusak hasil
kami. Setelah vial disesuaikan dengan benar, kami menurunkannya ke dalam air. Syukurlah, air
tidak mengalir ke respirometer, yang menandakan adanya kebocoran. Kami kemudian merekam
pembacaan pada pipet pada periode waktu yang ditentukan.

Hasil:

Pengukuran Konsumsi O 2 dari Biji Kacang Polong yang Direndam dan Dikeringkan pada
Suhu Kamar dan 10˚C

Manik-manik Kacang Kering dan Manik-

Kacang Berkecambah
Suhu Sendiri manik
Waktu
Aktual Membaca Perb Membac Perb Diff.∆ Membac Perb Diff.∆
(Min)
( o C) pada edaa a pada edaa yang a pada edaa yang
waktu X n waktu X n Dikoreksi waktu X n Dikoreksi

Awal-0 21 .87 .9 .89

0-5 20 .9 -.03 .79 .11 .14 .9 -.01 .02

0-10 20 .9 -.03 .7 .2 .23 .89 0 .03

0-15 20 .87 0 .62 .28 .28 .89 0 0

-20 20 .86 .01 .5 .4 .49 .89 0 -.01

Awal-0 9 .86 .85 .89

Oxygen Comsumption of Germinating Peas, Non -
0-5 10 .84 .02 .79 .06 .04 .87 .02 0
Germinating Peas, and Glass Beads at 20˚C and
0-10 10 .85 .01 .74 .11 .1 .9 -.01 -.02
10˚C
0-15 10 .87 .01 .69 .16 .17 .92
Beads
-.03
Alone-.02
20˚

0-20 110 .89 -.03 .65 .2 .23 .95 -.06 -.03

Germinating Peas
0.8 20˚
Consumption

Dry Peas and Beads

Oxygen

0.6
20˚
0.4
Beads Alone 10˚
0.2
0 Germinating Peas
0 0-5 0-10 0-15 -20 10˚
Time Dry Peas and Beads
10˚
 Pembacaan dari kacang polong perlu dibandingkan dengan pembacaan dari
manik-manik karena manik-manik berfungsi sebagai variabel kontrol, sehingga manik-
manik tidak mengalami perubahan volume gas. Benih yang berkecambah memiliki
tingkat metabolisme yang lebih tinggi dan membutuhkan lebih banyak oksigen untuk
pertumbuhan dan kelangsungan hidup. Kacang polong yang tidak berkecambah, meski
hidup, perlu mengonsumsi oksigen jauh lebih sedikit untuk bertahan hidup. KOH
menyerap karbon dioksida dan menyebabkannya membentuk endapan di bagian bawah
vial, mencegahnya mengubah tekanan di dalam vial. Ketika kacang polong menjalani
respirasi seluler, mereka mengkonsumsi oksigen dan melepaskan karbon dioksida, yang
bereaksi dengan KOH di dalam vial, menghasilkan penurunan gas di dalam pipet. Air
bergerak ke dalam pipet karena tekanan dalam pipet berkurang.

Perhitungan:

Tingkat dalam mL O 2 /
Kondisi Perhitungan
menit

Kacang Berkecambah / (0,85-0,65)

.01
10 o C 20 mnt.

Kacang Berkecambah / (0,9-0,5) 20

.02
20 o C mnt.

Kacang polong kering/ 10 (0,89-0,95) -.003

 o
C 20 mnt.

Kacang polong kering/ 20 (0,89-0,89)

o 0
C 20 mnt.
Kesimpulan:
Laboratorium mendemonstrasikan banyak hal penting yang berkaitan dengan respirasi
seluler. Ini menunjukkan bahwa laju respirasi seluler lebih besar pada kacang polong yang
berkecambah daripada kacang polong yang tidak berkecambah. Ini juga menunjukkan bahwa
suhu dan laju respirasi berbanding lurus; dengan kenaikan suhu, laju respirasi juga meningkat.
Karena fakta ini, respirometer yang ditempatkan di dalam air pada suhu 10 o C menunjukkan laju
respirasi seluler yang lebih rendah daripada respirometer yang ditempatkan di air bersuhu
ruangan. Kacang polong yang tidak berkecambah mengkonsumsi oksigen jauh lebih sedikit
daripada kacang polong yang berkecambah. Hal ini karena, meskipun kacang polong yang
berkecambah dan tidak berkecambah sama-sama hidup, kacang polong yang berkecambah
membutuhkan jumlah oksigen yang lebih besar untuk dikonsumsi agar benih terus tumbuh dan
bertahan hidup. Di laboratorium, CO 2 yang dibuat selama respirasi seluler dihilangkan oleh
kalium hidroksida (KOH) dan menghasilkan kalium karbonat (K 2 CO 3 ). Karbon dioksida perlu
dihilangkan agar perubahan volume gas di respirometer berbanding lurus dengan jumlah oksigen
yang dikonsumsi. Hasilnya adalah penurunan volume gas di dalam tabung, dan terkait dengan
penurunan tekanan di dalam tabung. Respirometer dengan manik-manik kaca berfungsi sebagai
kelompok kontrol yang tidak menjalani respirasi seluler. Banyak kesalahan bisa saja terjadi di
seluruh lab. Suhu rendaman mungkin dibiarkan berfluktuasi, yang akan mengubah suhu dalam
vial. Jumlah kacang polong, manik-manik, KOH, dan kapas mungkin bervariasi dari vial ke vial.
Udara mungkin masuk ke dalam vial melalui sumbat yang bocor atau pipet yang tidak tersegel
dengan baik. Botol-botol tersebut mungkin belum diseimbangkan dengan benar, dan siswa
mungkin membaca pipet terlalu cepat atau terlalu lambat. Siswa mungkin salah membaca pipet.
KOH bisa saja bersentuhan dengan sisi vial saat dijatuhkan ke kapas. Ketidakakuratan matematis
mungkin terjadi saat melengkapi tabel.