Patrick McCrystal

Respirația celulară: de la O 2 la CO2

Scop:
Acest laborator a oferit o perspectivă asupra procesului de respirație celulară și a modului
în care este afectată de temperatură atât în semințele de mazăre germinative, cât și în cele latente.
Respirația celulară este un proces catabolic producător de ATP în care receptorul de electroni
este o moleculă anorganică. Este eliberarea de energie din compuși organici prin oxidare chimică
în mitocondriile din fiecare celulă. Carbohidrații, proteinele și grăsimile pot fi metabolizate, dar
respirația celulară implică de obicei glucoză: C6H12O6+6O2→6CO2 + 6H2O+686Kcal de
energie/molde glucoză oxidată. Respirația celulară implică glicoliza, ciclul Krebs și lanțul de
transport al electronilor. Glicoliza este o cale catabolică care apare în citosol și oxidează parțial
glucoza în două piruvate (3-C). Ciclul Krebs are loc în mitocondrii și descompune un piruvat
(acetil-CoA) în dioxid de carbon. Aceste două cicluri produc o cantitate mică de ATP prin
fosforilarea la nivel de substrat și NADH prin transferul de electroni din substrat în NAD+.
Ciclul Krebs produce, de asemenea, FADH2 prin transferul de electroni către FAD. Lanțul de
transport al electronilor este situat la membrana interioară a mitocondriilor și acceptă electroni
energizați din enzimele colectate în timpul glicolizei și ciclului Krebs și cuplează această
alunecare exergonică a electronilor la sinteza ATP sau fosforilarea oxidativă. Acest proces
produce cea mai mare parte a ATP. Respirația celulară poate fi măsurată în două moduri:
consumul de O2 (câte moli deO2 sunt consumate în respirația celulară) și producția de CO 2 (câte
moli de CO2 sunt produse în respirația celulară). PV = nRT este formula legii gazului inert, unde
P este presiunea gazului, V este volumul gazului, n este numărul de molecule de gaz, R este
constanta gazului și T este temperatura gazului în grade K. Această lege arată câteva lucruri
importante despre gaze. Dacă temperatura și presiunea sunt menținute constante, atunci volumul
gazului este direct proporțional cu numărul de molecule ale gazului. Dacă temperatura și
volumul rămân constante, atunci presiunea gazului se schimbă direct proporțional cu numărul de
molecule de gaz. Dacă numărul de molecule de gaz și temperatura rămân constante, atunci
presiunea este invers proporțională cu volumul. Dacă temperatura se schimbă și numărul
moleculelor de gaz este menținut constant, atunci fie presiunea, fie volumul, fie ambele se vor
schimba direct proporțional cu temperatura.

Metode:
În timpul laboratorului, am pregătit atât o temperatură a camerei, cât și o baie de apă de
10oC. Apoi, am umplut un cilindru gradat de 50 ml la jumătatea drumului cu apă. Am adăugat 25
de mazăre germinativă și am determinat cantitatea de apă care a fost deplasată. Apoi am scos
mazărea, le-am așezat pe un prosop de hârtie, am reumplut cilindrul gradat și am adăugat
mărgele de sticlă la cilindrul gradat până când volumul a fost echivalent cu cel al mazărei
germinative expandate. Am îndepărtat mărgelele, am reumplut cilindrul gradat, am adăugat 25
de mazăre negerminativă și apoi am adăugat mai multe mărgele de sticlă până când volumul a
fost din nou egal cu volumul mazărei germinative. După tot ce s-a făcut, am pregătit un alt set de
mazăre și margele pentru ultimii 3 respirometri. Asamblarea respirometrelor a fost următorul
pas. Am obținut 6 flacoane, dopuri și pipete gradate. Apoi am pus un tampon de bumbac
absorbant în partea inferioară a fiecărui flacon și, folosind o pipetă, am saturat bumbacul cu
aproximativ 2-3 ml de 15 % KOH. Apoi am plasat un strat de bumbac neabsorbant deasupra
bumbacului îmbibat cu KOH, pentru a proteja mazărea de KOH. Am plasat primul set de mazăre
germinativă, mazăre uscată și mărgele și mărgele singure în flacoanele 1, 2 și 3, iar al doilea set
 în flacoanele 4, 5 și 6, apoi am așezat dopurile în fiecare flacon. Am făcut curele din bandă de
mascare pentru a ține pipetele afară din apă pentru perioada de echilibrare de 10 minute și am
așezat flacoanele pe ele (1, 2 și 3 în baia la temperatura camerei, 4, 5 și 6 în baia de 10 oC).
Perioada de 10 minute a fost necesară pentru a ne asigura că o diferență de temperatură între
aerul din flacon și apă nu va denatura rezultatele noastre. Odată ce flacoanele au fost ajustate
corespunzător, le-am coborât în apă. Din fericire, apa nu s-a repezit în respirometru, ceea ce ar fi
indicat o scurgere. Apoi am înregistrat citirea pe pipetă la intervale de timp stabilite.

Rezultatele:

Măsurarea consumului deO2 prin semințe de mazăre înmuiate și uscate la temperatura

camerei și 10°C

Tempe Numai mărgele Mazăre germinativă Mazăre uscată și margele

Timp ratura Citirea la Citirea la Citirea la
(min) reală Dif.∆ Dif.∆
momentu Dif. moment Dif. moment Dif.
(oC) corectat corectat
lX ul X ul X

Inițial-
21 .87 .9 .89
0

0-5 20 .9 -.03 .79 .11 .14 .9 -.01 .02

0-10 20 .9 -.03 .7 .2 .23 .89 0 .03

0-15 20 .87 0 .62 .28 .28 .89 0 0

-20 20 .86 .01 .5 .4 .49 .89 0 -.01

Inițial-
0 Oxygen Comsumption of Germinating .89
Peas, Non -
9 .86 .85

0-5 Germinating
10 .84 Peas,
.02 and Glass
.79 .06 Beads
.04 at
.87 20˚C.02and 0

0-10 10 .85 .01 .74 10˚C

.11 .1 .9 -.01 -.02 Beads Alone 20˚
0-15 10 .87 .01 .69 .16 .17 .92 -.03 -.02
1
0-20 10 .89 -.03 .65 .2 .23 .95 Germinating
-.06 Peas
-.03
0.8 20˚
Consumption

Dry Peas and Beads

Oxygen

0.6
20˚
0.4
Beads Alone 10˚
0.2
0 Germinating Peas
0 0-5 0-10 0-15 -20 10˚
Time Dry Peas and Beads
10˚
 A fost necesar să se compare citirea din mazăre cu citirea din mărgele, deoarece
mărgelele au servit ca variabilă de control, prin urmare, mărgelele nu au prezentat nicio
modificare a volumului de gaz. Semințele germinative au o rată metabolică mai mare și
au nevoie de mai mult oxigen pentru creștere și supraviețuire. Mazărea negerminativă,
deși vie, trebuie să consume mult mai puțin oxigen pentru a supraviețui. KOH a absorbit
dioxidul de carbon și l-a determinat să formeze un precipitat în partea inferioară a
flaconului, împiedicându-l să schimbe presiunea din flacon. Când mazărea a suferit
respirație celulară, au consumat oxigen și au eliberat dioxid de carbon, care a reacționat
cu KOH în flacon, ducând la o scădere a gazului în pipetă. Apa s-a mutat în pipetă
deoarece presiunea din pipetă s-a diminuat.

Calcule:

Condiție Calcule Rata în mL O2/ minut

Mazăre germinativă/ 10 (0,85-0,65)

o .01
C 20 minute

Mazăre germinativă/ 20 (0,9-0,5)

o .02
C 20 minute

(0,89-0,95)
Mazăre uscată/ 10 oC -.003
20 minute
 (0,89-0,89)
Mazăre uscată/ 20 oC 0
20 minute
Concluzie:
Laboratorul a demonstrat multe lucruri importante legate de respirația celulară. Acesta a
arătat că ratele de respirație celulară sunt mai mari la mazărea germinativă decât la mazărea
negerminativă. De asemenea, a arătat că temperatura și ratele de respirație sunt direct
proporționale; Pe măsură ce temperatura crește, crește și ratele de respirație. Datorită acestui
fapt, respirometrele plasate în apă la 10 o C au prezentat orată mai mică de respirație celulară
decât respirometrele plasate în apa la temperatura camerei. Mazărea negerminativă consuma
mult mai puțin oxigen decât mazărea germinativă. Acest lucru se datorează faptului că, deși
mazărea germinativă și negerminativă sunt ambele vii, mazărea germinativă necesită o cantitate
mai mare de oxigen pentru a fi consumată, astfel încât semințele să continue să crească și să
supraviețuiască. În laborator, CO 2 produs în timpul respirației celulare a fost îndepărtat de
hidroxidul de potasiu (KOH) și a creat carbonat de potasiu (K2CO3). A fost necesar ca dioxidul
de carbon să fie îndepărtat astfel încât modificarea volumului de gaz din respirometru să fie
direct proporțională cu cantitatea de oxigen consumată. Rezultatul a fost o scădere a volumului
de gaz în tub și o scădere aferentă a presiunii în tub. Respirometrul cu doar mărgelele de sticlă a
servit ca un grup de control care nu a suferit respirație celulară. Numeroase erori ar fi putut
apărea în tot laboratorul. Este posibil ca temperatura băilor să fi fost lăsată să fluctueze, ceea ce
ar schimba temperatura în flacoane. Cantitățile de mazăre, mărgele, KOH și bumbac pot varia de
la flacon la flacon. Este posibil ca aerul să se fi strecurat în flacon printr-un dop neetanș sau o
pipetă slab sigilată. Este posibil ca flacoanele să nu fi fost echilibrate corespunzător, iar elevii ar
fi putut citi pipetele fie prea devreme, fie prea târziu. Este posibil ca elevii să fi citit greșit
pipetele. KOH ar fi putut intra în contact cu părțile laterale ale flacoanelor atunci când a fost
aruncat pe bumbac. Este posibil să fi apărut inexactități matematice la completarea tabelului.