EL DESAFO DEL PNEUMOVIRUS AVIAR

Ing. Miguel Chale

Avda. La Selva 135 Girona Espaa mcv@hipra.com

Temario
1. Pneumovirus aviar: La enfermedad Caractersticas, Subtipos, Transmisin, Patognesis, Agentes secundarios 2. APV en ponedoras 3. APV en reproductoras 4. APV en broilers 5. Diagnstico 6. Vacunacin

Pneumovirus Aviar (APV)

Sndromes y sinnimos

SHS Sndrome de cabeza hinchada TRT Rinotraquetis del pavo ART Rinotraquetis aviar MPV Metapneumovirus aviar

Clasificacin de APV

FAMILIA: PARAMYXOVIRIDAE

SUBFAMILIA: PNEUMOVIRNAE

GENERO: PNEUMOVIRUS VRS Viruses Mouse pneumovirus

GENERO: METAPNEUMOVIRUS Pneumovirus aviar (APV) Metapneumovirus humano (hMPV)

Caractersticas del Pneumovirus

Fusin & Penetracin (F)
Membrana Lipdica

Matriz

Adhesin (G)
Complejo RNP

Subtipos
1 Serotipo Cuatro subtipos descritos: (Moabs Seq protena G )
-A Europa, Asia, frica, Amrica (exc. EEUU), Medio Oriente -B - C: USA (pavos) y Francia (patos) - D: Francia (patos)

Cepas de origen pavo son, menos patognicas para pollos y gallinas, pero cepas de gallinas y pollos son, usualmente, tambin patognicos para pavos

Pneumovirus Aviar (APV)

Se puede confundir con otras enfermedades: Escherichia coli Ornithobacterium rhinotracheale (ORT) Mycoplasmosis (MG/MS) Pasteurella multocida

Bronquitis infecciosa (BI) Enfermedad de Newcastle (ND) Influenza aviar (IA)

Transmisin
1) Horizontal Contacto directo e indirecto Rpidamente dentro de la manada El virus es eliminado por cornetes nasales y trquea Transmisin area es altamente efectiva Una valla puede retrasar la difusin del virus (ave a ave) Persistencia corta: 5-8 das 2) Vertical? Virus encontrado en tracto reproductivo (epitelio oviducto) Se encontraron pavos de 3 das positivos por PCR (Subtipo C) No hay reportes de transmisin al huevo

Patognesis
APV A o B: Entrada (Oculo-nasal) Replicacin en el tracto respiratorio alto

Lesiones en epitelio (Prdida de cilios)

Infeccin de macrfagos/viremia

Ag. Secundarios (E. Coli, etc) Distribucin por diferentes rganos

Consecuencia: Signos clnicos Desarrollo de respuesta inmune Inmunidad celular (Persistencia corta) Inmunidad humoral (Persistencia larga)

Limpieza del virus y recuperacin

Patognesis
Tiempos

24 horas PI en cornetes nasales y trquea 96 horas: completa deciliacin de trquea Signos clnicos se presentan luego de que el virus ya no se encuentra en ave

Aislamiento slo hasta aprox. 10 das PI

Patognesis
Dao de mucosa en cornetes nasales

Agentes secundarios
E. Coli O2, O8, O78 APV + E. Coli Lesiones Pasteurella multocida Mycoplasma gallisepticum ORT APV + ORT Lesiones

Alta interaccin con agentes secundarios

250 muestras positivas a APV

Factores que exacerban

Higiene

Cama

Ventilacin

APV
Densidad Multiedad

Bioseguridad

Estacionalidad de APV
Granjas con APV entre los aos 1998-2000 en EEUU (Nezworski, 2002)
25

20

Nmero de granjas

15 1998 1999 2000 10 media

0 Jan
Invierno

Feb

Mar
Primavera

Apr

May

Jun
Verano

Jul

Aug

Sep
Otoo

Oct

Nov

Dec
Invierno

APV en ponedoras

Signos clnicos en ponedoras comerciales

Afinidad por tracto respiratorio y reproductivo Cada de produccin 5-40% Problemas de calidad de huevo Edema facial Descarga nasal Virus se difunde por jaulas

Ponedoras: Cae produccin

Resumen de lotes afectados por APV
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 1 4 7 10 13 16 19 22 25 28 31 34 37 40 43 46 49 52 55 58 61

7 lotes de ponedoras

Edad de seroconversin

Nmero de lotes

EDAD (Semanas)

685 muestras de sueros de 54 lotes

Peritonitis

Calidad de huevo
Color de cscara Fragilidad de cscara Huevos sin cscara Porcentaje variable

APV en reproductoras

Signos clnicos en reproductoras

Se produce entre las 24-52 semanas Cada de postura e incubabilidad Signos clnicos: Opisttonos/torticolis Postracin y somnolencia Edema facial Odos con exudado amarillento

Opisttonos

APV en broilers

Signos clnicos en broilers

Se produce sobre 4-6 semanas Edema facial uni o bilateral (1-2% total) Ronquera Estornudos Ojo acuoso Descarga nasal Postracin Los ms afectados son los mejores machos de la manada

APV en pavos

Signos clnicos en Pavos

Especie ms sensible Ojo acuoso Conjuntivitis Edema facial uni o bilateral Signos respiratorios: Exudados nasales serosos Morbilidad es alta (100%) Mortalidad es variable (10-15%)

Diagnstico de APV

Diagnstico
Clnico Inmunoqumico Aislamiento vrico Molecular Serologa

Diagnstico clnico
Signos clnicos similares con otras enfermedades de tipo respiratorio (coriza, CRD, Pasteurella, ORT) Correcto diagnstico diferencial es un deber: Coriza infeccioso Diferentes circunstancias clnicas: Signos clnicos APV > APV > Signos clnicos

Mtodos inmunoqumicas

Streptavidin biotin Inmunoperoxidasa (IP)

Inmunofluorescencia directa (IF)

Aislamiento viral
Difcil de material de campo. El virus se elimina rpidamente. Recogida de muestras antes de que aparezcan los signos clnicos. Recogida de muestras del tracto respiratorio superior (cornetes y trquea)

Aislamiento viral

7 6 5

Signos clnicos

Virus/gr de tejido

Cornetes Trquea Pulmones Riones

4 3 2 1 0

1 1

3 2

5 3

74

10 5

Das postinfeccin
Cook and Cavanagh, AP, 2002, pp 117-132

Aislamiento viral
Recoleccin de muestras

1. Realizar el corte sagital

2. Exponer la parte interna del cornete

3. Estampar el cornete nasal

4. Dejar secar la tarjeta 40 minutos

Tcnicas moleculares
RT-PCR Primers especficos A & B

Subtipo B Muestra de campo Subtipo A Control positivo Subtipo B Control positivo

Persistencia de Subtipos A y B en tejidos

APV Subtipo A Tejido Das post-infeccin 6 8 10 14 + + + + + + + + + + + + -

Escobillon Cornetes Escobillon Subtipo B Cornetes

1 + + + +

3 + + + +

17 + +

21 +

Estudio propio

3 das PI APV-A APV-B Cornete nasal + + Glndula de harder + + Trquea + Pulmon Bazo Bolsa de Fabricio Tejido

6 das PI APV-A APV-B + + + + + + + + +

11 das PI APV-A APV-B + Aung, 2006

Serologa
Seroneutralizacin (SN) Inmunofluorescencia indirecta (IIF) Elisa:
Mayora de los Kits ELISA dan positivo despus de 10 das post-infeccin. Lotes vacunados con vacuna viva proveen bajos ttulos ELISA, debido a que la inmunidad celular juega un rol importante en la proteccin (Cook, 1989; Williams, 1991; Jones, 1996)

Pneumovirus en reproductoras 28 semanas

Plan vacunal utilizado: 1 vacuna viva -12 semanas / 1 inactivada -18 semanas

Pneumovirus en reproductoras 38 semanas

Plan vacunal utilizado: 1 vacuna viva -12 semanas / 1 inactivada -18 semanas

Pneumovirus en reproductoras 48 semanas

Plan vacunal utilizado: 1 vacuna viva -12 semanas / 1 inactivada -18 semanas

Pneumovirus en reproductoras 63 semanas

Plan vacunal utilizado: 1 vacuna viva -12 semanas / 1 inactivada -18 semanas

Cintica del pneumovirus en reproductoras

1 vacuna viva (12 semanas) 1 inactivada (18 semanas)
18000 16000 14000 12000 10000 8000 6000 4000 2000 0 28 38 48 63

Pneumovirus en broilers
Broilers vacunados 1 da de edad

Pneumovirus en broilers
Broilers infeccin de campo

Pneumovirus en ponedoras
Ttulos vacunales obtenidos en gallinas ponedoras SPF
Vacuna Inactivada Subtipo A (33 dpv) Inactivada Subtipo B (51 dpv) Viva subtipo A (21 dpv) Viva subtipo B (21 dpv) dpv 33 51 21 21 Biochek 15.923 18.764 1.540 8.805
Civtest-Hipra

Civtest-Hipra 5.693 16.434 635 8.194

Idexx

Idexx 10.134 26.026 2.906 12.016

Biochek
30.000

25.000

20.000

15.000

10.000

5.000

0 Inactivada Subtipo A (33 dpv) Inactivada Subtipo B (51 dpv) Viva subtipo A (21 dpv) Viva subtipo B (21 dpv)

Incidencia de APV
Estudio basado en muestras recibidas en el servicio diagnstico de HIPRA (DIAGNOS)
NEGATIVAS 46%

POSITIVAS 54%

600 muestras

Control de APV

Claves de manejo
Calidad de aire Correcta ventilacin Temperatura Vacunacin temprana

3600 3400 3200 3000 2800 2600 2400 2200 2000 1800 1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 56

180 170

Mantener observadas: Arranque Manejo de camas APV Vacunacin

160 150

Gramos de alimento/ave/da

140 130 120 110

Peso corporal (Gramos)

100 90 80 70

Mortalidad acumulada (%)

60 50 40 30 20 10 0

APV - Vacunacin

Vacunas: Hechos
Anticuerpos maternales no protegen contra infecciones de campo Muestra baja respuesta serolgica, pero una buena eficacia Inmunidad es principalmente celular, aunque tambin tiene inmunidad humoral Importancia de vacunas homlogas origen pollo para pollos y gallinas

Vacunas: Hechos
Vacunas con cepas Subtipo B y Subtipo A dan proteccin cruzada entre ellas. Vacunas subtipo C no protegen contra subtipos B o A Vacunas vivas protegen signos clnicos Vacunas inactivadas protegen cadas de postura Vivas + inactivadas: previenen signos clnicos y cada de postura.

Vacunas: Hechos
Anticuerpos maternales no protegen
4
Puntuacin de signos clnicos

3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 3 4 5 6 7 8 9 MDA MDA +

10

Das postinfeccin

Vacunas: Hechos
Puntuacin de signos clnicos: 3 semanas PI
3
Puntuacin de signos clnicos

2,5 2 1,5 1 0,5 0 1 2 3 4 5

Vacunadas Control

Das postinfeccin

Vacunas: Hechos
Produccin de huevos - IV inoculacin de gallinas
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 25 26

Viva Viva+Inct Inactivada Control infeccin

27

28

29

30

31

32

Edad (semanas)

Vacunas: Hechos
Calidad de cscara antes y despus de desafo con APV
% huevos sin cscara
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 25

Control

Infeccin

Viva Viva+Inct Inactivada

26

27

28

29

30

31

32

Edad (semanas)

Vacuna viva
Administrado va spray para proteccin inmunidad local Separada de otras vacunas respiratorias para evitar la interferencia como es el caso de vacunas de ND (Ganapathy, 2005) y BI (Jones, 1998; Cook, 2001) Proteccin cruzada entre Subtipos B y Subtipo A

Vacuna inactivada
Administracin Intramuscular Proteccin contra cada de produccin, calidad del huevo e incubabilidad Proteccin cruzada entre Subtipos B y Subtipo A

Programa vacunal
Broilers
Primovacunacin Viva Baja incidencia Alta incidencia 7 das 7-10 das Revacunacin Viva --18-22 das

Resultados de campo en broilers

Zona alto desafo

38-39 D MES may-09 jun-09 jul-09 ago-09 sep-09 Media

Llegada 595.100 460.600 392.200 664.200 594.600 2.706.700

No vacunados Salida Mort % Peso 552.840 7,10 2,08 421.724 10,39 1,92 370.576 5,51 2,11 591.940 10,88 2,01 556.810 6,36 2,13 2.493.890 8,0 2,1

IC 1,9 2,0 1,8 2,0 1,9 1,9

EF Llegada 267,8 897.250 226,2 161.050 284,0 1.054.373 229,7 903.370 270,6 605.850 255,7 3.621.893

Vacunados vacuna viva Salida Mort % Peso 852.126 5,03 2,16 151.250 6,09 2,27 997.571 5,39 2,18 855.898 5,25 2,35 565.166 6,72 2,32 3.422.011 5,7 2,3

IC 1,8 1,8 1,7 1,8 1,9 1,8

EF 292,2 302,0 307,5 315,4 295,2 302,5

Programa vacunal sugerido

Reproductoras pesadas y ponedoras comerciales
Primovacunacin Viva 10 12 semanas Revacunacin Inactivada 18 20 semanas

Reproductoras: eficacia de diferentes programas

100,0

90,0

80,0

70,0

60,0 SHS-SHS % Laying 50,0 SHS-TRT % Laying SHS-SHS % Fertility 40,0 SHS-TRT % Fertility SHS-SHS % Hatchability 30,0 SHS-TRT % Hatchability

20,0

10,0

0,0 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 Weeks of age

Reproductoras: Prueba de campo en rea endmica

Nmero de manadas (Media 10.000) 105 20

Prog. De Vacunacin Inactivada 18 sem. Viva 12 sem. e Inac. 18 sem.

Sin TRT

Con TRT

82.8 % 95 %

17.2 % 5%

Ponedoras: eficacia de diferentes programas

% de puesta
100 90 80

% semanal de puesta

70 60 50 40 30 20 10 0 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72 Semanas de edad SHS TRT SHS SHS

Ponedoras: eficacia de diferentes programas

Produccin Acumulada
350 300 250 200 150 100 50 0 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72 Semanas de edad SHS TRT SHS SHS

Nmero de Huevos/Ave

Ponedoras: eficacia de diferentes programas

Mortalidad Acumulada
500 450 400 350

Nmero de Aves

300 250 200 150 100 50 0 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72 Semanas de edad SHS TRT SHS SHS

Resumen de factores importantes

Diagnstico adecuado es un deber Estudio de interaccin con otros patgenos respiratorios

Bioseguridad y buenas prcticas de manejo (ventilacin)

Evaluacin de costo/beneficio de vacunacin Seleccin de vacuna y programa de vacunacin Administracin adecuada de vacuna es crtica

EL DESAFO DEL PNEUMOVIRUS AVIAR

Ing. Miguel Chale
Avda. La Selva 135 Girona Espaa mcv@hipra.com