ASPECTOS GENTICOS DA OBESIDADE | 327

REVISO | REVIEW

Aspectos genticos da obesidade

Genetics of obesity
Iva MARQUES-LOPES 1 Amelia MARTI 1 Mara Jess MORENO-ALIAGA1 Alfredo MARTNEZ1

RESUMO
A obesidade definida como a acumulao excessiva de gordura corporal deriva de um desequilbrio crnico entre a energia ingerida e a energia gasta. Neste desequilbrio podem estar implicados diversos fatores relacionados com o estilo de vida (dieta e exerccio fsico), alteraes neuro-endcrinas, juntamente com um componente hereditrio. O componente gentico constitui um fator determinante de algumas doenas congnitas e um elemento de risco para diversas doenas crnicas como diabetes, osteoporose, hipertenso, cncer, obesidade, entre outras. O aumento da prevalncia da obesidade em quase todos os pases durante os ltimos anos, parece indicar que existe uma predisposio ou susceptibilidade gentica para a obesidade, sobre a qual atuam os fatores ambientais relacionados com os estilos de vida, em que se incluem principalmente os hbitos alimentares e a atividade fsica. A utilizao de modelos animais de obesidade, a transferncia gnica e os estudos de associao e ligamento, permitiram a identificao de vrios genes implicados na obesidade. Termos de indexao: obesidade, genes, mutao, polimorfismo, estudos de associao e ligamento, modelos genticos de obesidade.

ABSTRACT
Obesity, defined as an excessive body fat accumulation, is caused by a chronic imbalance between energy intake and energy expenditure. Several factors have been associated with this energy imbalance, such as life style (diet and physical activity), neuroendocrine disorders, together with the genetic background. The genetic background is a major determinant factor of some congenital diseases and a risk factor for some chronic disorders, such as diabetes, osteoporosis, hypertension, cancer, obesity, and others. The increased prevalence
1

Departamento de Fisiologa y Nutricin, Universidad de Navarra. Edificio de Investigacin C/ Irunlarrea, 1, 31008, Pamplona, Espaa. Correspondncia para/Correspondence to: A. MARTNEZ. E-mail: jalfmtz@unav.es

Rev. Nutr., Campinas, 17(3):327-338, jul./set., 2004

Revista de Nutrio

328

I.MARQUES-LOPES et al.

of obesity in most countries during the last years, seems to indicate that there is a genetic predisposition or susceptibility to be obese which is increased by environmental and life style factors, mainly by food habits and physical in activity. The use of obesity animal models, genetic transfer and the association and linkage studies leaded to the identification of many genes associated with obesity. Index terms: obesity, genes, mutation, polymorphism, obesity genetic models, association and linkage studies.

INTRODUO A acumulao excessiva de tecido adiposo (obesidade) deriva de um aporte calrico excessivo e crnico de substratos combustveis presentes nos alimentos e bebidas (protenas, hidratos de carbono, lipdios e lcool) em relao ao gasto energtico (metabolismo basal, efeito termognico e atividade fsica). Nessa acumulao intervm, tanto os hbitos alimentares e de estilo de vida, os fatores sociolgicos e as alteraes metablicas e neuro-endcrinas, como os componentes hereditrios1,2,3. Neste sentido, os genes intervm na manuteno de peso e gordura corporal estveis ao longo do tempo1, atravs da sua participao no controle de vias eferentes (leptina, nutrientes, sinais nervosos, entre outros), de mecanismos centrais (neurotransmissores hipotalmicos) e de vias aferentes (insulina, catecolaminas, sistema nervoso autnomo (SNA). Assim, o balano energtico, do qual participam a energia ingerida e a energia gasta, parece depender cerca de 40% da herana gentica4, podendo afetar ambas as partes da equao energtica (apetite e gasto). Os progressos cientficos indicam que existe uma base gentica transmissvel, implicada na manuteno de um peso corporal estvel5, atravs dos seguintes mecanismos: 1) no controle de pptidos e monoaminas implicados na regulao do apetite; 2) nas variaes do metabolismo basal, no efeito termognico dos alimentos ou na atividade fsica espontnea e 3) na regulao da utilizao metablica dos nutrientes energticos, para suprir as necessidades do organismo. O aumento mundial da prevalncia da obesidade atribui-se principalmente s mudanas

nos estilos de vida (aumento do consumo de alimentos ricos em gordura, reduo da atividade fsica, etc.), que incidem sobre uma certa susceptibilidade ou predisposio gentica para ser obeso6. Neste contexto, tambm o fentipo da obesidade, do qual se distinguem quatro tipos em funo da distribuio anatmica da gordura corporal (global, andride, ginide e visceral), influenciado pela base gentica e por fatores ambientais3,4. Alm disso, desde o ponto de vista evolutivo, os indivduos com genes austeros ou poupadores podem ter sido favorecidos, j que a funo reprodutora est dependente das reservas energticas e as pessoas mais resistentes desnutrio podem ter sobrevivido em maior proporo, durante as pocas de falta de alimentos. Por ltimo, a co-existncia de obesidade em vrios membros da mesma famlia, confirma a participao da herana gentica na incidncia da obesidade. A probabilidade de que os filhos sejam obesos quando os pais o so, foi estimada em alguns estudos obtendo-se percentagens entre 50% e 80%7. Confirmam essa hiptese tanto o fato de existirem indivduos com uma alterao na termognese, no metabolismo basal ou na activao simptica, como a constatao de poderem os fatores genticos modificar os efeitos da atividade fsica sobre o peso e a composio corporal8.

ESTRATGIAS DE INVESTIGAO GENTICA DA OBESIDADE A epidemiologia gentica da obesidade tem como objetivo a discriminao dos rasgos do fentipo atribuveis base gentica em relao

Revista de Nutrio

Rev. Nutr., Campinas, 17(3):327-338, jul./set., 2004

ASPECTOS GENTICOS DA OBESIDADE | 329

s influncias externas do ambiente9. As estratgias de investigao dos determinantes genticos da obesidade incluem mtodos muito diversos (Quadro 1). O processo de interrelacionar um gene com um fentipo torna-se difcil pela baixa densidade de DNA codificante (<5%) e pela magnitude do material gentico constituinte do genoma humano, assim como pelas possveis interaes entre genes e fatores ambientais10.

Quadro 1. Possibilidades de investigao gentica da obesidade. Estudos de sndromes mendelianas Autossmico dominante Autossmico recessivo Ligado ao cromossoma X Estudos de sistemas modelos Animais obesos Animais transgnicos Cruzamento (QTL): fentipo vs. gentipo Estudos de associao e ligamento Epidemiologia de genes candidatos Segregao familiar

Diversos estudos com elevado nmero de famlias com diferentes graus de consanginidade permitiram quantificar que a associa indicadores objetivos de obesidade (IMC/%gordura), com a proximidade do grau de parentesco4,7, sendo o coeficiente de correlao (r2) baixo entre esposos (0,10-0,19) e tiossobrinhos (0,08-0,14), aumentando entre pais e filhos (0,15-0,23) e entre irmos (0,24-0,34). A correlao do ndice de Massa Corporal (IMC) ainda mais elevado em gmeos monozigticos (0,15-0,42) e dizigticos (0,70-0,88). Ademais, estudos de interveno diettica, baseados em balanos energticos positivos e negativos em gmeos idnticos, assinalam fidedignamente que as diferenas na susceptibilidade super alimentao crnica ou a periodos de inanio, parecem ser explicadas principalmente por fatores genticos13,14. As estratgias de identificao de genes implicados na obesidade podem ser ascendentes ou descendentes10. A metodologia ascendente, parte do gentipo e tenta observar uma correlao entre um gene ou grupo de genes com o fentipo; isto , trata de estabelecer uma relao ou ligao entre uma caracterstica gentica dentro de uma famlia e a transmisso do gene/genes. O mtodo descendente, parte do fentipo (ndice de obesidade) e analiza a distribuio ou presena de um determinado gene entre diversos ncleos e grupos familiares para estabelecer o grau de hereditariedade desse carter. Algumas limitaes deste tipo de estudos devem-se metodologia de avaliao da obesidade (fentipo) e natureza epidemiolgica destas investigaes baseadas em critrios estatsticos e no individuais7. Os estudos de segregao familiar revelam que a hereditariedade do ndice de Quetelet (peso/altura2) est na ordem dos 40%, enquanto que as investigaes com gmeos estimam a contribuio gentica em 70-80%13. No entanto, estas informaes no so suficientes para explicar inequivocamente a origem gentica da obesidade, uma vez que as famlias compartem outros fatores implicados nesta,

Os estudos de segregao de ncleos familiares, de adoes, e entre gmeos, assim como de associao gentica, confirmam a tese de que o risco de obesidade superior nos descendentes de pessoas obesas11. As investigaes relacionadas com doenas de transmisso mendeliana tambm indicam que a obesidade pode ser uma caracterstica de doenas autossmicas dominantes, recessivas e ligadas ao cromossoma X. Por outro lado, os estudos experimentais, tambm permitiram identificar alguns genes relacionados com a obesidade, atravs do gentipo de animais geneticamente obesos (leptina, receptor da leptina, protena agouti) ou do cruzamento de animais selecionados pelo fentipo e mediante animais carentes ou que expressam de forma elevada receptores adrenrgicos 3, protenas desacoplantes (UCPS), fatores de transcrio e diferenciao (PPAR, C/EBP)...), neuropptido Y (NPY), etc.6,9,12.

Rev. Nutr., Campinas, 17(3):327-338, jul./set., 2004

Revista de Nutrio

330

I.MARQUES-LOPES et al.

como o estilo de vida, os hbitos dietticos e o meio-ambiente14. A anlise do DNA humano para identificar genes relacionados com a obesidade ou outras doenas condicionadas geneticamente, inclui tcnicas de clonao e seqenciao de genes ou fragmentos de DNA, hibridao de cidos nuclecos, utilizao de enzimas de restrio (endonucleases), fracionamentos por electroforese (Southern), amplificao por reaes em cadeia com polimerasas (PCR), ou anlise de produtos do gene (protenas), entre outras15. A busca de novas mutaes implica metodologias mais complexas e especficas, tais como a utilizao de seqncias de DNA, anlise inespecfica do genoma (DD), anlise conformacional de polimorfismos de uma s linha (SSCP) e a electroforese de gradiente16,17. Os avanos tecnolgicos dos ltimos anos possibilitaram o desenvolvimento da genmica, transcriptmica e proteinmica, ferramentas moleculares que permitem examinar cada estgio do fluxo de informao biolgica, de DNA a RNA e, deste, a protenas at a funo biolgica18. Com tais instrumentos, pode-se avaliar a expresso de milhares de genes/protenas numa nica hibridao, o que se torna de grande utilidade no estudo dos mecanismos moleculares das diversas doenas19,20. Alguns investigadores utilizaram tambm a tecnologia array (DNA chip) para determinar as alteraes na expresso de genes associados com a diabetes em ratos magros, obesos e diabticos. Suas pesquisas indicaram que a expresso de genes adipognicos era reduzida nos indivduos com diabetes21. Os microarrays de oligonucletidos constituem uma nova tecnologia para o estudo do genoma. Neste sentido, realizou-se uma anlise parcial da expresso genmica do tecido adiposo em humanos e detectou-se vrios genes que at o momento no fora demonstrado expressarem-se no tecido adiposo; tal resultado sugere novos genes implicados na fisiopatologia da obesidade21.

TRANSTORNOS DE TRANSMISSO MENDELIANA As doenas de origem gentica classificam-se em trs categorias: 1) Alteraes cromossmicas; 2) Doenas monognicas ou de transmisso mendeliana; e 3) Sndromes multifatoriais ou complexas15. As alteraes cromossmicas implicam uma ausncia, duplicao ou distribuio anormal de um ou vrios cromossomas, que resultam em deficincia ou excesso de determinado material gentico. Por exemplo, a sndrome de Down (trissomia 21) assim como a sndrome de Turner (s um cromossoma X), normalmente vm acompanhadas de baixa estatura. As doenas monognicas ou mendelianas, determinadas pela mutao de um nico gene, caracterizam-se por um modelo tpico de transmisso gentica que pode classificar-se como autossmico dominante, autossmico recessivo ou ligado ao cromossoma X. A busca no banco de dados sobre Herana Mendeliana no ser humano (OMIM) indicou 39 entradas que se referem manifestao clnica de obesidade com a designao de doenas congnitas autossmicas dominantes; 55 entradas, com a designao de transmisso autossmica recessiva; outras 21com a designao de doenas ligadas ao cromossoma X22,23. A localizao cromossmica (locus) no genoma humano de pelo menos 16 das doenas mencionadas anteriormente, aparece na bibliografa sobre o assunto. A sndrome de Prader-Willi (OMIM 176270; 15q) cursa com obesidade dismrfica prematura (1-3 anos), hiperfagia, hipotonia muscular, hipogonadismo, resistncia liplise, estatura pequena e atraso mental moderado; ocasionada a sndrome por alteraes no brao q do cromossoma 15 paterno ou por duas cpias maternas do mesmo, doena cuja transmisso autossmica dominante e cuja incidncia de 1 em 30000. Tambm so autossmicas dominantes a deficincia em leptina (OMIM 164160; 7q) e a sndrome de Schinzel (OMIM 181450; 12q).

Revista de Nutrio

Rev. Nutr., Campinas, 17(3):327-338, jul./set., 2004

ASPECTOS GENTICOS DA OBESIDADE | 331

As sndromes de Ahlstrom (OMIM 203800; 2p), Bordet-Biedl (OMIM 209900; 11q, 209901; 16q, 600151; 3p, 600374, 15q) e Cohen (OMIM 216550; 8q), que costumam serem acompanhadas de um fentipo de obesidade e de outras manifestaes dismrficas como a polidactilia e a sindactilia, so autossmicas recessivas. As sndromes monognicas ligadas ao cromossoma X incluem as sndromes de Borjeson (301900; Xq) e de Simpson (312870; Xq), entre outras9. As ltimas sndromes monognicas descritas, referem-se s mutaes no cromossoma 1, relacionado com o receptor de leptina (LEPR); no cromossoma 2, que afeta a pr-opiomelanocortina (POMC); no cromossoma 5, que altera o gene implicado numa convertase de precursores de hormnios (PC1); e no cromossoma 18, que codifica os receptores de melanocortina 4 (MCR4)9,14. As sndromes multifatoriais normalmente afetam vrios genes (polignicos) e a sua expresso pode depender de fatores ambientais. Algumas doenas crnicas, como o caso da diabetes, da hipertenso e da gota, podem incluir-se neste grupo; a obesidade, como transtorno de etiologia mltipla, tambm se pode explicar, em alguns casos, como o resultado de uma doena de origem multifatorial com implicaes genticas15.

A descrio de animais fenotipicamente obesos com mutaes monognicas permitiu localizar alguns genes e caracterizar a sua participao na obesidade e as conseqncias da sua ausncia ou alterao25. Assim, os ratos diabtico (db/db), obeso (ob/ob), Tubby (tub), amarelo (Ay) , gordo (fat) e a rata Zucker (fa/fa), permitiram reconhecer genes homlogos no genoma humano, que se podem expressar de forma dominante (Ay) ou recessiva (db, ob, tub, fat). O fentipo de obesidade destes animais varivel no que diz respeito ao seu desenvolvimento como nas manifestaes e transtornos metablicos observados1,26. Assim, o rato amarelo (agouti) expressa de forma muito elevada a protena agouti codificada pelo cromossoma 2, que compete com o hormnio estimulante de melancitos (MSH) e com pptidos relacionados com a pr-opiomelanocortina. Neste caso a obesidade se instala de forma tardia acompanhada de hiperfagia. Os ratos obesos (ob/ob), cuja mutao se localiza no cromossoma 6 murino, desenvolvem-se com uma sndrome acompanhada de hiperfagia, diabetes e obesidade, cuja origem se deve ausncia de leptina (LEP) ou presena de leptina no funcional. Por outro lado, o modelo de obesidade observado no rato db/db e na rata fa/fa (Zucker) deve-se a uma resistncia leptina, como conseqncia de alteraes no receptor da leptina, causadas por uma mutao no cromossoma 4 do rato ou no cromossoma 5 da rata. Estes animais, alm de obesidade, apresentam hiperinsulinemia, intolerncia glicose e alteraes neuro-endcrinas e termognicas, alm de hiperfagia e infertilidade. A rata Zucker apresenta algumas variantes, assim como a rata corpulenta, SHR. A mutao presente no gene tub (rato Tubby), localizada no cromossoma 7, produz obesidade de aparecimento lento, uma ligeira resistncia insulina com hipoglicemia moderada e transtornos sensoriais. A ao da mutao parece estar ligada a uma incapacidade para hidrolizar diversos precursores. O rato gordo

UTILIZAO DE MODELOS ANIMAIS As investigaes com animais de laboratrio destinadas identificao de genes implicados na obesidade e seus homlogos no ser humano, incluem o estudo de modelos animais de obesidade com mutaes monognicas e polignicas, a caracterizao de loci relacionados com a obesidade atravs do cruzamento de animais com gentipo conhecido e fentipo obeso e tambm a produo de animais transgnicos ou knockout de genes candidatos relacionados com a incidncia de obesidade6,12,24.

Rev. Nutr., Campinas, 17(3):327-338, jul./set., 2004

Revista de Nutrio

332

I.MARQUES-LOPES et al.

com a mutao fat/fat no cromossoma 8, constitui um exemplo de obesidade tardia, acompanhada de infertilidade e hiperinsulinemia; nele, foi afetada a enzima carboxipeptidase E, responsvel pelo processamento de diferentes precurssores de hormnios como a pr-insulina e o POMC. Os modelos animais polignicos de obesidade, normalmente so de mais interesse para avaliar as interaes da susceptibilidade gentica com outras variveis dietticas, ambientais e metablicas, embora a sua interpretao possa ser complexa em certos casos. Os modelos de obesidade com etiologia polignica incluem, entre outros, os ratos obesos New Zealand, o rato BSB, a rata Osborne-Mendel e a rata do deserto, assim como algumas raas de primatas que costumam desenvolver sobrepeso e obesidade pela ingesto de diversas dietas ou como conseqncia da idade4. Os modelos animais de obesidade permitiram identificar e caracterizar as regies homlogas nos seres humanos. Assim, os loci implicados na obesidade presentes nos ratos amarelos (Ay), obeso (ob), diabtico (db), gordo (fat) y Tubby (tub) apresentam homologias nos cromossomas 20 (ASP), 7 (LEP), 1 (LEPR), 4 (CPE) e 11 (TULP1/2) do genoma humano, respectivamente. Os ratos alterados geneticamente, animais que eliminaram ou incorporaram ao seu genoma fragmentos especficos de DNA, permitiram verificar a funo de alguns genes relacionados com a obesidade, atravs da expresso aumentada, anulao ou regulao de diversos genes 6. Neste sentido, diversos laboratrios criaram animais transgnicos com um fentipo de obesidade, induzido por inibio do receptor de glicocorticides, expresso aumentada de CRH e de ACTH, expresso aumentada da protena agouti e do receptor GLUT-4; ou por bloqueio da expresso de UCP e do receptor adrenrgico 3, bombesina e serotonina, assim como da metalotioneina. Tambm se descreveram animais transgnicos em que o fentipo se caracteriza por

uma reduo da gordura corporal atravs da expresso aumentada de LPL, UCP e da enzima PEPCK ou pelo desenvolvimento de animais knockout para GLUT-4, frao RIIb da proteinquinase A, hormnio concentrador de melanina (MCH) e do neuropptido Y (NPY). Existem, ainda, animais transgnicos vinculados aos estudos de controle da termognese (adrenalina), da tolerncia glicose (TNF-) e da diferenciao celular (C/EBP). necessrio prestar ateno s limitaes destes modelos transgnicos para validar a funo fisiolgica de um determinado gene. O bloqueio ou expresso aumentada de um gene realiza-se em etapas muito precoces do crescimento, afetando todos os tecidos do organismo; alm disso, tambm podem existir mecanismos compensatrios para substituir a funo desse gene12. Para atenuar estas limitaes existem atualmente novas estratgias genticas que permitem a ativao e/ou desativao do gene ou tecido em questo e que podem conduzir a uma melhor compreenso da funo do referido gene9,27,28. Outro mtodo, desenhado inicialmente para a gentica vegetal, conhecido como seleo de locus por caracteres quantitativos, foi convenientemente utilizado para identificar loci com influncia sobre o fentipo da obesidade. Esta estratgia requer o cruzamento de duas raas (de ratos, ratas, etc.) com genomas conhecidos; posteriormente, a anlise do fentipo obtido, atravs de determinaes do peso, gordura corporal, adiposidade, identifica as regies cromossmicas implicadas na hereditariedade dessa caracterstica e as suas possveis homologias no genoma humano11. A utilizao destes mtodos permitiu a identificao de pelo menos 55 loci implicados na transmisso gentica da obesidade (e os seus homlogos no homem), alguns deles dependentes da dieta e de outros polignicos localizados principalmente nos cromossomas humanos 1, 3, 5, 7, 8, 10, 11, 12, 14, 17, 20, e X6,9.

Revista de Nutrio

Rev. Nutr., Campinas, 17(3):327-338, jul./set., 2004

ASPECTOS GENTICOS DA OBESIDADE | 333

TRANSFERNCIA GNICA E OBESIDADE O fundamento terico de uma nova estratgia teraputica, consiste em incorporar um gene ou fragmento de DNA no interior de determinada clula 15,16. Esta tcnica poderia permitir o tratamento gentico da obesidade, nos casos em que a causa seja a ausncia ou deficincia de um gene implicado na sua etiologia; isto se faria mediante a substituio ou incorporao de um determinado gene cuja atividade seja deficiente ou inadequada. Um exemplo desta possibilidade consiste em induzir determinadas clulas (por exemplo, msculo) a produzir grandes quantidades de uma protena atravs da incorporao de um determinado gene ou fragmento de DNA no seu ncleo celular. Os mtodos de introduo de material gentico incluem vetores virais (adenovirus, herpes vrus e outros) e no virais (lipossomas, conjugados DNA-protenas). A transferncia do material pode realizar-se ex vivo a clulas cultivadas, para posterior transplante ao receptor; ou in vivo, mediante a transferncia direta (injeo) do vetor com o gene para as clulas do receptor. Assim, uma vez que a transferncia de DNA para as miofibrilhas pode induzir a expresso de genes exgenos, injees intra-musculares de plsmidos com cDNA especficos foram utilizadas como mtodo de produo de diferentes protenas: fatores de coagulao, enzimas, citoquinas, hormnios, etc. Um exemplo da possibilidade desta tcnica deu-se na induo da produo de leptina em msculo, depois da incorporao do seu gene nesse tecido29. A leptina, sintetizada e segregada pelo tecido adiposo, funciona como um sinal aferente de saciedade, que atua sobre o hipotlamo, regulando o apetite e o metabolismo e, portanto, controlando a massa gorda corporal30,31. Assim, os ratos ob/ob que apresentam uma mutao neste gene, so animais obesos, nos quais a administrao repetida de leptina induz uma reduo do apetite e do peso corporal. Por outro lado, o tratamento in vivo com leptina aumenta a

taxa de liplise e o consumo de oxignio nestes animais. Neste sentido, um vetor de expresso plasmdica com cDNA de leptina, administrou-se no msculo tibial da pata traseira dos ratos, em conjunto com o promotor de citomegalovirus e do elemento regulador da cadeia leve da miosina. Os efeitos da injeo do gene da leptina e a sua incorporao ao msculo, revelam uma reduo significativa do apetite depois da injeo de DNA, assim como tambm uma diminuio do peso corporal. Em relao aos animais controle os animais submetidos terapia gnica com leptina, aumentaram tanto a leptinemia como o consumo de oxignio in vitro e a liplise basal29. Estes resultados confirmam que a leptina funcional pode ser produzida pelo msculo e liberada na circulao sangnea; isto refora a hiptese de que a leptina contribui aos efeitos de regulao do peso e da gordura corporal, podendo constituir-se numa via de aplicao da terapia gnica no tratamento da obesidade.

ESTUDOS DE ASSOCIAO E LIGAMENTO Os mtodos de associao e ligamento gentico constituem instrumentos valiosos para identificar o componente hereditrio da obesidade11,32. Os estudos de associao referem-se busca de relaes estatsticas entre um polimorfismo gentico e um determinado fentipo, geralmente entre indivduos sem parentesco. A estratgia epidemiolgica pode considerar: a comparao entre casos e controles, a anlise da variao para loci especficos ou a discriminao entre portadores e no portadores em relao a um determinado carter. Os estudos de associao aportam informao particularmente importante para a identificao de genes com uma pequena contribuio ao fentipo de obesidade. No entanto, a sua interpretao deve ser realizada com cautela, uma vez que se exigem valores estatsticamente significativos (p<0,01) para uma associao, esta pode ser devida a uma relao

Rev. Nutr., Campinas, 17(3):327-338, jul./set., 2004

Revista de Nutrio

334

I.MARQUES-LOPES et al.

causal, em que os loci apaream associados em conseqncia do azar ou da seleo gentica, ou que sejam simples artefatos4. Neste sentido, diversos ndices do fentipo da obesidade (pregas cutneas, peso, IMC, etc.) apresentaram correlaes positivas (p<0,01) com alguns genes, como por exemplo, apolipoprotena B (ApoB), apolipoprotena D (ApoD), fator de necrose tumoral (TNF- ), receptor D2 de dopamina (DRD2), receptor de lipoprotena de baixa densidade (LDLR), receptor de melanocortina 4 (MCR4), receptor de melanocortina 5 (MCR5), leptina e seu receptor (LEPR), receptor de glicocorticides (GLR), receptor ativado por peroxissomas (PPAR), leptina, receptor adrenrgico 3 (ADRB3) e protena transportadora de cidos graxos (FABP2). Por outro lado, os estudos de ligamento gentico implicam persistncia ou co-segregao de um marcador gentico ou locus e de um carter, durante geraes, dentro da mesma famlia. Esta estratgia pode utilizar-se com genes candidatos ou com marcadores de polimorfismos e torna-se mais til quanto mais perto se localiza o marcador em relao ao locus no cromossoma. Este protocolo pode utilizar-se com painis de famlias nucleares ou atravs da genealogia, sendo freqentemente til no seguimento de fentipos complexos, caraterizados pela presena de um gene importante 11 . Uma alternativa a este procedimento, consiste no estudo de casais de irmos em relao a um marcador gentico e um fentipo determinado, j que no requer o conhecimento do modo de transmisso, podendo ser utilizado para diversos loci. A existncia de associao entre o IMC ou outros ndices fenotpicos de obesidade (pregas cutneas, contedo em gordura, entre outros) e alguns genes, foi encontrada com uma probabilidade associada inferior a 0,01 para alguns genes como: fosfatase alcalina 1 (ACP1), receptor de glicocorticides (GR), fator de necrose tumoral a (TNF-), leptina, grupo sangneo Kell (KEL), receptor 4 e 5 de melanocortina (MC4R e MC5R) e adenosina deaminase (ADA), embora existam

algumas discrepncias, e inclusive resultados controversos em relao a algums deles4. Por isso, as expectativas geradas para o gene da leptina e do seu receptor (LEPR) no foram totalmente confirmadas experimentalmente, embora existam evidncias de uma implicao em alguns estudos de obesidade extrema em certos grupos tnicos33. Ademais, alguns estudos sugerem que no brao 7q prximo do gene LEP, podem existir marcadores intimamente relacionados com a obesidade. Tambm a regio cromossmica 11q e o cromossoma 20 apresentaram uma possvel associao com a obesidade, assim como os cromossomas 2, 5 e 10 com a leptina circulante, onde se encontram os genes da protena reguladora da glicoquinase (GKRP) e da pr-opiomelanocortina (POMC). A mutao Trp 64 Arg do gene do receptor adrenrgico 3 no parece apresentar associao com obesidade em todas as populaes estudadas, apesar dos resultados iniciais sobre a sua implicao e a sua associao consistente com uma diminuio do metabolismo basal11. Alm disso, existem trs marcadores adjacentes protena desacoplante 2 (UCP2) que apresentaram um certo ligamento com o metabolismo basal dos seus portadores. A protena desacoplante 3 (UCP3) tambm est sendo implicada no controle do gasto energtico e, indiretamente, na obesidade29, assim como o receptor ativado por peroxissomas (PPAR) em estudos de epidemiologia gentica34.

MAPA GENTICO DA OBESIDADE O mapa genmico descreve a ordem dos genes ou de determinados fragmentos de DNA (marcadores), assim como os espaos no codificantes em cada cromossoma16. O nvel mais baixo de resoluo corresponde aos mapas de ligamento gentico, que s mostram a localizao relativa de marcadores de DNA ou genes, enquanto que os

Revista de Nutrio

Rev. Nutr., Campinas, 17(3):327-338, jul./set., 2004

ASPECTOS GENTICOS DA OBESIDADE | 335

mapas fsicos descrevem a posio exata no cromossoma correspondente, com distncias que se medem em pares de bases. Os mtodos para o traado gentico incluem, entre outros: hibridao in situ, remoo de uma parte ou restrio de regies cromossmicas e isolamento de cromossomas artificiais em leveduras15. O traado do mapa gentico da obesidade supe identificar os loci onde residem os distintos caracteres envolvidos na etiologia da obesidade9,35. Diversas investigaes, utilizando diferentes protocolos e metodologias, identificaram mais de 430 genes e diversos marcadores genticos implicados na obesidade (Figura 1). As investigaes relacionadas com doenas de transmisso por gentica mendeliana acompanhada de manifestao clnica de obesidade, mutaes monognicas em animais geneticamente obesos, anlises genticas inespecficas, experincias com cruzamento de animais, e os estudos de associao e ligamento com genes candidatos, indicam que todos os

cromossomas do genoma humano contm loci relacionados com a obesidade, exceto o cromossoma Y 6,26. Assim, alguns cromossomas1,2,6,8,11,20 apresentam pelo menos trs loci relacionados com a obesidade nos braos p e q cromossmicos; existem outros, em que s um dos braos possue 3 loci (3p, 4q, 5q, 7q, 12q, 13q, 15q, 22q e Xq), enquanto que outros cromossomas no tm loci em nenhuma das suas regies p/q (7q, 21p y 22p). Por outro lado, a participao dos diversos genes no desenvolvimento da obesidade pode afetar o controle do apetite (NPY, leptina, POMC, CCK, MCH, serotonina, dopanina), o gasto energtico e a regulao termognica (ADR2 e 3, UCP1, UCP3, leptina), assim como a utilizao metablica de substratos combustveis e sinalizao (PPAR, APOB,APOD, PKA, etc.). Note-se que existem genes que inicialmente costumava-se relacionar com a obesidade, embora disso no se tivesse estabelecido uma implicao firme e outros genes, cujos estudos

Figura 1. Mapa gentico da obesidade.

Rev. Nutr., Campinas, 17(3):327-338, jul./set., 2004

Revista de Nutrio

336

I.MARQUES-LOPES et al.

apresentaram resultados controversos. Entre eles se incluem os seguintes: genes da protena desacoplante 1 (UCP1), receptor adrenrgico 2 (ADB2), insulina (INS), seu receptor (INSR) ou o sustrato do receptor de insulina (IRS-1), receptor 1 e 5 do neuropptido Y (NPY1R e NPY5R), ATPase-1 (ATP1), receptor de colecistoquinina A (CCKAR), transportador GLUT-1 (GLUT-1), protena Tubby (TUB/TULP1/2), inibidor da atividade de plasminognio -1 (PAI-1), fator semelhante insulina 2 (IGF-2), protena agouti e molculas implicadas na diferenciao de adipcitos (CEBP/PPAR), entre outros11,32,36.

com o metabolismo, como o caso da adenosina desaminase (ADA), da fosfatase cida (ACP1), do fator de necrose tumoral a (TNF-), de determinados neuropptidos hipotalmicos e seus receptores (MCR3,4 e 5, POMC, NPY) e dos receptores adrenrgicos (ADRB2 e 3). A maior sobrevivncia dos indivduos obesos e a influncia das reservas de gordura na fertilidade em situaes de falta de alimentos, podem ter sido em parte responsveis por uma seleo natural de pessoas com tendncia obesidade.

REFERNCIAS CONCLUSO
1. Martnez JA, Frhbeck G. Regulation of energy

Diversos estudos demonstram de forma evidente a participao do componente gentico na incidncia da obesidade. Estima-se que entre 40% e 70% da variao no fentipo associado obesidade tem um carter hereditrio. A influncia gentica como causa de obesidade pode manifestar-se atravs de alteraes no apetite ou no gasto energtico. As investigaes sobre a implicao gentica na prevalncia da obesidade utilizaram, ao longo dos ltimos anos, diferentes estratgias metodolgicas: estudo de modelos animais e extrapolao a regies homlogas do genoma humano; associao e ligamento de genes candidatos em estudos epidemiolgicos; investigaes de genes de transmisso mendeliana com manifestaes de obesidade, alm dos mtodos baseados na anlise inespecfica de genoma de indivduos obesos em relao a controles. A utilizao destes protocolos permitiram revelar a existncia confirmada de pelo menos 30 genes envolvidos na obesidade e a possibilidade da implicao de mais alguns. Os genes que por seu papel na obesidade atraram maior ateno nos ltimos tempos, foram: o gene da leptina (LEP) e seu receptor (LEPR), as protenas desacoplantes (UCP2 e 3), molculas implicadas na diferenciao de adipcitos e transporte de lipdios (PPAR, aP2). Tambm outros, relacionados

balance and adiposity: a model with new approaches. J Physiol Biochem 1996; 52:255-8. 2. Marques-Lopes I, Ansorena D, Astiasaran I, Forga L, Martnez JA. Postprandial de novo lipogenesis and metabolic changes induced by a high-carbohydrate, low-fat meal in lean and overweight men. Am J Clin Nutr 2001; 73:253-61. 3. Corbalan MS, Marti A, Forga L, Martinez-Gonzalez MA, Martinez JA. Beta(2)-Adrenergic receptor mutation and abdominal obesity risk: effect modification by gender and HDL-cholesterol. Eur J Nutr 2002; 41:114-8. 4. Bouchard C, Prusse L, Rice T, Rao DC. The genetics of human obesity. In: Bray GA, Bouchard C, James WPT. Handbook of obesity. New York: Marcel Dekker; 1998. p.157-85. 5. Hirsch J, Leibel RL. The genetics of obesity. Hosp Pract 1998; 33(3):55-9. 6. Bray G, Bouchard C. Genetics of human obesity: research directions. FASEB J 1997; 11:937-45. 7. Orera M. Aspectos genticos de la obesidade. In: Moreno B, Monereo S, lvarez J. Obesidad: presente y futuro. Madrid: Biblioteca Aula Mdica; 1997. p.51-69. 8. Macho-Azcarate T, Marti A, Gonzalez A, Martinez JA, Ibaez J. Gln27Glu polymorphism in the beta2 adrenergic gene and lipid metabolism during

Revista de Nutrio

Rev. Nutr., Campinas, 17(3):327-338, jul./set., 2004

ASPECTOS GENTICOS DA OBESIDADE | 337

exercise in obese women. Int J Obes Relat Metab Disord 2002; 26:1434-41. 9. Snyder EE, Walts B. Perusse L, Chagnon YC, Weisnagel SJ, Rankinen T, et al. The human obesity gene map: the 2003 update. Obes Res 2004; 12:369-439. 10. Comuzzie AG, Allison DB. The search for human obesity genes. Science 1998; 280:1374-7. 11. Chagnon Y, Prusse L, Bouchard C. Familial aggregation of obesity, candidate genes and quantitative trait loci. Curr Opin Lipid 1997; 8:205-11. 12. Inui A. Transgenic approach to the study of body weight regulation. Pharmacol Rev 2000; 52:35-61. 13. Bouchard C, Tremblay A. Genetic influences on the response of body fat distribution to positive and negative energy balances in human identical twins. J Nutr 1997; 127:943S-7S. 14. Jackson AS, Stanforth PR, Gagnon J, Rankinen T, Leon AS, Rao DC, et al. Melanocortin 4 receptor sequence variations are seldom a cause of human obesity: the Swedish Obese Subjects, the HERITAGE Family Study, and a Memphis cohort. J Clin Endocrinol Metab 2002; 87:4442-6. 15. Fauci AS, Braunwald E, Isselbacher KJ, Wilson JD, Martin JB, Kasper DL, et al. Harrisons principles of internal medicine. New York: McGraw Hill; 1998. 16. Romeo CM. Gentica humana. Bilbao: Universal Deusto; 1995. 17. Macho-Azcarate T, Marti del Moral A, Martinez Hernandez JA. Genetic studies of obesity in humans. Med Clin (Barc) 2000; 115:103-10. 18. Daniel H. Genomics and proteomics: importance for the future of nutrition research. Br J Nutr 2002; 87(Suppl 2):S305-11. 19. Edvardsson U, Alexandersson M, Brockenhuus von Lowenhielm H, Nystrom AC, Ljung B, Nilsson F, et al. A proteome analysis of livers from obese (ob/ob) mice treated with the peroxisome proliferator WY14,643. Electrophoresis 1999; 20(4-5):935-42.

20. Sanchez JC, Chiappe D, Converset V, Hoogland C, Binz PA, Paesano S, et al. The mouse SWISS-2D PAGE database: a tool for proteomics study of diabetes and obesity. Proteomics 2001; 1:36-63. 21. Moreno MJ, Mart A, Garca-Foncillas J, Martnez JA. DNA hybridization arrays: a powerful technology for nutritional and obesity research. Br J Nutr 2001; 86:119-22. 22. GDB(TM) Genome Database database [online] 2002 [cited 2003]. Baltimore (Maryland, USA): Johns Hopkins University, 1190. Available from: http:// gdbwww.gdb.org/-2002 23. Online Mendelian Inheritance in Man, OMIM(TM). Center for Medical Genetics, Johns Hopkins University (Baltimore, MD) and National Center for Biotechnology Information. Bethesda: National Library of Medicine; 2002. 24. Beales PL, Kopelman PG. Obesity genes. Clin Endocrinol 1996; 45:373-8. 25. Leibel RL, Chung WK, Chua SC. The molecular genetics of rodent single gene obesities. J Biol Chem 1997; 272:31937-40. 26. Naggert J, Harris T, North M. The genetics of obesity. Curr Op Gene Dev 1997; 7:398-404. 27. Kulkarmi RN, Bruning JC, Winay JN, Postc C, Magnuson MA, Kahn CR. Tissue-specific knockout of the insulin receptor in pancreatic beta cells creates an insulin secretory defect similar to that in type 2 diabetes. Cell 1999; 96:329-39. 28. Mauvais-Jarvis F, Kulkarni RN, Kahn CR. Knockout models are useful tools to dissect the pathophysiology and genetics of insulin resistance. Clin Endocrinol 2002; 57:1-9. 29. Marti A, Larrarte E, Novo FJ, Garcia M, Martinez JA. UCP2 muscle gene transfer modifies mitochondrial membrane potential. Int J Obes Relat Metab Disord 2001; 25(1):68-74. 30. Lopes IM, Forga L, Martnez JA. Effects of leptin resistance on acute fuel metabolism after a high carbohydrate load in lean and overweight young men. J Am Coll Nutr 2001; 20(6):643-8. 31. Wauters M, Considine RV, Chagnon M, Mertens I, Rankinen T, Bouchard C, et al. Leptin levels, leptin

Rev. Nutr., Campinas, 17(3):327-338, jul./set., 2004

Revista de Nutrio

338

I.MARQUES-LOPES et al.

receptor gene polymorphism, and energy me t a b o l i s m i n w o m e n . O b e s R e s 2 0 0 2 ; 10:394-400. 32. Hasstedt SJ, Hoffman M, Leppert MF, Elbein SC. Recessive inheritance of obesity in familial non-insulin-dependent diabetes mellitus, and lack of linkage to nine candidate genes. Am J Hum Genet 1997; 61:668-77. 33. Farooqi S, Rau H, Whitehead J, ORahilly S. ob gene mutations and human obesity. Proc Nutr Soc 1998; 57:471-5. 34. Ristow M, Mller-Wieland M, Pfeiffer A, Krone W, Kahn R. Obesity associated with a mutation in a

genetic regulator of adipocyte differentiation. N Engl J Med 1998; 339:953-9. 35. Garca F, Margareto J, Marti A, Martnez JA, De Miguel C. Expresin diferencial de genes en la obesidad inducida por la dieta en ratas. Proc SEB 1998; p.169. 36. Clment K, Dina CH, Basdevant A, Chastang N, Pelloux V, Lahlou N, et al. A Sib-Pair Analysis Study of 15 Candidate Genes in French Families With Morbib Obesity. Diabetes 1999; 48:398-02.

Recebido para publicao em 14 de janeiro e aceito em 31 de outubro de 2003.

Revista de Nutrio

Rev. Nutr., Campinas, 17(3):327-338, jul./set., 2004